复方磺胺甲恶唑片含量测定(实验报告完整版)
复方磺胺甲恶唑片含量测定
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（2）重氮化-偶合反应
A r N H2 HClN ,a NO2 重 氮盐OH ,β 萘酚 橙黄色— 猩红色的偶氮染料
6
6
（3）芳伯氨基与芳醛的缩合反应
Ar NH 2 芳醛 H 有色希夫氏碱
芳醛： 对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等
如：与对二甲氨基苯7甲醛在酸性溶液中生 成黄色希夫氏碱。
➢ 与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随N1取代 基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺 胺类药物的鉴别。
➢ 芳伯氨基反应：可发生重2 氮化-偶合反应，产生有 色沉淀
2
➢ N1上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂 反应：生成沉淀。
➢ 乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后（即乙酰化）， 在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴 别反应。
❖ 参比波长和测定波长的确定：取对照品溶液(2)的稀 释液，以257nm 为测定波长(λ2)，在304nm 波长 附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参比波长 (λ1)，要求△Ａ＝Ａλ2 －Ａλ1 ＝0 。
❖样液的测定：再在λ2与λ12波5 长处分别测定供试品溶 液的稀释液与对照品溶液(1) 的稀释液的吸收度，求 出各自的吸收度差值(△Ａ)计算，即得。
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四、含量测定
1．亚硝酸钠滴定法 测定原理：利用磺胺类药物的N1取代物分子中
含有芳伯氨基，在0~5℃低温状态下、盐酸介质 中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类 药物的含量。
H2N
+
NN
SO2NHR+NaNO2+ 2HCl
13
-
SO2NHR Cl +NaCl+2H2 O
13
磺胺嘧啶含量测定
离子对分配色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中两组分的含量
摘 要； 目的
结果
建 立离子对 分配 色谱法测定 复方磺胺 甲口 片中磺胺 甲口 恶唑 恶唑 和 甲氧 苄啶 的含 量 。方 法 流动相 为甲醇 ：
０３ 磷 酸 二 氢钾 ｛ ． ５ ｌＬ 四丁 基 溴 化 钹 （５ ４ ５ 。 ＳＣｌ 为 色 谱 柱 。 温 ２ ℃ ， ．４ ０ ０ｍｏ／ ５ ５： ）ＯＤ 。 柱 柱 ５ 流速 １Ｏ ／ ｎ 检 测 波 长 ２ ０ ｍ。 ． ｍｌｍｉ。 ４ｎ
磺 胺 甲 嚼 唑 在 ４ ～２ ｏ ｇ ｍｌｒ ． ９ ９ 、 ｏ Ｏ ／ （—Ｏ ９ ９ ） 甲氧 苄 啶 在 ８ ｏ ｇ ｍｌｒ ． ９ ８ 的 浓 度 范 围 内 呈 线 性 关 系 。 均 回收 率 分 别 ～４ ／ （ ＝Ｏ ９ ９ ） 平 该 法专 属 性 强 ， 作 简 便 ， 果 准 确 。 操 结
１２ 试 药 ．
精 密 称 取 磺胺 甲 嘿 唑 对 照 品 ４ ｍｇ 甲氧苄 啶对 ０ ，
照 品 ８ ， ５ ｍｌ ｍｇ 置 ０ 容量 瓶 中 ， 甲醇 适 量 使 溶 ， 流 加 用
动相稀 释至 刻度 ， 摇匀 ， 储备 液 。精 密量取 该储 备液 作
１ ０ １ ５ ２ ０ ２ ５ ３ ０ ３ ５ ４ ０和 ５ ０ 置 ２ ｍｌ ． 、． 、． 、． 、． 、． 、 ． ． ｍｌ ０ 容
成代 谢遭 到双重 阻 断 ， 协 同作 用 ， 强磺 胺 药抗菌 活 有 增 性， 使抑 菌 作用 转 为杀 菌 作用 ， 减少 耐 药 菌株 产 生 ， 临
床主要 用 于敏 感菌 所 致 的小 儿 急性 中耳炎 、 人 慢性 成
速 １ Ｏ ／ ｎ 检 测波 长 ２ ０ ｍ， ． ｍｌｍｉ ， ４ ｎ 进样 量 ２ ９ 。理论 板 ０１
复方磺胺甲恶唑的含量测定
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量［实验目的］1掌握高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2掌握高效液相色谱仪的操作及注意事项［实验原理］结构特点：苯环（紫外吸收）、芳伯胺基（重氮化-偶合反应）、磺酰胺基上的活泼氢有一定酸性，可与碱成盐或与重金属离子反应。
分子式：C10H11N3O3S 分子质量：253.28。
本品为白色结晶性粉末。
熔点167℃，易溶于稀盐酸；氢氧化钠溶液或氨水，几乎不溶于水。
无臭，味微苦。
外标法是以待测组分的纯品作为对照品，以供试品中待测组分的峰面积或峰高进行定量分析，本实验采用峰面积进行定量。
分别精密量取一定量的对照品和供试品配制成溶液，分别进相同的体积的对照品溶液和供试品溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测定峰面积。
［实验仪器、试剂］仪器：75-4型紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂 )，高效液相色谱仪，色谱柱，超声波清洗仪，紫外吸收检测器，无油隔膜真空泵，抽滤装置，电子分析天枰，称量纸，研钵，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml），漏斗，滤纸，烧杯，玻璃棒，移液枪试剂：复方磺胺甲噁唑片(山东新华制药股份有限公司 ,批号 0412073 )，甲氧苄啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色谱纯）,水（超纯水），乙腈(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，醋酸溶液（1→100），［实验步骤］1.色谱条件与系统适用性试验：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相：水-乙腈-三乙胺（799∶200∶1）（用醋酸溶液（1→100）调节pH值至5.9±0.1）检测波长：254nm流速：1.0mL/min进样量：20ul理论塔板数：按甲氧苄啶计算应不低于2000，甲氧苄啶与磺胺甲噁唑峰之间的分离度应大于 5.0。
甲氧苄啶峰与磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得过2.0。
2.测定法2-1溶液的配制2-1-1对照品储备液的配制：取磺胺甲噁唑200mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定课件
结果与讨论
结果总结
对实验结果进行总结，概述复方磺胺甲恶唑片的含量测定结果。
结果解释
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量进行解释，分析可能的 影响因素。
讨论
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量测定方法、实验过程等 方面进行讨论，提出改进意见和建议。
05 实验结论
实验总结
实验原理
通过高效液相色谱法，利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶解 能力不同，在流动相与固定相之间，将不同的物质分离出来。
色谱条件设置
根据实验原理和仪器说明书，设置色谱柱、流动相、检 测波长等参数。
样品测定
分别进样对照品溶液和样品溶液，记录色谱图，测量各 组分的峰面积或峰高。
数据处理
根据峰面积或峰高，计算各组分的含量。
02 实验材料与设备
实验材料
对照品：磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶
实验用水：超纯水
流动相：磷酸盐缓冲液
试剂：氢氧化钠、盐酸、 甲醇等
胺甲恶唑片的含量。
误差分析
03
对计算过程中可能产生的误差进行分析，评估结果的准确性。
结果可靠性分析
重复性实验
为了验证结果的可靠性，需要进行重复性实验， 并对多次实验结果进行比较和分析。
对照实验
通过设置对照组，对比实验组和对照组的结果， 判断实验结果的可靠性。
数据检验
采用合适的统计方法对实验数据进行检验，如t检 验、F检验等，以确定结果的可靠性。
测定步骤
3. 根据吸光度和标准曲线，计算出复 方磺胺甲恶唑片中主要成分的浓度。
4. 根据浓度计算出样品中药物的含量。
04 结果分析与讨论
数据处理与结果计算
数据处理
01
将实验过程中收集的数据进行整理、筛选和清洗，确保数据的
实验九1
样液的测定：再在λ2 与λ1 波长处分别测定供试品溶液 的稀释液与对照品溶液(2) 的稀释液的吸收度，求出各自 的吸收度差值（△Ａ），计算，即得。
实验注意事项
注意取样量的换算 注意配制稀释液的溶剂 测定时，参比溶液不得混淆，比色皿一定 要清洗干净 注意确定参比波长的方法
讨论与思考题
1、分别说明本品中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶
双波长法测定含量时波长选择的依据。
2、为何甲氧苄啶含量测定时供试液的稀释 倍数与磺胺甲噁唑测定时的要不同？
（2）甲氧苄啶的鉴别 取本品的细粉适量（约相当于TMP 50mg ），加稀硫 酸10ml，微热溶解后，放冷，滤过，滤液加碘试液0.5ml， 即生成棕褐色沉淀。
（3）薄层色谱实验 供试品溶液：取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑 0.2g），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液即为。 对照溶液：另取磺胺甲噁唑0.2g与甲氧苄啶40mg，加甲醇 10ml溶解，即得。 展开：点样量各5μl，硅胶ＧＦ254 薄层板，展开剂：氯仿 －甲醇－二甲替甲酰胺(20:2:1) ，展开后， 结果：晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视。供试品溶液所 显两种成分的主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同。
三、含量测定
1. 原理（等吸收双波长法） 当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的 干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相 等的两波长λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。然后根据 ΔA值计算b的含量。
消除a的影响测b 步骤：
A1a b A1a A1b
a b a b A2 A2 A2 a A1a A2
W=平均片重（g/片）
2、对照品溶液的配制
精密称取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品 50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分别置100ml量瓶中， 各加醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对 照品溶液(1) 与对照品溶液(2)
复方磺胺甲恶唑片的质量分析
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薄层鉴别实验
供试品溶液：取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑 0.2g），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液即为。 对照溶液：另取磺胺甲噁唑0.2g与甲氧苄啶40mg，加甲醇 10ml溶解，即得。 展开：点样量各5μ l，硅胶ＧＦ254 薄层板，展开剂：氯仿－ 甲醇－二甲替甲酰胺(20:2:1) ，展开后， 结果：晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视。供试品溶液所 显两种成分的主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同。
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4、磺胺甲噁唑稀释液的配制和测定
稀释液的配制：精密量取供试品母液与对照品溶液(1)、
(2)各1ml ，分别置50ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶 液稀释至刻度，摇匀，即得。 参比波长和测定波长的确定：照分光光度法，取对照品溶 液(2)的稀释液，以257nm 为测定波长（λ 2 ），在 304nm 波长附近（每间隔0.5nm ）选择等吸收点波长为 参比波长（λ1 ），要求△Ａ＝Ａλ2 －Ａλ1 ＝0 。 样液的测定：再在λ2 与λ1 波长处分别测定供试品溶液的 稀释液与对照品溶液(1) 的稀释液的吸收度，求出各自的 吸收度差值（△Ａ）计算，即得。
1 2 1 A A2 A1 ( A2 A2 ) ( A1 A12 ) 1 1 1 1 A2 A1 E2 CL E1 CL ECL
从以上的推导可以看出，用△A作为定量的一句，可以消除 干扰组分的干扰；又由于在一定条件下，△E为一常数，所以 △A和浓度（C）有线性关系，因此可以用对照品比较法测定 药物的含量。
实验注意事项
注意取样量的换算 注意配制稀释液的溶剂
测定时，参比溶液不得混淆，比色皿一定要清洗
干净
复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定
验证性试验实验十八复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量测定一、实验目的1.掌握双波长法的基本原理。
2.掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量的方法。
3.熟悉紫外分光光度仪的使用。
二、仪器与试药1.仪器Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪研钵定量滤纸（直径10cm）胖肚移液管规格：25mL容量瓶规格：25mL 、100mL 刻度移液管规格：10mL2.试药复方磺胺甲噁唑片规格：含磺胺甲噁唑（SMZ） 0.4g、甲氧苄啶（TMP） 0.08ｇ95%乙醇氢氧化钠硫酸三、实验原理1.双波长分光光度法（1）双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。
用数学式表达如下：ΔA（λ1λ2）=A a+b1-A a+b2=A a1-A a2+A b1-A b2=ΔE.a C a.L+ΔE b.C b.L若b为干扰物，所选波长λ1λ2处的E b相等，所以ΔE b=0则ΔA混=ΔE a.C a.L与干扰物浓度无关。
（2）双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理复方磺胺甲噁唑片是含磺胺甲基异噁唑（SMZ）及甲氧苄啶（TMP）的复方制剂。
在0.1mol/L 氢氧化钠液中，SMZ在257nm波长处有一最大吸收峰，TMP在257nm和304nm波长处为等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大，见下图。
所以测得样品在257nm和304nm波长处的吸收度差值ΔA与SMZ浓度成正比，与TMP浓度无关。
四、实验内容1.工作曲线的制备（1）标准贮备液的配制分别精密称取磺胺甲基异噁唑对照品0.1g ，置100mL 容量瓶中，加入50m L 95%乙醇溶解后，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，吸取10mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，得标准贮备液（100μg /mL ）。
复方磺胺甲恶唑片含量测定
中，加0.01mol/l氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，在254nm
的波长处测定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系
数（
E 1% 1cm
）为866计算出每片的溶出量，限度为标示量的70％，
应符合规定。
计算公式如下：
19
A 1% 稀释倍数 溶液总体积
溶出量％＝
E 1% 1cm
➢ 与芳醛在酸性溶液中缩合：生成有色的希夫碱。
3
3
二、磺胺类药物的鉴别
1．化学鉴别法 （1）铜盐反应
4
可初步区别结构类似的磺胺药
4
磺胺类药物与铜盐的反应
药物名称
加入硫酸铜试液后的现象
磺胺甲噁唑 磺胺异噁唑 磺胺嘧啶 磺胺多辛
生成草绿色沉淀 呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉淀 生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色 生成黄绿色沉5淀，放置后变淡蓝色
磺胺异噁唑 取 供 试 品 约 0.5g ， 精 密 称 定 ， 加 二 甲 基 甲 酰 胺 40ml溶解后，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇钠滴定 液(0.1mol/L)滴定，至溶16液恰显蓝色，并将滴定的 结 果 用 空 白 试 验 校 正 。 每 1ml 甲 醇 钠 滴 定 液 (0.1mol/L)相当于26.73mg的C11H13N3O3S。
图16-1 磺胺嘧啶的红外吸收光谱
9
三、磺胺嘧啶的检查
1．溶液澄清度与颜色的检查 有色的氧化产物——偶氮苯化合物
H3N2C4HNO2S
NN
SO2NHC4N2H3
方法：比色法
要求：澄清无色；如显色10 ，与黄色3号标准比色 液比较，不得更深。
10
2．有关物质的检查 目的：控制药物的纯度。 方法：薄层色谱法，主成分自身对照法 杂质的限度：0.5％。 3．干燥失重
双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中两组分含量.doc
典型实验教学案例简介案例x 双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中两组分含量药物的含量测定是药物质量控制的重要方面。
紫外分光光度法以其准确度、灵敏度高，简便快速等特点，成为药物含量测定的重要方法。
紫外法测定含量时，常选择被测组分的最大吸收波长最为测定波长，以提高检测的灵敏度。
当用紫外法测定复方制剂多组分中一种组分的含量时，共存组分常常也会有吸收干扰，此时，消除干扰就成为准确测定的关键环节。
双波长分光光度法作为计算分光光度法的一种，就是消除干扰、实现多组分含量同时测定的一种有效手段。
本实验就以复方磺胺甲噁唑片为实验对象，通过双波长分光光度法测定其两组分的含量，从而达到学习双波长法的原理和操作的目的。
一、实验目的1．掌握双波长分光光度法的测定原理。
2．熟悉双波长分光光度法在复方制剂分析中的应用。
二、实验原理当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。
然后根据ΔA值计算b的含量。
SMZ在257nm波长处有最大吸收，TMP在此波长吸收最小并在304nm波长附近有一等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定波长（图1），在304nm波长附近选择参比波长。
TMP在239nm波长处有较大吸收，此波长又是SMZ的最小吸收峰，并在295nm波长附近有一等吸收点，故选定239nm为测定波长（图2），并规定在此波长附近选择供测定的参比波长。
由于参比波长对测定影响较大，故采用对照品溶液来确定。
此波长可因仪器不同而异，测定时应仔细选择。
三、仪器与试剂1.主要仪器：紫外-可见分光光度计；100mL 容量瓶2.主要试剂：磺胺甲噁唑和甲氧苄啶对照品；0.4%氢氧化钠溶液；0.1mol/L 盐酸溶液；氯化钾四、实验步骤1．磺胺甲噁唑的含量测定（1）平均片重测定：10片，精密称定。
（2）供试品溶液配制：图2 TMP 紫外吸收图谱1. TMP(5.0μg/ml);2.SMZ(25.0μg/ml);3. SMZ+TMP;4. 辅料图l SMZ 紫外吸收图谱1. TMP(0.2μg/ml);2.SMZ(10.0μg/ml);3. SMZ+TMP;4. 辅料精密称取片粉(约50mg SMZ, 10mg TMP)片剂 乙醇溶解、定容过滤 研磨100m（3）对照品溶液配制（3）取对照品溶液（2）的稀释液，以257nm 为测定波长（λ2），在304nm 波长附近（每间隔0.5nm ）选择等吸收点波长为参比波长（λ1），要求ΔA= A λ2（2）－A λ1（2）= 0，再在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（ΔA ），计算，即得。
高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中SMZ_TMP的含量_吕璐
2.5 加标回收试验
在样品中加入一定量的对照品母液，配置成 3 份加标溶
液，分别进样，按 2.1 色谱条件进行分析，做加标回收试验，计算
回收率。结果见表 3。
表 3 加标回收试验结果（%） 加标回收 加标样品 1 加标样品 2 加标样品 3 平均回收率 RSD
SMZ
97.55
95.43 103.29
SMZ 标准曲线
TMP 标准曲线
图 2 对照品标准曲线
2.3 精密度试验
取标3 对照品溶液 100 μl，重复进样 3 次，按照 2.1 色谱条 件进行分析，计算含量，结果见表 1。
名称
SMZ TMP
表 1 精密度试验结果
标3～（1 mg/ml）
0.074 93 0.017 99
标3～（2 mg/ml）
取标2 和样品各一份，分别按 100 μl 进样，按 2.1 色谱条件进行 分析，结果标2 的保留时间为 SMZ 6.848 6 min、TMP 5.408 6 min， 样品的保留时间为 SMZ 6.845 3 min、TMP 5.408 9 min，其 HPLC 色 谱图见图 1。
对照品
样品
图 1 对照品及样品 HPLC 色谱图
复方磺胺甲恶唑片的全检
方法名称：复方磺胺甲恶唑片—磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的测定—高效液相色谱法
【应用范围】：该方法采用高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量。
该方法适用于复方磺胺甲恶唑片。
【方法原理】：供试品加甲醇稀释，最终用流动相定量稀释后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长240nm处检测磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的吸收值，计算出其含量。
复方磺胺甲噁唑片的全检
【性状】本品为白色片。
【规格型号】100s
【主要成份】本品为复方制剂，每片含活性成份磺胺甲恶唑0.4g和甲氧苄啶80mg。
1.甲氧苄啶：化学名：5[(3,4,5-三甲氧基苯基)甲基]-2,4-嘧啶二胺分子式：C14H18N4O3 分子量：290.32
2.磺胺甲恶唑：化学名：3-对氨基苯磺酰
【简介/商品功效】近年来由于许多临床常见病原菌对本品常呈现耐药，故治疗细菌感染需参考药敏结果，本品的主要适应症为敏感菌株所致的下列感染： 1.大肠埃希杆菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、奇异变形杆菌、普通变形杆菌和莫根菌属敏感菌株所致的尿路感染。 2.肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致2岁以上小儿急性中耳炎。 3.肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致的成人慢性支气管炎急性发作。 4.由福氏或宋氏志贺菌敏感菌株所致的肠道感染、志贺菌感染。 5.治疗卡氏肺孢子虫肺炎，本品系首选。 6.卡氏肺孢子虫肺炎的预防，可用已有卡氏肺孢子虫病至少一次发作史的患者，或HIV成人感染者,其CD4淋巴细胞计数≤200/mm3或少于总淋巴细胞数的20％。 7.由产肠毒素大肠埃希杆菌（ETEC）所致旅游者腹泻。
【磺胺甲噁唑的鉴别】芳香第一胺的鉴别反应
取本品的细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg),加稀盐酸1ml,必要时缓缓加热煮沸溶解,放冷,加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴,滴加碱性的β-萘酚试液,观察变化.
双波长法测定复方磺胺中SMZ的含量
双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑的含量一、实验目的1、掌握等吸收双波长法测定复方片剂组分含量的原理及方法；2、熟悉利用单波长分光光度计进行双波长法测定。
二、实验原理利用等吸收双波长法消除干扰组分的影响，根据在λ1和λ2的A 值通过下式计算：)()(221121b a b a A A A A A A A λλλλλλ+-+=-=∆ 由于 b b A A 21λλ=， 则l C E E A A A a a a a a )(2121λλλλ-=-=∆所以 l E E A l E E A A C a a a a a a a )()(212121λλλλλλ-∆=--=样 三、实验步骤1、对照品和样品溶液的配制TMP 对照品溶液：精密称取105℃干燥至恒重的TMP 约10mg ，乙醇溶解定容到100 ml ， 取上述溶液2.00 ml 加0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定容到100 ml ，摇匀。
SMZ 对照品溶液：精密称取105℃干燥至恒重的SMZ 约50mg （m SMZ ），乙醇溶解定容到100.0 ml ，取上述溶液2.00 ml 加0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定容到100 ml ，摇匀。
样品溶液：取片剂10片，研细，精密称取相当于SMZ 50 mg 与TMP 10 mg 粉末，乙醇溶解，定容到100.0ml ，过滤，取续滤液2.00 ml 加0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定容到100.0 ml 。
2、SMZ 、TMP 标准溶液吸收光谱绘制以及等吸收点寻找和样品的测定（1）以0.1 mol/L 氢氧化钠溶液为参比溶液，分别取SMZ 、TMP 标准溶液进行波长扫描（220nm ~320nm ）。
以SMZ 最大吸收波长为测量波长λ1，再在λ1处分别测量1λSMZ A 、1λTMP A 、1λ样A 。
（2）根据1λTMP A 值，按照TMP 吸收光谱在304 nm 附近寻找等吸收点2λTMP A （1λTMP A =2λTMP A ），以该波长作为参比波长λ2，然后在λ2处分别测量2λSMZ A 和2λ样A 。
复方磺胺甲恶唑片微生物限度检查方法验证_凌真
ABSTRACT:OBJECTIVE T o establish the method of microbial limit test f or compound sulfamethox azole tablet s.METHODS To determine the antimicrobial ef fect of compound sulf ametho xazole t ablets by recovery w it h five cont rol strains.RESULTS Dilution method was used for compound sulfamet hoxazole t ablets , t he recovery of the control group and t he tested group w ere hig her than 70 %.CONCLUSION T he methods of microbial limit test of Compound sulf amethoxazole tablets is recommended as t hat , dilution met hod is used f or bacilli ;the common met hod is used for fungi and yeast ;membrane-f ilter procedure is used for control of bacilli. KEY WORDS :Compound sulfamethoxazole tablets ;M icrobial limit test ;Methods Validation
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。
2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。
二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg（20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。
3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液 [取盐酸液L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(1)的稀释液，以为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定
03 实验步骤
仪器与试剂的准备
高效液相色谱仪
用于复方磺胺甲恶唑片的含量测定， 确保仪器性能良好，能够满足实验要 求。
试剂
甲醇、乙腈、磷酸、三乙等，确保 试剂的质量和纯度符合实验要求。
样品处理与溶液制备
样品处理
取复方磺胺甲恶唑片适量，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲恶唑0.25g），置 50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理使溶解，放 冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
除高效液相色谱法外，可探索其他适用于复 方磺胺甲恶唑片含量测定的方法，如紫外可 见分光光度法等。
扩大应用范围
本实验方法可应用于其他类似药物制剂的含 量测定，为药物质量控制提供更多技术支持 。
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药理作用
复方磺胺甲恶唑片是一种广谱抗菌药， 主要用于治疗敏感菌引起的感染。
组成
复方磺胺甲恶唑片由磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶组成。
高效液相色谱法的基本原理
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分离原理
高效液相色谱法基于不同 物质在固定相和流动相之 间的分配平衡差异进行分 离。
检测器
常用的检测器有紫外检测 器、荧光检测器、电化学 检测器等，用于检测分离 后的物质。
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分别精密吸取对照品溶 液与供试品溶液各10μL， 注入液相色谱仪，记录 色谱图。
按外标法以峰面积计算 出供试品中磺胺甲恶唑 （C10H9N3O3S）的含 量。
04 结果分析
实验数据记录与处理
实验数据记录
在实验过程中，我们详细记录了每组样品的称量数据、吸收度数据以及波长数据。这些数据均经过了 严格的核对，以确保准确性。
复方磺胺甲恶唑片的质量分析
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实验注意事项
注意取样量的换算 注意配制稀释液的溶剂 测定时，参比溶液不得混淆， 测定时，参比溶液不得混淆，比色皿一定要清洗 干净 注意确定参比波长的方法
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讨论与思考题
1、分别说明本品中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶双波 分别说明本品中磺胺甲噁 长法测定含量时波长选择的依据。 长法测定含量时波长选择的依据。 2、为何甲氧苄啶含量测定时供试液的稀释倍数 与磺胺甲噁唑测定时的要不同？ 与磺胺甲噁唑测定时的要不同？
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测定磺胺甲噁唑片中的磺胺甲噁唑时，因为磺胺甲噁 测定磺胺甲噁唑片中的磺胺甲噁唑时，因为磺胺甲噁唑在 257nm的波长处有最大吸收,甲氧苄啶在此波长处吸收较小， 257nm的波长处有最大吸收,甲氧苄啶在此波长处吸收较小， 的波长处有最大吸收 并在304nm波长附近有一等吸收点，故选择257nm为测定波 并在304nm波长附近有一等吸收点，故选择257nm为测定波 304nm波长附近有一等吸收点 257nm ），在304nm波长附近选择等吸收波长贼为参比波 长（λ2），在304nm波长附近选择等吸收波长贼为参比波 长（λ1）。测定甲氧苄啶时，由甲氧苄啶紫外吸收图谱 ）。测定甲氧苄啶时 测定甲氧苄啶时， 可知， 239nm波长处甲氧苄啶有较大吸收， 可知，在239nm波长处甲氧苄啶有较大吸收，而次此波长 波长处甲氧苄啶有较大吸收 是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波长附近有一等吸 是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波长附近有一等吸 295nm 收点，故选择239nm作为甲氧苄啶的测定波长， 295nm波 收点，故选择239nm作为甲氧苄啶的测定波长，在295nm波 239nm作为甲氧苄啶的测定波长 长附近秀安在等吸收波长作为参比波长。 长附近秀安在等吸收波长作为参比波长。
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
单波少法测定复圆磺胺甲噁唑含量之阳早格格创做一、手段1.掌握复圆造剂的分解特性及赋形剂的搞扰与排除要领.2.掌握单波少分光光度法测定复圆磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的本理与要领.两、真验真质与本品20片，粗稀称定，研细，粗稀称与适量(约相称于磺胺甲噁唑50mg（20片仄衡片沉的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片仄衡片沉的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲心恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，与绝滤液动做供试品溶液.粗稀称与105℃搞燥至恒沉的磺胺甲噁唑对于照品50mg（按本料药95%含量计）与甲氧苄啶对于照品10mg（按本料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别动做对于照品溶液(1)与对于照品溶液(2).3.磺胺甲噁唑的测定粗稀量与供试品溶液与对于照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.与对于照品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波少(λ2)，正在304nm波少附近(每隔断0.5nm)采用等吸支面波少为介进波少(λ1)，央供△A=Aλ2－Aλ1=0.再正在λ2与λ1波少处分别测定供试品溶液的稀释液与对于照品溶液(1)的稀释液的吸支度，供出各自的吸支度好值(△A)，估计，即得.粗稀量与上述供试品溶液与对于照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[与盐酸液(0.1mol/L)75ml与氯化钾，加火至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀.与对于照品溶液(1)的稀释液，以239.0nm为测定波少(λ2)，正在295nm波少附近(每隔断0.2nm)采用等吸支面波少为参比波少(λ1)，央供△A=Aλ2－Aλ1=0.再正在λ2与λ1波少处分别测定供试品溶液的稀释液与对于照品溶液(2)的稀释液的吸支度，供出各自的吸支度好值(△A)，估计，即得.本品每片中含磺胺甲噁唑(C10H11N3O2S)应为0.360～0.440g，含甲氧苄啶(C14H12N4O3)应为72.0～88.0mg.三证明1.磺胺甲噁唑与甲氧苄啶的结构分别为：SMZ与TMP的紫中吸支图谱分别为：1 TMP(2.0μg/ml)；2 SMZ(10.0μg/ml) 1 TMP(5.0μg/ml)；2 SMZ(25.0μg/m l)3 SMZ＋TMP；4 辅料3 SMZ＋TMP； 4 辅料2.复圆磺胺甲噁唑片的处圆为：磺胺甲噁唑400g甲氧苄啶80g造成1000片3.本真验采与单波少分光光度法测定SMZ战TMP的含量.由于搞扰组分正在测定波少战参比波少处吸支度相等，可正在估计△A时消去，所以应用本法不妨没有经分散，曲交测定复圆造剂中SMZ战TMP的含量.四、思索题1.试简述单波少分光光度法的本理.2.试查阅本品的其余分解要领，从中相识复圆造剂分解的特性及生少趋势.注意：1、与20片后要算一片的仄衡沉量，而后根据那一片去与八分之一沉量.2、1,2步调动做母液配造，不妨喊博门三组完毕，3步调由单数组完毕，4步调由单数组完毕.3、利用紫中测定时屡屡换一个波少便要将空黑对于照液吸支值沉新归整，预防出现背数值情况.。
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片主药成分的含量
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片主药成分的含量
廖富林;宋新康
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2005(16)12
【摘要】目的:采用高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑的含量.方法:以DOS柱为分析柱,流动相:水-乙腈-三乙胺(80∶20∶0.2),并用醋酸调pH至5.9±0.1,流速1.2 ml/min,检测波长240 nm,柱温40℃,峰面积外标法.结果:复方磺胺甲噁唑中甲氧苄啶和磺胺甲噁唑分别在0.1～0.01 mg/L和0.5～0.03 m/gL浓度范围内线性关系良好,r值分别均为0.999 9,平均回收率分别达RSD=0.4%和0.7%(n=4).结论:该方法操作较<中国药典>方法简便、快速、结果准确可靠,重现性好,可用于复方磺胺甲噁唑片中测定甲氧苄啶和磺胺甲噁唑含量.
【总页数】2页(P1212-1213)
【关键词】高效液相色谱法;复方磺胺甲噁唑;甲氧苄啶
【作者】廖富林;宋新康
【作者单位】嘉应学院生物系;广东省梅州市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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紫外分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片的含量
【作 者】梁李广;邓廷飞
【作者单位】广西卫生管理干部学院,;广西中医学院第一附属医院药剂科,
【正文语种】中 文
【中图分类】R927
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紫外分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片的含量
梁李广;邓廷飞
【期刊名称】《广西医学》
【年(卷),期】2001(023)003
【摘 要】@@ 复方磺胺甲噁唑片含有磺胺甲噁唑(SMБайду номын сангаас)和甲氧苄啶(TMP)两种成分,中国药典(1)采用双波长分光光度法测定其含量.笔者利用SMZ溶于氢氧化钠溶液,而TMP溶于氯仿的特点,在同一份样品中同时分离两种成分再分别用紫外分光光度法测定两者的含量,方法简便,结果准确.现报道如下.1仪器与药品分光光度计(日本岛津UV一2201型).复方磺胺甲噁唑片(市售品),SMZ对照品(原料经重结晶制得),TMP对照品(原料经重结晶制得),盐酸(分析纯),氢氧化钠(分析纯).