怎样做好全血铅测定论文

如何做好全血铅的测定

【中图分类号】r115 【文献标识码】b 【文章编号】1672－3783(2011)09－0245－01

【摘要】目的：选择一种操作简便，过程简单的一种测定全血

铅的方法。

方法：采用硝酸沉淀蛋白法对全血进行前处理。

结果：0~500ug/l的范围内，相关系数r=0.9995,加标回收率为

97.8%—102.5%。

结论：应用本法测定全血铅，过程简单，结果满意。

【关键词】全血，硝酸沉淀蛋白法，方法选择，铅。

随着中国工业化的快速发展及铅的广泛应用，铅已成为一种重要的环境污染物。其中具有代表性的铅污染是铅蓄电池的污染。目前由于电动车和机动车辆的大量需求，生产铅蓄电池的企业遍及中小城市。有的较大企业生产车间的环境能达到国家规定的标准，而一些规模较小的企业及手工作坊的生产点的环境无法达到国家规定要求，其环境污染严重危害人的身体健康。铅对人体全身器官系统均有作用，但以神经-血液，人-血管系统为主。最常见的症状是贫血、铅绞痛。目前国家规定测定血铅的行业标准方法是原子吸收光谱法（ws/t174—1999），此法标准系列配制过程中小牛血来源较困难，所以好多人用了一些替代方法并在杂志上发表，都说方法、结果很满意。对这些方法在以下文章中做一些分析。卫生行业标准规定的用硝酸沉淀蛋白法处理全血测定血铅的方法，操作简便，过

程简单，适用大批职业铅接触者的体检工作，检测结果取得较好的

回收率和精密度，结果满意。

1 材料与方法

1.1 仪器:北京市东西技术研究所aa7003原子吸收光谱仪，涂层石墨管（核工业部北京第五研究所），pb空心阴极灯（北京有色金属研究总院）

1.2 试剂:硝酸（伏级纯）：南京化学试剂有限公司，17.82mω超纯水（mul-9000型超纯水器），铅标准贮备液：1.0mg/ml（国家钢铁材料测试中心钢铁研究所总院gsb g62071-90），临时用1.0％

硝酸溶液稀释为50ug/ml的铅标准使用液。

1.3 仪器工作参数:波长283.3nm，负高压311.11v，灯电流

1.429ma，氘灯电流80ma。氩气压力：0.250mpa，氩气流量1.52/mim，测量模式为峰高，样品进样量10ul。石墨炉升温程序：干燥

400c-1200c,斜坡升温并保持45s,灰化4000c,斜坡升温并保持31s,

原子化20000c，斜坡升温并保持4s，清除22000c，保持3s。

1.4 采样:抽取静脉血2ml置于预先加有50ul肝素钠溶液

（5g/l）一次性塑料试管中，充分混匀，冰箱内冷藏储存，分析前

恢复到室温。

2 样品前处理的方法选择

2.1 样品前处理可采用干消化法、湿消化法、微波消解法和硝酸沉淀蛋白法。干消化法其优点能同时处理大批样品，虽然温度控制在4000c，铅仍有一定量的挥发，定容转移过程也会造成一定量

的损失。在所有消化方法中，其回收率是并不十分满意的一种。湿消化法其缺点需要人工操作和消耗一定量的酸，操作过程中易造成污染，大批样品操作较麻烦。其优点消化速度快，理论上挥发损失小。实际操作过程中消化温度控制在4000c，仍有一定量的挥发。微波消解法理论上能同时处理多个样品，但我们发现同时处理多个样品，其消解程序不一，这可能是因为微波炉工作时炉内不同位置上的微波强度不同引起的，所以最好一次处理一个样品。其缺点显然不能适应大批样品处理。硝酸沉淀蛋白法是国家卫生行业标准方法，本法在配置标准系列过程中要求用的小牛血来源困难。我们可用无接触铅工作正常人的肝素钠抗凝血代替。实验中采血及处理样品所用试管、离心管均可用正规厂家生产的一次性塑料制品，我们检测过一次性塑料管和离心管，其铅含量均＜0.005mg/l,不影响实验结果。此法优点适合大批（几十甚至几百份）样品处理，所用试管、离心管为一次性，省去了样品处前一些器皿需要酸浸泡、清洗等环节，以及消化的烦琐过程，不存在样品的定容转移，减少铅的损失。

3 硝酸沉淀蛋白法德操作过程

3.1 标准曲线:将50ug/ml的铅标准溶液用无接触铅工作的正常人肝素钠抗凝血配制为0、 50 、100 、 200 、 400 、500ug/l

标准系列，在上述仪器条件下测定吸光度值，并绘制曲线。

3.2 样品测定:吸取抗凝血0.15ml于其塞塑料锥形离心管中，加入0.6ml硝酸溶液（5%），立即盖紧盖子剧烈振摇后在旋涡混合

器上振摇15s。静置15mim，然后高速离心（5000r- 6000r/min）,l

离心5min,静置后取10ul上溶液测定。

3.3 标准曲线及回归方程:在0-500ug/l浓度范围，标准曲线线性良好，回归方程为y=0.00046x+0.02026相关系数r=0.9995，每次检测因环境条件、仪器状态和石墨管衰减等影响需重新做标准曲线。,

3.4 准确度和精密度:选取5份铅接触者血样，取平行样：一份接上述方法测定，一份加标测定结果2。

3.5 注意事项:采血时，肝素钠的加入量要严格控制，如果加入过多，样品在干燥阶段容易飞溅，所以最好用自制的抗凝管，不要买市售的。沉淀蛋白过程中必需高速离心，否则上溶液中残留的血液成份引起背景太高，影响测定结果。另外在处理样品和配制标准系列过程中，要掌握好硝酸浓度，否则影响蛋白测定。

4 小结

我们采用硝酸沉淀法对全血进行前处理，操作方便，过程简单。适合大批职业铅接触者的体检工作。此法避免了消化及灰化过程中铅挥发及转移过程中铅损失，回收率高，实验结果表明本法是一种较好的全血铅的检测方法。

参考文献

［1］蒋炜,唐洪,王坤等.干法灰化石墨炉原子吸收光谱法测定

全血铅［j］。中国卫生检验杂志，2008,18（3）：464-465。

［2］实用原子吸收分析技术。（内部参考资料）