煮沸杀菌法的应用原理

灭菌法

灭菌法-物理灭菌法2009-9-4 11:30【大中小】【我要纠错】灭菌方法：根据药物的性质及临床治疗的要求，选择合适的灭菌方法。

一般可分为物理灭菌法、化学灭菌法、无菌操作法三大类。

物理灭菌法是利用高温或其它方法，如滤过除菌、紫外线等杀死微生物的方法。

加热可使微生物的蛋白质凝固、变性，导致微生物死亡。

（一）干热灭菌法及设备干热灭菌法是利用干热空气或火焰使细菌的原生质凝固，并使细菌的酶系统破坏而杀死细菌的方法。

多用于容器及用具的灭菌。

1、火焰灭菌法即以火焰的高温使微生物及其芽胞在短时间内死亡。

一般是将需灭菌的物品加热10秒钟以上。

如白金等金属制的刀子、镊子、玻棒等在火焰中反复灼烧即达灭菌目的。

搪瓷桶、盆和乳钵等可放入少量乙醇，振动使之沾满内壁，燃烧灭菌。

2、干热空气灭菌法系利用热辐射和灭菌器内空气的对流来传递热量而使细菌的繁殖体因体内脱水而停止活动的一种方法。

由于干热空气的穿透力弱且不均匀、比热小、导热性差，故需长时间、高温度，才能达到灭菌目的。

一般需135-145℃/3-5小时、160-170℃/2-4小时、180-200/0.5-1小时；热原经250℃/30分钟或200℃/45分钟，可破坏。

本法适用于耐高温的玻璃、金属等用具，以及不允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学药品如油、蜡及滑石粉等，但不适用橡胶、塑料及大部分药品。

如注射剂容器安瓿、输液瓶、西林瓶及注射用油宜用干热空气灭菌法灭菌。

常用设备有电热箱等，有空气自然对流和空气强制对流两种类型，后者装有鼓风机使热空气在灭菌物品周围循环，可缩短灭菌物品全部达到所需温度的时间，并减少烘箱内各部温度差。

（二）湿热灭菌法及设备湿热灭菌法系利用饱和水蒸汽或沸水来杀灭微生物的一种方法，是注射剂生产应用最广泛的灭菌方法。

包括热压灭菌法、流通蒸汽灭菌法、煮沸灭菌法。

具有穿透力强，传导快，能使微生物的蛋白质较快变性或凝固，作用可靠，操作简便，水蒸汽含有潜热、比热较热空气大等优点，但对湿热敏感的药物不宜应用。

药品杀菌方法-物理灭菌(微波灭菌)+化学灭菌(中)

霉菌杀菌力较弱。紫外线对人体如照射过久，能产生结合膜炎及皮肤烧灼等现象。一般均在操作前启紫外线灯约半小时至一小时，然后进行操作。各种规格的紫外线灯，皆规定了有效使用时即，一般为 3，000 小时。故每次使用应登记开启时间，并定期进行来菌效果的检查，也可用具有对 254nm 灵敏
0c59f8ea 工业微波设备 /
0c59f8ea 工业微波设备 /
的紫外线。紫外线进行直线传播，其强度与距离平方成比例地减弱，并可被不同的表面反射。其穿透作用微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水，其中悬浮物或水中盐类增多时，则穿透程度显著下降。所以紫外线广泛作空气灭菌和表面灭菌之用。一般在 6－15m3 的空间可装置 30 瓦（或 36－4最限能设计直接测定被灭菌物内温度的装置。同时为了确保灭菌温度，在生产上常使用温度批示剂例如利用某些熔点正好是灭菌所需温度的化学药品作指示，以判断灭菌湿度是否达到。方法是将少量的药物封装于安瓿内，与灭菌物一起放入灭菌器的上下部位灭菌，
0c59f8ea 工业微波设备 /
体积、数量、排布均对灭菌的湿度有一定影响，故应先进行灭菌条件实验，确保灭菌效果。（2）必须将灭菌器内的空气排出。如果灭菌器内的空气存在，则压力表上所表示的压力是器内蒸气和空气二者的总压而非单纯的蒸气压力。结果压力虽然到达预定的水平，但温度达不到。若表指示一致。则有
可能空气没有排尽，也可能压力表失灵，也可能不是饱和蒸气，应找出原因，加以解决。由于水蒸气被空气稀释，妨碍了水蒸气与灭菌物品的充分接触，而降低了水蒸气的灭菌效果。附有真空装置的热压灭菌器，在通入蒸气前将顺内空气抽出，可加快预热过程，缩短灭菌时间。减压还可有效地将多
200 个／升的瓶子，用水温度 18℃雾滴大小为 80 进行喷雾时，冷却效果最大，过冷粗的喷雾将引起瓶子的爆破，或用逐渐降温的喷雾水冷却。对于灭菌后要求干燥但又不易破损的物料，灭菌后立即放出灭菌器内的蒸气，以利干燥。2．流通蒸气灭菌和煮沸灭菌法流通蒸气灭菌是不密闭的容器内，用

关于煮沸消毒正确的描述

关于煮沸消毒正确的描述
煮沸消毒是一种常见且有效的消毒方法，适用于许多物品和材料。

下面是关于煮沸消毒的正确描述：
1. 温度要求：煮沸消毒需要将水加热至100摄氏度（212华氏度）以上，以确保达到足够高的温度来杀灭绝大部分微生物。

2. 杀菌原理：煮沸消毒通过将水加热至沸腾，产生蒸汽和高温，从而破坏和杀灭微生物的细胞结构，包括细菌、病毒和真菌。

3. 消毒时间：为了彻底消毒，物品需要在煮沸状态下持续暴露一段时间。

常见的建议是将物品浸入沸水中煮沸10到15分钟，以确保有效杀灭微生物。

4. 适用物品：煮沸消毒适用于可以耐受高温和水的物品，如玻璃器皿、金属工具、陶瓷器具、刀具等。

然而，不适合用于某些材料，如塑料或木制品，因为高温可能会导致变形或损坏。

5. 注意事项：在进行煮沸消毒时，要确保使用足够的水量和适当大小的容器，以确保物品完全浸泡在沸水中。

另外，注意避免烫伤，并确保在进行煮沸消毒时有良好的通风条件。

需要注意的是，煮沸消毒并不能杀灭所有类型的微生物，特别是某些耐热的芽孢形式的细菌。

因此，在特殊情况下，如处理严重传染病菌或高风险环境下，可能需要采用其他更强效的消毒方法。

1。

煮沸法原理

煮沸法原理
煮沸法是一种常用的化学实验方法，用于将液体转化成气体。

其原理是将待煮沸的液体置于容器中，然后加热液体使其温度上升，当液体温度达到沸点时，液体表面开始产生气泡并散发气体。

这是因为沸点是液体在特定气压下的温度，当液体温度达到沸点时，液体内部的分子间相互作用力不再能够抵抗外部压力，液体分子能够脱离液体形成气体。

煮沸法是一种简单而有效的将液体转化成气体的方法，广泛应用于实验室科研和工业生产中。

通过加热液体，可以提高液体分子的动能，使其克服相互作用力脱离液体形成气体态。

在实验中，常使用热板、电热器或灯泡等加热器具进行煮沸，以加热液体达到沸点。

当液体开始煮沸时，我们可以观察到液体表面产生气泡并散发出气体。

煮沸法有许多应用，例如用于制备气体样品、提取挥发性物质等。

通过煮沸法，我们可以将液体中的气体分离出来，并进行进一步的分析和研究。

此外，煮沸法还可以将液体中的杂质去除，得到纯净的液体。

但需要注意的是，煮沸法只适用于沸点较低、挥发性较高的液体，对于高沸点或不易挥发的液体，需要采用其他方法进行处理。

总之，煮沸法是一种常用的实验方法，通过加热液体使其达到沸点，从而将液体转化成气体。

它在实验科研和工业生产中有广泛的应用。

杀菌消毒的原理

杀菌消毒的原理
杀菌消毒的原理是通过破坏和灭活病原体、细菌和病毒，以防止传播和感染。

杀菌消毒方法的实施通常借助物理方法或化学药物。

下面将详细介绍几种常见的杀菌消毒原理。

1. 物理杀菌消毒原理：
- 高温灭活：利用高温（通常在100摄氏度以上）对病原体
进行灭活，破坏病菌的细胞结构，使其失去生活繁殖能力。

常见的高温灭菌方法包括蒸汽灭菌和干热灭菌。

- 紫外线消毒：利用紫外线的辐射作用，破坏病菌的核酸结构，使其失去生物活性。

紫外线消毒通常用于空气和水的消毒处理。

- 过滤消毒：利用微孔过滤器材过滤掉病原体，防止其传播。

常用于水处理，如饮用水和药品生产中。

2. 化学杀菌消毒原理：
- 氧化剂：如过氧化氢、次氯酸钠等，通过氧化反应破坏病
原体的细胞结构和代谢途径，达到杀灭的效果。

- 氯类化合物：如次氯酸钠、氯己定等，通过氯离子与病原
体细胞内的酶和蛋白质进行反应，造成细胞蛋白质的脱活和破坏。

- 乙醛类化合物：如戊二醛、辛己醛等，通过与病原体细胞
内的蛋白质和核酸结合，破坏其结构和功能，从而杀灭病原体。

综上所述，杀菌消毒的原理主要是通过物理和化学手段对病原体进行灭活和破坏，以防止其传播和感染。

不同的杀菌消毒方
法适用于不同的场景和目的，正确选择和使用合适的杀菌消毒方法对于保障公共卫生和个人健康具有重要意义。

实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总

实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总1、热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。

在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。

2、干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20％以下的高热。

干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。

一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160－170℃经2小时方可杀死。

燃烧法：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。

烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。

将器械放在火焰上烧灼1－2分钟。

若为搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1－2分钟。

采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2－3次。

燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。

燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。

锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。

焚烧某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。

3、电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌。

培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。

一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160－170℃经2小时方可杀死。

热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。

灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。

4、微波消毒微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。

目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。

简述食品工业中常用的灭菌方法

简述食品工业中常用的灭菌方法灭菌是指将食品中的细菌、病毒、真菌等微生物全部杀死或去除，以保证食品的安全性和稳定性。

在食品工业中，常用的灭菌方法有高温灭菌、低温灭菌、化学灭菌、辐射灭菌等。

下面将分别详细介绍这些方法。

一、高温灭菌高温灭菌是指利用高温对食品中的微生物进行杀灭的方法。

常见的高温灭菌方法有煮沸法、蒸汽法和干热法。

1. 煮沸法煮沸法是指将食品放入开水中进行加热处理，使其中的微生物被彻底杀死。

这种方法适用于一些易于消化的食品，如蔬菜等。

2. 蒸汽法蒸汽法是指利用蒸汽对食品进行加热处理，使其中的微生物被彻底杀死。

这种方法适用于一些含水量较多的食品，如肉类、豆类等。

3. 干热法干热法是指利用干烤或干燥对食品进行加热处理，使其中的微生物被彻底杀死。

这种方法适用于一些含水量较少的食品，如坚果、饼干等。

二、低温灭菌低温灭菌是指利用低温对食品中的微生物进行杀灭的方法。

常见的低温灭菌方法有冷冻法和冷藏法。

1. 冷冻法冷冻法是指将食品放入低温环境中进行处理，使其中的微生物被彻底杀死。

这种方法适用于一些易于保存的食品，如肉类、鱼类等。

2. 冷藏法冷藏法是指将食品放入低温环境中进行处理，使其中的微生物得到抑制或被彻底杀死。

这种方法适用于一些易于变质的食品，如乳制品、蛋类等。

三、化学灭菌化学灭菌是指利用化学药剂对食品中的微生物进行杀灭或抑制的方法。

常见的化学灭菌药剂有过氧乙酸、次氯酸钠等。

1. 过氧乙酸过氧乙酸是一种常用的化学灭菌药剂，具有广谱杀菌作用，能够有效地杀灭食品中的微生物。

但是过氧乙酸对人体有一定的刺激性，使用时需要注意安全。

2. 次氯酸钠次氯酸钠也是一种常用的化学灭菌药剂，具有较强的杀菌作用，能够有效地杀灭食品中的微生物。

但是次氯酸钠使用时需要注意控制浓度和时间，以免对人体造成危害。

四、辐射灭菌辐射灭菌是指利用电离辐射对食品中的微生物进行杀灭的方法。

常见的辐射灭菌方法有紫外线辐射、X射线辐射、γ射线辐射等。

质粒DNA-煮沸法

碱裂解法流程图
对数期菌体上清液沉淀
溶液I充分重悬
抽提
干燥溶解
溶液II裂解
酒精沉淀
质粒DNA溶液
溶液III中和
离心洗涤
二、材料、设备及试剂
菌种：E. coli MV1184（含pUC118）、 E. coli K12（含pEGFP）设备：eppendorf管、微量取液器(20μl,200μl,1000μl)，台式高速离心机，涡旋振荡器试剂：LB液体培养基、溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ 、RNA酶A 、饱和酚:氯仿＝ 1:1
2.
菌体老化碱裂解不充分菌体中无质粒溶液使用不当
4.
对策
3.
五、质粒DNA提取常见问题问题二：质粒纯度不高，如何解决？
原因
1. 2. 3.
1.
混有蛋白混有RNA 混有基因组DNA
不要使用过多菌体。重新纯化 DNA，去除蛋白、多糖、多酚等杂质加入RNaseA室温放臵一段时间
对策
2.
3.
加入溶液II 和III后防止剧烈振荡，可能把基因组DNA剪切成碎片从而混杂在质粒中。细菌培养时间过长会导致细胞和DNA 的降解，培养时间不要超过16 小时。
六、问题与讨论
1. 简要叙述溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的作用，以及实验中分别加入上述溶液后，反应体系出现的现象及其成因。 2. 染色体DNA与质粒DNA分离的主要依据是什么？
质粒DNA－煮沸法煮沸法原理
染色体DNA比质粒DNA分子大得多，且染色体DNA为线状分子，而质粒DNA为共价闭合环状分子；当加热处理DNA溶液时，线状染色体DNA容易发生变性，共价闭环的质粒DNA在冷却时即恢复其天然构象；变性染色体DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀，而复性的超螺旋质粒DNA分子则以溶解状态存在液相中，从而可通过离心将两者分开。

手术室常用消毒灭菌法有几种

手术室常用消毒灭菌法有几种引言部分随着现代医学技术的不断发展，各种医学设备、医学器械在诊断治疗中的应用度也逐渐提高，医疗设备的升级与发展有利于整体医疗水平的提升。

因此，医疗人员在使用各种医疗设备的同时应该关注消毒灭菌工作，尤其是手术室相关的医疗设备，环境以及用具的消毒灭菌效果将会直接影响患者的手术感染情况。

医院手术工作人员应该遵循手术室消毒灭菌管理相关规定，保障手术室环境、器械以及物品的清洁性，改善手术医疗效果，保障患者生命健康。

本文将主要介绍手术室常用的几种消毒灭菌方法，同时给出手术室消毒灭菌管理的建议。

1.手术室常用消毒灭菌法1.1热力灭菌法热力灭菌的原理就在于热力对于微生物蛋白质以及核算的破坏性，高温将导致蛋白质的变性，使得核酸解链崩裂，最终致其死亡，起到灭菌的效果。

焚烧、灼烧是比较常见的热力灭菌法，但是该方法仅适用于被废弃的医用物品、垃圾、动物尸体等的处理。

烧灼则能够被利用进行微生物实验室中接种环、金属器械、试管口等用具的消毒灭菌。

另外，工作人员还可以使用干烤箱进行灭菌操作，可将其温度调至160℃～170℃，持续2h就能够达到灭菌的目的，能够被应用于消毒手术室中的玻璃器皿、瓷器、金属物品等。

常见的湿热消毒灭菌法包括巴氏消毒法、煮沸法、流通蒸汽法以及高压蒸汽灭菌法。

其中巴氏消毒法采取的是低温杀菌技术，其在消毒的同时还能够保护不耐热成分的状态，一般情况下分为60℃以及71℃左右两种规格，当前人们常使用后一种方法进行奶制品的消毒。

煮沸法指的是保持100℃煮沸5～10min进行消毒，如果是芽胞的话需要进行煮沸1～2h才能够发挥消毒效果，经常被用于手术室中注射器、手术用具等的消毒处理。

流通蒸气法则是使用蒸锅加热至100℃维持15～30min，就能够杀灭细菌的繁殖体。

在首次消毒之后，可以将物品放进37℃孵箱培养出繁殖体，之后每天再蒸汽消毒一次，连续进行三次，这样的消杀效果更好，该方法被称之为间歇消毒法，能够适用于不耐高温的物品，比如糖类、血清和鸡蛋培养基等。

常用的消毒灭菌方法

常用的消毒灭菌方法
消毒杀菌的方法有煮沸、紫外线照射、酒精消毒杀菌法以及高压蒸汽灭菌法等。

1.煮沸：主要是通过高温将除芽孢以外的细菌全部杀死，从而起到消毒杀菌的效果。

适用于毛巾、衣服、家用碗筷等物品。

2.紫外线照射：主要是利用波长为2000～3000Å的紫外线将物体表面的细菌全部杀死。

常用于器具表面和室内的消毒。

3.酒精消毒杀菌法：主要是利用酒精能穿透细菌的细胞壁，使其蛋白质发生变性死亡，进而起到消毒杀菌的效果。

通常用于物体表面、皮肤的消毒，临床常用75%浓度的酒精溶液。

4.高压蒸汽灭菌法：当高压蒸汽达到一定的温度时，可以将芽孢在内的所有细菌，进而起到消毒杀菌的作用。

适用于金属物品、培养基、玻璃等物品的消毒杀菌。

除此之外，消毒杀菌的方法还包括次氯酸钠溶液浸泡法、日晒法等，建议患者根据不同物品选择合适的方式。

常用的灭菌方法

常用的灭菌方法1、热力灭菌：利用高温使菌体蛋白质变性或凝固，代谢发生障碍，导致细菌死亡。

包括：（1）焚烧法：用火焚烧，是很彻底的灭菌方法，适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。

（2）烧灼法：直接再火焰上烧灼，用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌。

（3）干烤法：在干烤箱通电后利用高热空气进行灭菌。

一般加热160-170℃，维持2小时即可杀灭包括芽胞在内的一切微生物。

主要用于玻璃器皿、磁器或需干燥的注射器等。

（4）煮沸法：煮沸100℃5分钟可杀死细菌的繁殖体，一般消毒以煮沸10分钟为宜。

如需要杀死芽胞则要煮沸1-3小时。

主要用于一般外科器械、注射器、胶管和食具等的消毒。

（5）间歇灭菌法：是利用反复多次的流通蒸汽，杀死细菌所有繁殖体和芽胞的一种灭菌法。

本法适用于耐热物品，也适用于不耐热(<100℃)的一些物质如某些培养基的灭菌。

具体做法是将待灭菌的物品置于阿诺氏流通蒸汽灭菌器内，100℃加热15-30分钟杀死其中的细菌繁殖体，然后将物品置37℃温箱中过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸汽加热，如此连续三次，可将所有繁殖体和芽胞全部杀死。

若有某些物品不耐100℃，则可将温度降至75-80℃，每次加热的时间延长至30-60分钟，次数增至3次以上，也可达到灭菌目的，如用血清凝固器对血清培养基或卵黄培养基的灭菌。

（6）巴氏消毒法：由巴斯德创建，常用于牛奶和酒类的消毒。

一般加热61.1-62.8℃半小时，或71.7℃经15-30秒钟，便可达到杀死病原菌或一般杂菌，而不严重破坏物品的质量的目的。

（7）高压蒸汽灭菌法：是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。

利用高压蒸汽灭菌器锅进行灭菌，由于密闭容器加温所产生的高压饱和水蒸汽能获得较高的温度，通常在1.05kg/cm2的压力下，温度达121.3℃，维持15-30分钟，可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物。

此法适用于高温和不怕潮湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术器械、注射器、手术衣、敷料和橡皮手套等。

实验三细菌的分布与消毒灭菌

实验三细菌的分布与消毒灭菌【目的】①了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。

②了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。

③熟悉外界因素对细菌的影响，学习常用的消毒灭菌方法。

④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗力。

一、细菌的分布检查（一）空气中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。

【方法】①取普通琼脂平板一只开启皿盖，培养基面向上放于实验桌上，暴露5～30min后盖好。

②置37℃培养18～24小时后观察结果。

【结果】（填表10-1）平板培养基表面或多或少有菌落生长。

（二）地面水中的细菌检查【材料】地面水(河水、井水或池水)、高层琼脂培养基、1ml无菌吸管、灭菌培养皿。

【方法】①以无菌吸管吸取1ml地面水，加入灭菌平皿中。

②将已溶化且冷至45℃左右的高层琼脂倾注人上述平皿中，加盖后轻轻摇动，使水与琼脂充分混匀，静凝。

③37℃ 24小时后取出观察，计数菌落。

【结果】（填表10-1）（三）衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。

【方法】取普通平板一个，用蜡笔在平板背面玻璃上划成四等分，并贴上标签(图10-1)。

然后以无菌操作法，用衣袖角、票证、头发及手指或指甲内污物，在平板培养基表面相应部位轻轻涂抹，置37℃培养24小时，观察并记录结果。

【结果】填表培养基表面涂抹处有菌落生长。

衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查（四）正常人体咽喉部的细菌检查【材料】血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。

【方法】取灭菌棉拭一支，在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于血液琼脂培养基—侧，然后改用灭菌接种环作分离划线接种。

盖上皿盖，37℃孵育24小时（或者采用咳喋法）。

【结果】（填表10-1）琼脂平板表面有菌落生长。

其中占优势的是一种细小菌落，其周围有草绿色的不完全溶血环。

此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。

煮沸杀菌的实验报告

一、实验目的本次实验旨在探究煮沸方法对细菌的杀菌效果，验证煮沸消毒法的可行性，并了解其在实际应用中的效果。

二、实验原理煮沸消毒法是一种传统的消毒方法，其原理是利用高温使细菌蛋白质变性，破坏细菌的细胞膜和细胞壁，从而杀死细菌。

在标准大气压下，水的沸点为100摄氏度，煮沸五到十分钟可以杀灭细菌繁殖体，煮沸十五分钟可以杀灭多数细菌芽孢。

此外，在水中加入适量的碳酸氢钠溶液，可以提高沸点，增强杀菌效果。

三、实验材料1. 实验组：含有细菌的肉汤培养液2. 对照组：未加细菌的肉汤培养液3. 实验器具：高压锅、计时器、温度计、试管、试管架、酒精灯、镊子、无菌棉签、无菌水、碳酸氢钠溶液四、实验步骤1. 将肉汤培养液分别倒入实验组和对照组的试管中，每管5ml。

2. 将实验组试管中的培养液用无菌棉签均匀涂抹在试管壁上，对照组不做处理。

3. 将两组试管放入高压锅中，加水至没过试管，加入适量的碳酸氢钠溶液。

4. 加热至水沸腾，开始计时。

5. 实验组煮沸15分钟，对照组煮沸5分钟。

6. 关闭高压锅，自然冷却至室温。

7. 将两组试管中的培养液分别接种至新的肉汤培养液中，培养24小时。

8. 观察两组培养液是否出现菌落生长。

五、实验结果1. 实验组培养液中出现菌落生长，表明煮沸15分钟未能完全杀灭细菌。

2. 对照组培养液中未出现菌落生长，表明未加细菌的肉汤培养液在煮沸过程中未受到污染。

六、实验分析1. 实验结果表明，煮沸15分钟对细菌的杀菌效果有限，可能是因为实验中使用的细菌种类、数量以及煮沸时间等因素的影响。

2. 对照组培养液中未出现菌落生长，说明煮沸过程对未加细菌的肉汤培养液没有影响，进一步验证了煮沸消毒法的可行性。

七、实验结论1. 煮沸消毒法是一种简单、有效的消毒方法，适用于耐湿、耐高温的物品。

2. 煮沸时间对杀菌效果有重要影响，实验结果表明，煮沸15分钟对细菌的杀菌效果有限。

3. 在实际应用中，应根据具体情况选择合适的煮沸时间，以确保消毒效果。

消毒灭菌的方法及原理

v 适用于餐（茶）具、环境、水、物体表面消毒，常用于疫源地消毒。 v 常用方法：浸泡、擦拭、喷洒和干粉消毒。
精选ppt
29
乙醇
v 中效消毒剂，具有中效、速效、无毒，对皮肤粘膜有刺激性，对金属无腐蚀性，受有机物影响很大，易挥发，不稳定等特点。
v 适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒。
精选ppt
30
精选ppt
4
消毒与灭菌－基本概念
高水平消毒法：可以杀灭各种微生物，对细菌芽孢杀灭达到消毒效果的方法。这类消毒方法应能杀灭一切细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、病毒、真菌及其孢子和绝大多数细菌芽孢。属于此类的方法有：热力、电力辐射、微波和紫外线等以及用含氯、含溴消毒剂进行消毒的方法。中水平消毒法：是可以杀灭和去除细菌芽孢以外的各种病原微生物的消毒方法，包括超声波、碘类消毒剂(碘伏、碘酊等)、醇类、季铵盐（包括双链季铵盐）类化合物的复方、酚类等消毒剂进行消毒的方法。
精选ppt
13
消毒与灭菌－物理方法
❖ 辐射
紫外线
❖ 波长200-300nm的紫外线有杀菌作用，其中265－266nm
最强。 ❖ 紫外线穿透力弱，只用于表面
消毒，对人体皮肤、眼睛有损伤。 ❖ 大多数细菌、病毒接收相对较低强度的紫外光照射，在达到 10，000微瓦秒每平方厘米的剂量时，便会被破坏其结构而死亡。
精选ppt
5
消毒与灭菌－物理方法
v 热力 v 灼烧 v 加压空气灭菌法 v 过滤 v 辐射 v 低温
精选ppt
6
精选ppt
7ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
消毒与灭菌－物理方法
热力
干热灭菌法
湿热消毒灭菌法
精选ppt
8

物理消毒灭菌法

物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法主要分为热力消毒灭菌法、辐射消毒法、微波消毒灭菌法、电离辐射灭菌法、过滤除菌法。

一、热力消毒灭菌法（一）干热法导热慢，所需的温度较高，时间较长。

1.燃烧法（1）用途：①无保留价值的物品，如破伤风、气性坏疽等感染的敷料等；②金属器械及搪瓷类物品急用且无条件用其他方法消毒时，锐利刀剪除外，以免锋刃变钝。

（2）方法：①金属器械在火焰上烧灼20秒；②搪瓷类容器倒入少量95%乙醇，慢慢转动点火燃烧至熄灭。

2.干烤法（1）用途：油剂、粉剂、玻璃器皿、金属制品、陶瓷制品等。

（2）方法：①消毒：箱温120～140℃，时间10～20分钟；②灭菌：箱温160℃，时间2小时；箱温170℃，时间1小时；箱温180℃，时间30分钟。

（二）湿热法导热快，穿透力强，所需温度较低，时间较短。

1.煮沸消毒法（1）用途：搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品，不能用于外科手术器械的灭菌。

（2）方法：①刷洗干净；②全部浸没；③加热煮沸。

水沸开始计时：5～10分钟可杀灭细菌繁殖体，15分钟可杀灭多数细菌芽胞；加入碳酸氢钠，配成1%～2%溶液，可增强杀菌作用、去污防锈。

（3）注意事项：①物品全浸没：盖子打开，轴结打开，空腔导管预先灌水，容器不重叠；②玻璃类物品用纱布包裹，冷水或温水中放入；③橡胶类物品用纱布包好，水沸后放入；④中途加物品，需等再次水沸后开始计时；⑤海拔每增高300m，煮沸时间延长2分钟。

2.压力蒸汽灭菌法应用最广、效果最为可靠的首选灭菌方法。

（1）用途：各种器械、敷料、搪瓷类、玻璃制品、橡胶类、某些药品、溶液、细菌培养基等。

（2）方法：手提式压力蒸汽灭菌器、卧式压力蒸汽灭菌器、预真空压力蒸汽灭菌器。

①手提式压力蒸汽灭菌器：压力达103～137kPa，温度达121～126℃，保持20～30分钟，可达到灭菌效果；关闭热源，打开排气阀，待压力降至“0”时，可慢慢打开盖子，取出物品。

切忌突然打开盖子。

②卧式压力蒸汽灭菌器：空间较大，可一次灭菌大量物品。

消毒与灭菌的基本概念

消毒与灭菌的基本概念消毒与灭菌的方法可分为物理方法和化学方法两大类。

常用以下术语表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度：灭菌：指杀灭或去除物体上所有微生物的方法，包括抵抗力极强的细菌芽胞。

消毒：指杀死物体上病原微生物的方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。

用以消毒的药品称为消毒剂。

防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。

无菌：指没有活菌的意思。

防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，称为无菌操作。

一、热力灭菌法的种类及其应用物理消毒灭菌的方法主要有热力法、射线法和过滤法三种。

超声波、干燥、冷冻也能杀菌抑菌。

热力灭菌法是利用热能去变性蛋白质或核酸、破坏细胞膜或胞膜来实现杀死微生物。

分干热灭菌和湿热灭菌两大类。

干热灭菌的方法有：①焚烧：适用于废弃物品或动物尸体等；②烧灼：适用于实验室的金属器械(镊、剪、接种环等)、玻璃试管口和瓶口等的灭菌；③干烤：在干烤箱内加热至160～170℃维持2小时，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。

适用于耐高温的玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等；④红外线：常用于碗、筷等食具的灭菌；⑤微波：波长为1～1000mm的电磁波可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，灭菌效果不可靠，用于非金属器械及食具消毒。

湿热灭菌法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，因为：①湿热中蛋白吸收水分，更易凝固变性；②水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能；③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提高物体的温度。

常用的湿热灭菌法有：(一)xx消毒法加热61.1～62.8℃30分钟，或者72℃15秒，可杀死乳制品的链球菌、沙门菌、布鲁菌等病原菌，但仍保持其中不耐热成分不被破坏，用于乳制品消毒。

(二)煮沸法繁殖体需100％5分钟以上，芽胞需2小时以上，常用于食具、刀剪、注射器的消毒。

(三)流通蒸汽消毒法在一个大气压下利用100℃的水蒸气进行消毒，15～30分钟可杀灭细菌繁殖体，但不保证杀灭芽胞。

医疗机构-热力消毒灭菌法

。直接在火焰上烧灼20秒灭菌，或在容器内放少量95% 乙醇，燃烧至火焰熄灭
。用于：
接种环、试管口、耐热的搪瓷类、金属类物品灭菌；某些器械急用时（如止血钳、缝针）
燃烧法——注意事项
、远离易燃易爆物品、在燃烧过程中不得添加乙醇等燃料、贵重器械及锐利刀剪，禁用此法
干烤法
油剂
粉剂玻璃器皿金属制品
时、高海拔地区需适当延长消毒时间。海拔每增高300m，
消毒时间延长2min。、 1％～2％碳酸氢钠溶液煮沸时沸点可达105℃,除增
强杀菌作用外，还有去污防锈作用。
。
、常用于耐高温、耐高压、耐潮湿物品的灭菌
. 下排气式压力蒸汽灭菌器 . 预真空压力蒸汽灭菌器
如金属、玻璃、橡胶、搪瓷、辅料等
卧式
手提式
设备类别物品类别
下排气式预真空式
敷料
器械
敷料、器械
温度 (℃) 121 121 132-134
所需最短时间
（min）
30 20 4
压力
（kPa）
102.9 102.9 205.8
u效果可靠、使用广泛的方法
u作用原理：热力破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，导致其死亡
。干热法空气导热。湿热法空气和水蒸汽导热
燃烧法——简单、迅速、彻底的灭菌方法
、焚烧法。直接在焚烧炉内焚烧。用Biblioteka 处理无保留价值的污物、特殊感
破伤风气性坏疽铜绿假单胞菌
燃烧法、焚烧法、烧灼法
一般每周1次
、适用：耐湿、耐高温物品的消毒
、方法：消毒前先将物品刷洗干净，浸没在水中加热煮沸
、消毒参数：100 ℃ 5分钟-2小时

煮沸灭菌法原理

煮沸灭菌法原理
一、煮沸灭菌法
将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞。

在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈。

此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。

二、煮沸灭菌法原理
①湿热中蛋白吸收水分，更易凝固变性；
②水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能；
③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提高物体的温度。

湿热灭菌法一般采用121摄氏度，灭菌20-30min，如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时，再灭菌一次，以用于杀死刚刚萌发的孢子。

高温消毒和灭菌.

高温消毒和灭菌高温对微生物有明显的致死作用。

所以，应用高温进行灭菌是比较确实可靠而且也是常用的物理方法。

高温可以灭活包括细菌及繁殖体、真菌、病毒和抵抗力最强的细菌芽孢在内的一切微生物。

高温消毒和灭菌方法主要分为干热消毒灭菌和湿热消毒灭菌。

一、干热消毒和灭菌法1．灼烧或焚烧消毒法指直接用火焰灭菌，适用于金属笼具、地面、墙壁以及兽医使用的接种针、接种环、剪刀等耐热的金属器材。

接种针、环、棒以及剖检器械等体积较小的物品可直接在酒精灯火焰上或点燃的酒精棉球火焰上灼烧，金属笼具、地面、墙壁的灼烧必须借助火焰消毒器进行。

焚烧主要是对病畜禽尸体、垃圾、污染的垫草、垫料和不可利用的物品器材采用直接点燃或在焚烧炉内烧毁，从而消灭传染源。

2．热空气灭菌法又称干热灭菌法，需在电热干烤箱内进行。

此法适用于干燥的玻璃器皿，如烧杯、烧瓶、吸管、试管、离心管、培养皿、玻璃注射器、针头、滑石粉、凡士林及液体石蜡等的灭菌。

灭菌时，将待灭菌的物品放入烘烤箱内，使温度逐渐上升到160℃维持2h，可以杀死全部细菌及芽孢。

干热灭菌时注意：①消毒灭菌器械应洗净后再放入电烤箱内，以防附着在器械上面的污物炭化。

玻璃器材灭菌前应洗净并干燥，勿与烤箱底壁直接接触，灭菌结束后，应待烤箱温度降至40℃以下再打开烤箱，以防灭菌器具炸裂。

②物品包装不宜过大，干烤物品体积不能超过烤箱容积的2/3，物品之间应留有空隙，有利于热空气流通。

粉剂和油剂不宜太厚（小于1.3cm），有利于热的穿透。

③棉织品、合成纤维、塑料制品、橡胶制品、导热差的物品及其他在高温下易损坏的物品，不可用干烤灭菌。

灭菌过程中，高温下不得中途打开烤箱，以免引燃灭菌物品。

④灭菌时间计算应从温度达到要求时算起。

二、湿热消毒和灭菌法湿热灭菌法是灭菌效力较强的消毒方法。

常用的有如下几种：1．煮沸消毒即利用沸水的高温作用杀灭病原体。

常用于针头、金属器械、工作服、工作帽等物品的消毒。

煮沸温度接近100℃，10～20min可以杀死所有细菌的繁殖体，对于寄生虫性病原体，消毒时间应加长。