生物化学实验 血清、乳蛋白含量测定
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• 三试剂:
1.标准蛋白:1mg/ml BSA。
2.蛋白显色剂:溶解考马斯亮兰G-250 100mg于50ml 95%酒精中,wk.baidu.com加入100ml 85%的磷酸,然后用蒸馏水稀释到1L。
3.样品液:蛋白稀释液(稀释50倍)
• 四.操作: 取4只干净试管,分别标记为
“空白、标准、样品1、 样品2”。依次加入蒸 馏水、标准蛋白、稀释的样品各50 ul,然后每 管中均加入蛋白显色剂2.5 ml,混匀,2 min后 比色,记录各管的A595nm值。
• 五.结果及分析:
• 蛋白中蛋白质含量:
• C测=0D测/0D标× C标 单位:(g/100ml)
血清、乳蛋白含量测定
• 一.目的:学会用染料结合分析法测定血清 总蛋白的含量,掌握比色分析的方法及原理。
• 二.基本原理:在酸性条件下,蛋白质与考马斯
亮兰G-250产生颜色反应,最大吸收波长为595 nm。根据蛋白质溶液的A595值(吸光值)与蛋白质 浓度成线性正比的特点测定蛋白质含量。实验时 以已知浓度的牛血清白蛋白(BSA)溶液为标准。