贝克曼库尔特血细胞分析VCS技术

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自动网织红细胞功能
网织红细胞计数是用作红细胞产生或红细胞生成的指标,是诊 断或监测贫血治疗最常用的临床指标 传统的手工计数网织红细胞的方法因其固有的不精确性,当用 做监测实验时有一定的局限性,尤其是用在计数范围的低限或 高限时。涂片厚薄,染色深浅,有限的细胞计数以及技师间的 差异均会导致结果的变异系数为25%到50%。 流式细胞术测量网织红细胞不但大大提高了网织红细胞计数的 准确性和精确性,还能提供一些反映网织红细胞成熟度和大小 的非传统参数。临床研究已经开始将这些非传统参数应用于许 多贫血性疾病的诊断和治疗

VCS三维技术的优化
IntelliKineticsTM(智能调控) & AccuGateTM(精确定位)
两种新技术令报警的假阳性 和假阴性减少到前所未有的 水平
专利的IntelliKinetics™ 技术

对标本在测量前的预处理作最适化控制 根据实验室环境温度,控制

仪器内细胞与试剂的反应温度 试剂加入量 试剂与细胞的反应时间 从流式通道获取数据的时间
逐个、同时、直接的三维检测
细胞的三维定位
NEOP Mean
NEDC Mean
NE RLS Mean
三维分析技术



将检测过的8,192个细胞分 布到一个以V、C、S为三维 坐标的空间内,显示出细 胞群特征。 高智能的计算机软件分析 分析细胞群的位置、相对 密度、轮廓、和大小。 三维坐标的数据分析位点 多过 16 × 106个。
Coulter® LH750创新科技令操作更简便
自动网织红细胞功能
试剂 1. 非荧光染料---新亚甲蓝来沉淀网织红细胞内的RNA。网织 红细胞染色是为了把网织红细胞与成熟红细胞区分开来。 2. 脱蛋白溶液(酸性、低渗)--- 在血液与新亚甲蓝混匀孵育一 段时间后加入 a. 将网织红细胞内的血红蛋白除去,而保留着色的 RNA。 b. 红细胞肿胀成球形但不胀破
RB C
Blo o d
RBC S we lling Ery thro Ly s e
RBC g ho s t, frag m e nt, dis o lve S tab iLy s e
C O U N T
Coulter® LH 755TM 智能动力系统 Intellikinetics TM
.
根据实验室环境条件,调整 : 加入试剂的温度 加入试剂的量 试剂与细胞的反应时间( 从流式通道获取数据的时 间) 屏蔽分析环境的内、外源噪 音
白细胞五分类
VCS技术
从三分类到五分类
三分类:


五分类:

淋巴细胞 单核细胞 粒细胞
中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞
淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞
Lymphocyte
淋巴细胞 Monocyte 单核细胞
Granulocyte 粒细胞
淋巴
转动 – 从任意角度观察
根据需要隐藏/显示细胞亚群
AccuGate™ 定位技术

增加新的怀疑性报警提示



怀疑有中性、淋巴、或单核系原母细胞 分辨不同细胞系的原母细胞 衰老标本 低细胞数量标本(绝对值)
报警语更为准确和精确
经典的库尔特专利技术 。 ---蠕动摇床 .



全自动 90度摇匀 吸样前自动设臵初始化编号 唯一具备样本识别无错管理
Coulter® LH 755TM 智能动力系统 Intellikinetics TM
.
1. 试剂温度
消除实验室环境对结果的影响 保证在不破坏白细胞的前提下,完 全溶解红细胞 保证白细胞恢复原态
更精确的结果,降低复检率
2. 试剂量
整体提高实验室工作效率
3. 反应时间
优秀,经济的幼稚细胞检测
Coulter® HmXTM 卓越的幼稚细胞报警功能
临床疾病
骨髓移植 溶血性贫血 升高 升高
IRF
网织红细胞计数
降低 升高
缺铁性贫血
B12或叶酸缺乏 近期出血
升高
升高 升高
正常到降低
正常到降低 正常到升高
地中海贫血
髓障综合征 增生低下性贫血
正常到升高
正常到升高 正常到升高
升高


检测与白细胞分类共享一个流式通道。
网织红细胞 VCS三维散点图分析
网织红细胞
网织红细胞亚群分辨
白细胞
成熟红细胞 低成熟度网织红 网织红细胞 高成熟度网织红 非红细胞干扰
网织红细胞参数意义
参数
网织红细胞百分比 网织红细胞绝对值 网织红成熟度 平均网织红体积 平均球形红细胞体积 高散射网织红百分比 高散射网织红绝对值

.


对异常标本最精确的检测及结果报告 对重叠及被掩盖的群落进行精确分类 激发软件对分类结果异常的样本进行进一步分析 超凡的怀疑性报警灵敏度和特异性 标本具有更好的分类稳定性 增加新的怀疑性报警提示 大大降低假阳性率和假阴性率
Coulter® HmXTM 智能动力系统 Intellikinetics TM

.
在任何一种血细胞分析仪 的分析过程中, 细胞与试 剂之间的反应过程都对结 果的准确度起到至关重要 的作用。 细胞和溶血剂的反应( 物理法) 细胞和染色剂的反应( 化学法)
Ne ut
Eo
Lym ph
WB C S w e llin g
WB C S hrin ka g e
Ly s is Nuc le i


网织红细胞的检测

网织红细胞是介于晚幼红 细胞和成熟红细胞之间的 不成熟红细胞,通常较成熟 红细胞稍大,其胞质中尚残 存部分嗜碱性物质(RNA,核 糖体),经碱性染料染色后 可见深染的网状结构,故名 。

右图中标记A、B、C的细胞 分别代表不同成熟度的网 织红细胞的。
新亚甲蓝-VCS检测法

Scatter

Pak双试剂系统的作用
去红细胞: 红细胞溶解剂通过渗透压差溶解红 细胞

保持白细胞原态: 溶解终止液令白细胞恢复到 “接近原态”大小
接近原态的WBC分析
接近原态的白细胞
进入流式通道
接近原态的WBC分析:前处理装置
混合池和流式通道
流体动力聚焦
流体动力聚焦的流式通道

单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过流式 通道
Coulter® HmXTM 非线性柔变轮廓分类(AccuGate)
独有的非线性分类方式
柔变轮廓 细胞亚群多维参数的精确演算 原始细胞的特征描述 精确的报警
.
充满信心的最低人工复检率
单核 淋巴
中性
嗜酸
256 X 256 X 256
Coulter® HmXTM 非线性柔变轮廓分类(AccuGate)

将重叠限制到最低限度
正常压力差:标本压力小于鞘流压力
异常压力差:标本与鞘流压力差过小
VCS检测
V
C
八千多个白细胞逐个、直接 、同时地在流式通道内接受 VCS三重检测,得到各自的 三维座标值
S
增强型流式通道
VCS增强型流式通
道运用三种独立的 能量探针来分析细 胞,是目前最全面先 进的分析工具
英文
RET% RET# IRF MRV MSCV HLR% HLR#
正常参考
0.5% - 2% 2% - 6% (25 – 75) ×109/L 0.2-0.4 100-125fl 84-100fl 0.07%-0.7% (3 – 50) ×106/L
网织红细胞参数的临床意义
IRF的临床应用

未成熟网织红细胞,也称移动或张力细胞,正常情况下不足网织 红细胞总数的5%。未成熟网织红细胞在大量的促红细胞生成的 刺激下会释放到外周血中,如出血,某些贫血或对刺激骨髓造血 治疗的反映。IRF类似于中性粒细胞的核左移,能够提供额外的 红细胞信息,这些信息可以缩短疾病从诊断到治疗或单纯的治疗 时间。
基于VCS技术,结合库尔特非线性柔变轮廓分类技术, COULTER® HmX的研究队伍根据国际行业标准,在结 果报告单中提供无与伦比的包括十余种幼稚细胞的准 确报警,与同类仪器相比, COULTER® HmX的幼稚细 胞功能独有如下优点: 基于多维参数基础上,结合多种创新科技的准确的、 分系的幼稚细胞报警 无需额外的试剂,降低实验室成本 根据国际行业复检标准,只提供准确的报警以供人工 复检参考

IRF在其他方面的临床应用包括:

监测骨髓移植后干细胞再生情况 监测强度化疗后骨髓再生情况 监测铁、维生素B12和叶酸治疗 监测毒性药物对骨髓的影响 通过促红细胞生成监测肾脏移植 对贫血进行分类和评价 监测新生儿输血 检测再障危象 提高贫血的分类、诊断和治疗
不同临床疾病中IRF与网织红细胞计数的相互关系
Coulter® HmXTM 卓越的幼稚细胞报警功能



有核红细胞 单核系原始细胞 淋巴系原始细胞 粒系原始细胞 不成熟粒细胞 中性杆状核细胞 异型淋巴细胞 过度溶解的淋巴细胞 血小板凝集团和巨大血小板 细胞寄生虫(疟原虫等)
Coulter® LH750创新科技令操作更简便
Coulter® LH750创新科技令操作更简便
自动网织红细胞功能
方法:

漂清本底后,以VCS技术在增强型流式通道内对细胞进行 分析,即同时采用体积、传导性和光散射三维分析来确定 细胞并将其分类。

V:直流电测量的体积确定细胞的大小。网织红细胞的分 析高度依赖细胞的大小信息,根据定义,未成熟的红 细胞大于成熟的红细胞。数据图的y轴为体积 C:传导性或射频测量提供细胞的内部特性信息。数据 图的z轴为传导性,它只能在旋转的三维图中才可看到 S:细胞通过氦-氖激光束测得的光散射提供细胞表面特 性和细胞颗粒特性的信息。网织红细胞分析高度依赖 光散射信息因为含有残余RNA的红细胞的光散射强于 成熟红细胞的光散射。数据图的x轴为光散射
三维细胞定位
三维空间的多侧面表示-DF1
-体积(V),激光散射(S)
单核细胞
嗜酸细胞
中性粒细胞
淋巴细胞
DF2
-体积(V),传导性(C)
单核细胞
中性粒细胞
嗜酸细胞 嗜碱细胞
淋巴细胞
十余种异常细胞的报警提示
2 1
3 4
5 6
7 8 9 10
VCS三维分析的技术特点

接近原态的白细胞分析

一个分类试剂包
先进的标本预处理技术
专利的 AccuGate™ 定位技术
AccuGate™ 定位技术

真正的三维分析

全周边限定细胞亚群 每个细胞亚群都独立定义 超凡的怀疑性报警灵敏度和特异性

对细胞特征进行实时刻划பைடு நூலகம்


清晰的细胞亚群分界


标本具48小时的分类稳定性。
以崭新方式展示白细胞分类数据
从一个分类点图上了解更多信息
更好的体积测量方法
VCS - DC
V 是以库尔特原理检测
细胞的体积 获得的是完全的细胞体 积
更好的细胞内部结构测量方法
VCS - RF
C 运用高频探针检测
细胞的内部结构
获得细胞核复杂程度的 信息
区分分叶核和非分叶核 细胞
更好的细胞颗粒特性测量方法
VCS - Laser
S 是运用一个宽角度的
散射范围(10 -70) 来测量细胞的颗粒特性 更好地根据颗粒特性区 分淋巴细胞、中性粒细 胞和嗜酸细胞
单核
嗜酸
中性粒细胞
嗜碱
五分类VCS技术

运用V、C、S三种探针,在 流式通道的某一位点,对通 过的单列白细胞,进行逐 个的、同时的、三重的检 测,以及三维分析,以确定 其亚群性质。


V-低频波,分析细胞体积; C-高频波,分析细胞核型; S-激光,分析细胞的颗粒特 性。
接近原态的WBC分析

增强型流式通道,VCS直接、同时、三重检测

分析细胞的视角与手工相似
真正的三维检测 VCS,汇集最全面的物理检测工具

三维分析的高分辨率

(256 256 256)
白细胞五项分类 10多种异常细胞的检测
VCS三维分析的技术特点

流体动力聚焦 统计8000多个白细胞 分类结果与手工的相关性好 流式通道还可检测网织红细胞 被世界上最多实验室采用的五分类原理

以经典的超活染料新亚甲蓝(NMB)着色网织红细 胞内残存的RNA。 漂去除红细胞内血红蛋白(酸性试剂) 在流式通道,运用VCS三维技术,将网织红细胞与 成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区 分开来。
网织红细胞的VCS三维分析
运用VCS三维技术分析染色后的红细胞。

低频波检测细胞体积 高频波(阻光性)检测细胞的内部成分,可剔除非红细胞 颗粒 激光散射将网织红细胞与成熟红细胞区分开来(网织红 细胞胞浆含较 RNA 物质,散射较多的激光,在散点图 上分布于红细胞的右侧)。 网织红细胞成熟度越差,在散点图上分布越靠右
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