实验一 抗原抗体反应--凝集反应

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原理图
混 合 SPA IgG SPA- IgG
SPA- IgG待测抗原 凝集颗粒
待测抗原
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实验材料
1.待测血清样品 2.CRP乳胶试剂 3.反应玻片 4.50ul加样枪
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实验方法
1.反应玻片上滴加稀释血清样品50ul 2.滴加CRP乳胶试剂一滴，轻轻摇动5分 钟
•类型 类型
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协同凝集试验
• 原理 SPA能与血清中的 能与血清中的IgG类抗体的 段非特异 类抗体的Fc段非特异 能与血清中的 类抗体的 性结合，而两个Fab段暴露在葡萄球菌菌体表 性结合，而两个 段暴露在葡萄球菌菌体表 面，仍然保持正常的抗体活性，与特异性抗 仍然保持正常的抗体活性， 原相遇时，能出现特异的凝集现象。 原相遇时，能出现特异的凝集现象。
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抗体
抗体
一
混 有
、 抗 原 抗 体 结 合
二
分 离 剂
、 分 离 抗 体 抗体
抗体
可逆性示意图
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抗原抗体反应影响因素
1.抗原、抗体的自身因素的影响; 2.电解质、酸碱度、温度及时间等实验环境 因素的影响。
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第四节
抗原抗体类型
1.可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应 沉淀反应 2.颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应 凝集反应 3.抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应 细胞溶解反应 4.细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应 中和反应 5.免疫标记 免疫标记的抗原抗体反应。 免疫标记
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
可见反应
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抗原抗体反特点
特异性 比例性 可逆性 敏感性
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特异性示意图
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比例性示意图
抗体过量 比例合适 抗原过量
抗 体 沉 淀 的 量
抗原
量
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抗原抗体反应比例性的机制，可用网 格学说加以说明。因为天然抗原大多 是多价的，抗体至少为两价，当抗原 与抗体在等价带结合时，相互交叉连 接成具有立体结构的网格状复合体， 形成肉眼可见的沉淀物。当抗原或抗 体过剩时，由于过剩方的结合价得不 到饱和，只能形成小网格复合物。 但是，当抗原或抗体为单价，不管抗 原与抗体的量比关系是否合适，均不 能出现可见反应现象。
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凝集反应
类型： 类型： ★直接凝集反应 ★间接凝集反应 ★间接凝集抑制试验 ★协同凝集试验
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直接凝集试验： 直接凝集试验：颗粒性抗原在有电解 质的参与下， 质的参与下，直接与相应抗体结合出 现的凝集现象。 现的凝集现象。
1.凝集反应 凝集反应
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间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原 或 间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原(或 抗体）吸附或偶联于载体上， 抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏 载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用， 载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用， 在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。 在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。
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载体
可溶性抗原 致敏
致 敏 颗 粒
性抗 原致敏载体
抗体
NS
凝 集 颗 粒
抗体
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载体
已知抗体
致 致敏 敏 颗 粒
＋
用特异性抗 体致敏载体， 体致敏载体， 抗
凝 集 颗 粒
NS
抗
反向间接凝集试验 西南民族大学
抗 待测抗原 已知抗体 原
特异 结合
抗 体 复 合 物
NS 抗原 抗体 测 体 抗原 体
抗原抗体反应
免疫学
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抗原抗体反应
• 抗原与相应抗体的特异性结合反应称为 抗原抗体反应(antigen (antigen抗原抗体反应(antigen-antibody reaction)。 reaction)。
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抗原抗体反应原理
抗原抗体结合反应是抗原决定簇 抗体分子 抗原决定簇和抗体分子 抗原决定簇 超变区之间的相互作用，是一种分子表面的 超变区 特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能 在极短距离内才能发生效应。
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ห้องสมุดไป่ตู้
抗原抗体结合力
抗原和抗体的结合虽然是互补性，非共价 键，特异性结合，抗原与抗体这种弱的结 合力涉及下列几种分子间的作用力。
l. 静电引力 2.范德华引力 2.范德华引力 3.氢键结合力 3.氢键结合力 4.疏水作用力 4.疏水作用力
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亲水胶体转化为疏水胶体示意图
间接凝集抑制试验
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抗 待测抗原 已知抗体 原 抗 体 分 散
无结合
NS
间接凝集抑制试验
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抗球蛋白试验(Coombs试验) 抗球蛋白试验(Coombs试验) (Coombs试验
• 原理 机体受某些抗原刺激后产生“不完全抗体”， 机体受某些抗原刺激后产生“不完全抗体” 其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象， 其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象， 但能封闭抗原决定簇， 但能封闭抗原决定簇，使其不能再与完全抗体 结合。 结合。