乙肝病毒的检测课件
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实验3 ELISA法测定乙肝 ppt课件
实验3 ELISA法测定乙肝
（2）双抗体夹心法测定抗原
A.
将抗体吸附于固相表面;
B.
加抗原，形成抗原-抗体复合物;
C. 加酶标抗体;
D. 洗液洗去多余 未结合酶标抗体
E. 加底物显色。底物的降解量与抗原量有关。
实验3 ELISA法测定乙肝
（3）竞争法测定抗原 A. 将抗体吸附在固相载体表面; B.加入酶标抗原和待测抗原，竞争结合抗体； 对照只加入酶标 抗原； C. 加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知抗原量。
孔OD值。
实验3 ELISA法测定乙肝
结果判断：
样品OD值
阴性对照平均OD值
2.1
• 判断为阳性，否则为阴性。
• 阴性对照OD值低于0.05时作0.05计算， 高于0.05按实际OD值计算。
实验3 ELISA法测定乙肝
HBV抗原抗体检测结果的临床分析
＋
－－
－ － HBV感染或无症状携带
＋
＋－
－ － 急慢性乙肝或无症状携带
实验3 ELISA法测定乙肝
酶标记免疫技术
• 以酶作为标记物，通过显色反应指示抗原-抗体反 应的标记技术称为酶免疫技术。
• 可分为酶免疫组织化学技术和酶免疫测定技术两 大类。目前应用最广的为酶联免疫吸附试验 （enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,是 免疫测定技术的代表。
的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配
体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检
测方法中，这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银染色。
实验3 ELISA法测定乙肝
（2）双抗体夹心法测定抗原
A.
将抗体吸附于固相表面;
B.
加抗原，形成抗原-抗体复合物;
C. 加酶标抗体;
D. 洗液洗去多余 未结合酶标抗体
E. 加底物显色。底物的降解量与抗原量有关。
实验3 ELISA法测定乙肝
（3）竞争法测定抗原 A. 将抗体吸附在固相载体表面; B.加入酶标抗原和待测抗原，竞争结合抗体； 对照只加入酶标 抗原； C. 加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知抗原量。
孔OD值。
实验3 ELISA法测定乙肝
结果判断：
样品OD值
阴性对照平均OD值
2.1
• 判断为阳性，否则为阴性。
• 阴性对照OD值低于0.05时作0.05计算， 高于0.05按实际OD值计算。
实验3 ELISA法测定乙肝
HBV抗原抗体检测结果的临床分析
＋
－－
－ － HBV感染或无症状携带
＋
＋－
－ － 急慢性乙肝或无症状携带
实验3 ELISA法测定乙肝
酶标记免疫技术
• 以酶作为标记物，通过显色反应指示抗原-抗体反 应的标记技术称为酶免疫技术。
• 可分为酶免疫组织化学技术和酶免疫测定技术两 大类。目前应用最广的为酶联免疫吸附试验 （enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,是 免疫测定技术的代表。
的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配
体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检
测方法中，这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银染色。
实验3 ELISA法测定乙肝
乙肝检测PPT课件
了解肝脏损害程度 明确病因 判断病情发展
SEB-PM004/01-7/2010
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/20
SEB-PM004/01-7/2010
最常用的肝功能检测指标
丙氨酸氨基转移酶（ALT） 体现肝脏受损情况最灵敏的指 标。肝炎活动时，可见ALT显 著升高,患者升高的ALT水平通 常用高于健康人ALT正常范围 上限（ULN）的倍数来表示 天门冬氨酸氨基转移酶（AST） 反映肝脏损伤，只有当肝脏发生 严重坏死或损伤时，血中AST活性 才会增高
SEB-PM004/01-7/2010
慢性乙肝病毒感染分期
并非所有的慢性乙肝病毒感染者都需要治疗，治疗 也需把握适宜时机！
SEB-PM004/01-7/2010
慢性乙肝患者抗病毒治疗指征
（HBeAg阳性患者）
HBV DNA≥105 拷贝/毫升 ALT≥2倍正常值上限者或肝活检显示有较明显的炎 症坏死（Knodell HAI≥4或≥G2）
HBeAg阳性慢性乙肝患者如同时符合以上 两个条件时，应考虑抗病毒治疗
SEB-PM004/01-7/2010
慢性乙肝患者抗病毒治疗指征
（HBeAg阴性患者）
HBV DNA≥104 拷贝/毫升 ALT≥2倍正常值上限者或肝活检显示有较明显的 炎症坏死（Knodell HAI≥4或≥G2）
HBeAg阴性慢性乙肝患者如同时符合以上 两个条件时，应考虑抗病毒治疗
SEB-PM004/01-7/2010
确诊
“您的情况是慢性 乙型肝炎，即俗称 的
“大三阳”
SEB-PM004/01-7/2010
慢性乙肝的诊断标准
SEB-PM004/01-7/2010
乙肝五项解读ppt课件
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7
HBcAg与抗HBc
❖ 抗HBc IgM是HBV感染后较早出现的抗体， 在发病第一周即可出现，持续时间差异较大， 多数在6个月之内消失。高滴度的抗HBc IgM 对诊断急性乙肝或慢性乙肝急性发作有帮助。 抗HBc IgG表示过去感染，高滴度表示现症 感染，常与HBsAg并存；低滴度表示过去感 染，常与抗HBs并存。单一抗HBc阳性者可 以是过去感染，亦可以是低水平感染。
5、剖宫产分娩不能降低HBV的母婴传播率。
6、早产儿一般待体重≥2000g后行相关免疫接 种。
7、如果新生儿与HBsAg阳性成员密切接触， 就必须注射HBIG；不密切接触，不必注射。 （精液不能引起胎儿感染HBV）
8、HBsAg阳性孕妇的新生儿定期随访。
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26
乙型肝炎母婴阻断
❖ 单用乙型肝炎疫苗阻断母婴传播的阻断率为 87.8%(Ⅱ-3)。对HBsAg阳性母亲的新生儿， 应在出生后24 h内尽早（最好在出生后12 h） 注射乙型肝炎免疫球蛋白 (HBIG)，剂量应 ≥100 IU，同时在不同部位接种10 μg重组酵 母或20μg中国仓鼠卵母细胞 (CHO) 乙型肝炎 疫苗，在1个月和6个月时分别接种第2和第3 针乙型肝炎疫苗，可显著提高阻断母婴传播 的效果 (Ⅱ-3)。
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5
HBeAg与抗HBe
❖ 急性HBV感染时HBeAg的出现时间略晚于
HBsAg。HBeAg与HBV DNA有良好的相关性，
因此，HBeAg的存在表示病毒复制活跃且有较
强的传染性。HBeAg消失而抗HBe产生称为血
清转换。抗HBe阳转后，病毒复制多处于静止状
态，传染性降低。长期抗HBe阳性者并不代表病
乙肝标志物检测PPT课件
乙型肝炎病毒（电镜） DANE氏颗粒直径42NM 核心直径27NM
㈠乙肝六项检测
参考值：ELISA法为阴性 放射免疫分析（RIA）法为阴性
㈡HBV抗原抗体系统
HBsAg：表面抗原，是HBV的外壳，不含DNA, 其本身不具有传染性，但常与HBV同时存在，常被 作为传染性标志之一。是HBV感染的基本标志， 也是最早出现的血清学标志之一。
临床意义：YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需 的关键结构。
目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉米夫定等抗病毒 药物，作用靶位主要是HBV反转录酶，通过与底物 dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制。
当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸（I）或缬氨酸（V）， 就可能引起抗HBV类药物的药效丧失，从而产生耐药 性。
形态与基因结构
●小球形颗粒 空心包膜，不含核酸
●管形颗粒 两者均为过剩的病毒外壳，仅含HBsAg，无感染性
“空心汤团”
Dane颗粒（完整的病毒）形态
HBsAg
（外膜蛋白）
HBcAg
（核衣壳蛋白）
HBV DNA
DNAP HBeAg
HBV Viral Genome Organization
HBcAg HBeAg
约6个月，提示HBV 复制，是急性感染的重要指标， 也是慢性活动性肝炎的重要标志 抗-HBc IgG：在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴 随感染者终生存在，是既往感染过HBV的指标。
HBV抗原抗体系统
HBeAg阳性： 与HBsAg平行出现，较HBsAg消失早 意义：表示乙肝处于活动期，并有较强的传染性。 HBsAg持续阳性可转为慢性或肝硬化。孕妇阳 性可垂直传播。
YMDD测定结果为临床抗HBV类治疗用药提供了实验室 诊断依据。
乙肝实验室检查课件
7.乙肝病毒的基因组最引人注目的一个特征就是它非常小， 而且乙肝病毒DNA的两链长短不一，长链完整，长度恒定， 为负链，短链是正链，长度可变，大概是长链的50％～80%。 表面抗原和核心抗原都是由Dane颗粒的DNA编码而来。
病理：（1）HBV抗原和抗体系统
1.HBsAg和抗-HBs
PreS1 PreS2
4.慢性化：特别是幼儿期感染，多为慢性化过程，长期携带 HBV，体内呈“免疫耐受”状态，不能将病毒清除，这个过 程可长达10-30年或更久，是重要的传染源
5.致癌性：HBV是肝癌的重要病因，约80％-90％的肝癌有乙 肝背景。癌变的原因是HBV的基因整合到肝细胞基因上，发 生突变，导致肝癌。
6.HBV的基因变异性：HBV是极度易变异的病毒之一，它的四 个基因组（S、C、P、X）均可变异，变异是病毒的特性
（2）HBeAg 和抗-HBe
e抗原(HBeAg)： 是可溶性蛋白质 只存在于血液中 是病毒复制和传染性的标志 e抗体(抗-HBe)： 对HBV感染有一定的保护作用 其出现标志着病毒复制减少、 传染性降低
5
1,Hepatitis B（vi3ri）on(HDBaVne的par三tic种le)形态
3.生化指标：血清ALT（丙氨酸转氨酶）活力升高，有黄疸者 血 清胆红素升高。
4.病原学检查 甲型：抗HAV－IgM阳性，即可确诊。 乙型：HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗HBc－IgM阳性）或
HBVDNA阳性。 丙型：抗HCV-IgG、HCV-IgM阳性，HCV－RNA阳性。 丁型：抗HDV－IgM阳性或HDV－RNA阳性。 戊型：抗HEV－IgM阳性。 庚型：抗HGV－IgM阳性
2,secreted filament 3,secreted sphere
病理：（1）HBV抗原和抗体系统
1.HBsAg和抗-HBs
PreS1 PreS2
4.慢性化：特别是幼儿期感染，多为慢性化过程，长期携带 HBV，体内呈“免疫耐受”状态，不能将病毒清除，这个过 程可长达10-30年或更久，是重要的传染源
5.致癌性：HBV是肝癌的重要病因，约80％-90％的肝癌有乙 肝背景。癌变的原因是HBV的基因整合到肝细胞基因上，发 生突变，导致肝癌。
6.HBV的基因变异性：HBV是极度易变异的病毒之一，它的四 个基因组（S、C、P、X）均可变异，变异是病毒的特性
（2）HBeAg 和抗-HBe
e抗原(HBeAg)： 是可溶性蛋白质 只存在于血液中 是病毒复制和传染性的标志 e抗体(抗-HBe)： 对HBV感染有一定的保护作用 其出现标志着病毒复制减少、 传染性降低
5
1,Hepatitis B（vi3ri）on(HDBaVne的par三tic种le)形态
3.生化指标：血清ALT（丙氨酸转氨酶）活力升高，有黄疸者 血 清胆红素升高。
4.病原学检查 甲型：抗HAV－IgM阳性，即可确诊。 乙型：HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗HBc－IgM阳性）或
HBVDNA阳性。 丙型：抗HCV-IgG、HCV-IgM阳性，HCV－RNA阳性。 丁型：抗HDV－IgM阳性或HDV－RNA阳性。 戊型：抗HEV－IgM阳性。 庚型：抗HGV－IgM阳性
2,secreted filament 3,secreted sphere
乙肝丙肝实验室检测及临床意义PPT课件
丙型肝炎抗体测定（ Anti-HCV）
血浆/血清/全血 250403014 20元 酶免
每天上午10：00前样本当天可出报告，10:00后样本第二天下午 出报告
HBV 血清学检测
HBV DNA检测
HBeAg
HCV RNA检测
HBV DNA 分子检测 HBV DNA 定量检测
HBV 耐药突变株检测
③ PCR检测结果与其它检测 项目不同，一般量值变化 在一个数量级内均视为没 有变化
乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测意义
缩短“窗口期”，有利于感染的早期诊断
HBV感染后至血液中出现可检出的HBsAg或HBV特异抗体需要一定时间。
HBV DNA先于 HBsAg出现于外周
血循环中 实时荧光定量PCR检
HBeAg
HCV RNA检测
表面抗原 (HBsAg) e 抗原(HBeAg) 表面抗体(抗-HBs) e抗体(抗-HBe)
HBV血清学检测——乙肝两对半
+ 定性（qualitative） 判断阴阳性
+ 定量（quantitative） 单位：ng/ml、IU/ml、IU/L、PEIU/ml
定性-乙肝“两对半”
HBV DNA高精度检 全血、血清、血浆 促凝管 4℃ 测
每周一、周四10:30 前样本，15:00出报 告
每周四11:00前样本 ，当日16:30出报告
HCV RNA检测 全血、血清、血浆 促凝管 4h内送 每周三10:00前样本
至实验室
，15:00出报告
HBV耐药基因检测 全血、血清、血浆 促凝管 4℃
－
－
接种疫苗获得免疫力
相关检验项目详情
检验科（84005）
检测
乙肝ppt课件
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20
基层医务工作者 如何做？
完整版ppt课件
21
♥ 正确定位自己。 ♥ 做好教育宣传。 ♥ 正确指导患者，负责任地就医引导。 ♥ 在现有条件下适当治疗。 做好预防。
完整版ppt课件
22
如何预防？
完整版ppt课件
23
乙型肝炎的预防
疫苗预防 阻断母婴传播 避免医源性传播
完整版ppt课件
感染恢复期，有免疫力，无传染 性 ①窗口期，抗-HBs即将出现； ②HBV感染已过 ①注射疫苗后；②遥远的过去有 过HBV感染
4
乙肝的常规检查
病毒学检查
❖ 表面抗原(HBsAg )及抗体(抗-HBs) ❖ e抗原(HBeAg)及抗体(抗-HBe) ❖ 核心抗原(HBcAg)及抗体(抗-HBc) ❖ 乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA＜103copy/ml)
● 若乙肝表面抗体（HbsAb）（+）定量＜ 10 ∕iu ∕ml → 24 小时内接种免疫高价球蛋白200u
● 若乙肝表面抗体（完整H版bppst课A件b）（+）定量＞ 10 ∕iu ∕ml 或 28 HbsAg(+) →不需要特殊处理
职业暴漏的预防
• （1）在进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操 作时必须戴手套，操作完毕，脱去手套后立即洗手，必要 时进行手消毒。
完整版ppt课件
19
慢性乙型肝炎的管理指南
❖ 当应用口服抗病毒药物进行治疗时，HBeAg阳性患者出现HBeAg血清学 转换后，分别检测HBV DNA 2次均为阴性，每次至少间隔 6个月，则可 终止治疗。HBeAg阴性患者的疗程尚不明确，但如果检测3次且每次间 隔6个月，均提示HBV DNA阴性，则可以考虑不继续治疗。
乙肝的诊断ppt课件
26
乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）
乙肝病毒（HBV）的蛋白质分子包裹着病毒脱 氧核糖核酸（HBV-DNA）形成了球形的病毒 颗粒。位于病毒外层的，就是常说的乙肝表面 抗原，而病毒的遗传物质HBV-DNA则与核心 抗原相结合，位于病毒颗粒内部。
在临床上，有这种完整病毒结构的颗粒才具有 感染性和复制能力。我们通常所说的乙肝病毒 就是指这种颗粒。
16
乙肝表面抗原 （HBsAg ）续三
注意事项： HBsAg是乙肝早期诊断的指标，但不是
唯一指标，应该结合流行病学，临床表现和实 验室检查进行综合判断。
17
2、乙肝表面抗体（抗-HBs ）
抗-HBs是人体感染乙肝病毒后产生的最主要 的保护抗体，一般在发病较早期出现。
抗-HBs的出现，表示有乙肝病毒感染或接种 过乙肝疫苗。
22
乙肝e抗体（抗-HBe ）续
综上所述，乙肝e抗体阳性的乙肝病毒携带者 通过乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测，可以分 为两大类：一类是病毒低复制，传染性低；另 一类是病毒复制伴有活动性肝病，HBV-治疗。
23
5、乙肝核心抗体（抗-HBc ）
如果发病后6个月还不消失，一般认为容易演 变成乙肝病毒慢性携带者。
15
乙肝表面抗原 （HBsAg ）续二
有相当一部分人感染了乙肝病毒后不会发病， 医学上称无症状HBsAg携带者。
如果这类人再感染甲，丙，丁，戊，庚型肝炎 病毒时，单凭HBsAg阳性与否来诊断乙肝，就 有可能造成误诊。
另有5%-10%的人感染乙肝病毒以后，在发病 早期就能清除HBsAg,在这种病人血清中， HBsAg检测是阴性的，而抗-HBc-IgM阳性， 如果单凭HBsAg阳性与否作出乙肝的诊断，就 有可能漏诊。
乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）
乙肝病毒（HBV）的蛋白质分子包裹着病毒脱 氧核糖核酸（HBV-DNA）形成了球形的病毒 颗粒。位于病毒外层的，就是常说的乙肝表面 抗原，而病毒的遗传物质HBV-DNA则与核心 抗原相结合，位于病毒颗粒内部。
在临床上，有这种完整病毒结构的颗粒才具有 感染性和复制能力。我们通常所说的乙肝病毒 就是指这种颗粒。
16
乙肝表面抗原 （HBsAg ）续三
注意事项： HBsAg是乙肝早期诊断的指标，但不是
唯一指标，应该结合流行病学，临床表现和实 验室检查进行综合判断。
17
2、乙肝表面抗体（抗-HBs ）
抗-HBs是人体感染乙肝病毒后产生的最主要 的保护抗体，一般在发病较早期出现。
抗-HBs的出现，表示有乙肝病毒感染或接种 过乙肝疫苗。
22
乙肝e抗体（抗-HBe ）续
综上所述，乙肝e抗体阳性的乙肝病毒携带者 通过乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测，可以分 为两大类：一类是病毒低复制，传染性低；另 一类是病毒复制伴有活动性肝病，HBV-治疗。
23
5、乙肝核心抗体（抗-HBc ）
如果发病后6个月还不消失，一般认为容易演 变成乙肝病毒慢性携带者。
15
乙肝表面抗原 （HBsAg ）续二
有相当一部分人感染了乙肝病毒后不会发病， 医学上称无症状HBsAg携带者。
如果这类人再感染甲，丙，丁，戊，庚型肝炎 病毒时，单凭HBsAg阳性与否来诊断乙肝，就 有可能造成误诊。
另有5%-10%的人感染乙肝病毒以后，在发病 早期就能清除HBsAg,在这种病人血清中， HBsAg检测是阴性的，而抗-HBc-IgM阳性， 如果单凭HBsAg阳性与否作出乙肝的诊断，就 有可能漏诊。
临床检验乙肝课件ppt
控制脂肪摄入
避免高脂肪食物，如油炸食品、肥肉 等，以降低脂肪肝的风险。
多摄入新鲜蔬菜和水果
提供丰富的维生素和矿物质，有助于 改善免疫功能。
运动指导
适量运动
乙肝患者应进行适量运动，如散 步、慢跑、瑜伽等，以增强体质
和免疫力。
避免剧烈运动
避免过度劳累和剧烈运动，以免加 重肝脏负担。
定期复查
在运动过程中，乙肝患者应定期进 行肝功能等指标的复查，以确保身 体状况良好。
VS
详细描述
乙肝两对半检测包括乙肝病毒表面抗原（ HBsAg）、表面抗体（HBsAb）、e抗原 （HBeAg）、e抗体（HBeAb）和核心 抗体（HBcAb）的检测。HBsAg阳性表 示感染了乙肝病毒，HBsAb阳性表示体 内产生了保护性抗体。HBeAg阳性表示 病毒复制活跃，传染性强，HBeAb阳性 则表示病毒复制减弱，传染性降低。 HBcAb阳性表示感染过乙肝病毒。
免疫调节剂
通过调节机体免疫功能，增强机体对乙肝病毒的清除能力。
新型抗病毒组合疗法
将直接抗病毒药物与免疫调节剂联合使用，提高治疗效果。
乙肝疫苗研究
新型疫苗研发
01
针对不同基因型和亚型的乙肝病毒，研发更广泛覆盖的疫苗。
加强疫苗接种
02
针对已接种过疫苗的人群，研究加强接种方案，提高免疫效果
。
疫苗接种策略优化
性传播的预防
正确使用安全套，避免多个性 伴侣和无保护性行为。
加强个人卫生
注意个人卫生，勤洗手、勤洗 澡、勤换衣，保持生活环境清
洁卫生。
4
乙肝患者生活指导
饮食指导
饮食原则
乙肝患者应遵循高蛋白、低脂肪、高 维生素、易消化的原则，确保摄入足 够的营养素。
乙肝病毒五项检测 ppt课件
乙型肝炎病毒表面抗原
乙型肝炎病毒表面抗原
注意事项
本样品仅用于体外诊断，操作应按说明说严格进行。封板膜不能重复使用，不同 批号、酶标试剂和阴性对照不可混用，不能与其它厂家试剂混用。
避免在有挥发性物质及次氯酸类消毒液（如84消毒液）的环境下操作。 使用前请将试剂平稳至室温（平衡30分钟以上），实验前将试剂轻轻振荡混匀， 使用后立即回放2~8℃。未用完的微孔板条与干燥剂一起用自封袋密封2~8℃保存。 过期试剂请勿使用。 加液时必须用加样器，并经常校对加样器的准确性。加入不同样品或不同试剂组 份时，应更换加样器的吸头和加样槽，以防止出现交叉污染。 洗涤时各孔均匀需加满洗液，防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机应设定 30~60秒浸泡时间。在洗版结束后，必须立即进行下一步，不可使用酶标板干燥。 避免长时间的中断实验步骤，以确保每孔实验条件的均一。 结果判定必须以酶标仪读数为准。读取结果时，应擦干酶标板底部，且孔内不能 有气泡。不要触碰孔底部的外壁，指引或划痕可能影响板孔的读值。 所有样品、废液和废弃物都应按照传染物处理。终止液为硫酸，使用时必须注意
乙型肝炎病毒e抗体
检验方法：
配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。
编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性 对照2孔和空白对照1孔（用双波长检测，可不设空白对照孔）。
加样：分别在相应孔中加入待测样品及阴、阳性对照各50µl。
加酶：每孔加人酶标试剂50ul，空白孔除外，轻轻振荡混匀。 温育：用封板膜封板后置37℃温育30min。 洗涤：小心撕掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。 显色：每孔加人显色剂A、B液各50µl，轻轻振荡混匀，37℃避光 显色15min。 测定：每孔加终止液 50µl ，轻轻振荡混匀， 10min 内测定结果。
乙肝病毒的实验室检测(ppt)
Q 3’ 5’
Taq
3’ 5’
Taq
3’ 5’
R 5’
R
Taq
R
Taq
R
l
R
3’
退火
1. 链取代
3’
5’
2. 水 解
3’
5’
3. 聚 合
3’
5’
4. 检测荧光
3’
乙肝病毒的感染
乙肝病毒的感染
（一） 乙型肝炎病毒结构及特点
HBsAg：是HBV感染的主要标志 HBsAb：保护性抗体
HBcAg：仅存于感染的肝细胞核内，
HBV DNA检测的临床意义
HBV DNA是HBV存在最直接的依据 HBV DNA是HBV复制的标志 HBV DNA是患者具有传染性的标志 HBV DNA对乙肝两对半起补充作用 HBV DNA是目前判断乙肝抗病毒药物疗效最敏感的指标 HBV DNA可检测出隐匿性慢性乙型肝炎
PCR检测 HBV HCV HIV
• 每个PCR体系含4种主要成分：含有待扩增序列的DNA模板 、引物、TaqDNA聚合酶、脱氧核糖核酸三磷酸（dNTP）
荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术，是指在反应体系中加入荧光 标记，利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程，通过 标准曲线对PCR终产物的分析，最终实现对未知的起始 模版进行定量分析的一种技术，是迄今对已知基因序列的 核酸测定中最灵敏的方法。
HBV DNA检测的临床意义
提供直接证据缩短“窗口期”
“窗口期” 56 70 22
核酸检测缩短的“窗口期”的天数 6-15 41-60 10-15
有利于献血员窗口期病毒核酸的筛查和早期诊断
HBV DNA检测的临床意义
调查表明并不是所有“大三阳”的病人都处于 HBV复制期，具有传染性；也不是所有“小三阳” 的病人HBV都无复制。因此，要准确知道HBV是否 处于复制状态，最准确的方法还是通过检测HBV DNA来决定。
Taq
3’ 5’
Taq
3’ 5’
R 5’
R
Taq
R
Taq
R
l
R
3’
退火
1. 链取代
3’
5’
2. 水 解
3’
5’
3. 聚 合
3’
5’
4. 检测荧光
3’
乙肝病毒的感染
乙肝病毒的感染
（一） 乙型肝炎病毒结构及特点
HBsAg：是HBV感染的主要标志 HBsAb：保护性抗体
HBcAg：仅存于感染的肝细胞核内，
HBV DNA检测的临床意义
HBV DNA是HBV存在最直接的依据 HBV DNA是HBV复制的标志 HBV DNA是患者具有传染性的标志 HBV DNA对乙肝两对半起补充作用 HBV DNA是目前判断乙肝抗病毒药物疗效最敏感的指标 HBV DNA可检测出隐匿性慢性乙型肝炎
PCR检测 HBV HCV HIV
• 每个PCR体系含4种主要成分：含有待扩增序列的DNA模板 、引物、TaqDNA聚合酶、脱氧核糖核酸三磷酸（dNTP）
荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术，是指在反应体系中加入荧光 标记，利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程，通过 标准曲线对PCR终产物的分析，最终实现对未知的起始 模版进行定量分析的一种技术，是迄今对已知基因序列的 核酸测定中最灵敏的方法。
HBV DNA检测的临床意义
提供直接证据缩短“窗口期”
“窗口期” 56 70 22
核酸检测缩短的“窗口期”的天数 6-15 41-60 10-15
有利于献血员窗口期病毒核酸的筛查和早期诊断
HBV DNA检测的临床意义
调查表明并不是所有“大三阳”的病人都处于 HBV复制期，具有传染性；也不是所有“小三阳” 的病人HBV都无复制。因此，要准确知道HBV是否 处于复制状态，最准确的方法还是通过检测HBV DNA来决定。
乙肝五项 ppt课件
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7种罕见模式
1 + + + + + ①一种亚型的HBsAg及异型的抗 HBs（常见）； ②血清从HBsAg转化为抗HBs的过 程（少见）。
2-+++-
3-++++
4--++-
5+-++-
6+++--
7++++-
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乙肝检查再添新指标
以前是“两对半”，后来增加了一个HBcAb-Igm(核 心抗体Igm)，成了三对，现在又出现了一个PreS1(乙型肝炎病毒前S1抗原，简称S1抗原)，“两对 半”变成了“三对半”。
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2
乙肝两对半中
1（HBsAg-乙肝病毒表面抗原）为已经感染 病毒的标志， 并不反映病毒有无复制、复制 程度、传染性强弱；
2（HBsAb-乙肝病毒表面抗体）为中和性抗 体标志，是否康复或是否有抵抗力的主要标 志。乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性，应视 14121111后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的 人体内也会产生乙肝表面抗体，这是一种好 现象；
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：(1)可作为急性乙肝辅助诊断和预后指标，急性乙肝进入恢 复期常随
HBsAg的消失而消失，如果 急性乙肝发病后3-4个月 ， HBeAg由阳转阴，抗-HBe 出现，表示预后良好.起病 3-6个月，仍HBeAg(+)，可能是 急性肝炎转为慢性的最早证据。
乙肝病毒DNA复制过程
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3（HBeAg-乙肝病毒e抗原）为病毒复制标志。持 续阳性3个月以上则有慢性化倾向；
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