微生物检验学 肠球菌属
食品中肠球菌检验标准
食品中肠球菌检验标准本标准规定了食品中肠球菌的检验方法及判定，适用于食品中肠球菌的检测。
1.规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
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GB 4789.15 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验1.术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
肠球菌 enterococcus一组兼性厌氧的革兰氏阳性球菌，过氧化氢酶阴性，在含高浓度葡萄糖的肠道病原体选择性培养基上生长，在血琼脂平板上形成α溶血或β溶血的菌落。
1.肠球菌检验方法及判定4.1 样品处理将样品按照每份50g（或ml）进行无菌采样，放入含有适量无菌生理盐水的均质袋中，用拍击式均质器拍打2min~3min，制成1:10的样品匀液。
4.2 增菌培养将样品匀液按照1:10的比例接种到胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）培养基中，于37℃培养18h~24h。
4.3 分离培养将增菌后的培养物转种到绵羊血平板上，于37℃培养24h。
在血平板上长出的可疑菌落进行革兰氏染色、触酶试验和过氧化氢酶试验。
4.4 肠球菌鉴定及药敏试验对革兰氏阳性、触酶试验阴性、过氧化氢酶试验阴性的球菌进行生化试验和药敏试验，以确定是否为肠球菌属。
药敏试验参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）标准进行。
1.采样方案5.1 采样数量按照食品的类型、品种和生产日期等进行采样，每个样品采集数量不得少于5个。
5.2 采样方法采样时需遵循无菌操作原则，使用经过灭菌的采样工具和容器进行采样。
样品采集后应立即送往实验室进行检测。
1.检验程序6.1 检验前准备在进行肠球菌检验前，应做好实验室的清洁和消毒工作，确保实验室无菌环境符合要求。
同时准备好所需的仪器设备、培养基、试剂等材料。
主管检验技师考试临床医学检验微生物检验讲义第13章病原性球菌及检验
病原性球菌及检验● 考点葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属生物学性状微生物学检查法临床意义（致病性、所致疾病）【内容讲解】普及共性，单记个性生物学性状形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。
培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。
生化反应：特殊生化。
抗原：分类：致病性致病物质所致疾病微生物学检查：针对生物学性状和致病性。
一、葡萄球菌属一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。
（一）生物学特性1.形态与结构G+，球形，0.5～1.5μm，呈葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列），无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。
2.培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求不高，最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。
普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。
可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。
血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。
液体培养基：生长迅速呈均匀混浊状。
3.生化反应触酶试验（+）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶（多数致病性葡萄球菌）。
4.抗原（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。
存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。
（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。
5.分类（1）《伯杰系统细菌学手册》（2）古典分类法6.抵抗力对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐。
是抵抗力最强的无芽胞细菌。
（二）临床意义葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。
（1）金黄色葡萄球菌致病物质：血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。
肠球菌属标准操作规程
肠球菌属标准操作规程1.概述肠球菌属于1984年从链球菌属划出，单独成为一个菌属，包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、坚韧肠球菌、铅黄肠球菌、蒙氏肠球菌、海氏肠球菌、鹑鸡肠球菌和病臭肠球菌等18个种和1个变异株。
临床上常见的菌株为粪肠球菌。
2.标本类型血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。
3.鉴定3.1 形态与染色革兰阳性球菌，单个、成双或短链状排列。
3.2 培养特性在血琼脂平板上形成较小、灰白色，有a 溶血或β溶血环的菌落。
在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。
3.3 生化反应触酶试验阴性，分解甘露醇、山梨醇、胆汁七叶苷试验阳性、在含6.5%氯化钠的肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征革兰阳性球菌，触酶试验阴性，在65g/L 氯化钠中生长，胆汁、七叶苷试验阳性，45℃中生长。
3.4.2与屎肠球菌的鉴别：粪肠球菌不分解阿拉伯糖，而屎肠球菌能分解阿拉伯糖3.4.3 与链球菌属和乳球菌属的鉴别：见表5-353.4.4 粪肠球菌与其他各主要菌种间的鉴别：见表5-36操作步骤3.5.1 触酶试验阳性参见触酶试验标准操作规程3.5.2 鉴定从血平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件.5.质量控制参见《质量控制程序》6.检验结果解释与分析在β-内酰胺酶阴性球菌肠球菌中，氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。
青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。
粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。
对于血培养和脑脊液中分离到的肠球菌，需做β-内酰胺酶检测，β-内酰胺酶阳性，则对青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。
肠球菌 奈瑟菌 卡他莫拉菌
致病性
人类是淋病奈瑟菌的唯一天然宿主 传播方式： 成人---性接触 初生婴儿---患病母亲产道感染 致病物质： 菌毛、外膜蛋白、脂多糖、IgA 蛋白酶
发病机理
淋球菌 ———— 柱状上皮细胞表面 ———
逸至 借菌毛粘附 吞饮入胞
大量繁殖 —— 细胞裂解 ——— 粘膜下层—
中性粒细胞聚集吞噬 —— 急性炎症反应
初步诊断？
微生物学检查
CS涂片可在中性粒细胞内找到革兰 阴性双球菌。 从病人CS或急性期血液分离到脑膜 炎奈瑟菌。 从病人急性期血清或尿或CS中检测 到脑膜炎奈瑟菌群特异性多糖抗原。 以PCR检测到病人急性期血清或CS中 脑膜炎奈瑟菌的DNA特异片段。
肠球菌属
【掌握】 1. 微生物特性：形态染色、培养特点、 生化反应 2. 微生物检验：检验程序、标本直接检查、 分离培养与鉴定 【熟悉】肠球菌属的分类、临床意义、标本采集
肠球菌的抗生素敏感试验
抗生素的选择： A组：青霉素或氨苄青霉素 B组：万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普丁 C组：庆大霉素、链霉素 U组：环丙沙星、诺氟沙星、四环素 肠球菌天然耐药的抗生素： 复方磺胺增效剂（SMZ-TMP）、头孢菌素类、 氨基糖苷类（常规剂量）、头霉素类、氯洁霉素、 苯唑西林、林可霉素等。
卡他莫拉菌生化特征
触酶、氧化酶和 DNA酶均为 阳性。 硝酸盐还原试验阳性。 水解三丁酸甘油酯。 不分解任何糖类。
相关种属间的区别
奈瑟菌属和卡他莫拉菌及相关菌属的鉴别
细菌 奈瑟菌属 卡他莫拉菌 金氏菌属 细菌形态 双球菌/球杆菌 双球菌 球杆菌 氧化酶 + + + 触酶 +* + 葡萄糖 V +
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌是一类常见的细菌，它们存在于人体的消化系统中，尤其在肠道中大量繁殖。
虽然肠球菌在人类消化系统中扮演着非常重要的角色，但它们在临床检验中却并不被人们广泛地了解。
本文将详细介绍关于肠球菌的一些基本知识，以及它们在临床检验中的重要作用。
肠球菌简介肠球菌是一类革兰氏阳性菌，主要属于屎肠球菌属，包括了屎肠球菌科的细菌。
这些细菌除了存在于人类的肠道中之外，在土壤、水体、动物等环境中也有一定分布。
在人体内，肠球菌主要存在于大肠中，它们在人类的健康保持和免疫系统中发挥着非常重要的作用。
肠球菌的作用在人体的消化系统中，肠球菌在多个方面发挥着重要的作用。
肠球菌能够帮助人体消化食物并吸收营养物质，它们分解食物中的一些难以消化的物质，使得人体能够更好地吸收其中的养分。
肠球菌还能够抑制一些有害菌的繁殖，保持肠道内微生物群落的平衡。
肠球菌还能够促进免疫系统的发育，对抗外部病原微生物的侵袭。
肠球菌在临床检验中的意义肠球菌在临床检验中扮演着重要的角色，特别是在一些消化系统疾病的诊断和治疗中。
通过检测肠球菌的种类和数量，可以帮助医生了解患者消化系统内微生物群落的状态。
这对于一些慢性胃肠道疾病的鉴别诊断和治疗方案的选择非常重要。
肠球菌在一些感染性疾病中也有重要作用，比如肠球菌感染可以导致腹泻、腹痛等症状，通过检测肠球菌的情况可以帮助医生进行感染性疾病的诊断。
肠球菌的临床检验方法目前，常用于检测肠球菌的方法包括培养法、PCR法、生化鉴定法等。
培养法是最为传统的肠球菌检测方法，通过将患者的粪便标本等放入适当的培养基中，利用肠球菌的生长特性进行培养和鉴定。
PCR法是一种分子生物学技术，可以通过扩增和检测肠球菌的特定基因序列，快速准确地进行肠球菌的检测。
生化鉴定法则是通过检测肠球菌在代谢过程中产生的一些特定代谢产物来对其进行鉴定。
这些方法各有优劣，医生会根据具体情况选择适合的检测方法。
肠球菌的临床意义在临床检验中，肠球菌的检测不仅仅局限于对其数量和种类的了解，更重要的是分析其与宿主健康状况之间的关系。
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌一提起肠球菌，很多人都是谈之色变，特别是那些曾经经历过肠球菌皮肤软组织感染、脑颅感染，甚至由于肠球菌感染导致脑膜炎、腹腔感染、心骨膜炎或败血症的患者，对于肠球菌有着很深的恐惧感，并且由于肠球菌有着较强的耐药性，因此治疗起来也比较困难，这部分患者对于肠球菌可以说是唯恐避之不及。
而大家不太清楚的是，肠球菌作为肠球菌属的一份子，属于我们人类和动物体内肠道的正常菌落，甚至当出现腹泻症状时，屎肠球菌可以通过活菌形式参与到腹泻的治疗过程中，通常会和谷草杆菌一起对肠道菌群的环境起到一定的调节作用，从而促进肠道功能的尽快恢复，起到止泻的作用。
同时在动物养殖过程中，粪肠球菌也在其中发挥着一定的作用。
因此，小编将临床检验当中所有的肠球菌进行详细阐述，让大家能够对肠球菌有更加全面的正确认知。
1.什么是肠球菌？肠球菌属于革兰阳性球菌，在自然环境和人类、动物的消化系统中广泛存在着，肠球菌的外形为圆形或椭圆形，大多数都以单体、成对或者是短链排列的方式存在着，没有芽孢，也没有鞭毛。
肠球菌的生存能力很强，不管是在有氧环境下，还是在无氧环境下都可以生存；但是肠球菌在营养方面有着较为苛刻的需求，需要在高碱、高盐的10~45℃环境下生长，菌株在60℃高温下仍可部分存活。
在高盐、高碱、高酸等环境下，绝大多数微生物都无法生存，但这些因素对于肠球菌可以说是没有任何影响。
根据糖类特征将肠球菌可以分为以下三大类，一类主要是鸟肠球菌，另一类主要以粪肠球菌为代表，第三类中，坚韧肠球菌是其中的代表类型。
临床检验过程中将肠球菌进行分离处理后，粪肠球菌的占比高达90%以上，屎肠球菌的占比约在5%~10%之间，坚韧肠球菌和其他肠球菌只占极少的一部分。
一般情况下并不会造成感染，但是当身体的营养摄入严重不足，机体免疫力下降时，肠球菌会对正常的组织结构形成侵袭，从而引发感染。
1.肠球菌感染后会产生哪些危害？上面我们已经讲到，肠球菌属于人类和动物肠道当中的正常菌落之一，极少会诱发感染性疾病的发生，但是当身体由于严重缺乏营养，身体素质下降或者是受到其他刺激时，肠球菌就会发生位移，进入到其他黏膜组织中，从而引发感染。
微生物检验学 实验七 病原性球菌的检验
A群溶血性链球菌 S
-
无乳链球菌
R
+
肺炎链球菌和草绿色链球菌的鉴别
菌种
镜下形态
菌落形态
Optochin
肺炎链球菌
矛头状、成对、有荚膜
稍大、扁平、湿润、脐 状
S
草绿色链球菌
圆形、成链、无荚膜
较小、凸起、稍干、圆 形
R
【注意事项】
触酶试验中3％H2O2溶液要新鲜配制，并且不宜用 血琼脂平板上生长的菌落。 凝固酶试验通常用玻片法为筛选试验、如遇凝固酶 试验结果不典型可以用试管法鉴定。 观察胆汁-七叶苷试验结果时，要求至少1/2斜面变 黑才能判断为阳性。
【实验方法】 1、染色镜检 2、分离培养 3、生化反应 葡萄球菌属
触酶试验 凝固酶试验 新生霉素敏感试验
4
链球菌属和肠球菌属
触酶试验 链球菌属
杆菌肽敏感试验 CAMP试验 Optochin敏感试验 肠球菌属 胆汁-七叶苷试验 65g/L NaCl耐受生长试验
胆汁七 生化反应
CAMP试验
主要性状
菌落色素 溶血 血浆凝固酶 触酶 甘露醇发酵 新生霉素
3种葡萄球菌的生化反应结果
金黄色葡萄球菌
金黄色 ＋（β溶血）
＋ ＋ ＋ S
表皮葡萄球菌
白色 － － ＋ － S
腐生葡萄球菌
白色或柠檬色 － － ＋ － R
链球菌属和肠球菌属
A群溶血性链球菌和无乳链球菌的鉴别
菌种
杆菌肽
CAMP
10
实验7 病原性球菌的检验
临床微生物学及检验
医学检验学院 病原生物学教研室
【实验目的】
1.掌握葡萄球菌属、链球菌属和肠球菌属的 菌落形态、染色特点和基本生化反应。
肠球菌属的检验实训报告
一、实训目的1. 熟悉肠球菌属的生物学特性。
2. 掌握肠球菌属的分离、鉴定和药敏试验方法。
3. 培养微生物检验的基本技能和实验操作规范。
二、实训时间2023年4月15日三、实训地点微生物实验室四、实训材料1. 标本：尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等。
2. 培养基：营养肉汤、血琼脂平板、叠氮胆汁七叶苷琼脂、麦康凯琼脂等。
3. 鉴定试剂：革兰染色液、触酶试剂、胆汁七叶苷试剂、6.5%NaCl耐受试验试剂等。
4. 药敏纸片：青霉素、氨苄西林、万古霉素、庆大霉素等。
5. 仪器设备：显微镜、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器等。
五、实训方法1. 标本采集与处理采集尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等标本，按照无菌操作原则进行采集。
将标本接种于营养肉汤中，37℃恒温培养24小时。
2. 初步分离取培养后的肉汤，采用涂片、染色、镜检等方法进行初步分离。
观察菌落形态，选择可疑菌落进行进一步鉴定。
3. 鉴定（1）挑取可疑菌落，进行革兰染色、镜检，观察菌落形态。
肠球菌属为革兰阳性球菌，呈短链排列，卵圆形。
（2）进行触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5%NaCl耐受试验。
肠球菌属对触酶、胆汁七叶苷和6.5%NaCl具有耐受性。
（3）将可疑菌落接种于血琼脂平板，37℃恒温培养24小时。
观察菌落形态，判断溶血情况。
肠球菌属在血平板上为溶血或不溶血。
（4）对具有临床意义的肠球菌进行生化试验，如糖发酵试验、吲哚试验等，以鉴定到种。
4. 药敏试验将鉴定后的肠球菌接种于麦康凯琼脂平板，贴上青霉素、氨苄西林、万古霉素、庆大霉素等药敏纸片，37℃恒温培养24小时。
观察抑菌圈大小，判断菌种对药物的敏感性。
六、实训结果1. 标本采集与处理：成功采集到尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等标本，并进行了接种培养。
2. 初步分离：从培养后的肉汤中分离出可疑菌落，进行革兰染色、镜检，形态符合肠球菌属。
3. 鉴定：经触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5%NaCl耐受试验，确定为肠球菌属。
肠球菌 奈瑟菌 卡他莫拉菌参考
从男性病人尿道取材作培养时，应用拭 子深入尿道2cm-4cm，旋转取出分泌物。 从女性病人的宫颈取材时，应将棉拭插 入宫颈口1.5cm，稍转动并停留10s-15s。
淋球菌抵抗力很弱，最好床边接种，尽 快送检。
27
治疗
▪ 头孢三嗪（ceftriaxon，菌必治）250mg一次肌注， 有合并症者连用10天。
▪ 壮观霉素（spectinomycin，淋必治）2g，一次肌 注，有合并症者连用10天。
▪ 氟哌酸200mg口服，一日3次共7日；氟嗪酸200mg每 日2次口服共7日。
29
脑膜炎奈瑟菌
肠球菌属、奈瑟菌属、 卡他莫拉菌
1
肠球菌属
（Enterococcus）
2
肠球菌属分类
肠球菌原归于链球菌属，与 D 群链球 菌血清型相同 。
1984年 Schleifer 和 Kipper-Bale 将 其单独成立为肠球菌属 。
分子方法证实迄今有近20种肠球菌 。
3
临床意义
是人和动物肠道正常菌群之一 。 严重基础疾病的老年人和免疫力低下的患
6.5%NaCl生长
7
肠球菌属的细菌分组
试验 甘露醇 山梨糖 精氨酸
群Ⅰ + + -
群Ⅱ + +
群Ⅲ +
群Ⅳ -
群Ⅴ + -
8
各组所含肠球菌
群Ⅰ：鸟肠球菌、恶臭肠球菌、假鸟肠球菌、棉子糖
肠球菌、解糖肠球菌、E.gilvus、E.pallens
群Ⅱ：粪肠球菌、屎肠球菌、铅黄肠球菌、鸡肠
肠球菌、孟氏肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌（Enterococcus）是一类普遍存在于人体肠道等环境中的细菌，属于革兰氏阳性菌，可呈链状或双球状排列。
肠球菌具有一定的耐受力，在酸碱度变化、高浓度的胆汁等恶劣条件下仍能存活和繁殖。
常见的肠球菌有肠球菌属（Enterococcus）、肠致病性链球菌（Enterococcus faecalis）、牛肠球菌（Enterococcus faecium）等。
肠球菌作为常驻性微生物，对人体有着重要的生理功能。
肠球菌可以抑制肠道中的有害细菌的生长，维持肠道的微生物平衡。
肠球菌可以产生多种酶类和保护性抗菌物质，具有一定的抗菌作用。
肠球菌还能够产生某些维生素，如维生素K，维生素B12等，维持人体的正常代谢功能。
有时候肠球菌也会引起不同程度的感染。
肠球菌感染通常与人体免疫力降低、器官脏器的创伤、长期使用抗生素等因素有关。
肠球菌感染可以侵犯多个器官系统，如泌尿系统、呼吸系统、血液系统等，导致尿路感染、呼吸道感染、败血症等疾病。
临床上，常见的肠球菌感染包括尿路感染、消化道感染、中耳炎等。
肠球菌感染的临床症状多样化，常见的症状包括发热、腹痛、尿频、尿急、尿痛、腹泻等。
在尿路感染方面，肠球菌感染常常导致尿路感染，病情严重者还会引起肾盂肾炎、肾脓肿等并发症。
在肠球菌引起的泌尿道感染中，肠致病性链球菌是主要致病菌，其感染可经尿液培养等检查进行诊断。
治疗肠球菌感染的药物以青霉素类药物和糖肽类药物为主，如阿莫西林、万古霉素等。
对于肠球菌感染的患者，早期的诊断和治疗至关重要，以避免病情进一步恶化。
肠球菌是人体内常见的细菌，对维护人体的生理平衡起着重要的作用。
肠球菌也可引起感染，导致尿路感染、泌尿道感染、呼吸道感染等疾病。
及时诊断和治疗肠球菌感染是必要的。
对于预防肠球菌感染，我们需要加强个人卫生，提高免疫力，避免滥用抗生素等因素。
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌，又称为乳球菌或大肠球菌，是人体肠道中重要的一类细菌，直径约0.5-1.0微米，分为革兰氏阳性菌。
肠球菌种类繁多，其中具有致病性的肠球菌主要有大肠埃希菌、变形杆菌和志贺氏菌等。
肠球菌在人体中的数量非常庞大，占据着人体内肠道微生物的主导地位，对维持肠道微生态平衡和人体健康起着至关重要的作用。
肠球菌在肠道中的作用肠球菌在人体肠道中的数量大约为10^12 - 10^14个，是一种重要的有益菌，它们对人体肠道具有多种益处。
肠球菌可以占据肠道的生态位，对抑制有害菌的生长起到了重要的作用；肠球菌可以保护肠道黏膜，增强肠道黏膜的屏障功能，阻止有害物质通过肠道黏膜进入血液，保护肠道免受细菌和毒素侵害；肠球菌还可以合成和分解一系列对人体有益的物质，如维生素、氨基酸、抗生素等，对促进食物消化和吸收起到了重要作用。
肠球菌还与人体健康状况密切相关。
研究发现，肠球菌的失衡和失调与一些肠道疾病（如肠胃炎、肠炎、肠道感染等）、免疫系统疾病（如类风湿关节炎、自身免疫性疾病等）和新陈代谢性疾病（如肥胖症、糖尿病等）有关。
保持肠道内肠球菌的平衡，是维护人体健康的关键。
肠球菌在临床检验中的意义肠球菌在临床检验中有着重要的意义。
一方面，肠球菌数量和种类的检测能够为临床医生提供关于肠道微生物群的信息，以辅助诊断和治疗相关疾病。
在肠道感染病例中，通过检测肠球菌种类和数量的变化，可以帮助医生判断感染病原菌的类型和数量，从而指导临床治疗；在肠道疾病（如肠胃炎、炎症性肠病等）的诊断和治疗过程中，肠球菌检测也具有一定的指导意义。
肠球菌的相关指标也可以作为评估和监测肠道微生物群状况的指标，用于评价人体健康状况和疾病风险的变化，为临床诊断和干预提供参考。
肠球菌检测的方法主要有两种：一种是通过分离培养法检测肠球菌数量和种类；另一种是通过分子生物学方法检测肠球菌的核酸序列。
后者具有更高的敏感性和特异性，可用于检测肠球菌种类和数量的变化，也可以用于检测肠球菌在肠道疾病和免疫系统疾病中的变化。
【临床微生物实验】_肠球菌奈瑟菌和卡他莫拉菌
生物学特性和实验室检查
淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae)形态特征
• 形态：肾形或咖啡豆状。 • 排列：凹面相对、成双
排列。 • 特殊结构：幼龄菌可有荚膜及菌
毛。 • 染色：革兰阴性。 • 脓液中位于中性粒细胞内。 • 慢性淋病常位于细胞外。
淋病奈瑟菌
淋病奈瑟菌培养特征
• 最适 pH 7.4-7.6 。 • 最适温度 35-37℃。
肠球菌天然耐药的抗菌药物：
• 氨基糖苷类（一般剂量或中剂量） • 有些菌种（如鸡肠球菌、铅黄肠球菌）对万古霉
素低度耐药（药敏结果为中介水平）
不应报告的抗菌药物：
• 一般或中等剂量的氨基糖苷类 • 头孢菌素类 • 克林霉素类 •复方磺胺甲恶唑（SMZ-TMP)
高水平氨基糖苷类抗生素耐药肠球菌的检测：
皮肤黏膜瘀点，瘀斑等 –脑膜炎期：剧烈头痛、频繁呕吐、烦躁不安，以及颈
项强直等脑膜刺激征等 –恢复期：症状缓解 –暴发型：起病急骤，病情凶险。如不及时抢救，常在
24小时内危及生命 3. C群流脑具有易传播、隐性感染比例高等特点，临床上
常表现为暴发型。
流脑的颈项强直 流脑的淤点、淤斑
流脑的大面积出血性紫癜
• 致病物质：荚膜、菌毛、脂多糖,脂多糖 是其主要致病因素
• 分类：按其荚膜多糖抗原分13个血清群, 其中我国该菌感染A群占95%
脑膜炎奈瑟菌临床表现
1. 潜伏期1-10天，短者仅为数小时，多为2-3天。 2. 病程
–前驱期：鼻咽部充血和分泌物增多，咽痛，低热 –败血症期：突发寒战、高热。伴恶心呕吐、全身不适。
肠球菌属
（Enterococcus）
广州医科大学临床微生物检验室学习
பைடு நூலகம்球菌属分类
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌发布时间：2022-06-16T03:08:10.903Z 来源：《中国医学人文》2021年34期作者：郭旭[导读] 肠球菌是什么，你知道吗郭旭德阳市第二人民医院检验科四川德阳618000 肠球菌是什么，你知道吗？一般来说，肠球菌泛指的是肠球菌属（Enterococcus Thiercelin and Jouhaud)，因为其细胞呈现球形或卵圆形，且多出现在脊椎动物的粪便中，因此得名肠球菌。
在当前临床诸多研究中发现肠球菌这种致病菌会引发尿路感染和皮肤软组织感染，甚至会导致生命危险，引起腹腔感染和败血症等情况。
不仅如此，肠球菌还有着独特的耐药性，治疗难度非常大。
但是肠球菌并非是单纯的对人体有害的细菌，它其实是人体肠道菌群的一部分。
人们出现腹泻情况时，屎肠球菌会以活菌的形式参与到腹泻治疗中，和枯草杆菌对肠道内的环境进行调节，最终帮助肠道恢复正常功能，达到止泻效果，除此之外，肠球菌在动物养殖中也有突出的作用，本文章围绕着你不知道的肠球菌这些事展开说明，让大家更了解肠球菌。
什么是肠球菌？肠球菌是一种广泛分布于自然环境中、人类、动物消化道中的格兰阳性球菌，外表一般为球形或卵圆形。
肠球菌可以分为以下类别：粪肠球菌（E.faecalis）屎肠球菌（E.faecium) 鸟肠球菌(E.avium) 酪黄肠球菌(E.casseliflavus) 坚忍肠球菌(E.durans) 鸡肠球菌E.galinarum) 芒地肠球菌(E.mundii) 恶臭肠球菌(E.maladoratum) 希拉肠球菌(E.hirae) 孤立肠球菌（E.solitarius）棉子糖肠球菌(E.raffinosus) 假鸟肠球菌(E.pseudoavium) 以及粪肠球变异株(E.faecalis var)。
液体培养基中长球菌的出现，大多视野单个、成对和成短链的形式存在的。
它们之间没有明显的荚膜，在有氧或无氧的条件下均能生存，但是对于营养环境要求非常严格，需要在高碱和高盐环境下才能生长，否则就无法生长，但是肠球菌的环境耐受力极为强大，在10℃~45℃的环境下均可以生存，甚至在60℃的环境下也有一部分菌株能够存活。
微生物学检验(第3版)2012肠球菌与血液标本
具体实验操作
第一天的主要操作：
1.取标本分区画线接种到血平板、SS平板上
假设各位同学的平板经过培养24小时
2.取提供的平板菌落进行G染色观察细菌形态
3.取平板菌落进行触酶试验
4.取平板菌落接种于胆汁七叶苷培养基、6.5% NaCl肉汤培养基
5. 各人放入指定托盘后，由值日生放入35℃培养 24小时。
2、65g/L NaCl生长试验： 原理：肠球菌具有很强的耐盐能力，能在 65g/LNaCL血清肉汤培养基中生长，而链球菌的耐 盐能力较弱，在此培养基中不能生长。 方法：将被检菌接种65g/LNaCL血清肉汤培养基中， 35º C孵化18－24小时。 结果判断和报告：细菌生长且培养基变黄色为阳性， 细菌不生长且培养基不变色为阴性。此试验是鉴定 肠球菌和D群链球菌的重要试验，前者为阳性，后 者为阴性。
血瓶的配制：
血液培养基的种类很多，但共同的是均含有
三组成分：一是支持细菌生长的营养物质； 二是预防血液凝固的成分；三是抑制血液中 的杀菌物质。以生物制品公司生产的半成品： ‘血液增菌肉汤’ 为培养基。
配制步骤ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
(1)、称量、(2)、溶解、(3)、矫正PH、(4)、
分装、(5)、灭菌、(6)、质验、(7)、保存
无菌生长 (7天培养)
3
血液标本出现阳性结果的报告 三级报告制度
当疑有细菌生长时，以无菌操作挑取培养液涂片， 作革兰氏染色，如发现细菌要马上电话报告临床 (描述镜下细菌形态和革兰氏染色情况)，这是第 一级；取培养液转种血平板、中国蓝平板，同时 按涂片所见细菌的类型选药直接做初级药敏。24h 报初级药敏结果给临床，这是第二级；同时挑取 培养基上长出的可疑菌落做正规的生化试验和药 敏。48h根据生化结果发正规报告，同时报告药敏， 这是第三级。
肠球菌属检验
文件页码：1/21．概述肠球菌属包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、类鸟肠球菌、棉子糖肠球菌等21个种。
2. 标本类型血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。
3. 鉴定3.1 形态与染色革兰阳性球菌，单个、成双或短链排列。
3.2 培养特性在血琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成较小、灰白色，有α溶血或γ溶血环的菌落。
在康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。
3.3 生化反应触酶试验阴性，分解甘露醇，胆汁七叶苷试验阳性，在含6.5%NaCl肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，触酶阴性，在含6.5%NaCl肉汤中生长，胆汁七叶苷和耐盐试验阳性，45℃生长。
3.4.2与链球菌属和乳球菌属的鉴别肠球菌属能在pH9.6肉汤和45℃生长，胆汁七叶甘和耐盐试验阳性，而链球菌属和乳球菌属则相反。
3.4.3 粪肠球菌与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖，分解山梨醇。
屎肠球菌能分解L-阿拉伯糖，不分解山梨醇。
鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖和山梨醇。
3.5 操作步骤3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。
3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。
3.5.3 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4. 药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S19最新版本文件。
5. 质量控制参见《质量管理程序》。
6. 检验结果解释与分析在β-内酰胺酶阴性肠球菌中，氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。
青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。
粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。
对于血培养和脑脊液培养分离出的肠球菌需做β-内酰胺酶检测，若β-内酰胺酶阳性，则对氨基青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。
细菌检验表格整理(球菌、肠杆菌、弧菌)
肠外无菌部位——增菌——BAP；
混有其他污染菌——MAC、EMB——抑制其他革兰阳性菌及少数革兰阴性菌；
粪便标本——BAP、MAC、SS；
鉴定：
（科间鉴别）氧化酶、O/F实验
（属间鉴别）
KIA：分解葡——产酸/产酸产气；
分解乳糖——鉴别致病菌与非致病菌
MIU：U——大肠阴性为黄、变形阳性为红；
MAC：发酵乳糖产酸，形成较大黏液型、红色菌落；
在科玛嘉定位显色培养基呈绿色菌落
BAP、MAC培养基分离培养——挑选可疑菌落；
属间鉴别：
MIU（- - +）I除了产酸克雷伯菌，都为阴
KIA（发酵葡萄糖/发酵乳糖）
志贺菌属
4个血清群：A、B、C、D群
致病与侵袭力、内毒素、外毒素有关；
引起人类细菌性痢疾即菌痢，粪口传播；
生化：
发酵葡萄糖（产酸或产酸产气）、触酶+、氧化酶-、硝酸盐还原+；
抗原构造：
主要包括菌体O抗原（脂多糖）、鞭毛H抗原（蛋白质）、表面抗原（多糖）；
O抗原与H抗原是肠杆菌科血清型分群和分型的依据
抵抗力：
不强，高温即可被杀死
标本采集：
只有肠外感染标本做直接镜检（除血液）；
肠道感染标本（粪便、脓血、粘液）；
分类
（1）肠杆菌科：
革兰阴性杆菌，多为肠道的正常菌群；
（2）KIA：克氏双糖铁培养基，为肠杆菌科细菌常用的鉴别培养基
（3）迁徙现象：普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌种在普通琼脂平板上生长时可蔓延成波纹状，布满整个培养基表面
形态：
革兰阴性杆状或球杆状，无芽孢，多有鞭毛，能运动，致病性的菌株多有菌毛；兼性厌氧，营养要求不高，在BAP和MAC上生长良好；
肠球菌属 分类
肠球菌属分类全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：肠球菌属（Enterococcus）是一类革兰氏阳性球菌，属于革兰氏阳性菌属的乳酸菌科下的球菌属。
肠球菌属包含了一系列肠内固有的细菌，是人体肠道中最常见的细菌之一，也是一种典型的厌氧菌。
肠球菌属的细菌具有抗生素耐药性和耐热性，因此在医学领域和食品工业中具有重要的意义。
肠球菌属的分类历史悠久，最初是依据生理和生化特性进行分类，随着分子生物学技术的发展，现在的分类更多地依据基因序列的相似性进行。
根据16S rRNA基因序列的比较，肠球菌属可以分为多个亚属和种，如E. faecalis、E. faecium、E. gallinarum等。
肠球菌属中最常见的种是E. faecalis和E. faecium，它们是人类和动物肠道内的正常微生物，对维持肠道微生态平衡和健康具有重要作用。
肠球菌属在食品工业中也是一种重要的发酵剂，可以用于奶制品和发酵食品的生产中。
肠球菌属的细菌对抗生素有较强的耐药性，尤其是E. faecium，经常出现多重耐药的情况。
这使得肠球菌属细菌在医院感染中成为了一种常见的耐药菌株，导致了严重的医院感染问题。
对于肠球菌属的耐药性监测和控制具有重要的意义。
肠球菌属还具有益生菌的潜力，可以作为益生菌制剂中的一种重要菌种。
益生菌是一种有益于宿主健康的微生物，通过调节肠道菌群平衡，增强免疫力，改善营养吸收等方式对宿主产生益处。
肠球菌属的研究也对益生菌的开发和利用具有重要的意义。
第二篇示例：肠球菌属（Enterococcus）是一类革兰氏阳性、球形或短圆柱形的细菌，属于兰氏大肠杆菌科亚科，是人类和其他动物肠道中的常见菌群之一。
一、形态特征肠球菌是一类革兰氏阳性细菌，通常呈不规则的球形或短圆柱形。
它们不产生孢子，胞内不含有细胞鞭毛。
肠球菌在革兰染色中呈现紫色，属于革兰氏阳性细菌的一种。
二、生物学特性1. 营养需求：肠球菌是一类微好氧性或厌气性微生物，通常在氧气氧化状态下生长，但也具有在无氧气条件下生存的能力。
需氧和兼性厌氧性球菌鉴定—肠球菌属的鉴定(微生物检验课件)
（四）分型 目前分21种。引起医院内感染常见的是粪肠球
菌和屎肠球菌。 常用的分型方法：rRNA基因探针分型法。
（五）抵抗力
对理化因素抵抗力弱。
但对大多数抗生素天然耐药。头孢菌素、克林 霉素、复方增效磺胺、低浓度氨基糖甙类和万 古霉素天然耐药。易形成获得性耐药。
二、微生物学检验
（一）标本采集 尿液、血液、脑脊液、脓汁分泌物等。
（二）检验程序
尿液、脓汁、 穿刺液
涂片染色 分离培养（血平板）
血液
增菌培养（葡萄糖 肉汤）
初报
挑选可疑菌落
PYR试验 胆汁七叶 6.5%NaCl 苷试验 生长试验
报告
血清学 试验
其他鉴定 试验
（三）检验方法
1、直接镜检 适用于：痰、脓、脑脊液、穿刺液标本。 2、分离培养 血平板：灰白色，圆形，中等大小，不透明，S型菌 落，周围有α溶血或γ溶血。 选择培养基：叠氮胆汁七叶苷琼脂平板。
3、鉴定试验 （1）菌属鉴定试验：
①PYR试验：肠球菌、A群链球菌、某些凝固 酶阴性葡萄球菌为（+）
②胆汁七叶苷试验：+ ③ 盐耐受试验：+ （2）种间鉴定试验：
第三节 肠球菌属
是肠道中的正常菌群 导致医院内感染：如尿路感染、腹部和 盆腔感染、败血症、脑膜炎。
一、生物学特性
（一）形态染色
G+球菌，单个、成双或短链状排列。无荚膜、芽 胞，部分菌株有鞭毛。
（二）培养特性
营养:要求较高。能在高盐（6.5%NaCl）、 高碱（PH9.6）、高胆汁（40%）、 10-45℃均可生长。
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16
第二节 链球菌属 Stretococcus
一 分类 二 临床意义 三 形态和培养特征 四 种属鉴定
17
一、分类
1、血平板溶血现象
甲型溶血性链球菌 乙型溶血性链球菌 丙型溶血性链球菌
18
2、抗原结构
链球菌细胞壁多糖C抗原分群， 目前分为 A、B、C、D等 20 群。
19
具有A、C、G抗原群β溶血性链球菌 ➢菌落直径大于0.5mm 菌落直径小于0性休克综合症。
烫伤样皮肤综合症 6
三、形态及培养特性
（一）形态染色
直径0.5～1.5μm
革兰阳性球菌
排列呈葡萄串样
无鞭毛和芽胞
金黄色葡萄球菌纯培养 的镜下形态（革兰染色）
除少数菌株一般无荚膜
7
金黄色葡萄球菌败血症的血标 金黄色葡萄球菌伤口感染的 本培养后图片（革兰染色） 脓液直接图片（革兰染色）
营养要求高 血平板上形成灰白色，透明表
面光滑的小菌落，成α、β、 γ三种特征性溶血现象。
化脓性链球菌
草绿色链球菌
27
肺炎链球菌 α溶血 48h后菌落呈脐窝状
28
四、种属鉴定
链状排列革兰阳性球菌 兼性厌氧 营养要求高 触酶阴性
29
β-溶血链球菌鉴定 群特异性抗原鉴定 PYR试验 杆菌肽敏感试验 VP试验 CAMP试验等
22
❖草绿色链球菌 亚急性细菌性心内膜炎 亚急性细菌性心内膜炎肾改变
亚急性细菌性心内膜炎
23
❖ 牛链球菌 属于D群链球菌 尿路感染、化脓性腹部感染、心内膜炎
❖ 猪链球菌 败血症型、脑膜炎型
24
三、形态及培养特性
革兰阳性球菌 呈链状排列
25
无鞭毛无芽孢 肺炎链球菌呈矛尖状 成双排列，有荚膜。
26
➢ 个别菌种有稀疏鞭毛
肠球菌革兰染色
39
最适生长温度35℃， 10℃～45℃也能生长。 麦康凯平板上形成较 小、稍干燥的菌落。
肠球菌在麦康凯琼脂 平板上的菌落特征
40
血平板上形成灰白色、 表面光滑、直径0.5～ 1ｍｍ大小的圆形菌落， α溶血或不溶血。
粪肠球菌菌落
41
四、种属鉴定
6.5％NaCl培养基或PH9.6肉汤 中生长 触酶阴性 多数菌种PYR阳性 40%胆汁培养基中分解七叶苷
肠球菌胆汁七叶苷试验 阳性（黑色）
42
第四节 奈瑟菌属 Neisseria
一 分类 二 临床意义 三 形态和培养特征 四 种属鉴定
43
一、分类
奈瑟菌属隶属奈瑟菌科 淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae) 脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis）
44
二、临床意义
（一）淋病奈瑟菌 致病物质 成人：淋病 新生儿：淋菌性结膜炎
一 分类 二 临床意义 三 形态和培养特征 四 种属鉴定
36
一、分类
➢ 粪肠球菌和屎肠球菌原属于链球菌属 ➢ 1984年设立肠球菌属
37
二、临床意义
✓ 尿路感染 ✓ 腹膜炎、盆腔炎 ✓ 伤口感染、菌血症
38
三、形态及培养特性
➢ 革兰阳性，球形、卵圆形、 成对或短链状排列
➢ 兼性厌氧
➢ 无芽胞、无荚膜
3
一、分类
伯杰鉴定细菌学手册，35个种、17个亚种。 凝固酶(coagulase)：凝固酶阳性葡萄球菌和 凝固酶阴性葡萄球菌。 噬菌体分型:将金黄色葡萄球菌分为 5群 26型。
4
金黄色葡萄球菌（S.aureus） 表皮葡萄球菌 头状葡萄球菌 溶血葡萄球菌 里昂葡萄球菌等
5
二、临床意义
1.侵袭性疾病、皮肤感染、 内脏感染、全身感染。 2.毒素性疾病、食物中毒、
变异 链球菌群
唾液 链球菌群
米勒 链球菌群
草绿色链球菌鉴定
VP 脲酶 精氨酸 七叶苷 甘露醇
--
-
-
-
+-
-
+
+
+/- +/- -
+
-
+-
+
+/-
+/-
山梨醇 + -
34
抗链球菌溶血素O试验 常用于风湿热的辅助诊断，活动性风湿热患 者的抗体效价一般超过400单位。
35
第三节 肠球菌属 Enterococcus
(具A、C、G群抗原——米勒链球菌) 具有B群抗原的β溶血性链球菌
无乳链球菌 草绿色溶血或不溶血链球菌
肺炎链球菌和草绿色链球菌群
20
二、临床意义
❖ 化脓性链球菌（S.pyogenes） 化脓性感染 毒素中毒 变态反应性疾病
21
❖ 无乳链球菌 新生儿脑膜炎和败血症
❖肺炎链球菌 大叶性肺炎、支气管炎
第七章 球菌
临床微生物学及检验
医学检验学院 病原生物学教研室
化脓性球菌
链球菌属
(Streptococcus)
肠球菌属
(Enterococcus)
常见球菌
葡萄球菌属
(Staphylococcus)
奈瑟菌属
(Neisseria)
2
第一节 葡萄球菌属 Staphylococcus
一 分类 二 临床意义 三 形态和培养特征 四 种属鉴定
45
（二）脑膜炎奈瑟菌 致病物质 荚膜 菌毛 内毒素 流行性脑脊髓膜炎
46
三、形态及培养特性
（一）淋病奈瑟菌
➢ 革兰阴性，肾形 ➢ 成双排列，坦面相邻 ➢ 某些菌种形成荚膜 ➢ 无动力无芽胞
淋病奈瑟菌革兰染色
47
➢ 需氧生长
➢ 营养要求高
➢ 初次分离需 5～10%CO2
12
鉴定特征
葡萄串样排列的革兰阳性球菌
兼性厌氧
触酶阳性
氧化酶阴性
阳性
10％ NaCl条件中生长
触酶 阴性
13
菌种鉴定试验
❖ 凝固酶试验 结合凝固酶 游离凝固酶 金黄色葡萄球菌阳性
（玻片法）
（试管法）
14
❖ 耐热核酸酶试验 ❖ 碱性磷酸酶试验 ❖ 吡咯烷酮β萘基酰胺试验
15
其他鉴定试验
➢ 鸟氨酸脱羧酶试验、尿素酶试验、新生霉素敏 感试验、甘露醇分解试验、胶乳凝集试验等
8
（二）培养特性
营养要求不高 普通培养基上形成1～3mm 呈金黄色、白色、柠檬色 等不透明圆形凸起菌落。 能在10％～15％NaCl琼脂 中生长。
9
血琼脂平板上有透明溶血环
10
金黄色葡萄球菌在血 琼脂平板上的菌落特征
表皮葡萄球菌在血琼 脂平板上的菌落特征
11
四、种属鉴定
标本采集
按常规方法采取标本 采取标本应避免正常菌群污染
CAMP试验
30
非β-溶血链球菌鉴定
optochin试验 胆汁溶菌试验 胆汁七叶苷试验
31
粪肠球菌胆汁七叶苷 试验阳性
肺炎链球菌胆盐溶 菌阳性
32
菌种
肺炎链球菌 草绿色链球菌
牛链球菌
optochin敏感 试验 S R R
胆汁溶菌试 验 +
—
—
胆汁七叶苷 试验
—
— +
33
链球菌群
温和 链球菌群