动物疫病监测采样技术

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

样本\样品的数量
样本:总体中的一部分代表;样品:检测的原 始材料。
概率抽样(随机抽样):是按照随机原则进行抽样,
不加主观因素,组成总体的每个单位都有被抽中的概率(非零概 率)
比例抽样:按养殖规模成比例抽样。 多阶段抽样:全市分区,每个区随机选县,每
个县选乡镇,每个乡镇选养殖场。
样本量,符合统计学要求,决定因素:疫病在 群体中的发生率,可信水平,检测方法 的敏 感性和特异性。
几种重要疫病的采样时机
禽流感、新城疫:发病初期采全血,泄殖腔\咽 喉棉拭子;后期采集新鲜粪便;剖剪后的气管, 肺脏,肾脏等
口蹄疫:全血,水泡皮,水泡液,O/P液及口腔 分泌物和咽喉棉拭子
猪瘟,猪伪狂犬,蓝耳病:全血,血清,组织病 料:肺脏,脾脏,淋巴结,扁桃体,流产胎衣等, 新鲜精液或冷冻精液
3、采样的准确性和时效性
代表性:应该考虑到整个监测区域的地理分布,选 取有代表性的点。如动物品种分布、日龄、饲养密 度、地势特点、交通特点、动物迁徙习性等因素。 如禽流感采样时,疫区交接处,野鸟迁徙途径,水 禽家禽混合饲养处等。
时效性:如抗体监测,免疫后14天左右才可以采集; 监测病原时,注意排毒时间和病原的易嗜细胞和组 织,在监测时要根据不同时期,采集不同部位的组 织进行检测。如口蹄疫病毒首先是在咽喉部和肺上 皮细胞扩增,然后进入血液,通过分泌物、水泡排 毒。
样品存放用具:塑料离心管(1.5,2,5ml),自封口 样品袋,试管架,塑料样品盒,胶布,封口膜,冰袋。
防护用具:一次性手套,鞋套,口罩,隔离衣等。 记录用具:不干胶标签、圆珠笔、油性记号笔、采样单、
记录本等
2、采样前准备—采样技术
血液样品:牛、马、羊从颈静脉或尾静脉采血; 猪从前腔静脉采血,用量少时也可从耳静脉抽 取;家禽从翅静脉抽取。
根据信息来源分为:问卷调查和实验室监测。 实验室监测的关键:样品和检测技术。
实验室检测技术
病原检测:病原本身检测,病原特有蛋白检 测,病原特有核酸检测,动物试验
抗体检测:琼扩,试管凝集,平板凝集,血 凝和血凝抑制,中和试验,各种ELISA等。
在检测技术过关的情况下,监测结果是否具 有代表性,是否能够真实反映出疫病的真实 情况都与监测样品的采集有重要关系。
血浆:抗凝血混匀后,静置,上清即为血浆。
检测样品的分类
细菌学检测样品:采集发病典型或刚死亡的整体动物 送实验室为最好。无菌采集,冷藏,保存液中不加任 何抗生素。
病毒学检测样品:病毒检测应在动物病初、体温升高 期间采集。以组织脏器、血液、粪便等样品为主 。冷 藏或冷冻,保存液中加抗生素。
咽喉拭子、鼻腔拭子的采集:将灭菌的干棉拭子插 入口腔至咽的后部或鼻腔,轻轻擦拭并慢慢旋转将 拭子拔出,将棉拭子放入缓冲液内。
O/P液是从动物食道/咽喉刮取的黏膜样品,用特制 的食道探环刮取黏膜,放入样品保存液中。
水泡液及水泡皮的采集
用75%酒精消毒水泡表皮,用灭菌生理盐水擦 去酒精,用注射器穿刺吸取水泡液,置于含 抗生素的PBS缓冲液中;然后用剪刀将水泡皮 剪下,放入含抗生素的PBS缓冲液中。
血清学检测样品:静脉采血3 ml左右,注射器内留一 定空间,静置过程或已凝固的血液应低温冷冻,以免 溶血。短时间内,可在4度左右保存;如时间较长应冻 结保存,注意不能反复冻融.
病理学检测样品:保证样品新鲜,应选择病变最典型 最明显的部位,且连同部分健康组织一并采集。 浸泡 于酒精或福尔马林溶液中,冷藏保存和运输。
棉拭子样品:泄殖腔,咽喉,鼻腔 水泡皮及水泡液: O/P液:保定,左手拉出舌头或从嘴的一侧按
住舌头,右手缓慢放入探杯。 组织样品:解剖,洁净取样。
SUCCESS
THANK YOU
2019/6/12
血液样品的分离方法
抗凝血:采血前在试管或注射器内按比例加 抗凝剂,运输时必须减少震荡以免溶血。
动物疫病监测的采样技术
邱荣斌
西南科技大学生命科学与工程学院 2014年11月18日
主要内容
动物疫病监测的概念及其意义 检测样品存在的问题 样品的种类 高品质样品的特征 如何得到高质量的样品
动物疫病监测
定义:调查动物群体中某种疫病或病原的存 在情况。
通过监测可以了解动物疫病的流行现状、危 害程度、风险因子和发展趋势,早期识别疫 病的爆发和流行。
桃体 粪便样品:新鲜,湿润的 生殖道和精液样品 皮肤样品:皮屑 分泌液和渗出液样品:舌面或蹄部的水
泡液
血液样品
血液:最常用的样品,可以做血清学试验的样品,也可以作 为病原学试验的样品。
全血(抗凝血):抗凝剂有肝素,阿氏液,枸橼酸 钠和4%EDTA,或者用玻璃珠,脱纤维蛋白。
血清:不加抗凝剂的血液,在室温静置2~4h(或 37℃1h),待血液完全凝固后,析出上清即为血清。
猪流感:在发热期采集鼻咽棉拭子和肺组织病料。
三、高品质样品的特征
样本\样品数量适当 样品新鲜
样品标记明确 采样单填写规范
四、如何得到高质量的样品
高质量样品
采样前准备 采样的时效性 样本的数量
样品的标记
样品的保存 和运输
1、采样前的准备-器具
采样工具:一次性注射器,解剖刀,剪刀,镊子,酒精 灯,酒精棉,棉签,保定动物专用工具
非抗凝血:分离血清
血清析出好的因素:容器:玻璃试管优于塑 料离心管;斜面:与空气接触面要大。温度: 最佳温度是体温;时间:室温静置最短2小 时;离心:转速要低,2000转。
胶冻状血清的成因:采血前刚刚喂食(没有 空腹);凝血时间不够;脂肪血(营养过剩)
粪便、棉拭子和O/P液样品 的采集
泄殖腔拭子的采集:将棉拭子插入泄殖腔约 1.5~2cm,旋转后沾上粪便。
如何做好采样工作
送检样品中的问题
合格样品
如何得到合格样品
采样中应注意问题
一、样品存在的问题
样品的真实性(假样品,一个样品分开) 样品的质量(溶血,腐败,反复冻融) 采样单填写的信息不全(畜禽日龄,免疫情
况等) 组织来自百度文库品采集的太大,不专业。 样品编号不能追溯回去。
二、样品的种类
血液样品:血清,全血抗凝血,血浆 组织样品:心肝脾肺肾脑,淋巴结,扁
相关文档
最新文档