植物生理学实验：实验四 植物可溶性糖含量的测定(蒽酮比色法)
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注意一切与浓硫酸操作有关的安全 ！！！不要吝啬用水和卫生纸！！ ！
作业
得出实验结果后，根据标准曲线算出的含糖量 ，写于实验报告上。（之前问题）
。
实验目的；实验材料、仪器设备与试剂
目的：掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 仪器 分光光度计、水浴锅； 天平、试管架、容量瓶、试管、滤纸、漏斗。 试剂 100mg/L葡萄糖标准液；浓硫酸；蒽酮乙酸乙酯试剂 材料：白兰叶片
实验步骤
1. 葡萄糖标准曲线的制作（1组同学做，数据共享）
（1）取6支试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄 糖溶液：
出，自然冷却至室温，在630nm波长下比色。以标准蔗
糖含量作横坐标，以吸光值作纵坐标作标准曲线。
实验步骤
2. 植物样品中可溶性糖的提取（其他组做，数据共享） 将植物叶片剪碎混匀，准确称取0.3g3份，加入研钵中，
再加入2-3mL水和少量石英砂，研磨后转入试管中，用 水再洗涤2次，均转入试管中。将试管置于沸水浴中提取 30min，提取液过滤至25mL容量瓶，反复冲洗试管及 残渣，定容至刻度。 3. 显色测定（同上）： 吸取0.5mL提取液于试管中，加水1.5mL，蒽酮乙酸乙酯 试剂0.5mL和5mL浓硫酸，混匀，沸水浴中准确保温 1min取出，自然冷却至室温，在630nm波长下比色。
管号
0
1Hale Waihona Puke Baidu
2
345
100mg/L葡萄糖标准液（mL） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
水（mL）
2 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0
蔗糖含量（μg）
0 20 40 60 80 100
（2）在每支试管中立即加入蒽酮乙酸乙酯试剂0.5mL和
5mL浓硫酸，用玻棒混匀，沸水浴中准确保温1min取
植物生理学实验
实验四 植物可溶性糖含量的测定 （蒽酮比色法）
LOGO
实验原理
强酸可使糖类脱水成糖醛或羟甲基糖醛。 糖醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糖醛的衍生
物，呈蓝绿色。 该物质最大吸收峰在630nm处。在10－100μg/L范围
内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。 该法可测定几乎所有糖类（包括单糖、寡糖和多糖）
实验结果计算与分析
从标准曲线查得的糖含量（μg）
植物样品含糖量（％）＝
(C× VT× N) × 100
(Vs× W× 106)
C-从标准曲线查得的糖含量（μg）
VT-提取液体积（ml） VS-吸取样品液体积（ml） N-稀释倍数（根据实际情况）
W-样品重（g）
注意事项
加浓硫酸时应缓慢，以免产生大量 热量而爆沸，灼伤皮肤，如出现上 述情况，应擦干后迅速用自来水冲 洗。
作业
得出实验结果后，根据标准曲线算出的含糖量 ，写于实验报告上。（之前问题）
。
实验目的；实验材料、仪器设备与试剂
目的：掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 仪器 分光光度计、水浴锅； 天平、试管架、容量瓶、试管、滤纸、漏斗。 试剂 100mg/L葡萄糖标准液；浓硫酸；蒽酮乙酸乙酯试剂 材料：白兰叶片
实验步骤
1. 葡萄糖标准曲线的制作（1组同学做，数据共享）
（1）取6支试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄 糖溶液：
出，自然冷却至室温，在630nm波长下比色。以标准蔗
糖含量作横坐标，以吸光值作纵坐标作标准曲线。
实验步骤
2. 植物样品中可溶性糖的提取（其他组做，数据共享） 将植物叶片剪碎混匀，准确称取0.3g3份，加入研钵中，
再加入2-3mL水和少量石英砂，研磨后转入试管中，用 水再洗涤2次，均转入试管中。将试管置于沸水浴中提取 30min，提取液过滤至25mL容量瓶，反复冲洗试管及 残渣，定容至刻度。 3. 显色测定（同上）： 吸取0.5mL提取液于试管中，加水1.5mL，蒽酮乙酸乙酯 试剂0.5mL和5mL浓硫酸，混匀，沸水浴中准确保温 1min取出，自然冷却至室温，在630nm波长下比色。
管号
0
1Hale Waihona Puke Baidu
2
345
100mg/L葡萄糖标准液（mL） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
水（mL）
2 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0
蔗糖含量（μg）
0 20 40 60 80 100
（2）在每支试管中立即加入蒽酮乙酸乙酯试剂0.5mL和
5mL浓硫酸，用玻棒混匀，沸水浴中准确保温1min取
植物生理学实验
实验四 植物可溶性糖含量的测定 （蒽酮比色法）
LOGO
实验原理
强酸可使糖类脱水成糖醛或羟甲基糖醛。 糖醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糖醛的衍生
物，呈蓝绿色。 该物质最大吸收峰在630nm处。在10－100μg/L范围
内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。 该法可测定几乎所有糖类（包括单糖、寡糖和多糖）
实验结果计算与分析
从标准曲线查得的糖含量（μg）
植物样品含糖量（％）＝
(C× VT× N) × 100
(Vs× W× 106)
C-从标准曲线查得的糖含量（μg）
VT-提取液体积（ml） VS-吸取样品液体积（ml） N-稀释倍数（根据实际情况）
W-样品重（g）
注意事项
加浓硫酸时应缓慢，以免产生大量 热量而爆沸，灼伤皮肤，如出现上 述情况，应擦干后迅速用自来水冲 洗。