乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定——L(-)-羟脯氨酸含量测定法
分光光度法测定乳及乳制品中L(-)-羟脯氨酸的改进研究
ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｉ ｉ ｆ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ｅ ｐ ｓ ｏ ｆ ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｉ ｔ ｎ ｇ ｉ ｎ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｉ ｔ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｌ（ 一 ） 一 ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｘ ｙ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｎ ｅ ， ｂ ｕ ｔ ｌｓ ａ ｏ ｉ ｓ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｅ ａ ｎ ｄ ｆ ｅ ａ ｓ ｉ ｂ ｌ ｅ ．Ｔｈ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｈ ａ ｖ ｅ ｇ ｏ ｏ ｄ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｃ ｙ ，
Ⅵｒ 、 删 ． ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｄａ ｉ ｒ ｙ． ｎ ｅ ｔ
பைடு நூலகம்
中国乳 品工业
ｄ ｑ ｊ ｒ ｙ Ｉ Ｎ Ｄ Ｕ Ｓ Ｔ Ｒ Ｙ
ｚ ｇ ｒ ｐ ｇ ｙ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
分光光度法测定乳及乳制品中Ｌ （ 一） 一 羟脯氨酸的改进研究
赵玉童 ， 咸伟 月
（ 黑 龙 江省 质 量监 督 检 测 研 究 院 ， 哈 尔滨 １ ０ ００ ５ ０）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｉ ｓ ｎ ｏ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｌ ｎ ａ ｉ ｔ ｏ ｎ ａ ｌ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｏｒ ｆ Ｌ ｅ ａ ｔ ｈ ｅ ｒ ｍｉ ｌ ｋ ｉ ｄ ｅ ｎ ｉ ｔ ｉ ｆ ｅ ｄ ａ ｌ ｏ ｎ ｇ ｔ ｉ ｍｅ ． Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ｔ ｗｏ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｏ ｆ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｉ ｎ
ｉ ｎ ｍｉ ｌ ｋ ａ ｎ ｄ ｄ ａ ｉ ｒ ｙ ｐｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓ
ＺＨＡＯ Ｙｕ—ｆ ｕ ，ＸＩ ＡＮ Ｗ ｅ ｉ —ｙ ｕ ｅ
食品中可能添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单1-5批汇总
食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单（第1—5批汇总）时间：2011-04-23来源：卫生部浏览：38123 原文:核心提示：为进一步打击在食品生产、流通、餐饮服务中违法添加非食用物质和滥用食品添加剂的行为，保障消费者健康，全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治领导小组自2008年以来陆续发布了五批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》。
为方便查询方便，卫生部日前将五批名单汇总发布。
为进一步打击在食品生产、流通、餐饮服务中违法添加非食用物质和滥用食品添加剂的行为，保障消费者健康，全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治领导小组自2008年以来陆续发布了五批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》。
为方便查询，现将五批名单汇总发布（见表一、表二）。
表一食品中可能违法添加的非食用物质名单序号名称可能添加的食品品种检测方法1 吊白块腐竹、粉丝、面粉、竹笋GB/T 21126-2007 小麦粉与大米粉及其制品中甲醛次硫酸氢钠含量的测定；卫生部《关于印发面粉、油脂中过氧化苯甲酰测定等检验方法的通知》（卫监发〔2001〕159号）附件2 食品中甲醛次硫酸氢钠的测定方法2 苏丹红辣椒粉、含辣椒类的食品（辣椒酱、辣味调味品）GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法3 王金黄、块黄腐皮4 蛋白精、三聚氰胺乳及乳制品GB/T 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法GB/T 22400-2008 原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法5 硼酸与硼砂腐竹、肉丸、凉粉、凉皮、面条、饺子皮无6 硫氰酸钠乳及乳制品无7 玫瑰红B 调味品无注：滥用食品添加剂的行为包括超量使用或超范围使用食品添加剂的行为特此公告。
二〇一一年四月十九日后期增补名单：。
151种非法食品添加物黑名单
151种非法食品添加物黑名单为严厉打击食品生产经营中违法添加非食用物质、滥用食品添加剂以及饲料、水产养殖中使用违禁药物，卫生部、农业部等部门根据风险监测和监督检查中发现的问题，不断更新非法使用物质名单，至今已公布151种食品和饲料中非法添加名单，包括47种可能在食品中“违法添加的非食用物质”、22种“易滥用食品添加剂”和82种“禁止在饲料、动物饮用水和畜禽水产养殖过程中使用的药物和物质”的名单。
根据有关法律法规，任何单位和个人禁止在食品中使用食品添加剂以外的任何化学物质和其他可能危害人体健康的物质，禁止在农产品种植、养殖、加工、收购、运输中使用违禁药物或其他可能危害人体健康的物质。
这类非法添加行为性质恶劣，对群众身体健康危害大，涉嫌生产销售有毒有害食品等犯罪，依照法律要受到刑事追究，造成严重后果的，直至判处死刑。
这次公布的151种食品和饲料中非法添加名单，是由卫生部、农业部等部门在分次分批公布的基础上汇总再次公布，目的是提醒食品生产经营者和从业人员严格守法按标准生产经营，警示违法犯罪分子不要存侥幸心理;同时，欢迎和鼓励任何单位个人举报其他非法添加的行为。
一、食品中可能违法添加的非食用物质名单（47种）二、食品中可能滥用的食品添加剂品种名单（22种）三、禁止在饲料、动物饮用水和畜禽水产养殖过程中使用的药物和物质（82种）（一）食品动物禁用的兽药及其它化合物清单（21种）（二）禁止在饲料和动物饮水中使用的物质（11种）1．苯乙醇胺A（Phenylethanolamine A）：ß-肾上腺素受体激动剂。
2．班布特罗（Bambuterol）：ß-肾上腺素受体激动剂。
3．盐酸齐帕特罗（Zilpaterol Hydrochloride）：ß-肾上腺素受体激动剂。
4．盐酸氯丙那林（Clorprenaline Hydrochloride）：药典2010版二部P783。
ß-肾上腺素受体激动剂。
卫生部公布的食品中可能违法添加的47种非食用物质和易滥用的22种食品添加剂名单
卫生部公布的食品中可能违法添加的47种非食用物质和易滥用的22种食品添加剂名单注：滥用食品添加剂的行为包括超量使用或超范围使用食品添加剂的行为四、对企业巡查工作的建议1.关注企业使用的各种复合香精、改良剂等添加剂。
食品安全法规定：食品添加剂应当有标签、说明书和包装。
标签、说明书应当载明本法第四十二条第一款第一项至第六项、第八项、第九项规定的事项，以及食品添加剂的使用范围、用量、使用方法，并在标签上载明“食品添加剂”字样。
如标签上未标明其成分或无标签应要求企业停止使用。
依据《中华人民共和国食品安全法》第七十七条应查阅、复制进货台帐、生产记录等相关资料，当场封存此物品、在制品、库存品并将产品抽样送检。
2.关注生产现场无包装的不明物质。
不法企业在故意使用一些违规物质的时候，一般均会去除该物质的外包装，不存放在仓库，往往在其生产现场的角落可以见到没有任何标识的不明物质，如企业不能说明是何物质、作何用途，并无法提供相应证明的情况下，应依据《中华人民共和国食品安全法》第七十七条查阅、复制进货台帐、生产记录等相关资料，当场封存此物品、在制品、库存品并将产品抽样送检。
3.关注企业进货台账、销售台账及配料记录企业购买添加剂应当按照食品进货查验记录制度，如实记录食品添加剂的名称、规格、数量、生产批号、保质期、供货者名称及联系方式、进货日期等内容。
食品进货查验记录应当真实，保存期限不得少于二年。
巡查人员可以对进货台账、销售台账及配料记录进行抽查，核对其所用添加剂的品种、数量是否可以对应。
若发现有不对应，依据《中华人民共和国食品安全法》第七十七条复制相关资料，当场封存在制品、库存品并将产品抽样送检。
4. 关注企业添加剂的实际使用情况（1）注意称量用的计量器具的精度是否能满足要求，使用的方式是否合理。
（2）气温较高、湿度较大的春、夏季应加强对企业防腐剂使用情况的监督。
若发现有超剂量、超范围使用应当场封存在制品、库存品，登记相关记录并依据《中华人民共和国食品安全法》第四十六条、第八十六条对企业的违法行为进行处罚。
以假乱真的“山寨蛋白”——非法食品添加物“革皮水解物”解读
以假乱真的“山寨蛋白”——非法食品添加物“革皮水解物”解读奇云【期刊名称】《城市与减灾》【年(卷),期】2013(000)003【总页数】3页(P51-53)【作者】奇云【作者单位】淮南联合大学【正文语种】中文将破旧皮衣、皮箱、皮鞋以及厂家生产皮包等皮具时剩下的边角料，经过化学处理，水解产生的粉状物，就是“革皮水解物”。
因其蛋白含量较高，又被人们称之为“皮革水解蛋白”。
革皮水解物主要添加的食品是乳、乳制品及含乳饮料，作用是增加蛋白质含量。
也就是说，这又是一种类似于三聚氰胺的非法添加物，而它与三聚氰胺的不同之处在于，三聚氰胺尽管俗称“蛋白精”，但并非真正的蛋白质；而皮革水解物是真正的蛋白质，若添加到食品当中，检测起来难度更大。
值得一提的是，革皮水解物在2010年前通常被称为“皮革水解物”。
2009年5月21日，中国日用化工协会明胶分会致函全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治领导小组，就专项整治领导小组在2009年2月4日发布的《食品中可能违法添加的非食用物质名单（第二批）》中，涉及的皮革水解物及其检测方法问题提出商榷意见。
其中，关于皮革水解物的名称提出如下商榷意见：皮是指覆盖在动物体最外层与动物机体连成一体的组成部分，制革厂习惯称为生皮。
革是指皮经鞣剂（重铬酸盐）等加工变性处理所获得的一种能够满足人们不同使用性能（如制皮鞋或皮衣等）的材料，制革厂习惯称为革皮（含铬皮）。
因此，皮（未经鞣制）与革（已经鞣制）有着本质的差别，即皮没有经过鞣制，其重金属铬含量低；而革经过鞣制，其铬含量高。
铬是一种对人体有害的重金属元素。
所以，建议将皮革水解物的名称改为革皮水解物或铬皮水解物，这样较为直观、醒目，也便于区别，不易混淆。
20世纪80年代后期以来，皮革工业这种污染严重的公害产业逐渐由西方发达国家向发展中国家转移，我国成了皮革加工中心。
全世界每年产生数量巨大的皮革固体废弃物，而我国就占了近三分之一，这些固体废弃物主要都是铬革渣。
测定乳制品中皮革水解蛋白
TAU
4.2
1.08 0.06
P-ET-AMINE 5.6
ASP
23.0
OH-PRO
31.0
THR
33.7
SER36.7AS NhomakorabeaARAGIN 39.0
0.13
1.13 1.15 0.18 1.38 0.09
0.05
0.83 0.19 0.18 0.13 0.09
E GLU GLY ALA CITRULLINE a-A-B-A VAL CYS MET 1-LEU CYSTATHIO NIN LEU TYR b-ALA r-A-B-A HIS ANSERINE ARG
OPA
CHO +
CHO
COOH N-A-L-C
H2N C R1 H
氨基酸
R2 S
C
COOH
N C R1
C
H
H
图 1 氨基酸柱后衍生检测原理
1.2 试剂与仪器 标 准 品 ： 24 种 氨 基 酸 混 标 ， 购 于
Sigma-Aldrich 公司。试剂：纯水，Milli-Q 超纯水仪制备得到；柠檬酸锂、高氯酸、溴酸、 氢氧化锂，AR；N-Acetyl-L-cysteine 、Brij-35、 邻苯二甲醛(OPA)，购自 Sigma-Aldrich；流
1. 材料与方法 1.1 原理
柱后衍生系统是欧洲药典收录的氨基酸 分析方法。与柱前衍生相比，柱后衍生方法允 许样品中残留少量缓冲溶液，不易受基质干 扰，适用范围更广泛，尤其适用于生物样品分 析，衍生反应及色谱检测全自动完成，同时还 具有定量、重现性优异等优点。目前，氨基酸 柱后衍生主要有茚三酮衍生化法和邻苯二甲
（OH-PRO）的校准曲线如图 4 所示：
乳及乳制品中添加皮革水解物的检测
试验研究
乳及 乳制 品 中添加皮革水解物 的检 测
吴 燕 王 贞 （ 山东省青岛市饲料兽药检测站 ２ ６ ６ ０ ７ １ ）
摘要 本试验 采用紫外分光光度计 法测定生鲜Ｓ Ｌ Ｌ ． 羟脯氨酸的含量 来确 定是 否添加皮革 水解物 ，在前处理过程 中用
中，再加一 些香 精、色 素等 原料而 制得 的皮 革水解 产物
Ｄ Ｇ Ｇ ． ９ ２ ４ ０ Ａ 干燥 箱（ 上海森信实验仪器有 限公司） 。
１ ． ２ 试 剂
可提高乳制品中蛋白质的含量，这种奶称为“ 皮革奶” 。皮
革 奶会改变 生鲜 乳的 口感及 氨基酸 的组 成 ，降低 生鲜乳 中氨 基酸 的吸收利 用率 ，其 中含有 重金 属铬 被人体 吸收 后 ，积累可 导致 中毒 ，关节疏 松肿 大 ，造成 人体重 金属
用 已经废弃 的皮革 制 品或动物 毛 发 ，水 解后 制成粉 末 ， 因而 蛋 白含 量 比较 高 。 由于 乳及乳 制 品中蛋 白含量 要求 较 高 且相 对 固 定 ，将 皮 革 水解 蛋 白粉 掺 入 牛 奶 或奶 粉
ＤＶ － ８ ０ ０ 紫 外可见 分光光度 计（ 贝克曼公司） 、高速 冷 冻 离心机 （ Ｈｅ ｒ ａ ｅ ｕ ｓ 公司） 、水浴锅（ 上海亚荣生化仪器厂 ） 、
中毒 甚至造 成婴 儿死亡 。２ ０ ０ ９ 年 ，卫生 部 已将 皮革 水解
１ ． ２ ． １ 氟胺Ｔ 溶液
将１ ． ４ １ ｇ 氯胺Ｔ 溶 于１ ０ ｍｌ 水 中，依次加
入ｌ Ｏ ｍｌ 正丙醇和８ Ｏ ａｌ ｒ 缓冲溶液 。现用现配 。 １ ． ２ ． ２ Ｌ ． 羟脯 氨酸标 准溶 液 （ １ ）Ｌ ． 羟 脯氨酸标准储 备 液（ ５ ０ ｏ ￣ ｇ ／ ｍ１ ） 。精 密称 取Ｌ － 羟脯 氨 酸标 准 品（ 国 药 集 团） ５ ０ ａｇ ｒ ，用 少量 ０ ． ０ ２ ｍｏ ｌ ／ ｌ 盐酸 溶解 并 定容至 １ ０ ０ ｍｌ 容量 瓶 。（ ２ ）Ｌ ． 羟脯 氨酸标准 工作 液（ ５ ￣ ｔ ｇ ／ ｍ１ ） ：吸取 Ｌ ＿ 羟脯 氨 酸标准储备液５ ． ０ ０ ｍｌ 于５ ０ ０ ｍｌ 容量瓶 中，定容 。
纯牛奶中动物水解蛋白L-羟脯氨酸含量测定
国
结 晶 乙 酸 钠 溶 于 水 ，稀释 至 １ Ｌ ，此 溶 液 与 ２ ０ ０ ｍＬ 水 和 光度 ； Ｐ为标准 曲线查得试样 吸光度对应浓度 （ｕ ｇ ／ ３ ０ ０ ｍＬ 正 丙醇 混 合 。
ｍＬ）；Ｍ为标准曲线斜率 ；Ｘ 为样品中Ｌ 一 羟脯氨酸的百
氯胺Ｔ 溶 液 ：将 １ ． ４ １ ｇ 氯胺Ｔ ，溶于 １ ０ ｍＬ 水 中 ，依 分含 量 （ ｍｇ ／ ｋ ｇ） ；Ｖ 为 水解 后定 容体 积 （ ｍＬ）；Ｖ ２ 为
含量是衡量动物胶原水解蛋白含量 的一个重要指标 】 。 本试验之所 以设计 为检测纯牛奶 中是否含有Ｌ 一 羟脯氨
１ ． ２ 试 剂 结 晶 乙酸 钠 、苯 酚 、柠 檬酸 、对 二 甲基苯 甲醛 、氯
国药 集 团化 学 试 剂 有 限公 司 ）；正 丙 醇 （ 永 大 化 酸 ，是 因其 为动 物胶 原 蛋 白中特 有成 分 ，而不 存在 于 乳 胺 Ｔ （ 金 鹿 化 工 有限 公 司 ）；盐 酪 蛋 白中 ，所 以一 旦 检 出 ，则可 认 为纯 牛奶 中含 有皮 革 学试 剂 有 限公 司 ）；高氯 酸 （
摘
要 ：为 建立一种 测定 纯牛奶 中Ｌ 一 羟脯氨 酸 的紫外分 光光度 法 ，本研 究首先优化 前 处理条件 ，然后 通过
紫外 分光光度 计选 出Ｌ 一 羟脯氨 酸 的最佳吸 收波 长 ，测 定其含 量 ，并进 行精 密度和加 标 回收率试 验 。结果显 示 ，待测组分线性 关 系良好 ，最低检 出限为０ ． ２ ｍｇ ／ ｋ ｇ 。相对标 准４ ＆￣ＲＳ Ｄ． ｇ Ｊ ０ ． ４ ８ ％￣ ０ ． ７ ７ ％，加标 回收率基本在 ９ ３ ． １ ３ ￣ ／ ｏ ＂ １ ０ ０ ． ５ ７ ％。本 方法灵敏 、准确 ，重复性好 ，样 品处理 简便 易行 ，Ｔｉ ｆ于纯牛奶 ｅ ｅ Ｌ 一 羟脯氨酸含 量测定。
食品中可能违法添加的非食用物质和已滥用的食品添加剂名单(第1—5批汇总)
参考 Ｃ ， ０ ６ — ０ ６猪 肾和肌 肉组织 中乙酰丙嗪 、 Ｂ＇ ２ ７ ３ ２０ ｒ 氯丙嗪 、 氟哌啶醇 、 丙酰 二 甲氨 基丙吩噻嗪 、 甲苯噻嗪、 阿扎 哌垄 阿扎哌醇 、 唑心 安残留量的测定 ， 咔 液相色谱一 串联质谱法
无 ， 要 研 制 动 物 性 食 品 中 测 定 安定 的液 相 色 谱 一 需 串联 质 谱 法 蘑 菇 样 品可 通 过 照 射进 行 定性 检 测 面 粉 样 品无 检 测 方 法
罂粟壳 革皮水解物
火锅底料及 小吃类 乳与乳制 品 含乳饮料
参照上海 市食品药品检验所 自建方法 乳与乳制 品中动物水解蛋白鉴定一 （） 羟脯氨酸含量测定 （ Ｌ一一 检测方 法 由中国检验检疫科学院食 品安全所提供 。该方法仅 适应 于生鲜 乳、 牛奶、 纯 奶粉 ）
ｌ ８
１ ９ ２ ０
无 无 无 无 Ｇ ５ ０ ． —０ ３食 品中 有机 磷 农药 残 留 的测 定 ＢＴ ０ ９２ ２０ ０ 无 Ｇ ，５ ０ ．１２ ０ Ｂｒ ０ ９ — ０ ３食 醋卫 生 标 准 的分 析方 法 ｒ ４
肾上腺 素受体激 动剂 猪肉、 牛羊肉及肝脏等 类 药 物 （ 酸 克 伦 特 盐
２ １ ２ ２ ２ ３ ２ ４ ２ ５ ２ ６ ２ ７ ２ ８
溴酸钾
８ 内酰胺酶 一 （ 玉 兰 酶 制剂 ） 金 富马酸二甲酯
废 弃 食用 油 脂 工 业用 矿 物 油 工 业 明胶 工业 酒 精 敌敌 畏 毛 发水 工业 用 乙酸
小麦粉
乳与乳制品 糕 点
食 品 中 可 能违 法 添 加 的非 食 用 物 质 和 已滥 用 的 食 品添 加 剂 名单
（ １ 第 —５批 汇 总 ）
47种可能在食品中违法添加的非食用物质及检测方法
47种可能在食品中违法添加的非食用物质及检测方法
以下表格中，序号、47种违法添加的非食用物质名称、可能添加到的食品品种、标准检测方法，为2011年国务院食品安全委员会公布的内容。
快速检测参考方法一栏的内容，为笔者整理后加入，所提及的快速检测方法，以北京中卫食品卫生科技公司提供的产品说明书为参考内容。
更多的快速检测方法22种“易滥用的食品添加剂名单”
注：滥用食品添加剂的行为包括超量使用或超范围使用食品添加剂的行为
更多的快速检测方法。
乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定方法
水解 ２ ，极 易爆腾 、烧干 ，Ｈ １ ４ｈ Ｃ 浓度 （ Ｃ ， Ｈ ） 水 解 时间 （ Ｔ 和 反 应 温 度 （ Ｔ） 对 羟脯 氨 酸 Ｈ ） Ｒ 的测定 具有 显著 的影 响 ．通 过 对 酸水 解 条 件 的 优
文献标识码 ：Ａ
文章编 号 ：１ ６ ２ １ （０８ ３ ０４ — ３ ０ — ５３ ２０ ）０ － １５ ０ ０
Ｍｉ ｎ ａ ｒ ｒ ｄ ｃｓ ｉ ｈ ｄ ｎ ｉｃ ｔ ｎ ｏ ｎ ｍａ ｌ ａ ｄ ｄ ｉ ｐ ｏ ｕ ｔ ｎ ｔ ｅ ｉｅ ｔ ｉａ ｉ ｆａ ｉ ｌ ｋ ｙ ｆ ｏ ｐ ｏ ｅｎ ｈ ｄ ｏｙ ａ ｅ ｃ ｒｆ ａ ｉｎ ｒ ｔ ｉ ｙ ｒ ｌｓ ｔ ｅ ｔ ｉ ｔ ｉｃ ｏ
骤 繁琐 且所 花时 间较 长 。并 且 经试验 发 现 ：１ＯＣ ￣ Ｉ
量的测定已成为衡量机体胶原含量的一个重要指 标 ，影响组织胶原测定的主要 因素很多 ，如样 品 的重 量 、氧化 时 间 、显 色 温 度 、样 品 中盐 酸 浓 度 及对二氨基苯 甲醛 （ Ｄ Ｂ 的浓 度等 ，其 中胶 ＰＡ ）
维普资讯
乳与乳制 品中动物水解蛋 白鉴定方法
田艳 玲
（ 北京 市 理化 分析 测试 中心 ，国家食 品质量 安 全监督 检验 中心 ）
摘 要 ：动物水解蛋 白是利用皮革下脚料 等水解 制成 ，其 中的特 有成分 为 Ｌ一羟脯 氨酸 和羟赖氨 酸 ，且
羟脯氨酸的含量较高 ，达 １％ 以上 ，而大豆蛋 白与乳 蛋白中不 含有 此成分 。利用 这一特性就 可进行动物水解 ０
蛋 白质的鉴定 ，即通过对羟脯氨 酸的测定来鉴 定乳与乳制品 中是否添加 了动物水解蛋 白的成分 。
卫生部发布被滥用的食品添加剂及非法添加物名单
３ ２
镇 静 剂
猪 肉
参考 ＧＢ Ｔ ２ ７ ３ ２ ０ ／ ０ ６ ０ ６猪 肾 和肌 肉 组 织 中 乙酰 丙 嗪 、 丙 嗪 、 哌 氯 氟 啶 醇 、 酰 二 甲氨 基 丙 吩 噻 嗪 、 丙 甲苯 噻 嗪 、 阿扎 哌 垄 阿 扎 哌 醇 、 咔 唑心安残留量的测定 ， 液相 色谱一 串联质谱法无 ， 需要研制动物性 食品中测定安定的液相 色谱噌； 联质谱法
可能 添 加 的 食 品 品 种
１
吊白块
腐竹
、
粉丝 、 面粉 、 笋 竹
２
３ ４
苏丹红
王 金 黄 、 黄 块 蛋 白精
、
次 硫 酸氢 钠 的测 定 方 法 辣 椒粉 、 含辣椒类 的 食品 （ 椒酱 、 辣 辣昧调 味 Ｇ Ｔ １ ６１ ２ ０ ９ ８ － ０ ５食 品中苏丹 红染 料的检测 方法高效 液相 色 品） 谱法 腐 皮 乳 及 乳制 品 ＧＢ Ｔ ２ ３８ ２ ０ ／ ２８ ０ ８原 料 乳 与 乳 制 品 中 三 聚 氰 胺检 测 方 法 Ｇ Ｔ ２ ４０ Ｂ／ ２０ ２０ ０ ８原料乳 中三聚氰胺快速检测液相 色谱法
，
肾上腺素受体激动剂 类药物 （ 酸克 伦特 猪 肉、 盐 牛羊肉及肝脏等 罗 莱 克 多 巴胺 等 ）
，
２ ９
硝基 呋喃类药物
猪肉
、
禽 肉 、 物性 水产 品 动
国 农 业 会计 ２ １ －－ ０ － １ ６
文
摘
－ 鬻 爹 ０曼 鬻
３ ０ ３ １ 玉 米赤 霉 醇 抗 生素 残 渣 牛羊 肉及 肝 脏 、 牛奶 猪 肉
文
摘 ’
Байду номын сангаас
卫生部公布的食品中可能违法添加的47种非食用物质和易滥用的22种食品添加剂名单
卫生部公布的食品中可能违法添加的47种非食用物质和易滥用的22种食品添加剂名单表一食品中可能违法添加的非食用物质名单表二食品中可能滥用的食品添加剂品种名单四、对企业巡查工作的建议1•关注企业使用的各种复合香精、改良剂等添加剂。
食品安全法规定：食品添加剂应当有标签、说明书和包装。
标签、说明书应当载明本法第四十二条第一款第一项至第六项、第八项、第九项规定的事项，以及食品添加剂的使用范围、用量、使用方法，并在标签上载明食品添加剂”字样。
如标签上未标明其成分或无标签应要求企业停止使用。
依据《中华人民共和国食品安全法》第七十七条应查阅、复制进货台帐、生产记录等相关资料，当场封存此物品、在制品、库存品并将产品抽样送检。
2•关注生产现场无包装的不明物质。
不法企业在故意使用一些违规物质的时候，一般均会去除该物质的外包装，不存放在仓库，往往在其生产现场的角落可以见到没有任何标识的不明物质，如企业不能说明是何物质、作何用途，并无法提供相应证明的情况下，应依据《中华人民共和国食品安全法》第七十七条查阅、复制进货台帐、生产记录等相关资料，当场封存此物品、在制品、库存品并将产品抽样送检。
3•关注企业进货台账、销售台账及配料记录企业购买添加剂应当按照食品进货查验记录制度，如实记录食品添加剂的名称、规格、数量、生产批号、保质期、供货者名称及联系方式、进货日期等内容。
食品进货查验记录应当真实，保存期限不得少于二年。
巡查人员可以对进货台账、销售台账及配料记录进行抽查，核对其所用添加剂的品种、数量是否可以对应。
若发现有不对应，依据《中华人民共和国食品安全法》第七十七条复制相关资料，当场封存在制品、库存品并将产品抽样送检。
4. 关注企业添加剂的实际使用情况（1）注意称量用的计量器具的精度是否能满足要求，使用的方式是否合理。
（2 ）气温较高、湿度较大的春、夏季应加强对企业防腐剂使用情况的监督。
若发现有超剂量、超范围使用应当场封存在制品、库存品，登记相关记录并依据《中华人民共和国食品安全法》第四十六条、第八十六条对企业的违法行为进行处罚。
乳制品羟脯氨酸含量测定方法
乳制品中L－羟脯氨酸含量的测定方法1 范围本方法为乳制品中L-羟脯氨酸的测定方法。
本方法适用于乳制品中L-羟脯氨酸的测定。
3引用标准GB 9695.23-2008 肉与肉制品羟脯氨酸含量测定2 术语与定义乳制品中L-羟脯氨酸含量hydroxyproline content of foods在本方法规定的条件下测定的L-羟脯氨酸的含量。
L-羟脯氨酸含量用质量分数表示。
4原理用硫酸于105℃水解试样，释放出L-羟脯氨酸。
L-羟脯氨酸经氯胺T氧化后，与对二甲胺基苯甲醛反应生成红色化合物，在波长558nm处进行比色测定。
L-羟脯氨酸存在于动物胶、骨胶原或动物的结缔组织中。
水解动物蛋白(HAP)（Hydrolyzed animal protein ，中文别名：酶解胶原蛋白）中L-羟脯氨酸含量约为10%，对于乳与乳制品本身组成成分中不存在L-羟脯氨酸，但产品标准中有氮、蛋白质或氨基酸含量的规定的乳与乳制品，可通过本方法检测L-羟脯氨酸的含量并推算出动物水解蛋白的大体含量，可鉴别检验样品是否添加动物水解蛋白，以及动物水解蛋白的大体含量。
通过4 试剂如无特别说明，所用试剂均为分析纯。
水为蒸馏水或去离子水，或相同纯度的水。
4.1 硫酸溶液[c(H2SO4)≈3mol/L]量取750mL水于2L的烧杯中，在搅拌下缓慢加入320mL浓硫酸（ρ20=1.84g/mL）。
冷却到室温后转移至2L容量瓶中，用水定容。
4.2 缓冲溶液（pH=6.8）包括下列组分：a)26.0g一水柠檬酸（C6H8O7.H2O）；b)14.0g氢氧化钠；c)78.0g无水乙酸钠[Na(CH3CO2)]。
用500mL水溶解上述试剂并转入1L的容量瓶中，加入250mL正丙醇，用水定容。
该溶液于4℃暗处可稳定保存几周。
4.3 氯胺T溶液称取1.41g三水·N-氯-对甲苯磺酰胺钠盐（氯胺T），用100mL缓冲溶液（4.2）溶解。
临用时配制。
4.4 显色剂称取10.0g对二甲胺基苯甲醛，用35mL高氯酸溶液[60%(质量分数)]溶解，缓慢加入65mL 异丙醇。
乳和乳制品中动物水解蛋白鉴定——比色法测定L(-)-羟脯氨酸含量
ｈ ｄ ｏｙ ｅ ｔ 一）ｈ ｏ ｙ ｒ ｌ ｅａｔｒ６ｈｏ ｙ ｏｙ ｉ ａ ｙ ｌｚ ｄｉ ｏＬ（ 一ｒ ｘ ｐ ｏｉ ｆｅ ｆ ｄ ｌｓｓｔ １ ０℃． ｈ ｔｂ ｌｙ ｒｐ ｏ ｕ ｉｉｔ ｄ ｓ ｉｅｒｃ ｖ ｒ ｆ ｅ ｒ ｎ ｎ ｈｒ １ Ｔ ｅｓａ ｉｔ ， ｅ ｒ ｄ ｃｂｌ ｙａ ｐｋ ｅ ｏ ｅｙｏ ｉ ｉ ｎ ｈ ｔ
ｈ ｄ ｏｙ ｅ ｎｍａ ｒ ｔｉ ｒ ｓｎ ｌ ｎ ｌ ｒ ｄ ｃｓ Ｍｅｈ ｄ ： 一） ｏ ｙ ｒ ｌ ｅｗａ ｌａｅ ｏ ｓｍｐｅ ｅｔｄ ｙ ｒｌｚ ｄａ ｉ ｌ ｏｅｎｉ ｐｅ ｅ ｔｎｍｉ ａ ｄｍｉ ｐ ｏ ｕ ｔ． ｔｏ ｓ ｐ ｓ ｉ ｋ ｋ （ 一 ｘ ｐ ｏｉ ｓ ｅｅ ｓ ｄｆ ｍ ａ ｌｓ ｒａｅ Ｈｒ ｎ ｒ ｒ ｔ
（． 苏省产 品质量监督检验研究 院，江苏 南京 １ 江 摘
比色 法
２ ０ ２ ；２宿迁市产品质量监督检验所，江苏 宿迁 １０９ ．
２３ ０） ２ ８ ０
要 ： 目的：研究乳和乳制 品中动物 水解 蛋 白的鉴定方法 。通 过对 Ｌ 一 一 （ ） 羟脯氨酸 的检测来鉴定是否含有动物 水
解 蛋 白。方法 ：样 品经酸水 解 ，释放 出羟脯 氨酸 。经 氯胺 Ｔ氧 化 ，生成含 有吡 咯环 的氧 化物 。用 高氯酸破 坏过 量 的氯胺 Ｔ。羟脯 氨酸氧化物 与对 二 甲氨基苯 甲醛反应 生成 红色化合 物 ，在波 长 ５ ８ ｍ 处进 行 比色测定 。结果 ： ５ｎ 动物水解 蛋 白在 １ ＯＣ条件下水解 ６ Ｉ￣ ｈ后，能够充分水解 为 Ｌ 一 ． 脯氨酸 。以Ｌ 一 一 （ ）羟 （ ） 羟脯氨酸 为标样 ，比色 法测 定 乳制 品中 Ｌ 一 ． （ ） 羟脯氨酸含量 。该方法 的加 标回收率为 ９ ．％～ １ ４６ ９６ ０ ．％，满足分光光度法 分析方法 的实验需求 。 关键 词 ：动物 水解 蛋 白；Ｌ 一 一 脯氨 酸 ；水解 ； 比色 （ ）羟
乳制品中L-羟脯氨酸的测定
乳制品中L-羟脯氨酸的测定1 引言皮革水解蛋白是由皮革废料或动物皮毛、脏器等水解生成的一种蛋白粉，将其掺入牛奶或奶粉中可提高蛋白质的含量。
对于乳与乳制品中皮革水解蛋白的鉴定，主要是通过对L-羟脯氨酸含量的测定。
L-羟脯氨酸是胶原蛋白（皮革水解蛋白）特有的氨基酸，在乳酷蛋白中则没有，所以一旦检出，则可认为含有皮革水解蛋白，即为“皮革奶”。
本实验提供两种L-羟脯氨酸衍生方法，利用氨基酸分析柱，对L-羟脯氨酸进行分析检测，可根据实际情况进行选择。
2 仪器与试剂2.1 仪器、器皿2.1.1 HPLC+紫外检测器2.1.2 Diamonsil AAA氨基酸分析柱（CAT#: 99751）。
2.1.3 11 mL水解瓶（CAT#: 55354）2.1.4 1.5 mL塑料离心管。
2.1.5 20 mL玻璃具塞刻度试管。
2.1.6 5 mL玻璃具塞刻度试管。
2.1.7 0.22 μm针式过滤器（CAT#:37177）。
2.1.8 2 mL样品瓶（瓶：CAT#:5323，盖CAT#:5325）2.2 试剂2.2.1 甲醇（CAT#:50102）。
2.2.2 乙腈（CAT#:50101）2.2.3 正己烷（CAT#:50115）2.2.3 三乙胺（CAT#:50131）2.2.4 冰醋酸（CAT#:50132）2.2.5 三乙胺（CAT#:50131）2.2.6 磷酸氢二钠（CAT#:50158）2.2.7 磷酸二氢钠（CAT#:50157）2.2.8 L-羟脯氨酸（CAT#:46587）2.2.9 蛋白水解试剂：称取0.1 g苯酚置于100 mL容量瓶，加入50 mL浓盐酸（36%-38%，摩尔浓度约为12 mol/L），然后加水定容至100 mL。
2.2.10 0.1 mol/L HCl水溶液：量取8.3 mL浓盐酸，然后用纯水定容至1000 mL。
2.2.11 衍生剂PITC溶液：将250 μL异硫氰酸苯酯（PITC）用乙腈定容至10 mL。
氨基酸自动分析仪对乳制品中羟脯氨酸的测定方法研究
羟脯氨酸（ ｄｏ ｙ ｒｌ ｅＨ ｐ Ｈｙ ｒｘ ｐｏｉ ， ｙ ）又名 反式４ 羟 基 ｎ
．
响 ，Ｈ Ｌ 法 需要柱前衍生 ，反应操作复 杂，而氨基酸 ＰＣ 分析 仪法 中羟脯氨 酸与茚三酮反应后生 成黄色 产物 ， 在仪器 的第二通道波长４ ０ｎ ４ ｍ有最 大吸收 ，且保 留时
Ｌ 脯氨酸 ，分子式为Ｃ Ｈ Ｎ ３ ． ５ ９ ０ ，分子量 １ １１ ，是胶 原 ３． ３ 蛋 白所特 有 的氨基酸 ，在正常胶 原蛋 白中含量 约
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｅｓ ｐ ｒ ｔ ｎ ａ ｄａ ａｙ ｉ ｆ ｙ ｒ ｘ ｐ ｏ ｉ ｅ ｎ ｍｉ ｏ ｅ ｎ ｙ ｒ ｌｚ ｄａ ｉ ｌ ｒ ｔｉ ｒ ｓ ｒ ｈ ｄｂ ｍｉｏ ａ ｉ ｓｒ ｃ ： ｈ ａａ ｉ ｎ ｎ ｌ ｓｓ ｈ ｄ ｏ ｙ ｒ ｌ ｌ ｐ ｗｄ ｒ ｄｈ ｄ ｏ ｙ ｅ ｍａ ｏ ｅ ｗｅｅｒ ｅ ｃ ｅ ｙ ａ ｎ —ｃｄ ｅ ｏ ｏ ｎ ｉ ｋ ａ ｎ ｐ ｎ ｅａ ａ ａｙ ｅ ． ｅｍｅ ｏ ｓｃ ｎ ｅ ｉｎ ， ｃ ｕ ａｅａ ｄ ｐ ａ ｔ ａ， ｔ ｅ ｅ ｏ ｅｙ ｒｔ ｅ ｇ ９ ．％－１ ５％． ｎ ｌｚ ｒ Ｔ ｔ ｄｗａ ｏ ｖ ｎ ｅ ｔａ ｃ ｒ ｔ ｒ ｃｉ ｌｗｉ ｔ ｃ ｖ ｒ ｅ ｉ ４９ ￣ ０ ｈ ｈ ｎ ｃ ｈｈ ｒ ａ ｂｎ Ｋｅ ｒ ｓ Ｈｙ ｒ ｘ ｐ ｏ ｉ ｅ ａ ｎ — ｃｄ ａ ｔａ ａｙ ｅ ； ｙ ｒ ｌ ｚ ｉ ｌ ｏ ｌｇ ｎｐ ｏｅ ｓ ｙｗｏ ｄ ： ｄ ｏ ｙ ｒ ｌ ； ｍｉ ｏ ａ ｉ ｕ ｏ ｎ ｌ ｚ ｒ ｈ ｄ ｏｙ ｅ ａ ｍａ ｌ ｅ ｒ ｔｉ ｎ ｄ ｎ ｃ ａ ｎ
酮 显色剂 ：将 ２ ．７ｇ茚三酮溶于 １０ ６ ６ ０ ０ｍＬ乙二醇 甲 醚 中，加 入 ３ ３３ ３ ． ｍＬ 醋酸缓冲液 ，再加 入 ２ ３ ． ｍＬ ３ 三氯化钛 ，低温保存 。 １ 色谱条件 ． ２ 分离柱 ：２ ｌ ｄＸ ５ ｎ 不锈钢柱 ；交换树 脂 ６Ｔ ｎｉ ．１０ １Ｉ ． ｍｌ
食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单
关于印发《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（第一批）》的通知
食品整治办〔2008〕3号表1 食品中可能违法添加的非食用物质名单（第一批）
表2 食品加工过程中易滥用的食品添加剂品种名单（第一批）
关于印发《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种
名单（第五批）》的通知
整顿办函〔2011〕1号
附件1
食品中可能违法添加的非食用物质名单（第五批）
附件2
食品中可能易滥用的食品添加剂名单（第五批）
附件3
对前四批名单的补充和修改内容
关于公布食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单（第六批）的公告（卫生部公告2011年第16号）
食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单（第六批）
特此公告。
关于印发《食品中可能违法添加的非食用物质名单（第二批）》的通知食品整治办〔2009〕5号
食品中可能违法添加的非食用物质名单（第二批）
附件3：
食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（第三批）表1 食品中可能违法添加的非食用物质名单（第三批）
表2 食品加工过程中易滥用的食品添加剂品种名单（第三批）
对前三批名单的补充和修改内容。
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乳与乳制品中
动物水解蛋白鉴定
乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定
法
—L(-)-羟脯氨酸含量测定
羟脯氨酸含量测定法
1主题内容与适用范围
本方法规定了乳与乳制品制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定方法。
本方法适用于乳与乳制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定。
本方法通过对L(-)-羟脯氨酸含量的测定，可判定是否为动物水解蛋白。
2 引用标准
) --羟脯氨酸含量测定
L(--)
GB9695.23-90 肉与肉制品L(
3 原理
试样经酸水解,释放出羟脯氨酸。
经氯胺T氧化,生成含有吡咯环的氧化物。
用高氯酸破坏过量的氯胺T。
羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物,在波长558nm处进行比色测定。
4 试剂
所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或同等纯度的水。
4.1 氯化亚锡(GB638):0.75％溶液。
将氯化亚锡7.5g溶于500mL水中,再加入500ml浓盐酸(GB 622)。
4.2 盐酸(GB622):6mol/L溶液。
4.3 氢氧化钠(GB629);1mol/L、10mol/L溶液。
4.4 缓冲液:将50g柠檬酸,26.3g氢氧化钠和146.1g结晶乙酸钠(GB694)溶于水,稀至1L,此溶液与200mL水和300mL正丙醇混合。
4.5 氯胺T(HG3-972)溶液:将1.41g氯胺T,溶于10mL水中,依次加入10mL正丙醇和80mL缓冲溶液(用时现配)。
4.6 显色剂:称取10g对二甲氨基苯甲醛,用35mL高氯酸(GB623)溶解,缓慢加入65mL异丙醇。
4.7 L(-)-羟脯氨酸(C5H9NO3)标准溶液。
4.7.1 标准储备液500μg/mL:称取50.0mg/L(-)-羟脯氨酸用少量水溶解,加一滴6mol/L盐酸,定容至100mL容量瓶中。
4.7.2 标准工作液5μg/mL:吸取标准储备液
5.00mL于500mL容量瓶中,定容。
5 仪器和设备
5.1 实验室常规设备。
5.2 配有冷凝管的三角瓶:250mL。
5.3 恒温水浴。
5.4 试管加热器或水浴,可控温于60℃。
5.5 分光光度计。
6 试样处理：
6.1 方法1：准确称取样品2-5g（液体样品5-10g）放入250mL磨口三角瓶中。
加几粒沸石。
加入氯化亚锡溶液100mL,置于水浴上加热回流16h。
趁热将水解溶液过滤于200mL容量瓶中,用6moL/L热盐酸10mL反复三次冲洗三角瓶和滤纸,冷却,用水定容到刻度,混匀。
吸取5～25mL(V1)水解液于100mL烧杯中,用10mol/L、1mol/L氢氧化钠溶液调节pH为8±0.2,过滤于250mL容量瓶中,用30mL 水冲洗烧杯和滤纸上的氢氧化亚锡沉淀,反复三次,把洗液并入滤液中,以水洗至刻度,摇匀备用。
6.2 方法2：准确称取一定量样品，精确到0.0001g。
使样品蛋白质含量在10～20mg范围内；将称好的样品放于水解管中。
在水解管内加6mol/L盐酸10～15mL （视样品蛋白质含量而定）或加入12mol/L盐酸10～15mL，含水量高的样品（如牛奶）可加入等体积的浓盐酸，加入新蒸馏的苯酚（3.3）3～4滴，再将水解管放入冷冻剂中，冷冻3～5min，再接到真空泵的抽气管上，抽真空（接近0 psi），然后充入高纯氮气；再抽真空充氮气，重复三次后，在充氮气状态下封口或拧紧螺丝盖将已封口的水解管放在110±1℃的恒温干燥箱内，水解24h后（如加入12mol/L盐酸，水解时间可缩短至6h）后，取出冷却。
打开水解管，趁热将水解溶液过滤于100mL三角瓶中,用6moL/L热盐酸10mL反复三次冲洗试管和滤纸,冷却,用水定容到刻度,混匀。
吸取5～25mL(V1)水解液于100mL三角瓶中,用10mol/L、1mol/L氢氧化钠溶液调节pH为8±0.2,过滤于50mL容量瓶中,用水冲洗烧杯和滤纸上的氢氧化亚锡沉淀,反复三次,把洗液并入滤液中,以水洗至刻度,摇匀备用。
7 分析步骤
7.1 测定
7.1标准曲线的绘制
吸取L(-)-羟脯氨酸标准工作液0.00,10.00,20.00,30.00,40.00mL,分别置于100mL容量瓶中,定容摇匀。
浓度分别为0.0,0.5,1.0,1.5,2.0μg/mL。
取不同浓度的上述溶液4.00mL,分别加入20mL具塞试管中,加氯胺T溶液2mL,摇匀后于室温放置20min。
加入显色剂2mL,摇匀,塞上塞子于60℃试管加热器(或恒温水浴)中保温20min后取出,迅速冷却,在波长558±2nm处测定吸光值,绘制标准曲线。
7.2 试样测定
从待测液中吸取已制备好的样液4.00mL于20mL具塞试管中,以下按7.1步骤进行,同时作空白试验。
8 分析结果的计算
C·V1·A
计算公式: X= ───————×100
m×1000
式中:X——样品中L(-)-羟脯氨酸的含量,％;
C——从标准曲线上查得相应的L(-)-羟脯氨酸量,μg;
m——称取试样的质量,g;
V1——样液体积,mL。
A——稀释倍数
当符合允许差所规定的要求时,取两次测定结果的算术平均值作为结果,结果精确到0.01％。
9 允许差
同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过平均值的5％。
10 判定方法
因L(-)-羟脯氨酸为胶原蛋白中的特有组分，其含量占10%以上；而乳蛋白中不含有此成分，如若样品中含有L(-)-羟脯氨酸，可判定添加了动物水解蛋白。