标准血清效价测定
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标准血清效价测定
(一)凝集效价的测定
1.取小试管20 支,分两排放置于试管架上,前排标明 A ,后排标明 B ,再将各排由左而右注明号码。
2.各管均加生理盐水0.2 ml 。
3.吸取A 型被测血清0.2 ml ,加入A 排第1 管中,混匀,从第一管
中吸出0.2 ml 加入第2 管中,依次稀释至第10 管,从第10 管吸出
的0.2ml 弃掉,用同样的方法取B 型被测血清在B 排中稀释,最后两
排管的血清稀释倍数分别为1∶2 、1∶4 、1∶8 、1∶16 、1∶32 、1∶
64 、1∶128 、1∶256 、1∶512 、1∶1024 。
4.A 排管各加B 型2 %红细胞生理盐水悬液0.2ml;B 排管各加A 型
2 %红细胞生理盐水悬液0.2ml,混匀。
5.放置室温(18 ~22 ℃)1 ~2 小时观察结果,以稀释倍数最高而
又显凝集者为其凝集效价。上述操作过程见下表。
表 A 型标准血清(抗B)效价测定
表 B 型标准血清(抗A)凝集效价测定
如被测血清在第七管仍显凝集,则其凝集效价为1∶128 。如第八管仍显凝集则其凝集效价为1∶256 。O 型标准血清抗A 、抗B 的凝集效价测定,可参照上述
(二)标准血清的质量要求
A 型(抗B)效价应在1∶64 以上,
B 型(抗A)效价应在1∶128 以上,如果低于上述标准,不能使用。并要检查效价低的原因,重新制备,如果效价太高,可按效价规定加适量等渗盐水稀释。且不含其它血型抗体,不形成缗钱状的假凝集,冷凝集素效价<1∶4 。
(三)亲和力的测定
所谓亲和力是指标准血清与相对应的红细胞混合后出现的凝集速度及凝集块的大小而言。测定方法如下:
取待测血清0.1ml 放于玻片或瓷板上,取对应的10 %红细胞生理盐水悬液0.05 ml ,加于血清中混匀并涂成直径约1cm 的圆形,立即记时。观察出现凝集的时间。并继续转动玻片或瓷板,至3 分钟时观察凝集块的大小。标准血清亲和力的质量要求,在15 ~30 秒以内应出现凝集,3 分钟时凝集块应在1m- m2 以上,标准血清中不应含脂肪(脂肪可使效价迅速降低),不可污染细菌。