菊花组织培养
植物的组织培养-菊花
05
结论与展望
实验结论
组织培养技术成功应用于菊花繁殖，通 过无菌操作和适宜的培养条件，可以诱 导菊花愈伤组织形成和分化，进而获得
完整的植株。
实验结果表明，适宜的培养基和激素组 合对菊花组织培养具有显著影响，其中 MS培养基和适量的生长素与细胞分裂 素组合是最适合菊花组织培养的培养条
件。
此外，可以进一步优化培养条件和探索更高效的繁殖方法，提高菊花组织培养的效率和成功 率。同时，加强与其他学科的交叉研究，推动菊花组织培养技术的创新发展。
THANKS
感谢观看
培养过程与管理
总结词
控制适宜的培养条件并定期观察管理
VS
详细描述
适宜的培养条件是菊花组织培养成功的关 键因素之一。在培养过程中，需要控制适 宜的温度、湿度、光照、气体等条件，以 保证外植体的正常生长和发育。同时，需 要定期观察和管理，及时调整培养条件和 发现并解决问题，以确保组培的成功进行 。
04
根据所培养植物的种类和实验需求， 选择适宜的培养基配方。
根据培养基的类型和植物生长的需求， ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ整培养基的酸碱度。
制备培养基
按照所选培养基配方，精确称量各种 成分，按照规定的顺序加入，混合均 匀后进行灭菌处理。
培养条件及其控制
温度控制
光照控制
根据所培养植物的种类和生长阶段，保持 恒定的温度，以满足植物生长的需求。
药物等。
菊花的组织培养研究背景
菊花是中国传统名花之一，具有 丰富的品种和花色。
菊花的组织培养研究始于上世纪 80年代，随着技术的不断发展 和完善，已经实现了菊花的快速
繁殖和种质保存。
目前，菊花的组织培养技术已经 广泛应用于园艺、花卉产业等领
菊花组织培养方法(一)
菊花组织培养方法(一)菊花组织培养菊花是一种常见的观赏植物，而进行菊花组织培养可以促进菊花的繁殖和改良。
本文将详细介绍菊花组织培养的方法。
材料准备进行菊花组织培养需要以下材料：•菊花种子或植株•无菌的培养基•移液器•培养皿•剪刀和火柴（用于灭菌）菊花种子无菌播种法步骤1.对菊花种子进行消毒处理，将种子放在75%乙醇中浸泡5分钟，然后用无菌的蒸馏水洗净种子表面。
2.将种子放在培养皿内，培养皿事先用75%乙醇消毒并晾干。
加入适量无菌的培养基。
3.再将培养皿密封，放入25℃，避光昼夜温度（12小时黑暗+12小时光照）条件下培养。
菊花组织培养步骤1.将菊花叶片进行消毒处理，将新鲜的菊花叶片浸泡在75%酒精或无菌水中，然后用火进行消毒。
2.将叶片剪成小块，通常为直径0.5-1cm的圆形叶片。
3.将叶片置于含有植物生长激素的培养基中进行培养。
4.将培养皿密封，置于温度为25℃，避光昼夜温度（12小时黑暗+12小时光照）条件下培养。
菊花愈伤组织培养步骤1.将菊花叶片进行消毒处理，将新鲜的菊花叶片浸泡在75%酒精或无菌水中，然后用火进行消毒。
2.将叶片剪成小块，通常为直径0.5-1cm的圆形叶片。
3.将叶片置于含有高浓度植物生长激素的培养基中进行培养。
4.将培养皿密封，置于温度为25℃，避光昼夜温度（12小时黑暗+12小时光照）条件下培养。
总结菊花组织培养是一种重要的技术，可以促进菊花的繁殖和改良，实现优质菊花的生产。
通过菊花种子无菌播种法、菊花组织培养和菊花愈伤组织培养等方法，可以成功进行菊花组织培养。
注意事项•消毒操作必须严格进行，以避免在培养过程中产生污染。
•培养过程中要避免培养基表面的水分蒸发，应定时加入水分。
•培养过程中要避免光照强烈，以免影响菊花的正常生长。
•需要进行多次次的分离和传代，以保持菊花组织的纯度和优良性状。
结语通过本文的介绍，我们可以了解到菊花组织培养的方法以及注意事项，同时也能够意识到菊花组织培养在优质菊花的生产中的重要性。
菊花的组织培养课件(经典)
光照要求
每天光照时间应控制在12-16小时， 光照强度为2000-3000lx，以提供 充足的光照条件，促进菊花组织生 长和分化。
湿度控制
培养室内相对湿度应保持在70%80%之间，以防止培养物失水或过 度吸水。
营养液成分调整策略
01
02
03
大量元素调整
根据菊花生长需求，适时 调整营养液中氮、磷、钾 等大量元素的含量和比例。
课程结束后一周内提交。
报告格式
其他要求
采用书面形式，字数不少于1000字，需包 含标题、正文及结论等部分。
报告需真实反映学生的学习情况和自我感 受，不得抄袭或剽窃他人成果。
THANKS
感谢观看
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04
快速繁殖
利用组织培养技术可以快速繁 殖出大量优质种苗，满足市场
需求。
种质保存
通过组织培养技术可以长期保 存菊花的种质资源，避免种质
退化。
遗传转化
利用组织培养技术可以将外源 基因导入菊花细胞，实现遗传
转化和基因工程育种。
新品种选育
通过组织培养技术可以诱导菊 花产生变异，从中选育出优良
新品种。
考核内容
涵盖课程讲授的所有知识点，包括菊花的生物学特性、组织培养 的基本原理、技术操作等。
成绩评定
结合学生的出勤率、课堂表现、实验操作能力及考试成绩等多方 面因素进行综合评定。
学生自我评价报告提交要求
报告内容
提交时间
学生需对自己在课程学习过程中的表现进 行全面评价，包括知识掌握情况、实验将抗病虫害相关基因导入菊花
细胞，提高植株的抗病虫害能力。
06
总结回顾与课程考核要求
关键知识点总结回顾
菊花的组织培养
基因编辑
通过组织培养技术结合基因编辑技术， 可以对菊花的基因进行精确编辑，提 高菊花的抗性、产量和品质。
转基因技术
通过组织培养技术，可以将外源基因 导入菊花中，实现转基因菊花的培育， 为新品种的研发提供技术支持。
在育种上的应用
品种改良
通过组织培养技术，可以对菊花品种进 行改良，提高其抗性、产量和品质，满 足市场需求。
菊花组织培养
目录
• 引言 • 菊花组织培养的基本流程 • 影响菊花组织培养的因素 • 菊花组织培养的应用前景 • 菊花组织培养的挑战与展望 • 参考文献
01
引言
组织培养技术的简介
01
组织培养是一种通过人工模拟植 物体内环境，将植物的离体组织 或细胞培养成完整植株的技术。
02
该技术可用于快速繁殖、品种改 良、种质资源保存等方面，具有 高效、可控的特点。
织的生长和发育。
规模化生产
通过改进设备和工艺， 实现菊花组织培养的规
模化生产。
未来研究方向与展望
基因编辑技术的应用
利用基因编辑技术，定向改良菊花的某 些性状，提高其观赏价值和抗逆性。
种质资源保护与创新
通过组织培养技术，保存珍稀、濒危 的菊花种质资源，并进行创新利用。
次生代谢产物的生产
利用组织培养技术，生产菊花中的有 效成分，为医药、食品等领域提供原 料。
快速繁殖优良品种
01
02
03
快速繁殖
通过组织培养技术，可以 在短时间内快速繁殖出大 量优良品种的菊花，提高 生产效率和品质。
保持优良性状
组织培养繁殖的菊花能够 保持优良性状，避免传统 繁殖方式中优良性状的丢 失。
实现规模化生产
通过组织培养技术，可以 实现规模化生产，满足市 场需求，降低生产成本。
【高中生物】高中生物知识点：菊花的组织培养
【高中生物】高中生物知识点：菊花的组织培养菊花的组织培养：1.植物组织培养(1)原理：植物细胞具有全能性。
（2）方法：愈伤组织培养（固体培养基）和细胞悬浮培养（液体培养基）。
(3)基本过程① A代表一个孤立的组织、器官或细胞。
植物细胞具有全能性是它能被培养成D细胞的根本原因。
②b表示愈伤组织，它与a相比分化程度低，全能性高。
③ 如果a是花药，D是单倍体植株。
如果用秋水仙碱处理，可以获得染色体加倍的植株(4)操作流程MS固体培养基的制备：① 各种母液的配制→ 培养基的制备→ 绝育↓②培养基由大量元素、微量元素、有机成分组成③ 在菊花的组织培养基中，植物激素不可添加，因为它容易在短时间内培养外植体的消毒：用70％的酒精和0.1％的氯化汞溶液对外植体进行消毒↓接种：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种6-8块外植体。
外植体↓ 接种与细菌接种相似。
操作步骤相同，都需要无菌操作。
培养：接种后的锥形瓶应诙放在无菌箱中进行培养，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照↓移栽：将生根的苗从锥形瓶中移至消过毒的珍珠岩或蛭石中生活一段时间，苗健壮后再移至土中↓栽培2.示例：菊花组织培养（1）菊花的选材：未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
（2）过程：知识点拨：1.影响植物组织培养的因素：①不同植物组织培养的难易程度差别很大。
② 激素调节。
2、肉汤培养基以有机营养为主，ms培养基则需提供大量无机营养。
知识发展：1、植物激素与组织培养生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、去分化和再分化的关键激素。
它们的功能和特点如下：①在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
② 结果因使用顺序而异，如下所示：使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素它有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞分裂和分化同时使用分化频率增加③用量比例不同，结果也不同（2）在组织培养中，合成激素被用来代替天然激素，因为植物中有相应的酶分解天然激素，但没有相应的酶分解合成激素。
菊花的组织培养
实验具体操作过程
2、配置培养基 ①定容 ②调PH ③培养基的分装
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝
2、消毒
①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，并在流水下冲洗20min左右。
②酒精处理
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。
③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分， 放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min， 取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。
（三）接种
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消 毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟。
•观察时不打开封口膜 •手持锥形瓶锥形瓶观察时正握 •发现染菌外植体，及时转瓶，打开封口膜前先 高压蒸汽灭菌
三、课题延伸
1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季
无菌条件如何保证？Байду номын сангаас
需要保证无菌 条件步骤
关键操作
培养基及实验 •高压蒸汽灭菌 器材的灭菌 •灭菌干燥后直接拿到无菌操作台中
外植体的消毒 •酒精、升汞、无菌水彻底清洗
接种的 无菌操作
培养箱中的培 养
•始终在酒精灯旁进行 •每次使用器械后，都需要浸泡在95%的酒精中 •每次使用器械前，都需要用火焰灼烧灭菌 •操作过程中避免双手从培养皿上方移动 •每瓶内接种材料不宜过多
2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都 需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
专题3.1 菊花的组织培养
课题1 菊花的组织培养★课题目标1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力★课题重点植物组织培养过程中使用的无菌技术★课题难点植物组织培养过程中使用的无菌技术★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。
这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。
（二）进行新课1．基础知识知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题：1．1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题：1．3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。
1．4愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
〖思考2〗填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同：1．5植物组织培养的过程可简单表示为：活动2：阅读“影响植物组织培养的条件”，讨论并完成以下问题：1．6材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。
菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
〖思考3〗一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。
〖思考4〗选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述菊花是一种常见的观赏植物，其花朵色彩丰富，形态优美，深受人们喜爱。
为了研究菊花的生长发育规律以及促进其繁殖，进行菊花的组织培养实验是一种有效的方法。
本文将详细介绍菊花组织培养实验的设计。
一、实验材料准备1.1 选择适宜的菊花组织在进行菊花组织培养实验时，需要选择健康、无病虫害的菊花植株作为实验材料。
可以选择嫩芽、叶片或花蕾等组织进行培养。
1.2 准备无菌工作环境在进行组织培养实验时，需要准备无菌工作环境，包括无菌培养室、无菌操作台、无菌培养器具等，以确保实验的无菌条件。
1.3 配制培养基根据菊花组织培养的需要，可以选择适宜的培养基，如MS培养基、B5培养基等，并添加适当的植物生长调节剂，如激素等。
二、组织切割和接种2.1 组织切割将选取的菊花组织进行切割，保持组织的完整性，避免受损，以提高组织培养的成功率。
2.2 组织接种将切割好的菊花组织放入含有培养基的培养器具中，进行组织接种，确保组织与培养基充分接触，促进组织生长。
2.3 培养条件控制在组织接种后，需要控制培养条件，如光照、温度、湿度等，以促进组织生长和分化。
三、培养过程管理3.1 培养器具清洁在培养过程中，需要定期清洁培养器具，避免细菌和真菌的污染，影响组织的生长。
3.2 培养基更换随着培养时间的推移，培养基中的营养物质会逐渐耗尽，需要定期更换新的培养基，以维持组织生长所需的营养。
3.3 组织生长监测在培养过程中，需要定期观察和记录组织的生长情况，包括组织的形态、颜色、生长速度等，以及时调整培养条件。
四、组织分化和再生4.1 组织分化诱导通过调节培养基中植物生长调节剂的浓度和种类，可以诱导菊花组织进行分化，形成新的器官或植株。
4.2 再生植株培养对分化成功的组织进行再生培养，培养出新的植株，为菊花的繁殖提供新的途径。
4.3 植株移栽将再生的植株移栽到适宜的生长环境中，进行后续的生长观察和繁殖。
五、实验结果分析5.1 记录实验数据在实验过程中，需要详细记录实验数据，包括组织的生长情况、分化情况、再生植株数量等，以便后续的结果分析。
《菊花的组织培养》课件
菊花组织培养案例
菊花种子萌发的组织培养
利用组织培养技术，可实现菊花 种子取代传统方式萌发的目的。
菊花组织快速繁殖的组织 培养
通过组织培养技术，可以将菊花 的种子迅速繁殖，提高育种效率。
菊花细胞的悬浮培养
通过菊花细胞的悬浮培养技术， 可以在短时间内大量生产和收获 菊花组织。
常见问题及解决方案
1 细胞污染
《菊花的组织培养》PPT 课件
本课程将介绍如何进行菊花的组织培养。组织培养可以有效地促进植物生长 并获得质量更高的植物。让我们一起开始吧！
概述
什么是组织培养？
组织培养是指利用外界因素来控制细胞组织生 长、分化和发育的一种方法。
组织培养的意义
组织培养可用于繁殖难以育种的珍稀植物，也 可以研究细胞分裂及开发新品种等。
组织培养的发展趋势
未来的发展趋势是要提高组织培养技术的效率 和实用性，广泛应用于众多领域。
进行无菌操作可以避免细 胞污染，严格控制实验条 件。
2 培养基配制不当
按照具体的实验步骤制备 营养液，不同的植物需要 不同的培养基。
3 培养条件不合适
掌握适宜的环境温度、湿 度和通气量等因素，即可 提高菊花的培养成功率。
结语
菊花组织培养的应用前景
组织培养技术在植物学、农业及医学等领域有 广泛应用，将来有望推动更多领域的发展。
菊花的组织培养方法
1
材料准备
2
玻璃器皿、无菌培养基等实验用品。
3
培养基配制
பைடு நூலகம்
4
按照一定比例调配不同种类的营养物质，
如有机物、水、微量元素、激素等。
5
基本步骤
细胞分离、培养基配制、培养条件设置、 菊花细胞的悬浮培养等。
菊花常用的组培方法
菊花常用的组培方法菊花是一种重要的观赏植物，不仅具有美丽的花朵和丰富的品种，而且可以应用于药用和食用等多个领域。
为了满足人们对菊花苗种质的需求和加速菊花育种研究进程，组培技术被广泛用于菊花的育种和繁殖。
本文介绍了菊花常用的组培方法，帮助读者更好地了解菊花组培。
一、愈伤组织培养法愈伤组织培养法是菊花组培研究中最常用的方法之一，也是最基础的组培方法。
该方法是将菊花组织通过切割、去皮等手段形成小型的组织片段，再将其培养在含有适宜营养物质和生长激素的培养基中，让其形成小型愈伤组织并快速生长繁殖。
愈伤组织培养常用的培养基有MS、B5、N6等，最主要的激素为2,4-D、NAA、IBA、TDZ等。
在菊花愈伤组织培养过程中，应注意菌株选取、外植体处理、培养基配方、温度、光周期等因素的控制。
二、叶片和茎段组织培养法叶片和茎段组织培养法是将菊花的叶片或者茎段切割成小段，通过营养液或者培养基中适宜的生长激素刺激其生长而得到苗。
这种方法的最大优势是能够利用大量已有菊花株的组织进行繁殖，且培养的时间短。
这种方法同样需要注意菌株的选择、外植体的处理、培养基的配方等因素的控制。
三、花粉培养法花粉培养法是通过将菊花的花粉切割种植在含有营养物质的培养基上，让花粉萌发并生长为菊花幼苗的方法。
在花粉培养过程中，需要注意花粉的提取、消毒和筛选，以及培养基的配方和温度的控制。
四、微繁殖法微繁殖法是通过将菊花的细胞分化成愈伤组织细胞，再通过诱导分化为芽或根，将其形成小苗并逐步培育成成苗的方法。
此方法能够得到大量质量较高的菊花苗，而且操作简单，对于推广和产业化应用有很大的意义。
组培技术为快速育种和大规模生产高质量菊花苗提供了核心技术支持，应当得到更深入的研究和广泛的应用。
菊花组培技术在菊花栽培和育种应用中的优势已经得到了广泛认可。
虽然不同的组培方法略有差异，但基本原理是相似的，都是在营养基质中通过适宜生长激素的加入利用组织培养达到繁殖和育种的目的。
实验十二菊花的组织培养
实验十二菊花的组织培养背景知识1. 植物组织培养，即利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体进行培养，获得再生的完整植株或生产相关产品的技术。
植物组织培养广泛应用于植物快速繁殖、脱毒（脱除植物病毒）、种质资源保存、单倍体或多倍体育种、杂交、诱变等方面，也是遗传学、分子生物学等其他生物学科研究的一种基本技术。
2. 菊花，菊科菊属多年生草本，高60-150厘米。
茎直立，分枝或不分枝，被柔毛。
叶卵形至披针形，长5-15厘米，羽状浅裂或半裂，有短柄，叶下面被白色短柔毛。
头状花序直径2.5-20厘米，大小不一。
总苞片多层，外层外面被柔毛。
舌状花颜色各种。
管状花黄色。
对菊花进行组织培养，既可快速繁殖，又可使其脱毒而提高产量和品质。
活动目标1．基本目标（1）理解植物组织培养的原理。
（2）叙述组织培养过程中，植物从外植体发育到完整植株的变化过程。
（3）建立无菌概念，学习无菌技术。
（4）学习并尝试植物组织培养的技术与方法。
2．发展目标（1）体验严谨细致的生物学实验操作。
（2）感受科学技术在生产实践中的重要价值。
（3）通过审视自己动手操作的过程，总结分析实验成败原因。
实验准备1．实验原理（1）离体的植物器官、组织、细胞或原生质体，在无菌和人工控制的环境条件下，处于适当的培养基中，可以经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，形成完整植物体。
在植物组织培养的各个阶段中，植物激素的种类、用量、比例需进行适当调整已达成不同培养目标。
（2）无菌技术。
凡是暴露在（未经处理的）空气中的物体，曾经接触过自然水源的物体都是有菌的。
培养所用的培养基含有植物细胞生长所必需的各类营养物质，也使各种细菌、真菌易于滋生繁殖。
组织培养必须采用无菌技术，在取材、接种、培养的整个过程中，必须严格进行培养基和培养材料的灭菌，同时，严格进行无菌操作，防止污染。
2．材料、试剂、器具（1）材料：菊花，可进行生根培养的菊花试管苗。
高二生物 3.1菊花的组织培养
高二生物 3.1菊花的组织培养
5
应用领域
4、突变育种 采用组织培养可以直接诱变和筛 选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状 的品种。
5、基因工程 基因工程主要研究DNA的转导， 而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株 再生。
6、生物制品 有些极其昂贵的生物制品，如抗 癌首选药物--紫杉醇等，可通过组织培养方式生产。
高二生物 3.1菊花的组织培养
培养基配制(I)—母液配制：
按照MS培养基成分表, 配制分别配制培养基的
母液。 1、大量元素母液(10倍液)
分别称取10倍用量的各种大量无机盐，依次溶 解于大约800ml热的（60-80℃）蒸馏水中。（一 种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容 至1000ml后装入试剂瓶中，冰箱内贮存备用）。
3
离体（in vitro)条件下利用人工培养条件 在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整 植株的过程。
1958年，英国科学家Steward 等用胡萝 卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱 导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使 细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养 的技术程序奠定了基础。
高二生物 3.1菊花的组织培养
15
植物组织培养营养条件-培养基 (Culture Medium)
培养基是植物组织培养的重要基质。 培养基的成分主要可以分水、无机盐、 有机物、天然复合物、培养体的支持材 料等五大类。
高二生物 3.1菊花的组织培养
16
国际上流行的培养基有几十种，常 用的培养基有：
MS培养基、B5培养基、White培养基、 N6培养基、KM-8P培养基
③ 3-4周后完全形成愈伤组织状态（脱分化） 组织块失去色素
课题菊花的组织培养
是
。
答案：（1） aB Ab （2）纤维素酶 （3）聚乙二醇 （4）愈伤组织 （5）2 甲、乙两烟草品种旳花粉 48 AaBb 7/16
专题知识归纳
菊花旳组织培养
植物组 织培养
月季旳花药培养
概念：
原理：细胞旳全 基础：
能性
条 件 ： 脱分化
再分化
植物组织培养旳基本过 外植体
愈伤组织
胚状体
程：
外植体旳选择
• 2.你能说出MS培养基中多种营养物质旳作用吗？ 同专题2中微生物培养基旳配方相比，MS培养基 旳配方有哪些明显旳不同？
提醒：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所 必需旳无机盐；蔗糖提供碳源，同步能够维持细 胞旳渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生旳特殊营养需求。微生物培养基以有机 营养为主。与微生物旳培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物涉及植物生长 必须旳大量元素和微量元素两大类。
• 取甲乙两品种旳花粉分别培养成植株，将它们旳叶肉细胞制成原 生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放 到不小于800勒克斯光照下培养，成果有旳细胞团不能分化，有 旳能分化发育成植株。请回答下列问题：
• （1）甲、乙两烟草品种旳花粉旳基因型分别为 和 。
• （2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。
• 3．基因型为AaBb旳水稻（24条染色体）旳花药经过无菌操作， 接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。
• （1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成旳不规则旳细胞团，
愈伤组织形成中，必须从培养基中取得
和小分子有机
物等营养物质。
• （2）要增进花粉细胞分裂生长，培养基中应有
菊花的组织培养(审定)课件
REPORTING
• 菊花组织培养简介 • 菊花组织培养技术 • 菊花组织培养的步骤 • 菊花组织培养的优缺点 • 菊花组织培养的应用前景
目录
PART 01
菊花组织培养简介
REPORTING
WENKU DESIGN
组织培养的定义
01
组织培养是一种通过人工模拟植 物体内环境，将植物组织或细胞 培养成完整植株的技术。
基因工程与转基因植物
通过组织培养技术可以生产某些具有重要 价值的次生代谢产物，如药用植物的有效 成分等。
通过组织培养技术可以将外源基因导入植 物细胞或组织中，获得转基因植株，为植 物育种提供新的途径。
PART 02
菊花组织培养技术
REPORTING
WENKU DESIGN
材料的选取与处理
选取健康、无病虫害 的菊花植株作为外植 体来源，确保其遗传 稳定性。
抗病性强
通过组织培养，可以在短时间内大量繁殖菊花，大大缩短了繁 殖周期。
组织培养可以有效地保持菊花的优良性状，使得新繁殖的菊花 品种在形态、生长和开花等方面与原品种一致。
组织培养不受季节限制，可以在任何时间进行，使得菊花繁殖 更为灵活。
通过组织培养得到的菊花植株，抗病性强，生长健壮，易于管 理。
缺点
选择健康、无病虫害的菊花植株 ，采集生长旺盛的嫩茎或侧芽作
为外植体。
器具消毒
将实验器具、培养皿、玻璃瓶等彻 底清洗干净，并进行高温或紫外线 消毒，确保无菌操作。
培养基制备
根据实验需求，选择适宜的MS培养 基，添加适量的植物生长调节剂和 蔗糖，03
外植体接入
技术要求高
组织培养技术要求高， 需要专业的技术人员进 行操作，且设备投入较
菊花的组织培养精心设计
菊花的组织培养精心设计简介菊花是一种常见的花卉，具有丰富的花形和丰富的花色，备受人们喜爱。
为了满足市场对优质菊花的需求，培育高质量的菊花品种成为了菊花生产的重要环节之一。
本文将介绍菊花的组织培养技术，并提供一套精心设计的菊花组织培养方案。
菊花的组织培养技术菊花的组织培养是利用植物的组织细胞为材料，通过培养基和适当的生长条件，快速繁殖出大量相同的菊花植株。
菊花的组织培养可以有效地提高繁殖效率，加快新品种的选育速度，并且可以克服菊花育种中的某些难点。
菊花的组织培养步骤菊花的组织培养可以分为以下几个步骤：1.材料采集：选择器官发育完全的、无病虫害的菊花植株作为材料，从植株中切取茎段、芽鳞或叶片等组织细胞。
2.无菌处理：将采集到的材料进行表面消毒处理，以保证培养过程中无菌条件的要求。
3.培养基配置：根据菊花的生长需求，配置适宜的培养基，通常包括基本培养基、植物生长调节剂和营养物质等。
4.营养激素添加：根据不同的培养阶段，调整培养基中的营养激素种类和浓度，以促进组织分化和植株生长。
5.培养条件控制：菊花的组织培养需要适宜的光照、温度和湿度等条件，以确保培养过程的顺利进行。
6.观察和记录：定期观察培养过程中的植株生长情况和组织分化情况，并进行记录和分析。
菊花的组织培养方案为了提高菊花的组织培养效果，下面是一套精心设计的菊花组织培养方案：1. 材料采集：选择茎段为材料，茎段长度约为2-3厘米，要选取茎段顶部的生长点。
2. 无菌处理：将采集到的茎段进行外层消毒处理，可以使用75%酒精或次氯酸钠溶液进行浸泡消毒。
3. 培养基配置：本方案采用MS培养基，配方如下：•植物生长调节剂：添加0.3 mg/L的6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）和0.1 mg/L的NAA（萘乙酸）。
•pH值调节：将培养基的pH值调整至5.8-6.2。
4. 营养激素添加：根据不同的培养阶段，可以适当调整培养基中的营养激素浓度。
例如，在茎段分化阶段，可以增加6-BA的浓度，以促进茎段的分化生长。
31菊花的组织培养
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放 入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取 出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液.
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（三）接种 1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种 室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空 气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外 线照射20分钟
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菊花 组织 培养
本课题内容小结
基础知识
实验操作
植物体的 组织培养
影响组织培 养的因素
细胞分化 细胞全能性 组织培养过程 营养 激素 环境条件
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培40
作业：P36
1、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、 灭菌，并且要求无菌操作。
植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养 条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于 某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养 物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此 要进行严格的无菌操作。
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3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌. （二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝. 2、消毒
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右.
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② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗.
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（2）离体的植物组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花是一种常见的观赏植物，其组织培养技术可以用于繁殖、改良和保护菊花的优良品种。
本文将介绍菊花的组织培养实验设计，包括材料准备、培养基配方、组织处理方法、培养条件和观察指标等方面。
一、材料准备：1.1 菊花种子：选择健康、无病虫害的菊花种子，最好是来自于优良品种的种子。
1.2 培养基：根据菊花的生长需求，选择适合的培养基，如MS培养基、B5培养基等。
1.3 器具和试剂：准备无菌培养器具，如培养瓶、试管、无菌操作台等，以及无菌试剂，如植物生长调节剂、无菌蔗糖溶液等。
二、培养基配方：2.1 基本培养基配方：根据菊花的生长需求，配制适宜的基本培养基，包括无机盐、有机物质、维生素和植物生长调节剂等。
2.2 添加物质的调整：根据实验需要，可以对基本培养基进行添加物质的调整，如添加抗生素、蔗糖、染料等。
2.3 pH值的调节：调节培养基的pH值，使其适合菊花的生长需求，通常在5.5-6.5之间。
三、组织处理方法：3.1 种子消毒：将菊花种子进行表面消毒，以去除种子表面的细菌和真菌，常用的方法有浸泡消毒、酒精灯烧烤消毒等。
3.2 组织分离：将菊花的茎、叶、花等组织进行分离，通常采用无菌操作的方法，如剪刀切割、组织切片等。
3.3 组织接种：将分离得到的组织接种到培养基上，注意无菌操作，可以使用无菌针将组织块或组织片接种到培养基上。
四、培养条件：4.1 温度和光照：根据菊花的生长需求，设置适宜的温度和光照条件，通常在25-28摄氏度下，光照强度为3000-5000勒克斯。
4.2 湿度和通气：保持培养环境的湿度和通气条件，通常采用培养器具的盖子微开或使用无菌棉塞等方法。
4.3 培养周期：根据菊花的生长速度和实验需要，设置适宜的培养周期，通常为2-4周。
五、观察指标：5.1 菊花的生长情况：观察培养过程中菊花的生长情况，包括根系的生长、茎叶的发育和花朵的形成等。
5.2 组织的增殖情况：观察培养过程中组织的增殖情况，如组织的增长速度、组织的分化和再生能力等。
课件10：3.1 菊花的组织培养
(3)植物细胞表达全能性的条件：①离体状态；②一 定的营养物质；③植物激素；④其他适宜的外界条件(温 度、pH、氧气、光照、无菌等)。
B．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽
C．制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽
D．制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培
解析：植物组织培养的操作程序为“制备MS培养基→外植
体消毒→接种→培养→移栽→栽培”。接种后先培养再移
栽，最后是栽培。
核心要点一 植物组织培养的基本过程及影响因素
2．造成培养物污染的原因与处理
污染 种类
细菌污染
真菌污染
污染 原因
可能是由操作人员造成 的，如未戴口罩、接种 时说话、手未消毒或器 械灭菌不彻底等
可能是由植物材料 消毒不当引起的
处理 将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行 措施 高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清洗
[题组冲关]
3．关于生根的试管苗的移栽，下列说法错误的是
解析：植物组织培养需进行无菌操作，外植体要消毒，培 养基及其他器械要灭菌；经组织培养获得的幼苗需先移植 到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗 长壮后再移栽到土壤中；接种时要注意茎段的形态学上下 端，不能倒插。 答案：D
5．下列符合菊花组织培养基本步骤的是
(A )
A．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培
由根、茎、叶、花、 果实、种子组成
栽培
4．植物激素在植物组织培养过程中的作用
3.1菊花的组织培养
（二）影响植物组织培养的因素
3、不同植物激素使用顺序和使用量 生长素 细胞分裂素 植物激素中_______和___________是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性因素。 _______________、 植物激素的浓度 使用的先后顺序 _______________以及___________等，都会影响实 用量的比例 验结果。 ①不同植物激素使用顺序
上述个大的马铃薯、炫丽的菊花都 是利用植物的一块组织，甚至一个细胞 通过植物组织培养技术培养成的完整植 株。 运用这种技术： ①可以实现优良品种的快速繁殖， 保持遗传性状的一致 ②可以培养出大量不含病毒的幼苗， 提高作物的产量 ③可以实现花卉的连续生产，不受 开花季节的限制 ④· · · ···
科学研究表明，当植物细胞脱离了原 来所在植物体的器官或组织而处于离体状 态时，在一定的营养物质、激素和其他外 界条件的作用下，就可能表现出全能性， 发育成完整的植株。科学家用植物组织培 养的方法，已经把许多植物的离体的组织 或细胞，培养成了完整的植物体。 本课题中，我们将通过菊花组织培 养的实验来学习这一技术。
你听说过袖珍马铃薯吗？
为什么当年从市场上买回家的菊花开放 非常美丽、花瓣长、花朵大、花期特别长？
因为市场上销售的菊花多半是当年用菊花植 株的幼嫩茎扦插培育而形成，感染的病毒少，几 乎不影响菊花的生命活动。
从第二年开始为什么菊花的花瓣、花期逐渐 缩短，花朵与杭白菊相似？
随着种植时间的延长，菊花感染的病毒 增多，严重影响了菊花的生命活动。
（二）影响植物组织培养的因素
4、环境因素：
不同 不同的植物对各种条件的要求往往______。 如进行菊花的组织培养，一般将 pH控制在__________左右； 5.8 温度控制在__________ ； 18～22 ℃ 12h 并且每天用日光灯照射_____ 。
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愈伤组织的过程。
再分化 ：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，
又可以重新分化成根或芽等器官的过程。
愈伤组织 ：细胞排列疏松、无规则、高度液
泡化的无定形的薄壁细胞。
（二）植物组织培养的基本过程
切取 形成层
移栽
无菌 接种 培养室
脱分化
诱导愈伤组织 的形成
再化
试管苗的形成
（三）植物组织培养的理论基础---细胞全能性
4．温度、光照、pH的影响
温度： 大多数植物组织培养控制在23～27℃， 低于15℃时植物组织会表现生长停止； 高于35℃时对植物生长不利。 菊花的组织培养控制在18～22℃。 光照：菊花每日用日光灯照射12h。 pH： 不同植物对培养基最适pH的要求不 同，大多数控制在5～6.5。 菊花的组织培养控制在5.8左右。
乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁 酸（IBA）等。
作用：2，4－D有利于愈伤组织的生长； IAA、NAA、IBA有利于器官分化。
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－
BA）、玉米素（ZT）等。 作用：促进细胞的分裂与分化，其中KT能 明显促进芽的分化而抑制根的形成。
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）等
1、植物组织培养所利用的植物材料体积小、 抗性差，对培养条件的要求较高：
2、用于植物组织培养的培养基同样适合于某些 微生物的生长,微生物产生的代谢废物会毒害培养 的对象；培养物一旦受到微生物的污染，就会导 致实验前功尽弃；
因此要进行严格的无菌操作。
（二）外植体消毒
1、选材： 菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻 轻刷洗，刷洗后在 流水 下冲洗20min左右 体积分数 ② 酒精处理 为70％的 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入 酒精 中摇 动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水 中清洗
细胞分化是 否意味着细胞 中遗传物质的 改变？
遗传物质没有改变， 不同组织的细胞共同 来源于受精卵，经有 丝分裂产生。
3、细胞分化的实质
基因 在个体发育过程中，不同细胞中 遗传信息的执行情况不同即基因 的选择性表达的过程
A B C D E
A B C D E
AC B DE
A B C D E
A B C D E
③消毒液处理
取出后用 无菌吸水纸 吸干外植体表面的水分，放入 中1 －2min，取出后在 无菌水中至少清洗3次， 质量分数为 0.1％的氯化汞溶液 漂净消毒液
（三）接种
1、接种前用体积分数70%酒精擦拭工作台，点燃酒 精灯，所有操作在酒精灯旁边进行，每次使用器 械后都要灼烧灭菌 2、将装有培养基的锥形瓶整齐的排列在酒精灯左侧 ，将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成小段 （0.5-1cm） 3、左手持锥形瓶，右手拉开捆扎锥形瓶的绳子，并 将封口膜攥于右手手心，以避免封口膜接触瓶口 的一面被污染。左手持瓶，使瓶口旋转通过火焰 。 4、右手用镊子夹取菊花茎段，插入培养基中，不要 倒插，每瓶6-8块外植体，接种后，将封口膜重新 扎好。
结果分析与评价
2、配制培养基 ①（配制培养液 ） ②（ 调PH ） ③（培养基的分装 ） 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易， 因此不必添加植物激素 3、灭菌
分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌
在植物组织培养的过程中， 为什么要进行一系列的消毒、灭菌， 并且要求无菌操作？
人工种子
三、影响植物组织培养的因素
1、材料的种类、年龄及保存时间长短等 2、营养 3、植物激素 4、PH、温度、光照等条件
1、植物材料的选择
---直接关系实验的成败
①不同植物的组织培养难度不同 eg：烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
四、实验操作
制备MS固 体培养基
配制各种母液 配制培养基 灭菌
外植体消毒
接种
冲洗—酒精—无菌水冲洗— 氯化汞—无菌水冲洗至少三 次之上
培
养
栽
培
移
栽
（一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃ 保存配制好的培养基母液来制备
1、配制各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100 倍，常温保存 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可 按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩 倍数，计算用量
高度分化的动物体细胞的细胞 核有发育成完整个体的潜能
植物组织培养技术
动物的克隆技术
已经分化的细胞（核），仍然具有 发育成完整个体的潜能。 细胞全能性
思考
为什么已经分化的细胞具有全能性呢？
高度分化的细胞含有保持物种发育 所需要的全套基因
（四)植物组织培养的应用：
1、培育无病毒植株 2、大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗 烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料） 3、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差， 结子困难或发芽率低等问题） 4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 （受体细胞为植物细胞）
正常苗
污染苗
污染途径
1、外植体带菌
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
（五）移栽
1、打开封口膜
移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的 封口膜，让试管苗在培养间生长几日。一般放置在 20～25℃的遮荫环境中，适应5～7d。试管苗不萎蔫， 有新生长的趋势，便可移栽。
答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需 的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗 透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体 植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的 特殊营养需求。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养 不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混 合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大 类。
在无菌和人工控制条件下，将 离体的植物（ 器官、组织、细胞 ） 培养在人工配置的培养基上，给 予适宜的培养条件，诱导其脱分 化产生愈伤组织再分化形成丛芽 ，最终形成 完整的植株 。
又称：植物离体培养
关键词：
外植体、脱分化、再分化、愈伤组织
外植体 ：用于离体培养的植物器官或组织片段。 脱分化（或去分化）： 由高度分化的植物组织或细胞产生
在个体发育中，由一个或一种 细胞增殖产生的后代，在形态、 结构和生理功能上发生稳定性差 异的过程。
2、细胞分化的特点
4、普遍性
细胞分化发生在整个生命进程中。1、持久性 黑色素细胞在体外培养30多代后仍能合 成黑色素；离体培养的上皮细胞，始终保持 为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。 2、稳定性 造血干细胞 原红细胞 早幼红细 胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成 熟红细胞 死亡 3、不可逆性
蔗糖既是碳源也是调节渗透压的物质；维生素能 促进细胞分裂和诱导器官分化；甘氨酸是蛋白质 的组成成分，也是有机氮源。
D、植物激素：(生长素、细胞分裂素、 )赤霉素等
MS固体培养基成分及比例
萧县郝集中学
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同 专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基 的配方有哪些明显的不同？
作用：促进不定芽和幼株伸长。
激素的使用顺序、使用量及比例影响植物细胞
的发育方向：
使用顺序 先使用细胞分裂素后使用生长素 同时使用 使用比例 实验结果 细胞既分裂、也分化 分化频率高 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化
生长素
生长素 生长素
> <
细胞分裂素
细胞分裂素
3、植物激素的影响
常用植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉 素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分 化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用 呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物 细胞的发育方向
生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚
课题一 菊花的组织培养
学习目标：
掌握植物细胞的全能性，明确植物细胞体 现全能性的条件。 了解植物组织培养技术在生产中的应用。 熟悉植物组织培养的基本过程。 了解影响植物组织培养的各种因素。 掌握植物组织培养的基本技术。
一、知识回顾
1、细胞分化的概念
有丝分裂
受精卵
细 胞 分 化
红细胞
血红蛋白基因开启
合成血红蛋白 ( 肌动蛋白基因关闭 不合成肌动蛋白) 血红蛋白基因关闭 合成肌动蛋白 ( 肌动蛋白基因开启 不合成血红蛋白)
肌细胞
4、细胞分化的结果
细胞产生了不同种类的蛋白质 即出现了不同的结构和功能
二、基础知识
胚状体
离 体
愈伤组织
1958，美国，斯图 尔德
植物组织培养
（一）植物组织培养概念
2、清洗转移
用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒 的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间
3、移栽
幼苗长壮后，移栽到土壤中
珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发 的酸性熔岩，经急剧冷却而成 的玻璃质岩石，有弧形或圆形 裂隙，如珍珠的结构，所以被 命名为珍珠岩 。
蛭石是一种天然、无毒的矿物质， 在高温作用下会膨胀的矿物。它 是一种比较少见的矿物，属于硅 酸盐。
5、接种注意事项
①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70 ％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧 一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根 据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎 或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的 营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向： （ 形态学上端朝上，形态学下端朝下 ）不要倒插。茎 段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分