生理学实验报告蛙心灌流
蛙心生理实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 探究心脏节律性活动的生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取出并置于人工灌流液中,使其在一定时间内保持节律性收缩。
实验中,通过改变灌流液的成分,可以观察不同理化因素对心脏活动的影响,从而了解心脏生理活动的调节机制。
蛙心无营养性血管,离体后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验器材:蛙心夹、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、套管夹。
3. 生理信号采集系统、计算机。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心:取一只青蛙,双毁髓后背位置于蛙板上,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管,在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
2. 插管:用斯氏蛙心插管法,将蛙心夹插入心脏,并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。
3. 灌流:将蛙心置于任氏液中,开始灌流,调节灌流速度和压力,使心脏保持节律性收缩。
4. 观察与记录:观察心脏的收缩、舒张情况,记录心率和心搏曲线。
5. 改变灌流液成分:分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液,观察心脏活动的变化。
6. 分析与讨论:分析不同灌流液对心脏活动的影响,讨论心脏生理活动的调节机制。
五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中,心脏保持节律性收缩,心率为60-100次/分钟。
生理学实验报告_蛙心灌流_(2)
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性,了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中,通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质,同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中,可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件,观察心脏功能的改变,从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器:手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作:将蟾蜍置于蛙板上,用手术剪剪开胸腔,暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏,并连接灌流装置。
2. 灌流液准备:配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组:将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤:a. 对照组:灌流任氏液,观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组:灌流氯化钙溶液,观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组:灌流肾上腺素溶液,观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组:灌流乙酰胆碱溶液,观察心脏功能的改变。
5. 记录数据:观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等,并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组:心脏呈现规律的收缩和舒张,收缩幅度适中,频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组:心脏收缩幅度明显增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组:心脏收缩幅度增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组:心脏收缩幅度减小,频率减慢,收缩时间缩短,舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能,使收缩幅度增大、频率加快。
蛙心倒灌实验报告
一、实验目的1. 学习蛙心倒灌实验的操作方法。
2. 观察不同灌流液对蛙心活动的影响,探究理化因素对心脏功能的作用。
3. 了解心脏自律性、兴奋性和传导性的生理机制。
二、实验原理蛙心倒灌实验是生理学实验中常用的方法之一,通过将蛙心置于人工灌流液中,模拟心脏在体内的血液流动情况,观察不同灌流液对心脏活动的影响。
实验中,通过改变灌流液的成分和浓度,可以模拟心脏在不同生理和病理状态下的功能变化。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验仪器:蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液3. 实验试剂:NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、Na2HPO4、蒸馏水四、实验方法与步骤1. 将青蛙麻醉,背位固定于蛙板上。
2. 暴露心脏,用手术刀将心脏周围的大血管分离,并在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
3. 将蛙心夹固定在心脏的左心室,连接张力传感器。
4. 将心脏置于培养皿中,加入适量的任氏液。
5. 使用滴管向心脏的左心室注入0.65%NaCl溶液,观察心脏的收缩情况。
6. 分别加入2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液,观察心脏的收缩情况。
7. 记录不同灌流液对心脏收缩频率、幅度和节律的影响。
五、实验结果与分析1. 在0.65%NaCl溶液中,心脏保持正常的节律性收缩,收缩频率和幅度适中。
2. 将灌流液更换为0.65%NaCl溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微减小,说明细胞外液中缺乏Ca2+,导致心肌收缩力降低。
3. 向灌流液中加入2%CaCl2溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微加大,说明细胞外液浓度升高,Ca2+内流增加,心肌收缩力增强。
4. 向灌流液中加入1%KCl溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微加大,说明K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制,细胞外液中K+浓度升高,Ca2+内流减少,心肌的兴奋性降低。
蛙的生理实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习蛙的解剖结构,掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解神经和肌肉的兴奋、兴奋性,刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
3. 掌握蛙心灌流实验方法,观察心脏活动的影响因素。
二、实验原理1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备:蛙的坐骨神经和腓肠肌在生理条件下具有兴奋性和传导性,通过制备坐骨神经-腓肠肌标本,可以观察神经和肌肉的兴奋、兴奋性,刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
2. 蛙心灌流实验:离体心脏灌流实验是研究心脏生理功能的重要方法,通过改变灌流液的成分,可以观察其对心脏活动的影响,了解心脏的正常节律性活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、任氏液、生理盐水、剪刀、手术剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、套管夹、65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器:蛙类解剖台、显微镜、电生理实验系统、刺激器、数据采集系统、蛙心灌流装置。
四、实验方法与步骤1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备:(1)取青蛙一只,用生理盐水冲洗干净,左手握住蛙,使其背部向上。
(2)用眼科镊和剪刀在青蛙的坐骨神经和腓肠肌处剪开,分离出坐骨神经和腓肠肌。
(3)将坐骨神经和腓肠肌置于任氏液中,用玻璃分针轻轻拨动腓肠肌,观察肌肉收缩情况。
2. 蛙心灌流实验:(1)将青蛙的左心耳和左肺静脉用细线结扎,然后剪断,使心脏与体循环分离。
(2)将心脏置于蛙心灌流装置中,连接计算机采集系统和刺激器。
(3)将灌流液(任氏液)通过灌流装置注入心脏,观察心脏搏动情况。
(4)改变灌流液的成分,如加入肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等,观察心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备成功,腓肠肌在刺激下产生明显的收缩反应。
2. 蛙心灌流实验成功,心脏在灌流液的作用下保持节律性搏动。
生理学实验报告-蛙心灌流
实验名称:之五兆芳芳创作蛙类离体心脏灌流课程名称:生理学实验指导教师:龙天澄张碧鱼陈笑霞实验人:叶永锋08344031学院:陆地学院实验时间:2009年12月09日一、【目的要求】1、学习斯氏离体蛙心灌流法.2、了解心肌的生理特性.3、不雅察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏勾当的影响.二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的情况中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性勾当需要一个适宜的理化情况,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改动灌流液的某些成分,不雅察其对心脏勾当的作用.心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关.血钾浓度太高时(高于7.9mmol/L),心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降,表示为收缩力削弱、心动过和缓传导阻滞,严重时心脏可停搏于舒张期.血钙浓度升高时,心脏收缩力增强,太高可使心室停搏于收缩期.血钙浓度下降,心肌收缩力削弱.血中钠离子浓度的轻微变更,对心肌影响不明显,只有产生明显变更时,才会影响心肌的生理特性.肾上腺素可使心率放慢、传导放慢及心肌收缩力增强,乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反.三、【实验仪器】青蛙、经常使用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计较机收集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液.蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夹、0.65%NaCl、5%NaCI、2%CaCl2、1%KCl、1:5 000肾上腺素、1:10 000乙酰肌碱、300U/mL肝素.四、【办法与步调】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的办法流露心脏.仔细识别心脏周围的大血管(见右图).在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个别小时,结扎位置可靠上些).再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活扣备用.左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心标的目的将动脉上壁剪一斜口.选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm 高度)任氏液(内参加一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处拔出动脉圆锥(见右图).当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍撤退退却,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖标的目的推进,经主动脉瓣拔出心室腔内(于心室收缩时拔出,但不成插得过深,以免心室壁堵住套管下口).此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,标明操纵成功(不然需退回偏重新拔出).用滴管吸去套管中的血液,改换新鲜任氏液.稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同拔出的套管用双结扎紧(不得漏液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎线上方的血管.轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保存静脉窦与心脏的联系,使心脏离体(切勿损伤静脉窦).用任氏液频频冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液.保持套管内液面高度一致(1.5~2 cm),便可进行实验.(2)将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不成夹得过量,以免因夹破心室而漏液).再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连(如右图).注意:勿使灌流液滴到传感器上.调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中.2、实验不雅察(1)记实正常心搏曲线(2)改用0.65%NaCI溶液灌流,并作好加药标识表记标帜,不雅察心搏变更.待曲线氏插管装置出现明显变更时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标识表记标帜,并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常.注意:换液时切勿碰套管,以免影响描记曲线的基线,同时保持灌流液面一致(以下同).不雅察可得,NaCI溶液会阻遏心脏搏动.(3)向套管内加2~6滴5%NaCI(较细的套管需少加)溶液,作好加药记号,不雅察心搏曲线的频率及振幅变更.当曲线出现明显变更时,应立即吸去套管中的灌流液,并做好冲洗标※记,迅速用新鲜任氏液清洗2~3次,待心搏恢复正常.(4)同法向套管内参加1~3滴2%CaCI:溶液,不雅察并记实心搏曲线的变更.当出现明显变更时,立即改换任氏液,待心搏恢复正常(如果恢复迟缓,可多次冲洗).(5)向套管中加1—2滴1%KCl溶液,记实心搏曲线的变更.当心搏曲线变更时,同法改换灌流液,待心搏恢复正常.(6)同法记实套管中参加l~2滴的肾上腺素溶液(1:10 000)后心搏曲线的变更.(7)同法记实套管中参加1—2滴乙酰胆碱溶液(1:10 000)后心搏曲线的变更.3、实验结果与阐发将记实到的各段心搏曲线附在实验陈述中,计较给药前后曲线的频率、振幅和基线变更.丈量结果填入表中.五、【实验结果】1、正常博击曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图阐发:滴加0.65%NaCl溶液后,心跳削弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,由于灌注液中缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+削减,细胞质Ca2+浓度削减,心肌的收缩勾当也随之削弱.3、滴加5%NaCl溶液阐发:由于细胞外液中钠浓度差梯度的变更一般对心肌勾当影响不明显.因此上图的心率变更与图2滴加0.65%NaCl 溶液里变更其实不是很大,两个不合浓度的相同溶液作用机理是一样的,在此一不作过量相同阐发.但如果实验中滴加溶液顺序不一样,若先滴加5%NaCl.再滴加0.65%NaCl溶液,所得的心搏变更就不如图3那样明显了,收缩力仅出现很微弱的变更.4、滴加2%CaCl溶液阐发:细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用.[Ca2+] 0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均下降.[Ca2+] 0增高使Ca2+内流增多,因此慢反响细胞0期去极化放慢增强,传导性增高,而快反响细胞平台期缩短,有效不该期缩短,复极加快.Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强.[Ca2+] 0下降时,所引起的变更与高钙时相反.因此参加CaCl2后,心率削减、振幅削减,基线上移.5、滴加1%KCl溶液阐发:滴加1%KCl后的心搏曲线发明,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度逐渐下降,最后停止在基线处,即心脏停博于舒张状态.因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+削减,心肌的兴奋—收缩偶联进程削弱,心肌收缩力下降.所以心搏曲线振幅减小.6、滴加1:10000肾上腺素溶液阐发:滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大.其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强.另外,肾上腺素还有下降肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+互换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加快,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张进程明显增强.7、滴加1:10000乙酰胆碱溶液阐发:上图可示,蛙心收缩削弱,心率减慢,最后出现蛙心停止舒张阶段.其机理为:乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性,促使K+外流,将引起:1)窦房强细胞复极时K+外流增多,最大复极电位绝对值增大;Ik衰减进程削弱,自动除极速度减慢.这两方面因素导致窦房自律性下降,心率减慢.2)复极进程中K+外流增加,动作电位2、3期缩短,Ca2+进入细胞内削减,使心肌收缩削弱;另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道,削减Ca2+内流,进而使心肌收缩削弱.表一:各丈量结果比较表1改动灌流成分对蛙离体心脏勾当的影响六、1. 制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦.2 .上述各实验项目,一旦出现作用应立即用正常任氏液换洗,以免心肌受损,并且必须待心搏恢复正常前方能进行下一步实验.3. 温习心肌生物电的产生机制及各类离子对心脏勾当的影响.4. 尽量选用强健、体大的雄性蟾蜍,手术进程中注意庇护心脏,避免损伤.5. 实验中实时用任氏液冲洗心脏,待曲线恢复平稳后再进行下一步操纵.6. 每次改换任氏液都必须保持灌流液液面高度恒定,以免因灌流量变更而影响结果.7. 严格控制每次药品参加量,先加一滴,效果不明显再加一滴.8. 滴加药品和换取正常任氏液,须实时标识表记标帜,以便不雅察阐发.9. 吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用,不成混合使用,以免影响实验结果.【思考题】1. 离体蛙心制备好后,有时候馆内的液面上下移动很不明显,是何原因?如何处理?答:离体蛙心制备好后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张勾当而上下移动.其实质是:在心室收缩时,心室容积削减,室内压升高,将心室内的液体压入插管内,管内液面上升;在心室舒张的时候,心室容积增大,心室内压削减,将插管内液体吸入心室,管内液面下降.但是有时候蛙心插管内液面动摇不明显,其主要原因是:⑴插管内尖端出现血凝块.插管内液体不克不及顺畅的进出心室腔内.解决办法为用长吸管将血凝块吸出,在吸出血凝块后,应立即用新鲜任氏液换洗插管内液体几回,直至蛙心颜色变淡,插管内无血液和小血块为止.⑵插管尖端不在心室腔内,而是在心房或脉间结缔组织等地方.解决办法为将插管重新拔出心室,确定无误后,再结扎固定.⑶插管进入心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁.解决办法为将插管稍稍外提,使插管口正利益于心室腔内,且开口正对着液体喷射的轴流标的目的.⑷蛙心由于长期心肌失血,导致活气下降.解决办法为向插管内滴加少许肾上腺素或对其进行外加力使其起搏,使其勾当增强.⑸房室传导阻滞.在插管的操纵中,由于操纵失误,对心脏造成的损害过大,最后导致房室传导阻滞.由于这种伤害是不成逆转的,所以必须改换蛙心重做实验.2. 实验进程中,为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定?液面太高或太低会产生怎样的影响?答:在实验进程中,蛙心插管内液面高度产生变更,心脏收缩曲线会相应产生变更.心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响.插管液面高度所产生的压力,在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷,心室开始收缩的时候,此液体所产生的压力又成为心肌收缩时的后负荷.故高度的改动,进而引起的前后负荷的改动将改动心肌收缩的幅度和频率.当液面太高时.心缩曲线幅度将下降.因为太高的液面,将使心室前负荷超出了最适前负荷,将导致粗细肌丝过于疏远,而导致收缩的潜力削减,心肌收缩不再增加或下降.而类似的,太高的后负荷,也使心肌收缩的幅度和速度大大下降.而当液面太低时,心室收缩的幅度也会削减.因为前负荷太小,将导致粗细肌丝过于接近,而导致收缩的潜力削减,实际上,此时由于前负荷的削减导致心室收缩的效力的削减比前负荷增加而导致的还有明显.类似的,后负荷相应的削减也会导致心室收缩的削弱.所以,在实验中保持最适的液面高度.是取得较好实验结果的前提.3.各类离子成分改动蛙心收缩的原理是什么?答:由于心肌细胞生物电勾当和收缩进程与离子密切相关,因此,细胞外液中离子浓度升高或下降均会影响到心肌的电生理特性和收缩性.(1)钾离子的影响K+与静息电位的形成有关.细胞外液K +浓度[K+]0变更对心肌生理特性的影响较为庞杂.高钾:[K +]0轻度或中度增高时,膜内、外K+浓度差减小,静息电位绝对值减小,与阈电位差距缩短,因此,兴奋性增高. [K +]0显著升高时,由于静息电位绝对值减小过量(膜内达-55mV左右),Na+通道失活,因而兴奋性下降甚至消失.另外,还使0期去极化速度和幅度减小,传导性下降,导致兴奋传导减慢,甚至传导阻滞.此外,[K+]0增高还可提高膜对K+的通透性,加快K+外流,动作电位平台期缩短,因此,不该期缩短.此外由于平台期缩短,削减了Ca2+的内流,加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用,导致心肌收缩功效削弱;(2)钙离子的影响细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用.[Ca2+] 0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均下降.[Ca2+] 0增高使Ca2+内流增多,因此慢反响细胞0期去极化放慢增强,传导性增高,而快反响细胞平台期缩短,有效不该期缩短,复极加快.Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强.[Ca2+] 0下降时,所引起的变更与高钙时相反.(3)钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变更一般对心肌勾当影响不明显.只有当[Na+] 0明显增高时,膜内外钠的浓度差梯度增大,因此,快反响细胞Na+内流放慢,0期去极速度和幅度均增加,导致传导性和自律性增高.同时,Na+内流的增多促进细胞内Ca2+的外运使细胞内Ca2+浓度下降,因此,心肌收缩能力削弱.反之,当[Na+] 0下降,使心肌传导性和自律性下降,心肌收缩能力增强.八、【参考文献】【1】项辉,龙天澄等. 生理学实验指南[M]. 科学出版社, 2008 : 21- 38.【2】朱大年.生理学[M].人民卫生出版社,2008:6-8.。
蛙心灌流实验报告
蛙心灌流实验报告
实验目的,通过对蛙心进行灌流实验,观察心脏的生理反应,了解心脏的工作
原理。
实验材料和方法,实验所需材料包括蛙心、生理盐水、注射器、心电图仪器等。
首先将蛙心取出并清洗干净,然后将其放置在生理盐水中。
接着使用注射器将生理盐水注入蛙心,记录心脏的生理反应,并通过心电图仪器进行监测。
实验结果,在进行蛙心灌流实验的过程中,我们观察到蛙心在接受生理盐水灌
流后,心脏开始收缩和舒张,呈现出规律的跳动节奏。
通过心电图仪器的监测,我们可以清晰地看到心脏电活动的变化,进一步了解心脏的工作原理。
实验结论,蛙心灌流实验结果表明,心脏在接受生理盐水灌流后,能够正常地
进行收缩和舒张,保持正常的跳动节奏。
这一实验结果有助于我们深入了解心脏的生理功能,为进一步研究心脏疾病和治疗提供了重要的参考。
实验意义,蛙心灌流实验是生理学实验中常用的一种实验方法,通过对心脏的
灌流观察,可以帮助我们更好地理解心脏的工作原理和生理功能。
这对于心脏疾病的研究和治疗具有重要的意义,也为医学研究提供了重要的实验数据。
在本次实验中,我们通过对蛙心的灌流观察,获得了有益的实验结果,进一步
加深了对心脏生理功能的理解。
希望通过这一实验结果,能够为医学研究和临床实践提供有益的参考,为保护人类健康作出更大的贡献。
蛙心灌流实验实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技能,提高实验观察和分析能力。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。
通过离体蛙心灌流,可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。
实验中,利用任氏液作为灌流液,维持蛙心的正常生理活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。
2. 实验仪器:手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。
四、实验步骤1. 制备蛙心标本:将蟾蜍放入装有冰块的容器中,使其昏迷。
在蟾蜍背部剪一小口,暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
将心脏与动脉分离,用任氏液冲洗,置于蛙心夹上。
2. 连接实验装置:将蛙心夹固定于支架上,连接张力传感器和计算机采集系统。
将任氏液滴入培养皿中,用滴管控制液面高度。
3. 观察正常蛙心活动:打开计算机采集系统,观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。
4. 改变灌流液成分,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化:a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
c. 在灌流液中加入1%KCl溶液,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
f. 在灌流液中加入3%乳酸,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
5. 记录观察结果,分析实验现象。
五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后,心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小,表现为心跳频率和幅度降低。
蛙心灌流实验报告
蛙心灌流实验报告蛙心灌流实验报告引言:蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将溶液注入蛙心,观察其对心脏功能的影响,以研究心血管系统的生理和病理变化。
本实验旨在探究不同溶液对蛙心的影响,并从中得出相关结论。
实验材料和方法:1. 实验材料:蛙心、生理盐水、咖啡因溶液、酒精溶液、糖水溶液、酸性溶液。
2. 实验方法:将蛙心取出,用生理盐水清洗后,分别将不同溶液注入蛙心,并记录下观察到的变化。
实验结果与讨论:1. 生理盐水组:将生理盐水注入蛙心后,观察到心脏跳动平稳,无明显变化。
这表明生理盐水对蛙心的影响较小,不会引起明显的生理变化。
2. 咖啡因溶液组:将咖啡因溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动加快,并出现明显的兴奋状态。
咖啡因具有兴奋中枢神经系统和心血管系统的作用,因此可以加快心脏跳动。
3. 酒精溶液组:将酒精溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动减慢,并出现明显的抑制状态。
酒精具有抑制中枢神经系统和心血管系统的作用,因此可以减慢心脏跳动。
4. 糖水溶液组:将糖水溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动加快,并出现明显的兴奋状态。
糖水中的葡萄糖可以提供能量,激活心脏细胞,从而加快心脏跳动。
5. 酸性溶液组:将酸性溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动减慢,并出现明显的抑制状态。
酸性溶液会改变细胞内外的酸碱平衡,影响心脏细胞的正常功能,从而减慢心脏跳动。
结论:通过以上实验结果可以得出以下结论:1. 咖啡因具有兴奋心脏的作用,可以加快心脏跳动。
2. 酒精具有抑制心脏的作用,可以减慢心脏跳动。
3. 糖水中的葡萄糖可以提供能量,激活心脏细胞,从而加快心脏跳动。
4. 酸性溶液会改变细胞内外的酸碱平衡,影响心脏细胞的正常功能,从而减慢心脏跳动。
5. 生理盐水对蛙心的影响较小,不会引起明显的生理变化。
实验的局限性:1. 本实验仅使用了蛙心作为研究对象,结果可能不具有普遍性。
2. 实验中只考虑了溶液对心脏跳动的影响,未涉及其他心血管系统的参数。
生理学实验报告_蛙心灌流_(2)
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。
蛙心灌流实验报告
蛙心灌流实验报告实验报告:蛙心灌流实验实验目的:1. 了解蛙的心脏解剖结构及其生理特性;2. 掌握蛙心脏灌流的技术操作方法;3. 通过观察和记录实验结果,研究蛙心脏的生理功能。
实验原理:蛙心脏是一种三心室的心脏,左、右心房和右心室之间没有明显的分隔。
在正常情况下,蛙的心脏是按照一定的顺序进行收缩和舒张,完成心脏循环。
通过将生理盐水灌入蛙的心腔,可以模拟蛙的心脏循环过程,使心脏继续收缩和舒张。
实验材料:蛙、生理盐水、手术刀、缝合线、生理盐水注射器。
实验步骤:1. 用手术刀在蛙的腹部切开一小块皮肤,暴露心脏;2. 用手术刀小心地在蛙的心脏下切开一个小孔,用生理盐水注射器将生理盐水注入腔内;3. 观察心脏的收缩和舒张过程,并通过观察流入和流出的生理盐水量来评估心脏的功能;4. 实验结束后,用缝合线将心脏切开的部位缝合,然后将蛙恢复到原来的容器中。
实验结果:在实验过程中,我们观察到蛙心脏在收缩和舒张过程中有规律地推动生理盐水的流动。
正常情况下,心脏的收缩和舒张过程应该是有序的,流入和流出的生理盐水量应该是相等的。
实验结果显示,蛙心脏收缩和舒张过程正常,流入和流出的生理盐水量基本相等。
实验讨论:蛙心灌流实验是一种常用的生理实验方法,通过观察和记录心脏的生理功能,可以研究心脏的结构和功能。
实验中,我们灌流生理盐水来模拟心脏循环过程,这是比较接近真实情况的实验方法之一。
实验结果显示,蛙心脏有较好的收缩和舒张功能,流入和流出的生理盐水量相等,说明心脏的功能正常。
这与虽然虫是体型很小的生物,但它们的心脏结构和功能已经与人的心脏非常相似。
因此,蛙心灌流实验可以作为心脏生理学研究的重要工具之一。
总结:通过蛙心灌流实验,我们可以更深入地了解和研究心脏的结构和功能。
实验过程需要小心谨慎地操作,以确保实验的可靠性和准确性。
通过观察和记录实验结果,我们可以评估和分析心脏的生理功能,为进一步研究心脏疾病提供参考。
娃心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识,提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取离体后,采用人工灌流的方法,模拟心脏在体内的血液供应,观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中,常用的灌流液为任氏液,其中含有与心脏内环境相似的离子成分,如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度,可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料:蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法:(1)将蟾蜍处死,剥皮,暴露心脏,用蛙心夹固定心脏。
(2)将心脏的动脉插管,连接灌流管,并调整灌流速度。
(3)用生理盐水冲洗灌流管,使灌流液充满管内。
(4)观察心脏在任氏液中的正常活动,记录心率、振幅等指标。
(5)分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度,观察心脏活动的变化,记录心率、振幅等指标。
(6)对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动:心率适中,振幅适中,处于与内环境相似的任氏液中,蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度:当灌流液中Na+浓度降低时,心率减慢,振幅减小;当灌流液中Na+浓度升高时,心率加快,振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度:当灌流液中K+浓度升高时,心率加快,振幅增大;当灌流液中K+浓度降低时,心率减慢,振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度:当灌流液中Ca2+浓度升高时,心率加快,振幅增大;当灌流液中Ca2+浓度降低时,心率减慢,振幅减小。
五、结论与展望1. 结论:通过本实验,我们掌握了离体蛙心灌流的方法,观察到理化因素对蛙心活动的影响,进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望:本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中,我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响,如pH值、温度等,以深入了解心脏生理学的基本原理。
蛙心的实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官(蛙心)灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 了解心肌细胞在灌流过程中的生理反应。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取离体后,采用人工灌流的方法,保持其新陈代谢,使心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。
实验过程中,通过改变灌流液的成分,可以观察不同理化因素对蛙心活动的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、蛙心夹、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、任氏液、2%CaCl2、1% KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器:张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线。
四、实验步骤1. 准备实验材料,将青蛙双毁髓后背位置于蛙板上。
2. 按照实验步骤暴露心脏,并识别心脏周围的大血管。
3. 在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎,然后用蛙心夹固定心脏。
4. 将心脏置于任氏液中,连接张力传感器,观察心脏的节律性活动。
5. 分别用不同浓度的灌流液对心脏进行灌流,观察并记录心脏活动的变化。
6. 分别加入肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等药物,观察并记录心脏活动的变化。
五、实验结果与分析1. 在灌流过程中,心脏保持了节律性收缩,说明灌流液的成分接近蛙心的生理环境。
2. 当灌流液浓度改变时,心脏的收缩幅度、频率等生理指标也随之发生变化。
3. 加入肾上腺素后,心脏的收缩幅度和频率明显增加,说明肾上腺素具有增强心肌收缩力的作用。
4. 加入乙酰胆碱后,心脏的收缩幅度和频率明显降低,说明乙酰胆碱具有减弱心肌收缩力的作用。
5. 加入乳酸后,心脏的收缩幅度和频率明显降低,说明乳酸对心肌具有一定的抑制作用。
六、结论1. 蛙心灌流实验可以有效地观察理化因素对蛙心活动的影响。
2. 肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等药物对心肌具有明显的生理作用。
3. 本实验为进一步研究心肌生理学和药理学提供了实验依据。
蛙心灌流实验报告分析
蛙心灌流实验报告分析实验目的:本实验的目的是通过蛙心灌流实验,了解心脏在不同药物作用下的变化情况,进一步探究心脏药物治疗效果。
通过实验结果,总结出药物对心脏的影响机制,为心脏疾病的临床治疗提供理论依据。
实验设计:1. 实验材料准备:蛙心、药物溶液(如阿托品、乙酸胆碱等);2. 实验操作步骤:将蛙心从蛙身上切割下来,放置在培养基中,通过灌输不同药物溶液使心脏进行反应;3. 实验记录和测量:记录心脏在不同药物作用下的心率变化、收缩力变化等实验数据。
实验结果与分析:1. 药物A(阿托品)作用下,心率迅速增加,心脏收缩力减弱,心律失常加重;2. 药物B(乙酸胆碱)作用下,心率明显降低,心脏收缩力增强,心律规整;3. 药物C(多巴胺)作用下,心率适度增加,心脏收缩力增强,心律较为稳定。
结论:1. 阿托品对心脏的主要作用是抑制迷走神经的兴奋,从而使心率加快。
这也是阿托品常被用于治疗心脏病患者心率过慢的原因;2. 乙酸胆碱对心脏的主要作用是刺激迷走神经的兴奋,从而使心率减慢。
这也是乙酸胆碱被用于治疗心律过速的原因;3. 多巴胺对心脏的主要作用是增加心脏的收缩力,并同时对心率产生一定的影响。
这使得多巴胺常被用于治疗心力衰竭等心脏病。
讨论与展望:本次蛙心灌流实验通过模拟真实人体心脏反应,初步探究了不同药物对心脏的影响。
然而,在实际临床中,药物的作用往往会受到其他因素的调节和影响,例如患者的年龄、性别、基础疾病等。
因此,仅依靠蛙心灌流实验结果不能完全准确地预测药物在人体心脏中的效果。
为了更好地研究心脏药物治疗效果,未来可以结合体外模型和动物模型,进一步验证和分析不同药物对心脏的影响。
同时,开展临床试验,观察不同药物在疾病患者身上的实际疗效,加深对心脏药物作用机制的理解。
结语:通过蛙心灌流实验,我们可以初步了解不同药物对心脏的作用,为心脏疾病的治疗提供了一定的理论参考。
然而,我们仍需通过进一步研究和临床实践来验证和完善这些结论,为心脏病患者提供更加精确和有效的治疗方案。
机能实验报告蛙心(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解蛙心解剖结构及其功能。
2. 观察心脏搏动规律,掌握心脏搏动曲线的记录方法。
3. 掌握心脏灌流实验的基本原理和操作方法。
4. 分析灌流液成分对心脏搏动的影响。
二、实验原理心脏是人体循环系统的核心器官,主要负责泵血,维持血液循环。
蛙心作为实验材料,具有解剖结构简单、易于操作等优点。
心脏搏动曲线可以反映心脏搏动的规律和强度,通过观察和分析搏动曲线,可以了解心脏功能。
三、实验材料1. 实验动物:牛蛙2. 实验器材:蛙心夹,常用手术器械,生理信号采集系统,张力传感器,支架,双凹夹,培养皿,滴管,任氏液,秒表,棉线,套管夹,0.65%NaCl,2%CaCl2,1%KCl,1:10000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,3%乳酸。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心:取牛蛙一只,用刺蛙针通过枕骨大孔损毁脑和脊髓后,背位固定于蛙板上。
左手持有齿镊提起胸骨剑突下端的皮肤,用手术剪剪开一个小口,然后将剪刀由切口处伸入皮下,沿左、右两侧锁骨方向剪开皮肤。
将皮肤掀向头端,再用有齿镊提起胸骨剑突下端的腹肌,在腹肌上剪一口,将剪刀伸入胸腔(勿伤及心脏和血管)。
2. 蛙心夹夹持心脏:用蛙心夹夹住心脏的左心房和左心室交界处,将心脏固定在支架上。
3. 记录心搏曲线:将张力传感器连接到生理信号采集系统,将传感器放置在心脏表面,记录心脏搏动曲线。
4. 心脏灌流实验:按照以下步骤进行灌流实验:a. 以0.65%NaCl作为基础灌流液,观察心脏搏动曲线;b. 将灌流液更换为2%CaCl2,观察心脏搏动曲线;c. 将灌流液更换为1%KCl,观察心脏搏动曲线;d. 将灌流液更换为1:10000肾上腺素,观察心脏搏动曲线;e. 将灌流液更换为1:10000乙酰胆碱,观察心脏搏动曲线;f. 将灌流液更换为3%乳酸,观察心脏搏动曲线。
5. 观察并记录灌流液成分对心脏搏动的影响。
五、实验结果与分析1. 心脏搏动曲线记录结果显示,心脏搏动具有规律性,搏动曲线呈现周期性变化。
生理学实验报告-蛙心灌流
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。
蛙类系列实验报告(3篇)
第1篇摘要:本实验报告针对蛙类动物进行了一系列生理学实验,包括离体蛙心灌流实验和坐骨神经-腓肠肌标本制备实验。
通过这些实验,我们学习了蛙类动物的生理学特性,掌握了相关实验操作技术,并观察了不同刺激对蛙类心脏和肌肉的影响。
关键词:蛙类;生理学实验;离体蛙心灌流;坐骨神经-腓肠肌标本;刺激反应一、引言蛙类动物因其结构简单、生理功能明确、实验操作方便等特点,常被用作生理学实验的模型。
通过观察和分析蛙类动物的生理现象,我们可以深入了解人体生理功能及其调控机制。
本实验报告主要介绍了蛙类系列实验的过程、结果及分析。
二、离体蛙心灌流实验1. 实验目的- 学习离体蛙心灌流法。
- 观察Na+、K+、Ca2+及肾上腺素(Adr)、乙酰胆碱(ACh)、乳酸对离体心脏活动的影响。
2. 实验原理离体蛙心灌流实验是通过改变灌流液的成分,观察其对心脏活动的影响,从而了解心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性。
实验中,我们使用斯氏蛙心插管法,将离体蛙心置于适宜的环境中,通过改变灌流液的成分,观察心脏活动的变化。
3. 实验仪器青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
4. 实验方法与步骤(1)斯氏蛙心插管法:暴露心脏,识别心脏周围的大血管,穿一线于动脉圆锥下方,插入灌流管。
(2)灌流实验:将离体蛙心置于任氏液中,通过灌流管向心脏灌流,观察心脏活动。
(3)改变灌流液成分:分别加入不同浓度的Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸,观察心脏活动变化。
5. 实验结果与分析(1)Na+对心脏活动的影响:降低Na+浓度,心脏活动减弱;升高Na+浓度,心脏活动增强。
(2)K+对心脏活动的影响:降低K+浓度,心脏活动增强;升高K+浓度,心脏活动减弱。
生理学实验报告-蛙心灌流
真验称呼:之阳早格格创做蛙类离体心净灌流课程称呼:死理教真验指挥西席:龙天澄弛碧鱼陈笑霞真验人:叶永锋08344031教院:海洋教院真验时间:2009年12月09日一、【脚段央供】1、教习斯氏离体蛙心灌流法.2、相识心肌的死理个性.3、瞅察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对于离体心净活动的效率.二、【本理】将离体蛙心(得去神经支配的蛙心)脆持正在相宜的环境中,正在一定的时间内仍旧不妨脆持节律性中断,心净仄常的节律性活动需要一个相宜的理化环境,离体心净也是如许,离体心净摆脱了肌体的神经支配战齐身体液果素的间接效率,不妨通过改变灌流液的某些身分,瞅察其对于心净活动的效率.心肌细胞的自律性、镇静性、传导性及中断性,皆与钠、钾及钙等离子有闭.血钾浓度过下时(下于7.9mmol/L),心净镇静性、自律性、传导性及中断性皆下落,表示为中断力减强、心动过缓战传导阻滞,宽沉时心净可停搏于舒弛期.血钙浓度降下时,心净中断力巩固,过下可使心室停搏于中断期.血钙浓度落矮,心肌中断力减强.血中钠离子浓度的沉微变更,对于心肌效率不明隐,惟有爆收明隐变更时,才会效率心肌的死理个性.肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌中断力巩固,乙酰胆碱则与肾上腺素的效率好异.三、【真验仪器】青蛙、时常使用脚术器械、蛙板(大概蜡盘)、蛙心夹、估计机支集系统、弛力传感器、支架、单凸夹、单针形露丝刺激电极、滴管、培植皿(大概小烧杯)、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液.蛙心套管(斯氏套管大概八木氏套管)、套管夹、0.65%NaCl、5%NaCI、2%CaCl2、1%KCl、1:5 000肾上腺素、1:10 000乙酰肌碱、300U/mL肝素.四、【要领与步调】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,单毁髓后背位子于蜡盘中,按前里的要领表露心净.小心辨别心净周围的大血管(睹左图).正在左主动脉下圆脱一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位子稳当上些).再从安排二主动脉下圆脱一线,并挨一活结备用.左脚提起主动脉上的结扎线,左脚用眼科剪正在结扎线下圆、沿背心目标将动脉上壁剪一斜心.采用大小相宜的蛙心套管,而后将衰有少量(套管内2~3 cm下度)任氏液(内加进一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山启心处拔出动脉圆锥(睹左图).当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍退却,使尖端背动脉圆锥的背部后下圆及心尖目标促成,经主动脉瓣拔出心室腔内(于心室中断时拔出,然而不可插得过深,免得心室壁堵住套管下心).此时可睹套管中血液冲人套管,并使液里随心净搏动而亡下移动,标明支配乐成(可则需退回偏偏沉新拔出).用滴管吸去套管中的血液,调换新陈任氏液.宁静住套管后,沉沉提起备用线,将左、左主动脉连共拔出的套管用单结扎紧(不得漏液),再将结线牢固正在套管的小玻璃钩上,而后剪断结扎线上圆的血管.沉沉提起套管战心净,瞅浑静脉窦的位子,于静脉窦下圆剪断有牵连的构制,仅死存静脉窦与心净的通联,使心净离体(切勿益伤静脉窦).用任氏液反复浑洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液.脆持套管内液里下度普遍(1.5~2 cm),即可举止真验.(2)将插佳离体心净的套管牢固正在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多,免得果夹破心室而漏液).再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与弛力传感器贯串(如左图).注意:勿使灌流液滴到传感器上.安排隐现器上心净中断直线的幅度适中.2、真验瞅察(1)记录仄常心搏直线(2)改用0.65%NaCI溶液灌流,并做佳加药标记表记标帜,瞅察心搏变更.待直线氏插管拆置出现明隐变更时,坐时吸去套管中的灌流液,共时干佳浑洗标记表记标帜,并用新陈任氏液荡涤2—3次,待心搏回复仄常.注意:换液时切勿碰套管,免得效率描记直线的基线,共时脆持灌流液里普遍(以下共).瞅察可得,NaCI溶液会阻拦心净搏动.(3)背套管内加2~6滴5%NaCI(较细的套管需少加)溶液,做佳加药暗号,瞅察心搏直线的频次及振幅变更.当直线出现明隐变更时,应坐时吸去套管中的灌流液,并干佳浑洗标※记,赶快用新陈任氏液荡涤2~3次,待心搏回复仄常.(4)共法背套管内加进1~3滴2%CaCI:溶液,瞅察并记录心搏直线的变更.当出现明隐变更时,坐时调换任氏液,待心搏回复仄常(如果回复早缓,可多次浑洗).(5)背套管中加1—2滴1%KCl溶液,记录心搏直线的变更.当心搏直线变更时,共法调换灌流液,待心搏回复仄常.(6)共法记录套管中加进l~2滴的肾上腺素溶液(1:10 000)后心搏直线的变更.(7)共法记录套管中加进1—2滴乙酰胆碱溶液(1:10 000)后心搏直线的变更.3、真验截止与分解将记录到的各段心搏直线附正在真验报告中,估计给药前后直线的频次、振幅战基线变更.丈量截止挖进表中.五、【真验截止】1、仄常博打直线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分解:滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减强,那是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,由于灌注液中缺累Ca2+,以致心肌细胞动做电位2期内流Ca2+缩小,细胞量Ca2+浓度缩小,心肌的中断活动也随之减强.3、滴加5%NaCl溶液分解:由于细胞中液中钠浓度好梯度的变更普遍对于心肌活动效率不明隐.果此上图的心率变更与图2滴加0.65%NaCl 溶液里变更本去不是很大,二个分歧浓度的相共溶液效率机理是一般的,正在此一不做过多相共分解.然而如果真验中滴加溶液程序纷歧样,若先滴加5%NaCl.再滴加0.65%NaCl溶液,所得的心搏变更便不如图3那样明隐了,中断力仅出现很微小的变更.4、滴加2%CaCl溶液分解:细胞中Ca2+正在细胞膜上对于Na+内流有比赛性压制效率,称为膜屏障效率.[Ca2+] 0删下时,Na+内流受压制,细胞0期除极速度与幅度减小,使镇静性及传导性均落矮.[Ca2+] 0删下使Ca2+内流删加,果此缓反应细胞0期去极化加快加强,传导性删下,而快反应细胞仄台期支缩,灵验不该期支缩,复极加速.Ca2+内流删加,使心肌中断本领巩固.[Ca2+] 0落矮时,所引起的变更与下钙时好异.果此加进CaCl2后,心率缩小、振幅缩小,基线上移.5、滴加1%KCl溶液分解:滴加1%KCl后的心搏直线创制,直线的频次渐渐减小,愈去愈疏,幅度渐渐下落,终尾停止正在基线处,即心净停博于舒弛状态.果为当细胞K+浓度删下时,K+与Ca2+有比赛性拮抗效率,K+压制细胞膜对于Ca2+的转运,使加进细胞内Ca2+缩小,心肌的镇静—中断奇联历程减强,心肌中断力落矮.所以心搏直线振幅减小.6、滴加1:10000肾上腺素溶液分解:滴加肾上腺素后,蛙心中断巩固,心净舒弛真足,描记的心搏直线幅度明隐删大.其效率机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体分离,普及心肌细胞战肌浆网膜Ca2+通透性,引导肌浆中Ca2+浓度删下,使心肌中断巩固.其余,肾上腺素另有落矮肌钙蛋黑与Ca2+亲战力,督促肌钙蛋黑对于Ca2+的释搁速率减少,普及肌浆网膜摄与Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+接换,使复极期背细胞中排出Ca2+的效率加速,那样,将使心肌舒弛速度删快,所有舒弛历程明隐巩固.7、滴加1:10000乙酰胆碱溶液分解:上图可示,蛙心支紧缩强,心率减缓,终尾出现蛙心停止舒弛阶段.其机理为:乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体分离,一圆里普及心肌细胞膜K+通讲的通透性,督促K+中流,将引起:1)窦房强细胞复极时K+中流删加,最大复极电位千万于值删大;Ik衰减历程减强,自动除极速度减缓.那二圆里果素引导窦房自律性落矮,心率减缓.2)复极历程中K+中流减少,动做电位2、3期支缩,Ca2+加进细胞内缩小,使心肌支紧缩强;另一圆里乙酰胆碱可间接压制Ca2+通讲,缩小Ca2+内流,从而使心肌支紧缩强.表一:各丈量截止比较表1改变灌流身分对于蛙离体心净活动的效率六、1. 制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦.2 .上述各真验名目,一朝出现效率应坐时用仄常任氏液换洗,免得心肌受益,而且必须待心搏回复仄常后圆能举止下一步真验.3. 复习心肌死物电的爆收体制及百般离子对于心净活动的效率.4. 尽管采用结实、体大的雄性蟾蜍,脚术历程中注意呵护心净,预防益伤.5. 真验中即时用任氏液浑洗心净,待直线回复稳固后再举止下一步支配.6. 屡屡调换任氏液皆必须脆持灌流液液里下度恒定,免得果灌流量变更而效率截止.7. 庄重统制屡屡药品加进量,先加一滴,效验不明隐再加一滴.8. 滴加药品战换与仄常任氏液,须即时标记表记标帜,以便瞅察分解.9. 吸滴瓶中的任氏液战吸蛙心套管内溶液的吸管应区别博用,不可殽杂使用,免得效率真验截止.【思索题】1. 离体蛙心制备佳后,奇尔间馆内的液里上下移动很不明隐,是何本果?怎么样处理?问:离体蛙心制备佳后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的中断战舒弛活动而上下移动.本去量是:正在心室中断时,心室容积缩小,室内压降下,将心室内的液体压进插管内,管内液里降下;正在心室舒弛的时间,心室容积删大,心室内压缩小,将插管内液体吸进心室,管内液里下落.然而是奇尔间蛙心插管内液里动摇不明隐,其主要本果是:⑴插管内尖端出现血凝块.插管内液体不克不迭顺畅的出进心室腔内.办理要领为用少吸管将血凝块吸出,正在吸出血凝块后,应坐时用新陈任氏液换洗插管内液体频频,直至蛙心颜色变浓,插管内无血液战小血块为止.⑵插管尖端不正在心室腔内,而是正在心房大概者脉间结缔构制等场合.办理要领为将插管沉新拔出心室,决定无误后,再结扎牢固.⑶插管加进心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁.办理要领为将插管稍稍中提,使插管心正佳处于心室腔内,且启心正对于着液体喷射的轴流目标.⑷蛙心由于少久心肌得血,引导活力下落.办理要领为背插管内滴加少许肾上腺素大概者对于其举止中加力使其起搏,使其活动巩固.⑸房室传导阻滞.正在插管的支配中,由于支配错误,对于心净制成的益伤过大,终尾引导房室传导阻滞.由于那种伤害是不可顺转的,所以必须改换蛙心沉干真验.2. 真验历程中,为什么必须脆持蛙心插管内液里下度的恒定?液里过下大概过矮会爆收何如的效率?问:正在真验历程中,蛙心插管内液里下度爆收变更,心净中断直线会相映爆收变更.心肌支缩幅度战速度受到前背荷战后背荷的效率.插管液里下度所爆收的压力,正在心室舒弛期终期相称于心肌的前背荷,心室启初中断的时间,此液体所爆收的压力又成为心肌中断时的后背荷.故下度的改变,从而引起的前后背荷的改变将改变心肌中断的幅度战频次.当液里过下时.心缩直线幅度将落矮.果为过下的液里,将使心室前背荷超出了最适前背荷,将引导细细肌丝过于疏近,而引导中断的后劲缩小,心肌中断不再减少大概下落.而类似的,过下的后背荷,也使心肌中断的幅度战速度大大下落.而当液里过矮时,心室中断的幅度也会缩小.果为前背荷过小,将引导细细肌丝过于靠近,而引导中断的后劲缩小,本量上,此时由于前背荷的缩小引导心室中断的效力的缩小比前背荷减少而引导的另有明隐.类似的,后背荷相映的缩小也会引导心室中断的减强.所以,正在真验中脆持最适的液里下度.是博得较佳真验截止的前提.3.百般离子身分改变蛙心中断的本理是什么?问:由于心肌细胞死物电活动战中断历程与离子稀切相闭,果此,细胞中液中离子浓度降下大概落矮均会效率到心肌的电死理个性战中断性.(1)钾离子的效率K+与静息电位的产死有闭.细胞中液K +浓度[K+]0变更对于心肌死理个性的效率较为搀纯.下钾:[K+]0沉度大概中度删下时,膜内、中K+浓度好减小,静息电位千万于值减小,与阈电位好异支缩,果此,镇静性删下. [K+]0隐著降下时,由于静息电位千万于值减小过多(膜内达-55mV安排),Na+通讲得活,果而镇静性落矮以至消得.其余,还使0期去极化速度战幅度减小,传导性落矮,引导镇静传导减缓,以至传导阻滞.别的,[K+]0删下还可普及膜对于K+的通透性,加速K+中流,动做电位仄台期支缩,果此,不该期支缩.别的由于仄台期支缩,缩小了Ca2+的内流,加上细胞中K+与Ca2+正在膜上有比赛性压制效率,引导心肌中断功能减强;(2)钙离子的效率细胞中Ca2+正在细胞膜上对于Na+内流有比赛性压制效率,称为膜屏障效率.[Ca2+] 0删下时,Na+内流受压制,细胞0期除极速度与幅度减小,使镇静性及传导性均落矮.[Ca2+] 0删下使Ca2+内流删加,果此缓反应细胞0期去极化加快加强,传导性删下,而快反应细胞仄台期支缩,灵验不该期支缩,复极加速.Ca2+内流删加,使心肌中断本领巩固.[Ca2+] 0落矮时,所引起的变更与下钙时好异.(3)钠离子的效率细胞中液中钠浓度好梯度的变更普遍对于心肌活动效率不明隐.惟有当[Na+] 0明隐删下时,膜内中钠的浓度好梯度删大,果此,快反应细胞Na+内流加快,0期去极速度战幅度均减少,引导传导性战自律性删下.共时,Na+内流的删加促进细胞内Ca2+的中运使细胞内Ca2+浓度落矮,果此,心肌中断本领减强.反之,当[Na+] 0落矮,使心肌传导性战自律性落矮,心肌中断本领巩固.八、【参照文件】【1】项辉,龙天澄等. 死理教真验指北[M]. 科教出版社, 2008 : 21- 38.【2】墨大年.死理教[M].群众卫死出版社,2008:6-8.。
挖心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心肌细胞自律性、兴奋性、传导性及收缩性的相关生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是生理学中常用的实验方法,通过将蛙心取离体后,采用人工灌流的方法,模拟心脏在体内的生理环境,使心脏在一定时间内保持节律性收缩和舒张。
实验过程中,通过改变灌流液的成分,观察其对心脏活动的影响,从而了解心肌细胞在不同理化环境下的生理特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、常用手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器:手术显微镜、秒表、移液器、分析天平、培养箱、恒温器等。
四、实验方法与步骤1. 蛙心插管法:取一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,暴露心脏周围的大血管。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
将心脏取出,放入培养皿中,用任氏液洗净血液。
2. 蛙心固定:用棉线将心脏的主动脉和肺动脉结扎,固定在支架上。
3. 蛙心灌流:将蛙心夹在蛙心夹上,连接张力传感器和计算机采集系统。
将灌流液滴入蛙心夹中,调整灌流速度,使心脏保持节律性收缩和舒张。
4. 观察与记录:观察心脏的收缩幅度、节律、心率等指标,并记录实验数据。
5. 改变灌流液成分:分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换原灌流液,观察心脏活动的变化。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下,心脏保持节律性收缩和舒张,收缩幅度适中,心率稳定。
2. 当用0.65%NaCl灌流液替换原灌流液时,心脏收缩幅度稍微减小,心率稍微减弱。
这是因为Na+、Cl-浓度降低,导致心肌细胞内外离子浓度差减小,心肌兴奋性降低。
3. 当用2%CaCl2灌流液替换原灌流液时,心脏收缩幅度稍微加大,心率稍微加快。
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生理学实验报告-蛙心灌流————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:ﻩ蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。
稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎线上方的血管。
轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保留静脉窦与心脏的联系,使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。
用任氏液反复冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液。
保持套管内液面高度一致(1.5~2cm),即可进行实验。
(2)将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多,以免因夹破心室而漏液)。
再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连(如右图)。
注意:勿使灌流液滴到传感器上。
调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。
2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0.65%NaCI溶液灌流,并作好加药标记,观察心搏变化。
待曲线氏插管装置出现明显变化时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标记,并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常。
注意:换液时切勿碰套管,以免影响描记曲线的基线,同时保持灌流液面一致(以下同)。
观察可得,NaCI溶液会阻遏心脏搏动。
(3) 迅速用新鲜任氏液清洗2~3次,待心搏恢复正常。
向套管内加入1~3滴2%Ca CI:溶液,观察并记录心搏曲线的变化。
当出现明显变化时,立即更换任氏液,待心搏恢复正常(如果恢复迟缓,可多次冲洗)。
(4)同法向套管中加1—2滴1%KCl溶液,记录心搏曲线的变化。
当心搏曲线变化时,同法更换灌流液,待心搏恢复正常。
(5)同法记录套管中加入l~2滴的肾上腺素溶液(1:10 000)后心搏曲线的变化。
(6)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1:10000)后心搏曲线的变化。
(7)同法记录套管中加入l~2滴的3%乳酸后心搏曲线的变化。
五、【实验结果与原因分析】曲线的幅度————收缩的程度曲线的密度————心率曲线的基线————舒张的程度1、正常收缩曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析:滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,由于灌注液中缺乏Ca2+(),以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
3、滴加2%CaCl溶液分析:细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。
[Ca2+] 0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2+]0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。
Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。
[Ca2+]0降低时,所引起的变化与高钙时相反。
因此加入CaCl2后,心率减少、振幅减少,基线上移。
4、滴加1%KCl溶液分析:滴加1%KCl后的心搏曲线发现,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度逐渐下降,最后停止在基线处,即心脏停博于舒张状态。
因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。
所以心搏曲线振幅减小。
5、滴加1:10000肾上腺素溶液分析:滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大。
其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强。
另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强。
6、滴加1:10000乙酰胆碱溶液分析:上图可示,蛙心收缩减弱,心率减慢,最后出现蛙心停止舒张阶段。
其机理为:乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性,促使K+外流,将引起:1)窦房强细胞复极时K+外流增多,最大复极电位绝对值增大;Ik衰减过程减弱,自动除极速度减慢。
这两方面因素导致窦房自律性降低,心率减慢。
2)复极过程中K+外流增加,动作电位2、3期缩短,Ca2+进入细胞内减少,使心肌收缩减弱;另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道,减少Ca2+内流,进而使心肌收缩减弱。
7、滴加3%乳酸溶液分析:H+与Ca2+的竞争机制,导致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca 2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
六、【注意事项】1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦。
2.上述各实验项目,一旦出现作用应立即用正常任氏液换洗,以免心肌受损,而且必须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。
3.尽量选用健壮、体大的雄性蟾蜍,手术过程中注意保护心脏,避免损伤。
4.实验中及时用任氏液冲洗心脏,待曲线恢复平稳后再进行下一步操作。
5.每次更换任氏液都必须保持灌流液液面高度恒定,以免因灌流量变化而影响结果。
6.严格控制每次药品加入量,先加一滴,效果不明显再加一滴。
7.吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果。
七、【讨论】1. 离体蛙心制备好后,有时候馆内的液面上下移动很不明显,是何原因?如何处理?答:离体蛙心制备好后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。
其实质是:在心室收缩时,心室容积减少,室内压升高,将心室内的液体压入插管内,管内液面上升;在心室舒张的时候,心室容积增大,心室内压减少,将插管内液体吸入心室,管内液面下降。
但是有时候蛙心插管内液面波动不明显,其主要原因是:⑴插管内尖端出现血凝块。
⑵插管尖端不在心室腔内,而是在心房或者脉间结缔组织等地方。
⑶插管进入心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁。
⑷蛙心由于长期心肌失血,导致活力下降。
2. 实验过程中,为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定?液面过高或过低会产生怎样的影响?答:在实验过程中,蛙心插管内液面高度发生变化,心脏收缩曲线会相应发生变化。
心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响。
插管液面高度所产生的压力,在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷,心室开始收缩的时候,此液体所产生的压力又成为心肌收缩时的后负荷。
故高度的改变,进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率。
当液面过高时。
心缩曲线幅度将降低。
因为过高的液面,将使心室前负荷超过了最适前负荷,将导致粗细肌丝过于疏远,而导致收缩的潜力减少,心肌收缩不再增加或下降。
而类似的,过高的后负荷,也使心肌收缩的幅度和速度大大下降。
而当液面过低时,心室收缩的幅度也会减少。
因为前负荷过小,将导致粗细肌丝过于接近,而导致收缩的潜力减少,实际上,此时由于前负荷的减少导致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而导致的还有明显。
类似的,后负荷相应的减少也会导致心室收缩的减弱。
所以,在实验中保持最适的液面高度。
是取得较好实验结果的前提。
3.各种离子成分改变蛙心收缩的原理是什么?答:由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关,因此,细胞外液中离子浓度升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
(1)钾离子的影响K+与静息电位的形成有关。
细胞外液K+浓度[K+]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾:[K+]0轻度或中度增高时,膜内、外K+浓度差减小,静息电位绝对值减小,与阈电位差距缩短,因此,兴奋性增高。
[K+]0显著升高时,由于静息电位绝对值减小过多(膜内达-55mV左右),Na+通道失活,因而兴奋性降低甚至消失。
另外,还使0期去极化速度和幅度减小,传导性降低,导致兴奋传导减慢,甚至传导阻滞。
此外, [K+]0增高还可提高膜对K+的通透性,加速K+外流,动作电位平台期缩短,因此,不应期缩短。
此外由于平台期缩短,减少了Ca2+的内流,加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用,导致心肌收缩功能减弱;(2)钙离子的影响细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。
[Ca2+]0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2+]0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。
Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。
[Ca2+]0降低时,所引起的变化与高钙时相反。
(3)钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。