红景天苷的提取及含量测定方法概述_王海凤

红景天苷的提取及含量测定方法概述*

王海凤

（天津市宝坻区药品检验所，天津301800）

摘要本文综述国内外有关红景天苷的提取及含量测定方法，其中提取方法包括：大孔吸附树脂法、超声波法、超临界CO2萃取法、微波辅助提取法、酶解法、醇提取法、高压提取法等；含量测定方法包括重氮化比色法、紫外分光光度法、薄层扫描法、荧光光谱法、高效液相色谱法。

关键词红景天苷，提取，含量测定

中图分类号：Ｒ931．5文献标识码：A文章编号：1006-5687（2014）05-0061-03

红景天苷（salidroside）为红景天的主要有效成分。临床研究结果表明，其具有抗缺氧、抗疲劳、抗微波辐射、抗寒冷、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗炎、兴奋中枢神经和调节内分泌等药理作用，在军事、航天、运动及保健医学上具有重要应用价值，极具开发前景。通常以其含量的高低作为红景天质量优劣的判断标准。本文综述了国内外有关红景天苷的提取及含量测定方法。1提取方法

1.1大孔吸附树脂法王莹等［1］采用AB－8大孔吸附树脂法对高山红景天提取物进行分离，再用HPLC 法对其进行含量测定。结果认为AB－8型大孔吸附树脂吸附红景天苷的最佳吸附条件为：5mg高山红景天提取物须1g干树脂用量，样品液浓度10mg/ml。解吸速率控制在1．5倍柱体h为最佳，此时既能达到满意效果，又能提高实验速度。

1.2超声波法近年来发展起来的超声波提取技术，因其具有强烈振动和空化效应，可加速有效成分的溶出、缩短提取时间、提高产物得率，具有操作简单、无污染等优点［2］。为探寻红景天苷超声提取的最佳工艺条件，董彦莉［3］通过单因素和正交试验对溶剂浓度、超声提取时间、料液比温度等进行研究，确定红景天苷超声提取的最佳工艺条件为：以60%乙醇水溶液为溶剂、料液比为1ʒ20、提取温度40ħ、提取时间75min。影响红景天苷收率大小的因素为：提取温度＞料液比＞提取时间＞乙醇浓度，温度对红景天苷收率影响最大。程子毓等［4］首次采用恒温超声的方式，对青海产狭叶和大花红景天进行提取，此方法重现性良好。1.3超临界CO

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萃取法超临界萃取法，具有成本低、提取率高、溶剂用量少、时间短、无毒副作用等优点，是今后中草药有效成分提取的发展方向之一［5］。王化田等［6］研究表明，将超临界CO2萃取法和乙醇常温浸提法有效地结合，即先把红景天原料用超临界CO

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萃取其中的苷元酪，然后再用乙醇常温浸提法提取其中的红景天苷，这样既保证了两物质的较高得率，又易于实现两物质的有效分离，推进了红景天有效成分提取的产业化进程。

1.4微波辅助提取法微波处理就是利用微波的能量破坏目的物的细胞壁，使需要的物质渗出胞外，以利于有效成分的提取［7］。微波辅助提取技术在处理目的物作为中药天然活性成分提取的辅助方法已显示出极大的优势。黄韬睿等［8］通过实验研究表明，微波辅助法提取红景天有效成分的最佳条件为药材粒度为过40目筛，用药材量20倍的水浸泡30min后用中低火微波处理40s，然后在70ħ下提取10min，提取2次，该条件下红景天苷提取量达到4．43mg/g。与常规水煮法比较，用微波法提取红景天有效成分提取时间短，提取率高。

1.5酶解法

1．5．1纤维素酶酶解法纤维素酶是近年广泛应用于食品行业和饲料行业的一种酶类，能够分解β－1，4－糖苷键，对植物细胞有破壁作用，有利于植物细胞内有效成分的析出与释放。为了探寻红景天苷纤维素酶解法提取的最佳工艺条件，董彦莉等［9］对红景天进行了提取研究，确定其最佳工艺条件。结果表明，纤维素酶酶解法的最佳提取条件是以pH5．4的醋酸钠/醋酸缓冲液为溶剂，纤维素酶添加比例2%，提取温度50ħ，提取时间110min。

1．5．2微生物酶的方法高雪华等［10］采用黑曲霉发酵的方法获得了酪醇合成酶和红景天苷合成酶的粗提物，确定了两种微生物酶的初步性质，使得红景天的有效含量在较短周期分别得到了提高，为提高红景天苷和酪醇含量在酶学研究方向提供了新的途径和理论

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天津药学Tianjin Pharmacy2014年第26卷第5期*收稿日期：2014-02-24

依据。

1．6高压提取法程子毓等［11］在控温条件下，采用密闭升温的方式产生高压，从而使植物细胞破壁，进行有效成分提取，确定最佳提取工艺，并与超声波法进行比较。高压法最佳提取工艺条件下，红景天苷的得率高于超声波法，避免了超声波及微波对人体的危害，成本低，更适用于工业化生产。

1．7水提法刘莱等［12］运用正交设计法进行实验设计，取等量的药材，采用不同的提取溶液，用高效液相色谱法测定提取物中红景天苷的含量。表明水的比例越大，红景天苷的提取率越高，完全用水提取时提取率最高。最后确认最佳提取方案为8倍量水，每次提取时间2h，提取3次。

1．8醇提法李毅［13］采用高效液相色谱法测定醇提取法的红景天苷的含量，通过正交试验筛选出最佳工艺为：8倍量70%乙醇，提取3次，每次2h。

2含量测定方法

2.1重氮化比色法张群等［14］以甲液：磺乙酰胺钠3．5g，置于50ml量瓶中，加盐酸溶液（1→10）稀释至刻度；乙液：亚硝酸钠5g加水至50ml。应用时，甲、乙两液取等量在冰水浴中混合，放置片刻使用，作为重氮化试剂。于4min在491nm处测吸收度A，以A值和浓度C进行回归，在浓度0 36μg/ml间成线性关系，回归方程A=0．0286+0．01705C（r=0．9996）。对红景天流浸膏液进行测定，结果测得平均回收率为102．1%，ＲSD为101%，结果满意。

2.2紫外分光光度法崔瑞芳等［15］建立了紫外分光光度法测定抗辐康中红景天苷的含量测定方法。经光谱扫描测得红景天苷对照品的最大吸收峰为290nm，样品的最大吸收峰也在290nm处，在290nm处测定吸收度，求出吸光度（A），求得红景天浓度C与吸收度A的线性方程是Y=0．0246X+0．0288（r= 0．9999）。测得样品平均回收率为95．68%。刘西茜等［16］采用溶剂浮选法分离富集红景天苷，用紫外分光光度法对不同前处理样品中红景天苷含量进行测定，样品加标回收率为99．71% 104．21%，ＲSD为1．6% 2．21%。

2.3薄层扫描法王运科等［17］采用薄层扫描法对红景天口服液中红景天苷进行了含量测定，扫描方法为双波长反射式锯齿型扫描，参比波长254nm，检测波长289nm，线性参数SX=3，狭缝大小为0．4mmˑ0．4 mm。进样量1 5μg范围内与峰面积积分值呈现良好线性关系（r=0．9996），平均回收率为98．54%。钱彦丛等［18］采用双波长薄层扫描法对冀产红景天中红景天苷的含量进行测定。该方法仪器设备简单，操作方便，灵敏度高，结果准确，重线性好。

2.4荧光光谱法孙艳涛等［19］建立了测定红景天苷

的荧光光谱方法，选择了最佳荧光激发波长和发射波长，考查了乙醇浓度、温度、放置时间、pH值和共存离子对测定结果的影响。红景天苷的荧光光谱具有良好的稳定性，在最佳实验条件下，其荧光强度与浓度在0．04 18．03μg/ml范围内呈良好的线性关系，相关系数为0．9996，检出限为0．019μg/ml。红景天苷测定结果的相对标准偏差为0．33%（n=5），荧光法测得值与理论值的相对误差为40%。

2.5高效液相色谱法目前，测定红景天苷含量多用高效液相色谱法，此法分离效能高，分析速度快，应用范围广，重现性和准确度高，是测定制剂含量的首选方法。

2．5．1HPLC法韩彩霞等［20］以Diamonsi1C

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（4．6 mmˑ250mm，5μm）为色谱柱，乙腈－0．1%磷酸（7ʒ93）为流动相，流速1．0ml/min，检测波长223nm，进样量：5μl，理论板数按红景天苷峰计不低于3000，分离度符合要求。结果红景天苷在0．1064 1．596μg 范围内样品含量与峰面积呈良好的线性关系。也有学者用HPLC法测定天芪气血微粉片中红景天苷的溶出度［21］。

2．5．2ＲP－HPLC法况艳等［22］用ＲP－HPLC法，

AgilentHC C

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为色谱柱，以乙腈－0．05%冰醋酸溶（19ʒ81）为流动，流速：1．0ml/mi，柱温：30ħ，检测波长：275nm，采用外标两点法计算含量，测定二子菊花颗粒中红景天苷的含量。刘建明等［23］用ＲP－HPLC法测定大鼠血浆中红景天苷的浓度。

3结论

红景天苷应用范围广泛，疗效显著，副作用小，价格便宜，需求量大，红景天苷提取和含量测定方法目前有较多报道，技术较成熟，具有很好的开发应用前景。

参考文献

1王莹，汲晨峰，季宇彬．高山红景天中红景天苷分离和含量测定［J］．江西中医学院学报，2009，21（3）：74－76

2Mircea V．An overview of the ultrasonically assistedextraction ofbioactive principles from herk，［J］．Ultrasonics Sonochemistry，2001，8（3）：303－313

3董彦莉．超声波法提取红景天苷工艺条件的优化［J］．广东农学科学，2011，18：64－65

4程子毓，洪美花，陈元涛，等．恒温超声波法提取红景天根中红景天苷的工艺及含量测定研究［J］．青海师范大学学报，2008，3：80－82

5付玉杰，祖元刚，李春英，等．超临界CO2萃取甘草中甘草次酸的工艺研究［J］．中草药，2003，34（1）：31－33

6王化田，祖元刚，毛子军．超临界CO2萃取红景天中红景天苷、苷元酪醇的研究［J］．植物研究，2004，24（4）：462－465

7徐翔，李晓静，李靖靖，等．微波法提取红景天苷的工艺研究［J］．中

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