羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton比色法)

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Lysis buffer 的比例，加入 OH Lysis buffer 后匀浆或研磨，室温静置 4h，3000g 离心， 上清液即为羟自由基粗提液，4℃保存备用。 ②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定， 4℃保存，用于羟自由基(·OH)的检测。 ③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的羟自由基(·OH)，可以使用 OH Lysis buffer 进 行恰当的稀释。 2、 配制 OH Assay buffer 工作液：取适量的 OH Assay buffer 和 H2O2 基液，按 OH Assay
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羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton 比色法)
简介：
在生命活动的代谢过程中不断产生各种自由基，其中羟自由基·OH 是体内最活跃的活 性氧，可介导许多生理变化。羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成 细胞结构和功能受损
Leagene 羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton 比色法)又称羟自由基清除能力检测试 剂盒或羟自由基检测试剂盒，其检测原理 H2O2/Fe2+ 通过 Fenton 反应产生羟自由基，将 Fe2+氧化为 Fe3+，求得标准曲线，通过分析捕获产生的羟自由基可计算出自由基清除率或 清除能力。该试剂盒主要用于测定植物组织、血清、血浆等样本中的羟自由基清除率或羟 自由基清除能力。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
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4、 测定过程中的干扰因素较多，容易对测定的准确性和灵敏度造成影响。 5、 如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的最大检测体
积。 6、 如果加入 OH 萃取液萃取时，效果不佳，可按 OH 萃取液：甲苯=3:1 的比例配制新的
计算：
组织样品 OH 清除率(%)=(A 对照-A 对照/A 测定)×100 式中：A 对照=对照管的吸光度
A 测定=测定管的吸光度
注意事项：
1、 实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于 4℃。 2、 在萃取过程中混匀即可，不要剧烈振荡，以免发生乳化。 3、 在萃取过程中，如果出现轻微乳化，可通过离心去除。
buffer：H2O2 基液=的比例混合，即为 OH Assay buffer 工作液，4℃避光保存 1 周有 效。 3、 配制 OH 萃取洗涤液：取适量的蒸馏水和 OH 萃取液，按蒸馏水：OH 萃取液=的比例 混合，即为 OH 萃取洗涤液。 4、 OH 加样：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生 气泡。如果样品中的羟自由基(·OH)浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行 测定，样品的检测最好能设置平行管。
OH 萃取液，以此萃取液进行萃取。
有效期：6 个月有效。
相关：
源自文库
编号 NA0034 PE0025 PT0001 PT0013 PW0053 TC1167
名称 Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE) SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(5×) BCA 蛋白定量试剂盒 考马斯亮蓝快速染色液 Western 抗体洗脱液(碱性) 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
加入物(ml)
对照管
蒸馏水
0.5
待测样品
—
OH Assay buffer 工作液
0.5
OH 显色液
1
混匀，室温避光放置 10min。
Fenton 基液
0.5
测定管 — 0.5 0.5 1
0.5
5、 OH 测定：加入 OH 萃取液，轻轻混匀，静置分层，丢弃下层相，取上层有机相加入 新配制的 OH 萃取洗涤液，静置分层，上层液即为羟自由基待测液。以蒸馏水调零， 光径比色杯 1cm，以分光光度计测定对照管、测定管 420nm 处吸光度(A 对照、A 测定)。
组成：
名称 试剂(A): OH Lysis buffer 试剂(B): OH Assay buffer 试剂(C): H2O2 基液 试剂(D): OH 显色液 试剂(E): Fenton 基液 试剂(F): OH 萃取液 使用说明书
编号
TO1133 50T
Storage
250ml RT
25ml RT 避光
1ml RT
50ml 4℃ 避光
25ml RT 避光
100ml RT
1份
自备材料：
1、 蒸馏水 2、 实验材料：植物组织(芹菜、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等 3、 研钵或匀浆器 4、 离心管或试管 5、 离心机 6、 比色杯 7、 分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品： ①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，按 OH