Mayer'苏木素染液(免疫组化)说明书

苏丹Ⅲ染色试剂盒说明书

苏丹Ⅲ染色试剂盒说明书货号：G1511规格：3×50mL保存：RT避光，12个月。

产品组成：名称3×50ml Storage试剂(A):Mayer苏木素染色液50ml RT避光试剂(B):苏丹Ⅲ分化液50ml RT试剂(C):苏丹Ⅲ染色液50ml RT避光产品说明：脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。

中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。

中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。

在正常情况下，除脂肪细胞外其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴，如果细胞质内出现大量脂滴即为脂肪变性，常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。

中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。

苏丹染料脂质染色的机理一般认为纯属物理学的脂溶作用和吸附作用。

苏丹类染料由于在脂质中的溶解度大于在有机溶剂的溶解度，所以染色时染料便从染液中转移到被染的脂质中去，使脂质呈现出染液的颜色。

苏丹Ⅲ染色液主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性，细胞内出现多数中性脂肪滴；鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。

标本不采用含有乙醇的固定液(如需固定可采用10%中性福尔马林)、也不采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。

自备材料：70%乙醇、蒸馏水、显微镜、甘油明胶封片剂操作步骤(仅供参考)：1、新鲜组织低温切片，一般-20℃～-25℃。

如样本为脂肪瘤，应调节至-30℃。

2、冰冻切片6～15μm(6～8μm为佳)，贴于载玻片上。

3、蒸馏水稍洗。

4、入Mayer苏木素染色液，复染核1min。

5、自来水洗后，苏丹Ⅲ分化液分化数秒，流水洗至核为蓝色。

6、蒸馏水冲洗后，入70%乙醇稍微浸洗一下。

7、入苏丹Ⅲ染色液，浸染30min。

8、70%乙醇分化数秒，自来水洗。

苏木素伊红HE染色实验说明

苏木素伊红(HE)染色试剂盒北京华越洋----------------------------------------------------------------------------------------- -产品简介：Ø华越洋生物生产的苏木素伊红(HE)染色试剂盒(Hematoxylin and eosin staining kit)综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。

可以用于组织切片或培养细胞的染色。

Ø 苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。

Ø 本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。

使用的苏木素伊红染色试剂盒，染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。

Ø 染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。

本试剂盒至少可以染色300个样品。

包装清单：苏木素染色液: 200毫升伊红染色液:200毫升说明书:1份保存条件：室温保存，至少一年有效。

注意事项：Ø 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。

如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。

如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇、无水乙醇以及二甲苯。

Ø 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。

样品数量很多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。

Ø 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：1.样品处理a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟蒸馏水2分钟。

b) 对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。

c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。

苏木精、苏木素染色液溶液配制方法

华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。

(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。

(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。

该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。

对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。

这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。

但染色时间较长，需要20分钟以上。

如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。

（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。

B液： 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。

苏木精、苏木素染色液溶液配制方法

华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素1g 无水酒精10ml硫酸铝钾20g蒸馏水200ml氧化汞0.5g冰醋酸8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。

(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精20ml硫酸铝钾5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。

(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠20mg硫酸铝铵5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。

该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。

对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。

这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。

但染色时间较长，需要20分钟以上。

如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。

（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。

B液：29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。

免疫组化实验方法

免疫组化用户自备试剂：1．粘片剂APES 或POLY-L-LYSINE（博士德公司有售）。

2．免疫组化专用PBS（pH7.2-7.6）配法：1000ml 蒸馏水中加氯化钠8.5g, Na2HPO42.8g,NaH2PO4 0.4g。

如果用的是含水磷酸盐，应加上分子式中水的含量。

3．0.01M 枸橼酸盐缓冲液：1000ml 蒸馏水中加枸橼酸三钠（C6H5Na3O7·2H2O）3g, 枸橼酸(C6H8O7·H2O ) 0.4g。

4．DAB显色试剂盒（博士德公司有售）。

A.石蜡切片热修复抗原染色程序:1. 载玻片防脱片剂处理:可选择APES 或Poly-Lysine。

捞片后置烤箱58-60 ℃30-60 分以使切片紧密粘附。

2. 切片常规脱蜡至水。

脱蜡前，应将组织切片在室温中放置60min或60 °C 恒温箱中烘烤20min。

然后按下列步骤进行：1) 组织切片置于二甲苯中浸泡3 次，每次10 min ；2) 无水乙醇中浸泡3 次，每次10 min ；3) 依次通过质量分数为95% 、70% 、50% 的梯度乙醇溶液，每次 10 min ；4) PBS 中浸泡10 min 。

3. 30%H2O2 1 份+蒸馏水10 份混合,室温5-10 分钟以灭活内源性酶。

蒸馏水（可用PBS）洗3 次。

4. 热修复抗原:将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10 分钟后，反复1-2 次。

冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2 次。

5. 滴加5%BSA 封闭液,室温20 分钟。

甩去多余液体, 不洗。

6. 滴加适当稀释的一抗（小鼠或兔IgG），37 ℃ 1 小时左右或20℃时2 小时左右。

也可4℃过夜。

PBS（pH7.2-7.6）洗2 分钟×3 次。

（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。

一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。

百度文库-Mayer苏木素说明书

广州市外显子生物技术有限公司Http//
Mayer苏木素染色液说明书
货号：S-1507
组成：
组成规格
Mayer 100ml
说明书1份
产品简介：
苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的主要成分是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

Leagene Mayer苏木素染色液属于明矾苏木素液的一种，苏木精含量小，无氧化膜形成，对细胞核染色很清晰，不着染胞质和纤维成分，属进行性染色，故染色后不需盐酸乙醇分化，染色时间约3～5min。

常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核，尤其适用于在经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染，此时染色时间较短(通常5-10min)，染完后即可进行蓝化，不必分化。

在特殊染色中，Mayer苏木素染色液与天青石蓝B联合染色，使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。

保存：4℃避光保存，保质期12个月。

细胞核染色原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

注意事项：
1.脱蜡应尽量干净。

系列乙醇应经常更换新液。

2.您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

染色结果：
结果判定：
细胞核呈蓝色。

天狼星红染色液

北京雷根生物技术有限公司
天狼星红染色液
简介：
天狼星红染色液主要由天狼星红染色液、Mayer 苏木素染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。

采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚6μm ，常规脱蜡至水。

3、天狼星红染色液滴染。

4、流水稍微冲洗，去除切片表面染液。

5、Mayer 苏木素染色液染细胞核。

6、流水冲洗10min 。

7、常规脱水透明，中性树胶封固。

注意事项：
1、为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7μm 为宜。

3、本法染色稳定，不易褪色。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号名称 DC0041 2×50ml DC0041 2×100ml Storage 试剂(A): 天狼星红染色液 50ml 100ml 4℃ 避光试剂(B): Mayer 苏木素染色液 50ml 100ml 4℃ 避光使用说明书 1份。

苏木素染色液说明书

苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：EnVision TM FLEX Hematoxylin (Link)【包装规格】3×45mL【预期用途】用于对组织细胞切片中的细胞核染色。

【主要组成成分】苏木素水溶液【储存条件及有效期】室温下避光保存。

有效期12个月。

【适用仪器】组织染色机（Autostainer Link 48）【检测方法】1.检测步骤1)将抗原修复液按照1：50比例配制好，放置在免疫组化预处理系统（PT Link）中2)运行免疫组化预处理系统（PT Link）至65度，将切片放置在抗原修复液中3)加热至95度，持续20分钟，降温至65度4)将切片取出放置在洗脱缓冲液工作液中，5分钟后，放置在自动染色系统上染色5)过氧化物酶阻断剂5分钟6)洗脱缓冲液工作液冲洗7)一抗20分钟8)洗脱缓冲液工作液冲洗9)二抗20分钟10)洗脱缓冲液工作液冲洗11)DAB显色10分钟12)自来水冲洗13)苏木素染色液复染5分钟14)自来水冲洗15)70%酒精，80%酒精，90%酒精，100%酒精，100%酒精各2分钟16)二甲苯透明5分钟17)二甲苯透明5分钟18)封片2.质量控制程序1) 每次染色过程中都应当同时对一份已知的阳性对照标本进行染色，以确定染色时所使用的全部试剂是否有效。

若阳性对照标本没有出现阳性染色结果，此次检测样本的标记过程应当视为无效。

2) 应当同时采用阴性对照试剂对每份标本进行染色，以排除发生非特异性染色的可能性。

如果不能明确区分非特异性染色和特异性染色，此次检测样本的标记过程应当视为无效。

更多信息及使用说明请参见DAB染色液试剂盒（代码K8002）使用说明书和Dako自动染色系统（Autostainer Link 48）仪器操作手册。

【检测结果的解释】含有DAB的底物缓冲液可以在一抗所识别的目标抗原部位产生褐色。

阳性对照样本应当在其目标抗原的预期部位出现褐色。

改良型Mayer's苏木素染液使用说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
1 改良型Mayer's 苏木素染液
改良型Mayer's 苏木素染液
改良型Mayer's 苏木素染液是由氧化的苏木精和铝离子组成的复合体，可将细胞核染成蓝色。

染液无乙醇，无汞。

可清晰并锐利的对核进行染色，无背景染色。

可用于免疫组化DAB 或AEC 后的复染。

实验流程
1. 免疫组化常规操作完成后，DAB 或AEC 显色（HRP 系统）。

2. 显色强度合适时，用自来水冲洗终止显色。

•
3. 甩去样品上的自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染 30sec~3min 。

4. 用自来水完全冲洗掉复染液，PBS 或去离子水浸泡切片3~5min ，使胞核返蓝。

5. 脱水、透明、封片。

•
注意事项
HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间，要根据实验原理，结合具体情况而定。

结果
细胞核：蓝色。

温馨提示
1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。

2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。

储存温度
避光储存于室温。

包装清单货号
品名包装 HCY108
改良型Mayer's 苏木素染液 100mL 说明书 1份。

苏木素无水乙醇溶液(5%)

北京雷根生物技术有限公司
苏木素无水乙醇溶液(5%)
简介：
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE 染色，是病理学和组织学最常用
的一种染色方法。

苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的主要成分
是DNA ，在DNA 的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA 双螺旋的外
侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

苏木素无水乙醇溶液(5%)属氧化苏木素的染色液，主要由苏木素和乙醇组成，并已被氧化，
可立即用于多种苏木素染色，亦可与其他染液配套使用。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体需求操作。

注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。

2、系列乙醇应经常更换新液。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号名称 DH0040 Storage 苏木素无水乙醇溶液(5%) 100ml RT 避光使用说明书 1份。

(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书

苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。

苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。

带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。

伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。

此染色法可观察到清晰的细胞结构。

样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。

伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。

返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。

由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。

使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。

【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。

【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。

保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。

产品使用效期为2年，具体效期见标签。

【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。

为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。

根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。

苏木素-伊红染色液使用方法

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。

【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。

因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。

【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。

【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。

苏木素染色液英文名称DakoHarrisHematoxylin-Agilent

苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：Dako Harris Hematoxylin【包装规格】1L【预期用途】主要用于对组织细胞切片及涂片中的细胞核染色。

苏木素染色液预期用于给用福尔马林固定并用石蜡包埋的组织切片、冻结切片和细胞制片中的细胞核进行初步染色（蓝色）。

它是供在Dako CoverStainer仪器上使用的即用型试剂。

【主要组成成分】苏木素水溶液。

每瓶当中都含有1000 mL即用型试剂。

当把苏木素染色液加载到Dako CoverStainer仪器上后，应在5天内用掉或在处理完3000张载玻片后更换掉（取决于先发生的情况）。

配套产品代码CS711, Dako Modified Eosin Y代码CS702, Dako Bluing Buffer代码CS703, Dako Mounting Medium或代码CS705, Dako Toluene Free Mounting Medium代码CS704, Dako Cover Glass【储存条件及有效期】15℃～30℃避光保存，有效期12个月。

过了瓶上印刷的有效期后，请勿使用。

如果每天晚上都回收到瓶中，则试剂的机载稳定时间可达5天。

如果将试剂存储在其它任何非规定条件下，则用户须对条件进行验证。

没有显著标志标明本产品的不稳定性。

如果出现实验室的程序实施差异无法解释的不合理染色效果且怀疑是试剂出了问题时，请联系Dako的技术支持部。

生产日期、失效日期：见包装标签。

【适用仪器】在Dako CoverStainer仪器（组织染色机）上使用。

有关仪器及使用说明的更多信息，请参阅Dako CoverStainer仪器的《用户指南》。

【样本要求】石蜡切片：苏木素染色液可用于对用福尔马林固定并用石蜡包埋的组织切片进行初步染色。

冻结切片和细胞制片：苏木素染色液可用于对用丙酮固定的冻结切片或者固定的细胞制片进行初步染色。

【检验方法】苏木素染色液（代码CS709）是一种即用型试剂。

亚历山大染色液配制与使用

亚历山大染色液
编码名称规格保存条件
北京华越洋QC061亚历山大染色液
100ml
室温,避光,12个
月
北京华越洋QC062亚历山大染色液
50ml
室温,避光,12个
月
亚历山大染色液是植物花粉染料，常用于细胞核染色，对于植物花粉，染色后成紫红色。

主要由孔雀绿，酸性品红，苯酚等组成，显酸性，是较好的花粉粒染色剂。

自备材料：1载玻片，盖玻片
2光学显微镜
亚历山大染色液操作步骤：
1取新鲜花朵，去除花瓣和雌蕊
2将花粉物质置于载玻片，滴加2-3滴染色液。

3充分混合，立即盖上盖玻片染色5-10h。

4吸去多余液体，显微镜下观察。

注意：1染色后立即显微镜下观察。

HE染色试剂的配制

HE染色试剂的配制1．苏木素染液（1）Harri苏木素染液苏木素 1g无水乙醇 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾；然后将该两液合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌溶液至深紫色，随即用冰水冷却，恢复至室温后过滤备用。

使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。

（2）Gill改良苏木素液苏木素 2g无水乙醇 250ml硫酸铝钾 17g蒸馏水 750ml碘酸钠 0.2g冰醋酸 20ml先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水溶解硫酸铝钾；然后将该两液混合，再依次加入碘酸钠和冰醋酸。

使用前过滤。

（3）Mayer改良苏木素液A液：苏木素 2g无水乙醇 40mlB液：硫酸铝钾 100g蒸馏水 600ml将苏木素溶于无水乙醇中（A液）；稍加热，使硫酸铝钾溶于蒸馏水中（B液）。

将A液与B液混合后煮沸2min，再用蒸馏水补足至600 ml，加入400mg碘化钠充分混匀。

染液呈紫红色。

2. 盐酸－乙醇分化液浓盐酸 1 ml70%乙醇 99 ml3．伊红液（1）0.25～0.5%伊红Y水溶液伊红Y 0.25～0.5 g蒸馏水 100 ml冰醋酸 1滴（2）0.5%伊红Y-氯化钙水溶液伊红Y 0.5 g蒸馏水 100 ml无水氯化钙 0.5 g（3）0.25～0.5%伊红Y-乙醇溶液。

伊红Y 0.25~0.5 g80%乙醇 100 ml4．石炭酸-二甲苯混合液石炭酸 1份二甲苯 3份。

苏木素-伊红染色试剂盒使用说明书

注意：当跳过此步骤时，不使用二甲苯透明，酒精将会保存于组织切片上，导致伊红从切片上流出。
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13 封片：中性树胶封片，自然风干或烤干，显微镜观察。
注意事项 HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间，要根据实验原理，结合具体情况而定。
染色较弱是由于：1）组织切片过薄；2）染色时间不足；3）随后 95%酒精分化过度。染色过度是由于：1）染液浓度较高（可能是由于过度蒸发）；2）组织切片过厚；3）染色时间过长；4）随后 95%酒精分化不足。
伊红染色未分化（一种颜色）是由于： 1）固定不彻底； 2）过度染色，a）染色时间过长；b）染液浓度过高。
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4. 水洗：苏木素染色后，用水洗组织是非常重要的。这一步以及随后的水洗，可将多余的染料，媒染剂等去除。适当的漂洗可以去除表面金属光泽，金属光泽可阻止苏木素的染色。注意：跳过此步，将产生不好的结果，例如沉淀的形成，染液的稀释，表面金属光泽的存在。 5. 酸酒精：酸酒精分色剂 3~5sec。在苏木素染色方注意：如果没有此步骤，组织切片将变为暗紫色。嗜酸结构，例如，胶原，将不会呈现明亮的粉红色。组织结构之间将很难区分。很难对切片做出正确的判断。分色过度可能是由于：1)酸浓度过高；2)脱色时间过长等。分色不足是由于：1)酸浓度过低； 2)脱色时间不足；3)在切片上有多余的蛋白或者明胶等。
结果细胞核染为蓝色；细胞质染为红色。
温馨提示 1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。 2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度避光储存于室温。
包装清单货号
HCY112A HCY112B

天狼星红-苦味酸染色说明书

仅供科研使用版本号：170628天狼星红染色液(南京森贝伽生物科技有限公司)【产品组成】Component SBJ-0294S2×50mlSBJ-0294M2×100mlStore at试剂(A):天狼星红染色液50ml 100ml 4℃，避光试剂(B):Mayer苏木素染色液50ml 100ml 4℃，避光【保存条件】4℃,避光,12个月【产品概述】胶原纤维(CollagenFiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。

Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维；Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ型胶原纤维主要在基膜中。

天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。

偏振光镜检查，胶原纤维有正的单轴双折射光的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。

天狼星红染色液主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。

采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。

【使用方法】1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚6μm，常规脱蜡至水。

3、天狼星红染色液滴染1h。

4、流水稍微冲洗，去除切片表面染液。

5、Mayer苏木素染色液染细胞核8～10min。

6、流水冲洗10min。

7、常规脱水透明，中性树胶封固。

【染色结果】普通光学显微镜:胶原纤维红色细胞核蓝色偏振光显微镜:Ⅰ型胶原纤维强橙黄色或亮红色Ⅲ型胶原纤维绿色【注意事项】1、为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7μm为宜。

C0107 苏木素染色液

包装清单：
产品编号
C0l
1份
保存条件：
室温避光保存，至少一年有效。
注意事项：
¾ 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
¾ 本苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。 ¾ 本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它
染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。 ¾ 本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
后续步骤进行脱水、透明和封片处理。注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行苏木素染色。
3. 脱水、透明、封片或进行其它染色 a) 脱水、透明、封片： 95%乙醇脱水2分钟。换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色。 b) 进行其它染色：如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在苏木素染色液染色后： 70％乙醇洗涤2次，每次2分钟。 PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
2. 苏木素染色对于上述处理好的样品：苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 95%乙醇5秒。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照