电泳技术的临床应用完整版
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如何检测染色程度: 需要使用光密度仪.
正常的电泳图谱
出现单克隆免疫球蛋白的电泳图谱
蛋白电泳检测的不同步骤
制备胶片, 加样, 启动电源,开始电泳, 染色, 脱色, 结果检测
血清蛋白电泳的目的是什么?
检测异常 :
含量的变化 : 条带中蛋白含量的增加或 减少
性质的变化 : 异常条带的出现
溶血的标本
出现在a2区域的单克隆免疫球蛋白
下列情况下Alpha2区域会出现增加现象:
- 炎症症状 - 肾病综合征 - 出现游离轻链
肾病综合征
Beta globulins(β球蛋白区带)
在下列情况下会出现下降 :
- 肝功能不全 - C3 长期缺乏 或者 C3 代谢过快
(also in aging sample,C3 denaturation, splitted in up to
- 遗传性双白蛋 - 暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺激导
致的 - 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 : 大量的胰酶
的出现可以导致白蛋白降解
双白蛋白血症
双白蛋白血症
在下列情况下白蛋白会出现下降 :
- 肾病综合症, 蛋白流失, 胃肠病: 检查尿蛋白 - 淋巴细胞增生综合征 - 营养不良 - 肝脏功能不全 - 慢性炎症 - 严重烧伤 - 血液稀释
电泳检测
电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析
什么情况下必须进行电泳检测?
A/G比例变化
血液沉降速度发生异常变化
出现恶性疾病征兆
在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫球蛋白出 现大量异常增加
电泳区带分析
白蛋白区带
双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白条带出现 附属条带可能是由以下原因造成 :
Biblioteka Baidu
A1AT 等电聚焦电泳
急性炎症电泳图谱
Alpha 2 globulins(α2球蛋白区带)
下列情况中出现下降:
- 肝功能不全 - 血管内溶血
出现两个条带:
- 溶血标本 (结合珠蛋白-血红蛋白复合体) - 结合珠蛋白不同基因型 - 出现单克隆免疫球蛋白(带有大量负电荷)
*Alpha 2条带在电泳图谱中,是一个很特殊的条带. 因为这一条带 中含有五种蛋白: HDL, Haptoglobin, Alpha 2 Macroglobulin, Ceruloplasmin and Gc globulin. 由于结合珠蛋白有不同的基 因表现型, 增加了这一条带的复杂程度. 结合珠蛋白非常靠近 Alpha 1条带; 出现溶血时结合珠蛋白的迁移率会发生改变. 同时, 由于HDL的含量或者是存放过久的标本, HDL的迁移速度可能会 更快.
电泳技术的医学应用
蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手 段, 可全面精确, 描绘出患者蛋白质的 全貌. 对疾病的早期诊断, 疗效观察及 预后判断具有非常重要的临床价值.
蛋白的电泳检测
根据使用的染料或者是底物的不同，我 们可以检测到不同类型的蛋白:
血清蛋白 脂蛋白(运送脂类) 各种酶类 血红蛋白
临床意义
将电泳作为常规检测之一, 基于蛋白含量的 变化, 有助于我们对以下疾病的筛查 :
炎症 营养不良 肺气肿
临床意义
对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病: 骨髓瘤 巨球蛋白血症(Waldenstrom) 细菌和病毒感染
在这些情况下, 必须要做其他辅助测试, 比如 说免疫固定, 使用不同类型的抗血清对异常蛋 白进行检测. (对于后期治疗有很重要的指导意义)
4 fractions: 1 between a2andb
1 onb1
1on b2
and 1 ong)
在下列情况下会出现两个条带:
- 长期存放的标本或者是高胆固醇的标本, LDL 有不同的迁移率; 从而导致LDL电泳是偏移 Beta位置
Beta球蛋白在下列情况下会出现增加现象:
现代电泳技术的临床应用
厦门市第二医院 王友祥
使用范围和检测原理
电泳技术就是利用在电场 的作用下, 由于待分离样品 中各种分子带电性质以及 分子本身大小, 形状等性质 的差异, 使带电分子产生不 同的迁移速度, 从而对样品 进行分离, 鉴定或提纯的技 术.
在生化检测中, 主要用于分 离各类蛋白分子.
发展历程
1809年俄国科学家列伊 斯首先发现电泳现象
1937年瑞典科学家 Tiselius建立了界面电泳 技术, 并首次证明了血清 是由白蛋白及球 蛋白组成的因此获得 1948年诺贝尔化学奖.
1950年后, 区带电泳从 发展到成熟. 1980年以 来, 毛细管电泳逐渐受到 重视
常用的电泳技术
滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸 的电泳支持介质, 成本低, 结果易保存.
聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性分析蛋白质的 电泳方法, 特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白 质分子量, 一般用于科研.
毛细管电泳 :经典电泳技术和现代微柱分离 相结合的产物
血清蛋白电泳
白蛋白 a1: a1酸性糖蛋白, a1抗胰蛋白酶 a2: 结合珠蛋白, a2 巨球蛋白, a脂蛋白, 铜蓝蛋白 b : 转铁蛋白, 血液结合素, C3补体, b脂蛋白 g : 免疫球蛋白
蛋白染色
血清蛋白电泳后会呈现出5 或者 6 条带.
染色后,每个条带呈现出的不同程度的染色对应 着各自的蛋白浓度.
在下列情况中白蛋白会出现增加:
- 脱水症状 - 血液浓缩 - 白蛋白注射
Alpha 1 globulins(α1球蛋白区带)
将会在下列情况下出现下降:
- 蛋白流失 - 肝功能不全 - 先天性抗胰蛋白酶缺乏症
出现两个条带:
- 抗胰蛋白酶的不同基因型
出现增加:
- 炎症症状
A1AT不同的基因型
电泳技术在临检中的应用
急,慢性炎症
造血系统疾病: 多发 性骨髓瘤, 巨免疫球 蛋白血症
肾脏疾病
肝脏疾病
中枢神经系统疾病: 多发性硬化症
遗传性疾病: 地中海 贫血
代谢性疾病: 糖尿病 心血管疾病: 心梗,动
脉粥样硬化
恶性肿瘤
正确解释电泳结果 为临床对疾病的判断提供可靠参考
正常的电泳图谱
出现单克隆免疫球蛋白的电泳图谱
蛋白电泳检测的不同步骤
制备胶片, 加样, 启动电源,开始电泳, 染色, 脱色, 结果检测
血清蛋白电泳的目的是什么?
检测异常 :
含量的变化 : 条带中蛋白含量的增加或 减少
性质的变化 : 异常条带的出现
溶血的标本
出现在a2区域的单克隆免疫球蛋白
下列情况下Alpha2区域会出现增加现象:
- 炎症症状 - 肾病综合征 - 出现游离轻链
肾病综合征
Beta globulins(β球蛋白区带)
在下列情况下会出现下降 :
- 肝功能不全 - C3 长期缺乏 或者 C3 代谢过快
(also in aging sample,C3 denaturation, splitted in up to
- 遗传性双白蛋 - 暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺激导
致的 - 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 : 大量的胰酶
的出现可以导致白蛋白降解
双白蛋白血症
双白蛋白血症
在下列情况下白蛋白会出现下降 :
- 肾病综合症, 蛋白流失, 胃肠病: 检查尿蛋白 - 淋巴细胞增生综合征 - 营养不良 - 肝脏功能不全 - 慢性炎症 - 严重烧伤 - 血液稀释
电泳检测
电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析
什么情况下必须进行电泳检测?
A/G比例变化
血液沉降速度发生异常变化
出现恶性疾病征兆
在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫球蛋白出 现大量异常增加
电泳区带分析
白蛋白区带
双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白条带出现 附属条带可能是由以下原因造成 :
Biblioteka Baidu
A1AT 等电聚焦电泳
急性炎症电泳图谱
Alpha 2 globulins(α2球蛋白区带)
下列情况中出现下降:
- 肝功能不全 - 血管内溶血
出现两个条带:
- 溶血标本 (结合珠蛋白-血红蛋白复合体) - 结合珠蛋白不同基因型 - 出现单克隆免疫球蛋白(带有大量负电荷)
*Alpha 2条带在电泳图谱中,是一个很特殊的条带. 因为这一条带 中含有五种蛋白: HDL, Haptoglobin, Alpha 2 Macroglobulin, Ceruloplasmin and Gc globulin. 由于结合珠蛋白有不同的基 因表现型, 增加了这一条带的复杂程度. 结合珠蛋白非常靠近 Alpha 1条带; 出现溶血时结合珠蛋白的迁移率会发生改变. 同时, 由于HDL的含量或者是存放过久的标本, HDL的迁移速度可能会 更快.
电泳技术的医学应用
蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手 段, 可全面精确, 描绘出患者蛋白质的 全貌. 对疾病的早期诊断, 疗效观察及 预后判断具有非常重要的临床价值.
蛋白的电泳检测
根据使用的染料或者是底物的不同，我 们可以检测到不同类型的蛋白:
血清蛋白 脂蛋白(运送脂类) 各种酶类 血红蛋白
临床意义
将电泳作为常规检测之一, 基于蛋白含量的 变化, 有助于我们对以下疾病的筛查 :
炎症 营养不良 肺气肿
临床意义
对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病: 骨髓瘤 巨球蛋白血症(Waldenstrom) 细菌和病毒感染
在这些情况下, 必须要做其他辅助测试, 比如 说免疫固定, 使用不同类型的抗血清对异常蛋 白进行检测. (对于后期治疗有很重要的指导意义)
4 fractions: 1 between a2andb
1 onb1
1on b2
and 1 ong)
在下列情况下会出现两个条带:
- 长期存放的标本或者是高胆固醇的标本, LDL 有不同的迁移率; 从而导致LDL电泳是偏移 Beta位置
Beta球蛋白在下列情况下会出现增加现象:
现代电泳技术的临床应用
厦门市第二医院 王友祥
使用范围和检测原理
电泳技术就是利用在电场 的作用下, 由于待分离样品 中各种分子带电性质以及 分子本身大小, 形状等性质 的差异, 使带电分子产生不 同的迁移速度, 从而对样品 进行分离, 鉴定或提纯的技 术.
在生化检测中, 主要用于分 离各类蛋白分子.
发展历程
1809年俄国科学家列伊 斯首先发现电泳现象
1937年瑞典科学家 Tiselius建立了界面电泳 技术, 并首次证明了血清 是由白蛋白及球 蛋白组成的因此获得 1948年诺贝尔化学奖.
1950年后, 区带电泳从 发展到成熟. 1980年以 来, 毛细管电泳逐渐受到 重视
常用的电泳技术
滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸 的电泳支持介质, 成本低, 结果易保存.
聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性分析蛋白质的 电泳方法, 特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白 质分子量, 一般用于科研.
毛细管电泳 :经典电泳技术和现代微柱分离 相结合的产物
血清蛋白电泳
白蛋白 a1: a1酸性糖蛋白, a1抗胰蛋白酶 a2: 结合珠蛋白, a2 巨球蛋白, a脂蛋白, 铜蓝蛋白 b : 转铁蛋白, 血液结合素, C3补体, b脂蛋白 g : 免疫球蛋白
蛋白染色
血清蛋白电泳后会呈现出5 或者 6 条带.
染色后,每个条带呈现出的不同程度的染色对应 着各自的蛋白浓度.
在下列情况中白蛋白会出现增加:
- 脱水症状 - 血液浓缩 - 白蛋白注射
Alpha 1 globulins(α1球蛋白区带)
将会在下列情况下出现下降:
- 蛋白流失 - 肝功能不全 - 先天性抗胰蛋白酶缺乏症
出现两个条带:
- 抗胰蛋白酶的不同基因型
出现增加:
- 炎症症状
A1AT不同的基因型
电泳技术在临检中的应用
急,慢性炎症
造血系统疾病: 多发 性骨髓瘤, 巨免疫球 蛋白血症
肾脏疾病
肝脏疾病
中枢神经系统疾病: 多发性硬化症
遗传性疾病: 地中海 贫血
代谢性疾病: 糖尿病 心血管疾病: 心梗,动
脉粥样硬化
恶性肿瘤
正确解释电泳结果 为临床对疾病的判断提供可靠参考