第06章 电泳技术和常用电泳仪习题
电泳技术习题
电泳技术习题生化实验技术(电泳)习题一、是非题(对的打“√”,错的打“×”)1.电泳分离技术适用于分离各种离子和非离子混合物。
()2.高压电泳是指电场强度>20伏/cm,常用于高分子离子的分离。
()3.电场引力F的大小取决于粒子荷电量Q及电场强度E。
()4.在非分子筛的连续电泳系统中,不同种类的带电物质其泳动率取决于Q/r比值。
()5.电泳缓冲液常用离子强度为0.2~2.0之间。
()6.SDS-PAGE主要用于分离分子量不同的蛋白质混合物。
()7.电泳时由于电极反应,使阴极产碱,阳极产酸,故通常电极液要用缓冲溶液。
()8.蛋白质在小于等电点的pH溶液中,向阳极移动,而在大于等电点的pH溶液中,将向阴极移动。
()9.电泳缓冲液离子强度越高,电泳泳动率越快。
()二、名词解释1.电泳迁移率2.电场强度3.电渗现象三、简述题1.简述不连续PAGE分离血清蛋白质的基本原理。
2.试列举出三种电泳方法,比较其优缺点和应用范围。
3.简述等电聚焦电泳分离蛋白质的的基本原理。
四、选择题(只有一个正确答案)1.电泳系统中热效应取决于下列哪项因素―――――-―――――――――――――()A.电流强度B.支持物的电渗作用C.颗粒所带净电荷数及其大小,形状D.溶液的pH值E.溶液的离子强度2..进行DNA的琼脂糖凝胶电泳时,下列哪步操作是错误的:――――――――――――()A.称取琼脂糖配制一定浓度的琼脂糖溶液B.将样品放置于电泳槽阳极侧然后加入溶化的琼脂糖凝胶C.胶凝后,加入电泳缓冲液,拔出样品梳D.样品液与溴酚蓝缓冲液混合,再加入样品孔中E.电泳结束后以溴化乙锭染色,紫外光下观察区带3..电泳系统电场引力F的大小取决于:―――――――――――――――――――()A.粒子荷电量QB.电场强度EC.粒子荷电量Q及电场强度ED.粒子半径4.在非分子筛的连续电泳系统中,不同种类的带电物质其泳动率取决于:―――――()A.Q/r比值。
高考生物一轮复习科学探究系列6 电泳鉴定及应用
针对训练
1.科学家将海鱼的抗冻蛋白基因用PCR方法扩增,图1是扩增的目 的基因的示意图。为寻找合适的载体,科学家对某载体用EcoRⅠ和 SmaⅠ两种限制酶进行酶切后,再利用琼脂糖凝胶电泳得到图2所示 图谱(其中1号泳道是标准DNA样品,2号、3号、4号分别是EcoRⅠ 单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果)。下列 说法错误的是( )
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用_____________ (填“静置”或“摇床震荡”)培养。培养过程中抽样检测活菌数量 时,应采用________________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直 接计数法”),其原因是______________________________________ __________________________________________________________。 (3)电泳分离蛋白质混合样品的原理是__________________________ ___________________________________________________________ ________________________________________________。
图1
图2
A.应选用引物2和引物3对目的基因进行扩增 B.扩增5次后有22个等长的目的基因片段 C.DNA分子经过染色可在自然光下观察得到图2所示图谱 D.由图2可知该载体DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个
C [DNA聚合酶只能从引物的3′端开始延伸DNA链,因此应选用引 物2和引物3对目的基因进行扩增,A正确;DNA分子在PCR仪中经 过5次循环后会产生25=32个,其中只有2个DNA分子含有最初的模 板链,另仅含有第一次复制产生的单链参与形成的DNA分子有8个, 因此经过5次复制产生等长的目的自然光下很难看到,除非条带很亮,一般在 紫外光下观察,C错误;当仅用一种限制酶切割载体时,图中的2号 3号仅产生一种长度的DNA片段,说明该DNA分子中两种限制酶的 酶切位点各有一个,D正确。故选C。]
试题电泳(教学参考)
试题电泳(教学参考)实验十六溶胶的制备及电泳第一题、填空题1. 测胶体电泳的方法有____________法和______________法。
2.电泳实验中,在胶体上方加入与胶体___________一致的HCl水溶液,是为了使溶液中的________________处处一致。
3.将硫化氢气体通入酒石酸锑钾溶液中,生成胶体,为了除掉其正离子,应进行_________。
4. 氢离子迁移数的测定实验中,所用指示剂为_________________,界面下部为________性,呈________色,界面上部为________性,呈____________色。
5. 公式ζ=4πηυ/DE中υ为_________________________________。
6. 硫化锑在________电场作用下,向_______极移动其移动方向与_______离子移动方向一致。
7.用pH 计测定溶液的pH 时,所用的参比电极是_______,测定电极是_______。
在仪器定位时,必须使用_________ 溶液。
8. 界面移动法是直接测定溶液中离子的_______________________9. 胶体分散系统,分散质(或分散相)的颗粒大小介于nm之间。
10. 扩散双电层模型认为,在胶粒表面由反号离子电性中心构成的平面。
第二题、选择题1.电泳测定中,需恒定________不变。
(A)电压; (B)电流; (C)电流密度; (D)离子浓度。
2.迁移数测定中,需恒定_______不变。
(A)电压;(B)电流;(C)电流密度(D)离子浓度。
3.对硫酸铅胶体聚沉能力最强的是:(A)硫酸钠;(B)氯化钠;(C)硝酸镁;(D)硝酸钾。
4.胶体的泳动距离是测量:(A)下降值;(B)向正极升高;(C)向负极升高;(D)升降之和。
5.电泳实验中,两极间的距离是测量:(A) 水平横距离;(B) U形管的导电距离;(C) 两活塞间的胶体长度。
高中生物电泳
聚焦高中生物学试题中的电泳图电泳是常用的分离、鉴定技术,其本质是带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程中,由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离.电泳图是物质分离后呈现的结果图,常有DNA电泳图和蛋白质电泳图.新高考更加注重对能力和素养的考查,借用电泳图的高中生物学试题是近年高考命题的热点题型之一,如2021年河北卷第20题和2020年山东卷第17题. 笔者现对此类型试题进行归类,并分析电泳图试题的解题技巧.1.电泳与蛋白质结构和功能【例1】为研究与植物生长相关的基因及其作用,科学家获得了基因 A、B、C失活的多种突变体,电泳分析各植株中蛋白 m 和蛋白 n的表达情况,结果如图1.据图分析错误的是 ( )A.基因 B和 C分别控制蛋白 m 和n的合成B.蛋白 m 和蛋白n对植株生长起抑制作用C.基因 C比基因 B对植株生长的抑制更强D.基因 A 可能促进蛋白 m 和蛋白n的降解【分析】图1显示野生型植株高,无蛋白质 m 和n,其他类型植株高矮和蛋白质种类情况一目了然.A+B双突变体中有蛋白n说明基因 C与蛋白n的合成有关;A +C双突变体中有蛋白 m 说明基因 B与蛋白 m 的合成有关,A 项正确;根据野生型(有基因 A+B+C)和 A+B+C三突变体的植株均为高可知D项正确;根据图(b)(c)(d)植株矮小,可知B项正确;有基因C的植株比有基因B的植株高,说明基因B比基因C对植株生长的抑制能力更强,C 项错误.试题的能力考查点为获取信息的能力及实验探究能力,学科核心素养考查点为生命观念中的物质与能量观、科学思维及科学探究.【解题技巧】电泳图有关试题的特征是试题中呈现电泳结果图,解题的关键是读懂电泳图.不论是蛋白质电泳图还是DNA 电泳图,其主要是绘制有不同的条带,而不同的条带代表分子量不同的蛋白质或DNA.图中有正负极(有的电泳图也忽略正负极),正极为“起点”,条带为“终点”,起点和终点之间的距离不同表示分子量不同的蛋白质或DNA,越重或越长的蛋白质或DNA 跑得越慢,反之越快.电泳图旁边的长度不是代表DNA 分子的长度,而是代表跑带的长度,与DNA 分子的长度刚好相反.2.电泳与限制酶基因工程中用限制性核酸内切酶酶切DNA 分子,电泳可以使酶切的不同DNA 分子片段在凝胶中可视化.【例2】现有一长度为3 000碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制性核酸内切酶酶切后,进行凝胶电泳,使降解产物分开.用酶H 单独酶切,结果如图2(a)图.用酶B单独酶切,结果如图2(b)图.用酶H 和酶B同时酶切,结果如图2(c)图.该DNA 分子的结构及其酶切图谱是( )【分析】本题考查限制酶的相关知识,须知一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,且只能在特定的位点切割DNA分子.图2中甲、乙、丙是用不同的限制酶酶切的结果,电泳条带表示不同长度的DNA片段,限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列,不同限制酶识别位点不同,切点也不完全一样.酶切后得到的各个片段长度之和一定与线性DNA分子的总长度相等,图2(a)图是用酶H单独酶切线性DNA分子经电泳后得到的2条条带,说明该线性DNA分子上有1个酶H的酶切位点,且酶切后得到2 000bp和1 000bp两种长度的2个片段.图2(b)图是用酶B单独酶切线性DNA分子后得到的结果图,有2 000bp、600bp和400bp 三种长度的3个片段,且3个片段的总长度与线性DNA分子总长度相等,说明该线性DNA分子有2个酶B的酶切位点.图2(c)图是用酶H和酶B同时酶切的结果图,其酶切的总长度为1 400bp+600bp+400bp=2 400bp,与线性DNA分子总长3 000bp还相差600bp,即酶切后的片段应该是1 400bp+600bp+600bp+400bp=3 000bp,即有2个长度为600bp的片段.据此分析,A项的切割位点符合,A项正确.B项所示的切割位点,酶B单独切割时,切割出的片段长度分别为600bp、1 000bp、1 400bp,与图2结果不符,B项错误;C项所示的切割位点,酶B单独切割时,切割出的片段长度分别为400bp、1 200bp、1 400bp,不符合图2,C项错误;D项所示的线性DNA分子上,两种酶的切割位点的数量不对,D 项错误.【解题技巧】要根据电泳图条带数和条带所代表的DNA分子总长度“一眼望穿”酶切割位点个数.限制酶切割DNA分子时,切割后得到的片段数比切割后得到的位点数多1,即有n个切割位点,就有n+1个切割片段.3.电泳与遗传系谱图【例3】(2020年,山东卷,第17题)图3表示甲、乙两种单基因遗传病的家系图和各家庭成员基因检测的结果.检测过程中用限制酶处理相关基因得到大小不同的片段后进行电泳,电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段,数字表示碱基对的数目.下列说法正确的是()A.甲病的致病基因位于常染色体上,乙病的致病基因位于X染色体上B.甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致,替换后的序列可被MstⅡ识别C.乙病可能由正常基因上的两个BamHⅠ识别序列之间发生碱基对的缺失导致D.不携带致病基因、携带致病基因,两者均不患待测遗传病【解题技巧】“一眼望穿”电泳图中个体条带长度与纯合子、杂合子的关系,再分析遗传家系图中个体的基因型是解题的关键.此题电泳图中,条带数只有一条的个体一定是纯合子,如题中;条带数不止一条但代表的长度之和与最短的个体也应该是纯合子,如;条带数长度之和是最少的2倍的个体一定是杂合子,如个体和.因为基因在个体中是成对存在的,如果个体是纯合子,用限制酶处理,基因有相同切割位点,电泳结果显示条带数量之和构成该基因;如果个体是杂合子,用限制酶处理,两个基因可能存在不同切割位点,每个基因形成不同片段,电泳结果显示不同条带,每个基因片段需要结合相同基因进一步判断.如果最长的个体与最短个体的条带长度之和不是呈现2倍关系,则说明显性基因与隐性基因的长度不相等,一定有基因发生了碱基对的增添或缺失,如和.掌握了这个技巧就能“一眼望穿”个体基因电泳图.4.电泳与DNA指纹和亲子鉴定DNA亲子鉴定原理:采集生物检测样本并提取其中的DNA,沉淀DNA后通过PCR技术扩增出完整的基因组DNA,用限制性核酸内切酶将DNA样本切成特定的小片段,放进凝胶内,其带电荷和性质、电荷量及分子大小各不相同,在电场力的作用下泳动速率也不同,用电泳推动DNA小片段分离,再使用特别的“探针”去寻找基因.相同的基因会凝聚在一起,然后利用特别的染料在X光下,便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码,每个人的条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合.反复几次该过程,每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码,只要在十几至几十个DNA位点做检测,如果全部一样,就可以确定亲子关系,如果有3个以上的位点不同,则可排除亲子关系,有一两个位点不同,则应考虑基因突变的可能,可以加做一些位点的检测进行辨别.【例4】图4为某男子X,其两任妻子M、N以及四个战乱中走失的孤儿的DNA 样品的指纹图,哪两个孩子可能是该男子的子女及他们的母亲是()A.M的孩子是b,N的孩子是cB.M的孩子是c,N的孩子是bC.M的孩子是d,N的孩子是aD.M的孩子是d,N的孩子是b【分析】1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针,同人体核基因组成DN的A长的度酶不切等片的段杂杂交交带,获图得纹了由多个位点上的等位,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为“DNA指纹”,意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的.众多“DNA 指纹”组成“DNA指纹图谱”.从DNA指纹图分析,a、d的DNA指纹各有与X 相同的部分,说明他们可能是X的孩子.a的另一指纹与N相同,d的另一指纹与M 相同,说明a、d分别是N、M与X所生的子女.【解题技巧】此题的难点是对图示信息理解不到位.对图示信息的理解是解答本题的关键.如何理解图示信息呢?试题中所说的指纹图本质就是由不同基因组成.根据电泳条带比对,同源染色体一条来自父亲,一条来自母亲.子女的遗传物质来自父方和母方,比如b、c没有与男子X相同的DNA指纹图,说明一定不是其生物学意义上的孩子.5.电泳与PCR【例5】为检测目的基因是否成功导入植株,用PCR方法扩增相应植株的DNA 样本后,经电泳得到以下图谱(图5).其中1号为DNA标准样液(含标准长度的DNA片段),10号标本为蒸馏水.据此做出分析不合理的是()A.3号植株未成功导入相应的目的基因序列B.PCR产物的分子大小在250至500bp之间C.99号样品对应植株不是所需的转基因植株D.10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰【分析】电泳DNA时常常需要一定的数量,可用PCR方法扩增相应植株的DNA 样本后获得.分析电泳图可知2号为野生型,4~9号为转基因植株,10号标本为蒸馏水,其中4~9号理论上应包含目的基因,那么目的基因的长度应该是图中的250~500bp片段.3号植株包括250~500bp片段,应包含目的基因,A项错误;PCR过程中通常需要设计特定的引物来扩增特定的DNA片段,4~9号为转基因植株,理论上应包含目的基因,结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果,推测包含目的基因的片段大小为250~500bp,B项正确;9号不含有250~500bpDNA 片段,因此不是所需的转基因植株,C项正确;10号标本为蒸馏水,能够排除反应体系等对实验结果的干扰,因此10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰,D项正确.新高考的试题题量增加,素养考查更全面,往往设置新情境进行考查,利用电泳结果图进行考查往往是命题者比较青睐的试题类型之一,这类题可以是选择题,也可以是非选择题.试题通常给定一个情境,可以是科研成果,也可以是现实生活中与遗传有关的问题等等.试题的核心特征是有电泳图,电泳图可以是DNA分子电泳结果图,也可以是蛋白质分子电泳结果图.问题设置以电泳为中心,试题既能考查获取信息的能力,也可以多层次考查学科核心素养.。
电泳专题答案
电泳专题答案1、(1)碱基互补配对原则(或答DNA分子杂交)(2)孩子的每一对同源染色体必定一条来自母亲,一条来自父亲(3)B(4)DNA分子具有特异性(5)因为基因在DNA上,而不在RNA上,且DNA具有特异性(6)①B、C ②人体所有细胞均由一个受精卵有丝分裂产生,细胞核中均含有相同的遗传物质(或DNA)2、C3、BCD4、BC5、(1)DNA复制 Taq酶(2)分子的大小、形状(或凝胶的种类、密度;或电泳的电压大小)(3)6 46 (4)F2或F4(5) D解析:PCR技术的本质是DNA的体外复制,在DNA复制过程中用到Taq酶。
电泳技术与分子的物理性质有关,如分子量或分子大小、形状、等电点等。
从图1可看出电泳图中共有6种结果,推知由6种氨基酸组成。
蛋白质水解脱去的水分子数等于氨基酸数减去肽链数。
从图2分析,由于一个人的一半染色体来自父方一半来自母方,因此一个人的DNA电泳图谱应一半与父方一样一半与母方一样,图2中的C的DNA指纹图谱其中一半与母亲相同,另一部分与其最相近或相同的应是他的父亲。
最可能是F2.从图3的凝胶电泳分离图进行分析,只用限制性内切酶B进行酶切时得到了2个且2种的DNA片段,说明该酶只有一个酶切位点,排除B、C选项。
同样只用限制性内切酶A进行酶切时得到了3个且3种的DNA片段,说明该酶有二个酶切位点,对应不同的切点得到的DNA片段不同,只有选D得到的片段与图3一致。
6、(1)GATGCGTTCG (2)1 (3)Taq酶模板引物温度酸碱度(4)0 35S能标记蛋白质不能标记噬菌体的DNA(或噬菌体的DNA不含S或噬菌体的含S的蛋白质外壳未进入细菌)7、A8、CD9、答案:(1)常染色体隐性遗传Ⅲ-1、Ⅲ-2属于近亲婚配,均带有神经性耳聋基因(同一种隐性致病基因),后代隐性致病基因纯合的概率大(2分)(2)1 1/2(3)显(2分)腓骨肌萎缩症基因位于X染色体上(2分)(4)BbX d Y(2分)7/16(2分)10、答案(1)碱基对改变(或A变成T) 2 1 (2)放射性同位素(或荧光分子等)(3)---UGCACAA--- (4)Ⅱ-1和Ⅱ-4 Ⅱ-3 Ⅱ-211、AC12。
第06章 检验仪器,北方学院1 电泳技术和常用电泳仪习题
二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1.瑞典科学家A.Tiselius首先利用U形管建立移界电泳法的时间是()A.1920年B.1930年C.1937年D.1940年E.1948年2.大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH值是()A.7.2~7.4B.7.4~7.6C.7.6~8.0D.8.2~8.8E.8.8~9.23.下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中,错误的是()A.溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B.离子强度越高、电泳速度越快C.离子强度太低,缓冲液的电流下降D.离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明显降低E.离子强度太高,严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断4.电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是()A.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢B.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快C.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快D.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快E.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快5.一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是()A.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快B.颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快C.颗粒带净电荷量越大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快D.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越慢E.颗粒带净电荷量越小或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快6.电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外,还应具备()A.导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、B.不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C.不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D.导电、不带电荷、有电渗、热传导度大E.导电、带电荷、有电渗、热传导度小7.醋酸纤维素薄膜电泳的特点是()A.分离速度慢、电泳时间短、样品用量少B.分离速度快、电泳时间长、样品用量少C.分离速度快、电泳时间短、样品用量少D.分离速度快、电泳时间短、样品用量多E.分离速度慢、电泳时间长、样品用量少8.聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶,其优点是()A.机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率低E.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高9.20世纪60年代中期问世的等电聚焦电泳,是一种()A.分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术B.能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术C.利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术D.利用有pH值梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术E.用滤纸作为支持载体的电泳技术10.毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率,通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于()A.0.01pH单位B.0.05pH单位C.0.10pH单位D.0.15pH单位E.0.20pH单位11.双向凝胶电泳(二维电泳),最多可以分辨出的斑点数量是()A.500~1000B.1000~2000C.2000~4000D.4000~5000E.5000~1000012.下述免疫电泳优点的描述中,错误的是()A.加快了沉淀反应的速度B.是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再与抗体起反应C.本法微量化程度高D.多样化程度高E.应用范围小13.毛细管电泳技术最初发展的时期是()A.20世纪60年代B.20世纪70年代C.20世纪80年代初期D.20世纪80年代中后期E.20世纪90年代初期14.毛细管电泳时进样体积在nL级,样品浓度可低于的数量是()A.可低于10一2mo1/LC.可低于10一4mo1/LD.可低于10一5mo1/LE.可低于10一6mo1/L15.毛细管电泳的特点()A.容易自动化,操作繁杂,环境污染小B.容易自动化,操作简便,环境污染大C.容易自动化,操作繁杂,环境污染大D.不易自动化,操作简便,环境污染小E.容易自动化,操作简便,环境污染小16.毛细管等速电泳常用于分离()A.小离子、小分子、肽类及蛋白质B.大离子、小分子、肽类及蛋白质C.小离子、大分子、肽类及蛋白质D.小离子、中分子、肽类及蛋白质E.大离子、中分子、肽类及蛋白质17.理想的毛细管柱除应具有一定的柔性、易于弯曲,还应是()A.化学和电惰性的、紫外光可以透过、耐用又便宜B.化学和电惰性的、红外光可以透过、耐用又便宜C.化学和电惰性的、可见光可以透过、耐用又便宜D.化学和电惰性的、紫外和可见光可以透过、耐用又便宜E.化学和电惰性的、紫外和红外光可以透过、耐用又便宜18.目前所使用的毛细管柱内径是()A.5μm~25μmB.15μm~35μmC.25μm~75μmD.30μm~80μmE.50μm~100μm19.最初出现的电泳毛细管直径为()A.1mm~2mmB.1mm~3mmC.2mm~4mmD.3mm~5mmE.3mm~6mm20.毛细管电泳紫外检测器质量检测极限为()A.10-10~10-12B.10-13~10-16C.10-14~10-17D.10-15~10-18E.10-16~10-1921.毛细管电泳紫外检测器浓度检测极限为()A.10-1~10-3B.10-2~10-6C.10-5~10-8D.10-7~10-9E.10-10~10-1222.稳压稳流电泳仪属于中压电泳仪。
电泳试题及答案
电泳试题及答案1. 什么是电泳?电泳是一种利用电场驱动带电粒子在介质中移动的技术。
2. 电泳技术在哪些领域有应用?电泳技术广泛应用于生物化学、分子生物学、医学诊断、蛋白质纯化等领域。
3. 请列举两种常见的电泳类型。
两种常见的电泳类型是:凝胶电泳和毛细管电泳。
4. DNA电泳中,DNA片段的大小如何影响其迁移速度?DNA片段的大小越小,其迁移速度越快。
5. 蛋白质电泳中,蛋白质的等电点如何影响其迁移速度?蛋白质的等电点越接近凝胶的pH值,其迁移速度越慢。
6. 描述SDS-PAGE电泳的原理。
SDS-PAGE电泳是一种利用十二烷基硫酸钠(SDS)处理蛋白质,使其带上负电荷,通过聚丙烯酰胺凝胶进行分离的技术。
7. 什么是等电聚焦电泳?等电聚焦电泳是一种利用pH梯度分离蛋白质的技术,蛋白质在电场作用下移动到其等电点处,达到聚焦效果。
8. 如何通过电泳图谱判断DNA片段的大小?通过与已知大小的DNA标准品进行比较,可以判断DNA片段的大小。
9. 为什么在电泳实验中要使用缓冲液?缓冲液可以维持电泳过程中的pH稳定,防止蛋白质或DNA的降解。
10. 电泳过程中,电压和电流的关系是怎样的?电压与电流成正比,电压越高,电流越大。
11. 请解释电泳迁移率的概念。
电泳迁移率是指带电粒子在单位电场强度下单位时间内的迁移距离。
12. 电泳实验中,为什么需要使用染色剂?染色剂可以使蛋白质或DNA片段在凝胶上显色,便于观察和分析。
13. 什么是双向电泳?双向电泳是一种先进行等电聚焦电泳,再进行SDS-PAGE电泳的蛋白质分离技术。
14. 电泳实验中,凝胶浓度对分离效果有何影响?凝胶浓度越高,对小分子蛋白质的分离效果越好,但对大分子蛋白质的分离效果较差。
15. 描述电泳仪的基本结构。
电泳仪通常包括电源、电泳槽、凝胶和电极。
答案:1. 电泳是一种利用电场驱动带电粒子在介质中移动的技术。
2. 电泳技术在生物化学、分子生物学、医学诊断、蛋白质纯化等领域有应用。
电泳技术和电泳仪
电极
用于产生电场的部件,通常由 金属制成。
缓冲液
维持电泳过程中的pH值稳定 ,并具有导电性。
分离胶
用于分离不同带电粒子的凝胶 ,具有分子筛的作用。
电泳仪的功能和特点
高分辨率
能够分离和检测痕量级别的物 质。
高灵敏度
能够检测低浓度的物质。
快速分离
可在短时间内完成样品的分离 。
自动化
可实现自动化操作,提高工作 效率。
智能化
电泳仪的智能化主要体现在自动 化控制、数据分析和远程监控等 方面,通过与计算机和移动设备 的连接,实现了远程操作和实时
监控。
电泳技术和电泳仪的未来展望
交叉融合
随着多学科交叉融合的深入发展,电泳技术和电泳仪将与 质谱技术、纳米技术、生物信息学等领域进行更紧密的结 合,开拓新的应用领域。
个性化医疗
解释
电泳技术利用了带电粒子在电场 中的迁移率不同而实现分离,广 泛应用于生物、医学、环境监测 等领域。
电泳技术的原理
原理
在电场的作用下,带电粒子在电场中的迁移率取决于其电荷量、质量和分子大 小等因素。通过调整电场强度和电泳介质,可以控制带电粒子的迁移速度和分 离效果。
说明
电泳技术根据带电粒子的性质和分离目的的不同,可分为多种类型,如自由流 电泳、区带电泳、等电聚焦电泳等。
通过改进电泳介质和优化电泳条件,实现了对复杂样品的高分辨率分离,
提高了检测的灵敏度和准确性。
02
自动化和智能化
电泳技术正朝着自动化和智能化的方向发展,通过引入机器人技术和人
工智能算法,实现了电泳过程的自动化控制和智能化分析。
03
微流控芯片技术
微流控芯片技术结合电泳分离,可以实现样品的快速、高效分离,具有
电泳试题
2012年度(宝业电镀厂)技术晋升考试-----电泳部门____________________姓名____________________一、填空题(2x16=32分)1.电泳可分为____极电泳、____极电泳两大类。
2.电泳的过程包括____、____、____、____。
3.电泳涂料可分为哪三代:第一代为____涂料,第二代为____涂料,第三代为____涂料。
4.宝业厂主要用的是哪种涂料:____5.宝业厂电泳常用的打底工艺(颜色)有____、____、____(最少回答3个)6. 我们的工作环境中常见的强碱酸有____、____、____。
二、选择题(2x5=10分)1.以下哪种不属于常用的电泳槽( )A 圆盘电泳槽B 顺序电泳槽C 垂直板电泳槽D 水平电泳槽2.以下哪种不属于电泳的方法( )A 显微电泳B 自由界面电泳C 区带电泳D 凝胶电泳3.应用最广泛的电泳是( )A 显微电泳B 自由界面电泳C 区带电泳D 凝胶电泳4.区带电泳按( ) 分,可以分为平板式电泳,垂直板电泳,柱状(管状)电泳。
、A支持物的物理性状B支持物的装置形式C按pH的连续性 D 以上都不对5.以下哪一组不全是电泳设备( )A电泳槽、喷淋槽、电泳电源、电泳回收超滤机B电泳槽、喷淋槽、电泳电源、电泳涂装设备C电泳槽、喷淋槽、电泳电源、电泳漆D电泳槽、电泳电源、电泳回收超滤机、电泳涂装设备三、简答题(58分)1.电泳的原理(14分)2.电泳的工艺流程(14分)3.粘强酸后急救原则?(15分)4.粘强碱后急救原则? (15分)一、填空题1.阳极,阴极;2.电泳、电解、电沉积和电渗;3.环氧树脂涂料,丙烯酸树脂涂料,聚氨酯涂料;4. 丙烯酸树脂涂料;5.银底、镍底、白铜锡底;6.硫酸(H2SO4)、盐酸(HCL)、硝酸(HNO3)二、选择题BDCBC三、简答题1.答:阳极电泳用水溶性树脂是一种高酸值的羧酸盐,在水中溶解后以分子和离子平衡状态存在于直流电场中,通电后,由于两极的电位差,离子定向移动,阴离子沉积在阳极表面,而阳离子在阴极表面获得电子还原成胺,它是一个电化学反应,包括电泳、电解、电沉积和电渗四个同时进行的过程。
生物化学仪器分析技术课件-06电泳技术
• 通常凝胶的筛孔、透明度和弹性是随着凝
胶浓度的增加而降低的,而机械强度却随
着凝胶浓度的增加而增加。凝胶总浓度(T)
的计算公式如下:
• T=[(A+B)/M]×100%
• 式中叫代表Acr的重量(g);B代表交联剂 Bis的重量(g);M代表溶液的体积(mL)。
• 交联度(C)可按下式计算:
•
C=[B /(A+B)]×l00%
• 由于带电颗粒的泳动速度受电场强度影响, 使得同一带电颗粒在不同电场中泳动速度 是不同的,其泳动情况用迁移率来表示。
• 迁移率是指带电颗粒在单位电场强度下的 泳动速度,可用以下公式表示:
• m=v/E=Q/6πrη
• m:迁移率(cm2/V·s);v:颗粒泳动速 度(cm/s);E:电场强度(V/cm);Q: 被分离物所带净电荷;η:介质粘度;r: 颗粒半径。
电泳基本原理
• 任何带电物质由于其本身的解离作用或表 面上吸附其他带电质点,在电场中便会向 一定的电极移动。例如,蛋白质分子是由 氨基酸组成的,而氨基酸带有可解离的氨 基(一NH3+)和羧基(一COO-),是典型的 两性电解质,在一定的pH条件下,就会解 离而带电。带电的性质和多少取决于蛋白 质分子的性质和溶液的pH以及离子强度。
• 由上式可见迁移率与球形颗粒半径、 介质粘度、颗粒所带净电荷有关。
• 带电颗粒在电场申的泳动速度与本 身所带净电荷的数量,颗粒的大小 和形状有关。一般说,所带的电荷 数量越多,颗粒越小越接近球形, 则在电场中泳动速度越快,反之, 则越慢。
4.2 影响迁移率的主要因素
• 迁移率是胶体颗粒的物理常数,可 用来鉴定蛋白质以及研究它们的某 些物化性质,被分离物质迁移率除 受其本身性质影响外,还与其他外 界因素有关。影响颗粒迁移率的外 界因素讨论如下。
7,第六章电泳
1 名词解释
电泳、不连续凝胶电泳
2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。
3 采用电泳技术如何测定蛋白质分子量?如何测 定蛋白质等电点?
• 90年代又推出了分辨率极高的高效毛细管电泳。 多年来科学家们对电泳结果的分析做了大量的工 作,建立了各种实验方法,电泳后对分离物质可 以用染色、扫描、紫外吸收、放射自显影、生物 活性测定等方法进行分析,得到所需数据。
1.2 电泳速度 a)自由溶液中的电泳速度 静电引力: f=EZ 阻力: f '=6πrηv 当f=f '时,泳动速度为
分离特性 利用不连续电泳分离蛋白质,可改 变各种操作参数优化分离过程。例如, 调节pH值可改变荷电量Z,调节凝胶浓 度可改变迁移率,调节电压可改变电泳 速度等。因此,选择适当的操作条件, 可进行各种蛋白质的分离。
2.3 等电点聚焦
a)原理 一般的区带电泳利用溶质迁移率的差别进行 分离,而等电点聚焦(IEF)利用蛋白质和氨基酸 等两性电解质具有等电点,在等电点的pH下呈电 中性,不发生泳动的特点进行电泳分离。在电泳 设备中首先调配连续的pH梯度,然后使蛋白质在 电场作用下泳动到等于各自等电点的pH区域,从 而形成具有不同等电点的蛋白质区带。
3.2 等电பைடு நூலகம்聚焦
IEF的分离对象:蛋白质、两性分子 IEF操作的关键:是调配稳定的连续pH梯度, 一般采用氨基酸混合物或氨基聚合羧酸的缓冲 溶液调配pH梯度,前者的生物相容性好,但形 成的pH梯度稳定性较差;后者的聚合物含有许 多正负电荷,且与蛋白质的等电点范围相同, 缓冲能力强,pH梯度较为稳定,称为载体两性 电解质。 应用:分离、分析、pI测定
b)装置
线圈型装置:将Ampholine装入长软管中,并 将软管在水平方向上卷成线圈状,软管两 端加电压,使溶质发生电泳。电泳结束后, 剪断软管,回收分离软管中的组分。 柱式等电聚焦仪不使用密度梯度来稳定pH梯 度,而是将待分离样品和两性电解质混合 后,装入一长的塑料管中并在圆柱上绕上 螺旋,然后进行电泳操作。
电泳技术和常用电泳仪
样品点于滤纸中央
滤纸被润湿
盖上绝缘密封罩
输入直流电压
(二)醋酸纤维素薄膜电泳 检测微量异常蛋白
特点: 对蛋白质吸附小,消除拖尾现象
分离速度快 电泳时间短 样品用量少
(三)凝胶电泳
特点:机械强度好、弹性大、透明、 化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、 样品量小、分辨率高
(四)等电聚焦电泳
1937,Tiselius将血清蛋白分成清蛋白、α1-、
α2-、β、γ-球蛋白(移界电泳法)
-
点样线
+
诺贝 尔奖
20世纪50年代,出现支持物的区带电泳 80年代后期,出现毛细管电泳,芯片电泳
目前,电泳技术在生物大分子尤其是
蛋白质和核酸的分离、分析和鉴定上
具有巨大优势。 生物化学与分子生物学的“常规武器”
第一节 电泳原理
基本原理:
不同的物质,由于其带电性质、颗粒 形状和大小不同,因而在一定的电场中它 们的移动方向和移动速度也不同,因此可 使它们分离。
一、电泳迁移率(Electrophoresis mobility)
+ E + + + f · + +
Q
+
L
F
_ _ _ _ _ _
带电颗粒的电场力: F=E•Q=f• f—摩擦系数
HPCE的特点:
高效(每米塔板数为十万、百万、千万) 高速(几十秒内完成) 高灵敏度(10-19~10-21mol) 样品用量少(纳升) 应用范围广(无机离子到整个细胞)
重现性
进样的准确性
HPCE的基本工作原理
溶液中的带电粒子以高压电场为驱动 力,沿毛细管通道,以不同速度向与 其所带电荷相反的电极方向迁移,并 依据样品中各组分之间淌度和分配行 为上的差异而实现分离。
2024届高三生物一轮复习课件PCR技术与电泳相关问题
某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水 蛭素基因中的特定位点引入特定突变, 使水蛭素第47位的天冬酰胺(密码子为 AAC、AAU)替换为赖氨酸(密码子为 AAA、AAG),从而提高水蛭素的抗凝 血活性。原理见图。 2.中引物2或引物3设计的要求是 .
将两个基因的未端序列设计在同一引
物中(或引物2和引物3中必须具有互
补配对的片段)
(3)重叠延伸PCR技术可用于基因的定点突变。基因定点突变是根据目的基因(如图2 蛋白A基因)的序列,设计4条单链寡核苷酸片段为引物(图2中的引物A→D),原理是 取引物A、B进行PCR1反应,以及引物C、D进行PCR2反应,然后将需要的两个片
段混合、延伸并大量扩增。图2引物B和引物C中的“◠”代表 突变的碱基 ,引物 B和引物C碱基序列间存在的关系是______互___补_。
两种引物的碱基序列没有相关性
例2.(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断积累,荧光信号 的强度也随之增加。根据荧光强度的变化监测产物量的变化,得到一条 荧光扩增曲线(如图2)。
①出现“平台期”最可能的原因是__试__剂__盒__中__的___原__料__、__引__物__和__探_。针数量 一定,超出一定的循环数后,荧光分子不再增加
PCR定点突变技术—重叠延伸PCR
该技术要使用四条引物。其中引物2和 3的突起处代表与模板链不能互补的突 变位点,而这两条引物有部分碱基(包 括突变位点)是可以互补的。因此,分 别利用引物1和2,引物3和4进行PCR 后,得到的DNA片段可以通过引物2和 3互补的碱基杂交在一起,再在DNA聚 合酶的作用下延伸,就能成为一条完整 的DNA片段。最后,用引物1和4进行 扩增得到含有突变位点的DNA片段。 通过测序可以检验定点突变是否成功。
第06章 电泳技术和常用电泳仪习题
六章电泳技术和常用电泳仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1.电泳2.毛细管电泳的电场强度3.蛋白质的等电点4.电泳速度5.迁移率6.毛细管电泳技术7.电泳淌度8.迁移时间9.毛细管电泳电渗流10.焦耳热11.电渗12. 吸附作用二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1.瑞典科学家A.Tiselius首先利用U形管建立移界电泳法的时间是()A.1920年B.1930年C.1937年D.1940年E.1948年2.大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH值是()A.7.2~7.4B.7.4~7.6C.7.6~8.0D.8.2~8.8E.8.8~9.23.下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中,错误的是()A.溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B.离子强度越高、电泳速度越快C.离子强度太低,缓冲液的电流下降D.离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明显降低E.离子强度太高,严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断4.电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是()A.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢B.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快C.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快D.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快E.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快5.一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是()A.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快B.颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快C.颗粒带净电荷量越大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快D.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越慢E.颗粒带净电荷量越小或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快6.电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外,还应具备()A.导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、B.不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C.不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D.导电、不带电荷、有电渗、热传导度大E.导电、带电荷、有电渗、热传导度小7.醋酸纤维素薄膜电泳的特点是()A.分离速度慢、电泳时间短、样品用量少B.分离速度快、电泳时间长、样品用量少C.分离速度快、电泳时间短、样品用量少D.分离速度快、电泳时间短、样品用量多E.分离速度慢、电泳时间长、样品用量少8.聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶,其优点是()A.机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率低E.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高9.20世纪60年代中期问世的等电聚焦电泳,是一种()A.分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术B.能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术C.利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术D.利用有pH值梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术E.用滤纸作为支持载体的电泳技术10.毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率,通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于()A.0.01pH单位B.0.05pH单位C.0.10pH单位D.0.15pH单位E.0.20pH单位11.双向凝胶电泳(二维电泳),最多可以分辨出的斑点数量是()A.500~1000B.1000~2000C.2000~4000D.4000~5000E.5000~1000012.下述免疫电泳优点的描述中,错误的是()A.加快了沉淀反应的速度B.是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再与抗体起反应C.本法微量化程度高D.多样化程度高E.应用范围小13.毛细管电泳技术最初发展的时期是()A.20世纪60年代B.20世纪70年代C.20世纪80年代初期D.20世纪80年代中后期E.20世纪90年代初期14.毛细管电泳时进样体积在nL级,样品浓度可低于的数量是()A.可低于10一2mo1/LB.可低于10一3mo1/LC.可低于10一4mo1/LD.可低于10一5mo1/LE.可低于10一6mo1/L15.毛细管电泳的特点()A.容易自动化,操作繁杂,环境污染小B.容易自动化,操作简便,环境污染大C.容易自动化,操作繁杂,环境污染大D.不易自动化,操作简便,环境污染小E.容易自动化,操作简便,环境污染小16.毛细管等速电泳常用于分离()A.小离子、小分子、肽类及蛋白质B.大离子、小分子、肽类及蛋白质C.小离子、大分子、肽类及蛋白质D.小离子、中分子、肽类及蛋白质E.大离子、中分子、肽类及蛋白质17.理想的毛细管柱除应具有一定的柔性、易于弯曲,还应是()A.化学和电惰性的、紫外光可以透过、耐用又便宜B.化学和电惰性的、红外光可以透过、耐用又便宜C.化学和电惰性的、可见光可以透过、耐用又便宜D.化学和电惰性的、紫外和可见光可以透过、耐用又便宜E.化学和电惰性的、紫外和红外光可以透过、耐用又便宜18.目前所使用的毛细管柱内径是()A.5μm~25μmB.15μm~35μmC.25μm~75μmD.30μm~80μmE.50μm~100μm19.最初出现的电泳毛细管直径为()A.1mm~2mmB.1mm~3mmC.2mm~4mmD.3mm~5mmE.3mm~6mm20.毛细管电泳紫外检测器质量检测极限为()A.10-10~10-12B.10-13~10-16C.10-14~10-17D.10-15~10-18E.10-16~10-1921.毛细管电泳紫外检测器浓度检测极限为()A.10-1~10-3B.10-2~10-6C.10-5~10-8D.10-7~10-9E.10-10~10-1222.稳压稳流电泳仪属于中压电泳仪。
电泳技术和常用电泳仪习题参考答案
第六章电泳技术和常用电泳仪习题参考答案一、名词解释1.电泳:指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。
2.毛细管电泳的电场强度:在给定长度的毛细管两端施加一个电压后所形成的电效应强度。
3.蛋白质的等电点:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。
4.电泳速度:在单位时间内,带电粒子在毛细管中定向移动的距离。
5.迁移率:带电粒子在单位电场强度下的移动速度,常用μ来表示。
6.毛细管电泳技术:是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度(淌度)和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
7.电泳淌度:带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度之比。
8.迁移时间:毛细管中,带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。
9.毛细管电泳电渗流:在高电压下,溶液中的正电荷与毛细管壁表面的负电荷之间作用,引起流体朝负极方向运动的现象。
10.焦耳热:在高电场下,毛细管中的电解质会产生自热现象,称该热量为焦耳热。
11.电渗:电场中液体对于固体支持物的相对移动。
12.吸附作用:介质对样品的滞留作用。
二、选择题【A型题】1.C2.D3.B4.E5.A6.B7.C8.E9.D10.A11.E12.E13.D14.C15.E16.A17.D18.C19.E20.B21.C22.D23.E24.B25.D26.E27.D28.B29.C30.A31.B32.D33.C34.D35.B36.C37.D38D【X型题】1.ABCE2.ABCD3.ABCDE4.ABCE5.ABCD6.ABCE7.ABE8.ACE9.ABC10.ACDE11.ABCD12.ABCDE13.ABCE14.ABCD15.BCDE16.ABCDE17.BCDE18.ABCE19.ABDE20.ABCDE21.ABCD22.ABCD23.ABCE24.ABCD25.BCDE26.ABDE三、简答题1.简述电泳、电泳技术的概念。
电泳技术习题
生化实验技术(电泳)习题一、是非题(对的打“√”,错的打“×”)1.电泳分离技术适用于分离各种离子和非离子混合物。
()2.高压电泳是指电场强度>20伏/cm,常用于高分子离子的分离。
()3.电场引力F的大小取决于粒子荷电量Q及电场强度E。
()4.在非分子筛的连续电泳系统中,不同种类的带电物质其泳动率取决于Q/r比值。
()5.电泳缓冲液常用离子强度为0. 2~2.0之间。
()6.SDS-PAGE主要用于分离分子量不同的蛋白质混合物。
()7.电泳时由于电极反应,使阴极产碱,阳极产酸,故通常电极液要用缓冲溶液。
()8.蛋白质在小于等电点的pH溶液中,向阳极移动,而在大于等电点的pH溶液中,将向阴极移动。
()9.名词解释10.电泳迁移率11.电场强度12.电渗现象二、简述题1.简述不连续PAGE分离血清蛋白质的基本原理。
2. 试列举出三种电泳方法,比较其优缺点和应用范围。
3. 简述等电聚焦电泳分离蛋白质的的基本原理。
4. 在pH6.5的谷氨酸和丙酮酸混合液中,加入适量的新鲜猪肝匀浆后于37℃水浴中保温30分钟,煮沸后蛋白质沉淀,将上清液点在层析滤纸上,用酚水饱和液进行层析,层析结束后用茚三酮显色出现两条带,这两条带各是什么物质:说明原因?三、选择题(只有一个正确答案)1.电泳系统中热效应取决于下列哪项因素―――――-―――――――――――――()A.电流强度B.支持物的电渗作用C.颗粒所带净电荷数及其大小,形状D.溶液的pH值E.溶液的离子强度2..进行DNA的琼脂糖凝胶电泳时,下列哪步操作是错误的:――――――――――――()A.称取琼脂糖配制一定浓度的琼脂糖溶液B.将样品放置于电泳槽阳极侧然后加入溶化的琼脂糖凝胶C.胶凝后,加入电泳缓冲液,拔出样品梳D.样品液与溴酚蓝缓冲液混合,再加入样品孔中E.电泳结束后以溴化乙锭染色,紫外光下观察区带3.. 电泳系统电场引力F的大小取决于:―――――――――――――――――――()A. 粒子荷电量QB. 电场强度EC. 粒子荷电量Q及电场强度ED. 粒子半径4. 在非分子筛的连续电泳系统中,不同种类的带电物质其泳动率取决于:―――――()A. Q/r比值。
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六章电泳技术和常用电泳仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1.电泳2.毛细管电泳的电场强度3.蛋白质的等电点4.电泳速度5.迁移率6.毛细管电泳技术7.电泳淌度8.迁移时间9.毛细管电泳电渗流10.焦耳热11.电渗12. 吸附作用二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1.瑞典科学家A.Tiselius首先利用U形管建立移界电泳法的时间是()A.1920年B.1930年C.1937年D.1940年E.1948年2.大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH值是()A.7.2~7.4B.7.4~7.6C.7.6~8.0D.8.2~8.8E.8.8~9.23.下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中,错误的是()A.溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B.离子强度越高、电泳速度越快C.离子强度太低,缓冲液的电流下降D.离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明显降低E.离子强度太高,严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断4.电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是()A.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢B.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快C.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快D.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快E.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快5.一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是()A.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快B.颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快C.颗粒带净电荷量越大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快D.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越慢E.颗粒带净电荷量越小或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快6.电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外,还应具备()A.导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、B.不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C.不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D.导电、不带电荷、有电渗、热传导度大E.导电、带电荷、有电渗、热传导度小7.醋酸纤维素薄膜电泳的特点是()A.分离速度慢、电泳时间短、样品用量少B.分离速度快、电泳时间长、样品用量少C.分离速度快、电泳时间短、样品用量少D.分离速度快、电泳时间短、样品用量多E.分离速度慢、电泳时间长、样品用量少8.聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶,其优点是()A.机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率低E.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高9.20世纪60年代中期问世的等电聚焦电泳,是一种()A.分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术B.能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术C.利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术D.利用有pH值梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术E.用滤纸作为支持载体的电泳技术10.毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率,通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于()A.0.01pH单位B.0.05pH单位C.0.10pH单位D.0.15pH单位E.0.20pH单位11.双向凝胶电泳(二维电泳),最多可以分辨出的斑点数量是()A.500~1000B.1000~2000C.2000~4000D.4000~5000E.5000~1000012.下述免疫电泳优点的描述中,错误的是()A.加快了沉淀反应的速度B.是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再与抗体起反应C.本法微量化程度高D.多样化程度高E.应用范围小13.毛细管电泳技术最初发展的时期是()A.20世纪60年代B.20世纪70年代C.20世纪80年代初期D.20世纪80年代中后期E.20世纪90年代初期14.毛细管电泳时进样体积在nL级,样品浓度可低于的数量是()A.可低于10一2mo1/LB.可低于10一3mo1/LC.可低于10一4mo1/LD.可低于10一5mo1/LE.可低于10一6mo1/L15.毛细管电泳的特点()A.容易自动化,操作繁杂,环境污染小B.容易自动化,操作简便,环境污染大C.容易自动化,操作繁杂,环境污染大D.不易自动化,操作简便,环境污染小E.容易自动化,操作简便,环境污染小16.毛细管等速电泳常用于分离()A.小离子、小分子、肽类及蛋白质B.大离子、小分子、肽类及蛋白质C.小离子、大分子、肽类及蛋白质D.小离子、中分子、肽类及蛋白质E.大离子、中分子、肽类及蛋白质17.理想的毛细管柱除应具有一定的柔性、易于弯曲,还应是()A.化学和电惰性的、紫外光可以透过、耐用又便宜B.化学和电惰性的、红外光可以透过、耐用又便宜C.化学和电惰性的、可见光可以透过、耐用又便宜D.化学和电惰性的、紫外和可见光可以透过、耐用又便宜E.化学和电惰性的、紫外和红外光可以透过、耐用又便宜18.目前所使用的毛细管柱内径是()A.5μm~25μmB.15μm~35μmC.25μm~75μmD.30μm~80μmE.50μm~100μm19.最初出现的电泳毛细管直径为()A.1mm~2mmB.1mm~3mmC.2mm~4mmD.3mm~5mmE.3mm~6mm20.毛细管电泳紫外检测器质量检测极限为()A.10-10~10-12B.10-13~10-16C.10-14~10-17D.10-15~10-18E.10-16~10-1921.毛细管电泳紫外检测器浓度检测极限为()A.10-1~10-3B.10-2~10-6C.10-5~10-8D.10-7~10-9E.10-10~10-1222.稳压稳流电泳仪属于中压电泳仪。
其输出电压、电流的调节范围为()A.输出电压的调节范围为0V~100V、输出电流为0mA~50mAB.输出电压的调节范围为0V~200V、输出电流为0mA~60mAC.输出电压的调节范围为0V~300V、输出电流为0mA~80mAD.输出电压的调节范围为0V~600V、输出电流为0mA~100mAE.输出电压的调节范围为0V~800V、输出电流为0mA~200mA23.双向电泳样品经过电荷与质量两次分离后()A.可得到分子的分子量,分离的结果是带B.可得到分子的等电点,分离的结果是点C.可得到分子的等电点,分离的结果是带D.可得到分子的等电点、分子量,分离的结果是带E.可得到分子的等电点、分子量,分离的结果是点24.传统的单向电泳方法最多只能分析的蛋白质种数是()A.50B.100C.150D.200E.25025.利用毛细管电泳芯片技术,整个分离过程完成的时间是()A.10s以内B.20s以内C.30s以内D.45s以内E.60s以内26.利用毛细管电泳芯片技术分离DNA,整个分离过程在45秒内,而芯片的长度仅为()A.1.8cmB.2.6cmC.3.0cmD.3.5cmE.3.8cm27.缺铁性贫血时可由于转铁蛋白的升高而呈现增高的区带是()A.白蛋白B.α1球蛋白C.α2球蛋白D.β球蛋白E.γ球蛋白28.血清蛋白电泳图谱能辅助进行某些疾病的诊断及鉴别诊断。
下述区带中急性炎症时加深的是()A.白蛋白B.α1、α2C.α2、βD.β、γE.α129.应用电泳技术进行患者血液中Hb的类型及贫血类型的临床诊断,其增高能表现“β-轻型地中海贫血”的重要特征的血红蛋白是()A.HbCB.HbDC.HbA2D.HbEE.HbS30.电泳分析的血标本,冰箱冷藏保存标本可稳定的时间是()A.1周B.2周C.3周D.4周E.5周31.电泳试剂的保存要遵循试剂的保存条件进行,一般凝胶片保存的条件是()A.2~8℃B.干燥的室温C. O O CD.-20 O O CE.-80 O O C32.用正常人血清制备质控物。
观察数据变异的情况,需连续监测的时间是()A.5天B.10天C.15天D.20天E.30天33.电泳法分离蛋白质时,缓冲液的离子强度的一般要求是()A.0.01~0.05B.0.02~0.1C.0.02~0.2D.0.1~0.2E.0.2~0.534.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质,除一般电泳电荷效应外,欲使分辩力提高还应有的作用是()A.浓缩作用B.扩散作用C.重力作用D.分子筛作用E.电渗作用35.下述有关毛细管区带电泳的叙述中,不正确的是()A.也称为毛细管自由溶液区带电泳B.是毛细管电泳中使用最少的一种技术C.根据组分的迁移时间进行定性D.根据电泳峰的峰面积或峰高进行定量分析E.它适用于小离子、小分子、肽类、蛋白质的分离,36.下述对毛细管凝胶电泳原理的叙述中,不正确的是()A.是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳B.凝胶具有多孔性C.能根据待测组分的离子强度不同而进行分离D.起类似分子筛的作用E.适用于分离、测定肽类、蛋白质、DNA类物质的分离37.要显示出毛细管径柱的优越性,须使毛细管内径限制的范围是()A.50μm以下B.100μm以下C.150μm以下D.200μm以下E.250μm以下38.进行尿液电泳分析时,对尿标本进行浓缩处理所要求的尿液中蛋白质的浓度是()A.3g/L~5g/LB.5g/L~10g/LC.10g/L~15g/LD.15g/L~20g/LE.20g/L~30g/L【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
1.影响电泳的外界因素()A.电场强度B.溶液的pH值C.溶液的离子强度D.带电性质E.吸附作用2.电泳技术根据其功能可分类为()A.制备型B.分析型C.转移型D.浓缩型E.自动型3.电泳技术根据其工作原理可分为()A.移界电泳B.区带电泳C.等速电泳D.等电聚焦电泳E.免疫电泳4.国内外的电泳仪都趋向于控制的参数有()A.电压B.电流C.功率D.体积E.时间5.电泳的辅助设备有()A.恒温循环冷却装置B.伏时积分器C.凝胶烘干器D.分析检测装置E.电泳槽6.琼脂糖凝胶适合于()A.免疫复合物、核酸与核蛋白的分离B.免疫复合物、核酸与核蛋白的鉴定C.免疫复合物、核酸与核蛋白的纯化D.细菌或细胞中复杂的蛋白质组分分离E.在临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的检测7.聚丙烯酰胺凝胶具有的优点有()A.机械强度好、弹性大B.透明、化学稳定性高C.有电渗作用、设备简单D.样品量多E.分辨率高8.等电聚焦电泳法在电极之间形成的pH梯度是()A.稳定的B.间断的C.连续的D.瞬间的E.线性的9.等速电泳的特点有()A.所有谱带以同一速度移动B.区带锐化C.区带浓缩D.区带稀释E.区带圆化10.蛋白质的电泳迁移率与下述因素中有关的是()A.所带的净电荷B.重量C.颗粒直径D.质/荷比E.形状的不同11.免疫电泳可以用来研究()A.抗原和抗体的相对应性B.测定样品的各成分以及它们的电泳迁移率C.确定复合物中含有某种蛋白质D.鉴定抗原或抗体的纯度E.抗原和抗体分子量的大小12.毛细管电泳技术实现分离的原理依据是()A.以毛细管为分离通道B.以高压直流电场为驱动力C.样品中各组分之间迁移速度D.样品中各组分之间分配行为上的差异E.样品所带电荷13.毛细管电泳的特点()A.高灵敏度、高分辨率B.高速度C.样品少D.易自动化、操作复杂E.应用范围广14.下列对毛细管凝胶电泳描述中,正确的是()A.是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳B.凝胶具有多孔性、起类似分子筛的作用C.能根据待测组分的质荷比和分子体积的不同而进行分离D.在人类基因组计划中起重要作用E.是电泳中惟一的分离组分与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳方法15.下列对毛细管等速电泳的描述中,正确的是()A.目前应用很多B.缓冲系统由前后两种不同浓度的电解质组成C.被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中发生分离D.是电泳中惟一的分离组分与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳方法E.常用于分离小离子、小分子、肽类及蛋白质16.毛细管电泳仪的主要结构有()A.高压源B.毛细管柱C.检测器D.缓冲液槽E.记录装置17.自动化电泳仪实现自动化处理的步骤有()A.预处理电泳凝胶B.加样到电泳C.染色D.凝胶扫描E.结果处理18.全自动荧光/可见光双系统电泳仪的最大优点是()A.荧光系统全自动B.灵敏度高C.准确度高D.快采用低压、低温系统E.速度非常19.双向电泳技术具有的特点有()A.分辨率最高B.信息量最多C.有阴极漂移D.pH梯度稳定E.重复性好20.DNA测序系统可用于()A.DNA序列测定B.杂合子自动检测C.基因表达D.序列比较E AFLP指纹图谱21.电泳分析前的质量控制包括()A.标本采集B.标本保存C.电泳方法D.电泳试剂保存E.标本的稀释22.为提高毛细管胶束电动色谱的选择性和分离度,进行优化的手段有()A.选择胶束的种类和浓度B.改变缓冲液的种类C.改变组分、pHD.改变离子强度E.改变电场强度23.聚四氟乙烯材料做成的毛细管柱的主要缺点是()A.很难得到内径均匀的管子B.对样品有吸附作用C.热传导性差D.电渗强E.有变性现象24.对全自动醋纤膜电泳仪描述正确的是()A.自动化程度高B.灵敏度低C.只需将样品、试剂、电泳片放好,人员可离机完成实验并得到结果D.无法分析尿蛋白、脑脊液蛋白E.同工酶分析灵敏度高25.下列对醋酸纤维素薄膜电泳描述中,正确的是()A.薄膜对蛋白质样品吸附性大B.几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象C.分离速度快、电泳时间短D.样品用量少E.特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测26.电泳对支持物的一般要求为()A.不溶于溶液,不导电B.吸液量多而稳定C.不带电荷,有电渗D.不吸附蛋白质等其它电泳物质,热传导度大E.特结构均一而稳定,分离后的成份易析出三、简答题1.简述电泳、电泳技术的概念。