査式培养基和高氏培养基成分
常用细菌培养基配方
常用抗生素氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素(tetracyyline)(10mg/ml)溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
各种培养基成分
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
7H2O 0.48g,NaCO310g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
微生物学实验常用培养基的配制
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
各种培养基配方
146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
实验室常用培养基
.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。
如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。
(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。
(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
常用培养基配制方法
常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。
(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。
(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。
(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。
(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。
将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。
(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。
(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(整理)各种培养基成分
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
7H2O 0.48g,NaCO3 10g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
16种培养基配方
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养xx培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4。
7H2O 0.48g,NaCO310g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
查氏、TBS、LB培养基等培养基的制备
1. 查氏培养基--Czapek–Dox Medium蔗糖 30 g,NaNO3 3 g,K2HPO4 1 g, KCl 0.5 g, MgSO4· 7H2O 0.5 g,FeSO4 · 7H2O 0.01 g,琼脂 15 g,水 1000 mL,并用氢氧化钠调节 pH 至7.2-7.4。
121℃灭菌 20 min,冷却后备用。
液体培养基不加琼脂,用于菌种的扩大培养。
成分:硝酸钠3g磷酸氢二钾1g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000mL制法: 加热溶解,分装后121℃灭菌20min。
用途: 青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。
2. TSB 培养基--牛肉膏蛋白胨培养基:(牛肉膏 5g, 蛋白胨 10g, NaCl 5g, H2O 1000mL, pH 调至 7.2 ~7.4。
)胰蛋白胨 15 g,大豆蛋白胨 5 g,NaCl 5 g,牛肉膏 5 g,琼脂 15 g,水 1000 mL,并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。
121℃灭菌 20 min,冷却后备用。
液液体培养基不加琼脂,用于菌种的扩大培养。
3. LB 培养基---细菌基础培养基(Tryptone 10g, Yeast extract 5g, NaCl 10g, 水1000mL, pH 调至7.2 ~7.4。
)胰蛋白胨 10 g,酵母提取物 5 g,NaCl 5 g,琼脂 15 g,水 1000 mL,并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。
121℃灭菌 20 min,冷却后备用。
液体培养基不加琼脂,用于菌种的扩大培养。
4、soc培养基---改良的LB培养基SOC培养基组份浓度:2% (W/V) Tryptone ,0.5% (W/V) Yeast Extract ,0.05% (W/V) NaCl ,2.5 mM KCl 10 mM MgCl2,20 mM glucose。
常用培养基制备灭菌与消毒
分生孢子丝
气生菌丝 琼脂表 面 基内菌丝
The cross section of an actinomycete colony showing the substrate mycelium(基内菌丝) and aerial mycelium (气 生菌丝)with chains of conidiospores(分生孢子)
放线菌生长到一定阶段,大部分气生菌丝 分化成孢子丝,通过横割分列的方式产生 成串的分生孢子。孢子丝形态多样,有直、 弯曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。 孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等 等。它们的形态构造都是放线菌分类鉴定 的重要依据。 放线菌的菌落早期绒状同细 菌菌落月牙状相似,后期形成孢子菌落呈 粉状、干燥,有各种颜色呈同心圆放射状。
平板划线法: 1、倒平板,标记培养基名称,编号和实验 日期。
2、划线方法
稀释混合平板法 : 1、先加菌 2、倒平板时注意培养基温度 3、混合均匀
微生物培养技术
1、斜面接种 2、液体培养基接种 3、穿刺接种 将已接种的斜面、半固体和液体培养基放置培
养箱 中培养将生长好的菌种用牛皮纸包好,置4℃
冰箱中
查氏合成培养基
查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的 培养基,其配方如下:
NaNO3 3g,K2HPO4 1g, KCl 0.5g, MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4 0.01g,蔗糖 30g, H2O 1000ml,pH自然
麦芽汁培养基
用来培养酵母菌,干麦芽粉加4倍水,在5060℃保温糖化3-4小时,用碘液试验检查至 糖化完全为止,调整糖液浓度,煮沸后,过滤, 调pH为6.0。
有二层小梗
青霉
青霉的形态结构 A单轮型 B非对称型 C对称二轮型
生理生化实验培养基
(1)高氏一号培养基:可溶性淀粉20g,琼脂20g,硝酸钾1.0g,磷酸氢二钾0.5g,氯化钠0.5g,七水硫酸亚铁0.01g,七水硫酸镁0.5g,水1000毫升,Ph7.2-7.4,使用蒸水配置,灭菌条件为121℃,20 min。
(2)高氏一号液体培养基:可溶性淀粉20g,磷酸氢二钾0.5g,氯化钠0.5g,七水硫酸亚铁0.01g,七水硫酸镁0.5g,水1000毫升,Ph7.2-7.4,使用蒸水配置,灭菌条件为 121 ℃,20 min。
(3)牛肉膏固体培养基:牛肉膏3g,蛋白胨 10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000ml,ph7.0,使用蒸水配置,灭菌条件为 121 ℃,20 min。
牛肉膏液体培养基:牛肉膏3g,蛋白胨 10g,氯化钠5g,蒸馏水1000ml,ph7.0,使用蒸水配置,灭菌条件为 121 ℃,20 min。
(4)察氏培养基:硝酸钠3g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,Ph7.2-7.4,使用蒸水配置,灭菌条件为 121 ℃,20 min。
(5)黑色素产生培养基: L-络氨酸1g,酵母浸汁1g,NaCL8.5g,琼脂16g,加热溶解于水后,以蒸馏水定容至1000mL,PH7.2,灭菌条件为 121 ℃,20 min。
(6)硫化氢产生培养基:蛋白胨10g,柠檬酸铁0.5g,琼脂15g,加热溶解于水后以蒸馏水定容至1000ml,PH7.2,121℃灭菌20min,备用。
(7)明胶液化培养基:蛋白胨5g,葡萄糖20g,明胶200g,以蒸馏水定容至1000ml,ph7.2-7.4,121度灭菌20min,备用。
(8)纤维素水解培养基:七水硫酸镁 0.5g,Nacl 0.5g,磷酸氢二钾0.5g,硝酸钾1g,加热溶解于水后以蒸馏水定容至1000ml,ph7.2-7.4,滤纸条(长5cm,宽0.8cm),121度灭菌20min,备用。
16种培养基配方
9.查(察)氏培养基
成分:
NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO
4. 7H2O
0.5g,KCL
0.5g,FeSO
4.7H2O
0.01g,蔗糖30g,琼脂15~20g,蒸馏水1000mL,pH值自然。
制法:
加热溶解,分装后121℃灭菌20min。
0.025g,水1000mL,pH
7.2~
7.6
制法:
按量将各成分(酚红除外)混合,加热使完全溶解,调pH至
7.4±
0.2。加1%的酚红溶液
2.5mL,混匀。121℃高压灭菌15min
13.高氏一号(淀粉琼脂)培养基(主用于放线菌、霉菌培养)
可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCL
0.5g,K2HPO4
7.豆芽汁液体培养基
成分:
豆芽汁10mL,磷酸氢二铵1g,KCL
0.2g,MgSO
4.7H2O
0.2g,xx20g。
制法:
将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至
6.2~
6.4,分装于三角瓶中,
0.04%的溴甲酚紫酒精溶液(黄色
5.2~
6.8紫色)作为指示剂,115℃灭菌20min。
豆芽汁制备:
7.2~
7.4,121℃灭菌20min。若加入15~20g琼脂即成固体培养基。
15.xx培养基(醋酸钠xx培养基)
葡萄糖
1.0g,KCL
1.8g,酵母汁
2.5g,醋酸钠
8.2g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH自然,
0.7kg/cm2灭菌30min。
16.高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~76。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~76。
配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~72。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板。
*注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作。
察氏培养基
本品倾注平皿,下列菌株接种后25—28℃培养72h生长情况如下表。
菌名菌 号 生长状况 菌落特征
黑曲霉ATCC16404 良好 菌丝白色孢子黑色
白色念珠菌ATCC10231 良好 菌落表面呈奶油色
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
编号:021020
中文名称: 察氏培养基
英文名称:Czapek-Dox Agar
用 途:
用于培养能以硝酸盐作为唯一氮源的真菌和细菌,及青霉和曲霉等霉菌的分离培养和形态鉴别(GB/T4789.28-2003,GB/T4789.16-2003中4.77)。
原 理:
硝酸钠提供氮源;磷酸氢二钾是缓冲剂;硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁提供必须的离子;蔗糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
2、 将纯培养物点植于平板上。方法是将平板倒转,向上接种一点或三点,每菌接种两个平板,倒置于25—28℃温箱中培养。当刚长出小菌落时,取出一个平皿,以无菌操作,用小刀将菌落连同培养基切下1cm×2cm的小块,置菌落一侧,继续培养,于5—14d进行观察。
3、 斜面观察:将霉菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或点种(链刀菌或其他菌)于斜面,培养5—14d,观察菌落形态,同时还可以将菌种管置显微镜下用低倍镜直接观察孢子的形态和排列。
图鉴:
配方(每升):
硝酸钠3g
磷酸氢二钾1g
硫酸镁 0.5g
氯化钾 0.5g
硫酸亚铁0.01g
蔗糖30g
琼脂 15g
最终pห้องสมุดไป่ตู้ 7.3±0.2
使用方法:
1、 称取本品50g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌20min,待冷至55—60℃倾注灭菌平板;或将培养基溶解分装三角瓶或试管,灭菌后倒平板或制成斜面。
常用细菌培养基配方
常用抗生素氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素(tetracyyline)(10mg/ml)溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
查氏培养基配方
查氏培养基配方查氏培养基是常用的一种微生物培养基,它广泛应用于微生物学和分子生物学等领域。
它的基础配方如下:1. 细菌营养素 (10 g/L)细菌营养素在培养基中的作用是提供微生物所需要的营养成分,从而促进细菌的生长和繁殖。
此外,细菌营养素含有大量的氨基酸和代谢产物,可以帮助微生物合成蛋白质和其他生物大分子。
2. 氯化钠 (5 g/L)氯化钠也称为食盐,是一种常用的无机盐。
在培养基中,氯化钠可以调节细胞外液的渗透压,从而保证微生物细胞内物质的平衡。
3. 酵母提取物 (2.5 g/L)酵母提取物是一种具有高度营养价值的天然营养物质。
在培养基中,酵母提取物可以提供维生素、矿物质和氨基酸等营养成分,促进微生物的生长和繁殖。
4. 葡萄糖 (1 g/L)葡萄糖是一种单糖,在培养基中可以提供碳源和能源,从而促进微生物细胞代谢的进行。
此外,葡萄糖还可以促进微生物在培养基上快速适应和生长。
5. 磷酸二氢钾 (1 g/L)磷酸二氢钾是一种无色晶体,其在培养基中可以提供磷元素,促进微生物合成DNA和ATP等生物大分子。
此外,磷酸二氢钾还可以作为酸碱指示剂,评价培养基pH值。
6. 硫酸镁 (0.5 g/L)硫酸镁是一种重要的无机盐,在培养基中可以提供镁元素,促进微生物蛋白质合成和细胞壁合成等生物过程。
同时,在培养基中添加适量的硫酸镁可以调节微生物细胞内的酶活性和酸碱平衡。
7. 碳酸钠 (0.5 g/L)碳酸钠是一种白色结晶体,在培养基中可以作为缓冲剂,调节培养基的pH值。
此外,碳酸钠还可以作为微生物代谢产物的中和剂,保护微生物的生长环境。
通过以上7种成分的组合配比,可以制备出营养丰富的查氏培养基,为微生物的生长提供优良的条件,有助于广泛应用于微生物学和分子生物学等领域。
察式
1.“察式”培养基2.察氏培养基- 成分硝酸钠3g磷酸氢二钾1g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000mL察氏培养基- 制法加热溶解,分装后121℃灭菌20min。
察氏培养基- 用途青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。
另外为了防止杂菌生长,时常在该培养基内加入高浓度的氯化钠,以抑制非真菌的生长,此时称之为高盐察氏培养基。
“高氏一号”培养基基本原理高氏一号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
如果加入适量的抗菌药物,则可用来分离各种放线菌。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐,这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
因此,混合培养基成分时,一般是按配方的顺序依次溶解各成分,甚至有时还需要将两种或多种成分分别灭菌,使用时再按比例混合。
配方可溶性淀粉2g KNO3 0.1g K2HPO4 0.05g MgSO4· 7H2O 0.05g NaCl 0.05g FeSO4· 7H2O 0.001g (母液)琼脂2g自来水100mL pH 7.2~7.4灭菌 1.05kg/cm2,20min配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到100ml,调pH,121℃灭菌20min。
高温灭菌后,倒平皿前加入10%酚2滴至100ml培养基中混匀,将培养基倒入平皿内约15ml/皿。
高氏一号培养基的作用1 筛选2 培养放线菌[1]2.细菌定义细菌(英文:germs;学名:bacteria)广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹,只存在称作拟核区(nuclear region)(或拟核)的裸露DNA的原始单细胞生物,包括真细菌(eubacteria)和古生菌(archaea)两大类群。
人们通常所说的即为狭义的细菌,狭义的细菌为原核微生物的一类,是一类形状细短,结构简单,多以二分裂方式进行繁殖的原核生物,是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体,是大自然物质循环的主要参与者。