Biotage 样本 20110829
人血白蛋白
人血白蛋白拼音名:Renxue Baidanbai英文名:Human Albumin书页号:2000年版二部-1089本品系用乙型肝炎疫苗免疫的健康人血浆,经提取,灭活病毒制成。
【制法】取健康献血员新鲜血浆或保存期不超过2年的冰冻血浆,用低温乙醇蛋白分离法分段沉淀提取白蛋白组分,经超滤或冷冻干燥脱醇,浓缩等工序制得,其白蛋白纯度不低于96%。
然后加灭菌注射用水按照规定的蛋白质浓度配制成溶液,加适量稳定剂,进行60℃灭活病毒至少10小时,分装后置20~25℃至少4周,或30~32℃放置至少14天,逐瓶检查外观应符合规定。
【性状】本品为黄色或绿色至棕色略黏稠的澄明液体;不应有异物、浑浊或沉淀。
【鉴别】取本品,照《中国生物制品规程》进行。
(1) 用免疫双扩散法测定,仅与抗人的血清产生沉淀线,与抗马、抗牛血清不应产生沉淀线。
(2) 用免疫电泳法测定,主要沉淀线应为白蛋白。
【检查】照《中国生物制品规程》规定的方法检查如下项目。
pH值应为6.4~7.4。
吸收度在403nm的波长处测定,E1% 1cm不得过0.15。
纯度白蛋白应不低于蛋白质总量的96.0%。
钠不得过160mmol/L。
钾不得过2mmol/L。
多聚体不得过5.0%。
辛酸钠每1g蛋白质含辛酸钠应为0.140~0.180mmol;如与乙酰色氨酸混合用,则应为0.064~0.096mmol。
HBsAg 用国家批批检定合格的试剂盒检查,应为阴性。
HCV抗体用国家批批检定合格的试剂盒检查,应为阴性。
HIV<[1+2]>抗体用国家批批检定合格的试剂盒检查,应为阴性。
热稳定性取本品,在57℃±0.5℃水浴中保温50小时后,除颜色有轻微变化外,应无肉眼可见的变化。
异常毒性取本品,依法检查,应符合规定。
热原取本品,按家兔体重每1kg注射0.6g白蛋白,依法检查,应符合规定。
无菌取本品,依法检查,应符合规定。
【含量测定】照《中国生物制品规程》蛋白质含量测定法测定。
Xba I
For Genome DNA AnalysisXba IT C T A G AA G A T C TTaKaRa Code:D1093A包 装 量:1,500 Units附带试剂: 10×M Buffer 500 μl0.1% BSA 500 μl10×Loading Buffer 500 μl纯 度:1) Overdigestion Test:≥15 Units2) Ligation-Recutting Test:Ligation Effi.:100%,Recutting Effi.:100%3) Genome DNA Digest:≥50 Units4) pKF3 Cloning Test:<2%●酶贮存液:10 mM Tris-HCl, pH7.550 mM KCl0.1 mM EDTA1 mM DTT0.01 % BSA50 % Glycerol●起 源:Xanthomonas badrii●一般反应体系:Xba I 1 μl10×M Buffer 2 μl0.1% BSA 2 μlDNA ≤1 μg灭菌水 up to 20 μl●反应温度:37℃●反应时间:在上述20 μl的反应体系中,37℃反应5分钟可以完全切断dam非甲基化DNA,满足各种实验需求。
针对特殊酶切底物DNA,如果得不到良好的酶切效果时,可以将反应时间延长至1小时。
●活性确认:在50 μl反应液中,37℃温度下反应1小时,将1 μg的dam非甲基化DNA完全分解的酶量定义为1个活性单位(U)。
●纯度检测:1) Overdigestion Test:在1 μg DNA中加入过量的该限制酶,进行长时间(24小时)酶切反应,然后进行琼脂糖电泳,确认切出的DNA片段的电泳谱带不发生变化。
2) Ligation-Recutting Test:在经过10倍量该酶切出的DNA片段中,加入 T4 DNA Ligase,使其连接,然后再使用该酶进行切断反应,判断Ligation-Recutting效率。
蛋白裂解液
之老阳三干创作蛋白质的定位与蛋白质裂解液的选择:全细胞:NP-40或RIPA细胞质(可溶):Tris-HCl细胞质(细胞骨架):Tris-Triton细胞膜:NP-40或RIPA细胞核:RIPA线粒体:RIPARIPA裂解液配方1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitorand 10μl phosphatase inhibitor加水到 100mlAprotinin 10μg/μl ;用10mM HEPES-KOH(PH8.0)溶解,备用.●Nonidet P-40简称NP-40,乙基苯基聚乙二醇,经常使用非离子性去垢剂.●Na-deoxycholale,脱氧胆酸钠,离子型去垢剂.离子型去垢剂主要作用有:裂解细胞;溶解蛋白,尤其是可以溶解一些难溶于水的蛋白,如膜蛋白等;很适合做WB,但在Co-IP中使用,需要谨慎.●亮抑霉肽(Leupeptin):抑制丝氨酸蛋白酶包含胰蛋白酶、纤溶酶、猪胰激肽原酶)和半胱氨酸蛋白酶(包含木瓜蛋白酶和组织蛋白酶B)●抑肽素A(Pepstatin A)抑制各类天门冬氨酸蛋白酶,例如组织蛋白酶D、肾素、胃蛋白酶、细菌天门冬氨酸蛋白酶和HIV蛋白酶;●胰凝乳蛋白酶抑制剂(Chymostatin)抑制具有糜蛋白酶类特异性丝氨酸蛋白酶(包含糜蛋白酶、胃促胰酶、组织蛋白酶 G)和大多数丝氨酸蛋白酶(包含组织蛋白酶B,H,L)●抗木瓜蛋白酶(Antipain)抑制木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和纤溶酶.●氟化钠抑制酸性磷酸酶●正钒酸钠:抑制碱性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶(tyrosine phosphatase)●焦磷酸钠(sodium pyrophosphate):抑制丝氨酸-苏氨酸磷酸酶(serine-threonine phosphatase) .在与蛋白相关的检测中,首先最关头的一步即是蛋白质的提取.蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂以避免蛋白质的降解.另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不成少的,本文总结了经常使用的蛋白酶抑制剂PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂,EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠 ,BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠,Na2P2O4 焦磷酸钠等.对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制,贮存液与任务液浓度,保管都做了详细的说明.蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆的地面处理).溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml.在水溶液中不稳定.在100%异丙醇, +25℃时稳定至少9个月份子量:174.2使用:贮存浓度:200mM,任务浓度:1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B溶解性:高度溶于水(1mg/ml).4℃一周稳定,分红小份冷冻在-20℃至少6个月份子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用:贮存浓度:1mg/ml,任务浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶, 激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性.不抑制凝血酶或因子X.溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris,0.1M,pH8.0).pH 约7-8的溶液在4℃可保管1周,分装保管在-20℃可至少保管6个月.避免频频冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活.份子量:6,512使用:贮存浓度:1mg/ml, 任务浓度:0.06–2.0 ug/ml(0.01–0.3 uM)Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶,肾素,组织蛋白酶D,凝乳酶, 许多微生物酸性蛋白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml.4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保管1个月份子量: 685.9使用:贮存浓度:1mg/ml,使用浓度:0.7 μg/ml(1μM)EDTA-Na2特性:金属蛋白酶抑制剂溶解性:溶于水至0.5M,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月份子量: 372.24使用:任务浓度:0.2–0.5 mg/ml(0.5–1.3 mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8-9时再加入.磷酸酶抑制剂NaF氟化钠溶解性:溶于水份子量: 41.99使用:贮存液:5M 任务浓度:10-20mMNa3VO4 原矾酸钠份子量:183.91溶解性:溶于水,我们采办过来的是原矾酸钠.原矾酸钠需要经过处理以后才干成为激活的矾酸钠,激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用.原矾酸钠酿成激活的矾酸钠的过程是:100mM原矾酸钠激活储存液配制(1).取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄)(2).煮至无色(3).室温冷却(4).重调PH至10(5)重复(1)(2)(3)(4)直至溶液坚持无色,并且PH稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保管.使用:贮存液:100mM 任务浓度:1mMBETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠溶解性:溶于水份子量:306.11使用:贮存液:100mM 任务浓度:25mMNa2P2O4 焦磷酸钠溶解性:溶于水份子量:265.9贮存液:100mM, 任务浓度:1-2 mMSDS ,NP-40 ,TritonX-100这三种去垢剂的作用是不合的,或者说作用力量强弱不合.SDS属于离子型去垢剂,最厉害,基本可以把细胞完全破掉,DNA会释放出来,裂解液变得很粘稠.NP-40是很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白.TritonX-100的能力介于NP40和SDS之间,偏向于NP40,也是经常使用的细胞裂解液成分之一,在呵护蛋白活性方面有一定作用(SDS 基本会使蛋白变性失活).Brij Buffer I。
sp使用教程
Biotage快速制备色谱仪使用教程1. 开机后进入到下面的界面:2. 点击chemistry按钮,进入到下面的界面:3. 创建方法,点击界面右侧的Method,然后点击New。
在Information Editor 里填写User,Method Name,Sample Name,Project 信息,然后点击OK 。
4. 点击Separation Editor,在WEAK Solvent Strong Solvent 选择你所需要的溶剂。
在Cartridge Type 选择柱子的类型,在Flow rate 里设定流速,然后点击OK 。
5. 进入Gradient Editor,横坐标是体积/时间/柱体积,纵坐标是强极性溶剂的体积百分比。
点Start 键,设置初始强极性溶剂的体积百分比,点End 键,设置结束时强极性溶剂的体积百分比,点击Add After或Add Before 来设置多种梯度,点OK 保存。
6. 打开UV Detector, 进入UV Detector 界面,在Collection Wavelength 和MonitorWavelength 中设定收集和检测波长。
7. 在Collection Editor 里选择收集模式.8. 点击Rack Allocation,在Allocation Editor 里点击Rack Type 选择试管类型,在DispenseOrder 里选择收集类型。
在Max Fraction Volume 中设置试管的收集体积。
然后点击Save 保存方法。
9. 点击界面右侧的Solvent,如下图10. 点击Solvent Channel, 在出来的界面里设置溶剂名称,总体积和当前体积。
11. 点击出来的对话框里选择Though Column, 溶剂的种类,和溶剂的体积,然后点击Prime.12. 在右侧的 Method 里点击然后出现如下界面,点击出现如下界面,选择接收位置,然后点 OK.,就可以运行了。
生工试剂
产品编号产品名称产品包装产品单价AE232-100G缓冲液100G441AE232-25G缓冲液25G117AE232-5KG ADA BUFFER5KGAE319-100ML PAGE电泳玻璃板硅化处理试剂100ML375AE319-12PK PAGE电泳玻璃板硅化处理试剂12PK426AE429-10MG抑肽酶10MG625AE434-100G琼脂糖100G1549AE434-1KG AgaroseⅣ1KGAE434-25G琼脂糖25G426AE434-5G琼脂糖5G98AE437-100MG两性霉素B100MG AE437-1G两性霉素B1GAE477-20ML氨苄青霉素钠20ML325AE531-0.5ML牛血清白蛋白标准溶液0.5ML229AE531-1.0ML牛血清白蛋白标准溶液 1.0ML380AE531-1.5ML牛血清白蛋白标准溶液·475AE566-1L ALKALINE TRANSFER SOLUTION AE566-250ML ALKALINE TRANSFER SOLUTION AE776-100G琼脂糖100G1142AE776-1KG Agarose3:01HRBAE776-25G琼脂糖25G343AE776-5G琼脂糖5G82AJ234-100G琼脂糖100G3015AJ234-25G琼脂糖25G829AJ234-2KG Agarose SFR2KGAJ234-5G琼脂糖5G198AJ365-100ML ABTS100ML389AJ468-100U琼脂糖酶-取消AJ581-5MG抗蛋白酶5MG472AJ582-50MG AEBSF50MG555AJ608-5MG放线菌素D5MG958AJ637-100G琼脂100G216AJ637-500G琼脂500G981AJ637-50KG AGAR50KG0ALS001041肌动蛋白-停产1MG468ALS001069乙醇脱氢酶-停止100MG601ALS001130醛缩酶100MG935ALS002763L-氨基酸氧化酶2MG695ALS002764L-氨基酸氧化酶5MG1456 ALS009043腺苷脱氨酶250U735AN0239A磷酸氢二铵500G26AN3795-100G对氨基笨磺酸100G24AN4306-100G对氨基酚100G78AN4306-2KG对氨基酚-CP2KG0AN4306-50G对氨基酚-CP50G0AN4307-100G邻氨基酚100G92AN4307-25G邻氨基酚-CP25G0AN4307-2KG邻氨基酚-CP2KG0AN5254-100G营养琼脂100G65AN5255-250G琼脂粉250G72AN5255-25KG琼脂粉25KG0AS0017-250G琼脂糖250G498AS0017-50G琼脂糖50G110AS1033-100G丙烯酰胺-5折优惠AT011高压灭菌指示带,2.5CM×55M卷98AT012高压灭菌指示带,1.8CM×50M卷78AT0173-500ML冰乙酸500ML49AT0216A氢氧化铵500ML24AT0216G氢氧化铵500ML35AT0785-500ML乙酸36%500ML32AT0850-500G氯化铵500G48AT0851-25KG硫酸铵-GR-5折优惠AT0851-500G硫酸铵-5折优惠AT0853-500G乙酸铵500G24AT0855-20KG草酸铵-GR20KG0AT0855-500G草酸铵500G34AT0856-500G碳酸铵500G26AT0857-500G过硫酸铵500G34AT0860-20KG磷酸二氢铵-GR20KG0AT0860-500G磷酸二氢铵500G34AT0861-20KG磷酸氢二铵-GR20KG0AT0861-500G磷酸氢二铵500G34AT0862-500G柠檬酸铵500G54AT0941-25G茜素绿25G98AT0941-500G茜素绿-BS500G0AT0949-25G茜素红25G19AT0957-25G苋菜红25G37AT0960-25G酸性品红25G26AT0971-25G茜素黄R25G17AT0972-25G茜素黄GG25G17AT0987-10G氨基黑10B10G28AT1014-25G L-抗坏血酸25G12AT1014-500G L-抗坏血酸-AR500G0AT1021-25G邻氨基苯甲酸25G32AT1021-500G邻氨基苯甲酸-AR500G0AT1022-25G对氨基苯甲酸25G32AT1024-25G1-氨基-2-萘酚-4-磺酸25G22AT1025-1G偶氮胂I1G62AT1026-1G偶氮胂III1G56AT1070-25G安替吡啉25G18AT1071-25G氨基比林25G19AT1074-25G4-氨基安替吡啉25G28AT1074-500G4-氨基安替吡啉-AR500G0AT1351-500G结晶氯化铝500G34AT1354-500G硝酸铝500G27AT1357-500G氢氧化铝500G26AT1358-500G中性氧化铝500G39AT1359-500G碱性氧化铝500G39AT1360-100G酸性氧化铝-AR100G0AT1360-500G酸性氧化铝500G39AT1569-20KG氯化铵-AR20KG0AT1569-500G氯化铵500G32AT1570-250G氟化铵-AR250G0AT1570-500G氟化铵500G28AT1574-500G乙酸铵500G26AT1575-10KG草酸铵-AR10KG0AT1575-500G草酸铵500G32AT1578-500G磷酸铵500G26AT1583-100G偏钒酸铵100G38AT1587-10KG碳酸氢铵-AR10KG0AT1587-500G碳酸氢铵500G22AT1595-500G磷酸二氢铵500G26AT1597-500G柠檬酸铁铵500G44AT1600-10KG柠檬酸铵-AR10KG0AT1601-500G柠檬酸铵500G38AT1603-500G500G0AT1620-500ML苯胺500ML29AT1634-100G盐酸苯胺100G54AT1706-500ML乙酸36%500ML19AT1876-100G2-氨基噻唑100G27AT1876-2KG2-氨基噻唑-AR2KG0AT1921-500ML40%乙醛500ML34AT2076-5G丙氨酸5G20AX174-100G琼脂糖100G1816AX174-1KG AgaroseⅢ1KGAX174-250G AgaroseⅢ250GAX174-25G琼脂糖25G499AX174-5G琼脂糖5G110B0010-0.1OD M13/pUC Sequencing B0011-0.1OD M13/pUC Sequencing B0011-1.0OD M13/pUC Sequencing B0012-0.1OD M13/pUC Sequencing B0012-1.0OD M13/pUC Sequencing B0013-0.1OD M13/pUC ReverseB0013-1.0OD M13/pUC ReverseB0081-1000U钻石Taq酶1000UB0081-200U钻石Taq酶200UB0089-1000U Taq酶-B0089-200U Taq酶-B0089-5000U Taq酶-B0090-100U Taq Plus100UB0090-200U Taq Plus200UB0090-500U Taq Plus500UB0093-100U Pfu DNA Polymerase B0093-200U Pfu DNA Polymerase B0093-500U Pfu DNA Polymerase B0095-100U Heatstart Taq DNAB0095-200U Heatstart Taq DNAB0095-500U Heatstart Taq DNAB01BUFFER5*1ML152B0147Cohesive-end adaptor0.5B0148Duplex0.5ODB0172-100G双丙烯酰胺100G349B0172-10KG BIS-ACRYLAMIDE10KG0B0172-25G双丙烯酰胺25G96B19Diluent Buffer SetB22Buffer for Eco52I+B2292-6福尔马林4L284B23Buffer for SduI+B24Buffer for ScaI+B25Buffer for Eam1105I+ B26Buffer for Ecl136II+ B27Buffer for Bpu10I+B28Buffer for TaqI+B29Buffer for KpnI+B30Buffer5*1ML152B57Buffer for BamHI+BB0025-100G双丙烯酰胺-5折优惠BB0025-25G双丙烯酰胺-5折优惠BB0025-25KG 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D0532-100MG5’-三磷酸-2’-脱氧胸苷三钠盐100MG1994 D0532-50MG5’-三磷酸-2’-脱氧胸苷三钠盐50MG1200 D0613-10G脱氧胆酸钠盐10G67D0613-250G脱氧胆酸钠盐250G1391D0613-500G DEOXYCHOLIC ACID SODIUM D0613-50G脱氧胆酸钠盐50G306D0624-100ML十二烷基-三甲基-氯化铵100ML256D0624-25ML十二烷基-三甲基-氯化铵25ML85D0624-500ML十二烷基-三甲基-氯化铵500ML1096 D0644-100G DNA100G0D0644-1G DNA1G68D0644-25G DNA25G1290 D0644-500G DNA500G0D0644-5G DNA5G284D0649-100KU脱氧核糖核酸酶I100KU D0649-50KU脱氧核糖核酸酶I50KU D0657-1G2’-脱氧-D-核糖1G126D0657-50G2-DEOXY-D-RIBOSE50G0D0657-5G2’-脱氧-D-核糖5G572D0665-100G葡聚糖100G858D0665-1KG DEXTRAN1KG0D0665-25G葡聚糖25G236D0665-5G葡聚糖5G59DT0119-500ML二氯甲烷500ML65DT0120-4L二氯甲烷4L430 DT0120-500ML二氯甲烷-HPLC500ML0DT0151-500ML N,N-二甲基甲酰胺500ML69DT0152-4L N,N-二甲基甲酰胺4L592 DT0153-4L N,N-二甲基甲酰胺-HPLC4L0DT0153-500ML N,N-二甲基乙酰胺500ML84DT0163-500ML二甲亚砜500ML118 DT0164-4L二甲亚砜4L788 DT0746-500ML二氯甲烷500ML32DT0777-500ML N,N-二甲基甲酰胺500ML42DT0778-500ML N,N-二甲基乙酰胺500ML39DT0913-25G酚酞25G12DT0913-2KG酚酞-IND2KG0DT0973-25G二甲基黄25G38DT0994-25G变色酸钠25G42DT0997-25G二苯胺磺酸钠25G20DT1043-5G双硫腙(铅试剂)5G18DT1079-25G二苯偶氮碳酰肼25G38DT1100-250G对苯二酚250G37DT1101-100G间苯二酚100G26DT1102-100G邻苯二酚100G156 DT1321氯化钙干燥管,单球5个20DT1322氯化钙干燥管,双球5个20DT1568-500G硅藻土500G22DT1609-25G十二烷基-三甲基-溴化铵25G26DT1609-500G十二烷基-三甲基-溴化铵-AR500G0DT1612-100G十二烷基-三甲基-氯化铵-AR100G0DT1612-25G十二烷基-三甲基-氯化铵25G26DT1621-100G二苯胺100G19DT1621-2KG二苯胺-AR2KG0DT1635-100G对苯二胺100G32DT1635-25G对苯二胺25G0DT1636-100G邻苯二胺100G32DT1637-100G间苯二胺100G32DT1644-500ML二乙醇胺500ML29DT1664-500ML N,N-二甲基甲酰胺500ML34DT1665-500ML N,N-二甲基乙酰胺500ML32DT1697-500G月桂酸500G29DT1729-500G D-酒石酸500G104DT1731-100G DL-苹果酸-BR100G0DT1731-500G DL-苹果酸500G38DT1899-500G糊精500G29DT1976-100G2,4-二硝基苯酚100G44DT1977-100G二硝基苯酚100G64DT2003-500ML二氯甲烷500ML24DT2043-10G甜醇10G78DT2047-25G盐酸吡哆醇25G24DT5551-100G邻二氯苯酚100G97DTC003组织培养皿,12/包10*包26DTC007组织培养皿,10/包10包28DTC009组织培养皿,10/包10包35DTC015组织培养皿,单独包装包19E0105-100G乙二胺四乙酸二钠盐二水100GE0105-1KG乙二胺四乙酸二钠盐二水1KGE0105-500G乙二胺四乙酸二钠盐二水500GE0105-50KG EDTA DISODIUM SALTE0109-100G曙红Y100G378E0109-25G曙红Y25G104E0109-5G曙红Y5G32E0219-10G红霉素10G265E0219-2G红霉素2G63E0219-50G红霉素50G1102E0322-100G乙二胺四乙酸100G45E0322-1KG乙二胺四乙酸1KG361E0322-500G乙二胺四乙酸500G198E0492-1G溴化乙锭-7折优惠E0492-25G溴化乙锭-7折优惠E0492-500G ETHIDIUM BROMIDE[EB]500GE0492-5G溴化乙锭-7折优惠E0582-1L乙二醇1L212E0582-250ML乙二醇250ML65E0582-4L ETHYLENE GLYCOL4LE0720-100G乙二胺四乙酸二钾盐二水100GE0720-20KG EDTA DEPOTASSIUN SALTE0720-500G乙二胺四乙酸二钾盐二水500GE0732-1KG EGTA1KG0E0732-250G EGTA250G3236E0732-50G EGTA50G690E0732-5G EGTA5G83E261Low Range IE273Wide-Range Marker200μGE279Marks-IT TM100μGE683Low Range IIE687Low Range IIIE840DNA MicroMarker TME854PCR DNA MarkerEB0075-100G二乙胺四乙酸二钾盐二水100G0EB0075-500G二乙胺四乙酸二钾盐二水500G0EB0107-100G乙二胺四乙酸-7折优惠EB0107-1KG乙二胺四乙酸-7折优惠EB0107-500G乙二胺四乙酸-7折优惠EB0185-100G乙二胺四乙酸二钠盐二水-EB0185-1KG乙二胺四乙酸二钠盐二水-EB0185-500G乙二胺四乙酸二钠盐二水-EB0192-25G红霉素25G408EB0192-5G红霉素5G98EB0195-1G溴化乙锭-7折优惠EB0195-5G溴化乙锭-7折优惠EB0577-100G EDC100G0EB0577-1G EDC1G89EB0577-25G EDC25G202EB0577-5G EDC5G425EB315-100U无机焦磷酸酶-取消EB315-500U无机焦磷酸酶-取消EB333-200U无机焦磷酸酶-取消EB333-50U无机焦磷酸酶-取消EB517-10KU MMLV Reverse Transcriptase EB517-2KU MMLV Reverse Transcriptase EE406-5ML ETHIDIUM BROMIDE[EB]5MLEE522-100ML EDTA100ML192EF0261碱性磷酸酶,150U/μL7500U899EF0341碱性磷酸酶200U187EF0342碱性磷酸酶5*200U560EJ586-5MG E-645MG936EJ844-10TABS ETHIDIUM BROMIDE[EB]10TABSEJ844-25TABS ETHIDIUM BROMIDE[EB]25TABSEJ845-10T ETHIDIUM BROMIDE[EB]10TABSEJ845-25T ETHIDIUM BROMIDE[EB]25TABSEK0031T4多聚核苷酸激酶500UEK0032T4多聚核苷酸激酶2500UEL0011T4DNA连接酶EL0012T4DNA连接酶EL0013T4DNA连接酶EL0014T4DNA连接酶EL0017T4DNA连接酶EL0021T4RNA连接酶EL0331T4DNA连接酶EL0334T4DNA连接酶EL0337T4DNA连接酶ELS002290弹性蛋白酶25MG401ELS002292弹性蛋白酶100MG1269EN0171核酸酶BAL3150UEN0181微球菌核酸酶8000U455EN0191外切核酸酶III4000UEN0201核糖核酸酶H100UEN0202核糖核酸酶H500UEN0321核酸酶S110000U EN0361尿嘧啶DNA糖基酶200U455EN0362尿嘧啶DNA糖基酶5×200U1819EN0531RIBONUCLEASE A10MGEP0041DNA聚合酶IEP0042DNA聚合酶IEP0051DNA聚合酶IEP0052DNA聚合酶IEP0061T4DNA聚合酶EP0062T4DNA聚合酶EP0081T7DNA聚合酶EP0101T3RNA聚合酶EP0102T3RNA聚合酶EP0103T3RNA聚合酶EP0111T7RNA聚合酶EP0112T7RNA聚合酶EP0113T7RNA聚合酶EP0131SP6RNA聚合酶EP0161末端脱氧核苷转移酶500U606EP0162末端脱氧核苷转移酶2500U2425EP0421DNA polymerase IEP0422DNA polymerase IEP0441M-MLV逆转录酶2×5000U EP0442M-MLV逆转录酶10×5000U ER0011Alu I600UER0021Alw21I200UER0022Alw21I1000UER0031Alw26I1000UER0032Alw26I5000UER0041Alw44I1000UER0042Alw44I5000UER0051BamH I4000UER0052BamH I20000U ER0053BamH I HC20000U ER0061Bcn I1000U ER0062Bcn I5000U ER0072Bg1I10000U ER0081Bgl II500UER0082Bgl II2500U ER0091Bpu1102I200UER0092Bpu1102I1000U ER0111Bsp68I500UER0112Bsp68I2500U ER0121Bsp1191I2500U ER0131Bsp120I1500U ER0132Bsp120I7500U ER0133Bsp120I HC7500U ER0142Bsu15I3000U ER0151BsuR I3000U ER0152BsuR I15000U ER0161Cfr I200UER0162Cfr I1000U ER0172Cfr9I1500U ER0181Cfr10I200UER0182Cfr10I1000U ER0192Cfr13I5000U ER0202Cfr42I6000U ER0211Csp6I1500U ER0221Dra I1500U ER0222Dra I75000U ER0231Eam1104I300UER0232Eam1104I1500U ER0241Eam1105I1000U ER0242Eam1105I5000U ER0251Ecl136II1500U ER0252Ecl136II7500U ER0273EcoR I HC25000U ER0281Eco24I1500U ER0291Eco31I500UER0292Eco31I2500U ER0301Eco32I2000U ER0303Eco32I HC1000U ER0311Eco47I800UER0322Eco47III1000U ER0331Eco52I500UER0332Eco52I2500U ER0342Eco57I500UER0362Eco72I10000U ER0372Eco81I2500UER0381Eco88I1000U ER0392Eco91I5000U ER0401Eco105I600UER0402Eco105I3000U ER0421Eco147I1000U ER0422Eco147I5000U ER0432Sca I5000U ER0452Esp3I1000U ER0471Hin1I300UER0472Hin1I1500U ER0482Hin6I10000U ER0491Hinc II500UER0501Hind III5000U ER0502Hind III25000U ER0503Hind III HC25000U ER0512Hpa II5000U ER0521Kpn I4000U ER0522Kpn I20000U ER0523Kpn I HC20000U ER0541Msp I3000U ER0542Msp I15000U ER0551Mva I2000U ER0552Mva I10000U ER0562Mlu I5000U ER0571Nco I500UER0572Nco I2500U ER0581Nde I500UER0582Nde I2500U ER0591Not I300UER0601Pae I500UER0602Pae I2500U ER0611Pst I3000U ER0613Pst I HC15000U ER0622Pvu I1500U ER0631Pvu II2500U ER0632Pvu II12500U ER0633Pvu II HC12500U ER0641Sal I1500U ER0642Sal I7500U ER0643Sal I HC7500U ER0651Sdu I500UER0661Sma I1200U ER0662Sma I6000U ER0663Sma I HC6000U ER0671Taq I3000U ER0672Taq I15000U ER0681Xba I1500U。
噬菌体抗体文库淘选
噬菌体抗体文库淘选1.主要实验仪器表1实验所用主要仪器仪器名称型号/厂家高速冷冻离心机Neofuge15R生物安全柜Heal Force电热恒温水浴锅HHW21.600AⅡ恒温培养箱Heal force(3)5ml5%脱脂牛奶/PBST30℃封闭1h。
(4)5ml PBS洗涤1次。
(5)每管中加入500ul,10^11-10^12pfu的文库噬菌体(或者上一轮的扩增噬菌体),30℃孵育2h。
(6)5ml PBST洗涤4-6次(后几轮可根据富集程度增加洗涤次数)。
(7)每管中加入500ul的Gly-HCl(pH=2.2)洗脱噬菌体,室温振荡孵育6-8min左右。
加入120-130ul的Tris-HCl(pH=9.6)中和溶液至pH=7.0-8.0。
(8)将洗脱后的噬菌体稀释后,侵染对数期的大肠杆菌TG1,铺板测定滴度。
3.2洗脱噬菌体的扩增(1)吸取洗脱后的噬菌体,加入到对数期的大肠杆菌TG1菌液中,37℃静置30min后,220rpm培养30min-1h。
(2)培养基中加入抗生素Amp,37℃,220rpm培养至菌液OD=0.4-0.6左右。
(3)在菌液中加入辅助噬菌体。
37℃静置30min后,220rpm培养45min-1h。
(4)3000-5000rpm离心菌液,弃上清。
用同等体积2YT-Amp-Kan培养基重悬菌体。
30℃,220rpm培养过夜。
(5)次日,8000rpm,4℃,20min离心菌液,将上清转入新的离心管中。
加入1/4体积的(4)用PBS稀释每一轮扩增后的噬菌体,稀释倍数3倍递增。
初始浓度为10^12pfu/ml。
每孔中加入100ul稀释后的扩增噬菌体。
30℃孵育1h,300ul PBST洗涤4-6次。
(5)加入100ul二抗(抗噬菌体M13)稀释液,30℃孵育1h,300ul PBST洗涤4-6次。
(6)加入100ul显色液TMB避光显色3-8min,加入100ul2M HCl终止反应,酶标仪读数(450nm-620nm)。
Toxoplasma IgG ELISA测试产品说明书
Toxoplasma IgG ELISA Catalog Number SE120126Storage Temperature 2–8 °CTECHNICAL BULLETINProduct DescriptionToxoplasma gondii causes toxoplasmosis, a common disease that affects 30–50 of every 100 people in North America by the time they are adults. The mean source of infection is direct contact with cat feces or from eating undercooked meats. Toxoplasmosis generally presents with mild symptoms in immunocompetent individuals. In the immunocompromised patient,however, the infection can have serious consequences. Acute toxoplasmosis in pregnant women can result in miscarriage, poor growth, early delivery, or stillbirth. Treatment of an infected pregnant woman may prevent or lessen the disease in her unborn child. Treatment of an infected infant will also lessen the severity of the disease as the child grows. IgG and IgM antibodies to Toxoplasma can be detected with 2–3 weeks after exposure. IgG remains positive, but the antibody level drops overtime. ELISA can detect Toxoplasma IgM antibody one year after infection in over 50% of patients. Therefore, IgM positive results should be evaluated further with one or two follow up samples if primary infection is suspected.The Toxoplasma IgG ELISA Kit is intended for the detection of IgG antibody to Toxoplasma in human serum or plasma. Diluted serum is added to wellscoated with purified Toxoplasma antigen. Toxoplasma IgG specific antibody, if present, binds to the antigen. All unbound materials are washed away and the enzyme conjugate is added to bind to the antibody-antigen complex, if present. Excess enzyme conjugate is washed off and substrate is added. The plate isincubated to allow the oxidation of the substrate by the enzyme. The intensity of the color generated isproportional to the amount of IgG specific antibody in the sample.ComponentsReagents and Equipment Required but Not Provided.1.Distilled or deionized water2.Precision pipettes3.Disposable pipette tips4.ELISA reader capable of reading absorbance at450 nm5.Absorbent paper or paper towel6.Graph paperPrecautions and DisclaimerThis product is for R&D use only, not for drug,household, or other uses. Please consult the Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices.Preparation Instructions Sample Preparation1. Collect blood specimens and separate the serum.2.Specimens may be refrigerated at 2–8°C for up toseven days or frozen for up to six months. Avoid repetitive freezing and thawing.20x Wash Buffer ConcentratePrepare 1x Wash buffer by adding the contents of the bottle (25 mL, 20x) to 475 mL of distilled or deionized water. Store at room temperature (18–26 °C).2Storage/StabilityStore the kit at 2–8 °C.ProcedureNotes: The components in this kit are intended for use as an integral unit. The components of different lots should not be mixed.Optimal results will be obtained by strict adherence to the test protocol. Precise pipetting as well as following the exact time and temperature requirements is essential.The test run may be considered valid provided the following criteria are met:1.If the O.D. of the Calibrator is >0.250.2.The Ab index for Negative control should be <0.9.3.The Ab index for Positive control should be >1.2. Bring all specimens and kit reagents to room temperature (18–26 °C) and gently mix. 1.Place the desired number of coated strips into theholder.2.Negative control, positive control, and calibrator areready to use.Prepare 21-fold dilution of testsamples, by adding 10 µL of the sample to 200 µLof Sample Diluent. Mix well.3.Dispense 100 µL of diluted sera, calibrator, andcontrols into the appropriate wells. For the reagent blank, dispense 100 µL of Sample Diluent in 1Awell position. Tap the holder to remove air bubbles from the liquid and mix well. Incubate for20 minutes at room temperature.4.Remove liquid from all wells. Wash wells threetimes with 300 µL of 1x wash buffer. Blot onabsorbent paper or paper towel.5.Dispense 100 µL of enzyme conjugate to each welland incubate for 20 minutes at room temperature. 6.Remove enzyme conjugate from all wells. Washwells three times with 300 µL of1x wash buffer.Blot on absorbent paper or paper towel7.Dispense 100 µL of TMB substrate and incubate for10 minutes at room temperature.8.Add 100 µL of stop solution.9.Read O.D. at 450 nm using ELISA reader within15 minutes. A dual wavelength is recommendedwith reference filter of 600–650 nm.3ResultsCalculations1.Check Calibrator Factor (CF) value on thecalibrator bottle. This value might vary from lot tolot. Make sure the value is checked on every kit. 2.Calculate cut-off value: Calibrator OD x CalibratorFactor (CF).3.Calculate the Ab (Antibody) Index of eachdetermination by dividing the mean values of each sample by cut-off value.Example of typical results:Calibrator mean OD = 0.8Calibrator Factor (CF) = 0.5Cut-off Value = 0.8 x 0.5 = 0.400Positive control O.D. = 1.2Ab Index = 1.2/0.4 = 3Patient sample O.D. = 1.6Ab Index = 1.6/0.4 = 4.0Note:Lipemic or hemolyzed samples may cause erroneous results.InterpretationThe following is intended as a guide to interpretation of Toxoplasma IgG antibody index (Ab Index) test results; each laboratory is encouraged to establish its own criteria for test interpretation based on sample populations encountered.<0.9 –No detectable IgG antibody to Toxoplasma byELISA0.9–1.1 –Borderline positive. Follow-up testing isrecommend if clinically indicated.>1.1 –Detectable IgG antibody to Toxoplasma by ELISA References1.Wilson, M. et al., Evaluation of six commercial kitsfor detection of human immunoglobulin Mantibodies to Toxoplasma gondii. The FDAToxoplasmosis Ad Hoc Working Group.2.Obwaller, A. et al., An enzyme-linkedimmunosorbent assay with whole trophozoites ofToxoplasma gondii from serum-free tissue culturefor detection of specific antibodies. Parasitol. Res., 1995;81(5):361-4.3.Loyola, A.M. et al., Anti-Toxoplasma gondiiimmunoglobulins A and G in human saliva andserum. J. Oral Pathol. Med., 1997; 26(4):187-91. 4.Doehring, E. et al., Toxoplasma gondii antibodies inpregnant women and their newborns in Dar esSalaam, Tanzania. Am. J. Trop. Med. Hyg., 1995;52(6):546-8.5.Cotty, F. et al., Prenatal diagnosis of congenitaltoxoplasmosis: the role of Toxoplasma IgAantibodies in amniotic fluid [letter]. J. Infect. Dis.,1995;171(5):1384-5.6.Altintas, N. et al., Toxoplasmosis in last four yearsin Agean region,Turkey. J. Egypt. Soc. Parasitol.,1997;27(2):439-43.RGC,CH,MAM 10/14-1©2014 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA-ALDRICH is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. Sigma brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at and/or on the reverse side of the invoice or packing slip.。
beyotime的alp的catalog numbers
beyotime的alp的catalog numbersBeyotime是一家专业从事蛋白质组学、生物化学、细胞生物学等领域的生物试剂制造商,其ALP试剂盒是研究蛋白质和酶的理想选择。
本文将围绕Beyotime的ALP目录号展开,从多个角度为您介绍。
一、目录号的概念及其作用目录号(Catalog number)是Beyotime对生物试剂进行标识的唯一编号。
每种试剂都有一个独特的目录号,它由一定长度的字母和数字组成。
通过这个编号,电子商务平台或供应商可以非常方便地确定所需的试剂种类和批次,确保拿到的试剂是无误的。
二、Beyotime ALP试剂盒的种类1.磷酸酶酶标测定试剂盒:用于在细胞发育、代谢和疾病过程中检测磷酸酶活性。
目录号为P0321。
2.骨髓碱性磷酸酶(BALP)活性分析试剂盒:用于测定血清、血浆和尿液中的BALP活性。
目录号为P7607。
3.骨钙素(BGLAP)酶联免疫分析试剂盒:用于测定人类和小鼠血清、血浆和培养上清中的BGLAP水平。
目录号为EK0413。
4.乳铁蛋白(LTF)酶联免疫分析试剂盒:用于测定人类和小鼠血清、血浆和培养上清中的LTF水平。
目录号为EK0981。
5.核糖核酸酶P26(RNASP26)酶联免疫分析试剂盒:用于测定人类和小鼠血清、血浆和培养上清中的RNASP26水平。
目录号为EK3721。
三、如何选择适合自己的ALP试剂盒1.确定所需检测的样本类型ALP试剂盒针对不同的样本类型进行设计,如血清、血浆、尿液、培养上清等,因此在购买时需要明确所需样本。
2.选择对应种类的ALP试剂盒根据需要检测的目标蛋白,从Beyotime提供的ALP试剂盒中选择合适的一种。
3.确定所需的检测量级Beyotime的ALP试剂盒一般都有不同的检测范围,根据需求选择合适的检测级别。
4.确认批号和有效期选购时需要仔细查看目录号的前两位,确保购买的是同一批次的试剂,同时需要确认有效期,过期试剂会影响检测结果。
听说你要研究HMGB1,贴心奉上超高引用率试剂
听说你要研究HMGB1,贴心奉上超高引用率试剂展开全文HMGB1,你对这个因子还陌生吗?事实上,它已成为众多疾病研究的当红炸子鸡。
HMGB1 是什么?具有什么功能?本文给你解惑。
并且,小编贴心整理了Bio-Techne 旗下子品牌R&D Systems®和Novus Biologicals®的超高引用率 ELISA 试剂盒、重组蛋白及抗体试剂。
多功能警报器 HMGB1高迁移率族蛋白B1(HMGB1,High-mobility Group Box 1 protein),亦称为HMG1、Amphoterin,是一类非组蛋白核蛋白的家族成员[1-3]。
人 HMGB1 为 25 kDa 单链蛋白,由两个球状带正电荷的 DNA 结合结构域(HMG Box A 和 BoxB)以及仅含有 Asp 和 Glu 氨基酸残基的带负电荷的C 末端区域构成[4, 5]。
HMGB1 的翻译后修饰包括乙酰化、磷酸化和甲基化,影响HMGB1 的定位、受体结合及生物活性[3]。
HMGB1 结构示意图[3]尽管HMGB1 主要位于细胞核中,但在细胞活化或凋亡过程中,可以转移到细胞质甚至是细胞外空间[2]。
HMGB1 以非序列特异性方式结合DNA,参与基因转录、基因调节和DNA 修复等过程[3, 7];研究表明,HMGB1 的乙酰化介导其细胞质定位和最终分泌[8]。
HMGB1 可由多种细胞分泌,也可在细胞坏死、凋亡和焦亡时释放[2, 3]。
细胞外的 HMGB1 已成为研究焦点,它可以说是一种「多功能警报器」,介导多个信号通路,参与多种免疫反应。
HMGB1 的受体包括 TLR2、TLR4、TLR9、Syndecan3、Siglec10、整合素αMβ2、CXCR4、TIM-3 和RAGE 等[1, 2]。
它涉及广泛的疾病发病机理,包括动脉粥样硬化、败血症、肿瘤、神经退行性疾病、自身免疫疾病和炎症疾病[3, 9, 12]。
【VIP专享】ELISA实验标本的采集、处理和保存
ELISA实验标本的采集、处理和保存发布时间:2009-10-19ELISA实验标本的采集、处理和保存能够应用ELISA 实验的样本种类很多,有血清,血浆,细胞上清,细胞裂解液,尿液,关节滑液,脑脊液,肺泡灌洗液,各种组织的组织匀浆;采集和处理的方式都不相同。
下面就列出了biotnt 收集的给类样本的采集、处理和保存方式。
方法大多出自文献和试剂盒说明书,部分方法经Biotnt 验证过,但有的方法并没有实际操作过,所以,以下方法仅供参考。
一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存;1、真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中;2、采血后室温静置1小时;3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4、取上清。
分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月;5、根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。
大部分ELISA检测均以血清为标本。
血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的 ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
此外还应避免细菌污染,因为菌体中可能含有含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。
血清标本宜在新鲜时检测。
如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。
二、ELISA实验中血浆的采集、处理和保存;1、真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中;2、按1:9加入抗凝剂(EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠),30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集);3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4、取上清。
分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月;5、根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。
biobrick
合成生物学生命科学方向的一门新兴学科,它致力于从零开始建立微生物基因组,从而分解、改变并扩展自然界在35亿年前建立的基因密码。
它是从最基本的要素开始一步步建立零部件,再将零部件组织起来,建立出能体现各种功能的系统。
合成生物学的零部件,就是一段有特定功能的DNA序列。
但通过传统的分子克隆技术依赖PCR,酶切,连接等手段获得重组的DNA ,是很难满足合成生物学研究的需要的:每当需要一个“零件”时,就要设计一个独特的克隆方法;而且克隆一个组件的过程中的中间产物通常无法应用到别的组件上,这无疑是一种资源浪费。
T. Knight建立了一套新的名为“BioBricks”的克隆策略,使生物组件的标准化装配成为可能,就像传统的机械制造那样,各种组件具备一定的标准的接口,它们之间可以以标准的方法连接装配形成更大的组件。
每个BioBrick都是一段DNA,它包含特定的信息以及编码相对应的特定功能,例如,启动子,核糖体结合位点,蛋白质编码序列,终止子,或是它们的组合。
每个Biobrick 的上下游包含特定的酶切位点,只需要通过酶切连接反应,就可以将任意一个标准化后的BioBrick组件插入到其他的BioBrick组件的上游或者下游,并且,新的组合序列仍然是标准化的BioBrick组件[1]。
迭代这样的操作,可以利用简单的手段,从简单的组件出发,构建大规模的复杂系统。
一、Biobricks 概述1.什么是Biobricks简单的说,Biobricks就是一段含有特殊酶切位点和特定功能序列的一段DNA。
下图就是一个标准的Biobrick的实例。
一个标准的biobrick 有三部分组成:前缀(prefix),主体(body)和后缀(suffix).其中主体(body)部分是一段有特定功能的DNA序列,可以是调控基因,蛋白质编码基因,终止子等,也可以是它们的组合。
不同Biobrick是根据这一部分加以区分和命名的(见附录)。
蛋白样品制备的注意事项
蛋白样品制备的注意事项蛋白裂解液蛋白裂解液有多种,它们溶解蛋白的能力不同,简单来说,含有十二烷基硫酸钠(SDS)和其他离子型去污剂的溶解能力最强。
常用的蛋白裂解液有RIPA(放射免疫沉淀分析)裂解液、Nonidet-P40(NP-40)裂解液和Triton X-100裂解液等。
RIPA裂解液这是一类经典的细胞和组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强的裂解作用,提取的蛋白样品多用于Western blot 和IP等检测。
对于提取细胞核蛋白来说,这类缓冲液比只含有NP-40或Triton X-100的缓冲液更受欢迎。
RIPA裂解液根据裂解强度大致可以分为强、中、弱三类。
RIPA裂解液RIPA裂解液(强)的主要成分为1% Triton X-100,0.1% SDS和1% Sodium Deoxycholate,尤其适用于动物较硬组织的裂解,样品后续应用于进行Western blot等实验;RIPA裂解液(中)的主要成分为1% NP-40,0.1% SDS和0.5% Sodium Deoxycholate,适用于动物柔软组织的裂解,样品后续应用于进行Western blot等实验;RIPA裂解液(弱)的主要成分为1% NP-40和0.25% Sodium Deoxycholate,尤其适用于动物细胞的裂解,样品后续应用于进行Western blot等实验。
NP-40裂解液NP-40裂解液是一种比较温和的细胞和组织裂解液,主要成分为1% NP-40,适用于提取动物组织和细胞,样品后续应用于PAGE、Western blot、IP和Co-IP等实验。
细胞裂解液Triton X-100细胞裂解液是一种较温和的细胞和组织裂解液,可在非变性条件下裂解细胞,主要成分为1% Triton X-100,样品后续应用于PAGE、Western blot、IP和Co-IP等实验。
但如果目标蛋白不能完全从不溶性或凝集物中提取,RIPA裂解液将会更适合。
Biotage快速制备色谱讲义
Biotage快速制备色谱仪的使用及样品成分的分离一,实验目的:1,学习掌握Biotage快速制备色谱仪的原理及使用操作2,了解Biotage快速制备色谱仪器的结构3,学习利用Biotage快速制备色谱仪对混合样品的分离二,实验原理:利用样品混合物中各组分理、化性质的差异,各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。
当两相相对运动时,各组分在两相中反复多次重新分配,结果使混合物得到分离。
两相中,固定不动的一相称固定相;移动的一相称流动相。
固定相是固体吸附剂,吸附剂是多孔性微粒物质表面有吸附中心。
样品组分与流动相竞争吸附中心。
各组分的吸附能力不同,使组分在固定相中产生保留时间不同和实现分离。
制备色谱法其目的在于分离制备一种或多种纯组分,用于进一步的定性鉴定、化学合成或制备高纯标准物。
可分为工业用大规模制备纯物质的生产制备色谱和实验室分离几毫克至几克样品,以便鉴定色谱图中未知峰的小型制备色谱。
实验室制备色谱除了用柱色谱外还有制备薄层色谱。
制备色谱法可以完成一般分离方法难以完成的纯物质制备,如纯化学试剂、合成中间体、蛋白质的纯化等。
三,仪器与试剂:1,仪器,Biotage快速制备色谱仪;2,试剂,苯甲醛,邻氯苯甲醛,环己烷,乙酸乙酯四,实验步骤:1、打开系统电源开关,启动仪器;2、当进入主界面后,点击Chemistry;3、点击Lamp On。
紫外灯需要7.5 分钟的预热时间;4、选择右下角Solvents 界面,给需要使用的溶剂指定相应的溶剂进口,至少两种溶剂;5、进入方法编辑界面(Method tab),点击New 或者Open 以建立方法。
6、在参数编辑Parameters 界面,选择溶剂体系,柱子cartridge 的大小以及收集架子的类型。
流速flowrate是默认的,输入完点击OK;7、在收集方式Collection 界面,选择紫外检测器的波长,collection wavelength 为命令收集波长,monitor8、wavelength 为检测波长(可观察化合物在此波长条件下的吸收情况),两种波长范围皆为200~320nm,输入完点击OK;9、选择收集模式collection mode,里面共有六种收集模式,最常用的为CollectAll 全收集,Threshold 域10、值收集一般设置为50mAU,manual 手动收集,其它三种不常用。
ELISA实验常见样本类型以及处理方法——白介素-1β ELISA定量试剂盒
ELISA实验常见样本类型以及处理方法——白介素-1βELISA定量试剂盒ELISA常见的标本一般包括:液体类标本(包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等);培养细胞;组织标本。
那么是不是仅仅有了这些标本,就可以开始ELISA实验了呢?这些标本在收集的时间、方法以及保存条件都有一定的要求,划重点:1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原、无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-2Na,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。
避免使用溶血,高血脂样品。
3.组织匀浆:用预冷的匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。
取上清检测。
5.其它生物样品:如固体生物代谢物,按组织样本处理方法操作,悬浮物应离心去除。
以上为样本的实验前处理方法,如果遇到急事不能立刻用这些新鲜的样本来进行实验的话,那么也无妨,接下来跟大家分享,样本处理后的储存方法,在短时间内是可以应急的,但是还是建议新鲜样本最佳:ELISA方法类型对比一般ELISA实验类型有四种,竞争法、间接法、双抗体夹心法、双抗原夹心法,这四种方法有哪些不同,以及各自的优缺点是什么?Abbkine白介素-1βELISA定量试剂盒特点如下:1、高效、灵敏、特异的抗体;2、定量准确稳定的重复性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;5、节省实验经费。
文章来源:Abbkine。
生物样本数据库(BioSample)使用说明
生物样本数据库(BioSample)使用说明数据库简介 (2)用户注册 (2)BioSample创建 (3)批量样本提交模式(推荐) (3)单个样本提交模式 (8)BioSample修改和删除 (13)BioSample发布 (15)数据库简介生物样本数据库(BioSample)是收集与共享生物样本信息的资源库,提供生物样本的结构化描述信息递交和发布,样本类型涵盖人、动物、植物、微生物(含环境微生物)、病毒等。
用户注册请您进入生物数据递交系统(BIG Submission,https:///gsub/)完成账号注册,建议使用实验室公共邮箱进行注册。
如果您在账号注册和使用过程中遇到任何问题,请联系bigd-admin@。
BioSample创建账户注册完成后,即可进入BIG Sub统一递交入口,目前BioSample数据库支持两种数据提交模式(Submission type),分别为批量样本提交(Batch BioSamples)和单个样本提交(Single BioSample)。
大多数提交的生物样品需要一个以上的样本,建议用户使用“批量样本提交模式”进行BioSample创建。
批量样本提交(Batch BioSamples)模式(推荐)只要您一次性上传的样本数大于1,建议您使用批量样本提交(Batch BioSamples),具体步骤如下:提交者信息(Submitter)—用于收集数据提交者信息,系统会帮您自动填入用户注册时姓名和电子邮件信息,如部分信息需要调整,可直接修改并通过“保存并进入下一项(Save and forward)”键完成修改。
本系统支持中英文双语言模式,可随时自由切换请注意,数据信息审核与文件归档过程中出现任何问题,信息将反馈到您的注册邮箱,而非此处填入的提交者信息邮箱。
●基本信息(General)—用于收集有关BioSample(s)的描述信息,包括发布日期(Releasedate)、提交类型(Submission type)、项目编号(Project accession);●样本类型(Sample Type)—此页收集有关样本类型信息。
牛 β 乳球蛋白(β-Lg)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书
牛β乳球蛋白(β-Lg)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定牛血清、血浆、组织等样本中β乳球蛋白(β-Lg)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛β乳球蛋白(β-Lg)水平。
用纯化的牛β乳球蛋白(β-Lg)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入牛β乳球蛋白(β-Lg),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的牛β乳球蛋白(β-Lg)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛β乳球蛋白(β-Lg)含量。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
Biotage快速制备色谱讲义
谱讲义谱讲义Biotage快速制备色谱仪的使用及样品成分的分离一,实验目的:1,学习掌握Biotage快速制备色谱仪的原理及使用操作2,了解Biotage快速制备色谱仪器的结构3,学习利用Biotage快速制备色谱仪对混合样品的分离二,实验原理:利用样品混合物中各组分理、化性质的差异,各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。
当两相相对运动时,各组分在两相中反复多次重新分配,结果使混合物得到分离。
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样品组分与流动相竞争吸附中心。
各组分的吸附能力不同,使组分在固定相中产生保留时间不同和实现分离。
制备色谱法其目的在于分离制备一种或多种纯组分,用于进一步的定性鉴定、化学合成或制备高纯标准物。
可分为工业用大规模制备纯物质的生产制备色谱和实验室分离几毫克至几克样品,以便鉴定色谱图中未知峰的小型制备色谱。
实验室制备色谱除了用柱色谱外还有制备薄层色谱。
制备色谱法可以完成一般分离方法难以完成的纯物质制备,如纯化学试剂、合成中间体、蛋白质的纯化等。
三,仪器与试剂:1,仪器,Biotage快速制备色谱仪; 2,试剂,苯甲醛,邻氯苯甲醛,环己烷,乙酸乙酯四,实验步骤:1、打开系统电源开关,启动仪器;2、当进入主界面后,点击 Chemistry;3、点击 Lamp On。
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6、在参数编辑 Parameters 界面,选择溶剂体系,柱子 cartridge 的大小以及收集架子的类型。
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●刑侦化验部门血液体液中兴奋剂或毒物的检;
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RapidTrace 是由计算机软件控制的全自动固相萃取工作站,可根据所采用的固相萃取柱,快速而方便的调整样品参数,测试条件等。
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柱的活化,样品过柱,杂质洗脱,氮气吹干,分析物洗脱,浓
缩等过程都是完全自动完成,减少了人为误差,得到更高的回
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样品可以是同一程序,也可以是采用不同的萃取方法,灵活方
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