实验2土壤中细菌的分离与纯化

可编辑版
4
四、操作步骤（1）
1. 制备土壤稀释液 2. 涂布平板 3. 培养 4. 挑菌落 5. 平板划线分离 6. 转入斜面 7. 观察菌落特征、制片镜检菌体形态 8. 菌种保藏
可编辑版
5
四、操作步骤（2）
1. 制备土壤稀释液
可编辑版
6
四、操作步骤（3）
2. 涂布
可编辑版
7
四、操作步骤（4）
四、操作步骤（6）
5. 平板划线分离
可编辑版
10
四、操作步骤（6）
平板划线法
平板划线分离的方法
1.斜线法；2.曲线法；3.方格法；4.放射法；5.四格法
可编辑版
11
四、操作步骤（6）
平板划线分离
可编辑版
12
四、操作步骤（7）
6. 转入斜面
斜面接种时的无菌操作
(1)接种灭菌; (2)开启棉塞; (3)管口可灭编菌辑版; (4)挑起菌苔; (5)接种; (6)塞好棉塞13
可编辑版
15
六、思考题
1. 试拟出从土壤中分离芽孢杆菌的主要实验步 骤。
2. 如何检验平板上某个单菌落是不是纯培养？
可编辑版
16
四、操作步骤——初步鉴定
▪ 通过已掌握的实验技术，对分离到的纯菌株进 行初步鉴定。
➢ 观察和记录菌种的培养特征
➢ 革兰氏染色，观察和记录菌体特征与染色特性
➢ 芽孢染色
➢ 鞭毛染色
➢ 查《伯杰氏手册》等文献，初步对菌种进行鉴定。
➢ 将转入斜面的菌种置4℃冰箱保藏。
可编辑版
14
五、实验报告
在三种不同的平板上，你分离得到哪些类群的 微生物？简述它们的菌落特征和菌体形态。
实验十
微生物的分离与纯化
可编辑版
1
一、目的要求
1. 掌握土壤微生物的分离纯化方法和无菌操作 技术；
2. 初步掌握微生物的鉴定技术。
可编辑版
2
二、实验原理
1. 自然界中各种微生物混杂生活在一起，要研究 某种微生物的特性，首先须使该微生物处于纯 培养状态。从混杂的微生物群体中获得只含有 某一种或一株微生物的过程称为微生物的分离 与纯化。
2. 土壤是微生物生活的大本营，可以从中分离到 很多有价值的菌株。本实验将采用三种不同的 培养基从土壤中分离不同类型的微生物。
可编辑版
3
三、实验Fra Baidu bibliotek材
1. 土样：采集校园土壤
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基——细菌
3.
高氏Ⅰ号培养基——放线菌
4.
马丁氏培养基——真菌
3. 其他：无菌的培养皿、盛90mL无菌水并带 玻璃珠的三角瓶、盛9mL无菌水的试管、小 铁铲、吸头、移液器、无菌玻璃涂棒、接种 环、显微镜、染色液等。
3. 培养：高氏Ⅰ号培养基平板和马丁氏培养基平板倒置
于28℃培养箱中培养3~5 d，牛肉膏蛋白胨培养基平板 倒置于37℃培养箱中培养2~3 d。
可编辑版
8
四、操作步骤（5）
4. 挑菌落
接种和分离工具
1. 接种针；2.接种环；3.接种钩；4.5.可玻编璃辑涂版棒；6.接种圈；7.接种锄；8.小解剖9 刀