裸鼠成瘤ppt课件
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记录肿瘤的大小变化，是否需要取材后需要怎么拍摄裸鼠 的照片等等。
16
谢谢大家！
17
10
细胞慢病毒感染 附：一些细胞的慢病毒感染效果图 K562
A549
11
裸鼠成瘤
细胞培养：
细胞的状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键的一步。细胞 状态良好，对数生长期，接种很容易形成肿瘤，反之则会 导致失败。即浪费了细胞，又错过了裸鼠成瘤的最佳时期
-
+
12
裸鼠成瘤
细胞接种：
接种的细胞量：无血清培养基重悬成1*107个/ml的悬液，0.2ml/只/ 针。也就是一只裸鼠最少要用200W个细胞，有的细胞需求可能会 达到1000W个/只。 接种的部位大部分颈部和腋下皮下。血丰富，能提供大量的营养。 当然，这个也是可以调整的。 另外裸鼠理论上是1个裸鼠只能接种1针，形成1个肿瘤。因为2个或 者以上的肿瘤是会相互影响的。
小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现型（ phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无 毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基 因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能 将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。
2
裸鼠
裸小鼠 裸大鼠
一些比较有争议的细胞：
Hela（宫颈癌），HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。
8
细胞慢病毒感染
1、慢病毒保存
理论上慢病毒可在-80℃保存6个月，在4℃可保存3天。因为 慢病毒每次冻融会降低病毒滴度10%，因此慢病毒实验最好 是提前分装。
2、MOI值
细胞感染达到80%以上所需MOI值，这个大部分细胞是可以 查到，不过因为因为慢病毒感染细胞是很灵活的，因此MOI 值的选择也是很有差异性的，具体情况具体分析。
随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感 染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用 4--6周龄的裸鼠。
5
裸鼠成瘤方式
1.人体原发癌
结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤
裸
、淋巴瘤、白血病、肾癌、宫颈癌、软组织
鼠
肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、获得了一定百
成
分比（35.7%）的良好生长，并可传代。
13
裸鼠成瘤
附：我们实验一些裸鼠成瘤的成功案例
Hep-G2细胞
A375细胞
14
一些其他情况下的裸鼠成瘤 裸鼠皮下成瘤后，除了一些常规的检测外 我们一般可进行以下一些实验操作：
裸鼠活体荧光
15
相关裸鼠皮下成瘤的建议 1、裸鼠的品系。 2、裸鼠成瘤用的材料：细胞的选择。 3、客户的具体要求：比如说肿瘤形成部位，是否需要详细
7
常见的细胞株
常规较容易成瘤的细胞：
Hep-G2（肝癌，Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺)，A431(表皮 癌),SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌），A375/B16-F10（人黑 色素瘤细胞）。
可以成瘤但是比较慢的细胞：
CNE（鼻咽癌），A549（肺癌），SPC-A-1（肺腺癌）。HT-29 （结肠癌），EL-7402（肝癌）。
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细胞慢病毒感染
附：慢病毒使用量的相关计算公式 MOI=（慢病毒使用的体积*慢病毒滴度）/ 需要感染的细胞数 其中：慢病毒使用体积单位为ml 慢病毒滴度单位为TU/ml 例如： Hep-G2细胞，MOI=20，慢病毒滴度=1.0*108 TU/ml, 24孔板的细胞总数：2.0*105个。 因此：感染24孔板中1孔的HEP-G2细胞所需要的慢病毒体积 为： (20* 2.0*105)/ 1.0*108 =0.04ml
裸大鼠(基因符号rnu )：
一般特征似裸小ห้องสมุดไป่ตู้，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全 无毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。
4
裸鼠的选择
虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取 血量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一 定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸 大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/cnu裸小鼠。
裸鼠皮下成瘤
---慢病毒感染后的细胞
1
裸鼠
无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠）。目前已成为医学 生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学 、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等 实验方面，它有着特殊的价值。
裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一 种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小 鼠（nn/+）各方面表现都正常。
瘤
2.建株的人体肿瘤组织培养细胞
理论上建株的肿瘤细胞均可以
我们实验室均采用细胞株作为材料，这个方式是 性价比最高的，操作简便，材料安全且容易获取。
6
细胞株的选择 细胞的选择大致有一下几个方面：
1.国际公认度较高的细胞株。 2.根据体内生长情况来确定，很多细胞株，在文献中有
很高的出镜率，但是实际上，基本都是从体外开始有名。 当然，我们对于细胞株的选择是没有选择的！
3
形态特征 裸小鼠(基因符号nu):
无毛(hair less),无胸腺(athymus).幼鼠(3－4周龄),成年鼠(6－8周龄。 抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮 水患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，等都要 求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。
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谢谢大家！
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细胞慢病毒感染 附：一些细胞的慢病毒感染效果图 K562
A549
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裸鼠成瘤
细胞培养：
细胞的状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键的一步。细胞 状态良好，对数生长期，接种很容易形成肿瘤，反之则会 导致失败。即浪费了细胞，又错过了裸鼠成瘤的最佳时期
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裸鼠成瘤
细胞接种：
接种的细胞量：无血清培养基重悬成1*107个/ml的悬液，0.2ml/只/ 针。也就是一只裸鼠最少要用200W个细胞，有的细胞需求可能会 达到1000W个/只。 接种的部位大部分颈部和腋下皮下。血丰富，能提供大量的营养。 当然，这个也是可以调整的。 另外裸鼠理论上是1个裸鼠只能接种1针，形成1个肿瘤。因为2个或 者以上的肿瘤是会相互影响的。
小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现型（ phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无 毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基 因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能 将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。
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裸鼠
裸小鼠 裸大鼠
一些比较有争议的细胞：
Hela（宫颈癌），HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。
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细胞慢病毒感染
1、慢病毒保存
理论上慢病毒可在-80℃保存6个月，在4℃可保存3天。因为 慢病毒每次冻融会降低病毒滴度10%，因此慢病毒实验最好 是提前分装。
2、MOI值
细胞感染达到80%以上所需MOI值，这个大部分细胞是可以 查到，不过因为因为慢病毒感染细胞是很灵活的，因此MOI 值的选择也是很有差异性的，具体情况具体分析。
随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感 染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用 4--6周龄的裸鼠。
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裸鼠成瘤方式
1.人体原发癌
结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤
裸
、淋巴瘤、白血病、肾癌、宫颈癌、软组织
鼠
肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、获得了一定百
成
分比（35.7%）的良好生长，并可传代。
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裸鼠成瘤
附：我们实验一些裸鼠成瘤的成功案例
Hep-G2细胞
A375细胞
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一些其他情况下的裸鼠成瘤 裸鼠皮下成瘤后，除了一些常规的检测外 我们一般可进行以下一些实验操作：
裸鼠活体荧光
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相关裸鼠皮下成瘤的建议 1、裸鼠的品系。 2、裸鼠成瘤用的材料：细胞的选择。 3、客户的具体要求：比如说肿瘤形成部位，是否需要详细
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常见的细胞株
常规较容易成瘤的细胞：
Hep-G2（肝癌，Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺)，A431(表皮 癌),SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌），A375/B16-F10（人黑 色素瘤细胞）。
可以成瘤但是比较慢的细胞：
CNE（鼻咽癌），A549（肺癌），SPC-A-1（肺腺癌）。HT-29 （结肠癌），EL-7402（肝癌）。
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细胞慢病毒感染
附：慢病毒使用量的相关计算公式 MOI=（慢病毒使用的体积*慢病毒滴度）/ 需要感染的细胞数 其中：慢病毒使用体积单位为ml 慢病毒滴度单位为TU/ml 例如： Hep-G2细胞，MOI=20，慢病毒滴度=1.0*108 TU/ml, 24孔板的细胞总数：2.0*105个。 因此：感染24孔板中1孔的HEP-G2细胞所需要的慢病毒体积 为： (20* 2.0*105)/ 1.0*108 =0.04ml
裸大鼠(基因符号rnu )：
一般特征似裸小ห้องสมุดไป่ตู้，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全 无毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。
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裸鼠的选择
虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取 血量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一 定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸 大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/cnu裸小鼠。
裸鼠皮下成瘤
---慢病毒感染后的细胞
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裸鼠
无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠）。目前已成为医学 生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学 、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等 实验方面，它有着特殊的价值。
裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一 种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小 鼠（nn/+）各方面表现都正常。
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2.建株的人体肿瘤组织培养细胞
理论上建株的肿瘤细胞均可以
我们实验室均采用细胞株作为材料，这个方式是 性价比最高的，操作简便，材料安全且容易获取。
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细胞株的选择 细胞的选择大致有一下几个方面：
1.国际公认度较高的细胞株。 2.根据体内生长情况来确定，很多细胞株，在文献中有
很高的出镜率，但是实际上，基本都是从体外开始有名。 当然，我们对于细胞株的选择是没有选择的！
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形态特征 裸小鼠(基因符号nu):
无毛(hair less),无胸腺(athymus).幼鼠(3－4周龄),成年鼠(6－8周龄。 抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮 水患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，等都要 求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。