高效液相色谱单项选择及思考题试卷 及答案
高效液相色谱习题及解答
高效液相色谱法习题一、思考题1．从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2．液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处? 3．在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?4．液相色谱有几种类型? 5．液-液分配色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？6．液-固分配色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？7．化学键合色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？8．离子交换色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？9．离子对色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?10．空间排阻色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？11．在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱？12．何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？13．何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱？试述它们的基本原理14．何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处？16．以液相色谱进行制备有什么优点？17．在毛细管中实现电泳分离有什么优点？18．试述CZE的基本原理19．试述CGE的基本原理20．试述MECC的基本原理二、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3．组分在固定相中的质量为MA(g)，在流动相中的质量为MB（g），而该组分在固定相中的浓度为CA（g·mL －1），在流动相中浓度为CB（g·mL－1），则此组分的分配系数是( )。
高效液相色谱法习题
第12章高效液相色谱法习题（一）选择题单选题1. 在高效液相色谱中影响柱效的主要因素是( )A 涡流扩散B 分子扩散C 传质阻力D 输液压力2. 在高效液相色谱中，提高柱效能的有效途径是( )A 提高流动相流速B 采用小颗粒固定相C 提高柱温D 采用更灵敏的检测器3. 高效液相色谱法的分离效果比经典液相色谱法高，主要原因是( )A 流动相种类多B 操作仪器化C 采用高效固定相D 采用高灵敏检测器4. 在高效液相色谱中，通用型检测器是( )A 紫外检测器B 荧光检测器C 示差折光检测器D 电导检测器5. HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为( )A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相黏度较小D 柱温低6．液相色谱定量分析时，要求混合物中每一个组分都出峰的是( )A 外标标准曲线法B 内标法C 面积归一化法D 外标法7．下述四种方法中最适宜分离异构体的是是( )A 吸附色谱B 反离子对色谱C 亲和色谱D 空间排阻色谱8．在液相色谱中，梯度洗脱适用于分离( )A 异构体B 沸点相近，官能团相同的化合物C 沸点相差大的试样D 极性变化范围宽的试样9．在HPLC中，范氏方程中对柱效影响可以忽略不计的因素是( )A 涡流扩散B 纵向扩散C 固定相传质阻力D 流动相传质阻力10．当用硅胶为基质的填料作固定相时，流动相的pH范围应为( )A 在中性区域B 5一8C 1一14D 2一811．高效液相色谱法中，常用的流动相有水、乙腈、甲醇、正己烷，其极性大小顺序为( )A 乙腈>水>甲醇>正己烷B 乙腈>甲醇 >水>正己烷C 水> 乙腈>甲醇>正己烷D 水>甲醇> 乙腈>正己烷12．高效液相色谱法中,使用高压泵主要是由于( )A 可加快流速，缩短分析时间B 高压可使分离效率显著提高C 采用了细粒度固定相所致D 采用了填充毛细管柱13．液相色谱的H-u曲线（）。
高效液相色谱实验报告思考题
高效液相色谱实验报告思考题
高效液相色谱实验报告思考题：1. 实验目的是什么？
实验中使用的高效液相色谱技术有哪些优势？2. 实验中选
择的色谱柱和流动相有何特点？为什么选择这些条件？3.
实验中使用的样品是什么？为什么选择这个样品进行分析？
4. 实验中使用的检测方法是什么？该方法有哪些优点和局
限性？5. 实验中的结果如何解释？是否符合预期？如果结
果与预期不符，可能出现了哪些问题？6. 实验过程中是否
遇到了任何困难或挑战？如何解决这些问题？7. 实验结果
是否可靠和准确？如果不准确，可能出现了哪些误差来源？
8. 该实验对于解决什么问题或回答什么科学疑问具有重要
意义？9. 该实验还可以进行哪些改进或扩展？如何进一步
提高分析效果和准确性？10. 你对该实验的整体体会和收
获是什么？是否有任何进一步的研究方向或想法？以上思
考题旨在引导读者对高效液相色谱实验报告进行深入思考
和分析，以提高实验报告的质量和科学性。
高效液相色谱习题及答案
高效液相色谱法习题一、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相粘度较大D 柱温低3．分离糖类化合物，选以下的柱子（）最合适。
A ODS柱B 硅胶柱C 氨基键合相柱D 氰基键合相柱4．在液相色谱中，梯度洗脱适用于分离（）。
A 异构体B 沸点相近，官能团相同的化合物C 沸点相差大的试样D 极性变化范围宽的试样5．在液相色谱中，提高色谱柱柱效的最有效途径是（）。
A 减小填料粒度B 适当升高柱温C 降低流动相的流速D 增大流动相的流速6．如果样品比较复杂，相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳定，要准确测量保留值有一定困难时，可选择以下方法（）定性。
A 利用相对保留值定性B 加人已知物增加峰高的办法定性C 利用文献保留值数据定性D 与化学方法配合进行定性7．液相色谱中通用型检测器是（）。
A 紫外吸收检测器B 示差折光检测器C 热导池检测器D 荧光检测器8．离子色谱的主要特点是（）。
A 高压、高效、高速、高分辨率、高灵敏度B 采用柱后抑制技术和电导检测，特别适合离子分析C 采用了阴离子专用检测器，对阴离子分析有高灵敏度D 采用紫外检测器合柱压衍生装置，对离子分析有高效9．高压、高效、高速是现代液相色谱的特点，采用高压主要是由于（）。
A 可加快流速，缩短分析时间B 高压可使分离效率显着提高C 采用了细粒度固定相所致D 采用了填充毛细管柱10.与气相色谱相比，在液相色谱中（）。
A 分子扩散项很小，可忽略不计，速率方程式由两项构成B 涡流扩散项很小，可忽略不计，速率方程式由两项构成C 传质阻力项很小，可忽略不计，速率方程式由两项构成D 速率方程式同样由三项构成，两者相同11．在液相色谱中，下列检测器可在获得色谱流出曲线的基础上，同时获得被分离组分的三维彩色图形的是（）。
高效液相色谱习题及答案59852
高效液相色谱法习题一、思考题1．从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2．液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处 3．在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些其中最有效的途径是什么4．液相色谱有几种类型 5．液-液分配色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么6．液-固分配色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么7．化学键合色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么8．离子交换色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么9．离子对色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么10．空间排阻色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么11．在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱12．何谓化学键合固定相它有什么突出的优点13．何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱试述它们的基本原理14．何谓梯度洗提它与气相色谱中的程序升温有何异同之处15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处16．以液相色谱进行制备有什么优点17．在毛细管中实现电泳分离有什么优点18．试述CZE的基本原理19．试述CGE的基本原理20．试述MECC的基本原理二、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3．组分在固定相中的质量为MA(g)，在流动相中的质量为MB（g），而该组分在固定相中的浓度为CA（g·mL －1），在流动相中浓度为CB（g·mL－1），则此组分的分配系数是( )。
高效液相色谱法模拟试题及答案解析
C.保留值
D.分配比
上一题下一题
(23/30)单项选择题
第23题
衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数是( )。
A.调整保留值
B.相对保留值
C.保留值
D.半峰宽
上一题下一题
(24/30)单项选择题
第24题
用薄层色谱法定性的主要参数是( )。
A.分配系数
B.分离因数
C.分配次数
D.比移值
A.a、b、c、d、e
B.c、d、a、b、e
C.b、d、c、a、e
D.d、b、a、e、c
上一题下一题
(29/30)单项选择题
第29题
在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是( )。
A.改变固定相种类
B.改变流动相流速
C.改变流动相配比
D.改变流动相种类
上一题下一题
(30/30)单项选择题
第30题
反相键合相色谱是指( )。
A.正确
B.错误
上一题下一题
(21/28)判断题
第51题
液相色谱分离实验结束后，无需冲洗，可直接关机。( )
A.正确
B.错误
上一题下一题
(22/28)判断题
第52题
按衍生化的方法分类，衍生化技术可分为柱前衍生和柱后衍生。( )
A.正确
B.错误
上一题下一题
(23/28)判断题
第53题
进行液相色谱分析时，增加流动相中乙腈的量，可减小被分离组分的保留值。( )
第15题
高效液相色谱仪上清洗阀(放空阀)的作用是( )。
A.清洗色谱柱
B.清洗泵头与排除管路中的气泡
C.清洗检测器
D.清洗管路
高效液相色谱法考试答案
高效液相色谱仪试卷(满分100分)一、填空题(共52分,每空2分)1、高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成。
2、拖尾因子(T)用于评价色谱峰的对称性,除另有规定外,T应在0.95-1.05之间。
3、梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度)流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可。
(安捷伦液相),另一类是内梯度装置(高压梯度)。
将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度(岛津液相)。
4、如色谱柱需长期保存,反相柱可以贮存于甲醇或乙腈中,正相柱可以贮存于经脱水处理后的正己烷中。
保存时要旋紧柱堵头防止有机溶剂挥发导致色谱柱填料干裂、脱落。
5、气泡(空气)会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
6、高效液相色谱进样针:应选用液相专用的平头针。
流动相pH值应控制在2-8之间。
7、将吸滤头分别放入脱气后的流动相中,旋转排液阀,排液5min;排液结束后应先更改低流速再旋紧排液阀,避免压力过大冲坏色谱柱。
8、以硅胶为载体的键合固定相的使用温度通常不超过40°C,为改善分离效果可适当提高色谱柱的使用温度,但不宜超过60°C。
9、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱。
若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱。
组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。
10、高效液相色谱法常用的检测器类型有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、光电二极管阵列检测器等。
(任意写4种)二、名词解析(共16分,每空4分)1、基线:是在操作条件下,没有组分流出时的流出曲线。
2、保留时间:是从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。
3、色谱流出曲线:是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线,又称为色谱图4、梯度洗脱:就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的。
高效液相色谱习题及答案
高效液相色谱习题及答案高效液相色谱法题一、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。
A低沸点小分子有机化合物B高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。
A柱前压力高B流速比GC的快C流动相粘度较大D柱温低3．分离糖类化合物，选以下的柱子（）最合适。
A。
ODS柱B硅胶柱C氨基键合相柱D氰基键合相柱4．在液相色谱中，梯度洗脱适用于分离（）。
A异构体B沸点相近，官能团相同的化合物C沸点相差大的试样D极性变化范围宽的试样5．在液相色谱中，提高色谱柱柱效的最有效途径是（）。
A减小填料粒度B适当升高柱温C降低流动相的流速D增大流动相的流速6．如果样品比较复杂，相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳定，要准确测量保留值有一定困难时，可选择以下方法（）定性。
A利用相对保留值定性B加人已知物增加峰高的办法定性C利用文献保留值数据定性D与化学方法配合进行定性7．液相色谱中通用型检测器是（）。
A紫外吸收检测器B示差折光检测器C热导池检测器D荧光检测器8．离子色谱的首要特点是（）。
A高压、高效、高速、高分辨率、高灵敏度B采用柱后抑制技术和电导检测，特别适合离子分析C采用了阴离子专用检测器，对阴离子分析有高灵敏度D采用紫外检测器合柱压衍生装置，对离子分析有高效9．高压、高效、高速是现代液相色谱的特点，采用高压主要是由于（）。
A可加快流速，缩短分析时间B高压可使分离效率显著提高C采用了细粒度固定相所致D采用了填充毛细管柱10.与气相色谱相比，在液相色谱中（）。
A份子扩散项很小，可忽略不计，速率方程式由两项组成B涡流扩散项很小，可忽略不计，速率方程式由两项组成C传质阻力项很小，可忽略不计，速率方程式由两项组成D速率方程式同样由三项组成，二者不异11．在液相色谱中，下列检测器可在获得色谱流出曲线的基础上，同时获得被分离组分的三维彩色图形的是（）。
A光电二极管阵列检测器B示差折光检测器C荧光检测器D电化学检测器12．不同类型的有机物，在极性吸附剂上的保留顺序是（）。
高效液相色谱思考题试卷及答案
高效液相色谱法的习题和参考答案思索题与练习题1.高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的？解：气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创建条件，从它的高效、高速和高灵敏度得到启发，采纳5-10μm微粒固定相以提高柱效，采纳高压泵加快液体流淌相的流速；设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，克服经典液相色谱的缺点，从而达到高效、快速、灵敏。
2.简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何削减谱带扩张，提高柱效？解：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流淌相传质、停留流淌相传质与柱外效应。
在液相色谱中要削减谱带扩张，提高柱效，要削减填料颗粒直径，减小填料孔穴深度，提高装填的匀称性，采纳低黏度溶剂作流淌相，流速尽可能低，同时要尽可能采纳死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。
3.色谱柱A柱长为15cm，载体粒度为5μm。
另一B柱长为30cm，载体粒度为10μm。
两柱的柱效相等吗？解：∵l=L/dp∴lA=15/0.0005=30000lB= 30/0.0010=30000A柱的折合柱长为30000，B柱的折合柱长也为30000，表明组分在两根柱内从柱入口到出口都经过30000个载体颗粒，两柱的柱效相等。
4.流淌相为什么要脱气？常用的脱气方法有拿几种？解：流淌相中溶解气体存在以下几个方面的害处（1）气泡进入检测器，引起光汲取或电信号的改变，基线突然跳动，干扰检测；（2）溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流淌相或固定相发生化学反应；（3）溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分别和分析结果带来误差。
因此，运用前必需进行脱气处理。
常用的脱气法有以下几种: （1）加热脱气法；（2）抽吸脱气法（3）吹氦脱气法；（4）超声波振荡脱气法。
5.在液相色谱中。
常用作固定相，又可用作键合相基体的物质是A. 分子筛B. 硅胶C. 氧化铝D. 活性炭解：B硅胶要形成化学键合固定相，所用的基质材料应有某种化学反应活性，在四种固体固定相中只有硅胶含有硅醇基，是能进行键合的活性官能团。
高效液相色谱习题和答案解析
高效液相色谱法习题一、思考题1.从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2.液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处?3.在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径就是什么?4.液相色谱有几种类型?5.液-液分配色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？6.液-固分配色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？7.化学键合色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？8.离子交换色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？9.离子对色谱的保留机理就是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么?10.空间排阻色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？11.在液-液分配色谱中,为什么可分为正相色谱及反相色谱？12.何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？13.何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱？试述它们的基本原理14.何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？15.高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有与不同之处？16.以液相色谱进行制备有什么优点？17.在毛细管中实现电泳分离有什么优点？18.试述CZE的基本原理19.试述CGE的基本原理20.试述MECC的基本原理二、选择题1.液相色谱适宜的分析对象就是( )。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2.HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要就是因为( )。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3.组分在固定相中的质量为MA(g),在流动相中的质量为MB(g),而该组分在固定相中的浓度为CA(g·mL－1),在流动相中浓度为CB(g·mL－1),则此组分的分配系数就是( )。
高效液相色谱思考题试卷及答案
高效液相色谱法得习题与参考答案思考题与练习题１、高效液相色谱就就是如何实现高效、快速、灵敏得?解:气相色谱理论与技术上得成就为液相色谱得发展创造条件,从它得高效、高速与高灵敏度得到启发,采用5-１0μm微粒固定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相得流速;设计高灵敏度、死体积小得紫外、荧光等检测器,提高检测灵敏度，克服经典液相色谱得缺点，从而达到高效、快速、灵敏。
2、简述液相色谱中引起色谱峰扩展得主要因素，如何减少谱带扩张，提高柱效？解:液相色谱中引起色谱峰扩展得主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。
ﻫ在液相色谱中要减少谱带扩张，提高柱效,要减少填料颗粒直径，减小填料孔穴深度，提高装填得均匀性,采用低黏度溶剂作流动相,流速尽可能低,同时要尽可能采用死体积较小得进样器、检测器、接头与传输管线等。
3、色谱柱Ａ柱长为１5cm,载体粒度为5μm。
另一Ｂ柱长为3０cｍ,载体粒度为10μm。
两柱得柱效相等吗？解:∵ｌ=Ｌ／ｄpﻫ∴lA＝15/0、0005＝30000ﻫlＢ＝30/0、００10=30000ﻫA柱得折合柱长为30000,B柱得折合柱长也为300０0,表明组分在两根柱内从柱入口到出口都经过30000个载体颗粒,两柱得柱效相等。
４、流动相为什么要脱气？常用得脱气方法有拿几种？解：流动相中溶解气体存在以下几个方面得害处(1)气泡进入检测器,引起光吸收或电信号得变化,基线突然跳动,干扰检测;(2)溶解在溶剂中得气体进入色谱柱时,可能与流动相或固定相发生化学反应;(3)溶解气体还会引起某些样品得氧化降解,对分离与分析结果带来误差。
因此,使用前必须进行脱气处理。
常用得脱气法有以下几种:(1)加热脱气法;(2)抽吸脱气法(3)吹氦脱气法;(4)超声波振荡脱气法。
5、在液相色谱中。
常用作固定相，又可用作键合相基体得物质就就是A、分子筛B、硅胶C、氧化铝D、活性炭解:B硅胶要形成化学键合固定相,所用得基质材料应有某种化学反应活性,在四种固体固定相中只有硅胶含有硅醇基,就就是能进行键合得活性官能团。
高效液相色谱实验报告思考题
高效液相色谱实验报告思考题高效液相色谱实验报告思考题2000字1. 为什么选择高效液相色谱作为本实验的方法？相比其他色谱方法有什么优势？选择高效液相色谱作为本实验的方法主要有以下几个原因：首先，高效液相色谱是一种分离和分析化合物的常用方法，具有高灵敏度和高分辨率的特点。
在本实验中，我们需要分离和分析样品中的多个化合物或成分，高效液相色谱能够提供足够的分离能力，使得我们能够准确、快速地得到所需的结果。
其次，高效液相色谱是一种相对简单易行的色谱方法。
相比传统的气相色谱或纸层析法等方法，高效液相色谱操作相对简便，不需要复杂的样品预处理步骤，并且可以自动进行样品注射和分离，大大提高了实验的操作效率。
最后，高效液相色谱具有广泛的适用性。
高效液相色谱可以应用于许多不同的实验场景，可以用于分析有机化合物、药物、天然产物等各种样品。
在本实验中，我们需要分析的是食品中的色素成分，高效液相色谱也被广泛应用于该领域，具有丰富的实验经验和研究基础。
相比其他色谱方法，高效液相色谱的优势主要体现在以下几个方面：首先，高效液相色谱的分离能力更强。
相比传统的纸层析或薄层层析法等方法，高效液相色谱使用的分离柱具有细小的颗粒和大表面积，能够提供更多的相互作用点，从而实现更好的分离效果。
此外，高效液相色谱中还可以选用各种不同的填充剂和柱温，进一步提高分离效果。
其次，高效液相色谱的灵敏度更高。
高效液相色谱使用液相载气柱，可以将样品溶解于流动相中进行分析，样品分子在流动相中的扩散速率较快，对气相色谱中的固定相进行背扩散，进而提高分离效果和信号强度。
最后，高效液相色谱操作相对简单。
高效液相色谱的操作流程相对简单，仪器设备也相对便宜和易得，因此可以更广泛地应用于实验室中。
此外，高效液相色谱还可以自动进行样品注射和分离，大大提高了分析效率。
2. 本实验中遇到的问题和挑战是什么？如何解决这些问题？在本实验中，可能遇到的问题和挑战主要有以下几个方面：首先，样品制备和前处理可能比较复杂。
高效液相色谱习题及参考答案之欧阳索引创编
窗体底端欧阳家百（2021.03.07）窗体顶端窗体底端高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？A、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为（）A、甲醇/水（83/17）B、甲醇/水（57/43）C、正庚烷/异丙醇（93/7）D、乙腈/水（1.5/98.5）6. 下列用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（）范围内。
A 、10～30cmB、20～50mC 、1～2m D、2～5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力（）A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行（）的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是（）A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中，常常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱分析，应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、吸收检测器12. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（）A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（）A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是（）A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（）A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用（）水A．国标规定的一级、二级去离子水B．国标规定的三级水C．不含有机物的蒸馏水D．无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外－可见分光光度计完全不同的部件是（）A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1. 液相色谱分析时，增大流动相流速有利于提高柱效能。
高效液相色谱思考题试卷及答案
高效液相色谱法的习题和参考答案思考题与练习题1.高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的？解：气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创造条件，从它的高效、高速和高灵敏度得到启发，采用5-10μm微粒固定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相的流速；设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，克服经典液相色谱的缺点，从而达到高效、快速、灵敏。
2.简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何减少谱带扩张，提高柱效？解：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。
在液相色谱中要减少谱带扩张，提高柱效，要减少填料颗粒直径，减小填料孔穴深度，提高装填的均匀性，采用低黏度溶剂作流动相，流速尽可能低，同时要尽可能采用死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。
3.色谱柱A柱长为15cm，载体粒度为5μm。
另一B柱长为30cm，载体粒度为10μm。
两柱的柱效相等吗？解：∵l=L/dp∴lA=15/0.0005=30000lB= 30/0.0010=30000A柱的折合柱长为30000，B柱的折合柱长也为30000，表明组分在两根柱内从柱入口到出口都经过30000个载体颗粒，两柱的柱效相等。
4.流动相为什么要脱气？常用的脱气方法有拿几种？解：流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处（1）气泡进入检测器，引起光吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测；（2）溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反应；（3）溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分离和分析结果带来误差。
因此，使用前必须进行脱气处理。
常用的脱气法有以下几种:（1）加热脱气法；（2）抽吸脱气法（3）吹氦脱气法；（4）超声波振荡脱气法。
5.在液相色谱中。
常用作固定相，又可用作键合相基体的物质是A. 分子筛B. 硅胶C. 氧化铝D. 活性炭解：B硅胶要形成化学键合固定相，所用的基质材料应有某种化学反应活性，在四种固体固定相中只有硅胶含有硅醇基，是能进行键合的活性官能团。
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高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？A、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为（）A、甲醇/水（83/17）B、甲醇/水（57/43）C、正庚烷/异丙醇（93/7）D、乙腈/水（1.5/98.5）6. 下列用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（）范围内。
A 、10～30cm B、20～50m C 、1～2m D、2～5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力（）A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行（）的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是（）A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中，常常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱分析，应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（）A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（）A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是（）A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（）A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用（）水A．国标规定的一级、二级去离子水B．国标规定的三级水C．不含有机物的蒸馏水D．无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外－可见分光光度计完全不同的部件是（）A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1. 液相色谱分析时，增大流动相流速有利于提高柱效能。
2. 高效液相色谱流动相过滤效果不好，可引起色谱柱堵塞。
3. 高效液相色谱分析的应用范围比气相色谱分析的大。
4. 反相键合相色谱柱长期不用时必须保证柱内充满甲醇流动相。
5. 高效液相色谱分析中，使用示差折光检测器时，可以进行梯度洗脱。
6. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是减小填料粒度。
7. 在液相色谱中，范第姆特方程中的涡流扩散项对柱效的影响可以忽略。
8. 由于高效液相色谱流动相系统的压力非常高，因此只能采取阀进样。
9. 高效液相色谱仪的色谱柱可以不用恒温箱，一般可在室温下操作。
10. 高效液相色谱中，色谱柱前面的预置柱会降低柱效。
11. 液相色谱中，化学键合固定相的分离机理是典型的液－液分配过程。
12. 高效液相色谱分析中，固定相极性大于流动相极性称为正相色谱法。
13. 高效液相色谱分析不能分析沸点高，热稳定性差，相对分子量大于400的有机物。
14. 在液相色谱法中，约70－80％的分析任务是由反相键合相色谱法来完成的。
15. 在高效液相色谱仪使用过程中，所有溶剂在使用前必须脱气。
16. 填充好的色谱柱在安装到仪器上时是没有前后方向差异的。
17. 保护柱是在安装在进样环与分析柱之间的，对分析柱起保护作用，内装有与分析柱不同固定相。
18. 检测器、泵和色谱柱是组成高效液相色谱仪的三大关键部件。
19. 紫外－可见光检测器是利用某些溶质在受紫外光激发后，能发射可见光的性质来进行检测的。
20. 应用光电二极管阵列检测器可以获得具有三维空间的立体色谱光谱图。
三、简答题1. 为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气？2. 高效液相色谱有哪几种定量方法，其中哪种是比较精确的定量方法，并简述之。
参考答案一、选择题1.D2.C3.B4.C5.A6.D7.A8.C9.C 10.B 11.A 12.D 13.B 14.B 15.D 16.B 17.A 18. A 19. D 20. E二、判断题1.×2.√3.√4.√5.×6.√7.×8.×9.√ 10.√ 11.× 12.√ 13.× 14.√ 15.√ 16.× 17.× 18.√ 19.× 20.√三、简答题1. 高效液相色谱仪所用溶剂在放入贮液罐之前必须经过0.45μm滤膜过滤，除去溶剂中的机械杂质，以防输液管道或进样阀产生阻塞现象。
所有溶剂在上机使用前必须脱气；因为色谱住是带压力操作的，检测器是在常压下工作。
若流动相中所含有的空气不除去，则流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩，流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来，造成检测器噪声增大，使基线不稳，仪器不能正常工作，这在梯度洗脱时尤其突出。
2. 高效液相色谱的定量方法与气相色谱定量方法类似，主要有归一化法、外标法和内标法。
其中内标法是比较精确的定量方法。
它是将已知量的内标物加到已知量的试样中，在进行色谱测定后，待测组分峰面积和内标物峰面积之比等于待测组分的质量与内标物质量之比，求出待测组分的质量，进而求出待测组分的含量。
思考题与练习题1.高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的？解：气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创造条件，从它的高效、高速和高灵敏度得到启发，采用5-10μm微粒固定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相的流速；设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，克服经典液相色谱的缺点，从而达到高效、快速、灵敏。
2.简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何减少谱带扩张，提高柱效？解：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。
在液相色谱中要减少谱带扩张，提高柱效，要减少填料颗粒直径，减小填料孔穴深度，提高装填的均匀性，采用低黏度溶剂作流动相，流速尽可能低，同时要尽可能采用死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。
3.色谱柱A柱长为15cm，载体粒度为5μm。
另一B柱长为30cm，载体粒度为10μm。
两柱的柱效相等吗？解：∵l=L/dp∴lA=15/0.0005=30000lB= 30/0.0010=30000A柱的折合柱长为30000，B柱的折合柱长也为30000，表明组分在两根柱内从柱入口到出口都经过30000个载体颗粒，两柱的柱效相等。
4.流动相为什么要脱气？常用的脱气方法有拿几种？解：流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处（1）气泡进入检测器，引起光吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测；（2）溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反应；（3）溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分离和分析结果带来误差。
因此，使用前必须进行脱气处理。
常用的脱气法有以下几种:（1）加热脱气法；（2）抽吸脱气法（3）吹氦脱气法；（4）超声波振荡脱气法。
5.在液相色谱中。
常用作固定相，又可用作键合相基体的物质是A. 分子筛B. 硅胶C. 氧化铝D. 活性炭解：B 硅胶要形成化学键合固定相，所用的基质材料应有某种化学反应活性，在四种固体固定相中只有硅胶含有硅醇基，是能进行键合的活性官能团。
6.在150×Φ2mm硅胶柱流动相为己烷/甲醇（150:2），紫外检测器色谱条件下分离丙烯酰胺，判断以下组分的出峰次序，为什么？A. B.解：在给定的色谱条件下，组分B先出峰，组分A后出峰。
以硅胶为固定相，己烷/甲醇（150:2）为流动相，该体系为正相色谱，样品的极性A>B，在正相色谱体系极性小的组分先出峰，极性大的组分后出峰，所以出峰次序为B先出，A后出。
7.在硅胶柱上，用甲苯为流动相，某组分的保留时间为30min，如果改用四氯化碳或乙醚为流动相，试指出选用哪中溶剂能减少该组分的保留时间？为什么？解：该体系为正向色谱体系。
在该体系中流动相的极性增大保留值减少。
流动相甲苯、四氯化碳及乙醚的溶剂强度参数分别是0.29、0.18、0.38，因此选用溶剂强度参数大于甲苯的乙醚，可缩短该化合物的保留时间。
8.为什么体积排阻色谱中任何组分的分配系数必须符合0≤K≤1？如果K>1说明什么问题?解：因为组分的分配系数为K=Cs/Cm,Cs与Cm分别为组分在固定相和流动相中的浓度,当分子直径大于孔径时,此时Cm=0,∴K=0.当分子直径小于固定相孔径时,组分向空隙内流动相扩散,达到平衡时,一半组分在空隙内,一半组分在空隙外,此时K=1.0,若分子直径介于以上两种极限情况之间,K一定介于0与1之间,可见体积排阻色谱中,任何祖父呢的分配系数为0≤K≤1,如果K>1说明此时的分离方式已不是纯粹的体积排阻色谱,其分离过程受到其他作用力(如吸附)的支配.9.为了测定邻氨基苯酚中微量杂质苯胺,现有下列固定相:硅胶,ODS键合相,流动相有:水-甲醇,异丙醚-己烷,应选用哪种固定相,流动相?为什么?解：邻氨基苯酚中微量杂质苯胺测定,为了良好分离,应让苯胺先出峰,由于苯胺的极性小于邻氨基苯酚,因此应采用正相色谱法,选用硅胶为固定相,异丙醚-己烷为流动相.10.在ODS键合相固定相,甲醇-水为流动相时试判断四种苯并二氮杂苯的出现峰顺序.为什么?1. 2.3. 4.解：色谱条件为反相键合相色谱体系,在反相色谱体系中极性大的组分k 小,首先出峰,按四种苯并二氮杂苯的结构,出峰顺序为4-3-2-1.自测题1. 在GC 和LC 中, 影响柱选择性的不同的因素是A.固定相的种类；B. 柱温；C．流动相的种类； D ．分配比。
2. 在液相色谱中, 范氏方程中的哪一项对柱效能的影响可以忽略不计?A ．涡流扩散项；B ．分子扩散项；C．固定相传质阻力项；D ．流动相中的传质阻力。