郁证的大鼠模型
抑郁症失眠大鼠模型的构建与评价
[ 基金项目] 国家科技重大专项(2017ZX09309026) ,湖南省科技厅重点项目(2018dk2014) ,湖南省自然科学基金( 2019JJ50428) ,湖南中医
9A 型,济南益延科技) 、高效液相色谱仪( 1260 型,
,主要是因为缺乏一种稳
Aglient) 、ECD 电化学检测器 ( Antec) 、 生物组织包
improvement of multi platform water environment sleep deprivation was used to duplicate the rats model of depressive
insomnia. Methods 84 Sprague Dawley rats were randomly divided into blank control group, environmental control group,
药大学校级课题(2019XJJJ016) 。
Fund by Major National Science and Technology Projects ( 2017ZX09309026 ) , Key Projects of Science and Technology Department of Hunan
[ 通信作者] 王宇红(1965—) ,女,研究员,博士研究生导师,研究方向:中药神经精神药理。 Email:wyh107@
324
中国实验动物学报 2021 年 6 月第 29 卷第 3 期 Acta Lab Anim Sci Sin,June 2021,Vol. 29, No. 3
抑郁症肝郁脾虚证模型大鼠肠道通透性变化及逍遥散的调节机制
抑郁症肝郁脾虚证模型大鼠肠道通透性变化及逍遥散的调节机制抑郁症肝郁脾虚证模型大鼠肠道通透性变化及逍遥散的调节机制引言抑郁症是一种常见的心理疾病，其病理机制复杂且多样。
近年来，越来越多的研究表明肠道与心脑相关疾病有密切的关系。
肠道与中枢神经系统之间的相互作用使肠道变得重要，而肠道通透性的改变可能是抑郁症发生和发展的重要环节。
本实验旨在探讨抑郁症肝郁脾虚证模型大鼠肠道通透性变化及逍遥散的调节机制。
方法将健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和逍遥散组，每组10只。
模型组和逍遥散组大鼠采用慢性限制性水、慢性不可逆性电击和再逸宫等方法建立抑郁症肝郁脾虚证模型。
逍遥散组大鼠在模型建立后，连续给予口服逍遥散溶液，对照组和模型组分别给予等量蒸馏水。
实验开始前和结束后，检测大鼠体重和肠道通透性指标。
结果与对照组相比，模型组大鼠体重明显下降（P < 0.05），而逍遥散组大鼠体重下降幅度明显低于模型组（P < 0.05）。
通过使用能够被血液吞噬作用清除的小分子蠕动剂测定肠道通透性，发现模型组大鼠肠道通透性明显增加，而逍遥散组大鼠肠道通透性下降明显（P < 0.05）。
讨论本实验结果表明，抑郁症肝郁脾虚证模型大鼠在体重和肠道通透性方面存在明显变化。
抑郁症模型大鼠的体重下降可能与其摄食减少、代谢率降低有关，而逍遥散可能通过调节肠道通透性，减轻模型大鼠体重下降。
此外，该研究结果还强调了肠道通透性的重要性，在抑郁症发生和发展过程中扮演着重要角色。
结论本研究发现抑郁症肝郁脾虚证模型大鼠体重下降明显且肠道通透性增加，而逍遥散能够有效地改善这些变化。
这表明逍遥散可能通过调节肠道通透性改善抑郁症的症状。
然而，本研究仅仅是初步实验，还需要进一步的临床实验来验证逍遥散对抑郁症肝郁脾虚证患者的治疗效果。
这项研究为进一步探索抑郁症的病理机制提供了新的思路。
实际上，肠道通透性研究的临床应用前景广阔，为心理健康领域提供了新的调节途径。
经前烦躁障碍(PMDD)肝气郁证大鼠模型制备与鉴定开题报告
1
山东中医药大学
Shandong University of TCM
二 技术路线
健康wistar雌性大鼠， 120-150g
阴道图片法筛选动情周 期规律的大鼠
FST动情周期依赖性验证
山东中医药大学
Shandong University of TCM
经前烦躁障碍（PMDD）肝气郁证大鼠模型制备与鉴定开题报告
山东中医药大学
Shandong University of TCM
汇报内容
▪选题背景、意义 ▪课题目的 ▪课题设计 ▪课题特色 ▪进度安排及经费预算
2
山东中医药大学
Shandong University of TCM
背景及意义
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山东中医药大学
Shandong University of TCM
山东中医药大学
Shandong University of TCM
山东中医药大学
Shandong University of TCM
研究目的
6
山东中医药大学
Shandong University of TCM
目的一 鉴定出具备PMDD肝气郁病证属性的大鼠模型 （1）确认该大鼠模型符合PMDD诊断首要标准：动情非接受 期（相似于经前期）“症状出现”；接受期（相似于经行后 卵泡期）“症状减低消失”。 （2）确认该大鼠模型“症状出现”分别模拟出肝气郁证的 “临床表现”特点。 以严格科学证据，证明该病证大鼠模型属于PMDD肝气郁病证 大鼠模型。
2
山东中医药大学
Shandong University of TCM
慢性应激肝郁证大鼠模型的复制及相关基因表达的研究
2种抑郁症大鼠模型的比较
Ｓ ｒ ｕ— ｗ ｅ 大鼠 由浙江省动物实验 中心提 ｐａ ｅ ａ ｌ ｇ ｄ ｙ 供（ 许可证号 Ｓ Ｘ Ｃ Ｋ浙 ２ ０ —０ ， ￣ ７ 饲养 ０３０ ０）１０ ２０ ， １ ８ ｇ 于标准环境内（ 室温（ ± ） ，２ 黑，２ 白， ： ２ ２ ｏ １ ２ Ｃ ｈ １ ８ ０ ｈ ０
１ 强 迫游 泳 实验（ Ｓ ） － ３ Ｆ Ｔ
的慢性刺激后， 大鼠的不动时间明显延长， 与刺激
前相比具有显著性差异（＜ ．１ 大鼠的上窜时间 Ｐ０ ） ０；
明显缩短（＜ ． ） 表现出明显的抑郁样行为． Ｊ０ １ ｐ ０，
与盐水对 照组相 比较 ， 氯米帕明处理组大鼠
的不 动 时 间明 显增 加 （＜ ．１，上窜 时 间明 显减 少 Ｊ０ ） ｐ ０
开灯 型 制 备 ． ２
罪恶感和 自杀倾向， 在动物身上不能模拟 出来． 但 是动物模型还 是可以重现抑郁患者的很多基本生
建立 ２ 种忧郁症大鼠模型：１ （ 据文献【 确立慢 ） １ 】 性刺激： 每天随机给予大鼠电击足底 、 禁食 、冰水
收稿 日期 ：２０ ．００ ． ０ ８１—３ 宁波 大学 学报 （ 工 版 ）网址 ：ｔ ：３ｂｎ ｕ ｄ ． 理 ｉｐ／ ｆｔ ／ ｘ ． ． ｕｃ ｂｅ ｎ 基金 项 目：浙江 省实 验动 物科 技计 划 （ ０ ７８ ．７ ２０ Ｆ ０） ）． １ 第一 作者 ：尹维 刚 （１５ ） ６一 ，男，黑龙 江五 常 人， 授 ，主要研 究 方向 ：神经 生物 学 ． — ｉ ｙｎ ｉａｇ ｂ ． ｕ ｎ ９ 教 Ｅｍａｌ ｉ ｇｎ ＠ｎ ｕ ｄ． ： ｗｅ ｅ ｃ
理学和行为学的反应． 本实验比较 ２ 种抑郁症大鼠
大鼠抑郁模型
一、行为绝望抑郁模型大鼠强迫游泳实验复制方法：雄性大鼠，体重为160~180g。
将大鼠放入水深15cm的玻璃圆缸内（高40cm，直径18cm），水温25℃，使其游泳5min，测定动物在5min内累计保持漂浮不懂状态的时间。
动物不动行为的评判标准为大鼠微卷躯体，但保持垂直姿势，鼻孔露出水面。
给药时间可根据需要延长，于末次给药后1h左右进行测定。
模型特点与比较医学：大鼠强迫游泳实验的可信度较高，除了一些5—HT再摄取抑制剂之外，多数抗抑郁药在该模型中均能减少动物停止游泳不动的时间，且动物的实验结果与临床上药效显著相关。
该实验中水的深度是关键，应使动物后爪刚可触及水底，但又不能支撑身体的深度为宜。
二、习得性抑郁模型复制方法：雄性大鼠，体重为180~200g。
1、实验装置：为大鼠穿梭箱，梭箱包括2个相同大小的室，尺寸为30cm×20cm×30m，两室中间底部有一7cm×7cm的通路，可以人为开闭。
箱底均为不锈钢栅条，条间距离为1cm。
两室的栅条可分别通电，当其中一室与电刺激接通时另一室则为安全室，实验时仅一个室通电。
自动记录装置（或秒表代替）。
2、无助的“诱发”：将动物分组，实验组的动物于第1日进行不可逃避的电休克刺激。
作法是关闭穿梭箱的中间通路，将大鼠放入一侧箱内，通过箱底部金属栅条通电使大鼠足部接受0.8mA×15s的电刺激，1次/min，共60次（即15s的电刺激+45s 的间歇期），总共持续时间1h。
对照组大鼠只放入箱内而不进行电刺激，时间相同。
3、条件回避实验：第2日动物开始给药，采取亚长期（3~7d）给药方法。
最后一次给药后24h，进行条件回避实验。
将动物放入穿梭箱后适应5s，然后进行试验，条件刺激为铃声（或光信号），非条件刺激为足底电击0.8mA。
在铃声响后（或光信号出现后）3s开始刺激，动物逃到安全室后停止铃声（或光信号）和电刺激，如动物未能逃避且刺激达30s时停止。
慢性应激性抑郁症动物模型的建立方法与注意事项
慢性应激性抑郁症动物模型的建立方法与注意事项【造模机制】采用长期不可预见性:中等强度的电击,刺夺食水、冷水浸袍,反转昼夜节律等应激刺激,造成孤养动物处于抑郁状态,复制抑郁症模型。
【造模方法】1、动物及分组选用Wistar 成年雄性健康大鼠,体重180～220g。
利用旷场实验进行行为学评分,旷场实验水平运动和垂直运动总得分低于30 分和高于 120 分的动物予以剔除,选择得分相近的大鼠 30 只,随机分为 3 组。
1 组:正常对照组 10 只,不加任何处理，每疮 5 只喂养;1组:慢度轻度不可预见性应激抑郁模型组 10 只,单笼饲养,第8日起,按程序给予应激刺激,每日腹腔注射生理盐水1.0ml:Ⅲ组:抑郁模型组十舒必利治疗组10 只,单笼饲养,第 8 日起,按程序给予应激刺激,将舒必利溶于 1. 0ml 生理盐水,按 32.5mg/kg每日腹腔一次性注射。
2、抑郁大鼠模型的建立按照 Katz 的方法略加改进,将明暗颠倒 24 小时,4℃冰水游泳、停水 24 小时、停食 24 小时、夹尾 1 分钟、30V 电压电击足底 5 秒、水平震荡5 分钟(160Hz)、40℃环境5 分钟,共九种刺激随机安排到27 日内,每日一种,每种刺激出现3 次,同种刺激不能连续出现,使动物不能预料刺激的发生。
对照组不予任何刺激,上述各组处理均27 天,其间进行行为学实验及糖水消耗试验,在第 28 天,即末次处理 24 小时后,断头处死,对治疗组、模型组和对照组进行各项指标的比较。
3、行为学测定敞箱实验(open-field test):敞箱装置由不透明材料制成.底面为75cm×75cm 的正文形并被等分为 25 个等边方格,周围有高 40cm 的墙壁。
7:30～12:00之间在安静的房间内进行此项实验观察。
将大鼠置于中心方格内,观察大鼠在 5 分钟内穿越格数(四爪均进人的方格方可计数,为水平运动得分),后肢直立次数(两前爪腾空或攀附墙壁,为垂直运动得分),彻底清洁敞箱后再进行下 1 只大鼠的观察。
大鼠抑郁症模型的建立与评价
组别
n
空白组
20
模型组
20
注：与空白组相比，* P < 0. 05
第0 周 221. 5 ± 13. 7 224. 2 ± 10. 5
第1 周 226. 2 ± 14. 5 217. 2 ± 10. 2
第2 周 231. 4 ± 17. 4 209. 3 ± 12. 1*
第3 周 241. 5 ± 18. 4 200. 3 ± 10. 3*
表 2 两组大鼠 Open-field 法行为测定垂直运动结果比较（ 珔x ± s） （ 单位：次 /3min）
组别
n
空白组
20
模型组
20
第0 周 12. 5 ± 2. 3 12. 6 ± 2. 3
注：与空白组相比，* P < 0. 05 ，# P < 0. 01 .
第1 周 14. 2 ± 3. 3 10. 4 ± 1. 5*
表 1 两组大鼠 Open-field 法行为测定水平运动比较（ 珔x ± s） （ 单位：次 /3min）
组别
n
第0 周
空白组
20
70. 3 ± 11. 6
模型组
20
71. 3 ± 12. 7
注：与空白组相比，* P < 0. 05 ，# P < 0. 01.
第1 周 72. 2 ± 12. 3 63. 2 ± 10. 5*
1 材料和方法
1. 1 实验动物分组 健康成年 SD 大鼠 40 只，重 量 190g ± 20g，由 第
二军医大学实验动物中 心［SCXK （ 沪 ） 2007 － 0003 ］ 提供，置于 SPF 系统内［SYXK（ 沪） 2007 － 0003 ］，适 应性喂养 1 w。大鼠随机 分 为 空 白 对 照 组、模 型 组。 空白对照组 20 只，5 只 / 笼，雌 雄 各 半。 不 予 任 何 刺 激，自由 摄 食 和 饮 水，正 常 饲 养。 模 型 组 20 只，5 只 / 笼，雌雄各半。 1. 2 造模
肝郁证失眠大鼠模型的建立与评价_朱洁
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朱洁等 肝郁证失 眠大鼠模型的建立与评价
2011年第 8期
浓缩 ,分装灭菌后 , 4℃冰箱冷藏备用。 临用前置于 20℃环境下预热。
[摘 要 ] 目的 探索肝郁证失眠病证结合大鼠模型的建 立和评价方法。 方法 24只 SD大鼠随机分成 正常对照组、模型组 和酸枣仁汤组 ,每组 8只 ,采 用慢性夹尾刺激和 腹腔注射对氯苯丙 氨酸 ( PCP A)复 合因子造模法建立 肝郁失眠大鼠模型 ,酸枣 仁汤组大鼠于造模第 7d开始给予酸枣仁 汤 7. 5g /( kg· d)灌胃 ,对各组大鼠进行宏观体征观察、行为学评价、血液流变学分析、 病理学检查和下丘脑、海马组织、 5- 羟色酶 ( 5-HT )和去甲肾上腺素 ( N E)检测。 结果 模型组大鼠 睡眠节律明显改变 ,体重 增长缓慢 ,学习记忆能力 下降 ,血流 变高、中、低切全血黏度 均显著升 高 ,下丘 脑、海 马组织的 5-HT 及 N E含量存 在紊乱 ( P < 0. 05或 P < 0. 01) ,而酸枣仁汤组对上述指标均有改善 ( P < 0. 05或 P < 0. 01)。 结论 采用慢性夹尾刺激和腹腔注 射 PCP A复 合因子造模法建立的肝郁失眠证大鼠模 型具有可行性。 [关键词 ] 失眠 ;肝郁证 ;病证结合动物模型
朱 洁1* 申国明 1 汪远金 1 胡 闻 2
( 1. 安徽中医学院中西医结合临床学院 ,安徽省 合肥市梅山路 103号 , 230038; 2. 安徽医科大学附属省立医院病理科 )
基金项目: 安徽高校省级自然科学研究计划 项目 ( K J2008B074) * 通讯作者: zhujie531@ 163. com , ( 0551) 5169207
不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化
应激前
80. 34 ± 9. 53 77. 85 ± 12. 341） 79. 61 ± 10. 12 77. 17 ± 13. 651） 78. 63 ± 11. 96 7± 7. 98 60. 65 ± 11. 141） 86. 77 ± 10. 98 58. 92 ± 13. 581） 2） 84. 94 ± 14. 03 49. 81 ± 9. 211） 3）
6. 68 ± 1. 50 19. 21 ± 3. 071）
AChE
6. 56 ± 1. 13 9. 21 ± 2. 001） 7. 67 ± 1. 45 14. 04 ± 3. 671） 2） 6. 13 ± 0. 50 19. 80 ± 2. 031） 3）
图 1 各组大鼠海马 ChAT 蛋白表达（ 免疫组化，× 400）
ChAT（ U / g）
364. 87 ± 10. 47 383. 58 ± 7. 221） 360. 75 ± 10. 39 410. 74 ± 9. 841） 325. 97 ± 10. 40 425. 48 ± 13. 251）
AChE（ U / mgprot）
1. 59 ± 0. 45 2. 62 ± 0. 131） 1. 34 ± 0. 21 3. 37 ± 0. 951） 1） 1. 06 ± 0. 32 4. 32 ± 0. 651） 3）
19. 67 ± 5. 45 20. 04 ± 4. 94 16. 93 ± 2. 33 18. 47 ± 2. 90 17. 57 ± 4. 86 16. 35 ± 2. 67
79. 23 ± 9. 85 17. 60 ± 5. 01 34. 08 ± 5. 261） 13. 78 ± 3. 771） 74. 07 ± 7. 21 9. 47 ± 1. 73 18. 93 ± 5. 251） 2） 3. 42 ± 1. 001） 2） 70. 81 ± 5. 67 8. 50 ± 2. 65 6. 69 ± 1. 241） 3） 1. 47 ± 0. 211） 3）
围绝经期综合征肝郁大鼠模型的建立及评价
围绝经期综合征肝郁大鼠模型的建立及评价目的：用去势SD大鼠造围绝经综合征肝郁模型并从其外观特征及行为学水平评价建模的效果。
方法：24只雌性SD大鼠被随机等分为假手术组、去势空白组和去势模型组，每组各8只。
在去卵巢制备围绝经期综合征模型的基础上，加以21 d慢性束缚应激结合孤养法建立肝郁模型。
应激结束后，观察各组大鼠外观特征，检测各组大鼠体质量、1%糖水消耗率及旷场行为的改变。
结果：与假手术组比较，大鼠去势后体质量显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05）；应激造模开始后，去势模型组体质量增长缓慢甚至下降，大鼠毛发干枯、活动减少、大便次数增多、便溏；与假手术组相比，去势空白组和去势模型组在旷场实验中的水平得分和垂直得分均明显降低，差异均有统计学意义（P＜0.01）；去势模型组较假手术组和去势空白组的糖水偏爱率显著下降，差异均有统计学意义（P＜0.01）。
结论：雌性SD大鼠去势后也会产生部分围绝经期肝郁样症状。
在慢性束缚应激结合孤养法的作用下，大鼠的体质量、行为活动进一步减少，因此该方法可以有效复制围绝经期综合征肝郁大鼠模型。
标签：围绝经期综合征；肝郁；去势；慢性束缚应激；行为学围绝经期综合征指妇女绝经前后由于性激素波动或减少所致的一系列躯体及精神心理症状，其中雌激素水平下降是引起该病的主要原因[1-2]。
随着生活水平提高，工作压力加大，人口老龄化加剧，围绝经期综合征的发病率逐年增高。
肝气郁结证是其主要中医证型，中医药治疗已经取得较好的疗效，而且副作用小[3-4]。
目前比较认可的围绝经期综合征肝郁模型是运用自然衰老的大鼠进行造模，然而由于其饲养周期长，成本高，来源非常稀少，因此相关的研究报道相对较少，中医药对其作用机制的了解受到很大的局限[5-6]。
而去势大鼠也是公认的围绝经期综合征模型，其阴道脱落细胞涂片及血清性激素水平均和围绝经期发生的改变相似[7-8]。
因此本研究拟用去势大鼠模型，联合慢性束缚应激与孤养法进行造模，从外观特征及行为学水平来探讨该模型的有效性，为进一步探讨中医药治疗围绝经期综合征肝郁的科学内涵提供基础。
抑郁症动物模型是什么？
抑郁症动物模型是什么？抑郁症是一个多种因素综合作用的疾病，症状通常会复发且趋于慢性，甚至妨碍个人日常生活。
随着社会竞争日益激烈，生活和工作压力不断增加，抑郁症已成为现代社会极为常见的心理疾病，据联合国世界卫生组织预测，到2020年抑郁症将成为导致人类死亡和残疾的第2大疾病.行为绝望模型：利用动物不能逃逸出恶劣环境，以致行为绝望而设计出的一种模型。
其理论依据是人类抑郁症中慢性、低水平的应激源可导致抑郁症的发生，并加速其发展.大小鼠强迫游泳实验：又称Porsolt’s test，此模型是最广泛用来评估抗抑郁药的行为学模型，强迫游泳实验操作简单，对抗抑郁药敏感，能够检出广谱的抗抑郁药，缺点是仅对急性治疗的药物敏感，对5-羟色胺重摄取抑制剂类的药有效性不确定，有导致动物低体温的风险，现多用于抗抑郁药的初筛。
小鼠悬尾实验：是与强迫游泳实验相似的经典实验，悬尾小鼠为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一定时间后，出现间断性不动，显示“绝望”状态，此模型与强迫游泳实验的共同点是操作简单，对抗抑郁药敏感，测量其不动状态的适应性行为是一致的。
不同点：抗抑郁药作用的底物不同，两种模型中动物脑内多种神经递质的变化及受体功能改变不一致。
小鼠悬尾实验能够反映应激性低体温而强迫游泳实验不能，而小鼠悬尾实验仅适用于小鼠应激，而不适用于大鼠，目前也多用于抗抑郁药的初筛。
获得性无助模型：获得性无助是一种更接近于疾病病因学和遗传学的动物模型。
值得注意的是，大部分小鼠获得性无助模型只是短期的，在终止刺激后几天内就恢复正常，但因为某些未知原因，仅仅有部分小鼠仍然保持无助的症状，这反映了潜在的基因与环境交互作用。
获得性无助模型目前不仅用于抗抑郁药的筛选，且已日益用于此类药物的作用机制及抑郁症的神经生物学的研究，与强迫游泳实验、悬尾实验相似的是，获得性无助模型不能检测出慢性抗抑郁药的药效。
慢性轻度应激模型：慢性轻度应激是使动物长时间地接受温和应激刺激，模拟人们在日常生活中所遇到的“困难”。
抑郁症大鼠海马区树突形态变化研究【论文】
抑郁症大鼠海马区树突形态变化研究摘要：目的：抑郁症大鼠海马 3 Ammon 角区（cornu ammonis 3 CA3）神经元树突分支、长度及树突棘密度动态变化观察。
方法：利用敞箱实验(open- field test)作行为学评分，评分相近大鼠随机分为正常对照组（C 组）和抑郁组（D 组），每组60 只。
对照组正常饲养，抑郁组采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)法给予处理，分别在 7d、 14d、 21d、 28d 随机挑选 10只用敞箱实验做行为学评分并于当日处死做高尔基染色分析树突分支、长度及树突棘密度变化。
结果：正常对照组大鼠各时间点敞箱实验评分无明显差别(P<0.05)，树突分支、长度及树突棘密度无明显变化(P<0.05)；从 14d 开始，与对照组相比抑郁组大鼠敞箱实验评分减小(P<0.05)，树突分支、长度及树突棘密度明显减少(P<0.05)。
结论：随着抑郁程度的加重，大鼠海马 CA3 区神经元树突分支、长度及树突棘密度逐渐减少。
关键词：抑郁症；海马；树突形态中图分类号： R561 文献标识码： A 文章编号：1671-5837(2018)05-0217-03Dendritic morphology of neurons in hippocampal of depression ratsSUN Yan,LI Huan-li,et al.(The stroke cener of ZhouKou centrehospital,ZhouKou City,Henan Province,China )Abstract: Objective To discuss the dendritic morphology changes of pyramidal neurons in hippocampal cornu ammonis 3（CA3） ofdepressed rats. Methods Rats were randomly divided into normal control group and depression group according to open-field test and60 rats in each group.Depression group was dealt with chronic unpredictable mild stress (CUMS) while control group breedingnormally. 10 rats were selected randomly from each group after 7d, 14d and 21d and 28d for open-field test and Golgi staining.ResultsCompared with control group,open-field test scores of depression group was significantly reduced((P <0.05))and dendritic branching,length and dendritic spine density was significantly decreased (P <0.05) at each observation point after 14d.Conclusion As thedevelopment of depression,dendritic branches,length and density of dendritic spines gradually reduced in hippocampal CA3 of rats.Keywords: Depression hippocampus dendritic morphology抑郁症是以行为出现异常表现，心境低落为主要症状的一种心身疾病。
抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化
ｔ ｒ ｆｈ ｐ ｏ ａ ｐ ｓ ｉ ｅ ｒ ｓ ｉ ｎ ｍ ｏ ｅ ａ ｓ Ｍ ｅ ｈ ｄ Ｔｗｅ ｔ ｅ ａ ｅ Ｓ ｒ ｔ ｒ ａ ｄ ｍ ｌ ｕ ｅ ｏ ｉ ｐ ｃ ｍ ｕ ｎ ｄ ｐ ｅ ｓｏ ｄ ｌｒ ｔ ． ｔｏ ｓ ｎ ｙ ｆ ｍ ｌ Ｄ ａ ｓ ｗｅ ｅ ｒ ｎ ｏ ｙ
ｄｖｄ ｄ ｉ ｔ ＷＯ ｇ ｏ ｐ １ ｎ ｅ ｃ ）：ｎ ｒ ｌｇ ｏ ｐ ａ ｄ ｍｏ ｅ ｒ ｕ ． Ｔｈ ｏ ｍｅ ｓ ｇｖ ｎ ｎ ｉｉｅ ｎ ｏｔ ｒ ｕ ｓ（ ｉ ａ ｈ ０ ｏ ｍａ ｒ ｕ ｎ ｄ ｌ ｏ ｐ ｇ ｅ ｆ ｒ ｒｗａ ｉｅ ｏ
组和模型组 ， 每组 １ Ｏ只 。正 常组 不 给 予 任 何 处 理 ， 型 组 给 予 孤 养 加 ２ 模 １ｄ慢 性 不 可 预 见 性 的 温 和 应 激 （ ＵＭＳ 。 Ｃ ） 采 用 ＯｐｎＦｅｄ 糖 水 消 耗 量 及 Ｍｏｒ 水 迷 宫 测 试 大 鼠的 行 为 学 表 现 ； ｅ－ ｉｌ、 ｒｉ ｓ 光镜 以及 透射 电镜 观察 大 鼠 海 马 组 织 结 构 。
习记 忆 力 下 降 可能 与应 激 造 成 海 马形 态 结 构 改 变 有 关 。
关 键 词 ：慢 性不 可预见性 的温 和应激 ；海马 ； 透射 电镜 ；动物 ， 实验 ；大鼠
中 图分 类号 ： 一３２ Ｒ ３
文 献标识 码 ： Ａ
文章 编号 ： ｏｏ ２４２０）１ ０４ ０ １ｏ一２９ （０９０ —００－ ５
Ｃｈ ｎ ｅ ｆＬｅ ｒ ｉ ｇ ａ ｄ Ｍ ｅ ｏ ｙ Ａｂ ｌｔｅ ｎ ａ ｇ ｓｏ ａ ｎ ｎ ｎ ｍ ｒ ｉｉｉｓａ ｄ
大鼠抑郁模型
一、行为绝望抑郁模型大鼠强迫游泳实验复制方法：雄性大鼠，体重为160~180g。
将大鼠放入水深15cm的玻璃圆缸内（高40cm，直径18cm），水温25℃，使其游泳5min，测定动物在5m in内累计保持漂浮不懂状态的时间。
动物不动行为的评判标准为大鼠微卷躯体，但保持垂直姿势，鼻孔露出水面。
给药时间可根据需要延长，于末次给药后1h左右进行测定。
模型特点与比较医学：大鼠强迫游泳实验的可信度较高，除了一些5—HT再摄取抑制剂之外，多数抗抑郁药在该模型中均能减少动物停止游泳不动的时间，且动物的实验结果与临床上药效显著相关。
该实验中水的深度是关键，应使动物后爪刚可触及水底，但又不能支撑身体的深度为宜。
二、习得性抑郁模型复制方法：雄性大鼠，体重为180~200g。
1、实验装置：为大鼠穿梭箱，梭箱包括2个相同大小的室，尺寸为30cm×20cm×30m，两室中间底部有一7cm×7cm的通路，可以人为开闭。
箱底均为不锈钢栅条，条间距离为1cm。
两室的栅条可分别通电，当其中一室与电刺激接通时另一室则为安全室，实验时仅一个室通电。
自动记录装置（或秒表代替）。
2、无助的“诱发”：将动物分组，实验组的动物于第1日进行不可逃避的电休克刺激。
作法是关闭穿梭箱的中间通路，将大鼠放入一侧箱内，通过箱底部金属栅条通电使大鼠足部接受0.8m A×15s的电刺激，1次/min，共60次（即15s的电刺激+45s的间歇期），总共持续时间1h。
对照组大鼠只放入箱内而不进行电刺激，时间相同。
3、条件回避实验：第2日动物开始给药，采取亚长期（3~7d）给药方法。
最后一次给药后24h，进行条件回避实验。
将动物放入穿梭箱后适应5s，然后进行试验，条件刺激为铃声（或光信号），非条件刺激为足底电击0.8mA。
在铃声响后（或光信号出现后）3s 开始刺激，动物逃到安全室后停止铃声（或光信号）和电刺激，如动物未能逃避且刺激达30s时停止。
肝郁证大鼠模型血清代谢组学研究
肝郁证大鼠模型血清代谢组学研究一、本文概述随着现代生物医学的快速发展，代谢组学作为一种系统生物学的研究方法，已经在疾病诊断、药物研发和生物标志物发现等领域展现出巨大的潜力。
肝郁证，作为中医理论中的一个重要证候，其病理生理机制复杂，涉及多个系统和代谢途径的改变。
因此，本研究旨在通过代谢组学手段，深入探究肝郁证大鼠模型的血清代谢特征，以期为该证候的生物学本质和临床诊断提供新的思路和方法。
本研究首先建立了肝郁证大鼠模型，并通过高效液相色谱-质谱联用等代谢组学技术，对模型组和正常组大鼠的血清样本进行了全面的代谢物检测。
通过对检测数据的统计分析，我们筛选出了与肝郁证密切相关的差异代谢物，并进一步探讨了这些代谢物在肝郁证发生发展过程中的作用及其相互关系。
我们还对肝郁证大鼠模型的血清代谢网络进行了构建和分析，以揭示肝郁证状态下机体代谢的整体变化和调控机制。
本研究的结果不仅有助于深化对肝郁证生物学本质的理解，还可为肝郁证的早期诊断、病情评估和治疗策略的制定提供科学依据。
本研究也为代谢组学在中医证候研究中的应用探索了新的途径和方法。
二、材料与方法选用健康雄性SD大鼠，体重200~250g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，动物生产许可证号：SCK（京）2019-0010。
动物饲养于室温22~25℃，相对湿度50~60%，12h光照/黑暗循环的环境中，自由摄食和饮水。
适应性饲养1周后，将大鼠随机分为正常对照组和肝郁证模型组，每组10只。
肝郁证模型组大鼠采用慢性束缚应激法制备肝郁证模型。
将大鼠四肢捆绑于自制束缚架上，束缚时间为每天上午9:00~11:00，连续束缚21天。
正常对照组大鼠不进行束缚处理，自由活动。
实验结束后，禁食不禁水12h，采用腹主动脉采血法收集大鼠血液，静置30min后，3000r/min离心10min，分离血清，存于-80℃冰箱中待测。
郁证的大鼠模型
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关 键 词 ： 证 ； 激 ； 鼠模 型 郁 应 大 中图分类号 ：２ ３２ Ｒ — ３ 文 献标 志码 ： Ｂ 文 章 编 号 ：０ ４ ５ ２ （０ ０ ０ —０ ０ ０ １０ — ６ ７ ２ １ ）３ ０ ３ － ３
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抑郁症大鼠模型的建立与评价
抑郁症大鼠模型的建立与评价发表时间：2012-04-13T09:52:27.670Z 来源：《中外健康文摘》2012年第6期供稿作者：康志龙肖志成周新富[导读] 抑郁症是一种常见的影响人们日常生活和健康的精神疾病。
康志龙肖志成周新富（昆明医学院分子临床医学研究院云南昆明 650500）【中图分类号】R749【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）6-0048-02 【摘要】抑郁症是一种常见的影响人们日常生活和健康的精神疾病，主要表现有持续情绪低落，兴趣减低，悲观，思维迟缓，缺乏主动性，饮食、睡眠质量差，全身多处不适感，更有甚者可出现自杀念头和行为，重症抑郁有近15%的自杀率[1,2,3]。
世界卫生组织研究表明，抑郁症已经成为中国疾病负担的第二大疾病，到2020年，抑郁症可能成为仅次于心血管疾病的全球第二大疾患[4]。
动物模型能帮助人们更好的认识抑郁症，对抑郁症的治疗起到了非常良好的促进作用。
本文对常用的一些抑郁症造模方法及其评价做一阐述。
【关键词】抑郁症抑郁模型脑源性神经营养因子 BDNF 抑郁症是一类严重危害人们身心健康的精神障碍疾病。
它的发病率很高，几乎每7个成年人中就有1个抑郁症患者，目前全球有3.4亿精神抑郁症患者，相当于精神分裂患者的7至8倍，并且这一数字仍在上升，抑郁症也成为医学工作者研究的热点。
1 动物模型的建立动物抑郁模型对于抑郁症的治疗和抗抑郁药的开发有重要的作用，主要的抑郁模型有以下几种： 1.1药物诱发抑郁模型利血平拮抗,5-羟色氨酸诱导的甩头行为,小鼠育亨宾诱导的致死试验,大鼠色胺惊厥增强实验。
这些药物诱导模型可以用于早期评价抗抑郁药物作用或用来初筛未知化合物的药理作用特性[5]。
1.2应激模型1.2.1 绝望模型即大、小鼠强迫性游泳(forced swimm ing test)模型，该模型是将大鼠(或小鼠) 放入盛水的环形玻璃缸内强迫游泳。
动物最初在水中拼命游动、挣扎、试图逃脱,随之感到逃脱是不可能的,便不再挣扎和游动,仅将头部露出水面,肢体漂浮,维持一种不动状态,将此状态称为“行为绝望”。
抑郁模型大鼠海马内环境的分析
抑郁模型大鼠海马内环境的分析【摘要】目的研究海马内环境稳态在抑郁症中的作用。
方法20只雌性Wistar大鼠分为对照组、模型组。
ELISA法检测血清皮质醇、雌二醇，光镜和电镜观察海马CA3区形态学变化，免疫组化法检测海马脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达。
结果与对照组比较，模型组皮质醇水平显著升高，雌二醇水平明显下降，海马CA3区神经元损伤严重，脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达明显降低。
结论抑郁状态下，海马内环境稳态被破坏。
【关键词】抑郁症海马内环境稳态脑源性神经生长因子血管内皮生长因子【Abstract】 Objective: To study the action of hippocampal internal enviroment in deprssion. Methods: 20 femal wistar rats were pided into the control， model group. Serum cortisol and estradiol were measured with ELISA. Hippocampal CA3 morphology were observed by light and electron miroscope. BDNF and VEGF expressions were detected by immunohistochemistry. Results: compared with those in the control， in the model group， the serum cortisol level increased obviously， serum estradiol level decreased significantly， and the CA3 neurons had severious structure damage， and the expressions of BDNF and VEGF decreased markedly. Conclusion: The homeostasis of hippocampal internal enviroment is disrupted in depression.【Key words】 depression hippocampal internal enviroment homeostasis brain-derived neurotrophtic factor vascular endothelial growth factor 海马内环境指海马神经元的细胞外液，其理化性质和各种成分应保持相对稳定的状态，即稳态。
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关键词：郁证；应激；大鼠模型中图分类号：R2-332文献标志码：B文章编号：1004-5627（2010）03-0030－03抑郁症是一种常见的情感障碍性精神疾病，是一种以显著而持久的心境低落为主要特征的综合征，其主要表现有情绪低落，言语减少，精神、运动迟缓，常自责自罪，甚至企图自杀等，并常伴有睡眠异常、食欲减退、体重减轻、性欲减退等躯体症状，是目前世界上最易致残的疾病之一［1］。
它与中医郁证有若干相通之处，属于中医“郁证”范畴，多因情志所伤或素体偏弱，致气机失和，脏腑气血阴阳失调所致［2］。
研究表明，抑郁症的发生与应激性事件有着密切关系，慢性应激可以诱导抑郁。
我们采用慢性轻度应激和孤养2种经典造模结合的方式，利用长期不可预见性的轻度应激，造成动物的抑郁状态，类似中医的“郁证”，并对此模型的建立和有效性作出评价。
1材料和方法1.1动物分组健康SD 成年大鼠，体重180～200g ，上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，批号：SCXK （沪）2007、0005。
用敞箱实验进行行为学评分，选择得分相近的大鼠30只，随机分为3组：①生理盐水组（正常对照组）10只，大鼠笼每笼喂养5只：②慢性轻度不可预见性应激抑郁组（模型组）10只，每笼孤养1只：③造模加百忧解组（阳性对照组）10只，每笼孤养1只。
慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型造模过程持续24d 。
1.2抑郁大鼠模型的建立按照Katz ［3］248的方法略加改进，将明暗颠倒24h 、夹尾1min 、禁食24h 、禁水24h 、160Hz 摇晃5min 、30V 电压电击足底5s 、40℃环境5min 、冰水游泳8种刺激，随机安排到24d 内，每日1种刺激，每种刺激出现3次，同种刺激不能连续出现，使动物不能预料刺激的发生。
1.3行为测定按Open-Field 法［3］248测定行为。
敞箱装置由不透明材料制成，底面为76cm ×76cm 的正方形并被等分为25个等边方格，周围有高40cm 的墙壁。
在安静的房间内进行此项试验观察，每日早晨8∶00―12∶00进行此项试验观察。
将大鼠置于中心方格内，观察大鼠在5min 内穿越格数（四爪均进入的方格方可计数，为水平运动得分），后肢直立次数（两前爪腾空或攀附墙壁）为垂直运动得分，彻底清洁敞箱后再进行下1只大鼠的观察。
每周进行1次行为评分。
1.4体液消耗实验按Willner P 等的实验方法［4］，试验前，在隔离噪音的安静房间内，训练动物适应含糖饮水，每笼同时放置2个水瓶，第1个24h ，2瓶均装有1%蔗糖水，随后的24h ，1个瓶装1%蔗糖水，1个瓶装纯净水。
24h 的禁食禁水后，进行大鼠的基础糖水／纯水消耗试验，同时给予每只大鼠事先定量好的2瓶水：1瓶为1%蔗糖水，1瓶为纯净水，计算大鼠1h 饮用1%蔗糖溶液的量。
1.5统计学处理数据用x ±s 表示，用SPSS 11.5统计软件处理数据，采用t 检验，P ＜0.05为有显著性差异。
2结果实验结果见表1～表4。
3讨论3.1从中西医不同角度看，抑郁症的发生是受到外界的不可知的慢性刺激后引发的。
为了便于实验研究抗抑郁药的作用，我们需要根据其发病原因在动物身上模拟抑郁症的症状。
目前本病的动物模型国内外报道较多，一般可分为应激模型、孤养或分养模型、药理学抑郁模型、脑损伤模型、操作应激模型、遗传选择性抑郁模型等［5］，其中慢性轻度不可预见性的应激（CUMS ）抑郁模型主要模拟了人类抑郁的核心症状即快感缺乏，同时模拟了其它重症抑郁障碍的症状表现，如运动能力及社会交往能力下降、探索行为能力下降、侵犯攻击郁证的大鼠模型王玉露1，林于雄2，陈燕1（1.福建中医药大学药学院，福建福州350108；2.福建中医药大学学报编辑部，福建福州350003）收稿日期：2010-03-13作者简介：王玉露（1975—），女，讲师，医学硕士，主要从事药理学的研究。
Journal of Fujian University of TCM June 2010，20（3）福建中医学院学报2010年6月第20卷第3期30表1慢性应激对大鼠体重增加量和摄食量的影响组别对照组模型组10d 111.42±6.1642.00±5.181）20d 206.79±17.21130.12±17.581）10d 11.26±0.3611.97±0.8820d 10.73±0.436.54±0.421）体重增加／g摄食量／%注：与对照组比较，1）P ＜0.01。
表2慢性应激对2组大鼠敞箱实验指标的影响组别对照组模型组时间／d 应激前71421应激前71421水平运动／得分60.20±11.6664.60±10.2966.10±10.0460.10±10.8257.30±9.7861.10±12.2456.20±6.801）12.70±5.122）垂直运动／得分23.90±4.6825.40±5.2526.90±10.0123.50±9.7325.90±5.5324.60±7.9311.40±4.402）7.00±3.942）注：与对照组比较，1）P ＜0.05，2）P ＜0.01。
表3慢性应激对大鼠体液消耗的影响组别对照组模型组时间／d 应激前71421应激前71421纯水消耗／mL4.05±0.664.12±0.634.50±0.974.12±1.034.37±0.734.37±0.697.61±1.591）8.66±1.621）1%糖水消耗百分比／%72.86±4.0271.36±3.9869.91±7.1974.45±5.7972.56±4.4369.18±4.4850.41±7.851）45.67±7.021）注：与对照组比较，1）P ＜0.01。
体液消耗／mL14.98±1.7214.46±1.6515.17±1.6915.90±1.8316.01±2.1614.21±1.1116.14±1.9715.27±1.77糖水消耗／mL10.93±1.4910.34±1.5010.66±2.0312.02±1.8511.64±1.919.84±1.067.68±1.231）7.24±1.281）表4抗抑郁药对大鼠的影响组别对照组模型组治疗组糖水消耗量／mL12.02±1.857.24±1.281）11.55±2.92总体液消耗量／mL15.90±1.8315.27±1.7716.81±1.73注：与对照组比较，1）P ＜0.01。
水平运动／得分60.10±10.8212.70±5.121）62.20±11.35垂直运动／得分23.50±9.737.00±3.941）24.40±8.86体重增加量／g130.12±17.5840.00±5.191）128.70±17.23能力缺陷、性行为能力下降等，而且其模拟的刺激不用药物也没有脑损伤，更符合中医“郁证”的发病机理。
多数研究表明，经过2～3周的CUMS ，动物糖水消耗量明显下降，表明对奖赏的反应性下降。
CUMS 抑郁模型具有高度的有效性，并可持续几个月，基本符合抑郁模型的要求，是目前国外文献中广泛使用的模型［6-8］。
在恶劣心境障碍的发病中，慢性地低水平的应激源是促进疾病发生、加速疾病发展的重要原因。
根据恶劣心境障碍的临床特点，我们采用长期慢性应激和分养2种模型，用分养和中等强度不可预见性的刺激，造成了分养动物持久抑郁状态，复制了大鼠恶劣心境障碍模型。
3.2在造模过程中，模型大鼠处于明显的抑郁状态，可见精神萎糜，毛色晦滞，各种活动减少。
在造模14d 后水平活动和垂直活动次数减少，糖水消耗量和糖水偏爱百分比明显降低，而总耗水量无显著性差异。
水平运动减少反映动物的活动度下降，垂直运动减少反映动物对新鲜环境的好奇度降低；糖水消耗量和糖水消耗百分比减少反映了动物对幸福事件的反应能力下降。
在造模10d 后动物的体重增加量显著降低，20d 摄食量显著下第3期王玉露等：郁证的大鼠模型31降，这与抑郁症患者食欲下降、消瘦相类似。
由此可见，大鼠抑郁模型表现出的抑郁状态、好奇心下降、活动能力下降、兴趣丧失、食欲下降、体重减轻等与中医“郁证”的临床表现极为相似［9］，并可以保持较长的时间，是较理想的中医“郁证”动物模型。
参考文献：［1］MURRAY C J ，LOPEZ A D.Global mortality ，disability ，and the contribution of risk factors ：Global burden of disease study ［J ］.Lancet ，1997，349（9063）：1436-1442.［2］郭小青，张淑珍，刘瑶，等.抑郁症中医辨证分型的探讨［J ］.中外健康文摘：医药学刊，2008，5（1）：106-107.［3］KATZ R J ，ROTH K A ，CARROLL B J.Acute and chronic stress effects on open field activity in the rat ：implications for a model of depression ［J ］.Neurosci Biobehav Rev ，1981，5（2）：247-251.［4］WILLNER P ，TOWELL A ，SAMPSON D ，et al.Reduction ofsucrose preference by chronic unpredictable mild stress ，and its restoration by a tricycles antidepressant ［J ］.Psychopharma -cology ，1987，93（3）：358-364.［5］李晓秋，许晶.抑郁动物模型的研究进展［J ］.中华精神杂志，2002，35（3）：184-186.［6］REID L ，FORBES N ，STEWART C ，et al.Chronic mild stress and depressive disorder ：a useful new model?［J ］.Psychophar -macology ，1997，134（4）：365-367.［7］DE VRY J ，SCHREIBER R.The chronic mild stress depres -sion model ：future dvelopments from a drug discovery perspec -tive ［J ］.Psychopharmacology ，1997，134（4）：349-350.［8］郭晓云，江开达.慢性轻度应激抑郁症动物模型研究进展［J ］.国际精神病学杂志，2007，34（4）：216-217.［9］张之文.抑郁性神经症的中医症治探讨［J ］.上海中医药杂志，2005，36（10）：20-21.调中和胃汤是张介眉教授治疗功能性消化不良的经验方［1］，它是在半夏泻心汤的基础上加味而成的，具有辛开苦降、调和胃肠的功能，用于治疗功能性消化不良，疗效显著。