高效液相色谱仪-浙江大学
高效液相色谱仪的基本操作和使用
美国赛默飞世尔(Thermo)公司
Finnigan Surveyor Plus 高效液相色谱系统
1、进口仪器
美国戴安公司 SUMMIT高效液相色谱仪
2、国产仪器
大连依利特分析仪器有限公司 P200Ⅱ型液相色谱仪
2、国产仪器
北京市东西电子技术研究所 LC—5500液相色谱仪
2、国产仪器
浙江福立分析仪器有限公司FL2200型高效液相色谱仪
一、基本结构
4、检测器
a.可变波长紫外检测器（VWD）
b.二极管阵列检测器（DAD或PDA） c.荧光检测器（FLD） d.示差折光检测器（RID） e.电化学检测器（ECD）
一、基本结构
4、检测器
f.蒸发光散射检测器（ELSD）
g.质谱检测器（MSD） h.红外检测器（IRD） i.核磁共振检测器（NMRD） j.小角度激光散射检测器（LALLSPD）
2、国产仪器
上海伍丰科学仪器有限公司 LC-100系列智能全控液相色谱系统
2、国产仪器
北京莱伯泰科仪器有限公司 LabTech LC600高效液相色谱仪
2、国产仪器
通微（上海）分析技术有限公司
BiSep-1100 高效液相色谱仪
2、国产仪器
通微（上海）分析技术有限公司
EasySep-1010 高效液相色谱仪
一、基本结构
5、计算机控制系统
色谱工作站软件
6、馏份收集系统（制备型HPLC）
二、简介
1、进口仪器
2、国产仪器 3、新型快速分析仪器 4、色谱工作站软件
1、进口仪器
美国安捷伦科技有限公司 Agilent 1100系列 高效液相色谱系统
1、进口仪器
超高效液相色谱串联三重四极杆质谱联用仪论证报告-浙江师范大学
大型仪器设备购置论证报告
实验室管理处制
填表说明
1．单价10万元及以上仪器设备的申购均需填写此表，并与申购计划一起上报有关部门。
2．所在学院（部门）组织3—7人单数技术专家进行论证，并通知项目经费管理、设备管理等部门参加论证。
申请单一来源采购的需3人以上单数非本校专家参加论证；未列入全省统一论证进口产品范围的进口产品需5人以上单数非本校专家参加论证。
3．论证会由专家组组长主持，主要程序为：申购人报告、现场考察、专家质询与讨论、专家组形成论证意见并签名。
4．专家论证同意，经学院（部门）、项目经费管理部门签字并盖章后，报本科教学部（实验室管理处）网上公示一周无异议后实施。
5．此表一式1份（如设备为进口设备，请提交2份）。
高效液相色谱——荧光检测器测定蜂王浆中磺胺类药物残留的研究
５ 种磺胺类药物残 留， 具有方法简单 ， 快速 ， 准确 ， 试剂用量少， 检测成本低的特 点。该方法的检 测限为 １ ｋ ， 满足 目前蜂 王浆 出 口中磺 胺 类 药物 残 留允许 限量 的要 求 。 ｇ能
关键词 ： 王浆 ； 蜂 磺胺 类 药物 残 留 ； 高效液相 色谱 一 荧光检 测 器
ｃｕｄｍｅｔ ｈ ｅｄｏ ｅｒｓ ｕ ｍ ｔｏ ｌ ｎ ｍｉｅｉ ｙｌ ｅ ｙｏ ｘ ｏｔｔ ｎ ｏ ｌ ｅ ｔｅｎ ｅ ｆｈ ｉ ｅｌ ｉ ｆ ｓ ｆ ａ ｄ ｒ ａ ｊｌ ｆ ｐ ｒ ｉ ． ｔ ｅｄ ｉ ｒｕ ｏ ｎｏ ｌ ｅ ａｏ
Ｋｅ ｗｏｄ ： ｏａ ｊｌ ， ｕｆｎｍｉｅｒｓ ｕ ｓ Ｈ Ｌ －ｆ ｏｅｃｎ ｅｄ ｔｃ ｒ ｙ ｒ ｓ ｒｙｌ ｅ ｙ ｓ ｌ ａ ｄ ｉ ｅ， Ｐ Ｃ ｌ ｒｓｅ ｃ ｅ ｔ ｌ ｏ ｅｄ ｕ ｅｏ
周 摘 萍 ， 胡 福 良 ： 徐权 华 ， 罗梁 华 ， 李 玉香 ’ 徐 武峰 ， （． １ 浙江 蜂之语 蜂 业集 团有 限公 司 ， 桐庐 ３ １０ ；． １５ ０２ 浙江 大学 动物 科学 学 院 ， 卅Ｉ １０ ９ 杭 ０２ ） ３ 要 ： 文采 用 液液 萃取进 行样 品 前 处理 ， 前衍 生后 用带 荧光检 测 器的 液相 色谱仪 检 测 ！ ： ：
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【 章 标 号 ］４ ２ ４ ６ （０ ８ ０ — ０ ５ ０ 文 ０ １－ ３ ７ ２０ ）２ ０ ０ － ３
高效 液相色谱— — 荧光检 测器测定蜂王 浆 中 磺胺 类药物 残 留的研 究
Ｚ ｏ ｉｇ ｈ ｕＰｎ ’ＨｕＦ ｌ ｎ ＸｕＱｕ ｎ ｕ ’ Ｌ ｏＬａ ｇ ｕ ’ Ｌ ｕ ｉｎ ’ Ｘ ｕｅ ｇ ｕｉ ｇ ａ ａｈａ ｕ ｉｎ ｈ ａ ｉ ｘａ ｇ Ｙ ｕＷ ｆｎ ’
高效液相色谱法测定柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量
高效液相色谱法同时测定柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量1. 实验目的了解高效液相色谱仪基本结构和工作原理，以及初步掌握其通用操作技能；掌握高效液相色谱保留值定性方法和外标法的标准曲线定量方法；掌握高效液相色谱分析条件选择的依据和一般过程；了解紫外吸收曲线的测定和应用。
2. 实验原理采用RP-HPLC法对柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量测定。
3. 实验仪器与试剂仪器：Shimadzu高效液相色谱仪（SPD-10A VP紫外-可见检测器、LC-6A高压泵、CTO-10AS VP柱温箱〈含7725i型手动进样器〉），浙大智达N2000工作站；Shimadzu UV265型紫外分光光谱仪；Sartorius CP225D型电子天平；Millipore Milli-Q型纯水仪；Sartorius BP-20型pH计；Thermo MICROMAX型离心机；上海亚荣生RE-2000型旋转蒸发器；北京中兴伟业ZDHW型调温电热套。
试剂：乙腈为色谱纯；柚皮苷和橙皮苷对照品（Dr. Ehrenstorfer公司提供）；其余试剂均为分析纯。
4. 样品前处理材料为购于雅安市市场台湾龙珠蜜柚、广西甜橙、沙糖桔、皇帝柑、椪柑以及脐橙等柑橘类水果果皮，将上述果皮经80 ℃干燥后，粉碎过60目筛，保存备用。
分别精密称取过筛样品0.1g用滤纸包好，置于索氏提取器中，以200mL的80%乙醇为提取溶剂，提取3h。
待提取液降至室温，通过旋转蒸发器55℃浓缩至近干，用提取溶剂洗涤数次，定容至25mL容量瓶。
取1.0mL至1.5mL于离心管中，10000rpm/min离心10min，取上清液进行色谱分析。
5. 色谱条件色谱柱：C-18柱（记录型号和规格）；流动相：水∶乙腈（比例分别采用80∶20、81∶19以及82∶18），均用磷酸和5%的NaOH溶液调节pH = 2.4）；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；进样量：1 ~ 20μL。
高效液相色谱仪（3台）
高效液相色谱仪（3台）高效液相色谱仪（3台）详细配置：1. 高效液相色谱主机（包含四元低压梯度泵，自动进样器，柱温箱）1套2. 二极管阵列检测器1台3. 样品瓶微量进样瓶300个4. 色谱柱2根5. 色谱工作站软件1套6. 电脑（带刻录机）打印机1套7、不间断电源（3KW/1H）重要参数及指标：1.液相色谱部分：泵系统：四元泵系统1.1每台流量范围：0.001-10.000 mL/min1.2最大压力≥40 Mpa1.3脉动：±0.1MPa(水,1.0ml/min输液时)1.4流量精度：≤0.06%RSD1.5梯度精密度：≤0.15%RSD，流速为0.2和1.0ml时1.6 溶剂数：4种1.7在线脱气：二极管阵列检测器1.1波长范围：190－800nm；1.2波长精密度：±0.1nm；1.2灯：氘灯、钨灯；1.3波长准确度：＜1nm；1.4噪声：<±1.0×10-5Au(254nm)；1.5基线漂移：<±8.0×10-4Au/h(254nm)；自动进样器：1.1交叉污染：0.004%1.2进样体积：0.01~100 μl1.2进样准确度：±1％1.3进样量精密度：0.2％RSD以下1.4试样处理数：1.5ml瓶≥96个。
1.5样速度：10μL进样量≤20秒柱温箱：1.1温控范围：室温~80℃1.3温控精度：±0.5℃1.4 柱容量：≥3根(300mm色谱柱)色谱软件：1.1中文，可容Windows XP或Vista或Win7系统；1.2具有3D扫描功能，能做纯度分析，光谱匹配度分析1.3可自动进行数据采集和后处理，具有系统适应性软件，计算分离度、理论塔板数、拖尾因子、容量因子、信噪比等。
1.4可提供适时分析条件参数和分析结果，在线监测和采集泵压力变化数据。
1.5可使用PDF、EXCEL等格式输出实验结果。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作1. 目的：明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作，确保数据的准确性。
2. 范围：适用于安捷伦高效液相色谱仪。
3. 职责：检验人员对此负责。
4.操作规程：4.1 系统组成本系统由1个溶剂二元输送泵（分主/A泵和副/B泵）、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。
4.2 准备4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常4.1 将待测样品按要求前处理，准备HPLC 所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。
4.3开机：4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。
4.3.3 待各模块自检完成后，双击[Instrument 1 Online]图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏]，[ 显示状态工具栏]，[系统视图],[样品视图]，使其命令前有[√]标志，来调用所需的界面。
4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。
4.3.6 打开冲洗阀。
4.3.7 点击[泵]图标，点击[设置泵…]选项，进入泵编辑画面。
4.3.8 设流速：5ml/min，点击[确定]。
4.3.9 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[启动]，点击[确定] ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
4.3.10 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[关闭]，点击[确定]关泵，关闭冲洗阀。
高效液相色谱手性固定相法拆分betti碱及其衍生物对映体
浙 Байду номын сангаас 大 学 学 报（理学版）
（
）
Journal of Zhejiang University Science Edition
： http ///sci
Vol. 47 No. 1 Jan. 2020
DOI：10.3785/j.issn.1008⁃9497.2020.01.014
高效液相色谱手性固定相法拆分 碱及其衍生物对映体
BETTI
支 明 玉 1，2，朱 岩 2*
（1. 杭州职业技术学院，浙江 杭州 310018； 2. 浙江大学 化学系，浙江 杭州 310028）
摘 要 ：在 纤 维 素 三 （3,5-二 甲 基 苯 基 氨 基 甲 酸 酯）（Chiralcel OD-H） 和 Pirkle 型 (R, R)-Whelk-O1 手 性 柱 上 对 手性氨基酚 1-(α-氨基苄基)-2-萘酚 （Betti 碱） 及其衍生物 1-(α-苄氨基苄基)-2-萘酚和 1-(α-哌啶基苄基)-2-萘酚 对映体分离进行了研究，分别考察了在正己烷流动相中，碱性添加剂、醇类添加剂的种类和浓度对手性拆分的影 响。结果表明：溶质在 Chiralcel OD-H 柱上的分离效果好，而在(R, R)-Whelk-O1 手性柱上只有 1-(α-苄氨基苄 基)-2-萘酚部分分离。研究了空间立体结构因素对手性分离的影响，初步探讨和比较了溶质在这 2 种手性柱上的 手性识别机理。发现对(R, R)-Whelk-O1 柱，溶质与固定相之间的吸引作用很小，而对于 Chiralcel OD-H 柱，溶 质在手性空腔中的空间适应性很可能是手性识别的关键。
关 键 词：Betti 碱；1-（α-苄氨基苄基）-2-萘酚；1-（α-哌啶基苄基）- 2-萘酚；手性固定相；对映体分离
基于高效液相色谱-串联质谱法的植物源性食品中乙基多杀菌素残留测定
乙基多杀菌素可以有效防治鳞翅目幼虫、蓟马、潜叶蝇、小菜蛾、甜菜夜蛾、豆荚螟等农业害虫，并具有广谱、高效、低毒等特点[1-3]。
乙基多杀菌素产品自2009年4月首次在我国农药登记以来，广泛应用于植物源性食品中[4-8]，随之带来了乙基多杀菌素植物源性食品中残留的问题[9-11]。
因此，关于乙基多杀菌素在各类植物源性食品中的安全评价受到越来越多的关注。
《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》（GB 2763）是根据我国农药残留试验及监测数据、居民膳食消费数据、农药毒理学数据等，经过科学风险评估后制定的，是开展农药安全性评价和农产品质量安全监管的技术判定依据，也是食品安全国家标准的重要组成部分和保障食品安全、保护公众身体健康的重要措施。
现行有效GB 2763—2021与首次发布的GB 2763—2012相比，对食品中乙基多杀菌素最大残留限量由1个类别3个品种增加到8个类别48个品种，最大残留限量范围从（0.1～0.5）mg·kg -1到（0.01～10）mg·kg -1。
由此可见，我国对部分品种的乙基多杀菌素最大残留限量要求越来越严，因而建立测定植物源性食品中乙基多杀菌素残留量的分析方法具有重要意义。
乙基多杀菌素农药残留量的检测分析方法主要有液相色谱法（liquid chromatography ，LC ）[12-15]、液相色谱-串联质谱法（liquid chromatography-tandem mass spectrometry ，LC-MS/MS ）[16-23]，但目前样品基质主要围绕土壤、药材植物（党参、枸杞）、谷物（水稻）和动物源性产品（牛奶、鸡肉、猪脂肪）等开展研究，对植物源性产品基质中乙基多杀菌素农药残留量检测分析的研究目前鲜见报道。
QuEChERS 预处理方法具有快速、简单、廉价、有效、可靠和安全等特点，已被广泛应用在植物源性产品农药残留量的检测分析[24-28]。
高效液相色谱法测定止泻灵颗粒中橙皮苷含量
高效液相色谱法测定止泻灵颗粒中橙皮苷的含量【摘要】目的：建立止泻灵颗粒中橙皮苷含量的hplc 测定法。
方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（21：79），流速：1.0ml·min-1，检测波长：284nm。
结果：线性范围： 0.2ug～1.0 ug/ ml （r=0.9997）。
精密度： 0.31%（ n = 5）平均回收率为97.3%。
结论：试验表明，该方法简便，快速，结果准确，重现性好。
【关键词】止泻灵颗粒；橙皮苷； hplc【中图分类号】r286 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）12-0036-02止泻灵颗粒是《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第十七册收载的品种。
是由党参、白术、陈皮、白扁豆、甘草、薏苡仁、山药、莲子、泽泻、茯苓等十味中药制成的颗粒剂，具有补脾益气、渗湿止泻之功效，用于脾胃虚弱所致的大便溏泄，饮食减少，食后腹胀，倦怠懒言，以及慢性肠炎见上述证候者。
本实验对组方中主药之一陈皮中的主要疗效成分橙皮苷的含量采用hplc法进行测定研究，该方法操作简便、准确、重现性好1 仪器与试药1.1 仪器日本岛津lc-10atvp高效液相色谱仪，spd-10avp检测器；浙江大学n2000色谱工作站；kromasil十八烷基硅烷键合硅胶柱（4.6mm×250mm，5um），赛多利斯bs210s型电子天平。
1.2 试药橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所110721-200712）；乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯。
止泻灵颗粒购于本市医药公司，共3批，批号：20080302，20080804，20080915。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：kromasil 十八烷基硅烷键合硅胶柱（250mm×4.6mm，5um）流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（21：79），流速：1.0ml/min，检测波长：284nm，进样量：20ul，理论板数以橙皮苷峰计不低于3000。
高效液相色谱法测定盐酸罗格列酮片的含量及有关物质
药 学实 践 杂志
２１ ０ ２年 １月 ２ 日第 ３ ５ Ｏ卷 第 １ 期
４ ９
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｈ ｒ ｃ ｕ ｉａ ｒ ｃｉ ｅ， １ ３ ｏ ｒ ａ ｆＰ ａ ｍａ ｅ ｔ ｌＰ ａ ｔｃ Ｖｏ ． Ｏ，Ｎｏ １ Ｊ ｎ ａ ｙ２ ２ １ ｃ ． ， ａ ｕ ｒ ５， ０ ２
高 效 液 相 色谱 法 测定 盐酸 罗格 列酮 片 的 含量 及 有关 物 质
ｐｅ ｋ ｏ ｏ ｉ ｌ ａ ｏ ｅ， ｔ ｅ ｍａ ｎ ｒ ｌ ｔ ｄ ｓ ｂｓ ａ ｃ ｓ ａ ｈ ｅ ｒ ｄ ｂ ｅ ｉ ｕ ｉｉ ｓ ａ ｔ ｒ ｂ ｉ ｇ ｄｅ ｔ ｏ ｅ ａ ｆｒ ｓｇｉ ｚ ｎ ｔ ｈ ｉ ｅ ａ ｅ ｕ ｔ ｎ ｅ ｎｄ ｔ ｅ ｄ ｇ ａ ａ ｌ ｍｐ ｒ ｔｅ ｆ ｅ ｅ ｎ ｓ ｒ ｙ ｄ． Ｔｈ ｒ ｓ ａ ｇ ｏ ｉ ｅ ｒ ｒ ｌ ｔｏ — ｅ ｅ ｗａ ｏ ｄ ｌｎ ａ ｅ ａ ｉ ｎ
李 ３ 贾 飞 。 吴 永 江 １浙江大学药学 院 ， Ｌ 一， － ， （． 浙江 杭州 ３０１ ；． Ｉ １０２２浙江省食品药品检验所 ， 浙江 ｔ ＇ ３００ ） Ｅ＇ １０４ Ｊ ｌ ＇ ｌ
［ 要 ］ 目的 建 立 测 定 盐 酸 罗 格 列 酮 片 含量 及 有 关 物 质 的 Ｈ Ｌ 摘 Ｐ Ｃ方 法 。 方 法 采 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 ， 谱 柱 为 色 Ｄ ａ ｎｉ Ｃ ４ ６ ｍ × ５ ｌ ， ｍ） ， ０ ０ ５ ｍ ｌＬ醋 酸 铵 溶 液 一 腈 （ ０： ０ 为 流 动 相 ， 测 波 长 ２ ５ｎ ｉ ｍｏ ｓ （ ． ｍ ２ ０ Ｉ ｎ ５ ｌ ｌ Ｉ 柱 以 ． ２ ｏ ／ 乙 ５ ５） 检 ４ ｍ。结 果 罗
综述-高效液相色谱-质谱联用技术在代谢组学中的应用进展
高效液相色谱-质谱联用技术在代谢组学中的应用进展摘要：代谢组学是对一个生物系统的细胞在给定时间和条件下所有小分子代谢物质的定性定量分析, 从而定量描述生物内源性代谢物质的整体及其对内因和外因变化应答规律的科学。
而高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）作为代谢组学中一种重要的分离检测方法，在代谢组学中有着方方面面的应用。
本文介绍代谢组学中的高效液相色谱-质谱联用技术，并从药物分析、生理病理代谢、临床诊断标志物和细胞鉴定等方面介绍高效色谱-质谱联用技术在代谢组学中的应用。
关键词：高效液相色谱-质谱联用技术；代谢组学代谢组学的研究目的就是从尿液、血浆、血清、唾液和胆汁等生物体终端样本中检测代谢物，或跟踪代谢水平整体的动态变化，提取“组学”信息，以此来反映生物体在外源刺激作用下的体内生物学过程变化情况。
代谢组学研究的基本流程包括样品采集、预处理、代谢组分析、数据分析以及研究结果的解释与应用等。
1.检测工具其中的样品采集分离与分析离不开分离检测工具。
常用的分离检测工具包括色谱(Chromatography)、质谱(Mass Spectrometry，MS)、核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance，NMR)等。
【1】1.1核磁共振（NMR）NMR快速、选择性好,其样品处理简单且不造成破坏,只要含氢的代谢物都可以被检测,即可以对所有的分析对象达到无歧视分析。
对样品无损伤且重复性好,能够广泛应用于药物工业和病人的尿、血样分析。
样本制备简单且易自动化。
但是复杂混合物的NMR谱的解析非常困难。
对全面的代谢谱图分析, NMR最大的缺陷是灵敏度相对较低, 从而使得它不适合分析大量的低浓度代谢物。
【2】所需硬件投资也比较大1.2色谱（Chromatography）气相色谱(Gas Chromatography，GC)广泛用于微量、痕量组分的分析。
但是，气相色谱受组分挥发性和热稳定性的限制，需对样品进行衍生化处理。
高效液相色谱法测定槐花米提取物中芦丁含量
对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品5.4mg
置于5ml容量瓶 甲醇稀释至刻度
供试品溶液的制备 精密称取本品适量 置于
索氏提取器 甲醇提取至无色 提取液转移 至250 ml容量瓶 甲醇稀释至刻度
文献三
色谱条件
固定相：Spherisorb ODS Cl8 （150mm×4.6mm，5m）色谱柱
流动相：甲醇-乙腈-冰醋酸-水（22:10:3:65）
接进样 外标法测定 豆科植物槐树花蕾-槐米的主要有效成份
流动相：甲醇-水-乙酸（45:53:2）
样品测定 供试品溶液 微孔滤膜过滤 直接进样 外标法测定
流动相：甲醇-乙腈-冰醋酸-水（22:10:3:65）
仪器精密度 同一对照品溶液 而文献方案三认为加入乙酸可有效防止脱尾，实验中可根据实际情况决定是否加酸。
芦丁在204nm、257nm、355nm处有3个吸收 峰，药典中芦丁的检测波长为257nm，文献二用 了355nm作为检测波长，也获得了较好的检测结 果。另一个芦丁的吸收峰204nm干扰因素较多， 使用较少。
讨论
芦丁易溶于甲醇，在水中微溶，降低流动相中甲醇 的含量将提高芦丁的分离效果，但同时也将延长保 留时间，实验中需根据实际情况调节流动相配比以 获得良好的分离效果。
芦丁在水溶液中呈酸性，为防止其水解，药典及许 多文献报道的流动相中都加入了无机酸，但含量较 高的酸容易对分析柱造成损伤。文献一的流动相中 仅用了甲醇和水，也获得了满意的效果。而文献方 案三认为加入乙酸可有效防止脱尾，实验中可根据 实际情况决定是否加酸。
流动相：甲醇-乙腈-冰醋酸-水（22:10:3:65） 流速：1.0 ml/min 进样量：20µl 柱温：45℃ 检测波长：257nm
பைடு நூலகம்
高效液相色谱法(HPLC) 测定牛乳中α-乳白蛋白
高效液相色谱法(HPLC) 测定牛乳中α-乳白蛋白Determination of α-lactalbumin in milk products by high performance liquid chromatography ( HPLC)关荣发1，黄光荣1，贾振宝1，戴贤君1，叶兴乾2 GUAN Rong-fa1, HUANG Guang-rongn1, JIA Zhen-bao1, DAI Xian-jun1, YE Xing-qian2（1.中国计量学院生命科学学院，杭州310018; 2.浙江大学食品科学与营养系，杭州310029）(1. College of Life Sciences, China Jiliang University，Hang Zhou 310018; 2. Department ofFood Science and Nutrition, Zhejiang University, Hangzhou 310029) 摘要: 建立了利用常规的C18色谱柱的高效液相色谱测定牛乳中主要过敏蛋白α-乳白蛋白含量的方法。
色谱条件: 色谱柱Alltima-C18( 4.6 mm×200 mm, 5μm) , 柱温为45℃, UV 检测波长2l5 nm, 流动相A为含0.1%三氟乙酸的超纯水,流动相B为乙腈∶超纯水∶三氟乙酸=400∶100∶0.5，采用梯度洗脱方法，流速0.8mL/min。
结果表明: α-乳白蛋白的线性范围分别为50μg/mL-1000μg/mL( r=0.9909); α-乳白蛋白平均回收率为97.27 %, RSD=0.76%(n=5);该方法简便、准确, 适合于乳制品中α-乳白蛋白含量的测定。
关键词: 高效液相色谱法; α-乳白蛋白; 乳制品; 测定Abstract: A method for the determination ofα-lactalbumin in milk products by high performance liquid chromatography has been established. The chromatography conditions as follow: Alltima-C18 conlum (4.6 mm×200 mm, 5 μm), UV detection wavelengts 215 nm. This method consisted of a linear gradient of the two mobile phases of 0.1% trifluoroacetic acid in water and 0.5% trifluoroacetic acid and 80% acetonitrile in water at a flow rate of 0.5 mL/min, The conlum temperature was 25℃.The result showed that for α-lactalbumin the calibration curve was linear in the range of 50μg/mL ~1000μg/mL( r=0.9909). The average recovery percent was 97.27, the RSD was0.76%( n=5).The methods is suitable for contents analysis of α-lactalbumin in milk products.Key words: high performance liquid chromatography; α-lactalbumin; milk products; determination 随着人们生活水平的提高，奶制品在国内的消费量迅速增加，2005年我国城镇居民奶类人均消费量（折鲜奶）已达25公斤以上，饮用UHT奶、巴氏杀菌奶等液态奶已在我国渐成习惯，液态乳已经成为我国的主要乳制品。
高效液相色谱法测定蜂王浆中羟甲基糠醛含量
2008, Vol. 29, No. 03食品科学※分析检测412高效液相色谱法测定蜂王浆中羟甲基糠醛含量吴黎明1,2，田文礼2，薛晓锋2，周 骁2，赵 静2，胡福良1,*(1.浙江大学动物科学学院，浙江 杭州 310029；2.中国农业科学院蜜蜂研究所，北京 100093)摘 要：建立了测定蜂王浆中羟甲基糠醛含量的固相萃取-反相高效液相色谱法。
蜂王浆样品用水溶解提取，提取液用亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液沉降蛋白后，再用C 18固相萃取小柱净化。
羟甲基糠醛用甲醇从C 18小柱上洗脱，氮吹浓缩至近干，残渣用流动相溶解，过0.45μm 滤膜后，用高效液相色谱仪在285nm 测定。
本方法线性范围为0.1～20mg/L，线性相关系数R 2=0.9993；在0.2～10mg/kg 添加水平时，回收率在87.2%～93.1%之间，相对标准偏差为0.9%～3.4%，方法检出限为0.2mg/kg。
关键词：高效液相色谱；蜂王浆；羟甲基糠醛Determination of Hydroxymethylfurfural Contents in Royal Jelly by High Performance Liquid ChromatographyWU Li-ming 1,2，TIAN Wen-li 2，XUE Xiao-feng 2，ZHOU Xiao 2，ZHAO Jing 2，HU Fu-liang 1,*(1.College of Animal Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China；2.Institute of Apicultural Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100093, China)Abstract ：A reversed-phase high performance liquid chromatographic method was described for determination of HMF (hydroxymethylfurfural) in royal jelly. The sample was extracted with water and removed proteins using the zinc acetate and potassium ferrocyanide solutions. The sample extract was cleaned up by C 18 SPE cartridge, while the HMF was eluted off via C 18 SPE cartridge with methanol and evaporated to dryness on nitrogen dry evaporator, and residues were dissolved in mobile phase and passed through 0.45μm filters for determination by a liquid chromatography UV detection with the wavelength of 285 nm. The linear range of the method are 0.1～100 mg/L and the linear correlation coefficient is 0.9993. In the ranges of 0.2～10 mg/kg , the fortification recoveries are 87.2%～93.1%, the relative standard deviations are 0.9%～3.4%. The limit of detection for the method is 0.2 mg/kg.Key word s ：HPLC ；royal jelly ；hydroxymethylfurfural中图分类号：TS207.5 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2008)03-0412-03收稿日期：2007-11-30基金项目：国家自然科学基金项目(30471315)作者简介：吴黎明(1973-)，男，副研究员，博士研究生，研究方向为蜂产品质量安全与控制。
waters高效液相色谱e2695-2489技术参数
美国Waters公司高效液相色谱仪技术参数1四元梯度输液泵（Alliance 2695型）1.1工作模式：相互独立、电子控制的双柱塞直线驱动装置，双压力传感器反馈回路，无需混合器和阻尼器1.2溶剂数：1—41.3流速范围：0.010—10.000ml/min, 以0.001ml/min 为增量1.4流速精度：≤0.075%RSD1.5流速准确度：±1.0%1.6*延迟体积：<650µL，不随反压变化1.7混合范围：0.0—100.0% 以0.1% 增量1.8*梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化1.9*梯度精度：±0.15%，不随反压变化1.10压缩补偿：自动，连续1.11*梯度曲线：多种梯度曲线，线性、步进、凸线和凹线1.12控制器：内置程序控制器，液晶显示，按键操作，E2PROM程序存储器1.13*延迟体积、梯度准确度和梯度精度指标不随反压变化2进样器（Alliance 2695型）2.1自动进样方式2.2*样品瓶数：120位，由5个样品盘组成，24个2mL样品瓶/盘2.3进样次数：每个样品1—99次进样2.4进样精度：≤0.5%RSD2.5样品污染度：<0.1%，最少程度的交叉污染，保证热不稳定样品的完整性2.6进样准确度：±1uL2.7进样范围：0.1—2000µL2.8进样线性度：>0.9992.9*进样针清洗：针内外每次进样后通过专用流路自动清洗3紫外可见检测器（2489型）3.1波长、极性和灯源开关均可时间编程控制3.2内置硝酸铒滤光片，紫外光、可见光都可以校正。
3.3可变波长范围：190～700nm3.4*检测通道：2个3.5光源：氘灯3.6波长准确度：±1nm3.7带宽：5nm3.8测量范围：0.0001～4.0000AUFS3.9基线噪音：±0.25x10-5AU，230nm，10Hz，1.0s3.10漂移：1 x 10-4AU/hour，254nm在1mL/min（甲醇）3.11梯形狭缝的光路设计，从硬件上消除示差折光效应3.12*具有操作面板，可以独立设定工作参数、显示运行状态4色谱软件（2011年版Empower3型）4.1是在最新Windows 7操作系统下编写和测试，支持多窗口、多任务的操作模式。
高效液相色谱法测定蜂王浆中链霉素残留
约 ５ Ｌ水洗柱至洗脱液 ｐ ｍ Ｈ约为 ４ ， ． 抽干 ５ ｉ， ０ ａ ｒｎ 再 用 ４ Ｌ叔正液洗柱 ， 干 ５ ｉ， ｍ 抽 ｍ ｎ 最后用 １ｍ ５ Ｌ甲醇
淋洗柱子 ， 收集洗脱液 ， ４ ￣下旋转蒸发到干 ， 在 ０Ｃ 加
蜜、 牛奶 、 肉、 猪 水产品、 鸡肉等产品中链霉素残 留多
ｐ ＝ －； 谱 柱 ： ｙ ｅｓ Ｄ ２（５ ｍ ｘ４６ ｍ × Ｈ ３３ 色 Ｈ ｐ ｒｉＯ Ｓ １ ０ ｍ ． ｌ ａ ｒ
４ ｍ ； 速 ：．ｍｍｉ； 生 剂 ：．Ｍ Ｎ Ｏ 流 速 ： ）流 １ ／ ｎ衍 ０ ０ ａ Ｈ， ２
０ ｍｍｎ 衍生 管 ：— ６ 寸 ×１ｍ； ． ／ ｉ， ４ ｌｌ 英 ０ 柱温 ：０Ｉ， ５ ｃ 衍 ＝
冲 图分类￣１８ ３ Ｓ ９． ９ 【 文献标识码】 Ａ
链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗 菌素 ， 属于氨基糖甙碱性化合物。 它的抗结核杆菌的
瓶 ，加 ２ｍ ０ １ Ｈ ２ 高氯酸置于旋 涡混合器 ５ Ｌ． Ｍｐ ＝ ． ０ ０ 中，混匀 ３ ｉ，８０／ ｉ ｍ ｎ２０ ｒ ｎ离心 ｌｍｎ ｍ Ｏ ｉ，取上清液过 滤 ，用移液管吸取 １ｍ ５ Ｌ过滤液 ，用 １ ａ Ｈ调 ＭＮＯ ｐ ＝ ．， Ｈ ７ 过羧基 柱（ ０ 柱应预先活化 ， 活化方法是 ３ Ｌ ｍ 正 己烷 ，ｍ ３ Ｌ甲醇 ，ｍＬ水 依 次过 柱 ）用 １ｍ ３ ， ０ Ｌ缓 冲 液 Ａ洗柱并弃掉 ， ５ Ｌ的缓冲液 Ｂ收集洗脱液 ， 用 ｍ
内外相关文献报道的基础上 ，对蜂王浆中链霉素残 留的 Ｈ Ｌ — Ｆ Ｐ Ｃ Ｒ 检测方法进行 了研究。 １材 料 与方法
１１材 料与仪 器 ．
１２２分 析条件 ｒ流 动相 ：０ ．． ７ 】 ： ２％乙腈水溶 液 加 １１ 庚 ．ｇ
高效液相色谱法测定2-氯-6-三氯甲基吡啶粗产品
高效液相色谱法测定2-氯-6-三氯甲基吡啶粗产品摘要：2-氯-6-三氯甲基吡啶粗产品氯化过程的分析控制需要一种简便有效的检测方法。
本文建立了高效液相色谱法定量分析2-氯-6-三氯甲基吡啶的方法，考察了分析方法的精密度、回收率等指标，该方法简便、快速，可有效地检测反应粗产品中的2-氯-6-三氯甲基吡啶的含量，用于工业生产中氯化过程过深或过浅的问题，可对最终产品进行定量分析，为保证产品质量的稳定提高和降耗节能起到了积极作用。
关键词：2-氯-6-三氯甲基吡啶高效液相色谱定量分析2-氯-6-三氯甲基吡啶除能作为合成农药、医药等化工产品的中间体外，其本身也被用作农药（氯草定）和氮肥增效剂[11]。
其具有优良的硝化细菌抑制功能，可阻止土壤中氨态氮氧化为硝态氮，因而可降低土壤中氮肥的淋溶与流失，提高氮肥利用率，降低农业氮污染。
其在欧美均被广泛作为氮肥增效剂及土壤氮肥保护剂。
2-氯-6-三氯甲基吡啶的合成方法主要有两种：一种是采用吡啶-2-甲酸与氯气催化反应[12]，但是由于吡啶-2-甲酸的来源与价格的限制，难以实现大规模工业化生产；另一种是美国陶氏化学[13]采用的2-甲基吡啶与氯气在高温下气相氯化得到的产品，但是该合成方法所使用的设备材质要求较为苛刻，副产品多分离困难，操作控制条件复杂。
以2-甲基吡啶盐酸盐（MPCH）和氯气作为原料，在催化剂作用下中温氯化合成了2-氯-6-三氯甲基吡啶，该合成方法与传统合成方法相比，工艺简便、可连续工业化生产、原料易得、反应条件温和、设备材质要求不高、产品回收率及选择性高。
合成方程式如下：反应过程中，随着氯化深度的不同，除了生成目标产物2-氯-6-三氯甲基吡啶外，反应体系中还有未反应的原料2-甲基吡啶、低氯产物、高氯产物等，如果氯化深度得不到有效控制，既造成物料和能源的浪费，也是目标产物的产量和质量不稳定。
需要一种简便有效的检测方法对氯化过程进行分析控制。
本文建立了高效液相色谱法定量分析2-氯-6-三氯甲基吡啶的方法，考察了分析方法的精密度、回收率等指标，该方法简便、快速，可有效地检测反应粗产品中的2-氯-6-三氯甲基吡啶的含量，用于工业生产中氯化过程过深或过浅的问题，可对最终产品进行定量分析，为保证产品质量的稳定提高和降耗节能起到了积极作用。
高效液相色谱法测定人血浆中去铁酮含量
高效液相色谱法测定人血浆中去铁酮含量陆华;程道海;雷小光;何云燕;万瑞融;苏明;吴克婕;罗建明【摘要】目的建立高效液相色谱法测定人血浆中去铁酮(DFP)含量.方法 Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相:乙腈-50 mmol·L-1磷酸二氢钾(含5 mmol·L-1庚烷磺酸钠,1%三乙胺)＝11:89(用磷酸调至pH1.3),检测波长:278 nm,柱温:25 ℃,进样量:20 μL,流速:1 mL·min-1.结果 DFP在0.5～80.0 mg·L-1浓度范围内线性良好(r＝0.996 5),最低检出浓度为0.5 mg·L-1.高、中、低3种浓度样品绝对回收率＞85.6%,方法回收率＞89.9%,日内精密度RSD在1.61%～3.70%,日间精密度RSD在1.84%～4.81%.结论该方法操作简便易行,快速准确,灵敏度高,专属性强,适用于DFP的人体血浆浓度测定.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2014(033)002【总页数】4页(P164-167)【关键词】去铁酮;人体血浆;色谱法,高效液相;含量测定【作者】陆华;程道海;雷小光;何云燕;万瑞融;苏明;吴克婕;罗建明【作者单位】广西医科大学第一附属医院药学部,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院药学部,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院药学部,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院儿科,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院药学部,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院药学部,南宁,530021;桂林医学院,桂林,541004;广西医科大学第一附属医院儿科,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R969.1去铁酮(deferiprone,DFP),化学名称3-羟基-1,2-二甲基-4-(1H)-吡啶酮(3-hydroxy-1,2-dimethylpyridin-4(1H)-one),分子式:C7H9NO2,为口服的二齿状金属螯合剂,临床上常用于治疗耐受或不愿意接受现有螯合剂治疗的铁负荷过多的β地中海贫血［1］。
高效液相色谱法测定苁蓉酒中松果菊苷的含量
高效液相色谱法测定苁蓉酒中松果菊苷的含量李琦;丁轶聪【摘要】建立反相高效液相色谱法测定苁蓉酒中松果菊苷含量.固定相为C18,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(体积比为33:67),流速1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为330 nm.松果菊苷的浓度x(mg/mL)与其峰高y呈良好的线性关系,线性方程为y=2.5955x,相关系数为0.9999.样品的加标回收率为88.1%～107.5%,测定结果相对标准偏差为0.41%(n=5).【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2008(017)006【总页数】2页(P57-58)【关键词】高效液相色谱法;松果菊苷;苁蓉酒【作者】李琦;丁轶聪【作者单位】阜阳市产品质量监督检验所,阜阳,236000;阜阳市产品质量监督检验所,阜阳,236000【正文语种】中文苁蓉酒是以肉苁蓉为主要原料的传统补肾壮阳药物，具有补肾助阳、润肠通便的功效。
作为一种新兴的保健食品，肉苁蓉的主要活性成分是苯乙醇苷类化合物，而松果菊苷在此类化合物中含量最大,为主要成分，因此选择肉苁蓉中的松果菊苷作为本品含量测定的指标成分。
由于该类化合物有较强的紫外吸收[1]，笔者通过实验建立一种合理、有效、快速的高效液相色谱测定方法。
《中华人民共和国药典》中的分析方法采用了3种流动相[2]，而本方法只采用了两种流动相便将需要检测的物质完全分离。
该方法的建立对于肉苁蓉相关产品的检测具有一定的参考价值。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂高效液相色谱仪：L-7420型，二极管阵列检测器(195～900 nm)，日本日立公司；色谱工作站：N2000型，浙江大学智能信息工程研究所；旋转蒸发器：R-205型，上海申胜生物技术有限公司；甲醇：色谱纯；甲酸：分析纯；松果菊苷标准物质:纯度不小于99.8%，中国药品生物制品检定所；松果菊苷标准溶液：0.193 8 mg/mL，精密称取松果菊苷标准品10 mg，置于50 mL棕色容量瓶中，用60%甲醇溶液定容[3，4]；实验用水：超纯水，用0.45 μm微孔过滤膜过滤。
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三、使用维护技术力量及仪器安置地点（明确填写管理责任人、操作人员、维修保养人员及仪 器放置房间号）。
仪器放置于 生命科学大楼 430 管理负责人：傅承新 操作、保养人员：赵云鹏 维修人员：仪器公司专业工程师
专家组组长签名：常杰 专家组成员签名：朱诚 专家组成员签名：傅承新
日期：2007 年 11 月 20 日 五、本单位购置论证会议或规划会议情况(40 万元以上设备适用)：
1、 购置提议人（签名）： 2、 购置附议人（签名）： 3、会议纪要（必须有参与会议人员的人员签字，以附件形式提供）
六、备注
第5页
连续自动压力补偿，可自动根据液体的物理性质调整压缩比，确保流量输
出准确无误
仪器设备
DAD 检测器 波长范围：190－950nm
主要功能、
波长准确度：±1nm 噪音：<1.0X10-5AU
主要技术
漂移：<1.0X10-3AU/hr 测量范围： 1uAU-100AU
规格、及
线性范围： >2 AU 光源：氘灯，石英卤素灯
单位领导意见
审批意见
同意
负责人：吴平
实验室与设备管理处意见
主管部门意见 校领导审批意见
负责人 负责人
第6页
负责人
第7页
第3页
二、预计使用效率以及技术经济效益（有效机时/年，服务对象，教学、科研、服务成果）及 风险预测。 本设备服务对象为本院、校相关领域有机化学、药物化学、天然药物分离、药理学、生
态学、环境与资源学等）的研究人员和本地其它相关单位的研究人员、研究生和本科生教学. 有效机时预计可达到 500-1000 有效机时/年.
主要用途
检测单元：512 二极管阵列 狭缝宽度 ：1,2,4,8,16nm 可时间编程
分辨率： <1nm
流动池规格：9mm
带多组分共流出分析软件
功能：
对化合物进行高效的分离，可定性、定量分析。
用途： 第2页
天然产物、药物开发、有机化学、配位化学研设备的必要性；2,能利用该设备的学科；3、本校、附近兄 弟院校和科研单位是否有同类设备，能否共享；4、如果本校已有该类设备，说明该设备 工作情况；5、国内外供货商以及相关设备的比较。） 1、高效液相色谱仪（HPLC）以期高效的分离分析能力和较广的应用范围，已成为现代化
仪器中文名称
高效液相色谱仪
仪器英文名称
High Performance Liquid Chromatography
人民币
略
购置数量
1
单价
略
经费预算
美元
拟选厂商 1
略
拟选厂商 2
拟选厂商 3
经费来源
第1页
主要技术规格:
高压梯度泵
流速范围：0.01-10ml/min
最高耐压：8700Psi
最大流量准确度: +/-0.05％
浙江大学
购置大型贵重精密仪器设备项目 可行性论证与审批报告
设 备 名 称： 申 请 单 位： 经 费 来 源： 购置项目负责人(签名)： 购置单位负责人(签名)： 填 表 日 期：
高效液相色谱仪 生命科学院 自筹
2007-11-16
浙江大学实验室与设备管理处制 2006 年 6 月版
大型贵重精密仪器设备购置项目可 行 性 论 证与审批 报 告
第4页
四、专家组论证意见（专家名单由实验室与设备管理处指定）：
高压液相色谱的高分离能力与低压制备色谱的大通量于一体，是现代有机药 物合成、天然药物解析研究领域最强有力的分析工具之一。尤其在天然产物分离 与结构解析、药物开发等方面具有不可替代的作用。属于药物合成、天然药物化 学、有机化学、植物化学、药理学、生态学等研究领域的必备仪器之一，有必要 引进。
学研究领域最强有力的分析工具之一。尤其在天然产物的分离、药物开发等方面具有不可替代 的作用。
2、能利用 HPLC 的学科有：植物化学、天然药物化学、药理学、药物分析、有机化学、 生态学等。
3、本校测试中心及已有同类设备，可以共享。 4、本校已有的同类设备目前工作十分繁忙，样品测试周期很长，严重阻碍了理学院的科 研进展速度。 5、根据我们目前的研究需要，如有机合成药物分析，天然药物活性物质分离分析等工作，我 们主要对下列品牌和型号的仪器进行了市场调研和考察。 略