地黄栽培种与野生种内源激素含量的差异
地黄高产施肥方案
地黄高产施肥方案地黄是一种重要的中药材,具有补肝肾、滋阴养血、益精明目等功效,对于肾虚、血虚、眩晕等症状有很好的治疗作用。
地黄的高产施肥方案是确保地黄植株生长健壮、增加产量的重要措施之一、下面将介绍如何制定地黄高产施肥方案。
1.土壤调理地黄喜欢温暖湿润、沙质或粘质土壤,并且对肥沃的土壤要求较高。
因此,在种植地黄之前,首先需要进行土壤调理。
通过翻耕、松土等措施,改善土壤的通透性和保水性。
可以添加适量的腐熟有机肥、骨粉等有机物质,提高土壤肥力。
2.施肥时机对于地黄来说,春季和秋季是进行施肥的最佳时机。
在春季,地黄开始新的生长季节,需要充足的养分支持植株的生长。
在秋季,地黄开始准备进入休眠期,需要足够的养分储备。
因此,在这两个季节进行适量的施肥是非常重要的。
3.施肥量地黄对养分的需求比较高,因此施肥量需要适量增加。
一般来说,每亩地黄种植面积,需要施用有机肥1000-1500公斤,氮磷钾肥各种100-150公斤,额外施用少量硼肥、锰肥等微量元素肥料。
施肥量可以根据土壤的肥力状况、植株的生长情况和实际需求进行调整。
4.施肥方法地黄可以通过基肥和追肥相结合的方式进行施肥。
在种植地黄之前,可以将有机肥均匀撒在整个种植区域,然后用犁或铁耙将其埋入土中。
基肥施用后,可以在生长季节中的4-5月和7-8月进行追肥。
追肥时,可以将氮磷钾肥等化肥溶解在水中,通过灌溉或叶面喷施的方式进行施肥。
5.注意事项在施肥过程中a.避免过量施肥。
过量施肥会造成土壤肥力过高,导致地下水的污染,并且可能对植株的生长产生负面影响。
b.注意施肥的时机。
施肥时机选择合适的季节和植株的生长阶段,可以最大限度地满足植株的养分需求,促进产量的增加。
c.增加有机肥的比例。
有机肥对地黄的生长有着较好的促进作用,可以增加土壤的保水性和保肥性,提高产量和质量。
d.及时补充微量元素。
地黄对微量元素的需求较高,以锰、锌、硼等为主。
因此,在施肥过程中,可以适当添加含有这些微量元素的肥料,保证植株的健康生长。
浅谈中药地黄(家种、野生、采收、鲜品、生品、炮制品、近似种)
浅谈中药地黄(家种、野生、采收、鲜品、生品、炮制品、近似种)原始药终中药图文标准查询关注温馨提示本文已超链接至地黄图文中,公众号搜索地黄,随时查询!采地黄者作者:白居易(唐)麦死春不雨,禾损秋早霜。
岁晏无口食,田中采地黄。
采之将何用,持以易餱粮。
凌晨荷锄去,薄暮不盈筐。
携来朱门家,卖与白面郎。
与君啖肥马,可使照地光。
愿易马残粟,救此苦饥肠。
这首诗创作于公元813年。
诗人在下邽(今陕西渭南县内)渭村见到农民遭到春旱秋霜之灾后,入冬就断了口粮,而富贵人家却用粮食喂马,为此深有感触,于是以采地黄者的遭遇为题材,写下了这首同情贫民疾苦的诗歌。
人工种植的地黄说到地黄,几乎用过中药的人没有不认识的,这是最传统的中药之一,地黄也是我们身边最常见到的药用植物了。
无论道旁路边,荒郊土坡,都可以看到,而不像人参、当归、黄芪那样,只闻其名,却难在身边可以看到原植物。
地黄却朴实低调的默默的生活在我们身边。
地黄栽培品,叶片较硕大,较大的叶面积系数,保持光合产物的合成,助于促进块根的发育和膨大地黄用药历史悠久,最早《神农本草经》便有用药的记载和收录。
野生地黄虽然可以随处可见,但人工栽培可追溯到1000多年前,“大宜肥壤,虚地则根大而多汁。
”可见当时就有块根膨大的类型。
野生地黄经过长期的栽培选育,才有了现在几十种的地黄优良品种。
比如现在的优良品种“8525”.及“北京1号”等,为现主栽品种。
偶见的栽培品开花栽培地黄像多种药材种植一样,生长期间,一般都会摘除花蕾,因为抽薹开花会消耗养分,因此打掉花蕾,以确保根茎正常生长发育,达到增产增收的目的。
对于植物开花是否对内源性激素,及药用干物质种类是否影响,也无研究。
地黄全株地黄种植相对去其他中药品种,较为简单,周期短,回笼资金也快,又是大宗药材,使用量大。
较受种植欢迎。
地黄虽说是多年生植物,但在生产上生长周期很短。
一般在每年的4月上旬至5月上旬种。
10月上旬(寒露)便可收挖,只有5、6个月---150天左右。
地黄种植技术及亩收益
地黄种植技术及亩收益引言地黄(学名:Rehmannia glutinosa)是一种重要的中药材,常见于中国、日本、朝鲜等地。
地黄具有清热凉血、养阴补肾的功效,被广泛应用于中医药治疗各类疾病。
地黄的种植技术对于确保高产和品质至关重要。
本文将介绍地黄的种植技术,并分析其亩收益。
一、地黄的生态环境和土壤要求地黄喜欢温暖湿润的气候,适宜生长温度为20-30摄氏度,最佳生长温度为25摄氏度。
地黄对光照要求不高,半阴半阳的生长环境是最适宜的。
此外,地黄对土壤要求较高,适宜的土壤类型是肥沃、疏松、排水良好的壤土和黄壤。
酸性土壤和重茬地都不适宜种植地黄。
二、地黄的繁殖方式和种植方法1. 种子繁殖:地黄的种子在数月内能够发芽,但发芽率较低,一般在10%左右。
因此,种子繁殖不是常用的地黄繁殖方式。
2. 分株繁殖:分株繁殖是地黄的常用繁殖方式。
每年春季或秋季,在地黄植株成熟后,将植株切割成2-3个节段,然后重新种植到合适的土壤中。
3. 茎叶繁殖:茎叶繁殖是一种较为简单的繁殖方式。
选取健康有活力的茎叶,将其插入湿润的土壤中,即可生根成苗。
三、地黄的灌溉和施肥技术1. 灌溉技术:地黄是湿生植物,对水分需求较高。
在生长期间,保持土壤湿润是非常重要的。
要确保适量的灌溉,以防止土壤干旱。
2. 施肥技术:地黄在生长期和开花期需要充足的养分。
施肥时,可以选择有机肥料和矿质肥料混合使用,如鸡粪、骨粉等。
根据土壤的质量和植株的生长情况,合理确定施肥的量和频次。
四、地黄的病虫害防治地黄的病虫害较多,如地黄斑、炭疽病、疫病等。
为了保证地黄的正常生长和减少产量损失,进行病虫害的防治至关重要。
可以采取以下措施进行防治:1. 合理轮作:地黄不宜连作,避免连续种植地黄,最好实行3-4年的轮作。
2. 种植优良品种:选择抗病虫害性强的品种进行种植,减少病虫害发生的可能性。
3. 施用农药:可以根据病虫害的种类和严重程度选择适当的农药进行喷洒,但要严格遵守农药使用的安全规定。
地黄的产地分布
地黄的产地分布
地黄为玄参科地黄属多年生草本植物,生于海拔50~1100m的山坡及路旁荒地等处,因其地下块根为黄白色而得名地黄,其根部为传统中药之一,最早出典于《神农本草经》,下面我们就来看一看地黄的产地分布吧!
地黄的产地分布
地黄的产地主要分布于辽宁、河北、河南、山东、山西、陕西、甘肃、内蒙古、江苏、湖北等省区,中国各地及国外均有栽培。
生地黄的产地分布
生地黄喜温和气候及阳光充足之地,怕积水,忌连作,其块根在25-28℃时增长迅速,生于海拔50-1100米之砂质壤土、荒山坡、山脚、墙边、路旁等处。
生地黄原产于中国北京、天津、河南、河北、辽宁、山东、浙江、江苏、安徽、山西、陕西、内蒙古、湖南、湖北、四川等地均有分布,主产地河南、辽宁、河北、山东、浙江。
朝鲜、日本也有。
地黄的产地环境
1、喜肥:地黄喜疏松肥沃的沙质壤土,黏性大的红壤土、黄壤土或水稻土不宜种植。
2、喜光:地黄是喜光植物,植地不宜靠近林缘或与高秆作物间作。
3、温度:当土温在11~13℃,出苗要30~45天,25~28℃最适宜发芽,在此温度范围内若土壤水分适合,种植后一星期发芽,15~20天出土,8℃以下根茎不能萌芽。
从种植到收获需150~160天。
地黄栽培种与野生种内源激素含量的差异
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I SS N 04 9 6 — 3 49 0; CO DEN TS HP A9
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地黄的栽培技术及管理
地黄的栽培技术及管理摘要:地黄是一种常见中药材,也是我国林下种植中药材的首选品种。
本文针对林下种植地黄提出了一些意见和看法,以便供广大相关人员参考。
关键词:地黄;栽培;管理地黄(拉丁学名:Rehmannia glutinosa(Gaetn.)Libosch. ex Fisch. et Mey.),别名生地,是我国北方林下种植常见的中药材品种。
一、品种简介地黄:玄参科地黄,属多年生草本植物,高可达30厘米,根茎肉质,鲜时黄色,在栽培条件下,茎紫红色。
直径可达5.5厘米,叶片卵形至长椭圆形,叶脉在上面凹陷,花在茎顶部略排列成总状花序,花冠外紫红色,内黄紫色,药室矩圆形,蒴果卵形至长卵形,花果期4-7月。
地黄喜温和稍微有点湿润的气候,喜光、喜肥、忌积水,载培时易选择土层深厚,肥沃,排水良好的沙质壤土、粘土地根茎瘦细、质量差,不宜重茬,连作要在三年以上,前茬作物忌萝卜,油料等。
二、栽培技术1、选地整地按倒栽田的要求选择地黄生产田。
可于头年秋收之后,每亩施入腐熟农家肥5000公斤、饼肥150公斤,深翻30厘米。
第二年3月土壤解冻后,每亩施硫酸钾复合肥40公斤,过磷酸钙100公斤,尿素50公斤做基肥,整平耙细。
土壤黏重或低洼、排水不畅的田块,做成底宽50厘米、高25厘米、顶面宽30厘米的垄,在垄面上种植2行。
地势平坦、土壤透水性好的田块做成1.5米宽的平畦,田块四周开挖排水沟,雨季做好排水工作。
2、栽植以根茎繁殖为主,秋季采挖时,选指头粗细的种根沙埋贮存,到来年开春后大地化冻,施足基肥,整平土地,将种根截成3至5厘米的小段,以行株距30×30厘米开穴,每穴大根时放一段,小根放两段,撒少许草木灰(石灰亦可)复土6厘米,15--20℃时10天可出苗,一般亩用种量40至50公斤。
苗高5厘米时,结合除草,间苗,每穴留一棵,如有缺苗断垅者可补载,亩留基本苗4000至6000株,土地肥活者,可适当稀些,贫瘠土地可稍稠些,8000到1万也行。
地黄的种植时间和方法
地黄的种植时间和方法
1 地黄简介
地黄,也叫黄芪、党参,是一种常见的中药材,具有滋阴补肾、
益气养血、清心安神的功效。
地黄的主要产地集中在黄土高原、大别
山区和山西、陕西、甘肃等省份。
2 种植时间
地黄的种植时间一般在3月至4月,此时气温适宜、土壤湿度合适,有利于地黄的生长生长发育。
同时,地黄也可以在9月至10月进
行下种,这样可在来年春季迅速生长。
3 种植方法
3.1 土壤准备
地黄喜欢生长在富含有机质、排水良好、疏松透气的壤土中。
在
进行地黄的种植前,需要对土壤进行充分的准备和改良。
可以在土地
深耕的基础上加入优质的腐熟有机肥或堆肥,提高土壤肥力和保水性。
3.2 种子
地黄的种子一般选择一年生的种子进行种植。
种子的选过程中要
选颗粒饱满、外皮完整、没有病虫害损伤的种子。
选好种子后可以在
种子表面涂抹一层菜籽油或石油减轻病虫害对种子的危害。
3.3 播种
在田间选好适宜的地块后,可以进行地黄的播种。
播种时可以先
将种子泡水,然后在土壤中用指甲轻轻压实,并铺一层覆盖保湿膜,
以保持土壤湿度和温度。
3.4 管护
地黄在生长过程中要保持土壤湿度、适宜温度和适量光照条件。
不能让其受到严重的干旱、涝、热害、寒害等影响。
同时,在地黄生
长过程中还要定期及时除草、病虫害防治,促进地黄健康成长。
4 结语
以上就是地黄的种植时间和方法的介绍。
地黄是一种常见中药材,具有丰富的营养和药用价值,种植方法简单易行,需要耐心与细心,
才能都地黄进行健康成长。
地黄栽培种与野生种内源激素含量的差异
作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2013, 39(7): 1276−1283/zwxb/ ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@本研究由国家自然科学基金项目(81274014)和国家转基因生物新品种培育重大专项(2012ZX09304006)资助。
∗通讯作者(Corresponding author): 王绍华, E-mail: wangsh@第一作者联系方式: E-mail: xeli@Received(收稿日期): 2012-06-25; Accepted(接受日期): 2013-03-11; Published online(网络出版日期): 2013-04-23. URL: /kcms/detail/11.1809.S.20130423.1838.020.htmlDOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.01276地黄栽培种与野生种内源激素含量的差异李先恩1,2 孙 鹏2 祁建军2 周丽莉2 王绍华1,*1南京农业大学农学院, 江苏南京 210095; 2中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所, 北京 100094摘 要: 块根的发育和形成与植物内源激素密切相关。
本研究测定地黄2个栽培种和2个野生种在生长发育过程中内源激素含量表明, 地黄叶片中IAA 、ZR 和ABA 含量变化均呈单峰曲线, 即在拉线期及快速增长期逐渐升高, 之后逐渐降低, 但各生育期栽培种叶片中IAA 、ZR 和ABA 含量均高于野生种; 栽培种与野生种块根中IAA 和ZR 含量变化规律明显不同, 在拉线期与快速增长期, 栽培种迅速上升, 而后逐渐降低, 而在整个生长期野生种变化不明显; 整个生育期参试品种叶片中GA 含量变化不大, 栽培种在快速增长期根中GA 、ABA 的含量迅速上升, 而野生种变化不明显。
从上述变化规律来看, 地黄块根的形成与发育是多种内源激素协同作用的结果。
地黄的种植方法
地黄的种植方法地黄是一种常见的中药材,具有滋阴补肾、养血安神的功效。
地黄的种植方法对于保证品质和产量起着重要的作用。
下面将介绍地黄的种植方法,包括选地、施肥、播种、管理等方面的内容。
一、选地地黄喜欢生长在充足的阳光下,因此选地时应选择光照充足的地方,避免阴暗潮湿的环境。
同时,地黄对土壤要求较高,宜选择土壤肥沃、排水良好的地块进行种植。
二、施肥地黄对土壤肥力要求较高,种植前应进行充分的施肥。
可以选择有机肥、磷、钾等肥料进行施用,以提供充足的营养物质供给地黄生长发育。
三、播种地黄的种子较小,一般采用播种的方式进行繁殖。
播种前,可以将种子进行浸泡处理,提高发芽率。
然后选择适当的时间,一般在春季或秋季进行播种。
可以在地面上开沟,将种子均匀撒在沟内,然后轻轻覆土,保持适当的湿度。
四、管理1.保持适宜的湿度:地黄对水分要求较高,生长期间要保持适宜的湿度。
可以根据天气情况进行浇水,避免过湿或过干。
2.及时除草:地黄生长期间,要及时除草,保持地面整洁,避免杂草对地黄的生长造成影响。
3.防治病虫害:地黄易受到一些病虫害的侵害,如蚜虫、白粉病等。
可以采取合适的防治措施,如喷洒农药、采用生物防治等方式,保证地黄的健康生长。
4.适时疏菌:地黄生长期间,会出现疏菌的情况,需要及时进行疏菌,保持地黄的通风透光。
五、采收地黄的采收时间一般在生长期结束后的秋季,当地黄的地上部分开始枯黄时即可进行采收。
采收时,可以将地黄整株连根挖起,然后进行晾晒或干燥处理,以便后续加工和使用。
六、注意事项1.避免连作:地黄生长期较长,连续种植容易导致土壤养分不足,影响产量和品质。
因此,要注意避免地黄的连作,适当进行轮作。
2.合理施肥:地黄施肥要适量,过多的施肥会导致地黄生长过旺,影响品质。
同时要注意施肥的时机,避免在地黄生长期间过量施肥。
3.防治病虫害:地黄易受到一些病虫害的侵害,要及时采取防治措施,保证地黄的健康生长。
4.科学管理:地黄的管理要科学化,合理安排浇水、施肥、疏菌等工作,提高产量和品质。
地黄的种植技术和管理方法
地黄的种植技术和管理方法
地黄(Scientific name: Rehmannia glutinosa)是一种常见的中药材,其种植技术和管理方法如下:
1. 地理要求:地黄喜温暖湿润的气候和土壤条件,适宜种植于海拔500-1000米的山地、河谷或平原区域。
2. 土壤准备:地黄对土壤要求较高,适宜种植于疏松、排水良好、肥沃的土壤中。
在种植前,应进行翻耕和松土,以保证土壤肥沃度和透气性。
3. 种子处理:地黄一般使用种球繁殖,可将种球放入草木灰中浸泡24小时后,再用清水洗净。
4. 种植方法:选择合适的季节进行种植,春季和秋季均可。
先在地面上开沟,在沟底撒上适量的有机肥料,然后将种球均匀地放入沟中,覆盖土壤。
5. 浇水管理:地黄生长期间需要充足的水源,但要避免水分过多导致积水。
浇水应根据天气和土壤湿度调整,适时适量地供水。
6. 施肥管理:地黄喜肥,种植过程中可适量施入有机肥料和磷、钾等营养元素,促进其生长发育。
7. 病虫害防治:地黄易受到一些病虫害的侵扰,如蚜虫、白粉病等。
可定期巡查,发现病虫害及时采取相应的防治措施。
8. 采收和储存:地黄一般在生长3-4年的时候进行采收,割取地上部分,保留地下块茎。
采收后,应晾晒或蒸汽蒸煮处理,然后储存在通风、阴凉、干燥的地方。
以上是地黄的种植技术和管理方法,希望对您有所帮助!。
《蔬菜栽培学》复习思考题答案
《蔬菜栽培学》复习思考题一、名词解释1、蔬菜可供食用的草本植物和少数木本植物的嫩芽、嫩茎及部分菌类、藻类和蕨类植物2、生长由于细胞数目增多、体积细胞增大,以及细胞内含物增加,而引起的植物体积和重量的不可逆增加3、发育相似个体的形成,表现为新器官的产生4、生长相关植株在生长发育过程中各器官间的相互关系5、多年生蔬菜一次播种或栽植后,多年采收的蔬菜6、生理休眠由本身的遗传性决定的,即无论外界环境是否适宜生长,产品器官形成后必须经过一段休眠后,才能继续生长7、强制休眠由于产品器官形成后,由于不良的季节或环境导致无法继续生长,是适应不良条件的一种被动反应8、温周期现象蔬菜在长期的系统发育过程中,为了适应原产地的环境条件,形成了对昼夜温差有一定的要求的现象9、春化作用二年生蔬菜作物必须经过一定时间的低温,诱导花芽分化后,才能开花结实的现象10、种子春化萌动的种子感受低温,诱导花芽分化11、绿体春化一定大小的植株感受低温、诱导花芽分化12、光周期现象蔬菜植物只有在一定时间光照和一定时间黑暗交替的条件下才能开花结实的现象13、蔬菜种子蔬菜栽培上使用的种子,泛指所有的播种材料14、纯度供检样本中本品种种子占供检样品种子数量的百分率表示15、净度供检样本中种子占供检样本的重量百分率16、发芽率发芽种子数占供试种子数的百分率17、发芽势规定时间内发芽种子数占供试种子的百分率18、发芽年限指一定环境条件下种子保持发芽能力的年限19、使用年限种子可用于生产的年限20、分苗(假植)将小苗从播种床内起出,按一定距离移栽到分苗床中或营养钵中21、间苗拔除密苗、劣苗的作业22、基肥蔬菜播种或栽植前施入田间的肥料23、追肥蔬菜生长过程中施入的肥料24、定植成苗移植到田间的作业25、中耕雨后或灌溉后进行的改善土壤表层结构的田间作业26、培土在植株生长过程中将土壤培于根部的作业27、植株调整过人为的技术措施调控植株各器官生长发育的相关关系,使之有利于产品器官的形成28、整枝果菜类蔬菜栽培中,清除多余分枝以促进果实发育的方法29、摘心摘除生长点的作业30、植物激素植物体能自身合成,天然存在,含量甚微,控制生长发育的物质31、生长调节剂人工合成,有类似植物激素作用的物质32、无公害蔬菜狭义上讲:无公害蔬菜指没有被有害物质污染的蔬菜。
地黄栽培技术
地黄栽培技术地黄(学名:Rehmannia glutinosa)是一种传统中药材,被称为“四大名药”之一。
地黄具有滋阴补肾、生津润燥等功效,广泛应用于肾虚、阴虚、糖尿病等多种疾病的治疗。
而地黄的品质与产量又与其栽培技术密不可分。
本文将介绍地黄的栽培技术,旨在对广大地黄生产者提供实用的指导。
一、适宜生长环境地黄原产于中国北方,它喜欢温暖、湿润的环境。
地黄喜阳,但也怕高温。
夏季过热时,地黄会生长缓慢、无法开花结果。
但也不能太荫凉,掌握好合适的栽培环境是地黄成功种植的保障。
温度:地黄原产地温度适宜在10-26℃之间,应控制好夏季最高温度,选择遮阳、通风良好的地块种植。
湿度:地黄具有喜湿性,土壤湿度要在嫩叶期和花茎生长期时保持60%-70%左右,特别在开花期,宜保持土壤湿润,有条件的情况下生产者可利用水肥一体化技术保持土壤湿润。
土质:地黄土壤宜深厚而富含有机质,需保持土壤的酸碱度在6.5-7.5之间,如果土壤酸性过强,应当进行石灰调节,有机质含量不足时,可新鲜牛粪、叶质肥及骨粉等有机肥进行施用。
二、选择良种、科学布局地黄品种繁多,怎么样才能选择到适合自己的良种呢?首先,品种要适应当地气候及土壤环境,其次,要选择具有优异品质、高产的良种,进行良种扦插繁殖,以此进行规模化种植。
在布局上,地黄采取密植而不采用拨根方法。
可按照田畦分块种植,以利于地力调配、土壤修复。
在地黄的种植间距,以45厘米*30厘米为宜。
栽植时需注意插植方向和种植深度。
三、管理细节地黄生长过程中需要适当的管理和细心的呵护,以促进芽、叶、花生长,增加产量提高品质。
1.灌水:地黄喜湿,灌溉是其生长期的重要环节之一。
开花期为关键期,应增加耕地的湿润度,防止花荒影响产量。
2.施肥:地黄施肥需注意适量不宜过量。
在生长期间,应施有机肥和无机肥配合使用,以满足地黄生长的养分需求。
3.除草:地黄生长过程中应进行及时的除草防虫工作,可利用草本植物等天然方式进行草害防治,若有虫害危害,应及时进行防治。
地黄育种存在的问题
地黄育种存在的问题
地黄育种可能存在以下问题:
1.土壤肥力问题:育种地黄需要肥沃、疏松而不太粘的土壤,土壤肥力不足可能会导致地黄生长缓慢、产量低、品质差。
2.病虫害问题:地黄易受地黄枯萎病、病毒病等病害及虫害的侵袭,对生长造成严重损害。
3.种植环境问题:地黄喜欢温暖湿润的气候环境,如果种植环境不适合,可能会影响其生长和产量。
4.种子选择及处理问题:种子的选择和处理不当也可能影响地黄育种的效果。
针对以上问题,可以采取以下措施进行改善:
1.选择合适的土壤:选择疏松而不太粘的土壤,并进行深耕和施肥,以提高土壤肥力。
2.加强病虫害防治:定期检查地黄生长情况,及时发现并防治病虫害。
3.提供适宜的种植环境:在温暖湿润的环境下种植地黄,以利于其生长。
4.选择优良的品种及适当的处理方法:选用优良的品种,并进行适当的浸种、催芽等处理,以提高种子的发芽率和生长质量。
HPLC法测定不同产地地黄中地黄苷D的含量及耐用性试验研究
HPLC法测定不同产地地黄中地黄苷 D的含量及耐用性试验研究摘要:目的建立地黄药材中地黄苷D含量的高效液相色谱法。
方法地黄苷D采用超声提取,色谱柱为Diamonsil;检测波长:203nm;柱温:35℃;流速:0.8 ml/分钟;流动相:乙腈-0.1%磷酸(5:95)。
结果地黄苷D线性范围17.14~428.5μg /ml,线性方程y=3769X-13682,相关系数r=0.9998;平均回收率100.02%, 相对标准偏差0.007%(n =6)。
不同产地的17批地黄药材中地黄苷D的含量为0.157%~0.547%。
关键词不同产地;地黄;地黄苷D;反相高效液相色谱法。
地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根,味甘、寒,具有清热凉血,养阴生津的功效,用于热入营血,温毒发斑,吐血衄血等。
地黄,始载于《神农本草经》,称为干地黄,列为上品,其后代本草均有收载。
主产于中国河南、河北、内蒙古及东北等地。
地黄的化学成分以甙类为主,其中又以环烯醚萜甙类为主。
成分为梓醇、二氢梓醇、地黄苷A、B、C、D 等;苯乙醇苷类成分为毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷等,采用高效液相色谱法(HPLC)建立了地黄中地黄苷D的含量测定方法。
依据方法学的研究要求,开展了地黄苷D HPLC含量测定的方法耐用性研究。
方法的耐用性系指测定条件发生微小变动时,测定结果保持不受影响的承受程度,考察方法本身对于可变试验因素的抗干扰能力。
HPLC 检测方法的耐用性考察因素包括不同品牌或不同批号的同类型色谱柱、柱温、流速、pH 值和流动相的组成等。
本文采用单因素法,考察了不同品牌及规格的色谱柱、柱温、流速、流动相比例和pH 值等对分离度、理论板数的影响。
1 材料与方法1.1仪器、试剂与样品LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司),SPD-20A紫外检测器;UV-1810型紫外分光光度计购于北京普析通用仪器有限责任公司;BT.125D型电子分析天平购于德国赛多利斯公司; KQ-250型超声波清洗机购于昆山市超声仪器有限公司。
地黄
药理作用
1.生地黄的药理作用
对免疫系统的作用
对免疫系统显示出增强 或抑制作用,参与维护 机体的稳定。生地黄对 小鼠脾脏中玫瑰花形成 细胞有明显抑制作用。 生地黄能明显促进 ConA活化的脾淋巴细 胞DNA和蛋白质的生 物合成。生地黄可明显 抑制巨噬细胞表面la抗 原表面水平,降低其抗 原能力。
产地
河南武陟、温县、孟县、沁阳、博爱; ●山西河津、芮城、绛县、运城、曲沃、永济、 襄汶; ●山东成武、定陶,荷泽、聊城; ●河北临漳,安国、成安、肥乡; ●陕西渭南、夫荔、蒲城; ●广东澄海、翁渭、增城、封开、英德、高州; ●广西贵县、玉林、北流、横县、浦北、桂平等 地。
●
以河南武陟、温县、盂县、博爱所产量大质优, 为著名四大怀药之一 。
理化鉴别
生地黄:薄层色谱 取本品粗粉1g,加80%甲醇50 ml,超声处理30分钟,滤过, 滤液蒸干,加水5 ml使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次10 ml,正丁醇 液蒸干,残渣加甲醇2 ml使溶解,作为供试品溶液。另取麦角甾苷对照品,加甲醇 制成每1 ml含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液 5 μl、对照品溶液2 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-甲酸 (16:0.5:2)为展开剂,展开,取出,晾干。再用0.1%的2,2-二苯基-1-苦肼基无水 乙醇溶液浸渍,晾干。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位臵上,显相同颜 色的斑点。
显微特征
生地黄粉末 1.深棕色。 2.木栓细胞淡棕色。 3.薄壁细胞类圆形, 内含类圆形细胞核。 4.分泌细胞形状与一 般薄壁细胞相似,内 含橙黄色或橙红色油 滴状物。 5.具缘纹孔导管及网 纹导管直径约至92 μm。
液相色谱-质谱法分析地黄生长期中内源性激素的变化
㊀第53卷第3期郑州大学学报(理学版)Vol.53No.3㊀2021年9月J.Zhengzhou Univ.(Nat.Sci.Ed.)Sep.2021收稿日期:2020-09-02基金项目:国家自然科学基金项目(21772180)㊂作者简介:王少敏(1973 ),女,教授,主要从事药物分析研究,E-mail:wshaomin@㊂液相色谱-质谱法分析地黄生长期中内源性激素的变化王少敏1,㊀张蒙蒙1,㊀郭燕子1,㊀陈丽花1,㊀刘宏民2(1.郑州大学化学学院㊀河南郑州450001;2.郑州大学药学院㊀河南郑州450001)摘要:植物激素在调节植物生长和发育过程中起着重要作用㊂首次建立了同时分析地黄叶片和块茎中脱落酸㊁水杨酸㊁吲哚乙酸㊁赤霉素和玉米素等5种植物激素含量的液相色谱-质谱法㊂目标植物激素在线性范围内的相关系数范围为0.9959~0.9992,方法检出限范围为0.013~0.038μg /mL,定量限范围为0.043~0.127μg /mL㊂日内相对标准偏差范围为1.7%~3.2%,日间标准差范围为3.0%~10.5%㊂地黄叶片和块茎中5种植物激素的回收率范围分别是81.9%~106.7%和78.4%~96.7%㊂接着利用此方法分析了不同地黄生长期中叶片和块茎中目标植物激素含量的变化特征,这将有助于了解这些植物激素在地黄生长和发育中的作用㊂关键词:植物激素;地黄;植物发育;液相色谱-质谱中图分类号:R917㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:1671-6841(2021)03-0105-05DOI :10.13705/j.issn.1671-6841.20202860㊀引言植物激素是一类天然存在的信号分子,在细胞分裂㊁分化和生长㊁种子休眠和萌发㊁植物发育㊁结果和衰老等方面起着至关重要的作用㊂根据其多样性和生物学功能,植物激素主要包括乙烯㊁生长素类(auxins,AXs)㊁细胞分裂素(cytokinins,CKs)㊁赤霉素类(gibberellins,GAs)㊁脱落酸(abscisic acid,ABA )㊁水杨酸(salicylic acid,SA)㊁茉莉酸(jasmonic acid,JA)和油菜素类固醇等㊂尽管每类植物激素都有其特定的生物学功能,但它们通常利用协同作用或拮抗作用来共同调节植物对生物和非生物的胁迫反应㊂越来越多的研究表明植物激素信号在植物生命周期中参与复杂的相互作用[1]㊂植物激素由于存在于复杂的生物基质中,且浓度较低,化学性质多样,例如,吲哚乙酸(indole acetic acid,IAA)㊁ABA㊁SA 和赤霉素(gibberellin,GA 3)显酸性,而玉米素(zeatin,ZT)显碱性,这使得对它们的分析相当具有挑战性,需要对不同种类的植物激素进行快速通用的样品预处理及分析方法的开发和验证㊂目前测定植物内源激素的方法主要有气相色谱法(gas chromatography,GC)[2]㊁毛细管电泳法[3]㊁酶联免疫法[4]㊁液相色谱法(liquid chromatography,LC)[5]和液相色谱-质谱联用法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)[6]等,其中LC-MS 联用法由于具有灵敏㊁高效㊁准确的优点,是目前植物激素检测方法开发的方向㊂地黄是一种传统的玄参科中药材,含有丰富的糖和环烯醚萜类物质,其活性成分对免疫系统㊁内分泌系统㊁血液系统㊁神经系统和心血管系统等具有广泛的药理作用[7-8]㊂关于地黄药理㊁药效和活性成分的研究已有大量报道,而关于地黄在自然生长状态下的不同器官中获得的植物激素的内源性变化的研究较少㊂本研究旨在建立一种基于LC-MS 的同时检测地黄中5类激素中5种不同酸碱性内源植物激素的方法,定量分析地黄生长过程中叶片和块茎中ABA㊁SA㊁IAA 和ZT 含量的变化,以期增进对植物激素作用机制的了解,并在合理范围内使用以提高地黄的药用价值的研究㊂601郑州大学学报(理学版)第53卷1㊀实验部分1.1㊀材料、试剂与仪器地黄采自焦作市的试验田,其在6月移植,10月收获㊂期间分别在苗期(6月23日㊁7月31日)㊁拉线期(8月24日)㊁快速增长期(9月17日)㊁成熟期(10月12日)取样,每次收集同一片土地上长势相近的8个样品㊂将样品的叶和块茎分开并用清水冲洗,然后冷冻干燥保存在-80ħ㊂标准品(IAA㊁ZT㊁GA3㊁SA㊁ABA)和内标(苯甲酸)购自Sigma公司;甲酸(优级纯)㊁乙酸(优级纯)㊁甲醇(色谱纯)㊁乙腈(色谱纯)购自Merck公司;乙酸乙酯(分析纯)购自天津市科密欧化学试剂有限公司㊂C18 (Supelclean LC-18)固相萃取(solid-phase extraction,SPE)柱(500mg,3mL)购自Sigma公司;Oasis MAX㊁MCX和HLB SPE柱(60mg,3mL)购自Waters公司㊂实验用水均为Milli-Q超纯水机制备的超纯水㊂HPLC-MS(Waters,美国):2695高效液相色谱仪,2996光电二极管阵列(photo-diode array,PDA)检测器; Q-TOF Micro TM质谱仪;MassLynx V4.1软件系统㊂1.2㊀地黄样品的提取将冻干的地黄样品研磨成粉末,称取2g样品用20mL预冷的甲醇/水(体积比80ʒ20)在4ħ条件下萃取12h,在萃取之前,将内标(1μg/mL的苯甲酸)添加到每个样品中㊂将第一次萃取的残余物用10mL萃取溶剂萃取2h,合并第一次萃取液在40ħ旋蒸除去甲醇㊂之后,12000rpm下离心10min,吸取上清液,用水将上清液体积调至4mL后,加入8mL石油醚除色素㊂萃取分离后,用HCl调节水相的pH值至2.5后,加入两倍体积的乙酸乙酯超声5min并萃取激素㊂酸式提取后,用NH3㊃H2O将水相的pH值调节至9,重复相同的步骤,合并酯相,于40ħ下旋蒸至干㊂叶片提取物用200μL甲醇复溶,经0.22μm有机滤膜过滤后进样分析㊂块茎提取物复溶于2mL甲醇/水(体积比20ʒ80)中,然后进行SPE纯化步骤,见1.3㊂1.3㊀SPE纯化地黄块茎提取物C18SPE柱纯化方法:3mL甲醇㊁3mL水活化小柱,2mL80%的甲醇溶液平衡小柱㊂将块茎粗提取液用HCl调节其pH值至5.6上样㊂用8mL含0.075%的乙酸/水(体积比95ʒ5)的甲醇洗脱,收集洗脱液在40ħ蒸干,200μL甲醇复溶,经0.22μm有机滤膜过滤后进样分析㊂MAX SPE柱纯化方法:3mL甲醇㊁3mL水活化小柱,直接将块茎粗提取液上样,用3mL的5mmol/L乙酸铵洗涤除杂㊂用4mL含2%甲酸的甲醇溶液洗脱目标物,将洗脱液在40ħ蒸干后于200μL甲醇中复溶,经0.22μm有机滤膜过滤后进样分析㊂1.4㊀色谱-质谱仪器分析条件色谱柱为Agilent C18色谱柱(4.6mmˑ250mm,5μm);流动相为甲醇(A)和0.001%的甲酸水溶液(B);梯度洗脱程序为0~5min,40%~60%A;5~10min,60%A;10~15min,60%~80%A;15~20min, 80%~40%A㊂流速为1mL/min;柱后分流比为4ʒ1㊂进样量为10μL;柱温为30ħ㊂电离方式:ESI电离源,负离子模式;毛细管电压2.7kV;锥孔电压20V,离子源温度80ħ,脱溶剂氮气温度180ħ,碰撞电压5V,扫描范围m/z100~500,锥孔气流速50L/h,脱溶剂气流速380L/h㊂所选定量离子如下:ZT,m/z218; GA3,m/z345;SA,m/z137;IAA,m/z174;ABA,m/z263㊂2㊀结果分析与讨论2.1㊀实验条件的优化2.1.1㊀地黄块茎粗提物的纯化方法㊀由于地黄块茎粗提取物中含有大量的有机物干扰植物激素的测定,为降低基质效应,本文比较了4种SPE小柱的纯化效率㊂其中C18和MAX SPE柱纯化方法见1.3,HLB联合MCX柱的纯化方法见文献[9],MAX联合MCX柱的纯化方法见文献[10]㊂在样品中分别加入混标(0.5μg/mL)和内标(0.25μg/mL),通过比较4种SPE方法获得的各激素与内标的相对峰面积发现,5种植物激素的响应信号在C18SPE柱上得到显著提高(表1),因此选择C18小柱纯化样品㊂㊀第3期王少敏,等:液相色谱-质谱法分析地黄生长期中内源性激素的变化表1㊀植物激素在不同固相萃取小柱纯化方法下的响应值Table 1㊀The response of the five phytohormones on four candidate SPE methods ZT GA 3IAA SA ABAMAX 0.706ʃ0.0130.846ʃ0.0100.836ʃ0.0300.818ʃ0.0210.892ʃ0.092C18 2.825ʃ0.037 2.363ʃ0.112 1.540ʃ0.071 2.708ʃ0.041 2.998ʃ0.121MAX +MCX 0.936ʃ0.0200.185ʃ0.0040.815ʃ0.0370.825ʃ0.0510.612ʃ0.012HLB +MCX 0.180ʃ0.0210.874ʃ0.0130.800ʃ0.010 1.701ʃ0.0300.983ʃ0.052㊀㊀注:表中数值为相对峰面积ʃ标准差,相对峰面积为分析物与内标物的峰面积比值㊂图1㊀地黄叶提取物的LC-MS 的TIC 和其中5种植物激素的EICFigure 1㊀LC-MS TIC chromatogram and the corresponding EIC chromatograms of the five phytohormones in a leave sample2.1.2㊀液相色谱洗脱条件的优化㊀以甲醇(A)和水(B)作流动相,选择不同流动相体积比对激素进行洗脱,结果发现,在等度洗脱条件下,激素难以分离且分离时间较长,而采用梯度洗脱,可在20min 内完成对样品的分离㊂缓冲液中酸的存在可以抑制酸性激素的解离,从而改善峰的对称性和分离度,故选择比较了水(B)中甲酸含量为0.001%㊁0.01%㊁0.1%时的分离效果㊂结果发现,当水中甲酸含量为0.001%时,植物激素能获得更好的分离效果及检测灵敏度㊂图1是在1.4分析条件下得到的地黄叶片提取物中5种植物激素的LC-MS 总离子流图(total ion current,TIC)和相应的提取离子流图(extracted ion current,EIC)㊂2.2㊀分析方法的评价在优化条件下,对该LC-MS 方法的线性范围㊁检出限(limit of detection,LOD )㊁定量限(limit of quantitation,LOQ)㊁精密度和回收率进行了验证(表2)㊂用混合标准储备液逐级稀释配制标准曲线所需的浓度,由表2可见,线性相关系数在0.9959~0.9992之间,线性关系良好㊂以混合标准储备液稀释至信噪比(signal-noise ratio,S /N )为3时为检出限,S /N =10时为定量限,得到检出限范围为0.013~0.038μg /mL,定量限范围为0.043~0.127μg /mL㊂对重复性的验证得到日内和日间精度:日内和日间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD )范围分别是1.7%~3.2%和3.0%~10.5%(n =3),表明该方法具有较好的可重复性㊂对回收率的测定分别在叶片和块茎中进行:取2g 植物样品作为空白,分别加入相同体积的水(空白)和各目标激素浓度均为1μg /mL 的混标,经预处理后进样分析,重复3次操作,测得的样品加标浓度扣除空白对照浓度后,除以所加标准品浓度得到加标回收率,所测块茎和叶中5种植物激素的回收率范围分别是78.4%~96.7%和81.9%~106.7%,满足方法准确性要求㊂表2㊀植物激素的线性范围㊁回归方程㊁相关系数㊁检出限㊁定量限㊁精密度和回收率Table 2㊀The linear range ,regression equation ,correlation coefficient ,limit of detection ,limit of quantitation ,precision and recovery of analytes for the target phytohormones化合物线性范围/(μg ㊃mL -1)线性回归方程相关系数检出限/(μg ㊃mL -1)定量限/(μg ㊃mL -1)日内RSD /%(n =3)日间RSD /%(n =3)回收率/%(n =3)块茎叶ZT 0.127~2.00y =1.5386x +0.00760.99680.0380.127 3.0 3.778.483.3GA 30.070~7.90y =1.1082x -0.03140.99590.0210.070 2.710.595.797.5SA 0.077~5.20y =6.4174x -0.64810.99830.0230.077 3.27.586.397.5IAA 0.123~6.00y =1.4558x -0.13050.99920.0370.123 1.7 3.079.281.9ABA 0.043~5.10y =1.4517x -0.08820.99890.0130.043 2.57.796.7106.72.3㊀地黄叶片和块茎中植物激素的分析按照1.2~1.4方法对地黄生长期中叶片和块茎中的5种植物激素进行了跟踪检测,在叶片中可检测到全部目标植物激素,而块茎中未检出GA 3(推测块茎中的GA 3浓度在定量限下),因此我们对地黄生长期中701郑州大学学报(理学版)第53卷叶片和块茎中的除GA3外的其他植物激素的浓度进行了比较分析,结果见表3㊂表3㊀地黄中4种内源性激素的动态变化Table3㊀The dynamics of changes in endogenous amounts of4hormones in Rehmannia glutinosa单位:μg㊃g-1日期叶片中浓度块茎中浓度ZT SA IAA ABA ZT SA IAA ABA6月23日 1.012ʃ0.17923.976ʃ0.6901.953ʃ0.21326.362ʃ0.3090.036ʃ0.0024.607ʃ0.0500.926ʃ0.0501.623ʃ0.102 7月31日 1.217ʃ0.21014.219ʃ0.3202.218ʃ0.18520.182ʃ0.3110.039ʃ0.0043.124ʃ0.1170.921ʃ0.0502.193ʃ0.173 8月24日 1.128ʃ0.09217.524ʃ0.2031.854ʃ0.20616.125ʃ0.2820.035ʃ0.0037.987ʃ0.3050.922ʃ0.0503.687ʃ0.293 9月17日 1.054ʃ0.0925.782ʃ0.1811.124ʃ0.0951.525ʃ0.0200.032ʃ0.0035.092ʃ0.0800.931ʃ0.0401.024ʃ0.102 10月12日1.022ʃ0.1106.103ʃ0.1001.207ʃ0.0941.721ʃ0.0200.040ʃ0.0043.052ʃ0.1030.928ʃ0.0500.906ʃ0.101㊀㊀生长素IAA和细胞分裂素ZT有促进叶片生长扩张的作用㊂由表3可见,地黄叶片中IAA和ZT的含量在叶片生长初期含量较低,之后二者浓度逐渐增加,在七月底和八月初达到顶峰(IAA为2.218μg/g,ZT为1.217μg/g),这段时间叶茎逐渐伸长㊁叶片迅速扩张,之后,其含量下降并在8月底保持在相对稳定的水平,此时叶片生长缓慢,当其浓度在低点时,叶片生长也基本停止㊂SA和ABA在对外界应激中都起着重要作用[11-12],由表3可见,从叶片成熟到脱落,叶片中ABA含量在整个生长过程中呈下降趋势,SA的含量总体呈下降趋势(在8月底和10月底稍有波动),二者均在9月底达到较低水平,并保持稳定状态到最后㊂推测种子播种初期叶片中SA和ABA的含量高有利于植物对抗新生长环境的影响,因为第一次采集时间6月底正是将地黄从室内移植到炎热干旱的外界自然环境中时间,由于环境条件变化大,叶片中的SA和ABA的抗性在移植初期达到最高水平,之后植物叶片抗性减弱,可检测到SA和ABA含量也在降低,到最后阶段含量稳定㊂在块茎的发育过程中IAA和ZT的浓度近似保持稳定状态,根系呈持续生长的状态(表3)㊂ABA的浓度从苗期到拉线期均呈上升趋势,此后逐渐下降,在最后阶段保持稳定直到果实成熟,这种行为与报道[13]中对洋姜的研究结果一致,即低ABA含量增高可能对块茎生长有利㊂由此推测ABA不仅能调节对环境胁迫的反应,还能控制茎的生长,刺激块茎的萌发㊂此外,块茎中SA和ABA的浓度在地黄生长的苗期(7月31日)到成熟期(10月12日)表现出相似的先增高后降低的趋势,这表明SA和ABA对地黄块茎的生长有着协同的作用㊂植物的不同器官对激素的敏感性受多种因素的影响,如植物体内受体的种类和含量㊁细胞对激素的通透性及其代谢周转速率等㊂地黄块茎中生长素IAA的浓度在4个发育时期均低于叶片中的含量,这可能是因为块茎的发育对IAA的含量更敏感㊂块茎中与植物抗性有关的ABA和SA的含量也低于叶片,这可能是因为块茎是储存器官,不需要参与大量的代谢活动的原因(在马铃薯植株中也检测到类似的模式[14])㊂在地黄的整个发育期中块茎和叶中IAA和ZT的整体含量较低,呈现出较小的变化,而ABA和SA的含量较高,呈现出显著的变化,不仅浓度变化范围宽,并且有相似的变化趋势,由此可见,ABA和SA对植物抗性和块茎形成可能有一定的协同作用㊂有报道表明,在使用寄生植物感染的番茄中,在宿主-寄生相互作用的初始阶段, SA和ABA的含量均增加[15],显示出SA和ABA对生物应激的协同抗性作用,同时也有报道SA和ABA对外界应激(包括生物应激和非生物应激)表现出拮抗作用[16],由此可见SA-ABA在植物中作用机制的复杂性,需要更深一步的研究㊂3㊀结论本文建立了一种同时分析地黄组织中的5种不同酸/碱性的内源性植物激素(生长素㊁脱落酸㊁细胞分裂素㊁赤霉素和水杨酸)的LC-MS方法,对在不同的生长时期地黄叶片和块茎中植物激素的水平进行了检测和差异性比较,初步分析了含量动态变化的可能成因㊂由于内源激素水平可以协调内在的发育过程并传达环境信息,这项工作有助于理解植物激素在生理过程中的串扰,以及有助于在地黄不同发育阶段,通过使用外源生长调节剂来调节植物体内激素的水平来影响块茎生长㊁产量和质量的研究㊂801901㊀第3期王少敏,等:液相色谱-质谱法分析地黄生长期中内源性激素的变化参考文献:[1]㊀VANSTRAELEN M,BENKOVÁE.Hormonal interactions in the regulation of plant development[J].Annual review of cell anddevelopmental biology,2012,28:463-487.[2]㊀RAWLINSON C,KAMPHUIS L G,GUMMER J P A,et al.A rapid method for profiling of volatile and semi-volatile phytohor-mones using methyl chloroformate derivatisation and GC-MS[J].Metabolomics,2015,11(6):1922-1933.[3]㊀郭振朋,王晓瑜,陈义.反向电渗流非水毛细管电泳法快速测定微量赤霉素[J].色谱,2017,35(1):65-69.GUO Z P,WANG X Y,CHEN Y.Rapid determination of micro gibberellins by non-aqueous capillary electrophoresis with reversed electroosmotic flow[J].Chinese journal of 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vibration amplitude of the stayed cable was lower, but the possible fatigue damage could not be ignored;the lock-up interval of the stayed cable vortex-in-duced vibration was very short,the trajectory of the stay cable was also richer,no longer a single 8 -shaped movements.Key words:stay cables;vortex induced vibration;CFD;overset mesh;two degree of freedom model(责任编辑:方惠敏㊀孔㊀薇)(上接第118页)Analysis of Endogenous Hormones Changes during the Growth of Rehmannia glutinosa by Liquid Chromatography TandemMass SpectrometryWANG Shaomin1,ZHANG Mengmeng1,GUO Yanzi1,CHEN Lihua1,LIU Hongmin2(1.College of Chemistry,Zhengzhou University,Zhengzhou450001,China;2.School of Pharmaceutical Sciences,Zhengzhou University,Zhengzhou450001,China) Abstract:Phytohormones play an important role in the regulation of plant growth and development.A method for simultaneous determination of the phytohormones namely indoleacetic acid(IAA),zeatin (ZT),gibberellic acid(GA3),salicylic acid(SA)and abscisic acid(ABA)was developed.The method showed good linearity(correlation coefficient,R2values of0.9959~0.9992)for the target phy-tohormones.The limit of detection and limit of quantitation were in the ranges of0.013~0.038μg/mL and0.043~0.127μg/mL,respectively.The intra and inter-day precision were in the range of1.7%~3.2%and3.0%~10.5%,respectively.The recoveries of the analytes in leaves and roots were in the range of81.9%~106.7%and78.4%~96.7%,respectively.The method was applied to investigate the changes of the phytohormone levels in the leaves and roots during the development stages of Rehmannia glutinosa and the variation characteristics of the phytohormones were preliminarily discussed,which could be helpful to understand the role of these hormones in plant growth and development.Key words:phytohormones;Rehmannia glutinosa;plant development;liquid chromatography-mass spectrometry(责任编辑:王浩毅㊀方惠敏)。
空心莲子草不定根与贮藏根中六种内源激素含量比较
空心莲子草不定根与贮藏根中六种内源激素含量比较陈中义;李华成【摘要】研究了入侵植物空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)未膨大的不定根和膨大的贮藏根之间6种内源激素含量的差异,以及从贮藏根顶端到末端内源激素含量的分布情况。
结果表明,无论不定根还是贮藏根,ABA在6种内源激素中含量最高,其次为IAA,其余4种内源激素(BR,GA,JA,ZR)含量较低,ABA和IAA是空心莲子草根系中两种重要的内源激素;贮藏根中ABA和BR的含量极显著高于不定根(P≤0.01),ABA和BR可能在空心莲子草不定根膨大过程中具有重要作用;IAA、GA、JA、ZR 4种内源激素在不定根和贮藏根中的含量差异不显著(P≥0.05)。
在空心莲子草贮藏根中,BR表现出明显的从顶端向末端递减规律,IAA在贮藏根中部的含量最高,ABA、GA、JA、ZR 4种内源激素在贮藏根顶部、中部、尾部的含量差异不显著(P≥0.05),分布比较均匀。
%Differences of six endogenous hormone contents between smooth adventitious root and swollen storage root of A lter-nanthera philoxeroides were studied, and the distribution of endogenous hormones contents from the top to the end of storage root was also examined. The results showed that, whether in adventitious root or in storage root, the content of ABA was the highest in 6 endogenous hormones, followed by IAA, and the contents of other four endogenous hormones﹙BR,GA,JA,ZR﹚were low, which indicated that ABA and IAA were two important endogenous hormones in the roots of Alternanthera philoxe-roides. The contents of ABA and BR in storage root were significantly higher than that in adventitious root ﹙P≤0.01﹚, so A-BA and BR might play an important role in the swollen process ofadventitious root. The contents of other four endogenous hormones﹙IAA, GA, JA, ZR﹚ between adventitious roots and storage root had no significant difference﹙P≥0.05﹚. In the stor-age root of Alternanthera philoxeroides, BR showed obvious diminishing trend from the top towards the end, the highest con-tent of IAA was in the middle part in the storage root of Alternanthera philoxeroides, and the contents of ABA,GA,JA,ZR among the top, middle, and end of storage root had no significant difference﹙P≥0.05﹚, showed an uniform distribution.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2016(055)023【总页数】4页(P6144-6146,6163)【关键词】空心莲子草(Alternanthera philoxeroides);不定根;贮藏根;内源激素含量【作者】陈中义;李华成【作者单位】长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025;长江大学园艺园林学院,湖北荆州 434025【正文语种】中文【中图分类】S45;S482.8植物内源激素作为植物体内的痕量信号分子,对于调节植物各种生长发育过程和环境的应答具有十分重要的意义[1]。
中草药地黄的种植技术
中草药地黄的种植技术地黄,又称黄芪、黄秦、升麻、地血、土丹、地牛黄、地青、五倍子等,是一种常见的中草药材。
地黄富含黄酮类化合物、萜类化合物、生物碱、多糖等多种活性成分,具有补肾壮骨、滋阴补血、清热解毒、降血压、抗肿瘤等药理作用,因此在中医药中广泛应用。
地黄的种植技术是影响其质量和产量的重要因素。
本文将介绍地黄的种植技术。
一、地黄的适宜环境二、地黄的品种选择地黄的品种较多,市场上比较流行的有“山东金地黄”、“云南地黄”等,其中山东金地黄是品质较优的地黄品种。
三、地黄的繁殖方法地黄的繁殖方法一般采用分根繁殖和嫁接繁殖两种方法。
(一)分根繁殖地黄分根繁殖是将成年植株拔出地面,清洗干净后,分离出生长良好、根系健壮的根茎分别种植。
一般在3-5年后就可获得新的茎杆和根系。
分根繁殖的种植基地应选择土质松散、排水良好、阳光充足的地方,避免连种连作,以免土壤疲劳。
(二)嫁接繁殖地黄嫁接繁殖是将地黄的嫁接穗和砧木进行接合,形成嫁接苗,以增加地黄的产量和抗逆性。
一般选择树状地黄作为砧木,选择茎尖粗壮、尚未开花的地黄作为嫁接穗,进行清剪、接合和保护。
四、地黄的栽培技术(一)土壤准备地黄避免连作连种,选择排水良好、pH值在6.0~7.5之间的土壤。
在秋季进行翻耕,将秸秆等残留物质深埋于地下,保持土壤肥沃。
(二)施肥方法地黄的肥料主要是农家肥和人工有机肥。
在种植前充分施足肥料,在地下堆肥的予以深翻,增加土壤通透性。
(三)开墒根据不同的栽培区域和地域环境,选择合适的开墒时间和深度,保证地黄的生长发育。
(四)浇水和排涝管理地黄在生长期需要充足的水分和充足的排涝。
施肥后要淋透,适量控制浇水时间和浇水量,以避免过浇和萎缩现象。
同时保持水分充足,增加土壤湿度,利于地黄的生长。
五、地黄的病虫害防治地黄的主要病虫害有泥线虫、叶斑病、锈病、炭疽病、黄花叶、菜粉虱等。
防治措施是加强基地卫生管理,加强田间管理,早期发现病虫害,及时控制药剂防治,以避免病害扩散。
四大怀药的道地性
“四大怀药”的道地性经过漫长的实践和摸索,不同产地的中药材在医疗效果上的差异逐步被医药界认识,于是提出了药材道地与否的理论。
历史上最早记载用药要重视道地产地的,是南北朝时期名医陶弘景,他说:‚诸药所生,皆的有境界……小小杂药,多出近道,气力性理,不及本邦‛。
公元659年(唐高宗显庆四年),唐朝颁行的第一部药典《新修本草》出版,孙志约在《序》中说:‚动植形生,因地舛性……离其本土,则质同而效异‛。
药王孙思邈也一再强调:‚古之医者,自解自采,阴干曝干皆如法。
用药必依土地,所以治病十愈八九;今之医者,不知采取时节,至于出产土地,新、陈、虚、实,一皆不悉,所以治病十得五也‛。
到了宋朝,药物学家寇宗奭又强调:‚凡用药必择土地可宜者,则药力巨,用之有据。
……若不推究厥理,治病徒费其功‛。
李杲也说:‚凡诸草、昆虫,产之有地;根、叶、花、实,采之有时。
失其地,则性味少异;失其时,则气味不全‛。
当代道地药材理论权威、中国中医药研究院中药研究所教授赵桔材先生,针对中药材道地性强调:‚‘土地所出’是评价药材质量的重要指标‛。
河南省中药研究专家赵曦也强调:‚地道药材是中药界的脊梁,是中医最有效、最信任的武器,是研究新药取之不尽的源泉,在生产经营中具有举足轻重的地位。
‛在中药史上有‚非地道药材就没有中药‛之说。
陶弘景首创了‚道地药材‛的理论,并进行了长期的探索和寻找。
经过多年的实践和探寻,一直到唐朝,医药界才逐步公认:地黄、山药、牛膝、菊花以唐朝怀州(今焦作市所辖武陟、沁阳等县)所产最为地道。
并为区别其他产地的产品,逐步对这四种药材冠以‚怀‛字。
为什么以武陟为主的焦作市辖区产的地黄、山药、牛膝、菊花最为道地,主要有两个方面的因素。
1、无可比拟的自然条件和加工方法奠定了道地四大怀药基础。
古怀州属温暖大陆性季风气候,是黄沁河冲积平原。
境内的黄河、沁河、蟒河、济水、沙河等十数条河流,就像拧麻花一样在这里滚来滚去,在反复的冲击改道中形成了这片冲积平原。
地黄用法
药材鉴别
取该品粉末1g,加乙醇10ml,浸泡24小时,滤过,滤液作为供试品溶液。另取
熟地黄
5-羟甲基糠醛对照品,加乙醇制成每1ml中含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(60~90℃)-醋酸乙酯(1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。[1]
⑶砂仁制熟地黄:取净生地黄,加入黄酒,砂仁粉拌匀,装铜罐或其他适当容器内,密闭,以武火加热,隔水炖约48h,至内外漆黑,发空为度,取出,晾至八成干,切厚片,干燥。每生地黄100kg,用黄酒30~50kg,砂仁粉1kg。[3]
⑷熟地黄炭:取熟地黄片置锅内,用武火炒至发泡鼓起,表面焦黑色,内部焦褐色,喷淋清水少许,再炒至水气逸尽,置适宜容器内,密盖,灭尽火星,取出,晾干凉透。用于养血止血。[3]
⑹《本草正》:熟地黄性平,气味纯静,故能补五脏之真阴,而又于多血之脏为最要,得非脾胃经药那且夫人之所以有生者,气与血耳。气主阳而动,血主阴而静,补气以人参为主,而芪、术但可为之佐辅一卜血以熟地为主,而芎。归似叮为之佐。然人蔑、术、芎、归,则又有所当避,而入参、熟地,则气血之必不可无,故凡诸经之阳气虚者,非人参不可,诸经之明血虚者,非熟地不可。凡诸真阴亏损者,有力发热,为头疼,为焦渴,为喉痹,为嗽痰,为喘气,或脾肾寒逆为呕吐,或虚火载血于口鼻,或水泛于皮肤,或阴虚而泄利,或阳浮而狂躁,或阴脱而仆地,阴虚而神散者,非熟地之守不足以聚之;阴虚而火升者,非熟地之重不足以降之;阴虚而躁动者,非熟地之静不足以镇之;阴虚而刚急者,非熟地之甘不足以缓之;阴虚而水邪泛滥者,舍熟地何以自制;阴虚而真'气散失者,舍熟地何以归源;阴虚而精血俱损,脂膏残薄者,舍熟地何以厚肠胃,且犹有最玄最妙者,则熟地兼散剂方能发汗,何也以汗化于血,而无阴不作汗也。熟地兼温剂始能回阳,何也以阻生于下,而无复不成乾也,然而阳性速,敌人参少用,亦可成功,阴性缓,熟地非多,难以奏效。而个人有畏其滞腻者,则崔氏何以用肾气九而治痰浮:有畏其滑泽者,则仲景何以用八味丸而医肾泄。又若制用之法,有用姜汁拌炒者,则必有中寒兼呕而后可;有用砂仁制看,则必有胀满不行而后可;有用酒拌炒者,则必有经络壅滞而后可,使无此数者,而必欲强用制法,是不知用熟地者正欲用其静重之妙,
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地黄栽培种与野生种内源激素含量的差异
李先恩1,2
孙 鹏2
祁建军2
周丽莉2
王绍华1,*
1 南京农业大学农学院,江苏南京 210095;2 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100094
摘 要:块根的发育和形成与植物内源激素密切相关。本研究测定地黄2个栽培种和2个野生种在生长发育过程中 内源激素含量表明,地黄叶片中IAA、ZR和ABA含量变化均呈单峰曲线,即在拉线期及快速增长期逐渐升高,之后 逐渐降低,但各生育期栽培种叶片中IAA、ZR和ABA含量均高于野生种;栽培种与野生种块根中IAA和ZR含量 变化规律明显不同,在拉线期与快速增长期,栽培种迅速上升,而后逐渐降低,而在整个生长期野生种变化不明显; 整个生育期参试品种叶片中GA含量变化不大,栽培种在快速增长期根中GA、ABA的含量迅速上升,而野生种变化 不明显。从上述变化规律来看,地黄块根的形成与发育是多种内源激素协同作用的结果。IAA和ZR是块根起始分化 关键激素,决定了块根的形成,GA、ABA在地黄块根的发育与膨大中起了更重要的作用。 关键词:地黄;栽培种;野生种;植物激素
作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2013,39(7):1276-1283 ISSN 0496-3490;CODEN TSHPA9
D O I:10.3724/SP.J.1006.2013.01276
http:///zwxb/ E-mail:xbzw@
Ch a n g e s of H o r mon e s in C u ltiv a r s an d tin o s a L ib o sc h .
Wild -T y p e V a r ieties of R e h man n ia g lu -
LI Xian-E n , 1,2 SU N Peng2,Q I Jian-Jun2,Z H O U Li-Li2,and WA N G Shao-H ua1,* 1 College of Agriculture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;2 Institute of Medicinal Plant Development,China Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College,Beijing 100094,China
A bstract:The form ation and developm ent of tuberous roots is related to plant endogenous horm ones.We determined the contents of IAA ,ZR ,G A ,and ABA in leaves and roots of two cultivars and two wild-type varieties of Rehmannia glutinosa during the grow th periods and com pared their developm ental changing trends between cultivars and wild-type varieties of Rehmannia glutinosa.The results show ed that the contents of IAA ,ZR ,and ABA in leaves of cultivated Rehm annia glutinosa were higher than those of wild-type varieties and their changes in both cultivated and wild type of R.glutinosa displayed the saine single-peak curves during the grow th periods,they were all increased gradually at the elongation and rapid enlargem ent stages of roots and then decreased gradually.There was no significant developm ental change in GA content in the leaves of both cultivated and w ild-type varieties.H orm one contents in roots of cultivars had quite different developm ental changes from those of wild-type varieties.The contents of IAA ,ZR ,and ABA in the cultivars presented the changing trend of single-peak curves during root grow th periods while GA content increased rapidly in root enlargem ent stage.There was no much developm ental change in IAA and GA contents in roots of wild-type varieties.ZR content decreased gradually with the root developm ent in wild-type varieties. A BA content changed in roots of wild-type varieties displayed a single-peak curve which was much low er than that of the cultivars.This different developm ental changes of horm one contents in rehm annia roots between cultivars and wild-type varieties indicated that the developm ent of the rehm annia tuberous roots is affected by synergitic effects of several horm ones and that IAA and ZR act on the initiation of tuberous roots,w hereas GA and ABA play a more im portant role in root enlargem ent and thickening. K eyw ords:Rehmannia glutinosa Libosch;Cultivar;W ild-type varieties;H orm ones