实验室常用溶液的配制
实验室常规试验所需溶液的配制
实验室溶液的配制一.蛋白试验(1)4%的硼酸吸收液:分析纯硼酸,4g溶于50ml水,加热使其溶解,冷却,再用蒸馏水标至100ml。
(2)40%的氢氧化钠:分析纯氢氧化钠,40g溶于100ml水。
(4)0.1mol/L盐酸标准溶液:量取9ml盐酸(GB622,分析纯),用蒸馏水定容到1000ml,摇匀。
标定:在电子天平上准确称取5份烘干至恒重的基准无水碳酸钠,每份0.2g左右,记下所称的基准无水碳酸钠的质量m,将5份基准无水碳酸钠分别置于5个250ml锥形瓶中(提前标号),加入50ml水,加2~3滴甲基红指示剂,然后用待标定的0.1mol/L的HCL标准溶液滴定至溶液由黄色变为灰红色,记下消耗的盐酸标准液的体积Vo,然后将滴定完的锥形瓶在电炉上烧至沸腾,然后转小火保持沸腾2分钟,溶液中的二氧化碳被赶出后溶液又变为蓝绿色,冷却,再用盐酸标准溶液滴定至溶液变为灰红色,记下消耗的盐酸标准液体积Vi,两次滴定之和即为消耗的盐酸标准液体积。
平行滴定5份基准无水碳酸钠,记录好每份的数据。
计算公式:C(Hcl)=m/(V o+Vi)×0.05299,五次结果的平均值即为盐酸标准液的浓度,将盐酸标准液转入1000ml容量瓶保存即可。
贴上标签标明配制时间,配制人,溶液浓度。
注:测凯氏定氮仪漏气不漏气的方法——取分析纯硫酸铵0.2g左右做蛋白试验,测其氮含量,作3个平行试验,测得硫酸铵含氮量为21.19%±0.2%,否则应检查加减,蒸馏,滴定各步骤是否正确。
二.钙的测定(1)10%o淀粉溶液的配制:10g淀粉溶于水,加热使其溶解,冷却后转移到1000ml容量瓶,用蒸馏水定容到1000ml。
(2)1/1三乙醇胺溶液(即50%溶液):取100ml三乙醇胺溶于100ml蒸馏水中,摇匀,贴上保存于磨口瓶中。
(3)1/1乙二胺溶液:取100ml乙二胺溶于100ml水中,摇匀,贴上标签保存于磨口瓶中。
(4)200g/LKOH溶液:用电子天平称取40g分析纯氢氧化钾,溶于1000ml蒸馏水中(通风橱中进行),搅拌后放置,溶解完全后转移至磨口瓶中,贴上标签保存。
实验室溶液配制
实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l;氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%;准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%;准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%;准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l;硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%;准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L;准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂10标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇AR1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸77.68ml或称取93.216g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;16.甲基橙指示剂,C=0.1%,准确称取甲基橙固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;17.邻苯二甲基二辛酯DOP标准液C=100ppm配制:用1ml移液管移取1mlDOPAR加入250ml容量瓶中,并用二氯甲烷稀释至250ml定容,摇匀即可得DOP浓度为4000ppm溶液;用5ml移液管移取浓度为4000ppmDOP溶液2.5ml,加入100ml 容量瓶中,用二氯甲烷稀释至100ml,摇匀即可得浓度为100ppmDOP溶液;18.钼酸铵溶液的配制,C=5%,准确称取钼酸铵固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;19.硫酸溶液,C=10mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体543.9ml稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;20.氢氧化钠溶液,C=5%,准确称取氢氧化钠固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;21.氯化亚锡溶液,C=10%,准确称取氯化亚锡固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,溶液配置完成后向其中投入锡粒一颗并保存于大口瓶中;22.二氧化硅贮备液,1ml相当于1.0mg二氧化硅:准确称取分析纯硅酸钠4.730g分子式Na2SiO3·9H2O,分子量284.22溶于200ml蒸馏水中,并与1L容量瓶中定容,保存于塑料瓶中;23.二氧化硅工作液,C=20ppm,用移液管移取二氧化硅贮备液20ml与1L容量瓶中定容,即可得上述浓度溶液,保存于塑料瓶中;24.硫酸溶液,C=1mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体54.4ml或称取100.096g稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;25.硫代硫酸钠溶液,C=0.05mol/l,硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体7.9055g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;26.硼酸溶液,C=2%,准确称取硼酸固体2g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中;27.氢氧化钠溶液,C=40%,准确称取硼酸固体40g,溶于50ml蒸馏水中,冷却后在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中或胶塞玻璃瓶中;=1.2039.11%,1.1529.57%、28.盐酸溶液,C=0.05mol/l,分子量36.46,D1541.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸3.884ml或称取4.661g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;29.甲基红乙醇溶液,C=1%,准确称取甲基红固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;30.溴甲酚绿乙醇溶液,C=1%,准确称取溴甲酚绿固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;31.甘油水溶液,C=2%,准确移取甘油AR2ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;32.盐酸溶液,C=6mol/l,分子量36.46,D15=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、41.0510.17%;准确量取39.11%盐酸466.08ml或称取559.296g,稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;33.氢氧化钠溶液,C=6mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体240g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;34.氢氧化钠溶液,C=1mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体40g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液配制实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um 的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g 0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g 0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g 加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43?, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
实验室溶液配制
实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l。
氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%。
准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%。
准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%。
准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l。
硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%。
准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L。
准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂(10)标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇(AR)1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.20(39.11%),1.15(29.57%)、1.10(20%)、1.05(10.17%)。
实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。
加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。
用Nalgen e滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的p H值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallin ckrodt),搅拌过夜,然后用What man 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。
放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
配制溶液的方法有
配制溶液的方法有
配制溶液的方法主要有以下几种:
1. 固体溶解法:将固体溶质加入到溶剂中,通过搅拌和加热使其溶解。
这是最常用的配制溶液的方法,比如将盐加入水中配制盐水。
2. 溶液稀释法:当需要调整溶液浓度时,可以通过溶液稀释的方法进行。
将已有的浓溶液取出一部分,加入适量的溶剂使其稀释,从而得到所需浓度的溶液。
3. 液体混合法:将两种或多种溶液混合在一起,通过计算混合前后的溶质浓度和容积,可以得到所需浓度的溶液。
这种方法常用于配制某些特定浓度的试剂液。
4. 稀酸稀碱稀化法:将浓度较高的酸、碱加入到大量的水中,通过稀化的方法得到所需浓度的酸碱溶液。
这种方法常用于配制实验室中的常用酸碱溶液。
5. 水合物溶解法:有些化合物具有结晶水,通过将结晶体加入到水中,可以得到溶解度较高的溶液。
这种方法常用于配制一些含水合物的溶液。
在配制溶液时,需要注意以下几点:
1. 需要准确称量溶质和溶剂,以保证溶液浓度的准确性。
2. 溶质的溶解度和溶剂的性质需要考虑,确保溶解度足够高,否则溶质不易溶解或溶液浓度无法满足需求。
3. 在溶质溶解过程中,可以适当加热或搅拌促进其溶解,但需注意加热时避免溶液溢出或溶质分解。
4. 配制过程中,需要注意实验室安全,避免对身体和环境造成伤害。
总之,配制溶液的方法多种多样,具体选择哪种方法要根据实际情况和需求确定。
在操作过程中,需要严格控制溶质和溶剂的量,充分考虑溶液的浓度和溶解度,以确保得到所需浓度的溶液。
同时还需注重实验室安全,遵守操作规范,保证人身安全和环境保护。
20种实验室常用溶液配制与标定方法
20种实验室常用溶液配制与标定方法乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)C10H14N2Na2O8•2H2O=372.2418.61g→1000mL 【配制】取乙二胺四醋酸二钠19g,加适量的水使溶解成1000mL,摇匀。
【标定】取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.12g,精密称定,加稀盐酸3mL使溶解,加水25mL,加0.025%甲基红的乙醇溶液1滴,滴加氨试液至溶液显微黄色,加水25mL与氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)10mL,再加铬黑T指示剂少量,用本液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正。
每1mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于4.069mg的氧化锌。
根据本液的消耗量与氧化锌的取用量,算出本液的浓度,即得。
【贮藏】置玻璃塞瓶中,避免与橡皮塞、橡皮管等接触。
乙醇制氢氧化钾滴定液(0.5mol/L)KOH=56.1128.06g→1000mL【配制】取氢氧化钾35g,置锥形瓶中,加无醛乙醇适量使溶解并稀释成1000mL,用橡皮塞密塞,静置24小时后,迅速倾取上清液,置具橡皮塞的棕色玻瓶中。
【标定】精密量取盐酸滴定液(0.5mol/L)25mL,加水50mL稀释后,加酚酞指示液数滴,用本液滴定。
根据本液的消耗量,算出本液的浓度,即得。
本液临用前应标定浓度。
【贮藏】置橡皮塞的棕色玻瓶中,密闭保存。
四苯硼钠滴定液(0.02mol/L)(C6H5)4BNa=342.22 6.845g→1000mL【配制】取四苯硼钠7.0g,加水50ml振摇使溶解,加入新配制的氢氧化铝凝胶(取三氯化铝1.0g,溶于25mL水中,在不断搅拌下缓缓滴加氢氧化钠试液至pH8~9),加氯化钠16.6g,充分搅匀,加水250mL,振摇15分钟,静置10分钟,滤过,滤液中滴加氢氧化钠试液至pH8~9,再加水稀释至1000mL,摇匀。
【标定】精密量取本液10mL,加醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)10mL与溴酚蓝指示液0.5mL,用烃铵盐滴定液(0.01mol/L)滴定至蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mgX-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2gIPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL 分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11gCaCl(或者CaCl:2H2O1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(YeastExtraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/LTris-Cl(PH7.5)、15mmol/LNaCl中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG2500.35g室温下可储存,一般4℃Bradford工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA1mM0.292g(EDTA-2Na-2H2O)0.372g定容至1L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA5mM1.46g(EDTA-2Na-2H2O)1.86g尿素2M120gTritonX-1000.5%5ml脱氧胆酸钠盐0.1%1g定容到1L调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mMHEPES0.002mol=0.476g加入0.952g1.5mMMgCl20.00015mol=0.0036g加入0.0072g0.2mMEDTA0.00002mol=0.00584g加入0.01168g0.1MNaCl0.01mol=0.58g加入1.16g0.5mM钒酸钠0.00005mol=0.0092g加入0.0184g加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mMDTT总体积500μL加入0.1μL0.4mMPMSF总体积500μL加入20μL1%SDS加入50μL10%SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl80.0669gKCl2.0129gNa2HPO414.1960gKH2PO42.4496g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.43,137mMNaCl,and2.7mMKCl4转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸2.9gTris5.8gSDS0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris碱(Mr121.14)30.2g甘氨酸(Mr75.07)188gSDS(Mr288.38)10g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01MTris-Cl(pH6.8)60.55gTris碱溶解于400ml蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5MTris-Cl(pH8.8)90.83gTris碱溶解于400ml蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
实验室常用溶液的配制标准程序
实验室常用溶液的配制标准程序3 、适用范围XXXX研发部常用溶液:3M 醋酸钠、2N NaOH 、5M NaCL、Solution Ⅰ、Solution ⅡSolution 、Solution Ⅲ、LB培养基、1M Tris-HCl 、10 ×TE Buffer 、10 ×PBS Buffer 、苯酚/ 氯仿/ 异戊醇、10%(W/V )SDS 、0.5M EDTA(pH 8.0) 、50 ×TAEBUffer 、20 ×SSC 、封闭缓冲液(Wester杂交)。
4 、配制4.1 、用具干燥洁净的200ml量桶一只,三角烧瓶两只,天平一架,250ml、1000ml广口瓶各一只。
4.2 、配制步骤4.2.1 、配制NaAC溶液⑴用天平称取40.8克分析纯的NaOAC固体,置于250ml三角烧瓶中。
⑵用100ml量桶准确取40ml去离子水,摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解⑶加去离子水将溶液定容到100ml⑷高压灭菌后,室温保存。
4.2.2 、配制NaOH溶液⑴用100ml量桶准确取80ml去离子水,置于250ml三角烧瓶中。
⑵用天平称取8克NaOH固体缓缓加入三角烧瓶中。
⑶摇荡混匀溶液。
用去离子水将溶液体积定容到100ml。
⑷将混匀的溶液转移入玻璃瓶中,室温保存。
4.2.3 、配制NaCL溶液⑴用天平称取292.2克NaCL固体置于1L烧杯中,加入800ml的去离子水后搅拌溶解。
⑵加去离子水将溶液定容至1L,适量分成小份。
⑶高压灭菌后,4 0 C 保存。
4.2.4 、配制Solution Ⅰ溶液(1)量取1M Tris-HCL(ph8.0) 25ml ,1.5M EDTA(ph8.0) 20ml , 20 %Glucose(1.11M) 45ml, dH 2 O 910ml , 置于1L烧杯中。
(2)高温高压灭菌后,4 0 C 保存。
(3)使用前每50 ml的Solution Ⅰ加入2 ml 的RNaseA(20mg / ml).4.2.5 、配制Solution Ⅱ溶液(1) 量取10 %SDS 50 ml, 2N NAOH 50 ml, 置于500 ml 烧杯中。
实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制1.30%丙烯酰胺溶液(100ml)【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’—亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中.加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。
用Nalgene滤器(0。
45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于4℃温度。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性.称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具.可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸,因此大于1年的溶液应该被丢弃。
2.40%丙烯酰胺(用于DNA测序,1L)【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml 的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
置棕色瓶中保存于室温。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定.3.0。
1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液(1ml)【配制方法】在0。
8ml蒸馏水中溶解60mg ATP,用0。
1mol/L NaOH调至pH值至7。
0,用蒸馏水稀释1ml【注意】分装成小份保存于—70℃4.10mol/L乙酸铵溶液(1L)【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中,加水稀释至1L后过滤除菌.在4°C储存。
【注意】乙酸铵是热不稳定的.不要高压灭菌.5.10%过硫酸铵溶液(10ml)【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至10ml.该溶液可在4℃保存数周。
实验室常用溶液配方
常用溶液配方(细胞培养)PBS配制一、PBS配方配1L 25倍PBSNaCl 200gNa2HPO4-2H2O 36g 最难溶最后加或Na2HPO4-12H2O 72.4gNaH2PO4-2H2O 6.5g 或NaH2PO4 5g搅拌,1000ml定容,调PH值至7.2—7.4(细胞培养)1倍PBS配方NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.44g 或者Na2HPO4-12H2O 3.57gKH2PO4 0.24g加水定容至1L,调PH值7.2-7.4(细胞培养)10倍PBS配方NaCl 80gKCl 2gNa2HPO4 14.4g 或者Na2HPO4-12H2O 35.7gKH2PO4 2.4g(组化用)PBS配方配1L 10 倍PBSNaHPO4 10.9g 或Na2HPO4-12H2O 27.50gNaCl 90gNaH2PO4 3.2g 或NaH2PO4-2H2O 4.16g搅拌,1000ml定容,调PH至7.2,分装,常温保存配1倍PBS(0.01PBS)1.取50ml 10倍PBS,倒入容量瓶2.定容至500ml,摇匀,分装二、胰酶的配制:0.25%胰酶1倍PBS 1000ml胰酶粉(trypsin)2.5gEDTA 0.4g搅拌后4摄氏度过夜,然后用NaOH调PH值至7.2-7.4;用0.22um滤器(绿色滤器)过滤分装保存。
三、培养基配制L-DMEM配制1L培养液:L-DMEM 10gNaHCO3 2.2g双抗1%(11ml)胎牛血清110ml注:国产胎牛血清需要56℃,30min灭活加完混合后,用0.22um的滤器过滤除菌,4摄氏度保存。
低糖冻存液的保存冻存液:L—DMEM:血清:DMSO=6:3:1注:(DMSO要缓慢加入,以防散热不均,下面要垫上冰块,助散热。
配好后用0.22微米滤器过滤,分装,4℃保存1640培养液配制1L体系:1640干粉10.3g/LNaHCO3 2g双抗1%100倍谷氨酰胺10mlβ-巯基乙醇3.5 uL胎牛血清10%(灭活)0.22微米滤器过滤,4℃保存。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
实验室常用溶液配制
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
实验室常用溶液配制
Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should havea final concentration of 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessarydepending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should be kept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液配制。
1. 酸液配方:K2Cr2O2:100g 加热助溶,冷却后加浓H2SO4。
H2O:750mlH2SO4:275ml注:切不可将K2Cr2O2倒入H2SO4中,以防爆炸。
2. D-HanK’s g/LNaCl:8gKCl:0.4gNa2HPO4·H2O:0.06g / Na2HPO4:0.0534gKH2PO4:0.06gNaHCO3:0.35g酚红:0.02g3. 4%多聚甲醛4g多聚甲醛+PBS(细胞培养用)定容至100ml。
配制时65℃水浴不停搅拌。
4. Trypsin (0.25%)① 0.25g Trypsin 加PBS100ml0.02g EDTA②加适量5%NaHCO3调PH至7.2-7.4注:用前30min,将其放入37℃培养箱以提高胰酶活性。
5. PI染液配制NS:32.4mlPI:2.5mgRNase:0.5mgTriton-X100:0.25ml枸橼酸钠:50mg加蒸馏水至50ml注:配时PI最后加入(因其避光且有剧毒)6. 动物麻醉剂量(i.p.)水合氯醛:小鼠5%——0.08ml/10g;大鼠10%——0.3-0.4ml/100g戊巴比妥钠:小鼠0.3%;大鼠3%——0.15ml/100g;犬——3%(i.v.),1ml/kg 乌拉坦:大鼠25%——0.5ml/100g7. ADP配制128mg+173mlH2O200µl/支分装,-20℃保存用时NS+800µl或磷酸缓冲液+800µl8. PAF配制1mg+NS10ml分装50µl/支,每支加950µlNS稀释9. AA配制无水乙醇(EtOH)500µl,待全溶后加入NS至1ml,分装为20µl/支。
用时加980µlNS稀释至1ml。
终浓度:76.92µg/ml(体内)74.07µg/ml(体外)10. 电泳液(buffer)10×Tris 30.3gGly 144g 稀释至1000ml备用(可常温保存)SDS 10g临用前将其用去离子水1:9稀释11. 转膜buffer1×Tris 3.03gGly 14.4g 加去离子水至1000ml备用(4℃保存备用)MeOH 200ml10×Tris 30.3g 加去离子水稀释至1000ml备用(4℃保存)Gly 144g临用时取100ml 10×buffer+150ml MeOH稀释至1000ml (预冷)12. TBSTTris: 2.42gNaCl:8g 加去离子水至1000ml备用(4℃保存)Tween-20 0.5ml13. PBS——1000mLNaCl:8gKCl:0.2gNa2HPO4·H2O:1.56g / Na2HPO4:1.39g / Na2HPO4·12H2O:3.48g KH2PO4:0.2gPBST:PBS 1000mL+500µL Tween-2014. 肝素配制原液:12500u/支(2ml)抗凝:40u/ml血配制:2ml 30ml(生理盐水配制)1.5ml弹头中,100µl-150µl/支。
【分享】34种实验室常用溶液的配制及注意事项.
【分享】34种实验室常用溶液的配制及注意事项这是我以前收藏的资料,不记得在哪里找到的了,或许很多溶液大家用不着,学习一下也不错,主要是我觉得这里面的注意事项值得大家参考,拿来大家共享吧~1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。
加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。
用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。
放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
实验室常用溶液配制
常用溶液的配制1 细菌培养相关溶液1)LB培养基:胰蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl 10g5M NaOH调PH至7.0加去离子水至1000ml高压灭菌2)氨苄青霉素:1g溶于10ml水中,使用时1:1000稀释卡那霉素:1g溶于20ml水中,使用时1:1000稀释。
2 细胞培养相关溶液1)DMEM培养基:DMEM干粉(Gibco)1袋加入适量去离子水中NaHCO3 3.7gHEPES 3g搅拌溶解1M HCl或1M NaOH调节PH至7.0-7.2定容至1000ml,0.22µm的微孔滤膜过滤除菌。
2)1640培养基:1640干粉(Gibco)1袋加入适量去离子水NaHCO3 2gHEPES 3g搅拌溶解1M HCl或1M NaOH调节PH至7.0-7.2加入去离子水至1000ml用0.22µm的微孔滤膜过滤除菌3)胰蛋白酶液(0.25%Trypsin-0.04%EDTA消化液):Trypsin 1.25gEDTA 0.2gNaCl 3.5gNa2HPO4⋅12H2O 0.15gKH2PO4 0.12gTris 1.5gKCl 0.185gD-葡萄糖0.5g酚红0.005g加去离子水溶解定容至500ml0.22µm的微孔滤膜过滤除菌4)1x PBS(1L) :NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4⋅12H2O 1.44gK2HPO4 0.24g加蒸馏水800ml盐酸调PH至7.4加水定容至1000ml3 Western-blot 相关试剂1)30%丙烯酰胺溶液:丙烯酰胺29gN,N-亚甲双丙烯酰胺1g加入适量去离子水充分溶解定容至100ml(不高压) (至少搅拌半小时)普通滤纸过滤避光、室温贮存于棕色瓶中2)1.5M Tris-Cl(PH8.8):Tris碱18.15g去离子水80ml浓盐酸调PH值8.8加去离子水定容至100ml3)1.0M Tris-Cl(PH6.8):Tris碱12.1g去离子水80ml,浓盐酸调PH至6.8加去离子水定容至100ml1.0M Tris Cl用800ml 蒸馏水溶解121.1g Tris 碱,加浓盐酸调PhpH:7.4 HCl:70ml7.660ml8.042ml应使溶液冷却至室温后调pH加水定容至1L分装高压灭菌如果1mol/L 溶液呈现黄色应丢弃4)10%(m/v)过硫酸胺:过硫酸胺0.1g溶于1ml去离子水中,现用现配。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液配制0.25%胰酶-EDTA的配制细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100ml PBS,0.25g胰酶步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中,低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了。
低温,防止酶失活对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2 ,增加消化效力实验常用溶液的配制1.革兰氏碘液:称碘化钾2g溶于100ml蒸馏水中,再加1g碘使其溶解,最后用蒸馏水稀释至300m1,盛于棕色瓶内,保存于暗冷处。
2.1.苯酚品红改良液(一)①A液:取3克碱性品红,溶于100ml 70%酒精中(此液可长期保存)。
②B液:取A液10m1,加入90ml 5%苯酚水溶液(一般在两周使用为好)。
③C液:取B液45m1,加入 6ml冰醋酸和6ml 37%甲醛。
④、苯酚品红改良液:取C液10m1,加入90ml45%冰醋酸和1克山梨醇。
2.2.苯酚品红改良液(二):A液:碱性品红3g+100ml 70%乙醇。
B液:A液10ml+5%苯酚水溶液90m1。
C液:B液120ml+冰醋酯12ml+甲醛12ml。
D液:C液120ml+45%冰醋酸480ml。
在D液中加1%山梨醇(600mlD液中加 6g山梨醇),此液配好后至少放4一5天方可使用,可保存几年。
3.1.甲基绿一哌罗宁混合染液(一):①醋酸缓冲液(pH4.8)0.2mol.L-1醋酸(A.R)(取1.2ml加蒸馏水至100ml)4份0.2mol.L-1醋酸钠(A.R)(取2.72g加蒸馏水至100ml)6份。
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实验室常用溶液的配制1.30%丙烯酰胺溶液(100ml)【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。
加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。
用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于4℃温度。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸,因此大于1年的溶液应该被丢弃。
2.40%丙烯酰胺(用于DNA测序,1L)【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml 的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
置棕色瓶中保存于室温。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液(1ml)【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水稀释1ml【注意】分装成小份保存于-70℃4.10mol/L乙酸铵溶液(1L)【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中,加水稀释至1L后过滤除菌。
在4°C 储存。
【注意】乙酸铵是热不稳定的。
不要高压灭菌。
5.10%过硫酸铵溶液(10ml)【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至10ml。
该溶液可在4℃保存数周。
6.1mol/L CaCl2溶液(200ml)【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至200 ml。
用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。
【用法】制备感受态细胞时,将等分试样解冻,用蒸馏水稀释至100ml。
通过Nalgene过滤器(0.45微米)过滤除菌,并在使用前冷却至0℃。
7.2.5mol/L CaCl2溶液(20ml)【配制方法】称取13.5g CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至20ml。
用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。
8.脱氧核苷三磷酸(dNTPs)溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP的实际浓度。
计算每个dNTP的实际浓度。
对于路径长度为1cm的比色皿,吸光度等于消光系数和摩尔浓度的乘积。
然后用蒸馏水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分别分装成小份贮存于-70℃。
9.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液(20ml)【配制方法】称取3.09g DTT,溶于15ml蒸馏水中,用0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)补足体积至20ml。
通过0.22微米过滤器过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
【注意】不要对DTT或含有DTT的溶液进行高压灭菌。
10.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液(1L)【配制方法】在800ml蒸馏水中加入186.1gNa2EDTA·2H2O,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒),然后稀释至1L,分装后高压灭菌备用。
在室温下保存。
【注意】EDTA二钠盐不溶于水,需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。
分配适当的等分试样并通过高压灭菌消毒。
11.溴化乙锭(10mg/ml溶液)(100ml)【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于4°C。
【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。
使用后,这些溶液应进行净化。
有关如何执行此操作的详细信息,请参阅机构指南。
12.2×HEPES缓冲盐溶液(100ml)【配制方法】用90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4·2H2O、0.2g葡萄糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水稀释至100ml。
用0.22μm 滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃。
13.1mol/l异丙硫基-β-D-半乳糖苷IPTG溶液(10ml)【配制方法】IPTG(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水稀释至10ml,用0.22μm一次性滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。
14.1mol/L乙酸镁(MgOAc)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解214.46g四水乙酸镁,稀释至1L过滤除菌。
在室温下保存。
15.1mol/L MgCl2溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解203.4g MgCl2·6H2O,用水稀释至1L,分装成小份并高压灭菌备用。
在室温下保存。
【注意】MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。
16.酚/氯仿溶液【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris·HCl(pH7.6)萃取几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris·HCl(pH7.6)液层,保存于4℃。
【注意】酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。
所有操作均应在化学通风橱中进行。
与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。
17.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液(10ml)【配制方法】用10ml异丙醇溶解PMSF成1.74mg,分装成小份贮存于-20℃。
如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。
【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。
凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。
PMSF的水溶液在其已经变为碱性(pH> 8.6)并在室温下储存几小时后可以安全地丢弃。
(PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。
pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为35min。
)18.1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液(100ml)【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml蒸馏水中,用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后稀释到100ml,分装成小份后保存于-20℃。
19.3mol/L乙酸钠(pH7.0)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2,稀释到1L,分装后高压灭菌。
在室温下保存。
20.3mol/L乙酸钠(pH5.2)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至7.0,稀释到1L,分装后高压灭菌。
在室温下保存。
21.5mol/L NaCl溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解292.2g NaCl加水稀释至1L,分装后高压灭菌。
在室温下保存22.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液(1升)【配制方法】在900ml蒸馏水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃溶溶,加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2,加水稀释至1L,分装备用。
在室温下保存。
【注意】SDS的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS。
10%SDS溶液无须灭菌。
23.20×SSC(NaCl和柠檬酸钠)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH 溶液调节pH值至7.0,加水稀释至1L,分装后高压灭菌。
在室温下保存。
24.20×SSPE溶液(盐,磷酸钠,EDTA)(1升)【配制方法】在800ml毫升水中溶解175.3g NaCl,31.2g NaH2PO4·2H2O和7.4g EDTA,用NaOH溶液调节pH值至7.4(约需6.5ml 10ml/L NaOH),加水稀释至1L,分装后高压灭菌。
在室温下保存。
25.100%三氯乙酸(TCA)溶液(500g TCA)【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml蒸馏水,形成的溶液含有100%(M/V)TCA。
在室温下保存。
26.1mol/L Tris溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解121.91g Tris碱,加入浓HCl调节pH值至所需值。
对于pH 7.4,加入70ml HCl; 对于pH为7.6加入60ml HCl; 对于8.0的pH,加入42ml HCl。
加水稀释至1L,分装后高压灭菌。
在室温下保存。
【注意】如1mol/L溶液呈现黄色,应予丢弃并置备质量更好的Tris。
尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍可向大多数厂商购得合适的电极。
Tris溶液的pH值因温度而异,温度每升高1℃,pH值大约降低0.03个单位,应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值。
例如:0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。
27.Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/l Tris)(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱,加入0.015g酚并用HCl 调至pH值至7.4,用蒸馏水稀释至1L,分装后高压灭菌(15lb in-2液体循环中20min),于室温保存。
28.电泳用Tris-乙酸(TAE)(50X)(1升)【配制方法】称重242g Tris碱,加入800毫升蒸馏水溶解。
加入57.1ml冰醋酸和100ml 0.5mol/lEDTA(pH8.0),用蒸馏水补足体积至1升。
在室温下保存。
【用法】用蒸馏水稀释1:49。
TAE具有相当低的缓冲能力,并且在延伸电泳期间倾向于耗尽。