用薄层色谱法鉴定咖啡因

2、薄层色谱法对APC各组分的分离鉴定实验操作及现象

（1）点样：点样前，先用铅笔在薄层板上距末端0.6~1cm处轻轻画一横线，等距点上三点，再在薄板的另一端距末端约1cm处轻轻画上一横线，然后用毛细管依次分别吸取咖啡因、阿司匹林、乙酰水杨酸轻轻点样在已画好的点上，干燥后可进行色谱展开。

(2)展开：将事先选好的展开剂（苯：乙醚：冰醋酸：甲醇=120:60:18:1）放入干净小烧杯内展开剂的深度达0.5~1cm即可，再放入点好样品的薄层板，用表面皿盖好烧杯，使样品在杯内进行展开分离。当展开剂上升到预定的位置时（上步中画好的横线），立即取出薄层板并尽快用铅笔在展开剂上升的前沿处画一横线作标记，在水平位置上风干，然后在红外灯下烘干冰醋酸。

（3）鉴定： a.显色：将烘干的薄层板放入254nm紫外分析仪中照射显色，可清晰地看到展开得到粉红色斑点。 b.定位：定出多点的相对位置，量出斑点中心到原始点的距离及展开剂前沿到原始点中心的距离，计算Rf值。 c.确定镇痛药APC的成分：通过Rf值的分析结果，课确定相应的组分。展开剂液面要在点样线一下，不能超过；薄层板取出后要及时标记展开剂的前沿，否则展开剂挥发后难以确定；其中APC是三个点。 Rf=物质移动距离/溶剂移动距离