烟草植物组织培养 (1)
植物组织培养技术(一)
精选课件
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发展简史
• 1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学 说，奠定了组织培养的理论基础。
1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个 细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。
1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。 1922年，Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。 1934年，White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁 殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。
精选课件
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植物组织培养的分类
• 外植体（explant)：由活体（in vivo)植物体上 提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组 织、器官等。
• 广义的组织培养依外植体不同，可分为：器官 培养（organ culture）、茎尖分生组织培养 (shoot tip culture,shoot apex culture,apical meristem culture)、愈伤组织培养(calluse cultrue)、细胞培养(cell culture)、原生质体培养 (protoplast culture)
的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能
表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现
的这一过程，就是植物精组选织课件培养。
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植物细胞全能性的表达
• 脱分化（dedifferentiation)：将来自已分 化组织的已停止分裂的细胞从植物体部 分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞 的分裂活性。
精选课件
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植物组织培养特点
• ①培养条件可以人为控制
组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件下 进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响， 且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
植物烟草实验
烟草叶片愈伤组织诱导摘要用不同成分培养基，附加0.8%琼脂，3%蔗糖，调pH5.8—6.0，取烟草叶片作为外植体进行愈伤组织诱导培养，计算污染率、诱导率以及诱导情况，观察愈伤组织的发生情况。
实验表明，养分较高的培养基，外植体生长情况较好。
当细胞分裂素高于生长素的浓度时，有利于分化出芽；细胞分裂素低于生长素的浓度时，有利于分化出根；当细胞分裂素及生长素的浓度适合时，愈伤组织不分化，但是生长旺盛。
关键词：烟草叶片愈伤组织诱导前言烟草（Nicotiana tabacum）又名草烟，属茄科烟草属的一年生草本植物，本属约有60种，原产于美洲和大洋洲[1]。
烟草是重要的经济作物和工业原料作物，其体内所含的烟碱等生物碱是非常宝贵的医药及化工原料[2]。
有报道烟草细胞悬浮培养物获得细胞分裂素类物质，因此很有必要对烟草的组培快繁进行研究，以获得更有效的方法提高产率和产量。
柯善强综述植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制[3]，戴冕进行了烟草叶肉原生质体再生植株的研究[4] ,徐瑞娟等通过烟草花序苞叶的离体培养分化出花芽[5],战淑敏用烟草叶组织培养直接获得再生植株[6]。
本实验以烟草叶片组织为外植体进行组织培养，诱导愈伤组织，观察愈伤组织诱导情况。
1.材料与方法1.1 配置培养基母液，每2人为一个小组，配置以下培养基，并分装，灭菌，然后室温下放置一周。
1.2 取烟草叶片取烟草的嫩叶片作外植体。
先用自来水冲洗干净，再用蒸馏水洗2次后，置于超净台上，于无菌条件下先用75%的酒精浸泡30秒，然后置于无菌瓶中用10%次氯酸钠溶液浸泡20分钟至30分钟，再用无菌水冲洗4次，最后在无菌培养皿中将嫩叶片切成1cm见方小块，接种在培养基中。
1.3.1 观察污染情况：观察是否有细菌性污染（菌斑呈粘液状,接种后1-2天出现）和真菌性污染（出现不同颜色霉菌,接种后3-10天出现），并计数。
计算污染率。
污染率(%)=污染的材料数/总接种材料数×100%[7]1.3.2 观察各培养基中的外植体产生愈伤组织的情况，愈伤组织出现时间和愈伤组织形态特征（颜色和质地等），计数形成愈伤组织的材料数，并计算诱导率。
浙江省杭州市2024-2025学年高三上学期教学质量检测生物试题
浙江省杭州市2024-2025学年高三上学期教学质量检测生物试题一、单选题1．五水共治是指“治污水、防洪水、排涝水、保供水、抓节水”。
下列做法与“五水共治”行动不相符的是（）A．工业用水封闭化B．适时清理河道C．及时拧紧水龙头D．污水直排河道2．莲藕内部含有管状小孔构成的通气组织，有助于其在水生环境中进行良好的气体交换。
莲藕内部管状小孔形成的原因是（）A．细胞分化B．细胞衰老C．细胞坏死D．细胞凋亡3．肺炎支原体是一种能够引起人类肺部炎症的原核生物，其特征包括细胞膜中胆固醇含量较高以及无细胞壁等。
下列叙述正确的是（）A．肺炎支原体具有完整的细胞核结构B．肺炎支原体的蛋白质在核糖体中合成C．胆固醇构成了肺炎支原体细胞膜的基本骨架D．抑制细胞壁合成的抗生素可用于治疗支原体肺炎4．野生型金黄色葡萄球菌对青霉素敏感，在长期滥用青霉素的环境中，最终产生能在高浓度青霉素下生长的菌群。
下列叙述正确的是（）A．抗青霉素金黄色葡萄球菌群体的产生是长期人工选择的结果B．抗青霉素金黄色葡萄球菌个体的产生是长期自然选择的结果C．接触青霉素之前金黄色葡萄球菌种群中已有抗青霉素的个体D．抗青霉素金黄色葡萄球菌的产生是染色体畸变引起的5．有学者认为，人类祖先（2n=48）在进化过程中，两条近端着丝粒染色体短臂末端DNA 相互连接，形成现代人类的2号染色体，该染色体目前仅含一个有功能的着丝粒。
下列叙述错误的是（）A．人类2号染色体形成时仅发生染色体结构变异B．短臂末端DNA的连接伴随磷酸二酯键的形成C．融合形成的2号染色体中必有一个着丝粒失活D．可通过显微镜观察判断两条染色体是否相互连接6．小蓬草是一种入侵植物，其自身抗逆性较强，容易形成单优势种群落。
研究发现裸露的荒地被小蓬草入侵程度比成熟乔木林的严重。
下列叙述正确的是（）A．小蓬草与入侵地所有植物共同构成了生物群落B．小蓬草与入侵地各种植物的生态位完全重叠C．小蓬草入侵的程度可能与入侵地物种丰富度有关D．小蓬草入侵不改变当地群落演替的速度和方向7．现有编号为1、2、3的三个试管，加入等量的双链DNA后，分别加入破坏糖和磷酸、糖和碱基之间的连接键以及氢键的试剂进行充分反应。
植物组织培养操作流程
2、植物组织培养的发展 ❖1904年，德国植物胚胎学家Haning用
萝卜和辣根的胚进行培养，首次获得 组培的成功。 ❖1922年，豌豆、玉米和棉花的茎尖培 育获得成功 ❖1933年，我国李继侗等进行银杏离体 胚培养获得成功。
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3、植物组织培养的应用 在作物育种上的应用（单倍体植株、种
间杂交、细胞融合、细胞突变、种质保 存和基因工程）。 在作物脱毒和快速繁殖上的应用。 在遗传、生理生化和病理研究上的应用。
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1、点着酒精灯
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2、双手擦拭消毒
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3、剪刀灭菌
外焰
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4、酒精中冷却
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5、把酒精烧去
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6、打开三角瓶——铝箔纸的拿法a
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7、打开三角瓶——铝箔纸的拿法b
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8、瓶口在火焰上烧过
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9、铝箔纸的放法
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10、镊出烟草苗a
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11、镊出烟草苗b
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12、放入培养皿中
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4、植物组织培养的内容 植物组织培养包括以植物和它的离体 器官、组织、细胞和原生质体为外植体 的离体无菌培养，拥有几种不同水平的 培养技术，即整体的、器官的、组织的、 细胞和原生质的培养技术。（植株培养、 胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞 培养、原生质体培养 ）
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石 斛 植 物 的 芽 培 养
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11 、 双 目 解 剖 镜 下 解 剖 豌 豆 茎 尖
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目镜
放大倍数 旋钮 物镜
底光源开关 解剖载物台
显 微 解 剖 镜 焦距旋钮 使 用
上光源调节
图解 旋钮
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六、实验结果观察
1、两周以后观察烟草愈伤组织的形成情况。 2、四周后，观察烟草幼苗的成长情况。 3、六周后，观察豌豆愈伤芽丛的生长情况。 4、每人一份实验报告，当堂上交。
人教版高中生物选择性必修3第2章第1节1课时练习含答案
第2章第1节一[基础达标]题组一细胞的全能性1．下列最容易表达出细胞的全能性的是()A．人的口腔上皮细胞B．葡萄枝韧皮部细胞C．兔的肝脏细胞D．鼠的神经细胞【答案】B【解析】人的口腔上皮细胞、兔的肝脏细胞和鼠的神经细胞都是动物细胞，而葡萄枝韧皮部细胞为植物细胞。
植物细胞的全能性比动物细胞的全能性高，容易表达出全能性。
综上所述，B正确，A、C、D错误。
2．下列实例中，能够体现细胞全能性的是()A．小鼠腺细胞的自我复制B．克隆羊“多莉”的获得C．壁虎断尾后重新长出尾部D．胡萝卜韧皮部细胞经植物组织培养产生完整植株【答案】D【解析】小鼠腺细胞的自我复制的结果是细胞数量的增多，不是完整生物体(或分化成其他各种细胞)，不能体现细胞的全能性，A错误；克隆羊“多莉”的诞生说明已分化的动物体细胞的细胞核是具有全能性的，B错误；壁虎断尾后重新长出尾部属于器官的再生，是细胞的分裂和分化能力，并没有体现细胞的全能性，C错误；胡萝卜韧皮部细胞培育出植株属于植物组织培养过程，体现了植物细胞的全能性，D正确。
3．植物组织培养过程中，可通过诱导菊花幼叶发育为完整植株，其根本原因是菊花幼叶细胞()A．具有菊花植株全套的遗传信息B．具有其他细胞不具备的蛋白质C．还未被植物病毒感染D．分化程度低分裂能力强【答案】A【解析】植物组织培养过程中，可通过诱导菊花幼叶发育为完整植株，其根本原因是菊花幼叶细胞具有菊花植株全套的遗传信息。
题组二植物组织培养4．影响植物组织培养的因素包括()①培养基的配制②外植体的选取③激素的运用④消毒⑤温度、pH、光照A．①②③④⑤B．①②③C．①②③④D．①②③⑤【答案】A【解析】离体的植物组织和细胞，对营养、环境条件要求相对特殊，需要配制适宜的培养基，①正确；不同植物组织培养的难易程度差别很大，即使是同一种植物材料，因器官来源及其生理状况、材料的年龄、保存时间的长短等不同也会影响实验结果，②正确；植物激素中，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，③正确；植物组织培养需要在无菌条件下进行，因此要对外植体进行消毒，④正确；植物组织培养需要适宜的温度、pH，还需要适时的光照(脱分化避光，再分化需要光)，⑤正确，故A正确。
2 烟草愈伤组织诱导实验
烟草叶片愈伤组织诱导分化实验1. 实验目的（1）通过诱导植物（烟草叶片、水稻种子）愈伤组织和器官发生，分析生长素和细胞分裂素对烟草叶片离体培养的作用。
（2）了解植物组织在离体培养条件下脱分化和再分化的特点。
2. 实验原理外植体形成愈伤组织大致要经历三个时期：启动期、分裂期和形成期。
启动期主要通过激素以及环境因素的诱导使外植体细胞代谢增强，大量蛋白质与核酸形成为细胞分裂做准备；分裂期时外植体细胞在激素诱导下脱分化并不断增殖，形成结构疏松的组织块；形成期时，由于不同植物生长激素的诱导使愈伤组织形成根、芽等形态分化。
烟草为常见模式植物之一，常用于植物组织培养，是研究细胞脱分化和再分化的理想材料。
在愈伤组织诱导及分化过程中，光照条件起到的作用是促使愈伤组织进行光合作用生成糖类，促使代谢活动进行。
6-BA、NAA均为植物生长调节剂，6-BA属于细胞分裂素，可诱导愈伤组织发生并促进牙的形成；NAA属于细胞分裂素，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根。
根据Skoog和Miller提出的生长素和细胞分裂素相对浓度调节器管分化的概念，相对高的生长素有利于细胞增殖和不定根的分化，而相对高的细胞分裂素浓度有利于不定芽的分化。
通过改变激素的种类和浓度，有效地调节培养组织的器官分化，已经在许多植物的组织培养中得到证实，甚至在一些低等植物中也得到了证实。
3. 实验材料与操作方法3.1 实验材料3.1.1 材料选择：烟草By-2，滤纸片，枪头3.1.2 实验试剂：（1）植物生长调节剂（超净台过滤灭菌，1.5 mLEP管分装后-20℃贮存）6-BA 0.5mg/mL（1mol/L NaOH溶解再用蒸馏水定容）NAA 0.5mg/mL（1 mol/L NaOH溶解再用蒸馏水定容）（2）抗生素（超净台过滤灭菌，1.5 mLEP管分装后-20℃贮存）卡那霉素50 mg/mL（蒸馏水定容）利福平15 mg/mL（无水乙醇溶解再用蒸馏水定容）链霉素30 mg/mL（蒸馏水定容）羧苄青霉素100 mg/mL（蒸馏水定容）（3）实验用培养基MS大量元素储存母液（50×，蒸馏水定容）：1650mg/L NH4NO3+1900mg/L KNO3+370mg/L MgSO4·7H2O+170mg/L KH2PO4+440mg/LCaCl2·2H2O（CaCl2·2H2O在配制过程中不易溶解，可单独配成储液存放）MS微量元素储存母液（100×，蒸馏水定容）：0.83mg/L KI+6.2mg/L H3BO3+22.3mg/L MnSO4·4H2O+8.6mg/L ZnSO4·7H2O+ 0.25mg/L Na2MoO4·2H2O+0.025mg/L CuSO4·5H2O+0.025mg/L CoCl2·6H2O +27.8mg/LFeSO4·7H2O +37.3 mg/L Na2-EDTA·2H2O（FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA·2H2O两个试剂配制成100×溶液4℃冰箱避光储存）MS有机成分储存母液（100×，蒸馏水定容）：3mg/L甘氨酸+0.5mg/L烟酸（维生素B5）+0.5mg/L盐酸吡哆醇（维生素B6）+0.1mg/L盐酸硫胺素（维生素B1）+100mg/L肌醇（肌醇难溶解，一般独自配成浓缩液储存）MS培养基（NaOH调节至pH 5.8，蒸馏水定容）：1×大量元素+1×微量元素+1×有机成分+30g/L蔗糖+0.8%琼脂+不同比例生长素（6-BA+IAA）3.1.3 实验仪器：超净工作台，烧杯，锥形瓶，培养皿，枪形镊子，眼科剪，移液枪，酒精灯，光照培养室，3.2 操作方法取幼嫩烟草叶片约5片（选择幼年的外植体较好，如分生组织、维管束、形成层组织、静止的薄壁组织），用自来水清洗晾干。
高二生物《植物的组织培养技术》
一、基本过程−−−→−−−→→脱分化再分化外植体（离体的组织、器官或细胞）愈伤组织根、芽或胚状体完整植株1.外植体由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。
一般取植物幼嫩部位（如茎 尖）或花药等。
2.愈伤组织原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。
它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
其特点是：排列疏松、无规则、高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞，具有未分化特性。
知识点睛第10讲 植物组织培养技术愈伤组织形成过程中，没有叶绿素和叶绿体的形成，所以愈伤组织形成初期不需要充足的光照。
通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:l来诱导植物材料愈伤组织的形成。
3.胚状体胚状体是在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚的发生和发育过程，形成与合子胚相类似的结构。
一般专指在组织培养条件下产生的非合子胚。
诱导胚状体需要的条件，因植物种类、部位和培养时组织细胞所处状况的不同而异。
胚状体的诱导与外植体所处生理状况，内源激素的变化及遗传性、倍性等都有密切关系。
①胚状体的产生不需要任何激素，如烟草、曼陀罗和水稻等的花药培养。
②培养中需要生长激素或细胞分裂素或二者的组合，如檀香和石刁柏的愈伤组织培养。
③需先在有激素的培养基上诱导，然后转入低浓度激素或无激素的培养基中，如胡萝卜在诱导愈伤组织时需2,4-D，但由愈伤组织诱导出胚状体时，则需在没有2,4-D的培养基培养。
④某些天然产物，如椰乳，西瓜汁，酵母提取物，酪朊水解物或腺嘌呤等都有利于胚状体的发生。
二、理论基础：植物细胞的全能性1. 细胞全能性的定义：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。
2. 在生物的生长发育过程中，细胞并不表现出全能性，而是分化成各种组织和器官。
3. 细胞具有全能性的原因：含有该种生物全部遗传信息。
4. 细胞的全能性高低比较：①一般，细胞分化程度越高，全能性越低②受精卵>生殖细胞>体细胞③植物体细胞>动物体细胞三、条件1.离体2.无菌3.一定的营养物质：水、无机盐、蔗糖（提供碳源和调节渗透压）、维生素等4.植物激素在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素。
植物组织培养技术方案
花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞
核和1个生殖细胞核，每个生殖细胞核再进行一次有丝
分裂生成2个精子。
基础知识 -----产生花粉植株的两种途径 • 途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株； • 途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组
织，再将其诱导分化成植株。
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
不需要光
需要光
4、植物组织培养的应用：
1、培育无病毒植株
2、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤 和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）
3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力 的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子， 可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难 或发芽率低等问题
专题3 植物组织培养技术
课题1 菊花的组织培养
一、基础知识 1、植物的组织培养
（1）细胞的分化
①概念在：个体发育中，相同细胞的后代在形态、结 构、生理功能上发生稳定性差异的过程 。 ②举例：如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、 器官、系统。 ③特点：a、持久性：是一种持久性的变化，它发生在生
物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度；b 、稳 定性：细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的；c 、全能 性：已分化的细胞，仍具有发育的潜能。
④结果：形成不同的细胞和组织。
⑤原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择 性表达的结果。
（2）细胞的全能性
①定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个 体的潜能的特性。 ②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特 有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需 的全部基因。 ③实例：已分化的植物细胞，仍具有全能性。高度 特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限 制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细 胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质。 ④全能性的比较:受精卵>生殖细胞>体细胞
植物组培自测题与参考答案(简)
第1章复习测试卷二、填空题1．根据外植体的不同，一般可以将植物组织培养分为：植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。
2．在植物组织培养中，外植体脱分化后，再分化形成完整植株的途径有两条：一是器官发生途径，二是胚状体途径。
3．通过器官发生再生植株的方式有三种：第一种最普遍的方式是先分化芽，再分化根；第二种是先分化根，再分化芽，这种方式中芽的分化难度比较大；第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽，再通过维管组织的联系形成完整植株。
4．体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。
5．植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。
一个多世纪来，植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。
6．在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下，1902年德国植物生理学家G．Haberlandt提出了细胞全能性的设想，并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。
7．White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法，成为以后各种植物组织培养的技术基础，他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。
8．1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株，首次通过实验证明了植物细胞的全能性，成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。
9．1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。
同年Morel培养兰花的茎尖，获得了快速繁殖的脱毒兰花。
其后，国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上，建立了“兰花工业”。
10．花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展，获得成功的物种数目不断增加，其中包括很多种重要的栽培物种。
烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。
三、是非题（×）1．从理论上说，所有的植物细胞与组织材料都能培养成功，其培养的难易程度基本相同。
植物组织培养技术
初代培养（ culture） 初代培养（primary culture）：指在组织 培养过程中，最初建立的外植体无菌培 养阶段。由于首批外植体来源复杂，携 带较多细菌，要对培养条件进行适应， 因此，初代培养一般比较困难。 继代培养（ subculture） 继代培养 （ subculture ） ： 在组织培养过 程中，当外植体被接种一段时间后，将 已经形成愈伤组织或已经分化根、茎、 叶、花等的培养物重新切割，转接到其 它培养基上以进一步扩大培养的过程称 为继代培养。
另一为药物和生物制品的工业生产，探索 天然药物生产工业化的途径是当前药物生产 的一个新方向，有可能用组织培养法来代替 全植物提取有效成分。组织培养应用在药学 方面的工作虽然历史不长，但发展很迅速， 它具有如下一些优点： 1．利用组织培养代替原植物的栽培以获得 所需的有效成分，达到产量高，成本低的目 的，还可节约土地。 2．除了应用于产生次生物质外，还可应用 于生物转化。例如烟草组织培养中蒂巴因去 甲基后可能生成吗啡。
目前中国已成功地将麦角菌、灵芝、猴 头菇等真菌进行工业化生产，高等植物组织 培养在工业化中的应用也正在研究。 总之，植物组织培养这一新技术在中草药 方面应用的前途是无限广阔的，它不仅有利 于探讨和阐明药用植物生理、遗传和成分生 物合成等一系列理论问题，而且一旦工业化 生产问题得到解决，将可以为防病治病做出 很大的贡献。
2 培养基的种类 MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基等等。 3 培养基的配制 （1）混和培养基中的各成分 （2）融化琼脂 （3）调整pH为5.8 （4）分装 （5）灭菌 （6）放置备用
二组织培养操作的一般流程
1 2 3 4 5 6 器皿的洗涤 培养基的配制和灭菌 接种室及用具消毒 材料灭菌：70％酒精、氯化汞 接种 无菌培养
四川省成都列五中2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题
高2022级生物学一、选择题：共30个小题，每小题2分，共60分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1．下列有关生物多样性的叙述，正确的是（）A．对生物多样性最好的保护是最大程度的利用B．生物多样性是经过漫长的协同进化实现的C．生物多样性的直接价值明显大于它的间接价值D．生物多样性的形成过程即新物种的形成过程2．为认真践行“人民城市”重要理念，持续打好垃圾分类攻坚战和持久战，不断提高人民群众的满意度和获得感，某地执行垃圾分类回收政策，对于垃圾中的有机废弃物将按照“无废化生态社区”模式进行处理。
“无废化生态社区”中对有机废弃物进行处理的相关方案如图所示。
下列叙述错误的是（）A．有机废弃物发酵得到的有机肥料能为农作物提供营养物质B．“无废化生态社区”遵循循环、整体等生态工程原理C．从资源化、无害化角度分析，垃圾处理途径②③优于④D．“无废化生态社区”模式能提高物质循环速率和能量传递效率3．生态足迹指在现有技术条件下，维持某一人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
下列活动不利于降低生态足迹的是（）A．国家实施“三北”和长江中下游地区重点防护林建设、退耕还林还草B．在日常饮食中，减少植物性食物的比例，多摄入肉类食物C．减少石油、天然气的使用，大力发展太阳能、风能等新能源D．减少私家车出行，提倡自行车或步行等绿色出行方式4．我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。
下列说法正确的是（）A．腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起B．利用酵母菌酒精发酵进行传统酿酒的过程中，需一直保持无氧的条件C．泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出D．制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率5．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是（）A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B．葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间C．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同的发酵条件6．在用传统发酵技术制作发酵食品过程中，控制发酵条件至关重要。
植物组织培养(实验报告—)
C Schleiden D White
7．下列不属于大量元素的盐是（C）。
A NH4NO3 B KNO3
C ZnSO4·7H2O D MgSO4·7H2O
8．在组织培养中，IAA、ZT和GA必须用（B）法灭菌
Ａ高压灭菌Ｂ过滤灭菌
Ｃ干燥灭菌Ｄ照射灭菌
9．要配置母液浓度为0.1mg/ml的IBA 500ml，需要IBA（B）mg。
7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。
8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。
9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。
15.愈伤组织：原指植物在受伤后伤口表面形成的一团无序生长的薄壁细胞，在组织培养中，是指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。其特点是：细胞分裂快，结构疏松，缺少结构组织，颜色浅而透明。
16.初代培养：是指在组培过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。即无菌接种完成后，送入培养室的外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短枝(或称茎梢)、不定芽(丛生芽)、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。
A．GA B．IAA；
C．NAA D．ZT
19．在成批培养过程中，细胞数目呈（C）曲线变化。
A．Y型B．X型
C．S型D．Z型
20．要配置母液浓度为0.1mg/ml的IBA 500ml，需要IBA（B）mg。
A．20 B．50
C．100 D．1000
21.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_________：
植物组织培养技术
植物组织培养技术植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞），以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株，统称为植物组织培养。
植物组织培养的过程可概括为：外植体脱分化或完整植株胚状体茎尖、胚及子房等器官做外植体可不经脱分化直接形成试管苗。
植物组织培养技术是生物技术的重要组成部分，在生产实践及基因工程、遗传转化等研究中有重要应用前景。
植物脱毒及离体快繁，花药培养与单倍体育种、幼胚培养与试管受精，抗性突变体的筛选与体细胞无性系变异，植物产品的工厂化生产等方面的研究和应用，均必须借助植物组织培养技术的基本程序和方法。
通过本实验，要求同学掌握植物组织培养操作技术；了解外植体脱分化及再生的过程；理解植物细胞全能性。
一、试材与用具1．植物材料：花生、烟草、苹果、大白菜、玉米等。
2．实验室：准备室、接种室、培养室等。
3．仪器设备：高压灭菌锅（器）、光照培养箱、振荡培养箱、天秤、酸度计、超净工作台等。
4．器械及用具：镊子、手术刀、接种针、细菌过滤器、记号笔等。
5．玻动器皿：三角瓶、培养瓶、培养皿、量筒、容量瓶等。
二、方法步骤（一）培养基的制备1．母液的配制在植物组织培养中，不同的植物，不同的器官和组织，不同的研究目的，使用不同的培养基，培养基尽管千差万别，按其性质和含量来分主要由以下几部分组成：①无机营养，包括大量元素和微量元素；②有机物质；③铁盐；④碳水化合物；⑤天然复合物；⑥激素；⑦琼脂（固体培养基）；⑧其他添加物。
在培养基的配制中，对各组分的成分，常先要按其需用量扩大一定倍数，配制成母液（表2－1）。
配制母液时应注意以下两个方面：（1）配制大量元素母液时，为了避免产生沉淀，各种化学物质必须充分溶解后才能混合，同时混合时要注意先后顺序，把钙离子（Ca2+）、锰离子（Mn2+）、钡离子（Ba2+）和硫酸根（SO42-）、磷酸根（PO43-）错开，以免形成硫酸钙、磷酸钙等沉淀，并且各种成分要慢慢混合，边混合边搅拌。
植物组织培养
2.微量元素母液(100 倍液)
后装入剂瓶中，冰箱内贮存备用）。
℃）蒸馏水中。（一种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容至 1000ml
分别称取 10 倍用量的各种大量无机盐，依次溶解于大约 800ml 热的（60-80
1.大量元素母液(10 倍液)
帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓 帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓
植物组织培养期末考试习题参考答案
仅供参考植物组织培养复习题一、名词解释1植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
2初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体从植物体上分离下来的第一次培养的过程。
3继代培养：初代培养后，将组织转移到新的培养基上进行培养的都称为继代培养。
4体细胞胚：植物组织培养过程中能够产生与正常合子胚相似的结构，由体细胞发育而成，也称为胚状体。
5胚的培养：在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。
6外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
7驯化现象：植物组织经长期继代培养，要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”现象。
8玻璃化苗：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化，这种出现玻璃化现象的试管苗成为玻璃化苗。
9愈伤组织：在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团无定形的疏松排列的薄壁细胞，类似分生组织。
10脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
11再分化：脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
12人工种子：人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。
13褐化现象：褐化是指在接种后，外植体表面开始褐化，释放出褐色物质，有时甚至会使整个培养基褐化的现象。
14器官培养：以植物器官作为外植体进行离体培养，包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。
15原生质体培养：用酶及物理方法除去细胞壁，对所得到的原生质体进行培养的方法。
16基本培养基：人工配制的仅能满足外植体最基本生长需要的培养基，如MS、MT、White培养基。
17完全培养基：在基本培养基的基础上添加各种各样的附加物（激素、有机物质等），具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件，含有满足各种营养要求的培养基二、填空、选择、判断、简答、问答1植物组织培养的定义、特点、发展简史（1）定义：把无菌操作分离植物体的一部分，接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。
植物组织培养(山东联盟)智慧树知到答案章节测试2023年山东农业工程学院
第一章测试1.有利于启动植物细胞分化和形成胚性细胞团。
A:2，4-DB:细胞分裂素C:赤霉素D: 脱落酸答案:A2.下列关于在组织培养的发展史上事件描述不正确的是（）。
A:1960年Cooking报道了诱导鸡红细胞与酵母细胞融合培养。
B:1958年Steward报道了胡萝卜细胞悬浮培养C:1978年Melchers报道了马铃薯和番茄的融合培养D:1962年Murashinge和Skoog在烟草的培养中筛选出N6培养基。
答案:D3.植物细胞怎样才能表现出全能性（）。
A:导入其他植物细胞的基因B:将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内C:脱离母体后给予适宜营养和外界条件D:给予适宜的营养和外界条件答案:C4.优良的愈伤组织具备以下哪几个特点（）。
A:高度的胚性或再分化能力B:旺盛的自我增殖能力C:经过长期继代保存而不丧失胚性D:不容易散碎答案:ABC5.植物激素中的生长素和细胞分裂素，是启动细胞脱分化、分裂和再分化的关键性激素。
A:对B:错答案:A6.一般单子叶植物比双子叶植物及裸子植物容易脱分化。
A:错B:对答案:A7.胚胎培养的目的是克服败育和三倍体育种。
A:错B:对答案:B8.实现细胞全能性的条件是组织或器官解离和给予所需的营养物质。
A:错B:对答案:B9.支撑植物组织培养作为一门技术的两个重要模式是培养基模式和激素调控模式。
A:对B:错答案:A10.将植物体的任何部分都可以进行离体培养，使之发育形成完整植物体。
A:错B:对答案:B第二章测试1.调整培养基pH所用到的仪器是（）。
A:离心机B:酸度计C:显微镜D:电子天平答案:B2.电线着火时，下列措施正确的是（）。
A:可用泡沫灭火器灭火B:先灭火再切断电源C:用沙或二氧化碳灭火器灭火D:可用水灭火答案:C3.下列哪个不是培养室的设备（）。
A:培养箱B:紫外光源C:高压灭菌锅D:培养架答案:C4.清洗玻璃器皿用的洗涤剂主要有（）。
A:肥皂B:铬酸洗涤液C:洗衣粉D:洗洁精答案:ABCD5.下列关于培养室的说法正确的是（）。
植物组织培养复习题(标准)
植物组织培养复习题一、填空题：1.植物脱病毒一般采用茎尖培养脱毒和热处理两种方法。
2.最典型的培养基是1962年发表的的一种适合于烟草愈伤组织快速生长的改良培养基，该培养基后来被称为MS培养基，现已广泛用于植物组织培养。
3.胚状体发育顺次经过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期。
4.具有防止褐变作用的维生素是Vc。
5.植物组织培养按培养对象分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养等几种类型。
6.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以0.3～0.5mm、带1～3个叶原基为好。
7.对植物组织培养的培养基灭菌时，一般情况采用的条件是121温度，保持时间是15～20分钟。
8.在幼胚培养基中，蔗糖的主要作用是维持渗透压、提供碳源和能源和防止幼胚早熟萌发。
9.植物组织培养中，微量元素铁的用量较大，由于在较高pH下，易形成Fe(OH)3沉淀，难以被吸收，所以多用硫酸亚铁（FeSO4·7H20）和乙二胺四乙酸（Na2-EDTA）形成的螯合物，并且单独配制。
10.种质保存大致分为原地保存和异地保寸两种方式。
11.外植体选择的原则是：选择优良的种质、选择健壮的植株、选择最适时期、选取适宜的大小。
12.细胞悬浮培养的方法有成批培养和连续培养等。
13.植物原生质体分离的方法有酶解法和机械法。
14.植板率是指已形成细胞团的单细胞与接种总细胞数的百分数。
15.花粉分离的方法有挤压法、磁搅拌法、漂浮释放法。
16.植物组织培养发展可分为三个时期：萌芽阶段、奠基阶段、快速发展和应用阶段。
17.一个年产4-20万株苗的商业性组织培养实验室，其总面积不应少于60平方米，可划分为准备室、缓冲室、无菌操作室和培养室。
18.盐酸硫胺素VB1是脱羧酶辅酶，吡哆醛VB6是转氨酶辅酶。
19.愈伤组织形成大致经历三个时期，即：诱导期、分裂期、分化期。
20.茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为茎尖分生组织组织培养和普通茎尖培养两种类型。
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烟草植物组织培养实验一实验目的学习和掌握植物组织培养技术，理解植物细胞的全能性。
二实验原理植物组织培养是从20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。
由于其拥有占地少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。
本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。
在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。
从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。
①起动期是指细胞准备进行分裂的时期。
用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。
起动期是通过一些刺激因素（如机械损伤、改变光照强度、增加氧等）和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。
机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。
在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词，但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果。
外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好，因此生长素类物质在植物组织培养中得到广泛应用，常用的有生长素（2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、萘乙酸NAA、萘乙酰胺NAD和吲哚乙酸IAA、吲哚丙酸IPA和吲哚丁酸IBA）细胞分裂素（6-苄氨基嘌呤6-BA、6-糠氨基嘌呤（KT）氯吡苯脲（KT-30，CPPU））等。
分裂期是指外植体细胞经过诱导以后脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。
处于分裂期的愈伤组织的特点是：细胞分裂快，结构疏松，颜色浅而透明。
外植体的脱分化因植物种类、器官来源及其生理状况的不同而有很大差别。
例如，烟草、胡萝卜等植物的脱分化比较容易，禾本科植物的脱分化比较难；花的脱分化比较容易，茎、叶的脱分化比较难；幼嫩组织的脱分化比较容易，成熟的老组织脱分化比较难。
分化期是指在分裂期的末期，细胞内开始出现一系列形态和生理上的变化，从而使愈伤组织内产生不同形态和功能的细胞。
这些细胞类型有薄壁细胞、分生细胞、色素细胞、纤维细胞，等等。
外植体的细胞经过起动、分裂和分化等一系列变化，形成了无序结构的愈伤组织。
如果在原来的培养基上继续培养愈伤组织，会由于培养基中营养不足或有毒代谢物的积累，导致愈伤组织停止生长，甚至老化变黑、死亡。
如果要让愈伤组织继续生长增殖，必须定期地（如2～4周）将它们分成小块，接种到新鲜的培养基上，这样愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长。
愈伤组织的形态发生方式经过起动、分裂和分化期产生的愈伤组织，其中虽然发生了细胞分化，但是并没有器官发生。
只有满足某些条件，愈伤组织的细胞才会发生再分化，产生芽和根，进而发育成完整植株。
愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式（器官发生型）和胚状体方式两种。
不定芽方式是在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根。
胚状体方式是由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。
这种由愈伤组织中的薄壁细胞不经过有性生殖过程，直接产生类似于胚的结构，叫做胚状体。
在植物组织培养中，不定芽方式和胚状体方式是愈伤组织形态发生的两种最常见和最重要的方式。
胚状体方式比不定芽方式有更多的优点，如胚状体产生的数量比不定芽多，胚状体可以制成人工种子，等等。
培养基的主要指标为营养的组分，植物生长物质的浓度，特别是后者对外植体的分化起着极其重要的作用。
培养基的组织成分主要包括：1. 矿质营养。
矿质营养又叫无机营养，是指植物在生长发育的过程中所需要的各种化学元素，其中包括大量的元素如N、P、K和微量元素如Fe、B、Mn、Zn、Cu等，其对植物的生长发育中有着重要的生理作用。
2. 维生素。
维生素能够以辅酶的形式参与多种酶系的反映，直接影响到蛋白质、糖、脂肪等物质的代谢活动。
主要有Vb、Vb1、Vc、Vu、Vb5等。
3. 植物生长物质。
其在较低浓度下能够对植物产生显著生理作用，主要包括：细胞分裂素和生长素。
4. 碳源。
其不仅为外植体提供能量，而且也能维持一定的渗透压。
如果糖、葡萄糖、蔗糖等。
5. 琼脂。
琼脂是组织培养中固体培养基的凝固剂，用来控制培养基的硬度。
6. 辅助添加物。
添加物主要有氨基酸与植物材料，前者包括丙氨酸、甘氨酸、谷氨酰氨、酪氨酸、天冬酰氨等是主要的有机氮源，有助于外植体的蛋白质合成。
而后者成分十分繁杂，如马铃薯、香蕉、椰乳等，但有助于外植体分化提高繁殖系数。
植物组织培养的培养基种类很多，MS培养基（如表一）是使用最广泛，很多花卉的组织培养均在MS培养基上进行。
此外，在兰花的组织培养中常使用VW培养基。
培养基配方设计是组培法育苗中的关键步骤。
根据理论与实际经验，对不同种类的花卉及不同的取材部位，需设计出相适应的配方，并从中筛选出最佳者。
继代芽增殖培养：很多花卉植物经过2-6 周的培养即可分化出大量的不定芽。
根据情况可以将这些增殖了大量新芽的外植体重新分割进行几代培养，以扩大繁殖规模直至满足繁殖需要为止。
三实验用品1、每组：1 玻璃烧杯、1玻璃棒、1pH试纸(5.5-9.0) 、培养瓶若干1瓶无菌水、1个无菌烧杯、1包无菌滤纸、1个无菌白瓷板2、公用用品：1/2MS干粉式培养基、冷凝脂、蔗糖、激素（2,4-D、NAA、6-BA均为1mg/ml）、1N NaOH、1N HCl蒸馏水、70%酒精、0.01%升汞、移液器、微波炉、灭菌器、超净工作台、酒精灯、解剖刀、镊子四实验材料烟草叶片五实验内容1、培养基配置与分装培养基配置：大量、微量、有机、铁盐琼指7g/l 搅拌蔗糖30g/l 调节pH为5.8 加热溶解加激素分装50ml/瓶注意：认真计算由储备液配制成工作液所需添加的各种溶液的量计算公式：母液吸取量（ml）=待配培养基总量（ml）/母液扩大倍数MS培养基中加激素的量和组合如下：①MS+2,4D0.5②MS+6-BA0.1+NAA0.5③MS+6-BA0.5+NAA0.5注意：右下角标数值单位为mg/l，添加激素前认真计算激素储备液配制成工作液所需的量计算公式：生长调节物质母液吸取量（ml）=工作液中所需激素浓度（mg/l）/每毫升母液中含激素的量（mg）2、培养基的灭菌-----高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）3、无菌苗的获得4、烟草叶片愈伤组织的诱导和不定芽的分化步骤于超净台中彻底冲洗外植体；70%酒精消毒3min；无菌水冲洗3遍，每遍3mini；将烟草叶片残留的水分用灭过菌的滤纸吸干；白瓷板上用消毒的解剖刀分割为1-1.5cm2的小块；接入相应的MS培养基上，每瓶接种4-5块。
3、培养与观察将培养瓶由超净台中转移到光照培养箱，给予适合的条件：26~28℃，光照1000lux~2000lux培养；观察：取三个时间观察，分别是2~3天；13天；23天。
可从愈伤组织的诱导情况，生长情况观察，还可借助倒置显微镜观察体细胞胚的发育阶段。
例如：①MS+2,4D0.5 沿切口已长出大量白色、疏松呈颗粒状的胚性愈伤组织。
取愈伤组织块置实体显微镜下观察，可发现愈伤组织内含有大量处于不同发育阶段的体细胞胚，如球形胚、心型胚、鱼雷型胚、早子叶胚等。
②MS+6-BA0.1+NAA0.5愈伤组织为黄绿色，其上已分化出许多小苗，具有两片小子叶，类似于典型的种子苗。
显微切片观察证明，这些小苗来源于愈伤组织中的单个胚性细胞，是通过体细胞胚发生途径形成的。
③MS+6-BA0.5+NAA0.5愈伤组织颜色较绿，质地较为致密，已分化出许多从生芽，形态特征与2中的明显不同，这是通过器官发生途径。
数据统计：烟草叶片愈伤组织诱导情况编号每瓶接种数愈伤组织诱导率愈伤组织状态染菌率六实验结果与分析1、将观察结果加以描述和统计；对出现诱导失败和污染的情况要加以认真分析，找到原因。
2、绘图或照片七．思考题1、外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，哪些激素起作用？2、如果时间允许，请设计下游诱导愈伤组织分化和再生植株的实验。
实验三愈伤组织的诱导一、实验目的利用植物的快速无性繁殖技术诱导愈伤组织。
二、实验原理利用附加2,4-D 2mg/L的MS培养基上诱导愈伤组织。
三、实验材料烟草叶片四、实验步骤1、培养基的配制、消毒及各种器皿的消毒灭菌。
2、接种室灭菌：打开紫外灯30min。
3、外植体的选取：取生长良好的烟草幼嫩叶片进行诱导。
4、操作台的消毒：进入接种室前关房间紫光灯，进入后关超净工作台上的紫光灯，用70%的酒精擦洗超净工作台3-4遍，将双手也用乙醇消毒。
然后在无菌条件下将外植体接种到培养基表面。
5、实验后将工作台面清理干净，各种仪器工具洗净归位。
五、实验结果由烟草叶片成功诱导出的愈伤组织实验结果：烟草的愈伤组织形成、发育良好，没有染菌，所配培养基适合烟草形成愈伤组织。
随着愈伤组织的生长，褐色区域也越明显，但对愈伤组织没有什么影响。
愈伤组织的主体呈黄绿色但出现许多绿色的生长端点，这些端点经诱导可形成根或芽。
分数________ 教师___________ 时间__________实验四芽的诱导一、实验目的：了解植物快速无性繁殖技术。
选择适当的培养基诱导不定芽的产生二、实验原理配制MS培养基并加入10ml6-BA，2.5mlNAA，作为诱导芽的培养基，用由烟草叶片诱导成功的愈伤组织诱导产生芽。
三、实验步骤1、实验前的准备：各种器具消毒、灭菌，培养基的配制及消毒，实验材料的选取。
2、接种室的消毒：接种前一天晚上用过氧乙酸熏蒸灭菌，第二天接种前20分钟打开紫光灯。
3、外植体的消毒：使用无菌苗。
4、进入接种室前关房间紫光灯，进入后关超净工作台上的紫光灯，用70%的酒精擦洗超净工作台3-4遍，将双手也用乙醇消毒。
然后在无菌条件下将愈伤组织生长较好的部位切割下来接种到培养基表面，注意切口面向下。
5、将接种好的培养基置于培养室培养，定期观察记录结果。
6、实验后将工作台面清理干净，各种仪器工具洗净归位。
四、实验结果由愈伤组织诱导生芽成功后的照片实验结果：接种后没有被细菌及霉菌污染生长状况良好，发出新芽并有明显的生长。
由图片可以看出，培养基上方芽的生长不是很旺盛，而培养基下方的芽且生长的很旺盛，这是因为在接种幼嫩愈伤组织切块时，由于切块太小难以很好的区分出切面，导致切面没有向下所致。