病毒类生物制品安检与效检共36页
生物制品的检验项目
生物制品是指从生物材料中提取或制造的药物、疫苗、生物诊断试剂和细胞疗法等产品。
对于生物制品的质量控制和安全性评估，通常需要进行一系列的检验项目。
以下是一些常见的生物制品检验项目：
1. 物理性质：包括外观、颜色、透明度、pH值、浓度、稳定性等。
2. 细菌污染：通过菌落计数法、培养基检测、真菌/霉菌检测等方法，检查产品中是否存在细菌污染，确保产品的微生物质量。
3. 病毒安全性：包括病毒清除和病毒灭活等方面的检验，以评估生物制品是否存在潜在的病毒污染风险。
4. 有害成分检测：检查生物制品中是否存在有害的毒素、残留物、重金属等物质。
5. 细胞活性和效能评估：一些生物制品，如细胞疗法产品，需要进行细胞活性和细胞功能的评估，以确保其安全和有效性。
6. 免疫原性评估：对于疫苗等生物制品，免疫原性评估是重要的，以评估其引起免疫反应的能力。
7. 蛋白质纯度和结构评估：生物制品中的蛋白质纯度和结构的评估对于确保产品的质量和稳定性非常重要。
8. 稳定性研究：评估生物制品在不同温度、湿度和储存条件下的稳定性，以确定其有效期和储存要求。
这些仅是一些常见的生物制品检验项目，实际检验项目的选择和范围取决于具体的生物制品类型、法规要求和相关标准。
为确保生物制品的质量和安全性，生产厂商通常会根据相关规定和标准进行全面的质量控制和检验。
病毒类生物制品安检和效检PPT课件
4、特殊的安全检验指标
有一些产品，因靶病毒对不同年龄的动 物致病性不同，可能规定需用不同年龄 段的本动物进行安全检验（如孕畜、仔 畜等），对于这类制品应按规定进行检 验。
影响安全检验结果的主要因素
对于病毒类制品来说，由于病毒与细菌不同：a.病毒更 易受抗体及各种理化因素的影响；b.病毒类疫苗在生产 过程中除易受细菌污染外，更易受外源病毒污染，因 此潜在的不安全因素更为复杂，因此在对病毒类疫苗 特别是弱毒活疫苗进行检验时应注意以下几点：
效力检验的技术依据如下：
1、中华人民共和国兽药典、兽用生物制品质量标准、生物制品规程
2、企业的内控标准
3、企业效力检验SOP
效力检验的一般要求
样品要求：a.除另有规定外一般每批疫苗任抽1瓶按
规定进行检验；b.同批疫苗分为几个亚批时，效力检验 均应按亚批分别抽样分别检验，不能采用检验一个亚 批代表其它批或几个亚批混和效检的方法进行检验。
兽用生物制品安全检验的技术依据如下：
1、中华人民共和国兽药典、兽用生物制品质量标准、生物 制品规程
2、企业的内控标准 3、企业安全检验SOP
安全检验的一般要求
1、安检样品：除另有规定外，每批抽3瓶混和后按照 规定进行检验和判定；
2、场地：安全检验应在专用动物舍内进行，不得在野 外进行
3、安检动物：安检动物必须符合各制品质量标准和规 程的要求
b.相对保护比率方法：主要用于攻毒毒株毒力较弱，不一定
全部发病死亡的制品，如传染性支气管炎（免疫6/8、对照0/4或 免疫8/8对照3/4）、兔瘟灭活疫苗（免疫4/4、对照3/4） ）
c.半数保护量（PD50）和保护指数（PI值）
半数保护量测定方法:是以不同剂量疫苗免疫动物，采用定量
第四章兽医生物制品监察制度与质量检验课件
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新制品是指我国创制或首次生产用于畜禽等动物疾病预防、治 疗和诊断用的生物制品；对已批准的生物制品所使用的菌毒种 和生产工艺有根本改进的，亦属于新制品管理范畴。
第一类：我国创造的制品；国外仅有报道而未批准生产的 制品。
第二类：国外已批准生产，但我国尚未生产的制品。 第三类：对我国已批准的生物制品使用的菌毒种和生产工
艺有根本改进的制品。
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第二节 兽医生物制品的质量检验
一、无菌检验或纯粹检验 二、安全检验 三、效力检验 四、其它检验项目
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一、无菌检验或纯粹检验（test or purity test）
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⑵定量免疫变量强毒攻击法 把动物分为两大组，一为免疫组，一为对照组，两大组
又各分为相等的若干小组，每小组的动物数相等。免疫 动物均用同一剂量的制品接种免疫，经一定时间后，与 对照组同时用不同稀释倍数强毒攻击，比较免疫组与对 照组的存活率。
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⑶变量免疫定量强毒攻击法 将疫苗稀释为各种不同的免疫剂量并以之接种动物，间
即最小免疫量:半数保护量（PD50）/半数免疫量（ImD50）
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（二）效力检验的方法和要点
1.动物保护力试验 ★ ★ ★ ★ ★ ⑴ 定量免疫定量强毒攻击法；⑵ 定量免疫变量强毒攻击法 ；⑶ 变量免疫
定量强毒攻击法 ；⑷ 被动免疫抗体测定 2.活菌计数与病毒量的滴定
⑴ 活菌计数; ⑵ 病毒量的滴定 3.血清学方法
①加速老化法：疫苗于37℃贮存10-30d不破乳。 ②离心加速分层法：在一个半径为10cm的离心器中装油乳剂，3000r/min离心 15min不分层，相当于保存1a以上不破乳。 ⑷乳剂类型的测定 ①Robertson的染料法：用“SudanⅡ油溶性染料”和“亮蓝FCF”水溶性染料， 分别加入两份乳剂中，轻轻摇动，若是整个乳剂染油溶性染料即外相为油（W/O）， 若整个乳剂染水溶性染料即外相为水（O/W）。 ②冲淡或滴于冷水表面：此法是根据乳状液搀合的物质（油或水）来确定外相的性质。 ③电导法：因为多数的油皆是不良导体，而水则是良导体，用万能电表把两极分开插 入乳剂中，能导电者外相为水，为水包油乳剂；不能导电者外相为油，为油包水乳剂。 ⑸粒度大小及分布的测定：用显微镜直接观察，或用光散射法和透射法或微计测定之， 以直径10um均匀颗粒的乳剂为较好。
药物分析第二章药品质量标准()
现以在《中国药典》2010年版正文中收载的 阿司匹林为例说明。
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阿司匹林
Asipilin
Aspirin
C9H8O4 180.16 本品为2-（乙酰氧基）苯甲酸。含C9H8O4不得少于 99.5%。
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C. 50 ml滴定管
D. 50 ml量瓶
E. 100 ml量筒
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例4. 中国药典中规定，称取“2.00 g”系指
A. 称取重量可为1.5～2.5 g
B. 称取重量可为1.95～2.05 g
C. 称取重量可为1.995～2.005 g D. 称取重量可为1.9995～2.0005g
二部收载化学药品、抗生素、生化药品、 放射性药品及各类制剂，还有药用辅料等；
第三部收载生物药品。
同时配套出版了《中国药典》2010年版英文版。
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1．收载品种
本版药典共收载4567个品种,其中新增1386种，修订 2237种。
一部收载品种2165种,其中新增1019种，修订634种； 二部收载品种2271种，新增330种，修订1500种；
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小结
二、《中国药典》的内容
（二）品名目次
（三）正文 （四）附录
（五）索引
三、现行中国药典 四、局（部）颁标准和地方标准 五、地方标准上升国家标准的概况 六、药品质量标准的制订原则
七、几部外国药典
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附：练习题
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生物制品的检测内容
生物制品的检测内容有哪些？
答：生物制品的质量检定包括安全性和效力检定两个方面：前者包括毒性试验、防腐剂试验、热原质试验和有关安全性的特殊试验等；后者包括浓度测定（含菌数或纯化抗原量）、活菌率或病毒滴度测定、动物保护率试验、免疫抗体滴度测定和稳定性试验等。
将生物制品的质量检测大致分为理化检定、安全检定和效力检定三个方面。
1、物理性状的检查：包括外观、真空度及溶解速率和装量；
2、蛋白质含量测定：用以检查有效成分、计算纯度和比活性。
常用测定方法有凯氏定氮法、酚试剂法和双缩脲法等；
3、防腐剂和灭火剂含量测定：苯酚、甲醛、三氯甲烷和汞制剂等非有效成分的含量应控制在一定限度内；
4、纯度检查：通常采用电泳法和HPLC；
5、相对分子质量或分子大小测定：常用凝胶层析法、SDS-PAGE法和超速离心分析法；
6、其他：水分、酸碱度和氯化钠测定；
7、安全检查：过敏性物质检查；杀菌、灭活和脱毒检查；残余毒力和毒性物质的检查；外源性污染的检查；
8、生物制品的效力测定：免疫力试验（定量免疫定量攻击法、变量免疫定量攻击法、定量免疫变量攻击法、被动保护力测定）、活菌数和活病毒滴度测定、血清学试验和其他有关效力的检定和评价；
9、杂质：宿主细胞（菌）蛋白质残留量检查、外源性DNA残留量检查、残留抗生素的检查和产品相关杂质的检查。
生物制品的质量检验—生物制品的效力检验
将药物的供试品（T）和已知效价的标准品（S）对生物体 进行同时对比，以对T的效价（或毒力）进行检定的方法。 属于对比检定。
S— dS （标准品剂量）； PS （标准品效价） T— dT （供试品剂量）； PT （供试品效价）
常以产生等反应时的效价比值R得出
R= PT/PS
等反应对比检定原理
✓Reed-Muench法计算
(难点、重点)
病C毒C液IDC5P0E孔数 无CPE
累计
出现CPE孔
稀释度
孔数 CPE孔数 无CPE孔数 所占的%
10-1
8
0
27
0
100（27/27）
10 -2
8
0
19
0
100（19/19）
10 -3
7
1
11
1
91.6 （11/12）
10 -4
3
5
4
6
40（4/10）
2 随机区组设计
将分成8各区组（如来自8个窝的动物）的32个受试者随机分配到 A,B,C,D四个处理组各区组中的受试者被随机分配接受的不同处理
3 微量生理活性
物质测定
应用 范围
1 药物效价测定
2 某些有害杂质
限度检查
微量生理活性物质测定
一些神经介质，激素等微量生理活性物质，由于其很 强的生理活性，在体内的浓度很低，加上体液中各种物 质的干扰，很难用理化方法测定。
而不少活性物质的生物测定法由于灵敏度高、专一性 强，对供试品稍作处理即可直接测定。
整体动物
体外测定
(in vitro) 离体器官、组织,微生 物, 酶和细胞
定量、半定量、定性 药品的生物效价、 安全检查、鉴别
国家食品药品监督管理局关于进一步加强生物制品批签发管理工作有关事项的通告
国家食品药品监督管理局关于进一步加强生物制品批签发管理工作有关事项的通告文章属性•【制定机关】国家食品药品监督管理局(已撤销)•【公布日期】2007.11.15•【文号】国食药监注[2007]693号•【施行日期】2007.11.15•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】药政管理正文国家食品药品监督管理局关于进一步加强生物制品批签发管理工作有关事项的通告（国食药监注[2007]693号）为切实保障生物制品质量安全，根据《生物制品批签发管理办法》的有关规定，现就进一步加强生物制品批签发管理工作的有关事项通告如下：一、国家食品药品监督管理局授权中国药品生物制品检定所以及北京、吉林、上海、湖北、广东、四川、甘肃等省（市）级药品检验机构承担生物制品批签发工作；授权15位签发人代表国家食品药品监督管理局签发生物制品批签发证明文件（见附件1）。
二、目前已开展生物制品批签发的品种包括所有预防用疫苗、人血白蛋白及静注人免疫球蛋白类血液制品；用于血源筛查的4种体外生物诊断试剂及ABO血型定型试剂仍按原批批检定方式进行（见附件2）。
国家食品药品监督管理局将根据实际情况，年内逐步对所有血液制品实施国家批签发。
三、各承担生物制品批签发工作的药品检验机构在本单位的网站上每2周公布已批签发产品的情况。
内容包括：品种名称、企业名称、规格和数量、批号、有效期、签发结论等有关信息。
四、生物制品批签发采用批记录摘要审查和实验室检验相结合的方式进行。
实验室检验项目和抽检比例等具体事项由中国药品生物制品检定所负责组织论证后确定并通知承担生物制品批签发工作的药品检验所。
疫苗、血液制品生产企业的派驻监督员负责批签发产品的现场抽样和封样工作（抽样程序见附件3）。
五、承担生物制品批签发工作的药品检验机构如增加批签发品种的检验或者复核工作，须通过国家食品药品监督管理局组织的检查和验收，被授权后方可开展批签发工作。
六、纳入生物制品批签发的疫苗类制品和人血白蛋白进口通关备案时，需按照《药品进口管理办法》的相关规定，提供由生产国或者地区药品管理机构（或者授权批签发机构）出具的批签发证明原件。
生物制品学生物制品的质量管理、检定与标准化
*
10
第一节 生物制品的BMP管理
六、生物制品GMP认证检查要点
3．“脱毒前”与“脱毒后”
“脱毒前”系指破伤风梭状菌、白喉杆菌繁殖培
养时，生产大量破伤风毒素及白喉毒素，对
人体有致病性，这一阶段为“脱毒前”。
“脱毒后”系指毒素中加入一定量甲醛或适宜脱
毒剂，将毒素去掉毒性，不再具有致病性，
仍保留其抗原性和免疫原性，称之为“脱毒后”
生物制品检定的依据 《中华人民共和国药典》 《中国生物制品规程》
*
19
第二节 生物制品的质量检定
生物技术药物质量标准研究的依据
一、主要依照《重组DNA产品质量控制要点》 、《中国生物制品规程》、《中国药典》等 要求进行。
二、参考世界卫生组织（WHO）和美国FDA颁布 的指南、ICH文件和《欧洲药典》。
因此，血液制品、抗血清、人和动物组织 生产制备制品时，须有专用生产场所、生 产* 设备及器材，不可与其他生物制品混用 12
第一节 生物制品的BMP管理
六、生物制品GMP认证检查要点 5．芽孢菌制品，系用炭疽杆菌、破伤风梭菌 、肉毒梭菌等含有芽孢菌来生产制备的制品， 芽孢菌是微生物对外周环境抵抗力最强的生命 单位。
*
28
效价测定一般原则
1、国际通用方法； 2、测定结果须用国际或国家标准品
校 正，以国际单位表示。
*
29
生物学活性测定方法分类
1）体外细胞培养测定法
a、促进细胞生长作用（G-CSF:NFS-60 ）
b、抑制细胞生长作用 (TNF:L929)
c、间接保护细胞作用 (IFN:VISH;VSV)
2）离体动物器官测定法
*
27
一、生物学活性测定和比活性
药品GMP检查指南(生物制品)
一．机构与人员[检查要点]药品生产和质量管理的组织机构对做好药品生产全过程监控至关重要；适当的组织机构及人员配备是保证药品质量的关键因素；人员的职责必需以文件形式明确规定；培训是实施药品GMP工作中的重要环节。
0402 生物制品生产企业生产和质量管理负责人是否具有相应得专业知识（细菌学、病毒学、生物学、分子生物学、生物化学、免疫学、医学、药学等），并具有丰富的实践经验以确保在其生产、质量管理中履行其职责。
1．主管生物制品生产企业的生产和质量管理的企业负责人应具备医药及生物学等方面的专业知识和实践经验才能确保其在生产、质量管理中履行职责。
生物制品是药品的一大类别。
生物制品是应用普通的或以基因工程（Genetic Engineering）、细胞工程（Cell Engineering）、蛋白质工程（ProteinEngineering）、发酵工程（Fermentation Engineering）等生物技术获得的微生物（细菌、噬菌体、立克次体、病毒、寄生虫等）、细胞及各种动物和人源的组织和体液等生物材料制备，其制备过程是生物学过程和无菌操作过程，并用于预防、治疗、诊断疾病的药品。
我国目前生产和使用的生物制品有200多种，各生物制品生产企业所生产的品种各不相同，基于生物制品起始原辅材料、生产制备过程及质量控制等的固有特性，细菌类或病毒类疫苗（包括毒素、类菌素、抗毒素及抗血清等）生产企业的生产和质量管理负责人应具备细菌学或病毒学、生物化学、分子生物学、免疫学、流行病学等方面的专业知识；细胞因子及其他活性生物制剂生产企业，应具备生物化学、免疫学、分子生物等方面的专业知识；DNA产品生产企业，应具备现代生物技术、分子生物学、遗传学、免疫学等方面的专业知识；体内及体外诊断试剂生产企业应具备生物学、免疫学、生物化学等方面的专业知识；血液制品生产企业，应具备生物化学、分析生物学、病毒学等方面的专业知识。
2．本项规定应具备的相应专业知识，也不可机械地局限到一个人所学的具体专业学科。
ICH生物技术生物药品的质量要求
批准以后 的可比性
已生产 产品
已批准 正开发
不同阶段 的可比性
产品
改变生产 工艺
工 艺 步 骤 Y-B 工 艺 步 骤 Y-C 工 艺 步 骤 Y-C
药厂B 药厂C 药厂D
工艺步骤X
药厂A 发明者
工艺步骤Y
药厂A 发明者
………
第24页/共64页
生物可比性（Q5E）
．
研究的主要课题
改变的阶段，改变的程度。
生产工艺全过程要严格执行GMP，以免去除病毒或灭活病
毒
第12页/共64页
细胞的表达构建体分析（Q5B）
1. 表达构建体为含有重组蛋白编码序列的表达载体。 表达构建体 分析的目的是确保产品的正确编码序列被导入到宿主细胞，并从培养 到生产结束保持不变，以保证终产品的质量和一致性。 2. 在活细胞中产生的重组蛋白，其基因序列可能发生突变而改变蛋 白质的性质，从而对病人产生潜在的副作用。蛋白质分析方法有时不 能检测到所有重组蛋白编码序列突变造成的蛋白质结构变化， 核酸 分析可用于验证表达构建体的编码序列和物理状态。因次，用核酸分 析和蛋白质分析才能保证最终产品的氨基酸序列。
蛋 白 与 人 体 相第5差页/较共6多4页。
基因工程药物的评价
要从以下三方面:
（1）起始材料的评价，包括宿主细胞及用于生产的基因的
来
源、性质和序列的基础资料。
（2）制造过程的评价。
（3）最终产品的评价。
第6页/共64页
ICH对生物技术/生物制品质量要求的文 件
ICH对生物技术/生物制品的质量要求，除了应符合 ICH有关文件外，在质量部分，重点提出了６个文件： ICH Q5A、Q5B、Q5C、Q5D、Q5E 和 Q6B。
生物制品无菌检验规程
生物制品无菌试验规程生物制品不得含有杂菌（有专门规定者除外），灭活菌苗、疫苗不得含有活的本菌、本毒。
在制造过程中应由制造部门按各制品制造及检定规程规定进行无菌试验，分装后的制品须经质量检定部门做最后检定。
各种生物制品的无菌试验除有专门规定者外，均应按照本规程的规定进行。
1 抽样1.1原液及半成品原液及半成品应每瓶分别进行无菌试验，其抽样量应至少为0.1%，但不得少于1.0ml。
1.1.1 大罐稀释的制品抽样数量不得少于10ml。
1.1.2 原液及半成品每开瓶一次，应如上法抽验。
1.2 成品每亚批均应进行无菌试验，样品应随机抽取，应具有代表性（包括分装过程的前、中、后样品）。
1.2.1分装量在100支（瓶）或以下者抽检不少于5支，101～500支（瓶）者抽检不少于10支（瓶），501～10000支（瓶）者抽检不少于20支（瓶，10001支（瓶）以上者抽检40支（瓶）。
1.2.2每瓶装量20ml以上的冻干血液制品，每柜冻干200瓶以下者抽检2瓶，200瓶及以上者抽检4瓶。
6～20ml抽检量加倍。
5ml和5ml以下者按1.2.1项抽检。
1.3凡规定需作支原体检查的制品，均应在半成品时按亚批进行检查，成品可不再做。
2 无菌试验用培养基（培养基处方可附录1）2.1 检查制品中本菌是否存活应采用适于本菌发育生长的培养基（在半成品时检查，有专门规定者除外）。
2.2 检查需氧性和厌氧性杂菌应采用硫乙醇酸盐培养基。
检查不含汞类防腐剂制品中的需氧性和厌氧性杂菌时，该培养基中可不加硫乙醇酸盐。
检查霉菌和腐生菌应采用改良马丁培养基。
检查混浊制品可采用不含琼脂的硫乙醇酸盐培养基。
检查活菌苗时可加大琼脂含量，做成斜面。
2.3 检查支原体应采用猪胃消化液半固体或牛心消化液半固体培养基。
2.4 生物制品无菌试验用培养基亦可用经检定合格的干燥培养基配制。
2.5 无菌试验培养基的灵敏度，乙型溶血性链球菌（32210株）应达到10-8，短芽胞杆菌（7316株）和生孢子梭状芽胞杆菌（64941株）应达到10-7，白色念珠菌（ATCc 10231）和腊叶芽枝霉应达到10-6。
某生物制品企业检查缺陷
观察为11000瓶），所有培养瓶全部正立放置。
3. 冷库管理人员未对新修订的《产品退货处理SOP》和《成 品贮存及冷链运输管理SOP》进行培训。
存在问题
4. 实验动物房周围环境较差，厂区内养狗，地面露 土，未对周围施工人员进行有效管理。
5. 精密仪器实验室与分包装1车间的灯检间相连。
6. 分包装车间参观走廊内存放有低硼硅玻璃管制注 射剂瓶（批号：09101717）和抗生素瓶用铝塑组 合盖（批号：0904092）。 7. 半成品通过洗瓶间传入灌装间、抗生素瓶用铝塑 组合盖通过灌装间传入轧盖间。
08072）中总蛋白含量检测结果超标，按偏差去处理。
2. 分包装二车间西林瓶灌装线《微生物挑战测试报告》 （VD-R-09017）显示：培养基灌装量为0.5ml，而产品规 格包括30ug/1.0ml/瓶，15ug/0.5ml/瓶；未将所有灌装的 培养基瓶进行培养观察（轧盖合格11945瓶，移交QC培养
基本信息
生产企业名称：xx生物制品有限公司
生产地址： 检查日期：
检查类型：
检查范围：甲型H1N1流感病毒裂解疫苗 检查依据：中国《药品生产质量管理规范》(1998年修订) 检查员： 观察员：
存在问题
1. 未建立OOS管理程序，把超过内控标准的检测结果当作偏 差去处理。如手动层析系统清洁验证（验证报告：VD-R-
存在问题
18. 成品仓库Ⅱ中存放一批退回的流感病毒裂解疫苗（批号
20090838，数量34435支，规格0.5ml/支），货位卡上未
记录退货日期和退货原因。 19. 不合格退货产品台帐记录不规范。 20. 检验Triton X-100含量的高压液相色谱柱（Agilent ealipse XDB-C18 4.6x250mm,5um）与SOP规定的生产 也未经过验证。 21. 成品冷库Ⅱ第3号探头温度显示8.5℃，限度为2-8℃，未填
生物制品
25死疫苗：不能在动物体内繁殖，比较安全，不发生全身性副作用，无毒力返祖现象，有利于制备多价或多联等混合疫苗
26多价苗：指用同一种微生物中若干血清型菌（毒）株的增殖培养物制备的疫苗。
27抗血清：含有针对某种病原的特异性抗体的血清。
3禽胚培养法是用来培养某些对禽胚敏感的动物病毒的一种培养方法，可用于多种病毒的分离、培养、滴度的测定、中和试验以及抗原制备，也广泛用于生物制品的研究和生产
4细胞培养：cell culture用机械的方法(剪碎)或化学的方法(胰酶)，使动物组织或传代细胞分散成单个细胞悬液后，给以相应的营养和温度等条件，在体外进行培养
5、试比较弱毒疫苗和灭活疫苗的优缺点？活疫苗优点;可以在免疫动物体内繁殖；能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应；免疫力持久，有利于清除局部野毒；产量高、生产成本低。缺点：有毒力增强和返祖危险；有不同抗原的干扰现象；要求在低温、冷暗条件下运输和储存。灭活苗优点：比较安全，不发生全身性副作用，无毒力返祖现象；有利于制备多价或多联等混合疫苗；制品稳定，受外界环境影响小，有利于保存运输。缺点：死疫苗不能在免疫动物体内繁殖；疫苗免疫剂量大，生产成本高，需多次免疫；只能诱导机体产生体液免疫和免疫记忆，故常需要用佐剂或携带系统来增强其免疫效果。。弱毒疫苗只需要很小的剂量就可刺激动物体产生强烈的免疫反应，而且免疫维持时间长，一般可达1年甚至更长时间。而灭活疫苗诱导机体产生的免疫应答较弱且免疫维持时间短。但弱毒疫苗保存条件较严格，运输不如灭活疫苗方便。
2影响灭活作用的因素有哪些？1灭活剂特异性2微生物种类与特性3灭活剂浓度4灭活剂温度5灭活时间（灭活时间与灭活剂浓度和作用温度密切相关）6酸碱度（在微酸性时灭活速度慢，抗原性保持较好；碱性时灭活速度快，担抗原性易受破坏7有机物存在
生物制品检验工作规范2020
附件4生物制品检验工作规范第一章依据、术语与适用范围第一条为进一步规范生物制品检验检测工作，依据《药品检验机构资质认定条件与检验工作规范》、《生物制品批签发管理办法》及相关法律、法规的规定，制定本规范。
第二条生物制品是药品的一部分。
生物制品是指以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为起始原材料，用生物学技术制成，用于预防、治疗和诊断人类疾病的制剂，如疫苗、血液制品、生物技术药物、微生态制剂、免疫调节剂、诊断制品等。
第三条本规范适用于承担生物制品检验检测的实验室。
第二章实验室和人员第四条生物制品检验检测实验室（以下简称实验室）应当是能够承担相应法律责任的法人或其他组织，不具备独立法人资格的实验室应当经所在法人单位授权。
第五条实验室所在机构应当有相应的部门管理试剂耗材、仪器设备、实验室设施和实验动物，做好各项条件保障的组织和供应工作，保证检验检测工作的正常进行。
第六条涉及病原微生物实验活动的实验室所在机构应当设立生物安全管理部门，建立生物安全管理体系，负责实验室生物安全的管理和监督。
—1 —第七条实验室所在机构应当设立技术负责人、质量负责人和授权签字人，应当明确其职责和权力。
第八条技术负责人应当具有医学、药学或生物学等相关专业教育背景，本科或以上学历，高级专业技术任职资格，有5年以上药品检验工作经历和2年以上管理工作经验。
第九条质量负责人应当具有医学、药学或生物学等相关专业教育背景，本科或以上学历，中级及以上专业技术任职资格，有3年以上药品检验工作经历和2年以上质量管理工作经验。
第十条授权签字人应当具有医学、药学或生物学等相关专业教育背景，本科或以上学历，中级及以上专业技术任职资格，有5年以上药品检验工作经历或药品检验管理工作经验。
应当熟悉标准和方法，对生物制品检验中有关问题能作出正确判断和处理，并对所签发的检验报告负责。
第十一条承担检验检测工作的实验室负责人应当具有医学、药学或生物学等相关专业教育背景，并具备5年以上实验室检验检测工作经验或中级以上技术职称，能有效地组织和开展生物制品的检验工作，对检验检测中的有关问题做出正确判定和处理。
常见病毒性产品安全检验和效力检验
注：红色字体疫苗表示可采用此方法，
也可采用其他方法。
4、病毒含量测定效检方法举例
口蹄疫O、A型活疫苗单价苗的效力检验：将疫苗 用PBS做10倍系列稀释，O型苗以10-5、10-6、10-7 三个个稀释度，A型苗以10-6、10-7、10-83个稀释 度，各皮下接种3—4日龄乳鼠4只，每只0.1ml， 观察4-5日，根据乳鼠发病死亡数计算LD50 ，每 0.1ml O型苗≥105.5 LD50， A型苗≥106.5LD50，判 为合格。 山羊痘活疫苗效力检验方法之一：按瓶签注明 头份，用生理盐水稀释测其毒价，每头份病毒含 量应≥103.5 TCID50。
安全检验注意事项
8.安全措施：（1）检验过程中应注意防 止对检验人员和环境的污染，检验人员必 须穿戴工作服、口罩及相关的安全防护器 具，撒在操作台、地面的产品要进行消毒 处理。检验完毕后开封的产品均要进行高 压灭菌处理。（2）发病或死亡动物、粪 便及其污染物必须严格按照“防止散毒” 等相关规定处理。（3）怀孕或手部有外伤的
安全检验四种类型的主要产品
用本动物进行安全检验（18种）：鸡新城疫灭活疫苗、鸡产蛋下降综合 征灭活疫苗、鸡传染性鼻炎和鸡新城疫二联灭活疫苗、兔出血症灭活疫 苗、鸡痘活疫苗（Ⅰ）、鸡痘活疫苗（Ⅱ）、鸡传染性支气管炎活疫苗 （H120、H52）、鸡新城疫中等毒力活疫苗、鸡传染性法氏囊中等毒力株 活疫苗（B87）、鸭温活疫苗、小鹅瘟活疫苗、鸡新城疫、鸡传染性支 气管炎二联活疫苗、鸡传染性喉气管炎活疫苗、猪瘟活疫苗（Ⅱ）、伪 狂犬活疫苗、山羊痘活疫苗、绵羊痘活疫苗。 本动物或实验动物（或鸡胚）任选其一的安全检验（3种）：鸡马立克 氏病活疫苗、鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗、鸡新城疫低毒力活疫 苗 。 只用实验动物进行的安全检验（3种）：牛瘟活疫苗（Ⅰ）、牛瘟活疫 苗（Ⅱ）、伪狂犬灭活疫苗 。 用本动物和实验动物同时进行的安全检验（6种）：牛口蹄疫O型灭活疫 苗、口蹄疫O、A型活疫苗、马传染性贫血活疫苗、猪口蹄疫O型灭活疫 苗、猪瘟活疫苗（Ⅰ）、猪瘟、猪丹毒和猪肺疫三联活疫苗。
生物制品概述及检查要点ppt课件
2019-30来自重组DNA产品质量控制要点
6. 半成品及成品应按现行《中国生物制品规程》相关 标准进行检定；
7. 工程菌株应进行菌落形态、革兰氏染色、抗生素的 抗性、电镜检查、生化反应、表达量、质粒酶切图 谱等检查；
8. 工程细胞应进行外源因子（细菌、真菌、支原体、 病毒）检查、致病性实验、细胞鉴别试验、表达量 测定等；
主要产品：人血白蛋白
静注人免疫球蛋白
人免疫球蛋白
人凝血因子
特异性免疫球蛋白等
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细胞因子和重组DNA产品
由健康人血细胞增值、分离、提纯或由重 组技术制成的多肽类或蛋白类制剂。
主要产品：干扰素(IFN) 白细胞介素(IL) 集落刺激因子(CSF) 红细胞生成素 (EPO)等
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诊断制品
排斥野毒
病原
4. 可提纯抗原，加入佐剂增加 免疫效果
缺 1. 抗原不稳定，灭活即失效 1. 一般需注射2~3次才明显有效
2. 易污染其它病原 点
2. 一般仅产生体液免疫
3. 抗原要求量大，制造工艺较 繁琐
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三、生物制品的基本属性和特点（一）
其起始材料均为生物活性物质；
生物制品生产加工全过程是生物学过程，是无 菌操作过程；
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二、生物制品分类
按生物制品的组成和性质可分为: 疫苗（Vaccines） 抗毒素及免疫血清(Antitoxin and Antisera) 血液制品（Blood Products） 细胞因子和重组DNA产品（Cytokines and Recombinant DNA Products） 诊断制品(Diagnostic Reagents) 其他制品
美国药典USP36微生物限度检查
USP36 1117 优良微生物检测规范（中英文1/ 2）2013-08-09 15:30:46| 分类：USP|举报|字号订阅1117 MICROBIOLOGICAL BEST LABORATORY PRACTICES 优良微生物检测规范INTRODUCTION 介绍Good laboratory practices in a microbiology laboratory consist of activities that depend on several principles: aseptic technique, control of media, control of test strains, operation and control of equipment, diligent recording and evaluation of data, and training of the laboratory staff. Because of the inherent risk of variability in microbiology data, reliability and reproducibility are dependent on the use of accepted methods and adherence to good laboratory practices.优良微生物检测规范由一些活动组成，这些活动依赖于几个基本要素：无菌技术、培养基控制、检测用菌株控制、设备操作和控制、完善的记录和数据评估、化验室员工的培训。
由于微生物数据具有天生的不确定性，数据的可靠性和重复性取决于是否使用被接受的方法，以及是否严格遵守化验室规范。
MEDIA PREPARATION AND QUALITY CONTROL 培养基制备和质量控制Media Preparation 培养基制备Culture media are the basis for most microbiological tests. Safeguarding the quality of the media is therefore critical to the success of the microbiology laboratory. Media preparation, proper storage, and quality control testing can ensure a consistent supply of high-quality media.培养基是大多数微生物测试的基础。
病毒检测记录
检定依据：《中华人民共和国药典》现行版检定方法：见《病毒检测SOP》S0P-Z1008-01 一、设备/用具二、试剂1细胞病变检查(1)样品制备：取m1待检血清加入m1的MEM细胞培养液中；再取m］阴性血清加入m1'IEM细胞培养液中。
(2)接种细胞：将准备好的二倍体细胞、Vero细胞、牛肾细胞、BT细胞消化后，种入75cι√细胞瓶中，加入上述培养液(含15%待检样品和阴性血清的培养液)，每种细胞接种瓶，每瓶加液体m1,于37C培养天。
第天换液一次。
(3)盲传：第一天进行第一次盲传，将上述接种供试品的四种细胞和阴性对照，分别传出个75cm2细胞瓶，继续培养天,在第天时换液一次。
(4)第二次盲传：第天时进行第二次盲传，将第一次传代后的细胞培养物分别传至_____________ 孔细胞培养板中，每种细胞接种孔。
其中孔加入已处理好的盖玻片。
继续培养至第21天。
剩余细胞保存备用。
(5)阴、阳性对照制备：第天阴性对照瓶细胞达到70%汇合时，取VerO和BT细胞种入含盖玻片的12孔板中，置37°C5%C02培养箱中，次日，Reo3和PI3种入VerO细胞，每种病毒种5孔，留2孔做阴性对照。
BVDV.BPV>BAV-3接种于BT细胞中，每种病毒种3孔，留3孔做阴性对照。
置37℃5%C02培养箱中，吸附_____________ 至______ ,弃去上清液，加入细胞维持液，继续培养7天。
(6)接种观察记录日期：_____ 年____ 月_____ 日2血吸附病毒检查：.培养天后，将上述接种供试品的每种细胞取—孔，接种了BPI3的Vero细胞取—孔，未接种病毒的VerO细胞取孔，用%的鸡和豚鼠红细胞混合悬液覆盖于细胞表面，℃放置_____ 至o然后置 ____________ C至,分别进行镜检，观察红细胞吸附情况。
3、免疫荧光抗体检查法(D取第二次盲传后的供试品飞片，每种细胞取2片。