亲和色谱技术研究进展
中药有效成分提取分离新技术的研究进展
中药有效成分提取分离新技术的研究进展提取是中药制剂生产过程中最基本、最重要的环节之一，以下是搜集整理的一篇探究中药有效成分提取新技术的，供大家阅读参考。
摘要：综述超临界流体萃取、微波辅助萃取、超声辅助提取、酶工程技术、动态连续逆流提取及动态循环阶段连续逆流提取、半仿生提取、新型吸附剂电泳、超高效液相色谱(UPLC)、高分离度快速液相色谱(RRLC)和超快速液相色谱(UFLC)、高速逆流色谱、超临界流体色谱、亲和色谱、分子烙印亲和色谱、免疫亲和色谱、生物色谱、分子生物色谱、细胞膜色谱、多维组合色谱、萃取与色谱技术联机耦合、大孔树脂吸附分离、膜分离、分子蒸馏技术及双水相萃取等新技术在中药有效成分提取分离中的研究进展。
�关键词：中药;有效成分;提取分离;新技术;进展中药的化学成分十分复杂，含有多种有效成分，提取其有效成分并进一步加以分离、纯化，得到有效单体是中药研究领域中的一项重要内容。
从天然产物中分离有效成分，并发展新药和寻找先导化合物是药物开发的重要内容。
近年来，在中药有效成分提取分离方面出现了许多新技术、新方法，已显示极大的应用前景，使中医药工业更加生机盎然。
以下笔者将这些新技术的进展作一简要介绍：1 中药有效成分提取新技术的进展提取是中药制剂生产过程中最基本、最重要的环节之一，提取的目的是最大限度地提取药材中的药效成分，避免药效成分的分解流失和无效成分的溶出。
随着现代化工工程技术的迅猛发展，一些现代高新技术不断被应用到中药生产中来，大大促进了中药产业的发展，使中药制药工业技术水平上升了一个新的高度。
1.1 超临界流体萃取技术(supercritical fluid extraction，SFE)SFE是一种以超临界流体代替常规有机溶剂，对目标成分进行萃取的新技术。
以CO2为流体的超临界萃取技术在天然药物提取分离中得到广泛的应用，超临界状态下的CO2的极性与正己烷相似，所以最适合用于溶解亲脂性、低沸点的物质，如挥发油、烃、酯、内酯、醚及环氧化合物等，是目前解决中药制药工业中挥发性或脂溶性有效成分提取分离的有效方法，有很强的实用性。
简述亲和色谱的原理及应用
简述亲和色谱的原理及应用亲和色谱（Affinity chromatography）是一种分离和纯化生物大分子（如蛋白质，核酸）的方法，通过利用生物大分子与特定结构或化学团的选择性相互作用，实现目标分子的吸附和洗脱。
亲和色谱的基本原理是利用亲和剂来特异性选择性地结合目标分析物，而不影响其他非目标分析物的分离。
亲和色谱通常包括固定相、饱和剂和洗脱剂。
亲和色谱的基本原理可以通过以下步骤来描述：1.固定相选择：选择合适的固定相材料，能够与目标分析物发生特异性的相互作用。
常用的固定相有分子筛、离子交换树脂、亲和剂固相。
2.亲和剂选择：选择合适的亲和剂，能够特异性结合目标分析物。
亲和剂可以是与目标分析物发生物理或化学相互作用的配体，也可以是其他与目标分析物有关的结构。
3.亲和剂固定：将亲和剂固定在固定相上，通常通过化学交联或其他方法实现。
这样可以将亲和剂与固定相材料紧密结合，避免在洗脱过程中亲和剂的流失。
4.样品处理：将待分离的样品加入到色谱柱中，使目标分析物与亲和剂发生结合。
在结合过程中，非目标分析物会通过无关亲和相互作用而被移除。
5.洗脱：通过改变洗脱剂的条件或温度，打破目标分析物与亲和剂之间的结合，使目标分析物从固定相上洗脱下来。
亲和色谱有着广泛的应用领域，其中一些重要应用包括：1.蛋白质纯化：亲和色谱是蛋白质纯化中最常用的方法之一、可以通过与目标蛋白质特异性结合的亲和剂来纯化目标蛋白质，例如通过与抗体或配体结合的蛋白A和蛋白G分离抗体。
2.药物筛选：亲和色谱可用于筛选和鉴定与特定药物分子发生高亲和力结合的分子目标。
这种方法在药物发现和药物研究中发挥着重要作用。
3.蛋白质-蛋白质相互作用研究：亲和色谱可以用于研究蛋白质-蛋白质相互作用，帮助揭示生物系统中蛋白质间的相互作用网络。
4.核酸纯化：通过与目标核酸特异性结合的亲和剂，如亲和树脂或亲和柱，可以高效地纯化目标核酸。
5.细胞分离：亲和色谱可以用于分离不同细胞亚群或纯化特定类型的细胞，通过与特定细胞表面标记物结合。
新型重组proteina亲和色谱填料的开发
新型重组proteina亲和色谱填料的开发新型重组蛋白亲和色谱填料的开发引言：亲和色谱是一种常用的蛋白质纯化技术，其中填料的选择对色谱柱的性能和纯化效果有着重要的影响。
目前，已经开发出了多种亲和填料，如金属离子配体、抗体和蛋白A/G等。
然而，传统的亲和填料存在一些局限性，如对大规模生产亲和柱的制备不适用、具有较低的结合能力和选择性等。
因此，有必要进一步开发新型的重组蛋白亲和色谱填料，以满足科研和工业生产的需求。
一、重组蛋白亲和配体的筛选和设计重组蛋白亲和配体是新型亲和填料的关键组成部分，其具有高结合能力和选择性的特点。
在填料的开发过程中，首先需要筛选和设计适用的蛋白质亲和配体。
一种常见的策略是利用分子对接模拟来预测配体与目标蛋白的结合方式和亲和力。
此外，还可以通过蛋白工程技术来改变亲和配体的结构和性质，进一步提高其结合能力和选择性。
二、亲和填料的材料选择和表面修饰亲和填料的材料选择对其性能有着重要的影响。
常用的填料材料包括凝胶、介孔材料和聚合物等。
凝胶类填料具有较高的结合能力，但其分离效率和压力容量较低。
介孔材料具有较大的孔径和表面积，可以提高分离效率和压力容量，但其结合能力较弱。
聚合物填料具有较高的结合能力和分离效率，但其制备过程较为复杂。
因此，可以根据具体需求选择合适的填料材料。
亲和填料的表面修饰是提高其结合能力和选择性的关键步骤。
常用的修饰方法包括活性基团引入、交联和覆盖等。
活性基团引入可以增加填料表面的功能基团，从而提高他们与目标蛋白的亲和力。
交联可以增加填料的稳定性和耐压性，从而提高其使用寿命。
覆盖是将辅助蛋白或寡肽修饰到填料表面，以增加与目标蛋白的结合能力和选择性。
三、亲和填料的性能评价和优化亲和填料的性能评价是指对其结合能力、选择性、稳定性和耐压性等进行定量和定性的分析。
常用的评价方法包括结合等温线测定、选择系数测定和使用寿命评价等。
通过对填料的性能进行评价，可以了解其优势和不足之处，并进一步对填料进行优化。
凝胶色谱亲和色谱研究进展及案例
凝胶色谱亲和色谱研究进展及案例凝胶色谱和亲和色谱是生物化学领域中常用的分离和纯化技术。
在过去几十年中，这两种技术已经取得了重要的研究进展，并成功应用于各种生物分子的纯化和研究中。
凝胶色谱是一种分子大小分离和纯化技术，基于分子在凝胶基质中的大小排列原理。
凝胶基质通常是一种由交联聚合物构成的固体材料。
凝胶色谱的主要原理是根据分子在凝胶中的弥散速率不同来实现分离纯化。
大分子会比小分子更慢地穿过凝胶基质，从而实现分子大小的分离。
由于凝胶色谱非常温和，适用于分离和纯化各种生物大分子，如蛋白质、核酸和多糖。
近年来，凝胶色谱的研究进展主要集中在凝胶基质的改良和优化上。
一项研究使用了新型聚合物材料制备的类孔洞凝胶，提高了溶剂的渗透性，从而加快了分子的弥散速率，实现了更快的分离速度。
另一项研究则利用凝胶微粒内部的导体结构，实现了电场改性的凝胶色谱，提高了分离效果和分辨率。
亲和色谱是一种将目标生物大分子与固定相之间特定的相互作用用于分离纯化的技术。
固定相通常是一种具有特定亲和性的配体，可以选择性地结合目标分子。
亲和色谱的原理是通过结合-解离循环，将目标分子与杂质分子进行选择性分离。
近年来，亲和色谱的研究进展主要集中在配体的开发和优化上。
一项研究使用了新型功能性高分子材料作为固定相，开发了具有高亲和性和选择性的亲和色谱柱，用于蛋白质的纯化。
另一项研究则通过表面改性技术，将金属离子固定在亲和色谱柱表面，实现了对金属离子亲和性蛋白的高效纯化。
总之，凝胶色谱和亲和色谱是生物化学领域中重要的分离和纯化技术。
在过去几十年中，这两种技术取得了重要的研究进展，并成功应用于各种生物分子的纯化和研究中。
随着不断的技术改良和优化，凝胶色谱和亲和色谱将在生物学研究中发挥越来越重要的作用。
凝胶色谱、亲和色谱研究进展及案例
1924 年，俄罗斯学者 Engelhardt提出了“固定化配体原理”，作为分离生物活性物质 的方法，为亲和色谱分离方法的根本。
1970 年，Cuatrecases 提出了“空间间隔臂”概念和方法，成功解决了配位体的立体 可接受性问题。
金属有机骨架化合物（MOFs）因具有比表面积大、结构多样性、孔道尺寸可调、骨架 可修饰、热稳定性和化学稳定性良好等优点而广泛应用于分离分析等领域。西班牙 Balearic Islands大学的 Palomino课题组利用注射器设计了一种针管式自动磁性 （MOFs ）分散固相微萃取装置。
固定相
多孔整体材料作为一种新型分离介质，由于其具有制备简便、通透性好、性能稳定和 易于修饰等特点而被誉为第四代色谱分离介质。邹汉法课题组发展了一种基于光引发 巯基－丙烯酸酯点击聚合反应的新方法，并成功制备了具有高分离性能的有机－硅胶 杂化整体柱。与巯基－烯和巯基－甲基丙烯酸酯点击聚合反应相似，光引发的巯基－ 丙烯酸酯点击聚合反应不仅反应效率较高，速度快，而且反应条件非常温和。
分子印迹技术是采用人工合成方法制备对目标分子有特异性识别材料的技术。由于蛋 白质体积大、结构复杂、易于变性，完整蛋白质模板分子难以获得且价格昂贵，因此 限制了蛋白质分子印迹材料的发展。中国科学院大连化学物理研究所张丽华研究员课 题组提出了一种蛋白质抗原决定基分子印迹磁性纳米材料的制备新方法。抗原决定基 印迹是以目标蛋白质上一段特异性多肽为模板分子进行印迹。由于模板肽段与目标蛋 白质间存在极强的特异性，形成的印迹位点对模板肽段及目标蛋白质均具有特异性识 别能力。
1、中国色谱发展概况
新冠疫苗 亲和色谱 -回复
新冠疫苗亲和色谱-回复新冠疫苗是当今全球关注的焦点话题之一，而亲和色谱则是一种常用的分离和纯化技术。
本文将会详细介绍新冠疫苗的亲和色谱进展，以及亲和色谱在疫苗研发中的应用。
一、新冠疫苗简介新冠病毒是一种由SARS-CoV-2引起的呼吸道传染病，其传播速度极快，严重威胁着全球人民的健康和经济。
为了应对疫情，科学家们积极开展了新冠病毒疫苗的研发工作。
二、亲和色谱的基本原理亲和色谱是一种分离和纯化生物大分子的方法，通过利用生物分子之间相互作用的特异性，使目标分子选择性地与固定相结合。
常见的亲和色谱方法包括亲和层析和亲和吸附。
三、亲和色谱在新冠疫苗研发中的应用新冠疫苗的研发是一个复杂而漫长的过程，其中亲和色谱技术发挥了重要作用。
下面将介绍亲和色谱在新冠疫苗研发中的几个典型应用。
1. 抗原纯化亲和色谱可以用于抗原的纯化，以获得高纯度和高活性的抗原。
研发新冠疫苗时，科学家需要从新冠病毒中提取出目标抗原，并将其纯化，以便后续的疫苗研究和制备工作。
2. 抗体纯化研发新冠疫苗的关键是获得高效的抗体。
亲和色谱可用于抗体的纯化，以去除杂质和其他非特异性成分。
纯化后的抗体可用于体外研究、体内动物试验以及临床试验等。
3. 抗体结构研究亲和色谱还可以用于抗体结构的研究。
通过利用与特定抗体亲和的配体分离，科学家可以更好地了解抗体的结构和功能。
这对于了解抗体的作用机制以及优化疫苗设计具有重要意义。
4. 结合亲和素的载体构建研发新冠疫苗时，科学家还需要将目标抗原与亲和素结合，以获得更好的免疫原性和稳定性。
亲和色谱可以用于合成亲和素与目标抗原结合的载体，为疫苗研发提供有力支持。
四、新冠疫苗研发中的亲和色谱进展近年来，亲和色谱在新冠疫苗研发中得到了广泛应用，并取得了一些重要进展。
1. 抗原纯化的改进传统的亲和色谱方法在抗原纯化中存在一些问题，比如选择性不高、纯化效率低等。
研究人员通过改进亲和色谱的材料和工艺，提高了抗原纯化的效率和纯度。
细胞膜色谱技术在多肽类成分筛选的研究进展
㊀基金项目:山东省中医药科技项目(Ｎｏ.２０２０Ｑ０２３)ꎻ山东省自然科学基金(Ｎｏ.ＺＲ２０２０ＭＨ３８６)ꎻ国家重点研发计划政府间国际科技创新合作项目(Ｎｏ.２０１９ＹＦＥ０１１７８００)ꎻ中央引导地方科技发展专项基金(Ｎｏ.ＹＤＺＸ２０２１１１７)ꎻ山东省重点研发计划(科技示范工程)(Ｎｏ.２０２１ＳＦＧＣ１２０５)作者简介:孙铁锋ꎬ男ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ研究方向:中药药理ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｓｕｎｔｉｅｆｅｎｇｌｏｖｅ＠１６３.ｃｏｍ通信作者:王平ꎬ女ꎬ博士ꎬ研究员ꎬ研究方向:中药药理ꎬＴｅｌ:０５３１－８２９４９８２５ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｗａｎｇｐｉｎｇｊｉｎａｎ＠１６３.ｃｏｍ细胞膜色谱技术在多肽类成分筛选的研究进展孙铁锋１ꎬ王平１ꎬ２ꎬ丁相龙３ꎬ丁立钧４ꎬ姜其宝５ꎬ王金国４(１.山东省中医药研究院ꎬ山东济南２５００１４ꎻ２.天津大学精密测试技术及仪器国家重点实验室ꎬ天津３０００７２ꎻ３.青岛市黄岛区第二中医医院ꎬ山东青岛２６６４００ꎻ４.日照市中医医院ꎬ山东日照２７６８００ꎻ５.山东中医药大学ꎬ山东济南２５０３５５)摘要:近年来ꎬ随着色谱技术的不断发展ꎬ细胞膜色谱在多肽类活性物质的研究中得到了广泛的应用ꎮ本文在总结国内外相关文献的基础上ꎬ介绍了细胞膜色谱技术的原理和特点㊁细胞膜色谱技术的分类以及细胞色谱技术在多肽类活性成分的研究进展ꎮ总结并提出了细胞膜色谱检测多肽的优点㊁目前存在的问题ꎬ展望了前景ꎮ关键词:细胞膜色谱ꎻ多肽类成分ꎻ筛选中图分类号:Ｒ９６５.１㊀文献标志码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２３)１１－０９２６－００７ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２３.１１.０１４ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｎｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓＳＵＮＴｉｅｆｅｎｇ１ꎬＷＡＮＧＰｉｎｇ１ꎬ２ꎬＤＩＮＧＸｉａｎｇｌｏｎｇ３ꎬＤＩＮＧＬｉｊｕｎ４ꎬＪＩＡＮＧＱｉｂａｏ５ꎬＷＡＮＧＪｉｎｇｕｏ４(１.ＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｉｃｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＪｉｎａｎ２５００１４ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｒｅｃｉｓｉｏｎＴｅｓｔｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓꎬＴｉａｎｊｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＴｉａｎｊｉｎ３０００７２ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＨｕａｎｇｄａｏＤｉｓｔｒｉｃｔＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＱｉｎｇｄａｏ２６６４００ꎬＣｈｉｎａꎻ４.ＲｉｚｈａｏＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＨｏｓｐｉｔａｌꎬＲｉｚｈａｏ２７６８００ꎬＣｈｉｎａꎻ５.ＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＪｉｎａｎ２５０３５５ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓꎬｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ￣ｐｈｙｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｓｔｕｄｙｏｆｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ.Ｏｎｂａｓｉｓｏｆｓｕｍｍａｒｉｚｉｎｇｔｈｅｒｅｌｅｖａｎｔｌｉｔｅｒａｔｕｒｅａｔｈｏｍｅａｎｄａｂｒｏａｄꎬｔｈｉｓｐａｐｅｒｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎬｔｈｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｃｅｌｌｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｎｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ.Ｔｈｅａｄ￣ｖａｎｔａｇｅｓａｎｄｅｘｉｓｔｉｎｇｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｂｙｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｅｒｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄａｎｄｐｕｔｆｏｒ￣ｗａｒｄꎬａｎｄｔｈｅｐｒｏｓｐｅｃｔｗａｓｐｒｏｓｐｅｃｔｅｄ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＣｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎻＰｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓꎻＳｃｒｅｅｎ㊀㊀多肽(ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ)是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物ꎬ是蛋白质水解的中间产物ꎮ由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫作二肽ꎬ同理类推还有三肽㊁四肽㊁五肽等ꎮ通常由１０~１００个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽[１]ꎮ它的分子结构是氨基酸和蛋白质之间的化合物[２－３]ꎮ许多中药中都存在着多肽成分ꎬ对于多肽成分的研究日益受到重视ꎬ迫切需要一种有效的方法来筛选和鉴定中药原料中的多肽有效成分ꎬ包括薄层色谱(ｔｈｉｎ－ｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎬＴＬＣ)㊁高效液相色谱(ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎬＨＰＬＣ)㊁气相色谱(ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎬＧＣ)等方法ꎮ已有研究[１０]采用高效液相色谱－高分辨质谱联用技术对几种阿胶块的特征肽进行了鉴定ꎬ鉴定结果准确ꎬ但过程较为复杂ꎮ最近ꎬ细胞膜色谱(ｃｅｌｌｍｅｍ￣ｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎬＣＭＣ)技术的蓬勃发展为筛选和鉴定多肽提供了新思路㊁新方法ꎮ细胞膜色谱是一种利用小分子配体和受体㊁酶和底物㊁抗原和抗体之间的高度特异性相互作用ꎬ或通过氢键㊁离子㊁疏水和亲水相互作用的分子结合能力来模拟体内药物之间相互作用的仿生色谱方法ꎮ近年来细胞膜色谱方法应用于药物受体相互作用的研究和复杂样品中有效或有害成分的筛选[１４]越来越普遍ꎬ细胞膜色谱在高表达受体㊁工程细胞培养等方面取得重大成果ꎬ大大提高了药物成分的筛选速度ꎮ本文拟将近几年关于细胞膜色谱的原理及特点㊁分类以及在多肽类药物成分的筛选方面的研究做个总结ꎮ１㊀细胞膜色谱的原理及特点在细胞膜的表面ꎬ存在着一个活性的受体和一个离子通道ꎬ它们能够与一些药物相结合ꎬ对第二个或者第三个信号分子起到一定的作用ꎬ引发一些生物学效应ꎬ达到药理作用ꎮ细胞膜色谱以硅胶作为载体ꎬ将具有靶向作用的细胞膜固定在硅胶载体上ꎬ利用硅胶表面的硅羟基不可逆地强大的吸附作用和吸附的细胞膜之间的融合作用ꎬ从而使硅胶表面被细胞膜所覆盖ꎬ形成具有生物活性的细胞膜固定相[１５]ꎬ将缓冲溶液作为流动相ꎬ将中药物质添加到缓冲溶液中ꎬ经过一段时间ꎬ中药活性物质被保留在固定相中ꎬ无效成分经过洗脱流出色谱柱ꎬ完成筛选过程ꎮ细胞膜色谱技术可以使细胞膜保持完整性和酶活性ꎬ从而使得细胞膜色谱具有色谱分离㊁活性检测和药物鉴定等作用[１６]ꎬ可以将每味中药的活性成分形成化学库ꎬ一个细胞膜色谱柱形成一种高通量筛选系统ꎬ多类细胞膜色谱柱从而形成中药的高通量筛选系统[１７]ꎬ可以进行定性和定量分析ꎬ具有简便性㊁稳定性等特点[１８]ꎮ２㊀细胞膜色谱的分类及应用根据所选细胞膜是否固定在色谱载体上ꎬ细胞膜色谱技术可分为细胞膜生物亲和色谱技术和细胞膜固相色谱技术[１９]ꎮ细胞膜生物亲和色谱法使用各种生物活性物质(如酶㊁载体蛋白㊁细胞膜等)作为固定相ꎮ由于这种生物活性固定相可以特异性地结合参与人类生活的不同生物活性物质ꎬ生物色谱法可以用来分离和制备具有不同生物活性的物质ꎮ目前ꎬ生物色谱法主要使用固定在色谱支架上的活性生物分子㊁活性细胞膜(或仿生膜)㊁活细胞㊁植物细胞(或细胞壁)[２０]ꎮ细胞膜固相色谱法是利用色谱学技术研究流动相中药物与受体相互作用规律的受体动力学新方法[２１]ꎬ因细胞膜固相色谱的细胞膜上有许多不同的受体ꎬ利用亲和性的生物大分子ꎬ可以特异性地选择性地与作用组分结合ꎬ并与其进行特殊的结合和分离ꎬ具有结合㊁高效㊁稳定的特性ꎬ从而模拟药物与靶点之间的相互作用ꎬ并将特定的组分释放到细胞膜的靶点上[２２]ꎮ２.１㊀细胞膜固相色谱法㊀将特定的活性细胞与植物的浸提物在合适的培养液中进行混合培养ꎬ使其与细胞膜受体特异地结合ꎬ通过洗涤㊁解离等方法将其释放ꎬ然后利用层析技术对解离液中的有效组分进行分离ꎮ这种方法能有效地减少许多非特定成分的干扰ꎬ为中药的活性成分研究提供了一种新的途径[２３]ꎮ主要流程包括:①亲和孵育ꎻ②洗脱ꎻ③提取ꎻ④色谱分离㊁分析㊁比较ꎮ李翠芹等[２４]用兔白细胞膜(ＷＢＣＭ)制成了ＷＢ－ＣＭＣ模型ꎬ并对其在ＷＢＣＭ㊁ＴＬＲ４的作用部位进行了研究ꎮ同时ꎬ利用正相色谱法和反相柱色谱法对白术进行了超临界萃取ꎬ结果表明ꎬ白术中抗炎症作用的主要化学成分是白术内酯Ⅰ和烷烃ꎮ樊宏伟等[２５]通过建立血小板细胞膜色谱模型ꎬ对丹参与血小板间的相互作用进行了研究ꎬ发现此系统中残余组分与其药效关系密切ꎮ结果显示ꎬ血小板液－固相色谱中ꎬ主要的反应物质与受体㊁通道㊁淀粉样前体蛋白(ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎꎬＡＰＰ)等分子间的交互作用ꎬ其他成分与其药效有明显的关系ꎮ朱建梁等[２６]以肾小球系膜细胞膜固相色谱法测定丹皮中的作用组分ꎬ并以其为固定相ꎬ选择性地将其与肾系膜细胞结合ꎬ由此推测ꎬ丹皮酚是其作用部位ꎮ２.２㊀细胞膜生物亲和色谱[２７]㊀通过将一种特殊的细胞膜与一种特殊的载体结合ꎬ从而形成一种与特定的活性组分相结合的细胞膜固定相ꎬ从而能够动态地模拟出体外药物与体内靶基因的相互作用ꎬ并对其合成机理进行了深入的研究ꎮ主要过程是:①分离活性细胞膜ꎻ②固定活性细胞膜ꎻ③制备细胞膜色谱柱ꎻ④细胞膜色谱和分析[２８]ꎮＧｕ等[２９]用骨髓单个核细胞膜色谱法筛选黄芩抗骨质疏松成分ꎬ提高了筛选效率ꎮＬｉ等[３０]以硅胶为载体ꎬ以昆明种小鼠腹腔巨噬制备细胞膜固定相ꎬ通过对鱼腥草进行体外抗氧化剂的筛选ꎬ并与气相色谱 质谱联用仪(ＧＣ－ＭＳ)进行比较ꎬ分析表明ꎬ甲基正壬酮是鱼腥草中主要的抗氧化剂(ＭＮＫ)ꎮＨｏｕ等[３１]制备了以硅胶为载体的ＭＤＡ－ＭＢ－２３１细胞膜固定相ꎬ并用２ＤＬＣ－ＭＳ(二维液相色谱质谱联用仪)分析技术ꎬ筛选厚朴中抗乳腺癌成分ꎬ结果显示ꎬ和厚朴酚和厚朴酚为其主要抗乳腺癌成分ꎮＳｕｎ等[３２]以硅胶为载体ꎬ在人胚胎肾细胞(ｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｋｉｄｎｅｙ２９３ꎬＨＥＫ２９３)细胞膜上高表达表皮生长因子受体(ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅ￣ｃｅｐｔｏｒꎬＥＧＦＲ)的士的宁中筛选抗ＥＧＦＲ成分ꎬ发现马钱子的主要活性成分为马钱子碱和士的宁ꎮ多种细胞膜模型用于筛选中药或化合物的活性成分ꎬ如丹参㊁四川牡丹和当归ꎮ３㊀细胞膜色谱在多肽类成分中的应用多肽(ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ)是一类新兴生物活性有效成分ꎬ其相对分子质量介于大分子蛋白/抗体类成分和小分子化学成分之间[３３]ꎮ随着多肽筛选技术的不断发展ꎬ已开发出更多的多肽药物ꎬ用于疾病的诊断㊁治疗和预防[３４]ꎮ多肽的研发已在许多系统疾病中显示出多肽的药效和潜在的商业价值ꎬ其应用范围包括:抗菌肽㊁抗氧化肽㊁抗肿瘤肽等ꎮ利用小分子化合物调节蛋白质间的交互作用ꎬ从而干扰细胞的信号传导通路ꎬ从而调节机体的生命活动ꎬ从而达到抑制肿瘤生长的目的ꎮ多肽能通过干扰肿瘤细胞的信号传导途径ꎬ抑制肿瘤细胞生长㊁转移ꎬ促进肿瘤细胞的凋亡[３５]ꎮ其中ꎬ抗体药物具有较高的价格㊁较大的分子量和复杂的生物结构ꎬ并可通过非特异性的吸收而导致肝脏的损害ꎬ从而限制了其临床应用[３６]ꎮ多肽药物易降解ꎬ细胞膜渗透性差ꎬ是当前亟待解决的问题ꎮ由于该技术具有在线㊁高通量㊁自动化等优点ꎬ是一种高效的组分筛选技术ꎮ３.１㊀细胞膜色谱法在抗菌多肽方面的应用㊀抗菌肽又被称为抗微生物肽ꎬ对细菌㊁病毒㊁真菌㊁寄生虫㊁肿瘤细胞具有很强的抗菌作用ꎬ其本身的稳定性和抗性很低ꎬ是一种能够抵御微生物侵袭的高质量的多肽ꎮ自身稳定性较高并且产生抗药性的概率相对较低ꎬ在具体的构建过程中ꎬ是机体抵抗病原微生物侵袭㊁具有优质的抵抗微生物活性的小分子多肽[３７]ꎮ大多数的抗菌肽对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有效ꎬ某些种类的抗菌肽还对真菌㊁病毒㊁寄生虫等也具有杀灭作用ꎮ有研究表明ꎬ有些类型的抗菌肽具有抗ＤＮＡ㊁ＲＮＡ病毒的作用[３８]ꎮ抗菌肽分子很小ꎬ可以在很短的时间内生成ꎬ而且它的反应速度和传播速度要比人体内的免疫细胞快得多ꎮ由于其特殊的机制ꎬ能够形成不耐菌的特点ꎬ成为新型的抗菌药物ꎮ抗菌肽是一种免疫调节物质ꎬ它可以参与到宿主自身免疫系统中的其他反应中ꎬ增强免疫细胞的增殖和吞噬能力ꎬ调节炎症反应及相关免疫因子的活性ꎬ从而激活和调整免疫系统ꎬ增强人体的免疫力ꎮ但是ꎬ抗菌肽在生产中也面临着诸多问题:①抗菌肽种类繁多ꎬ杀菌效果和功能不尽相同ꎻ②抗菌肽在体内的作用机制还不明朗ꎻ③大部分的天然抗菌肽还存在着活性低㊁毒性大等问题ꎻ④抗菌肽在酶的作用下会丧失生物活性ꎬ稳定性较差ꎮ综上可知ꎬ目前抗菌肽应用还处于试验探索阶段ꎬ今后还需付出诸多努力解决上述问题ꎬ为抗菌肽的应用打下坚实基础ꎮ利用细胞膜色谱技术可以更好地发现广谱的抗菌肽ꎬ探讨抗菌肽的作用机理ꎮ王改玲[３９]以草鱼为研究对象ꎬ利用细胞膜层析技术ꎬ将抗菌蛋白从体表黏液中分离出来ꎬ并对其氨基酸成分进行了质谱分析ꎮ通过构建真核表达载体ꎬ对鲤鱼上皮细胞进行抗菌㊁抗病毒㊁抗菌活性的研究ꎬ结果表明ꎬ用细胞膜色谱技术制备抗菌肽是可行的ꎮ肖建辉[４０]以麻疯树种子粉为起始材料ꎬ建立了扩散－分层色谱法ꎬ并以解毒的麻疯树种子粉及其蛋白水解物改进了扩散－分层色谱法ꎮ通过引进研究抗菌机制的工具和优化现有筛选方法的组合和设计ꎬ快速㊁准确地发现和制备麻疯树的抗菌肽ꎮ研究表明ꎬ通过细胞膜亲和色谱法可以分离麻疯树抗菌肽ꎬ细胞壁膜是抗菌肽(ＪＣｐｅｐ７和ＪＣｐｅｐ８)的主要抗菌目标ꎮ唐文婷[４１]用细胞膜色谱法制备了模拟磷脂的涂布细胞膜固定相ꎬ并从卵白蛋白胃蛋白酶的水解产物中成功分离出一种新型的抗菌肽ꎮ采用模拟细胞膜的磷脂固相萃取与ＨＰＬＣ技术ꎬ结果表明细胞膜固相萃取与ＨＰＬＣ技术适用于抗菌肽的分离ꎮ范华宁[４２]利用酪蛋白水解酶ꎬ结合固相亲和萃取和高效液相色谱法构建了细胞膜色谱柱ꎬ研究了抗菌肽的抗菌性和稳定性ꎬ以及抗菌肽对金黄色葡萄球菌生长曲线和细胞膜组成的影响ꎮ结果表明ꎬ通过ＣＭＣ分离酪蛋白衍生的抗菌肽得到的抗菌肽对革兰阳性和阴性细菌均有抑制作用ꎬ具有一定的热稳定性ꎬ能耐受一定的离子强度ꎬ而且酪蛋白衍生的抗菌肽能破坏细菌壁膜结构ꎬ导致细菌死亡ꎮ３.２㊀细胞膜色谱法应用于抗氧化肽活性成分筛选㊀抗氧化肽是一种结构简单㊁易吸收㊁稳定性好㊁无免疫反应性的天然抗氧化剂ꎬ它不仅具有很好的抗氧化作用ꎬ还能起到降低血压㊁抗肿瘤的作用ꎬ因此在食品㊁医药㊁保健食品等方面得到了广泛的应用[４３]ꎮ不同来源的抗氧化肽对人体的健康起到了积极的作用ꎬ在食品㊁药学㊁生物等方面有着广泛的应用前景ꎮ然而ꎬ在抗氧化肽作为天然抗氧化剂大规模地应用到人类营养和健康领域之前ꎬ仍有许多科学和技术问题亟须解决[４４]:①酶解制备的许多小肽具有相似的分子量ꎬ因此ꎬ如何有效地分离㊁提纯目的抗氧化肽是目前亟待解决的问题ꎻ②虽然在某些体内和体外实验中ꎬ抗氧化肽具有很好的抗氧化作用ꎮ然而ꎬ目前还没有标准化的方法来评价多肽的抗氧化性ꎻ③抗氧化肽的不稳定性是制约其广泛应用于食品和医药领域的重要因素ꎮ玉米蛋白粉中含丰富抗氧化肽ꎬ为探究玉米蛋白粉中的抗氧化肽ꎬ姜源[４６]通过生成完整的极化差分单层结构Ｃａｃｏ－２细胞膜模型ꎬ以ＡＧＩ/ＬＰＭ和ＨＡＩ/ＬＧＡ结构鉴定为研究对象ꎬ分离纯化了玉米抗氧化肽ꎬ事实证明ꎬ玉米衍生的五肽ＡＧＬＰＭ(丙氨酸 甘氨酸 亮氨酸 脯氨酸 甲硫氨酸(Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｒｏ－Ｍｅｔ)的抗氧化活性最强ꎮ在其(非Ｃ端或Ｎ端)肽序列中ꎬＬｅｕ－肽的抗氧化活性可能大于Ｉｌｅ－肽的抗氧化活性ꎻ与非螺旋弧相比ꎬα螺旋结构可能在肽的抗氧化活性中发挥更大作用ꎮ３.３㊀细胞膜色谱应用于肿瘤靶向多肽的筛选㊀小分子抗癌肽高度多样化ꎬ其结构多样性决定了抗癌途径和机制的多样性[４７]ꎮ肽化合物可以直接或间接作用于肿瘤细胞ꎬ以调节其生长和凋亡ꎬ抑制肿瘤相关的物质或信号ꎬ并促进凋亡相关的物质或信号ꎮ研究发现[４８]ꎬ蛋白肽可以增加巨噬细胞的吞噬能力ꎬ促进淋巴细胞的增殖ꎮ从植物和微生物中分离和合成的多肽可以通过生物或化学合成来诱导细胞凋亡和抑制肿瘤发展ꎮ肽具有高度的针对性ꎬ不良影响少ꎬ而且容易分离和修改ꎬ今后分离㊁修饰和合成新的抗癌肽药物是有很大希望的ꎮ对多肽抗癌机制的研究还不够全面ꎬ缺乏相关的临床和药理研究ꎬ其固有的免疫和适应性免疫机制也没有得到很好的阐释ꎬ因此需要进一步研究ꎬ为开发新的抗癌药物奠定基础ꎮ纳米医学输送系统面临的两个问题是对肿瘤组织的靶向性差和渗透性差ꎮ传统理论认为ꎬ纳米药物可以通过实体瘤的高通透性和滞留效应(ｅｎｈａｎｃｅｄｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙａｎｄｒｅｔｅｎｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔꎬＥＰＲ)效应在肿瘤中富集ꎬ但最近的研究表明ꎬ基于ＥＰＲ的富集率只有０.７％ꎮ特别值得关注的是通过细胞膜色谱法筛选肿瘤靶向肽ꎬＬｖ等[４９]开发了一种基于伪细胞膜色谱法的肿瘤靶向肽的筛选方法ꎬ根据靶标能与细胞膜表面的受体特异性结合的原则筛选靶标肽序列ꎮ通过固相合成法合成了大量的随机多肽库ꎬ通过固相萃取法对合成的多肽库进行方便快捷的筛选ꎬ并对保留在细胞膜表面的多肽序列进行测序ꎬ最终得到目标多肽ꎮＣｈｅｎ等[５０]建立了一种新颖的二维比较细胞膜色谱系统用于筛选复杂的中草药中与肝癌相关的特异性靶向多肽受体结合的配体ꎮ在构建高表达磷脂酰肌醇蛋白聚糖３(Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３ꎬＧＰＣ３))的肝癌细胞株ＳＫ－Ｈｅｐ１－ＧＰＣ３的基础上ꎬ负载ＳＫ－Ｈｅｐ１－ＧＰＣ３/ＣＭＣ柱ꎮ黏多糖Ｉ被保留ＳＫ－Ｈｅｐ１－ＧＰＣ３/ＣＭＣ色谱柱上ꎬ经表面等离子体共振检测ꎬ与ＧＰＣ３的亲和力为４.３３μｍｏｌ Ｌ－１ꎮ在细胞增殖实验中ꎬ黏液蛋白酶Ｉ对ＳＫ－Ｈｅｐ１－ＧＰＣ３细胞的ＩＣ为１８.０１μｍｏｌ Ｌ－１ꎬ从而根据柱上的保留行为筛选黄芩抗肿瘤的多肽成分ꎮ温浙盛等[５１]建立了肿瘤脂质体细胞膜色谱模型ꎮ通过建立可直接用于体外表达多肽的ＤＮＡ文库ꎬ用核糖体表达法筛选特异性抗肿瘤肽ꎬ并用ＭＴＴ法检测所筛选肽的体外抗肿瘤作用ꎮ结果表明ꎬ通过体外核糖体表达和脂质体从设计的肽库中成功地筛选出了部分肽ꎮ４㊀总结ＣＭＣ技术自诞生以来ꎬ从一维到多维ꎬ从脱机到在线ꎬ再从多靶点转成特异性靶点[５２]ꎬ与传统方法相比ꎬＣＭＣ克服了 分离－评价 模式的缺点ꎬ在复杂样品中目标组分的高通量筛选方面具有独特的优势ꎮ采用ＣＭＣ技术与ＨＰＬＣ㊁ＭＳ技术相结合ꎬ可以有效地筛选和鉴别有效组分ꎮＣＭＣ技术具有在线㊁高通量和自动化等特点ꎬ是一种新型的有效组分筛选技术ꎮ已被广泛应用于抗肿瘤㊁抗心血管疾病㊁抗前列腺增生等活性成分的筛选[５３－５４]ꎬ筛选准确度逐渐提高ꎬ提高了筛选的效率ꎮ随着分子生物学的发展如大肠杆菌和哺乳动物细胞ꎬ已被用于在体外过表达受体蛋白ꎬ从而能够构建具有高水平表达特异性受体的细胞系ꎮ近年来ꎬ研究人员利用现代分子生物学工具构建了稳定且高表达的重组ＨＥＫ２９３细胞系ꎬ其受体包括表皮生长因子受体(ＥＧＦＲ)㊁血管内皮生长因子受体２(ＶＥＧＦＲ２)㊁成纤维细胞生长因子受体－１(ＦＧＦＲ１)和ＦＧＦＲ４ꎮ利用相应受体的选择性拮抗剂作为对照样品ꎬ成功建立了高表达的ＣＭＣ模型ꎬ发现了苦参㊁当归㊁蓼㊁黄芪㊁乌头和黄叶的活性成分ꎮ高表达细胞系的构建可以实现ＣＭＳＰ类型具有更强的特异性和选择性的无限扩展ꎬ从而大大提高了该方法的灵敏度和准确性ꎮ传统筛选方法在分析通量㊁分析效率㊁分析内涵上均存在重大缺陷ꎬ严重制约了从复杂体系中筛选多肽类活性成分的发展ꎬ而ＣＭＣ作为一种高通量筛选系统可从成千上万的多肽类成分中快速筛选出具有特殊生物活性的化合物ꎮ将组合化学技术与药物高通量筛选技术相结合ꎬ可使一次合成成千上万的多肽成为可能ꎬ这也将是多肽类药物开发的重要途径ꎮ一般多肽的浓度较低ꎬ成分复杂ꎬ尤其是杂质的理化性质和目标多肽十分相似ꎬ分离纯化比较困难ꎬＣＭＣ细胞膜表面的特异性受体可高选择性地与作用组分结合ꎬ从而达到理想的分离纯化效果ꎮ利用新兴肽类技术将被ＣＭＣ筛选纯化出的多肽类活性成分应用到制药中ꎬ包括多功能肽㊁细胞穿透肽和多肽偶联药物ꎬ将大大拓展治疗性多肽药物的应用范围ꎮ细胞膜色谱存在一定的缺陷ꎬ因其是在离体的条件下筛选中药活性物质ꎬ因此不能模拟活性物质在体内的结合情况ꎬ不能排除非特异性现象[５５]ꎻ细胞膜色谱是以受体学说为原理的ꎬ只对于一些有特定靶点的药物有筛选作用ꎬ存在一定的限制ꎮ在筛选不同的活性物质时需要更换不同的细胞膜固定相ꎬ固定相的制备比较烦琐ꎬ且保存时间不长ꎬ实验的精密度欠缺ꎬ难以得到推广ꎮ由于ＣＭＣ柱的受体容量有限ꎬ高含量/亲和性化合物可能会导致柱超载ꎬ从而导致忽略其他阳性候选物[５６]ꎮ为克服上述效应ꎬ充分发掘生物活性物质ꎬ采用了基于化学成分的二维ＣＭＣ技术和化学成分敲除技术ꎬ具有良好选择性㊁稳定性和再现性ꎬ结合组分敲除方法ꎬ克服了色谱柱过载问题ꎬ提高了筛选效率ꎮ天然植物药中成分复杂ꎬ应用天然药物分离提取方法筛选其中特定的有效成分周期长ꎬ命中率相对较低ꎬ而ＣＭＣ法不经分离步骤ꎬ直接在模型上确定药物的某种活性成分ꎬ具有方法快速㊁简捷㊁命中率高的特点ꎮ因此ꎬ细胞膜色谱法可作为一种高通量的药物筛选方法用于从中药复杂体系中筛选出药物的活性成分ꎮ参考文献:[１]㊀沈莉莉ꎬ王姣姣ꎬ陈吴越ꎬ等.抗肿瘤多肽的高效筛选方法及研究现状[Ｊ].药学学报ꎬ２０２０ꎬ５５(１０):２２９８－２３０５. [２]李永振ꎬ贺继东ꎬ彭政ꎬ等.多肽的合成与应用进展[Ｊ].化学与生物工程ꎬ２０１０ꎬ２７(４):９－１４.[３]杨晓男ꎬ阮丽君ꎬ江兴ꎬ等.多肽类药物与中药肽研究展望[Ｊ].中国中药杂志ꎬ２０２２ꎬ４７(２２):５９７８－５９９０. [４]温学美ꎬ李悦ꎬ陆静.串联质谱法在合成多肽药物结构确证中的应用进展[Ｊ].中国药房ꎬ２０１９ꎬ３０(２０):２８７６－２８８０.[５]王永亮ꎬ陈敬蕊ꎬ孔令聪ꎬ等.蛋白/多肽类药物长效化技术研究进展[Ｊ].经济动物学报ꎬ２０２２(３):２３０－２３６. [６]ＺＨＡＮＧＬꎬＹＩＸꎬＷＡＮＧＳꎬｅｔａｌ.Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｇｒａｐｈｅｎｅｑｕａｎｔｕｍｄｏｔｓ－ｄｅｃｏｒａｔｅｄＥＧＦＲｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇ￣ｒａｐｈｙｆｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍＰｅｕｃｅｄａｎｕｍｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍＤｕｎｎ[Ｊ].ＡｎａｌＢｉｏａｎａｌＣｈｅｍꎬ２０２１ꎬ４１３(７):１９１７－１９２７.[７]ＶＬＩＥＧＨＥＰꎬＬＩＳＯＷＳＫＩＶꎬＭＡＲＴＩＮＥＺＪꎬｅｔａｌ.Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅｓ:ｓｃｉｅｎｃｅａｎｄｍａｒｋｅｔ[Ｊ].ＤｒｕｇＤｉｓｃｏｖＴｏｄａｙꎬ２０１０ꎬ１５(１/２):４０－５６.[８]ＣＲＡＩＫＤＪꎬＦＡＩＲＬＩＥＤＰꎬＬＩＲＡＳＳꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｆｕｔｕｒｅｏｆｐｅｐｔｉｄｅ－ｂａｓｅｄｄｒｕｇｓ[Ｊ].ＣｈｅｍＢｉｏｌＤｒｕｇＤｅｓꎬ２０１３ꎬ８１(１):１３６－１４７.[９]ＷＵＣꎬＷＡＮＧＮꎬＸＵＰꎬｅｔａｌ.Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｖｉｎｙｌａｌｃｏｈｏｌ－ｄｅｃｏｒａｔｅｄｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇ￣ｒａｐｈｙｆｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｔｉ－ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍＬｉ￣ｕｗｅｉＤｉｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍ[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ２０２０ꎬ４３(１１):２１０５－２１１４.[１０]沙小梅ꎬ张丽君ꎬ蒋文丽ꎬ等.高效液相色谱－高分辨率质谱联用技术鉴定阿胶块中不同胶类的特征性多肽[Ｊ].食品工业科技ꎬ２０２２ꎬ４３(４):９７－１０４.[１１]ＬＩＮＹꎬＸＵＪꎬＪＩＡＱꎬｅｔａｌ.ＣｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｕｐｌｅｄｏｎｌｉｎｅｗｉｔｈＬＣ－ＭＳｔｏｓｃｒｅｅｎａｎｔｉ－ａｎａｐｈｙｌａｃｔｏｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍＭａｇｎｏｌｉａｂｉｏｎｄｉｉＰａｍｐ.ｔａｒｇｅｔｉｎｇｏｎＭａｓ－ｒｅｌａｔｅｄＧｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒＸ２[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ２０２０ꎬ４３(１３):２５７１－２５７８.[１２]ＪＩＡＱꎬＦＵＪꎬＬＩＡＮＧＰꎬｅｔａｌ.Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅ￣ｔｗｅｅｎｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ/ｈｙｄｒｏｘｙｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅａｎｄｔｈｅｉｒｓｉｎｇｌｅｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓａｎｄａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ－ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅ２ｂｙａｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍｅｔｈｏｄ[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ２０２２ꎬ４５(２):４５６－４６７.[１３]ＦＵＪꎬＪＩＡＱＱꎬＺＨＯＵＨＸꎬｅｔａｌ.Ｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａ￣ｔｏｇｒａｐｈｙｆｏｒｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｈｌｏｒｏ￣ｑｕｉｎｅａｎｄｈｙｄｒｏｘｙｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅｗｉｔｈＡＣＥ２ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢＡｎａｌｙｔＴｅｃｈｎｏｌＢｉｏｍｅｄＬｉｆｅＳｃｉꎬ２０２１(１１６２):１２２４６９.[１４]ＭＡＷꎬＷＡＮＧＣꎬＬＩＵＲꎬｅｔａｌ.Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡꎬ２０２１(１６３９):４６１９１６.[１５]ＷＵＣꎬＷＡＮＧＮꎬＸＵＰꎬｅｔａｌ.Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｖｉｎｙｌａｌｃｏｈｏｌ－ｄｅｃｏｒａｔｅｄｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇ￣ｒａｐｈｙｆｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｔｉ－ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍＬｉ￣ｕｗｅｉＤｉｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍ[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ２０２０ꎬ４３(１１):２１０５－２１１４.[１６]许晴ꎬ李智ꎬ万梅绪ꎬ等.基于细胞膜色谱技术的人参皂苷及五味子木脂素与血管内皮生长因子受体的作用分析[Ｊ].药物评价研究ꎬ２０２１ꎬ４４(１１):２３７９－２３８４. [１７]李欧ꎬ付真真ꎬ刘康妮ꎬ等.血小板细胞膜色谱构建及柱温研究[Ｊ].中国药学杂志ꎬ２０２０ꎬ５５(１５):１２８９－１２９４. [１８]许晴ꎬ李智ꎬ万梅绪ꎬ等.中药活性成分筛选新技术研究进展[Ｊ].药物评价研究ꎬ２０２１ꎬ４４(７):１５４１－１５４７. [１９]马文苑ꎬ谢媛媛ꎬ王义明ꎬ等.细胞膜色谱技术在中药质量评价中的应用与思考[Ｊ].药学学报ꎬ２０１７ꎬ５２(１２):１８２７－１８３８.[２０]郑乐艺.新型跨膜蛋白－脂质体生物色谱制备和应用方法学研究[Ｄ].上海:中国人民解放军海军军医大学ꎬ２０１９.[２１]郑华珠ꎬ王利胜ꎬ吴银爱ꎬ等.ＵＰＬＣ－ＭＳ/ＭＳ联合细胞膜固相色谱法分析补阳还五汤作用于神经元样ＰＣ１２细胞的效应成分[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１８ꎬ２４(４):１４－２０.[２２]吴勇辉ꎬ杨安平ꎬ刘辉.细胞膜固相色谱法筛选夏枯草抗人乳腺癌细胞效应成分[Ｊ].今日药学ꎬ２０２１ꎬ３１(１１):８４４－８４６.[２３]傅万峪ꎬ刘祺ꎬ郝婷ꎬ等.细胞膜色谱技术在中药活性成分筛选及质量控制中的应用[Ｊ].承德医学院学报ꎬ２０２１ꎬ３８(６):５３２－５３５.[２４]李翠芹ꎬ贺浪冲.白细胞膜色谱模型建立与白术中ＴＬＴ＿４受体拮抗活性成分筛选研究[Ｊ].中国科学(Ｃ辑:生命科学)ꎬ２００５(６):５４５－５５０.[２５]樊宏伟ꎬ余黎ꎬ洪敏ꎬ等.血小板细胞膜固相色谱法的建立及其对丹参效应物质的初步分析[Ｊ].中国药学杂志ꎬ２０１４(５):６２－６５.[２６]朱建梁ꎬ黄丽妹ꎬ卜文婕ꎬ等.系膜细胞膜固相色谱法研究丹皮中的效应成分[Ｊ].安徽大学学报(自然科学版)ꎬ２０１３ꎬ３７(１):１０４－１０８.[２７]ＣＡＯＪꎬＹＡＮＧＬꎬＷＡＮＧＹꎬｅｔａｌ.Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｉｎ￣ｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｌｏｃａｌａｎｅｓｔｈｅｔｉｃｓａｎｄｈｉｓｔａｍｉｎｅＨｒｅ￣ｃｅｐｔｏｒｂｙｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍｏｄｅｌ[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌꎬ２０２１(１９６):１１３９１１.[２８]王玉ꎬ杨雪ꎬ夏鹏飞ꎬ等.细胞膜色谱及质谱联用技术在中药活性成分筛选中的应用[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０２０ꎬ２６(８):２４１－２５０.[２９]ＧＵＹꎬＣＨＥＮＸꎬＷＡＮＧＹꎬｅｔａｌ.Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ３－ｍｅｒ￣ｃａｐｔｏｐｒｏｐｙｌｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ(ＭＰＴＳ)－ｍｏｄｉｆｉｅｄｂｏｎｅｍａｒ￣ｒｏｗｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｆｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｔｉ－ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａｅＲａｄｉｘ[Ｊ].ＡｃｔａＰｈａｒｍＳｉｎＢꎬ２０２０(１０):１８５６－１８６５. [３０]ＬＩＷＦꎬＮＩＵＸＦꎬＺＨＯＵＰꎬｅｔａｌ.ＡＣｏｍｂｉｎｅｄＰｅｒｉｔｏｎｅａｌＭａｃｒｏｐｈａｇｅＣｅｌｌＭｅｍｂｒａｎｅＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄＯｆｆｉｎｅＧＣ－ＭＳＭｅｔｈｏｄｆｏｒＳｃｒｅｅｎｉｎｇＡｎｔｉ－ＩｎｆａｍｍａｔｏｒｙＣｏｍｐｏ￣ｎｅｎｔｓｆｒｏｍＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＨｏｕｔｔｕｙｎｉａｃｏｒｄａｔａＴｈｕｎｂ[Ｊ].Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａꎬ２０２１(７３):６７３. [３１]ＨＯＵＸꎬＹＵＡＮＸＬꎬＺＨＡＮＧＢꎬｅｔａｌ.Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｃｔｉｖｅａｎｔｉ－ｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｏｍｐｏｕｎｄｓｆｒｏｍＣｏｒｔｅｘＭａｇｎｏｌｉａｏｆｆｃｉ￣ｎａｌｉｓｂｙ２ＤＬＣ－ＭＳ[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ２０１３ꎬ３６(４):７０６. [３２]ＳＵＮＭꎬＧＵＯＹꎬＤＡＩＢＬꎬｅｔａｌ.Ｈｉｇｈ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎＥＧＦＲ/ｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｏｎｌｉｎｅ－ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ/ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ:ｒａｐｉｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆＥＧＦＲａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓｆｒｏｍＳｅｍｅｎＳｔｒｙｃｈｎｉ[Ｊ].ＲａｐｉｄＣｏｍｍｕｎＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍꎬ２０１８ꎬ２６(１７):２０２７.[３３]王奥奥ꎬ李磊ꎬ李瑛ꎬ等.中药来源多肽类活性成分治疗缺血性心脑血管疾病的研究进展[Ｊ].中国中药杂志ꎬ２０２１ꎬ４６(２１):５５７６－５５８４.[３４]何小奇ꎬ邓莉.抗心肌缺血再灌注损伤多肽类药物的研究进展[Ｊ].医学综述ꎬ２０１９ꎬ２５(１７):３４７３－３４７８. [３５]孙重期ꎬ束永前ꎬ毛文君.多肽组学分析揭示内源性多肽对肺腺癌恶性表型的关键作用[Ｊ].南京医科大学学报(自然科学版)ꎬ２０２２ꎬ４２(３):３１７－３２４.[３６]赵娣ꎬ陈西敬.生物大分子药物的药代动力学研究进展[Ｊ].药学进展ꎬ２０１８ꎬ４２(８):５９２－５９８.[３７]宇晓军ꎬ李丹丹ꎬ王路义ꎬ等.抗菌肽对育成期母貂生长性能㊁养分表观消化率及肠道菌群的影响[Ｊ].动物营养学报ꎬ２０２２ꎬ３４(２):１１９４－１２０４.[３８]李静.抗菌肽的生物学特性及在畜禽养殖中的应用[Ｊ].现代畜牧科技ꎬ２０２１(９):２３－２４.[３９]王改玲.草鱼体表粘液抗菌肽的细胞膜色谱制备法和抗菌机理的研究[Ｄ].驻马店:黄淮学院ꎬ２０１８.[４０]肖建辉.麻疯树籽粕脱毒及其抗菌肽的细胞膜色谱制备法和抗菌机理的研究[Ｄ].无锡:江南大学ꎬ２０１２. [４１]唐文婷.基于肽 膜相互作用的模拟细胞膜法筛选抗菌肽的研究[Ｄ].无锡:江南大学ꎬ２０１４.[４２]苑华宁.细胞膜色谱法制备酪蛋白源抗菌肽及其抗菌性研究[Ｄ].无锡:江南大学ꎬ２０１４.[４３]ＥＳＦＡＮＤＩＲꎬＷＡＬＴＥＲＳＭＥꎬＴＳＯＰＭＯＡ.Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓａｎｄｐｅｐｔｉｄｅｓｆｒｏｍｃｅｒｅａｌｓ[Ｊ].Ｈｅｌｉｙｏｎꎬ２０１９ꎬ５(４):ｅ０１５３８.[４４]ＺＨＥＮＧＹＪꎬＷＡＮＧＸꎬＺＨＵＡＮＧＹＬꎬｅｔａｌ.ＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌＡＣＥ－ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｅｐｔｉｄｅｓｆｒｏｍｑｕｉｎｏａｂｒａｎａｌｂｕｍｉｎａｓｓｉｓｔｅｄｗｉｔｈａｎｉｎｓｉｌｉｃｏａｐｐｒｏａｃｈ:Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎꎬｉｎｖｉｖｏａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎꎬａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０１９ꎬ２４(２４):４５６２.[４５]姜源.玉米抗氧化肽的分离纯化与结构鉴定及其完整吸收研究[Ｄ].长春:吉林大学ꎬ２０１８.(下转第９３６页)。
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用饶澄;黄显【摘要】亲和色谱法是利用化合物和药物作用靶之间的亲和活性,将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来的一种方法,具有色谱分离和活性筛选可同时进行的特点,特别适合于研究复杂体系中的效应物质.以生物和非生物来源物质为配基的各种亲和色谱在天然药物活性成分分析中得到了广泛应用,已逐渐成为一种重要的技术手段.该文归纳了亲和色谱原理在天然药物活性成分分离、筛选中的几种应用形式,并对其应用概况和前景进行了讨论,以期更好地利用这一分析工具.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2010(019)012【总页数】3页(P19-21)【关键词】亲和色谱;天然药物;分离;筛选【作者】饶澄;黄显【作者单位】福建医科大学协和临床医学院药学部,福建,福州,350001;福建医科大学附属协和医院药学部,福建,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R284;R917目前，新的提取分离技术尤其是各种色谱技术已广泛应用于天然药物的有效成分研究，但很多色谱分离、分析模式都是基于混合物间理化性质的差异，并未包含任何药理功能的信息。
亲和色谱法是根据生命现象中生物大分子间高亲和力与高专一性可逆结合而设计的一种独特的色谱分离方法[1]。
在亲和色谱中，将能与潜在药物(配体)特异结合的物质(配基)，如靶蛋白等固定于色谱填料上制备色谱柱，再将待分离混合物与色谱柱固定相一起孵育后，以洗脱液洗脱或不经孵育，使混合物缓慢、连续地通过色谱柱，即可实现混合物间以亲和性为基础的分离。
亲和色谱一般使用生物来源的配基，但随着其应用范围的扩大，一些非生物来源的配基也逐渐被采用[2]。
在此介绍在天然药物活性成分分离、纯化中常用的几种亲和色谱方法及其应用进展。
1 基于固定化靶蛋白的亲和色谱血浆蛋白与药物可逆的结合平衡，直接影响到药物能否透过血管达到作用位点。
汪海林等[3]将以人血清白蛋白为配基的色谱用于药用植物活性成分的粗筛选，方法是在流动相中加入顶替剂使强保留组分快速流出，以少含或不含有机溶剂的缓冲溶液作为流动相冲洗、筛选弱保留组分，结果当归的2个主要活性峰经鉴定为其最重要的两种有效成分阿魏酸和藁本内酯，而用梯度淋洗法分离出了蒙古黄芪的7个活性成分。
亲和色谱技术及其在药物发展中的应用
2012年1月内蒙古科技与经济Januar y2012 第2期总第252期Inner M o ngo lia Science T echnolo gy&Economy N o.2T o tal N o.252亲和色谱技术及其在药物发展中的应用X张薇薇,郭宝凤(内蒙古医学院研究生院,内蒙古呼和浩特 010059) 摘 要:亲和色谱技术应用越来越广泛,已成为生物工程中分离纯化最有效的技术之一,在药物的活性成分的提取和筛选中也发挥了重大作用。
本文对亲和色谱技术及其在药物发展中的应用进行综述。
关键词:亲和色谱技术;药物发展;生物工程 中图分类号:T Q460.7+2 文献标识码:A 文章编号:1007—6921(2012)02—0105—02 亲和色谱法是依据生物大分子能够与配体特异、可逆地结合在一起的特性,从复杂的生物样品中分离得到所需的目标产物。
它基于生物大分子与配体之间的生物学特异性,具有选择性强、纯化效率高、活性回收率高等优点[1]。
基于分子识别原理的亲和色谱常被描述为在蛋白质纯化技术中效率和选择性最高的分离方法[2],也为天然植物药中有效成分的提取、中药复方的定性定量分析等方面提供了实验依据。
1 亲和色谱技术1.1 免疫亲和色谱免疫亲和色谱(IAC)是一种将免疫反应与色谱的差速迁移理论结合而建立的一种色谱方法。
简单来说,它是利用抗体与其相应抗原的作用具有高度的特异性和高度结合力的特点,从而从复杂样品基质中分离出分析物和纯化各自互补的免疫物质[3]。
随着新的合成基质和偶联化合物的出现以及对免疫亲和色谱研究的深入,必将使免疫亲和色谱在工业性生产纯化蛋白质的应用上逐渐得到发展[4]。
1.2 细胞膜色谱(CMC)法细胞膜色谱法是研究药物与受体之间相互作用的一种新型亲和色谱技术,是将活性组织细胞膜固定于特定载体表面,制备成细胞膜固定相,用液相色谱法研究药物或化合物与固定相上细胞膜及膜受体的相互作用的方法。
硼酸盐亲和色谱法检测糖化血红蛋白的分析性能评价
硼酸盐亲和色谱法检测糖化血红蛋白的分析性能评价1. 引言1.1 背景介绍硼酸盐亲和色谱法利用硼酸盐与碳水化合物结构中的1,2-或1,3-二醇基团的亲和性，在中性或弱碱性条件下可以高效地分离出含有二醇基团的化合物。
与传统方法相比，硼酸盐亲和色谱法具有操作简便、成本低廉、分离效果好等优势。
该方法在糖化血红蛋白检测中的应用前景广阔。
本文旨在评价硼酸盐亲和色谱法在检测糖化血红蛋白中的分析性能，探讨其在临床实践中的潜在应用价值，为改进糖尿病患者血糖控制提供更有效的监测手段。
1.2 研究目的研究目的是通过对硼酸盐亲和色谱法检测糖化血红蛋白的分析性能评价，探索该方法在临床血液学领域的应用价值。
具体包括评估该检测方法在糖化血红蛋白测定中的准确性、灵敏度和重复性，以及与传统方法的比较。
通过对糖化血红蛋白的准确检测，可以帮助医生更准确地判断糖尿病患者的血糖控制情况，及时调整治疗方案，降低并发症风险。
研究还旨在为进一步完善硼酸盐亲和色谱法的检测流程和参数提供参考，使其在临床实践中更加稳定可靠，为疾病的早期诊断和有效管理提供有力支持。
通过本研究，希望为糖化血红蛋白检测方法的改进和应用提供有益的参考和指导，为疾病的预防和治疗做出更大的贡献。
1.3 研究意义糖化血红蛋白作为糖尿病的重要生化指标之一，在临床诊断和治疗评价中具有重要意义。
研究表明，糖化血红蛋白水平与患者血糖控制情况密切相关，可以客观反映患者的血糖水平变化情况。
准确、快速地检测糖化血红蛋白水平对于糖尿病的诊断、治疗和预防具有重要意义。
本研究旨在评价硼酸盐亲和色谱法在糖化血红蛋白检测中的分析性能，为提高糖尿病患者的诊断和治疗水平提供科学依据。
通过对该方法的优势和实验结果进行深入分析，探讨其在临床应用中的潜在作用，为糖尿病的管理和预防提供新的思路和方法。
【字数：231】2. 正文2.1 硼酸盐亲和色谱法原理硼酸盐亲和色谱法是一种基于硼酸盐与糖类化合物之间的特异性相互作用的色谱分离技术。
亲和色谱技术在药物分析中的应用进展
亲和色谱技术在药物分析中的应用进展王嗣岑;贺晓双【摘要】亲和色谱是依靠键合在固定相上的配位体与生物活性目标分子间特异性的识别与可逆的亲和作用,实现生物分子选择性分离的一种液相色谱分析方法.该方法具有高选择性、高回收率等特点,可同时进行色谱分离及活性筛选,广泛应用于活性产物的筛选、分离和纯化.本文简述了生物特效亲和色谱、印迹分子亲和色谱、染料配基亲和色谱等几种常用亲和色谱技术,综述了近年来亲和色谱在手性药物拆分、天然药物中活性组分筛选、活性蛋白分离纯化及药物-蛋白相互作用研究中的应用,并对其应用前景进行了展望.%Affinity chromatography (AC)is a type of liquid chromatography that makes use of biological-like interactions for separation and specific analysis of bioactive components. It has been widely used as a high-throughput screening method for the separation,screening and purification of the target molecules from complex samples with advantages such as high selectivity and high recovery efficiency.This article summarizes the biological effects of affinity chromatography, molecular imprinting chromatography, and dye ligands affinity chromatography.The review also encompasses the application of AC in the separation of chiral drugs,screening of active components,purification of target protein,and mechanism of the drug-protein interaction.Moreover,the prospects of its applications are also discussed.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(038)006【总页数】8页(P777-784)【关键词】亲和色谱;药物分析;手性药物拆分;活性成分筛选;药物蛋白相互作用;生物大分子【作者】王嗣岑;贺晓双【作者单位】西安交通大学药学院,陕西西安 710061;陕西省心血管药物工程技术研究中心,陕西西安 710061;西安交通大学药学院,陕西西安 710061;陕西省心血管药物工程技术研究中心,陕西西安 710061【正文语种】中文【中图分类】R917亲和色谱(affinity chromatography)是利用生物分子与亲和色谱固定相表面配位体之间的特异性亲和吸附作用，进行选择性分离生物分子的一类色谱方法[1]。
近年中国色谱研究进展
色谱第30卷专论与综述DOI ：10．3724/SP．J．1123．2012．02012*通讯联系人：张玉奎，中国科学院院士，研究员，博士生导师，主要从事色谱基本理论和新技术、新方法的研究．E-mail ：ykzhang@dicp．ac．cn．基金项目：国家自然科学基金委创新群体项目（21021004）．收稿日期：2011-12-29#此篇文章系《色谱》编辑部根据张玉奎院士在2011年10月召开的第2届大连国际色谱学术报告会上所做的大会报告《中国色谱研究进展》编写，由雷小元博士执笔．近年中国色谱研究进展#张祥民1，张丽华2，张玉奎2*（1．复旦大学化学系，上海200433；2．中国科学院分离分析化学重点实验室，国家色谱研究分析中心，中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连116023）摘要：20世纪末至今，是中国色谱学科全面快速发展的重要时期。
伴随着生命科学、材料科学、能源科学、环境科学等学科的不断发展，特别是功能基因组学、蛋白质组学、代谢组学和糖组学等组学研究的兴起，色谱学科得到了更加密切的关注和更加广泛的运用，我国色谱工作者也在上述方面取得了显著的成绩，一些研究成果在国际上具有一定的影响力。
本文对近年来我国色谱工作者在色谱基础理论、分离分析方法与技术、新型色谱柱和富集材料、新型色谱分析仪器设备以及相关开发与应用等方面的一些典型工作进行介绍。
关键词：中国色谱；研究进展；典型工作；综述中图分类号：O658文献标识码：A文章编号：1000-8713（2012）03-0222-10Recent advances of chromatographic research in ChinaZHANG Xiangmin 1，ZHANG Lihua 2，ZHANG Yukui 2*（1．Department of Chemistry ，Fudan University ，Shanghai 200433，China ；2．CAS Key Laboratory of Separation Science for Analytical Chemistry ，National Chromatographic R．＆A．Center ，Dalian Institute of Chemical Physics ，Chinese Academy of Sciences ，Dalian 116023，China ）Abstract ：Since the end of 20th century ，chromatographic science has experienced a rapid development in China．Along with the current developments of life science ，material science ，energy science and envi-ronmental science ，especially the rise of researches in functional genomics ，proteomics ，metabolomics ，glycomics etc ，chromatography has got more close attention and extensive applications．During this peri-od ，the chromatography researchers of China have made significant achievements ，published a considera-ble number of papers in the world-class academic journals and made some impacts on the international re-search．This review summarizes some of the representative studies of chromatographic research in China about the basic theories of chromatography ，new separation and analytical methods and techniques ，new columns and enrichment materials ，new equipments and applications of chromatographic analysis in the last decade．Key words ：chromatographic science in China ；research development ；representative works ；review 色谱技术的出现及发展至今已将近110年。
新型重组proteina亲和色谱填料的开发
新型重组proteina亲和色谱填料的开发新型重组蛋白亲和色谱填料的开发简介：重组蛋白亲和色谱是一种有效的分离和纯化方法，常用于蛋白质的提取和纯化。
本文将介绍新型重组蛋白亲和色谱填料的开发，包括其优点、制备工艺以及应用前景。
一、新型亲和色谱填料的优点新型亲和色谱填料相较于传统的色谱填料具有以下优点：1.高亲和力：新型重组蛋白亲和色谱填料可根据目标蛋白的特定性质进行设计，使其具有更高的结合亲和力，提高纯化效率。
2.高选择性：新型亲和色谱填料可以通过改变填料表面特性，调控与目标蛋白的亲和力，实现高选择性的分离和纯化。
3.可重复使用性：新型亲和色谱填料具有较强的耐久性和稳定性，可以经过简单的再生步骤后重复使用，降低生产成本。
二、新型亲和色谱填料的制备工艺新型亲和色谱填料的制备工艺主要包括以下几个步骤：1.基质选择：选择适合的基质用于制备亲和色谱填料，常用的基质包括琼脂糖、寡聚糖等。
2.功能化改性：通过表面改性，引入与目标蛋白结合的亲和配体，如金属离子、抗体等。
3.固定化亲和配体：将亲和配体固定在基质上，以增强其稳定性和亲和力，常用的方法包括共价键结和吸附等。
4.填料包装：将固定化亲和配体的基质充填到色谱柱中，形成亲和色谱填料。
三、新型亲和色谱填料的应用前景新型亲和色谱填料具有广阔的应用前景，主要体现在以下几个方面：1.生物药物纯化：新型亲和色谱填料可用于重组蛋白、抗体等生物药物的快速纯化，提高产品质量和产量。
2.蛋白相互作用研究：新型亲和色谱填料可用于研究蛋白质的相互作用，揭示蛋白质结构和功能的相关机制，为药物设计提供重要依据。
3.分子诊断和检测：新型亲和色谱填料可用于快速富集和检测特定蛋白质，应用于分子诊断和检测领域，提高检测的精确性和敏感性。
结论：新型重组蛋白亲和色谱填料是一种具有广泛应用前景的分离和纯化技术，通过优化设计和制备工艺，可以提高纯化效率和选择性，降低生产成本。
随着生物医药领域的发展和需求增加，新型亲和色谱填料的研究和应用将迎来更多的机遇和挑战。
亲和色谱法的原理及应用
亲和色谱法的原理及应用一、亲和色谱法的原理亲和色谱法是一种利用生物大分子间的特异性相互作用进行分离和纯化的方法。
其原理是通过靶分子与固相上的配体之间产生亲和结合来实现分离。
亲和色谱法利用了配体与靶分子之间的特异性相互作用，如抗原与抗体的结合、酶与底物的结合等，从而实现对目标分子的选择性捕获。
其分离和纯化效果优于传统的分离方法，成为现代生物科学研究中不可或缺的技术手段。
二、亲和色谱法的应用亲和色谱法在生物学和药物研发等领域中有着广泛的应用。
下面列举了一些常见的应用案例：1.抗体纯化：亲和色谱法广泛应用于抗体的纯化工艺中。
通过将抗体的抗原特异性与配体结合，可以实现对抗体的高效选择性纯化。
2.蛋白质纯化：亲和色谱法在蛋白质纯化中起到了重要的作用。
通过将某一特定结合配体固定在色谱柱上，可以实现对目标蛋白质的选择性捕获。
3.酶底物亲和纯化：亲和色谱法可利用酶与底物之间的亲和结合进行酶的纯化。
通过将底物或类似物固定到色谱柱上，可实现对酶的选择性捕获。
4.核酸纯化：亲和色谱法可应用于核酸的纯化过程。
通过将亲和配体固定在色谱柱上，可以实现对目标核酸的高效分离。
5.生物药物开发：亲和色谱法在生物药物的开发过程中起到关键作用。
通过分离和纯化目标蛋白质，可以获得高纯度的生物药物。
三、亲和色谱法的优势和局限性使用亲和色谱法进行分离和纯化具有以下优势：•高选择性：亲和色谱法可以实现对目标分子的高度选择性捕获，减少了其他杂质的干扰。
•高纯度：亲和色谱法可以获得高纯度的目标分子，满足进一步研究和应用的需要。
•原位纯化：亲和色谱法能够在原位进行纯化操作，避免了传统离心、沉淀等分离步骤。
然而，亲和色谱法也存在一些局限性：•配体选择性：亲和色谱法的成功与否，取决于配体与靶分子之间的相互作用是否特异、强烈，因此选择合适的配体是亲和色谱法的关键。
•杂质的干扰：亲和色谱法在分离和纯化过程中，有时可能会受到杂质的干扰，导致目标分子的选择性捕获不够理想。
sepharose 亲和色谱法
sepharose 亲和色谱法Sephadex亲和色谱法亲和色谱法是现代生物分离工艺中常用的一种方法，广泛应用于制药、生命科学等领域。
Sephadex亲和色谱法是其中一种常见的亲和色谱法技术，以Sephadex吸附材料为基础，通过静电作用或化学键等特定相互作用，使目标生物分子选择性地与吸附材料结合，实现其分离纯化。
本文将从Sephadex亲和色谱法的基本原理、操作步骤、应用前景等方面进行介绍。
一、Sephadex亲和色谱法的基本原理Sephadex亲和色谱法的基本原理是基于分子间的亲和作用，即生物分子与亲和基质之间的特异性结合。
在Sephadex亲和色谱法中，一般会选择合适的亲和基质作为吸附材料，如金属离子、抗体、蛋白质等。
这些亲和基质能与目标生物分子通过静电作用、亲水作用、疏水作用等相互作用形成稳定的复合物，从而实现目标生物分子的分离纯化。
二、Sephadex亲和色谱法的操作步骤1. 样品制备：将待分离的混合样品经过必要的前处理，如细胞破碎、蛋白质沉淀等，得到纯化后的目标生物分子。
2. 亲和色谱柱填充：选取适合的Sephadex材料填充色谱柱，可以根据目标生物分子的特性选择合适的亲和基质，并将其与Sephadex材料结合。
3. 样品上样：将纯化后的目标生物分子与填充好的色谱柱接触，通过静电作用或化学键等相互作用，使目标生物分子选择性地与亲和基质结合。
4. 洗脱分离：通过适当的洗脱缓冲液，改变色谱柱内部的条件，破坏目标生物分子与亲和基质间的结合力，实现目标生物分子的洗脱。
5. 分析纯化：收集洗脱出的目标生物分子样品，并使用合适的分析方法进行检测和定量，评估纯化效果。
三、Sephadex亲和色谱法的应用前景Sephadex亲和色谱法由于其简单易行、操作灵活等特点，在生物制药、疾病诊断、蛋白质研究等领域具有广泛的应用前景。
首先，Sephadex亲和色谱法可以用于制备药物中的目标分子。
比如，在药物开发过程中，通过亲和色谱法可以高效纯化药物的活性成分，减少其他有害成分的干扰，提高药物的纯度和活性，从而增强药物的效果和安全性。
亲和色谱纯化真核mrna的原理
【文章】亲和色谱纯化真核mRNA的原理在生物学研究领域，特别是在分子生物学中，亲和色谱是一种常用的纯化技术。
亲和色谱的原理是利用分子间特异性结合的原理，通过特定的亲和配体来实现目标分子的分离和纯化。
而在真核细胞中，mRNA作为DNA转录的产物，具有重要的生物学意义，利用亲和色谱技术来纯化真核mRNA，对于研究mRNA的结构、功能和调控机制非常重要。
本文将对亲和色谱纯化真核mRNA的原理进行全面评估，帮助读者深入理解这一关键技术的原理和应用。
一、亲和色谱的基本原理亲和色谱的基本原理是利用生物分子之间的特异性结合。
在纯化过程中，首先需要选择并合成具有高特异性的亲和配体，例如抗体、亲和标签、寡核苷酸等。
将这些亲和配体固定在固定相上，构成亲和柱。
当混合物通过亲和柱时，目标分子能够与亲和配体结合，而其他非特异性结合的物质则能够被洗脱。
通过改变环境条件或者使用竞争性洗脱剂，可以将目标分子从亲和柱上洗脱下来，实现分离和纯化。
二、真核mRNA的纯化原理纯化真核mRNA是分子生物学研究中的常见操作，它可以帮助研究者了解mRNA的结构、功能和调控机制。
在真核细胞中，mRNA具有帽结构（cap）和多聚腺苷酸尾巴（polyA tail），这些结构成为亲和色谱mRNA纯化的关键。
通常，利用亲和色谱技术来纯化真核mRNA，研究者会选择具有高特异性结合帽结构或polyA尾巴的亲和配体。
这些亲和配体可以与mRNA特异性结合，将其他RNA、DNA和蛋白质等杂质洗脱，最终实现真核mRNA的纯化。
三、亲和色谱纯化真核mRNA的应用亲和色谱纯化真核mRNA在分子生物学研究中有着广泛的应用。
纯化的mRNA可以用于mRNA的测序和定量分析。
纯化的mRNA可以用于构建基因文库，用于获得特定基因的cDNA。
纯化的mRNA还可以用于研究mRNA的转录调控和后转录修饰等重要生物学过程。
亲和色谱纯化真核mRNA技术对于研究mRNA的结构、功能和调控机制具有重要意义。
亲和色谱纯化蛋白质新进展
亲和色谱纯化蛋白质新进展韩金玉 那 平 元英进(天津大学化工系 天津 300072)提要 通过对35篇文献的综述,介绍了亲和色谱技术的新进展。
关键词 亲和色谱法,蛋白质纯化本文收稿日期:1995年8月22日,修回日期:1996年1月12日1 前言生物工程有许多应用价值和经济价值很高的蛋白质产品,在生产过程中这些产品的分离纯化是非常重要的。
亲和色谱(affinity chr omatogr aphy,AFC )以其高选择性、高收率且一步得到高纯度产品的技术优势,成为纯化蛋白质的最有效的技术之一。
不仅在实验室规模广泛应用,而且越来越多地以工业规模得到利用。
AF C 是建立在目的蛋白质与固定化配基之间特异性可逆相互作用基础上的吸附色谱。
根据蛋白质与配基的不同,可将AFC 分为许多种类。
另外,AFC 与高效液相色谱结合可成为主要用于生化分析的各种高效亲和色谱如高效免疫亲和色谱(high -per for mance immunoaffinity chr omat og-raphy ,HP IAC )等,一般所言的AFC 均指经典制备型AFC 。
2 亲和吸附剂与AFC 操作亲和吸附剂是AF C 技术的关键所在,AFC 与其他吸附色谱一样,也希望固定相与流动相的接触面积大,故通常采用粒径小、内表面积大且蛋白质可迅速扩散至颗粒内固定化配基处的吸附剂。
虽然降低粒径会提高吸附、洗脱步骤的效率,但同时也会增大柱床压降,所以实际操作时宜选择硬度大的小颗粒吸附剂。
AF C 载体大多为直径在几十至几百微米的球形凝胶颗粒,适合大规模AFC 操作的商品载体如表1所示,它们都具有羟基功能团,可供偶联各种亲和配基,且具备大孔、耐压以及在宽pH 值范围内化学稳定等性能。
用户可以购买这些商品载体按需要自己偶联相应配基制得亲和吸附剂,也可根据欲纯化蛋白质性质直接购买厂家已偶联好所需配基的亲和吸附剂商品。
AFC 所用的配基除天然物质外,还有许多由基因重组、细胞融合技术制得的单克隆抗体等,这也是AFC 技术如此兴旺的重要原因之一。
色谱分离技术—亲和色谱分离技术
亲和层析介质
亲和配基
常用的亲和配基： 辅酶和磷酸腺苷
某些酶需要在辅酶存在的情况下才能表现出催化活性，即辅酶能与脱氢酶 和激酶之间通过亲和作用相互结合，因此这些辅酶可用作脱氢酶和激酶的亲和 配基。
主要的辅酶有NAD、NADP、ATP。
亲和层析介质
亲和配基
常用的亲和配基： 过度金属离子
铜、镍、锌等可与氮、硫、氧等供电原子产生配位键，因此可与蛋白质表 面的组氨酸的咪唑基、半胱氨酸的巯基和色氨酸吲哚基发生亲和结合作用。
的亲和能力有决定性影响。
亲和色谱法的操作方法
1.配基固相化（样品制备、装柱、平衡） 2.亲和吸附 3.解吸附 4.色谱柱再生
亲和色谱法的操作方法
1.配基固相化 将与纯化对象有专一结合作用的物质，连接在水不溶性载体上，制成亲和
吸附剂后装柱（称亲和柱），用一定pH和离子强度的缓冲液对柱子进行平衡。 2.亲和吸附
即进料和杂质清洗。将含有目标产物的料液连续通入亲和柱，目标产物吸 附在柱上，之后用缓冲液淋洗色谱柱除去未被吸附的杂蛋白。
亲和色谱法的操作方法
3.解吸附 解吸附即目标产物洗脱。用某种缓冲液或溶液通过亲和柱，把吸附在亲和
柱上的目的产物洗脱出来。
亲和色谱法的操作方法
4.色谱柱再生 用几倍体积的起始缓冲液进行再平衡，一般足以使亲和柱再生，但一些未
亲和层析介质
亲和层析介质由载体和配基组成
亲和载体
载体应具备的条件： 1.载体必须具有较好的理化稳定性和生物惰性，非专业吸附小。 2.具有大量可供活化和配基结合的化学基团，以供与配基共价连接之用。 3.载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。 4.载体必须有稀松的网状结构使大分子能自由进入。 5.载体要有良好的机械性能，颗粒均匀。
靶向亲和-液相色谱-质谱联用技术快速筛选黄藤总生物碱中乙酰胆碱
ＤＯＩ ： １ ０ ・ Ｕ８ ９ ５ ／ ｊ ・ ｌ ｓ ｓ ｎ ・ ０ ２ ５ ３ ． ｊ ８ ２ ０ ・ １ ６ ０ ４ ６ ０
靶 向亲 和－ 液 相 色谱 ． 质 谱联 用 技 术快 速 筛选 黄藤 总生 物碱 中 乙酰胆 碱 酯 酶抑 制 剂
何 忠梅 吕 娜 南敏伦 赵 昱玮 赫玉芳 孟令 文 孙佳 明 张连 学
（ 吉林农 业大学人参工程技术创新 中心 ， 长春 １ ３ ０ １ １ ８ ） （ 吉林 省中医药科学 院 ， 长春 １ ３ ０ ０ １ ２ ）
ｆ 长 春 中医 药 大 学 ， 长春 １ ３ ０ １ １ ７ ）
摘
要
采用靶 向亲和． 液 相色谱． 质谱联用技术 （ Ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ｅ ａ ｆ ｉ ｆ ｎ ｉ ｔ ｙ － Ｌ Ｃ — Ｅ Ｓ Ｉ － ＭＳ “ ）快速筛 选黄藤 总生物
药物中 ， 成为药物筛选 的重要工具 ６ ， ， ］ 。本研究采用靶 向亲和一 液相色谱． 质谱联用技术筛选黄藤
中能够抑 制 乙酰胆 碱酯 酶 的活性 成分 ， 筛选出 １ ２种 具有 潜 在 抑制 乙酰 胆碱 酯 酶 的活 性成 分 ， 并 鉴定 了
其 中 ６种 化合 物 ， 为建 立 中药 中 乙酰 胆碱 酯酶 抑制 剂 的快速 筛选 提供 了科学 依据 。
有抑制 乙酰胆碱酯 酶活性 的成分 ， 适用 于复杂体 系中的高通量筛选。
关键词 靶 向亲和一 液相 色谱 一 质谱 联用技术 ；黄藤 总生 物碱 ；乙酰胆碱酯酶 ； 抑 制剂
１ 引 言
阿尔茨 海默 病 （ Ａ ｌ ｚ ｈ ｅ ｉ ｍ ｅ ｒ Ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ，Ａ Ｄ ）是 以大 脑 中 口 一 淀 粉样 蛋 白老 年 斑 （ Ｓ Ｐ ｓ ）沉 积 、 神经 纤维 缠结 （ Ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｉ ｆ ｂ ｒ ｉ ｌ ｌ ａ ｒ ｙ ｔ ａ ｎ ｇ ｌ ｅ ｓ ， Ｎ Ｆ Ｔ ｓ ）和 突触及 神经 元缺 失 为特征 的一 种神经 系统 退行 性疾病 ， 已成 为威 胁 现代 社会 老年 人健 康 的重大 疾病 之一 ｌ ｌ Ｊ 。针 对 Ａ Ｄ的病 理特征 及 病 因所 研发 的药 物 中 ，乙酰胆 碱酯 酶 抑 制剂 （ Ａ Ｃ ｈ Ｅ Ｉ ） 已广 泛用 于临床 治疗 Ａ Ｄ。Ａ ｃ ｈ Ｅ Ｉ 通 过抑 制体 内 Ａ Ｃ ｈ Ｅ活 性 ， 减 少 乙酰胆碱 分解 ， 缓解 Ａ Ｄ对生 活能力 和认 知能力 的损 害 。但 已上市 的 Ａ Ｃ ｈ Ｅ Ｉ 如他 克林 、 利 斯 的明等虽然有 一定效 果 ， 但存 在 活 性不强 、 副作用 较 大 的缺点 Ｊ 。 目前 ， 从 中药 中寻 找具 有 选 择性 强 、 副作 用 小 的 Ａ Ｃ ｈ Ｅ Ｉ 成 为 医药研 究
新型亲和膜色谱用于去除胆红素的研究
新型亲和膜色谱用于去除胆红素的研究胆红素是一类微量元素，它们主要存在于人体内由动物食物、水果和蔬菜中吸收而来。
它通常被用作一种营养成分，但是如果胆红素超标，则会造成健康危害。
为了分离和去除高浓度的胆红素，研究人员提出了一种新型亲和膜色谱法。
本文研究了新型亲和膜色谱对胆红素的分离和去除的有效性，以及对它的分析结果。
一、胆红素的来源及危害1.1红素的来源胆红素是一种重要的染料类物质，它存在于动物食物、水果和蔬菜中，以及有机及无机污染物中。
胆红素通常被用作一种营养成分，它可以刺激消化系统，促进营养的吸收，对人体有益处。
胆红素浓度大于一定程度时，可能会对人体健康产生危害。
胆红素可通过人体消化系统摄取，当它被代谢成一种被称为红酸的物质时，可能会影响血液循环中的各种氧化酶作用，从而对人体健康造成危害。
1.2红素的去除由于胆红素浓度高时会造成健康危害，所以为了分离和去除高浓度的胆红素，传统的方法是通过物理、化学和生物方法来分离和去除胆红素，但这些方法的效率都相对较低，需要较大的生产成本。
二、提出新型亲和膜色谱法2.1介为了克服传统去除胆红素方法的缺点，研究人员提出了一种新型亲和膜色谱法，它可以有效分离和去除胆红素。
新型亲和膜色谱法是一种由活性碳和醋酸钾共同形成的膜材料，胆红素可与活性碳以及醋酸钾形成氢键进行络合，从而使胆红素在膜材料表面结合，从而起到去除的作用。
2.2验条件新型膜色谱法的试验条件包括两个因素：活性碳质量、醋酸钾质量和搅拌速度。
在实验中，我们采用一定的质量比例的活性碳和醋酸钾，将它们混合搅拌，然后用一定的搅拌速度搅拌，以便充分混合活性碳和醋酸钾，最后将混合物加入胆红素溶液中进行测试。
2.3验结果实验证明，新型膜色谱法有效地分离和去除了胆红素，随着活性碳和醋酸钾混合质量增加，胆红素浓度也显著降低。
在一定量的活性碳和醋酸钾混合物中，随着搅拌速度增加，胆红素的去除效果也越好。
三、膜色谱法对胆红素的分析结果3.1外-可见吸收光谱法我们采用紫外-可见吸收光谱法对去除胆红素后的溶液进行分析，实验结果显示，新型膜色谱法能够有效去除胆红素，因为胆红素在膜材料表面形成络合，使其从溶液中被完全分离出来。
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第３２卷第４期２００７年４月上海化工ＳｈａｎｇｈａｉＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ摘要亲和色谱具有高选择、高活性回收率和高纯度等特点，已成为生物工程中分离纯化最有效的技术之一，是生物化工研究的重要方向。
综述了亲和色谱技术及其发展趋势。
关键词亲和色谱研究进展生物化工中图分类号Ｑ８１４．１第一作者简介：刘望才男１９７８年生博士研究生研究方向为化工技术在生物工程中的应用２７・・上海化工第３２卷［１］［２］［３］［４］液ｐＨ为４．２、０．０２ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（含０．５ｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ），所得ＧＳＨ纯度可达４９．８％，平均提取率为６７．９％。
３拟生物亲和色谱近年来发展起来的以氨基酸（包括多肽）亲和色谱和染料亲和色谱为代表的仿生亲和小分子配基新技术。
对需要纯化的目标蛋白，在组合生物分子库和组合化学分子库中筛选其相应的亲和配基，然后将其固定到支持介质上，这种组合出来的亲和配基比天然生物分子性质更稳定，特异性及重复性更好［１１－１２］。
３．１染料配基亲和色谱染料配基能通过共价链牢固地结合到亲和载体上。
染料配基价格低廉，与蛋白质的结合容量大，并且不易为物理或化学物质所降解，因此是一种较为理想的基团特异性配基。
Ｓ．Ｃ．ＭｅＬｉｓｓｉｓ等［１３］研究了谷胱甘肽结构类似物亲和吸附剂。
所用的染料是二氯三嗪的模拟物，其中活性部分结构与谷胱甘肽类似。
用此种亲和吸附剂分别纯化三种作用于谷胱甘肽的酶ＮＡＤ＋、甲醛脱氢酶和谷胱甘肽－Ｓ－转移酶，效果良好。
３．２多肽亲和色谱与金属和染料相比，多肽具有较高的特异性，且通常是无毒的。
多肽具有与蛋白质相似的结构，因此它们的作用通常是温和的，因此在分离过程中采取温和的洗脱条件，可以避免蛋白质的变性。
Ｈ．Ａｒｏｓｔｏｖａ［１４］等用碘化的Ｌ－酯氨酸与琼脂糖交联制备亲和色谱柱纯化猪胃蛋白酶，效果良好。
Ｊｏｈｎ等［１５］合成的双环八肽类似物，对肠促胰酶肽有很好的特异性吸附。
然而，自然界中存在的与蛋白质等生物大分子有天然亲和性的多肽种类非常有限。
因此，必须找到并得到合适的特异性多肽。
组合化学的进一步发展［１６］将为这一发展方向开辟道路。
４亲和色谱和其他技术联用过程集成（ＰｒｏｃｅｓｓＩｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）是一般化工加工过程的重要研究方向［１７］。
以下将对一些集成化的亲和色谱技术分别进行介绍。
４．１亲和膜分离技术亲和膜分离（ＡｆｉｎｉｔｙＭｅｍｂｒａｎｅＳｅｐａｒａｔｉｏｎ）是将亲和色谱与膜分离技术结合起来以提高过程选择性的一项新型分离技术。
亲和膜分离技术，综合了两种方法的优点，而且互相互补克服缺点，具有传质阻力小、压降低、设备体积小、配基利用率高等优点［１８］。
亲和膜过滤技术研究的最早报道见于１９８０年［１９］。
在国内，巳报道用于血清中内毒素［２０］等的分离纯化。
４．２电泳亲和色谱技术电泳亲和色谱技术（ＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＡｆｆｉｎｉｔｙＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）是将电泳与亲和色谱相结合形成一种新型制备规模的生物分离技术。
其基本思想是利用电场强化扩散过程以加速分离过程的进行。
ＬｉｕＺ等［２１］发现亲和色谱过程施加电场后吸附过程的传质速率加快，动态吸附容量提高。
４．３生物磁性亲和分离技术磁性分离技术中引入磁性介质，在操作时通过外加磁场的作用，可以提高传统生物分离技术的效率［２２］。
Ｓａｆａｎｋ等［２３］则探讨了利用磁性颗粒进行细胞分离的方法。
郭立安等［２４］合成了能用于万古霉素纯化用的磁性亲和载体，并从发酵液中一步纯化得到，可得到纯度达９７％以上的纯品。
４．４膨胀床吸附色谱技术传统色谱过程的最大不足是不能处理含固体颗粒的料液，２０世纪９０年代产生的膨胀床吸附技术，将固－液流态化技术与色谱过程偶合，使吸附和淋洗过程大大加快，细胞碎片等不溶物从顶部排出，实现了离心、过滤和纯化的一体化操作［２５］。
５展望亲和色谱技术以其高选择性和可逆性开创了生化分离的新纪元，随着临床对药用蛋白等生物工程产品需求的不断加大以及组合化学、基因工程等科学技术的高速发展，亲和色谱技术将迅速向前发展。
参考文献孙彦．生物分离工程［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００４：１９３－２２６．师贤，王俊德．生物大分子的液相色谱分离和制备［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９９：５１－１１５．熊宗贵．生物技术制药［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９９：１３５－１３９．ＢｅｒｒｕｅｘＬａｕｒｅＧ，ＦｒｅｉｔａｇＲｕｔｈ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆａｎｔｉｂｏｄｙｂｉｎｄｉｎｇｔｏｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｇｒｏｕｐｓｐｅｃｉｆｉｃａｆｆｉｎｉｔｙｌｉｇａｎｄｓｉｎｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｍｏｎｏｌｉｔｈａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎｄＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，２０００（２４）：９５－１０４．２８・・第４期刘望才等：亲和色谱技术研究进展ＰＰＧ工业集团在美国服装及鞋材展览会上宣布：公司正在兴建一座先进的油漆服务工厂，厂址选为中国平山市。
工厂预期将于今年４月开始运营，ＰＰＧ将展现ＶＩＶＡＦＬＥＸ色彩系统的各种性能及优势。
“ＶＩＶＡＦＬＥＸ色彩系统被应用在运动鞋上最柔软的材料如合成革、乙烯－醋酸乙烯共聚物（ＥＶＡ）、聚氨酯（ＰＵ）和热塑性聚氨酯（ＴＰＵ）时，不仅能够提供绚丽的色彩，而且能够保证始终如一稳定的外观。
”ＰＰＧ涂料服务业务部总监Ｌｏｎｇ先生说：“这将是ＰＰＧ的第一家ＶＩＶＡＦＬＥＸ色彩系统喷涂中心，它还将成为我们展示应用于运动鞋产业涂料专长的基地。
”工厂将提供防护性能并能够提供涂层设计方案、销售样品及生产数量。
Ｌｏｎｇ先生还说：“ＰＰＧ定位此中心的运营目标是与区域客户合作以减少小额定单的生产周期和成本，以此来增强订单运作的灵活性。
”（涂闽）ＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＡｆｆｉｎｉｔｙＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＬｉｕＷａｎｇｃａｉＺｈｕＪｉａｗｅｎＡｂｓｔｒａｃｔ：Ａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｉｃｉｅｎｔｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｉｎｂｉｏｌｏｇｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｈｉｃｈｈａｓｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｈｉｇｈｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｈｉｇｈｒｅｃｏｖｅｒｙｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｈｉｇｈｐｕｒｉｔｙａｎｄｓｏｏｎ．Ｔｈｅｔｙｐｅｓａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｒｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ．ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｆｆｉｎｉｔｙｓｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；Ｒｅｖｉｅｗ；Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈｅｍｉｓｔｒｙ［５］［６］［７］［８］［９］［１０］［１１］［１２］［１３］［１４］赵益明，何杨，等．单克隆抗体Ｓｚ－９５亲和色谱纯化人血小板第４因子［Ｊ］．中国生化药物杂志，２００２，２３（２）：６９－７３．ＵｅｄａＥＫＭ，ＧｏｕｔＰＷ，ＭｏｒｇａｎｔｉＬ．Ｃｕｒｒｅｎｔａｎｄｐｒｏｓｐｅｃ－ｔｉｖｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｍｅｔａｌｉｏｎ－ｐｒｏｔｅｉｎｂｉｎｄｉｎｇ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＡ，２００３，９８８：１－２３．ＬａｂｒｏｕＮＥ．Ｄｅｓｉｇｎａｎｄｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆｌｉｇａｎｄｓｆｏｒａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＢ，ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｉｎｔｈｅＢｉｏｍｅｄｉｃａｌａｎｄＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００３，７９０：６７－７８．ＲｅｎＤｉｙａ，ＰｅｎｎｅｒＮａｔａｌｉａＡ，ＳｌｅｎｔｚＢｅｎｊａｍｉｎＥ，ｅｔａｌ．Ｃｏｎ－ｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓｏｆｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｓｏｒｂｅｎｔｓｔｏｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙｉｎｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｍｅｔａｌａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈＣｕ（ＩＩ）［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＡ，２００４，１０３１：８７－９２．ＬａｒｒｙＲｉｇｇｓ，ＣａｔｈｙＳｌｏｍａ，ｅｔａ１．Ａｕｔｏｍｅｔｅｄｓｉｇｎａｔｕｒｅｐｅｐ－ｔｉｄｅａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ［Ｊ］．ＪＣｂｏｍａｔｏｇｒＡ，２００１，９２４：３５９－３６８．潘飞，邱雁临．还原型谷胱甘肽的金属螯合亲和色谱纯化［Ｊ］．中国医药工业杂志，２００６，４：１７０－１７１．陈涛，刘耘，潘进权．分离纯化新技术亲和色谱［Ｊ］．广州食品工业科技，２００３，Ｖ１９（２）：１００－１０４．李世祟，陈昭烈．不稳定蛋白质的分离纯化［Ｊ］．药物生物技术，２００２，９（３）：１７６．ＭｅＬｉｓｓｉｓＳＣ，ｅｔａ１．ＮｅｗｆａｍｉｌｙｏｆｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｙｌｂｉｏｍｉｍｅｔｃｃｌｉｇａｎｄｓｆｏｒａｆｆｉｎｉｔｙＣｂｏｍａｔｏｇａｐｈｙｏｆｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－ｒｅｃｏｇｉｓ－ｉｎｇｅｎｚｙｍｅｓｅ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｐｙＡ，２００１，９１７：２９－４２．ＨＡｒｏｓｔｏｖａ，ＺＫｕｃｅｎｖａ，ｅｔａ１．Ａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｏｆｐｏｒｃｉｎｅｐｅｐｓｉｎｏｎｄｉｆｆｅｎｔｔｙｐｅｏｆｉｎｕｎｏｂｉｌｉｚｅｄ３，５－ｄｉｉｏｄｏ－Ｌ－ｔｙｍｏｓｉｎｅ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＡ，２００１，９１１：２１１－３１６．ＮｄｕｎｇｕＪｏｈｎＭ，ＧｕＸｕｙｕａｎ，ＧｒｏｓｓＤｕｓｔｉｎＥ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｂｉｃｙｃｌｉｃｄｉｐｅｐｔｉｄｅｍｉｍｅｔｉｃｓｆｏｒｔｈｅｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎａｎｄｏｐｉｏｉｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ［Ｊ］．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ，２００４：４５（２１）４１３９－４１４２．ＮｉｃｈｏｏｌａｓＫ．Ｔｅｒｒｅｔｔ著，许家喜译．组合化学［Ｍ］．北京：北京大学出版社，１９９９：２３５－２５０．梅乐和，姚善汀，林东强，等．生物分离过程研究的新趋势［Ｊ］．化学工程，１９９９，２７（５）：３８－４１．ＪｏｓｓｏｎＪＡ，ＭａｔｈｉａｓｓｏｎＬ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ－ｂａｓｅｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｆｏｒｓａｍｐｌｅｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＡ，２０００，９０２（１）：２０５－２１３．ＥｌｉａｓＫ．Ａｆｆｉｎｉｔｙｍｅｍｂｒａｎｅｓ：ａ１０－ｙｅａｒｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．ＪＭｅｍ－ｂｒａｎｅＳｃｉｅｎｃｅ，２０００，１７９（１２）：ｌ－２７．魏桂林，刘学良，李京华，等．亲和膜用于去除医药及人血清白蛋白溶液中的内毒素［Ｊ］．色谱，２００２，２０（２）：８０－８５．ＬｉｕＺ，ＦｅｎｇＳＨ，ＹｉｎＪ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｉｅｓｏｎａｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｎａｎｅｌｅｃｔｒｉｃｆｉｅｌｄ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏ－ｍａｔｏｇｒＡ，１９９９，８５２（１）：３１９－３２４．薛博，余艺华，孙彦．磁性介质及其在生物技术中的应用［Ｊ］．化工进展，２０００，１９（１）：１８．Ｓａｆａｒｉｋ１，ＳａｆａｒｉｋｏｖＡＭ．Ｕｓｅｏｆｍａｇｎｅｔｉｃｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｆｏｒｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢ，１９９９，７７２（１）：３３－５３．郭立安，朱宝泉，陈代杰．万古霉素的磁性亲和吸附分离［Ｊ］．生物工程学报，２００１，１７（５）：５８４－５８６．路秀玲，赵东旭，金业涛．扩张床吸附直接从牛血中快速分离牛血清白蛋白［Ｊ］．中国生化药物杂志，２００５，２６（１）：５－９．收稿日期：２００７年１月［１５］［１６］［１７］［１８］［１９］［２０］［２１］［２２］［２３］［２４］［２５］ＰＰＧ宣布设立运动鞋涂料喷涂中心!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!２９・・。