二甲基亚砜DMSO 冻存液
超低温保存技术的相关机理综述
二甲基亚砜二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。
具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物,被誉为“万能溶剂”。
同时,氯化铬,氯化锰等过渡金属卤化物与氯化钾,氯化钠等卤化物在DMSO中有一定溶解度,故可以应用在有机电化学中。
二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂,特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂,作聚氨酯合成及抽丝溶剂,作聚酰胺,聚酰亚胺和聚砜树脂的合成溶剂,以及芳烃,丁二烯抽提溶剂和合成氯氟苯胺的溶剂等。
除此之外,在医药工业中二甲基亚砜还有直接用作某些药物的原料及载体。
二甲基亚砜本身有消炎止痛,利尿,镇静等作用,亦誉为“万灵药”,常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。
DMSO是二甲基亚砜,用途广泛。
用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。
是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。
对皮肤有极强的渗透性,有助于药物向人体渗透。
也可作为农药的添加剂。
也是一种十分重要的化学试剂。
DMSO也是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,减轻自由基对细胞损害,改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。
但研究表明,DMSO存在一定的毒性作用,与蛋白质疏水集团发生作用,导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性。
DMSO存在一定的毒性作用,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤.在防冻剂中的应用纯DMSO 的冰点是18.45℃,含水40%的DMSO在-60℃不冻,而且DMSO与水、雪混合时放热。
这种性质使DMSO可作为汽车防冻液、刹车油、液压液组分。
乙二醇防冻液在超过-40℃低温时已不适用。
而且比DMSO沸点低,有毒,易生产气阻。
DMSO 防冻液在北部严寒地区用于除冰剂,涂料、各种乳胶的防冻剂,汽油、航煤的防冰剂,骨髓、血液、低温保存的防冻剂等。
二甲基亚砜说明书
二甲基亚砜说明书中文名称:二甲基亚砜(DMSO)英文名 :Dimethyl sulfoxide(DMSO)别称:二甲亚砜化学式: C2H6OS分子量: 78.13CAS登录号: 67-68-5EINECS登录号: 200-664-3熔点: 18.4 °C沸点: 189°C水溶性:能溶密度: 1.100g/mL外观:无色液体闪点: 95°C应用:有机高分子合成稳定溶剂安全性描述:避光低温稳定危险性符号:36/37/38危险性描述:不可食用,接触就医相对分子量: 78.078供应商:乔羽生物储存条件:2-8°C 低温避光保存二甲基亚砜(DMSO)简介:二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,常温下为无色无臭的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。
具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物,被誉为“万能溶剂”。
在酸存在时加热会产生少量甲基硫醇、甲醛、二甲基硫、甲磺酸等化合物。
在高温下有分解现象,遇氯能发生剧烈反应,在空气中燃烧发出淡蓝色火焰。
可作有机溶剂、反应介质和有机合成中间体。
也可用作合成纤维的染色溶剂、去染剂、染色载体,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收剂。
二甲基亚砜(DMSO)物理性质:无色粘稠液体。
可燃,几乎无臭,带有苦味,有吸湿性。
除石油醚外,可溶解一般有机溶剂。
能与水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二恶烷和芳烃化合物等任意互溶,不溶于乙炔以外的脂肪烃类化合物。
[1] 有强烈吸湿性,在20℃,当相对湿度为60%时,可从空气吸收相当于自身重量70%的水分。
该品是弱氧化剂,不含水的二甲基亚砜对金属无腐蚀性。
含水时对铁;铜等金属有腐蚀性,但对铝不腐蚀。
对碱稳定。
在酸存在时加热会产生少量的甲基硫醇;甲醛;二甲基硫;甲磺酸等化合物。
在高温下有分解现象,遇氯能发生激烈反应,在空气中燃烧发出淡蓝色火焰。
DMSO(细胞冻存)
DMSO(细胞冻存)简介:随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。
冷冻保存细胞系的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。
细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。
细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。
Leagene DMSO(细胞冻存)是经典的细胞冻存液的成分之一,用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存,该溶液经无菌处理。
组成:自备材料:1、 细胞计数器2、 细胞冻存管3、 超低温冰箱或液氮4、 超净工作台操作步骤(仅供参考):1、 培养细胞至对数生长晚期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞进行冻存操作。
如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。
2、 离心,弃上清。
3、 一般按培养基:DMSO(细胞冻存)或者血清:培养基:DMSO(细胞冻存)等比例配制细胞冻存液。
重悬细胞,使细胞浓度达到/ml ,置于冻存管中,密闭、不要拧的太紧,避免弯曲变形。
4、 一般进行冷冻。
亦可采用-20℃ 30min ,-70℃ 过夜,最后置于液氮罐中长期存储。
编号 名称 CC0118 Storage DMSO(细胞冻存) 50ml -20℃使用说明书 1份注意事项:1、注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染。
2、初次使用融化后可在4℃保存1个月,但应减少反复冻融的次数,以免失效。
3、杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:24个月有效。
Y-Tec 二甲基亚砜 DMSO(细胞级)说明书
上海七纯生物科技有限公司上海七纯生物科技有限公司网址: 产品说明书品名:Y-Tec 二甲基亚砜DMSO(细胞级)货号:YDM0100规格:100mL➽产品信息:Y-Tec 二甲基亚砜DMSO (细胞级)属于非质子极性溶剂,常用于细胞冻存培养基,可很好的保护细胞免受冰晶引起的机械性损伤。
七纯的DMSO 也可用于主培养、亚培养、重组异倍体、杂交瘤等系列细胞株,胚胎干细胞(ESC )和造血干细胞的冷冻保藏,经常会与血清(FBS)或牛血清白蛋白(BSA)混匀后使用。
也常用于抗体蛋白保存、试剂溶剂溶解剂、PCR 实验、细胞组织与器官的保存中用作玻璃化低温冷冻防护剂。
➽兼容性:完全互容:LDPE 、HDPE 、聚丙烯、PPCO 、聚甲基戊烯、尼龙、teflon FEP 中度互容:聚苯乙烯、ECTFE/ETFE不互容:聚砜、flexible and rigid PVC tubing 、聚碳酸脂➽溶解性:DMSO 易与水混合(1mL DMSO +1mL H2O )形成清澈、无色的溶液。
也溶于乙醇、丙酮、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂,产品易吸潮,保存注意避免暴露在潮湿环境中。
➽保存条件:1.室温(RT )运输与保存,有效期24个月。
2.DMSO 容易过冷并且室温下缓慢融化,若收到的产品应为固体并非液体状态,可通过加热将固化的DMSO 放在室温下可以再次液化,对其本身无损害。
属于热稳定化合物,在高达100℃的酸、碱及中性溶液中保持稳定。
温度接近其沸点(189℃),在碱性和中性溶液中仍保持稳定。
150℃加热24h ,其纯度损失小于0.1%。
➽使用注意事项:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
免责声明:本公司将不为任何非正常使用产品导致的损失与意外负责For Laboratory Research Use Only。
常见细胞冻存液配方
常见细胞冻存液配方一、常见细胞冻存液配方细胞冻存可是细胞实验里超级重要的一环呢,就像给细胞找个“冬眠”的地方,等需要的时候再把它们唤醒。
那冻存液的配方就像是这个“冬眠小窝”的建造蓝图。
配方一:最经典的一种就是含10% DMSO(二甲基亚砜)和90%胎牛血清的冻存液。
DMSO这个东西很神奇哦,它就像是细胞的保护神。
在细胞冻存的时候,细胞周围的环境变得超级冷,这个时候细胞里的水就会有变成冰晶的危险,冰晶就像小刀子一样会把细胞给划伤,那细胞就死翘翘啦。
但是DMSO可以降低细胞里水结冰的温度,这样就可以减少冰晶的形成,保护细胞。
胎牛血清呢,就像是给细胞提供营养的小仓库,在冻存的时候也能给细胞补充一些营养,让细胞在“冬眠”的时候也不至于太饿啦。
配方二:还有一种是90%血清 + 10% DMSO + 1 - 2%的甘油。
甘油和DMSO有点像,都是可以保护细胞防止冰晶伤害的。
血清在这里面也是提供营养和一些保护的作用。
这个配方有时候对于一些比较脆弱的细胞效果还挺好的。
比如说一些干细胞之类的,用这个配方冻存可能会让它们在复苏的时候更有活力。
配方三:另外一种是专门的细胞冻存培养基,这种培养基是商业化生产的。
它里面的成分很复杂,除了有类似DMSO这样的保护剂之外,还有一些特殊的营养成分和缓冲物质。
这种冻存液对于一些对环境要求特别高的细胞比较适用。
比如说一些从人体组织里刚分离出来的原代细胞,用这种专门的冻存培养基可能会提高冻存和复苏的成功率。
在使用这些冻存液配方的时候也有一些小窍门哦。
比如在配置冻存液的时候,一定要保证所有的成分都是无菌的,不然细胞在冻存的时候就容易被细菌或者真菌污染,那之前的努力就都白费啦。
还有就是在把细胞放到冻存液里的时候,要轻轻吹打,就像轻轻抚摸细胞一样,可不能太粗暴了,不然细胞可能会被弄伤呢。
概括来说,不同的细胞可能适合不同的冻存液配方,要根据细胞的类型、实验的要求等来选择合适的冻存液配方,这样才能让细胞在冻存和复苏的时候都保持良好的状态,继续为我们的科研工作或者其他应用发挥作用呢。
二甲基亚砜DMSO 冻存液
二甲基亚砜科技名词定义中文名称:二甲基亚砜英文名称:dimethyl sulfoxide;DMSO定义:一种氢键破坏剂。
因其抗冻作用,可用于细胞的冻存;因其对大分子的变性作用,用于变性凝胶电泳等。
所属学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与技术(二级学科)本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布百科名片二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide或DMSO),无色液体,重要的极性非质子溶剂。
它可与许多有机溶剂及水互溶。
二甲基亚砜具有极易渗透皮肤的特殊性质,造成使用人员感觉类似牡蛎般的味道。
基本资料结构式产品名称:二甲基亚砜结构简式:(CH3)2-S-O 英文名:Dimethyl sulfoxide 别名:Dimethylsulfoxide; Methyl sulfoxide; Sulfinylbis (methane); DMSO分子式:C2H6OS 分子量:78.12 CAS:登录号67-68-5 EINECS:登录号200-664-3 FEMA:登录号3875 物理化学性质密度:1.1 熔点:18.4-19.0°C 沸点:189°C 折射率:1.477-1.48 闪点:95°C 燃点:300℃粘度:1.996mPa·s(25℃)简介二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,具有吸湿性的可燃液体,既有高极性,高沸点,非质子,于水混溶的特性,热稳定性好,能溶于乙醇,丙醇,苯和氯仿等大多数有机物,被誉为“万能溶剂”。
二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂,特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂,作聚氨酯合成及抽丝溶剂,作聚酰胺,聚酰亚胺和聚砜树脂的合成溶剂,以及芳烃,丁二烯抽提溶剂和合成氯氟苯胺的溶剂等。
除此之外,在医药工业中二甲基亚砜还有直接用作某些药物的原料及载体。
二甲基亚砜本身有消炎止痛,利尿,镇静等作用,亦誉为“万灵药”,常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。
二甲基亚砜DMSO
二甲基亚砜DMSO000二甲基亚砜基本信息英文名Dimethyl sulfoxide别名Dimethylsulfoxide; Methyl sulfoxide; Sulfinylbis (methane); DMSO产品名称二甲基亚砜分子式C2H6OS分子量78.12CAS 登录号67-68-5EINECS 登录号200-664-3FEMA 登录号3875物理化学性质密度 1.1熔点18.4-19.0°C沸点189°C折射率 1.477-1.48闪点95°C1概述二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,具有吸湿性的可燃液体,既有高极性,高沸点,非质子,于水混溶的特性,毒性极低,热稳定性好,能溶于乙醇,丙醇,苯和氯仿等大多、数有机物,被誉为“万能溶剂”。
二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂,特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂,作聚氨酯合成及抽丝溶剂,作聚酰胺,聚酰亚胺和聚砜树脂的合成溶剂,以及芳烃,丁二烯抽提溶剂和合成氯氟苯胺的溶剂等。
除此之外,在医药工业中二甲基亚砜还有直接用作某些药物的原料及载体。
二甲基亚砜本身有消炎止痛,利尿,镇静等作用,亦誉为“万灵药”,常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。
2 国外产需情况2.1生产目前世界上仅有美国,日本,法国和中国四个国家拥有二甲基亚砜的生产装置,截止1997年底美国,法国和日本三国现有的二甲基亚砜装置的生产能力已达3万吨/年。
我国约1万吨年(表1,2)。
表1 国外二甲基亚砜生产厂家及生产能力国家公司厂址生产能力/Kt*a-1美国Gayload Slidell,La 22Altochem Lacq 6日本昭和工业公司 2表2 国内二甲基亚砜生产厂家及生产能力工厂名称生产能力/kt*a-1 1996年产量/kt盘锦新型化工厂 5 4.1本溪化工矿业总厂 1.2 (不详)本溪橡胶化工厂1_2 (停产)山西太谷化工厂0.5 0.41山西榆茨有机化工厂0.5-0.85 0.32湖北宜城化工厂0.4 (不详)江苏武进槽桥中学实验厂0.8 (不详)河南焦作焦东矿务局化工厂1(停产) 0.12上海硫酸厂1(停产) -河北赵县化工厂0.3(停产) -我国二甲基亚砜生产能力和产量增长很快。
二甲基亚砜在生物实验中的具体应用
二甲基亚砜在生物实验中的具体应用
二甲基亚砜(DMSO)是一种广泛应用于生物实验中的有机溶剂,其具体应用包括以下几个方面:
1. 细胞培养:DMSO可作为细胞冻存液的组分之一,能够降低细胞存活率和损伤,增强细胞冻存的成功率。
同时,DMSO可促进细胞的分化和增殖。
2. 药物转运:DMSO可促进药物分子的渗透和转运,提高药物的生物利用度。
因此,可作为药物研发的溶剂和载体,有助于提高药物疗效和减少副作用。
3. DNA测序:DMSO可作为DNA测序反应的溶剂和增效剂,能够提高测序反应的准确性和稳定性。
4. 蛋白质纯化:DMSO可在蛋白质纯化的过程中起到保护和稳定的作用,同时可促进蛋白质的溶解和折叠。
5. 神经保护:DMSO具有一定的神经保护作用,能够保护神经细胞免受氧化应激和其他损伤的影响,有助于治疗神经系统疾病。
综上所述,DMSO在生物实验中具有广泛的应用前景,在细胞培养、药物研发、DNA测序、蛋白质纯化和神经保护等方面具有重要作用。
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二甲基亚砜直接加入培养中Jurkat细胞进行冻存
二甲基亚砜直接加入培养中Jurkat细胞进行冻存陈丽洁;王犇;赵起超;马冠英;童晨壕;陈功星【期刊名称】《华夏医学》【年(卷),期】2016(0)3【摘要】目的:探讨培养中的细胞直接加二甲基亚砜(DMSO)冻存的方法.方法:常规培养Jurkat细胞,接种换液培养过夜,然后封闭与未封闭室温继续培养,6d后镜下观察生长状态;另外部分收集离心常规冻存,部分细胞直接加DMSO冻存,半年后复苏检测存活率和换液MTT分析细胞活力.结果:室温培养的Jurkat细胞,封闭组呈弱酸性,大部分细胞维持完整形态,少部分崩解,而未封闭组相反;常规和直接加DMSO组复苏存活率均超过50%,复苏过程中细胞活力逐渐上升,8d后复苏成功可以传代,各检测点两组间均没有统计学差异(P>0.05).结论:在培养中的Jurkat细胞直接加DMSO冻存,是一种新的细胞保存方法,可以作为细胞培养技术的一个补充.【总页数】4页(P10-13)【作者】陈丽洁;王犇;赵起超;马冠英;童晨壕;陈功星【作者单位】杭州师范大学医学院实验中心,浙江杭州 310016;杭州师范大学医学院实验中心,浙江杭州 310016;杭州师范大学医学院实验中心,浙江杭州 310016;杭州师范大学医学院实验中心,浙江杭州 310016;杭州师范大学医学院实验中心,浙江杭州 310016;杭州师范大学医学院实验中心,浙江杭州 310016【正文语种】中文【中图分类】Q343.6【相关文献】1.贴壁培养细胞直接用培养瓶置-80℃冻存 [J], 徐佳宁;何立锋;郑蒙雨;倪利承;汪浩;陈功星2.低浓度二甲基亚砜保护SSMC7721细胞冻存后活力 [J], 李中文;吴涛;付应霄;吴守伟3.二甲基亚砜血小板冻存剂的制备及质量控制 [J], 龚正明;余梅贵4.低浓度二甲基亚砜冻存外周血造血干细胞的效果 [J], 靳海杰;唐菊英;孙敬芬;赵丹丹;黄文荣;刘源;高春记;达万明5.二甲基亚砜联合羟乙基淀粉的非程控降温法低温冻存脐血来源不成熟树突状细胞的实验研究 [J], 王逸涛;彭毅志;王强;王永权;游波因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)冰冻保存液
Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)冰冻保存液GMP车间全封闭生产无菌过滤无热源无内毒素无支原体污染临床应用和脐带血保存冰冻血小板保存目前Cryosure-DMSO 冰冻保存液-二甲基亚砜占据了全球50%脐带血保存市场,国内市场的占有率为90%。
顶级的DMSO-德国WAK DMSO(二甲亚砜),临床应用级产品信息:WAK-DMSO-10/70 CryoSure-DMSO二甲亚砜10ml/70ml德国WAK CHEMIE公司研发的二甲亚砜(DMSO)在高级别DMSO的精制领域处于领先地位,其细胞冻存级产品在市场上拥有较高的占有率,经过六年多的客户检验和使用,质量过硬。
为了进一步提升品质,在攻克了几个难题后,生产线进行了GMP改造。
该产品为德国药监局正式批准可进行临床注射、骨髓移植、造血干细胞分离、脐带血冻存、角膜及其他器官保存等领域。
特别应用在贵重细胞和娇嫩细胞的冻存和复苏,适合广大科研工作者,尤其是从事免疫学、细胞学、生物制药和干细胞临床应用的科研人员。
目前,包括上海市血液中心和上海脐带血库在内的全国有超过一百家临床、科研单位已经使用了等国WAK公司的产品,客户还在不断增加中。
WAK公司的二甲亚砜纯度高于99.5%,且每瓶DMSO都用KOH通过光谱仪做了可染色物质的检验,本DMSO杂质含量远远低于美国药典中允许的含量,另外为了防止玻璃瓶掰开时细小碎片进入药液,其选择了造价较高的胶盖多计量药瓶。
WAK公司的二甲亚砜(DMSO)商品名叫CryoSure,是在GMP条件下生产的,无热原、无内毒素、无支原体,同时根据客户要求,做了活力实验、支原体检验。
顶级的DMSO-德国WAK DMSO(二甲亚砜),临床应用级品名:Dimethyl Sulfoxide(DMSO) CAS号:67-68-5分子式:C2H6OS 分子量:78.13域处于领先地位,其细胞冻存级产品在市场上拥有较高的占有率,经过六年多的客户检验和使用,质量过硬。
二甲基亚砜百科
二甲基亚砜百科二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,简称DMSO)是一种有机溶剂,既能溶解有机物,又可溶解无机和有机无电解质,其分子式为C2H6SO。
它具有无色、无臭、透明、沸点高、极性强等特点,广泛应用于医药、农业、化工等领域。
本百科将详细介绍二甲基亚砜的物理化学性质、应用领域和安全注意事项。
一、物理化学性质1. 理化性质:二甲基亚砜为无色液体,在常温下呈透明状态。
它具有较高的沸点(189°C)和较低的冰点(18.5°C),能在较宽的温度范围内保持液体状态。
二甲基亚砜极性较强,可溶于水、醇类、醚类等极性溶剂,并可与非极性溶剂如烷烃和芳烃混溶。
2. 化学性质:二甲基亚砜是稳定的化合物,具有优良的溶解性和中性反应性。
它在常温下不与大多数无机和有机物发生反应,但可参与亲电或亲核取代反应。
此外,它对空气中的水分和氧气较敏感,容易吸湿和氧化。
二、应用领域1. 医药领域:二甲基亚砜是一种重要的药剂溶剂,具有促进药物经皮或黏膜吸收的优势。
它被广泛应用于外用药和局部治疗药物的制剂中,用于治疗风湿性关节炎、痔疮、皮炎等疾病。
此外,DMSO还被用于体外培养细胞、冷冻保存生物样品等生物医学研究中。
2. 农业领域:二甲基亚砜作为一种优良的溶剂,被应用于农药制剂和植物生理调节剂的制备过程中。
它不仅能有效溶解和稀释农药成分,还能促进农药在植物体内的吸收和输导,提高农药的利用率和效果。
此外,DMSO还可用于处理植物组织和种子的储藏、保鲜和冷冻。
3. 化工领域:二甲基亚砜是一种重要的有机合成溶剂,广泛应用于有机合成反应中。
它可作为氧化剂、还原剂、酸催化剂等催化剂的载体,参与各种有机合成反应,包括氧化、还原、取代、缩合等。
此外,DMSO还可用作润滑剂、清洗剂、抗冻剂等工业产品的添加剂。
三、安全注意事项1. 避免纯品接触皮肤或吸入:二甲基亚砜具有刺激性和增透性,接触纯品可能导致皮肤刺激、过敏或渗透作用。
上海一种新型的细胞冻存液比例注意事项
上海一种新型的细胞冻存液比例注意事项在细胞冻存过程中,冻存液的比例是至关重要的。
最近,上海研发了一种新型的细胞冻存液,以下是使用该液体时需要注意的比例问题:
1. DMSO (二甲基亚砜)的比例应该在5%到10%之间。
这是因为DMSO可以防止细胞在冻结过程中受到损伤,并保护细胞的完整性。
2. FBS(胎牛血清)的比例应该在10%到20%之间。
FBS可以提供细胞所需的营养物质和生长因子,使细胞在冻结过程中获得营养和生长环境。
3. 细胞培养基的比例应该在70%到85%之间。
这是因为细胞培养基可以提供细胞冻存期间所需的保护性环境,并保持细胞的生长状态。
4. 其它添加剂的比例应该在适量的范围内。
添加剂可以根据细胞类型和要求进行调整,但应注意添加剂的比例不要超过总液体的5%。
总之,在使用新型的细胞冻存液时,比例是非常重要的。
需要根据细胞类型和要求进行适当的调整,并确保比例在适当的范围内,以确保细胞的冻存效果和质量。
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成都一种新型的细胞冻存液配制步骤
成都一种新型的细胞冻存液配制步骤
近些年来,随着科技的不断进步和人们对健康的重视,细胞冻存液的
需求量也逐渐增加。
在这个领域,成都科学家们研制出了一种新型的
细胞冻存液,具有更高的稳定性和更好的保存效果。
下面,我们来一
起了解一下这种新型细胞冻存液的制备步骤吧。
1. 材料准备。
首先,我们需要准备一些化学试剂,包括明胶、甘露醇、DMSO(二甲基亚砜)、维生素C、纯化水等等。
这些试剂的制备需要按照一定的比例进行,以保证后续的制备过程顺利进行。
2. 配制过程。
首先,将纯化水倒入优化好的容器中,然后将明胶粉末
加入其中,搅拌均匀,然后加热至溶解,并且降温至0℃以下。
接着,将甘露醇和DMSO加入溶解好的明胶中,再次搅拌均匀。
最后,加入维
生素C,再次搅拌,直至配制的液体呈现均一无颗粒悬浮液体状态。
3. 细胞样品冻存。
将待冻存的细胞培养物离心,将培养液倒掉。
接着,将细胞样品加入冻存液中并混合均匀。
然后,将混合好的细胞样品和
冻存液存放在预冷的冻存管中。
最后,可以通过高速冷却和低温冷冻
等方法,将冻存液和细胞样品冷冻保存在-80℃的冰箱中。
4. 冻存液的保存。
将配制好的冻存液保存在干燥,阴凉的地方,避免
阳光直射。
同时,在使用之前,需要用无菌的方法进行消毒处理,以
确保细胞不会受到细菌或病毒等污染物的干扰。
通过以上的步骤,我们可以得到一种更稳定、更有效的细胞冻存液。
在细胞的研究和应用领域中,这种新型冻存液的应用前景十分广阔,
有望为生物科学研究提供更好的帮助和支持。
成都一种新型的细胞冻存液配制步骤
成都一种新型的细胞冻存液配制步骤
近年来,越来越多的科研工作者开始采用细胞冻存技术来保存和管理实验室中的细胞。
而细胞冻存液的配制是保存成果和顺利进行实验的关键步骤之一。
本文将介绍一种新型的细胞冻存液的配制步骤,旨在为使用细胞冻存技术的科研工作者提供参考。
步骤一:准备配方
本新型细胞冻存液的配方为10% DMSO(二甲基亚砜)、40% FBS (胎牛血清)、50% 培养基。
其中,DMSO为保护细胞的冷冻剂,FBS 为提供营养的血清,培养基为维持细胞活性的基础液体。
步骤二:配制液体
将DMSO和FBS分别加入培养基中,慢慢滴加,搅拌均匀,避免气泡形成。
注意,DMSO要先加入,因为它的性质决定了它需要先与细胞接触,以确保细胞被充分保护。
步骤三:分装保存
将配制好的细胞冻存液分装到冻存管中,每支约 1 mL。
标示好冻存日期、细胞品系等信息,放入液氮中进行保存。
需要注意的是,在配制和冻存过程中,细胞的数量和保护要求是非常重要的。
因此,在操作前需要充分了解自己的实验对象,根据不同的细胞品系和特性进行合理的配制和保存。
同时,细胞冻存液的密封性和保存温度也需要严格控制,以确保细胞的生命力和活性能够得到最好的保护。
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上海一种新型的细胞冻存液配制步骤
上海一种新型的细胞冻存液配制步骤
以下是一种新型的细胞冻存液配制步骤:
材料:
1. 1.5M甘露醇液
2.10% DMSO(二甲基亚砜)溶液
3.FBS(胎牛血清)
4.细胞培养基
步骤:
1、快速冻存细胞时,需要准备含有15%甘露醇和10% DMSO的细胞冻存液。
2、将500ml未经处理的FBS缓慢加入500ml培养基中搅拌均匀后,将其过滤消毒。
3、将1.5M甘露醇溶液和10% DMSO溶液配制好(用无菌过滤器过滤消毒),放在冰箱中冷却。
4、在处理细胞之前,将FBS和细胞培养基混合,细胞培养基中FBS的最终浓度应
为10%-20%.
5、添加3ml 1.5M甘露醇液和2ml 10% DMSO溶液到每个细胞培养离心管中。
6、使用吸管或移液器将5ml细胞培养基和FBS混合液缓慢地滴入细胞培养离心管中,慢慢地加入,同时轻轻摇动细胞培养离心管,避免出现气泡。
7、将细胞培养离心管密封,快速放入-80℃冰箱中。
8、维持细胞在-80℃冰箱中至少1小时,之后可转移到液氮罐中进行长期保存。
注意事项:
1、所有材料和离心管必须进行无菌处理,以避免细菌或病毒的污染。
2、在使用DMSO时,需格外小心,因为它是一种臭味强烈、易挥发、对人类有毒的有机溶剂。
使用时必须佩戴耐化学性手套、护目镜等个人防护设备。
3、在加入细胞培养基和FBS混合液时,要非常小心,以避免出现气泡。
dmso结冰点
dmso结冰点
二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,常温下为无色无臭的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。
其结冰点凝固点在18.4度左右。
冬季华东华北地区的温度通常低于这个温度,因此在这些地区,DMSO在冬季基本已经结冰。
DMSO具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物,被誉为"万能溶剂"。
在冬季使用时,建议将其存储在有空调的库房内,以避免结冰;如果采购数量较大,可以根据每天或每两天的使用量,提前将未来1-2天的产品放置到高于18度的库房内,使用时取出即可。
二甲基亚砜直接加入培养中Jurkat细胞进行冻存
二甲基亚砜直接加入培养中Jurkat细胞进行冻存目的:探讨培养中的细胞直接加二甲基亚砜(DMSO)冻存的方法。
方法:常规培养Jurkat细胞,接种换液培养过夜,然后封闭与未封闭室温继续培养,6 d 后镜下观察生长状态;另外部分收集离心常规冻存,部分细胞直接加DMSO冻存,半年后复苏检测存活率和换液MTT分析细胞活力。
结果:室温培养的Jurkat 细胞,封闭组呈弱酸性,大部分细胞维持完整形态,少部分崩解,而未封闭组相反;常规和直接加DMSO组复苏存活率均超过50%,复苏过程中细胞活力逐渐上升,8 d后复苏成功可以传代,各检测点两组间均没有统计学差异(P>0.05)。
结论:在培养中的Jurkat细胞直接加DMSO冻存,是一种新的细胞保存方法,可以作为细胞培养技术的一个补充。
标签:二甲基亚砜;细胞培养;冻存细胞培养技术中细胞保种始终是一个不可缺少的内容,虽然经典方法解决了主要的问题,探讨更方便的方法仍然很有必要,尤其是对于细胞培养技术这一烦琐而十分常用的生物医学实验手段。
细胞作为生命的基本单位,其生长存活影响因素很多,人为培养环境中营养、pH值、温度是最为基本的条件,在这些条件改变的情况下,细胞生长存活受到影响,由于细胞是一种低级的生命现象,其耐受能力要优于其组成的高级生命体,这在体外实验中得到体现。
人为培养环境相对固定,细胞可以自我调节到某个时期的最适状态,此时细胞生长旺盛,状态良好,这也是细胞冻存的最适时间。
肿瘤微环境研究表明,碳酸氢钠口服足以增加肿瘤组织周围的pH值和抑制肿瘤的生长与局部浸润,支持了酸介导的肿瘤细胞入侵假说,在体外长期的细胞培养实验中,也发现肿瘤细胞在弱酸性环境中生长良好,这种条件理应对细胞保存提供方便,笔者对这种人为环境下的细胞冻存优势进行探讨。
1材料与方法1.1材料白血病T淋巴细胞株Jurkat细胞为本实验保存,小牛血清购于杭州四季青生物工程材料有限公司;RPMI1640培养基(含青霉素100 U/ml,链霉素100 U/mL)DMSO和MTr购于Sigma公司;无菌塑料培养瓶为上海BD Falcon产品;封口膜为美国Parafilm公司产品。
Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)冰冻保存液
Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)冰冻保存液GMP车间全封闭生产无菌过滤无热源无内毒素无支原体污染临床应用和脐带血保存冰冻血小板保存目前Cryosure-DMSO 冰冻保存液-二甲基亚砜占据了全球50%脐带血保存市场,国内市场的占有率为90%。
顶级的DMSO-德国WAK DMSO(二甲亚砜),临床应用级产品信息:WAK-DMSO-10/70 CryoSure-DMSO二甲亚砜10ml/70ml德国WAK CHEMIE公司研发的二甲亚砜(DMSO)在高级别DMSO的精制领域处于领先地位,其细胞冻存级产品在市场上拥有较高的占有率,经过六年多的客户检验和使用,质量过硬。
为了进一步提升品质,在攻克了几个难题后,生产线进行了GMP改造。
该产品为德国药监局正式批准可进行临床注射、骨髓移植、造血干细胞分离、脐带血冻存、角膜及其他器官保存等领域。
特别应用在贵重细胞和娇嫩细胞的冻存和复苏,适合广大科研工作者,尤其是从事免疫学、细胞学、生物制药和干细胞临床应用的科研人员。
目前,包括上海市血液中心和上海脐带血库在内的全国有超过一百家临床、科研单位已经使用了等国WAK公司的产品,客户还在不断增加中。
WAK公司的二甲亚砜纯度高于99.5%,且每瓶DMSO都用KOH通过光谱仪做了可染色物质的检验,本DMSO杂质含量远远低于美国药典中允许的含量,另外为了防止玻璃瓶掰开时细小碎片进入药液,其选择了造价较高的胶盖多计量药瓶。
WAK公司的二甲亚砜(DMSO)商品名叫CryoSure,是在GMP条件下生产的,无热原、无内毒素、无支原体,同时根据客户要求,做了活力实验、支原体检验。
顶级的DMSO-德国WAK DMSO(二甲亚砜),临床应用级品名:Dimethyl Sulfoxide(DMSO) CAS号:67-68-5分子式:C2H6OS 分子量:78.13域处于领先地位,其细胞冻存级产品在市场上拥有较高的占有率,经过六年多的客户检验和使用,质量过硬。
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二甲基亚砜
科技名词定义
中文名称:二甲基亚砜
英文名称:dimethyl sulfoxide;DMSO
定义:一种氢键破坏剂。
因其抗冻作用,可用于细胞的冻存;因其对大分子的变性作用,用于变性凝胶电泳等。
所属学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与技术(二级学科)
本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布
百科名片
二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide或DMSO),无色液体,重要的极性非质子溶剂。
它可与许多有机溶剂及水互溶。
二甲基亚砜具有极易渗透皮肤的特殊性质,造成使用人员感觉类似牡蛎般的味道。
基本资料
结构式
产品名称:二甲基亚砜结构简式:(CH3)2-S-O 英文名:Dimethyl sulfoxide 别名:Dimethylsulfoxide; Methyl sulfoxide; Sulfinylbis (methane); DMSO分子式:C2H6OS 分子量:78.12 CAS:登录号67-68-5 EINECS:登录号200-664-3 FEMA:登录号3875 物理化学性质密度:1.1 熔点:18.4-19.0°C 沸点:189°C 折射率:1.477-1.48 闪点:95°C 燃点:300℃粘度:1.996mPa·s(25℃)
简介
二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,具有吸湿性的可燃液体,既有高极性,高沸点,非质子,于
水混溶的特性,热稳定性好,能溶于乙醇,丙醇,苯和氯仿等大多数有机物,被誉为“万能溶剂”。
二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂,特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂,作聚氨酯合成及抽丝溶剂,作聚酰胺,聚酰亚胺和聚砜树脂的合成溶剂,以及芳烃,丁二烯抽提溶剂和合成氯氟苯胺的溶剂等。
除此之外,在医药工业中二甲基亚砜还有直接用作某些药物的原料及载体。
二甲基亚砜本身有消炎止痛,利尿,镇静等作用,亦誉为“万灵药”,常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。
DMSO是二甲基亚砜,用途广泛。
用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。
是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。
对皮肤有极强的渗透性,有助于药物向人体渗透。
也可作为农药的添加剂。
也是一种十分重要的化学试剂。
DMSO也是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,减轻自由基对细胞损害,改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。
但是研究表明,DMSO存在严重的毒性作用,与蛋白质疏水集团发生作用,导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性。
DMSO是毒性比较强的东西,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤. 最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。
吸入:高挥发浓度可能导致头痛,晕眩和镇静。
皮肤:能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。
若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应。
要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液,因其毒性不为人所知,而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤,在一定条件下会将有毒物质代入肌肤。
吸收:吸收危险性很低。
细胞冻存时作为细胞的保护剂。