Siemens Advia 系列生化仪参数详解

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Siemens Advia 系列生化仪参数详解

本详解主要针对的是市场上常见的四种西门子机型:ADVIA1200/1650/1800/2400。大致分为五个章节:简介、基本参数介绍、读点前移、前带监测、参数设置。

一、简介:

ADVIA1650是最早进入中国的拜耳生化仪,虽然师出日本,也是日本电子制造,但还是能看出拜耳的设计理念在里面。后来拜耳被西门子收购,ADVIA生化也保留了下来。

ADVIA系列生化仪都是将ISE作为标配安装,ADVIA1200生化速度是800测试每小时,ISE400测试每小时;ADVIA1650和升级版1800的生化速度都是1200测试每小时,ADVIA2400的生化速度是1800测试每小时。

Advia系列的操作控制软件都大同小异,几乎没有什么本质上的变化,所以延续性较强。加上西门子特有的流水线兼容性,使ADVIA系列的生命力变得异常顽强,在国内流水线市场里占据相当大的份额。

在ADVIA老版本的程序中,是支持四种试剂的,也就是R1、R2、R3和R4;但在后续版本中,四种试剂变为2种,只有R1和R2,这一点厂家并没有说明为什么。

所有的Advia系列,都是两个试剂盘,两个试剂针,反应盘是单盘,塑料反应杯,一根样本针。除ADVIA1200外,都有一个稀释盘和稀释样本针,稀释样本针将原始样本加入到稀释样本盘中,按照最高可达1:75的比例进行样本稀释,然后通过样本针将稀释后的样本转移到反应盘中。同样,在反应盘上也可以进行最高1:75的样本稀释,这样二者相乘,样本的稀释比例高达1:5625。稀释样本盘也是塑料杯,有自己单独的搅拌器、冲洗站。

ADVIA的试剂也可以进行稀释,所以节省试剂。但由于设计理念的关系,其孵育介质有孵育油,也就是油浴。3M生产的孵育油价格较贵,而且需要半年更换。除常规的清洗剂外,反应杯空白比色也需要单独的活化剂,加上稀释样本或试剂用的生理盐水,总体下来ADVIA 的耗材较多,而且总成本也不少。

所有的ADVIA系列都是R1+S+R2方式。反应时间可选择:3分钟、4分钟、5分钟、10分钟、15分钟、长程反应21分钟和31分钟。

ADVIA1200没有稀释样本盘,所以样本直接被转移到反应杯上。加样速度4.5秒,读点13.5秒,R1+S后读第一点,10分钟反应读点42个,R2在19点前加入。

反应杯总数231个,反应体积为80-430ul,R1和R2加入体积范围在5-300ul之间。反应时间可选择:3分钟(最后读点14)、4分钟(最后读点18)、5分钟(最后读点21)、10分钟(最后读点42)、15分钟(最后读点63)、长程反应21分钟和31分钟。

ADVIA1650和1800加样速度为3秒,读点时间是6秒,R1+S后读第一点,10分钟反应读点98个,R2在49点前加入。

反应杯总数221个,反应体积为80-300ul,R1和R2加入体积范围在15-150ul之间。

ADVIA2400加样速度为2秒,读点时间是14秒,R1+S后读第一点,10分钟反应读点41个,R2在22点前加入。

反应杯总数340个,反应体积为60-180ul,R1和R2加入体积范围在10-100ul之间。

二、基本参数介绍:

主读点:M.DET.Pm/n 也就是Main Detect point的简写,m和n是主读点区的起止点,0

子读点:S.DET.Pp/r。也就是subsidiary Detectpoint的简写,p和r是子读点区的起止点,0

读点:N,在终点法反应中,读点不小于三个,如果小于三个,系统自动前移满足三个。在速率法当中,读点不能少于六个,如果小于六个,系统自动前移满足六个。

根据反应方法,子读点可以选择也可以不选择。

u/d和U/D旗标:U和u表示上限,D和d表示下限,当超过小写u/d范围时,用大写U/D 显示。

空白:Blank(u/d U/D),这里指的是试剂空白的上下限。就是以去离子水为样本的检测,主要用来监测试剂性能,是以主读点区主波长的吸光度值为基准的,当试剂的空白吸光度超过u/d上下限范围,就会用U/D显示出来,提醒操作人员注意试剂问题。试剂空白是可以选择是否进行监测的。

Blank u/d的定义是,在下降速率当中,Blank u也就是空白上限为2ABS,Blankd为主读点吸光度的50%;在上升速率当中,Blank u也就是空白上限为最高主读点吸光度的150%,Blank d为主读点吸光度的50%。

图1 Blank u/U/d/D 示意图

修正点: E2。E2表示试剂和样本加入后的几个点的吸光度值,用来进行LIH(乳糜、黄疸、溶血等标本)或底物耗尽的监测。E2都将监测试剂空白以及样本加试剂的结果,也就是说E2=样本+R1的E2吸光度减去试剂空白的E2吸光度。

读点前移:Point-Forwarding。在速率法中,高浓度样本往往很快消耗完反应物,而底物却大量存在,速率反应很快停止。当系统监测到这种情况时,会自动将主读点前移至发生速率反应的区域。

在使用读点前移的技术时,需要增加一个主读点M.DET.P l,l

图2 读点前移示意图

图2所示中,m和n点之间出现底物耗尽现象,由于设置了l点,所以自动将读点移至l和m之间读取。同样,l和m以及m和n之间要多于6个读点。

如果判断底物耗尽,就要借助样本吸光度限制这个概念。

样本吸光度限制:Sampleu/d。Sample u或d只能选择一个,这是根据反应方向的不同而设定的,下降速率反应将只有Sample d,上升速率反应将只有Sample u。其要求监测R2加入之前和之后的数个读点的吸光度值,依然是主波长的吸光度值。R2加入之前的监测点就是我们前面说的E2,R2加入之后的监测点是主读点区的最后两个点,叫做选择点。E2和选择点进行计算:

Sample u/d=选择点的吸光度-(E2*K)

其中:E2=样本和R1的E2点吸光度值–试剂空白的E2点吸光度值

K=(R1+S)/(R1+S+R2)是体积系数。

当E2用于底物耗尽探测时,读点自动选取第7点,这样会避开LIH因素干扰。

判断依据,在下降速率反应中,当Sample d大于选择点吸光度时,认为是底物耗尽;在上升速率反应中,当Sample u小于选择点吸光度时,认为是底物耗尽。

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