显微鉴定

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三、扫描电镜等的应用
1.偏振光显微镜(偏光显微镜 ) 在偏光显微镜下,中药的鉴别要 素在色彩上表现出一定的变化, 可作为大多数植物、动物、矿物 类中药的显微鉴别依据之一。
例如:
淀粉:在偏光显微镜下呈现黑十
字现象,不同类型的淀粉其黑十 字形象不同; 草酸钙结晶:类型多样,在偏光 显微镜下呈不同的多彩颜色;
鉴定叶、花、果实、种子、全草
等类中药,可取叶片、萼片、花 冠、果皮、种皮制表面片,以观 察各部位的表面(皮)特征。 可将中药作粉末片进行观察。
可制解离组织片,以观察某些细
胞组织,如纤维、石细胞、导管 等。 对于中成药,可直接取目的物, 选用不同试液制片,观察粉末的 具有鉴别意义的组织、细胞及细 胞后含物显微特征。
有异常构造(三生构造): 何首乌根的形成层环外方有数个 复合维管束; 牛膝根有数轮同心排列的维管束 (维管束环的束间形成层不明显); 商陆根有数轮同心排列的形成层 环及其所形成的三生构造;
单子叶植物
无木栓组织,其表皮细胞外壁有
时增厚,也有表皮发育成数列根 被细胞,壁木栓化或木化; 皮层宽广,占根的大部分,内皮 层凯氏点通常明显; 中柱小,木质部束及韧皮部束数 目多,相间排列成一圈。 中央有髓。
石细胞:应注意形状、大小、细胞 壁增厚形态和程度、纹孔形状及大 小、孔沟密度等特征。 纤维:观察时注意纤维的类型、形 状、长短粗细等;注意纤维束的周 围细胞是否含结晶形成晶鞘纤维。
分泌组织:注意分泌细胞、分泌腔 (室)、分泌管(道)及乳汁管等类型、 形状、颜色、周围细胞的排列及形 态等特征。 结晶:大多为草酸钙结晶,偶有含 硅质块的,应注意结晶的类型、大 小、排列及含晶细胞的形态等。
2.
根据处方明确专属特征 中成药显微鉴定,一般根据处方, 对各组成中药粉末特征作分析比 较,选取各药具专属性的显微特 征,作为鉴别依据。
六味地黄丸是由熟地黄、山茱萸、
牡丹皮、山药、茯苓、泽泻六味 药组成,每味药都有数个显微特 征,大部分特征又有横向类别的 交叉。选取六味药各具专属性的 显微特征,这样六味药物均可鉴 别。
2、根茎类粉末中药的观察:
注意鳞茎、块茎、球茎常含多量
较大的淀粉粒,其形状、大小、 脐点、层纹以及复粒等特征是鉴 别的重要依据; 鳞茎的鳞叶表皮常可察见气孔;
单子叶植物根茎较易见到环纹导
管; 蕨类植物根茎一般只有管胞,无 导管。
(三)茎藤类中药
1.茎藤类中药的组织构造 根据维管束的类型及排列: 双子叶植物茎 单子叶植物茎
石细胞:在植物体内广泛分布,
其细胞壁在偏光显微镜下呈亮黄 色或亮橙黄色; 纤维、导管、矿物类物质:在偏 光显微镜下则呈强弱不同的色彩; 动物的骨碎片、肌纤维、结晶状 物、毛茸等也呈现出不同的偏光 特性。
2.扫描电子显微镜(扫描电镜)
(十四)中成药显微鉴别要点
中药丸散锭丹等成方制剂,大多直 接用各种粉末中药及中药浸膏配制 而成。 显微鉴定是鉴定中成药丸散锭丹 和制定品质标志的科学方法之一, 对保证中成药的质量,有一定的 科学意义和应用价值。
中药的粉末鉴定研究对于中成药的 科学鉴定有重要作用。 1.了解组方中药、剂型和制法 熟悉处方中组成药物的显微特征 是中成药鉴别的基础。 中成药的显微鉴别要比中药材粉 末鉴别复杂得多,制备方法及辅 料等会产生一定的影响和干扰。
切向纵切面:观察木射线的形状
(梭形或线状)、宽度、高度及类 型(单列或多列),同时观察导管、 木纤维等。 2、木类粉末中药的观察 以导管、韧型纤维、纤维管胞、 木薄壁细胞的形态特征以及细胞 后含物为主要鉴别点。
(六)叶类中药
1.叶类中药的组织构造 横切片观察: 表皮:要注意上、下表皮细胞的 形状、大小、外壁、气孔、角质 层厚度,以及有无内含物,特别 是毛茸的类型及其特征。
显微鉴定
显微鉴定(microscopical idenifiction)是利用显微镜来观察中药的 组织构造、细胞形状以及内含物, 描述显微特征,制定显微鉴别依据, 用以鉴定中药品种和质量的重要手 段之一。
一、显微鉴定的常用方法
显微鉴定 组织鉴定:观察药材的切片或磨 片,鉴别其组织特征,适合于完 整的药材或粉末特征相似的同属 药材的鉴别; 粉末鉴定:观察药材的粉末制片 或解离片鉴别其细胞分子及内含 物的特征,适合于破碎、粉末状 药材或中成药的鉴别。
皮层及韧皮部:有厚壁组织存在,
是为鉴定特征,要注意纤维和石 细胞的形状、大小、壁的厚度、 排列形式等。 皮类中药常有树脂道、油细胞、 乳管等分泌组织以及草酸钙结晶。
2.皮类粉末中药的观察
主要有木栓细胞、纤维、石细胞、
分泌组织及草酸钙结晶等,都有 鉴别意义。
(五)木类中药
1.木类中药的组织构造 从三个切面观察组织构造: 横切面:年轮、木射线宽度(细 胞列数)、密度,导管等; 径向纵切面:木射线的高度、长 度及细胞类型等;
粉末片:
水合氯醛透化片;
水合氯醛不透化片;
醋酸甘油片或稀甘油片或水装片。
磨片:观察矿物药,相当于固定
片。
目镜测微尺
观察细胞和后含物时,常需要测
量其直径、长短(以µ m计),作为 鉴定依据之一,测量可用目镜测 微尺进行。 先将目镜测微尺用载台测微尺标 化,计算出每一小格的µ m数,应 用时将测得物的小格数,乘以每 一小格的µ m数,即得所欲测定物 的大小。
双子叶植物根茎:有木栓组织;皮
层中有时可见根迹维管束;中柱维 管束无限外韧型;中心有髓。少数 种类有三生构造,髓部有复合维管 束。 单子叶植物根茎:外层为表皮;皮 层中有叶迹维管束;内皮层明显; 中柱中散有多数有限外韧维管束, 也有周木维管束 ( 如菖蒲 ) ;多含草 酸钙针晶束,存在于黏液细胞中。
2.果实类粉末中药的观察 外果皮细胞的形状、垂周壁的增 厚状况、角质层纹理以及非腺毛、 腺毛的有无及中果皮、内果皮的 细胞形态等特征。
(九)种子类中药
1.种子类中药的组织构造
重点观察
种皮的构造,有的种皮只有1层
细胞,多数的种皮由数种不同的 细胞组织构成;
种子的外胚乳、内胚乳或子叶细
胞的形状、细胞壁增厚状况; 所含脂肪油、糊粉粒或淀粉粒等。
2.种子类粉末中药的观察 注意种皮的表面观及断面观形态 特征; 注意种皮支持细胞、油细胞、色 素细胞的有无和形态; 有无毛茸、草酸钙结晶、淀粉粒、 分泌组织碎片等。
(十)全草类中药
大多为草本植物的地上部分,少
数为带根的全株。 全草类包括了草本植物药的各个 部位,其显微鉴定可参照以上各 类中药的鉴别特征。
单子叶植物茎:
最外层为表皮,基本组织中散生
多数有限外韧维管束,中央无髓。 裸子植物茎: 木质部主为管胞,通常无导管。
2.藤茎类粉末中药的观察
除了无叶肉组织外,其它组织一
般都可能存在。
(四)皮类中药
1.皮类中药的组织构造 皮类中药:指裸子植物和双子叶 植物的形成层以外的部分,以茎 干皮的种类较多,根皮、枝皮的 种类较少。 木栓组织:注意层数、颜色、细 胞壁的增厚程度;
(十一)菌类中药
大多以子实体或菌核的形式入药。
观察时应注意菌丝的形状、有无
分枝、颜色、大小; 团块、孢子的形态; 结晶的有无及形态、大小与类型; 应无淀粉粒和高等植物的显微特 征出现。
(十二)动物类中药
因药用部位不同,可分为: 动物体:应注意皮肤碎片细胞的 形状与色素颗粒的颜色;刚毛的 形态、大小及颜色;体壁碎片、 骨碎片等特征。
根类中药常有分泌组织,大多分
布于韧皮部,有乳管、树脂道、 油室或油管、油细胞等。 根类中药中常有各种草酸钙结晶, 如簇晶、方晶、砂晶或针晶等, 兼有簇晶与针晶或砂晶与簇晶共 生。 纤维、石细胞及淀粉粒、菊糖的 有无及其形状亦应注意。
2、根类粉末中药的观察 木栓组织:多见,注意木栓细胞 表面观的形状、颜色、壁的厚度, 有的可见木栓石细胞(如党参)。 导管:一般较粗,注意其类型、 直径、导管分子的长度及末端壁 的穿孔的形状及排列等。
鉴定者:需具有植(动)物解剖
的基本知识,掌握制片的基本技 术。 鉴定时:根据观察的对象和目的, 选择具有代表性的药材,制备不 同的显微制片,依法进行鉴别。
植物性中药
根、根茎、茎藤、皮、叶等类,
制作横切片观察,必要时制纵切 片; 果实、种子类须作横切片及纵切 片观察; 木类须观察横切、径向纵切及切 向纵切三个面。
(八)果实类中药
1.果实类中药的组织构造 观察果皮的组织特征,由子房壁 分化和增大形成的真果的果皮, 可分为: 外果皮:相当于叶的表皮,为1 列表皮细胞,需注意的问题同叶 类。
中果皮:相当于叶肉,为多列薄
壁细胞,有细小维管束散布。 内果皮:相当于叶的表皮,变异 较大,有的为1层薄壁细胞,有 的散在石细胞,有的为结晶细胞 层,也有分化为纤维层。
双子叶植物茎:
草质茎:有表皮;皮层为初生皮
Fra Baidu bibliotek
层,有的可见内皮层;中柱鞘常 分化为纤维或夹杂有石细胞;束 中形成层明显;次生韧皮部大多 成束状或板状,少数呈筒状;髓 射线较宽;髓较大。
木质茎:外层为木栓组织;皮层
多为次生皮层;中柱鞘厚壁组织 多连续成环或断续;形成层环明 显;次生韧皮部及次生木质部呈 筒状结构;射线较窄,细胞壁常 木化;髓较小。
叶肉:注意栅栏组织细胞的形状、
大小、层数及所占叶肉的比例和 分布; 叶脉:观察维管组织的形状、类 型以及周围或韧皮部外侧有无纤 维层。
2.叶的表面制片 主要观察表皮细胞、气孔及各种 毛茸的全形。 注意上、下表皮细胞的形状,垂 周壁及有无纹孔,角质层纹理, 气孔的类型及副卫细胞数。
3.
切片类型
横切片或纵切片 切片方法 徒手切片:10~20µ m,最为简便、 快速,较为常用。 石蜡切片:便于教学用。 滑走切片:有专用机器切制。 冰冻切片:宜于科研,不利于教 学,无法染色。
解离组织片:可用氢氧化钾法,
使细胞间质溶解,细胞分离后观 察目的物。 表面片:叶、花、果实、种皮等 多用,可观察各部位的表皮特征。
二、显微鉴定要点
(一)根类中药 1、根类中药的组织构造 双子叶植物: 多为次生构造,表层为木栓组织; 皮层一般已不存在;栓内层发达 呈皮层样,称次生皮层; 韧皮部较发达;形成层环多明显;
木质部由导管、管胞、木纤维、
木薄璧细胞及木射线组成; 中央大多无髓。 少数为初生构造,皮层宽,中柱 小,木质部束及韧皮部束数目少, 相间排列,初生木质部呈星芒状, 一般无髓。
淀粉粒:一般较小,应注意淀粉粒 的多少、形状、类型、大小、脐点 形状及位置、层纹等特征。
(二)根茎类中药
1、根茎类中药的组织构造
根据中柱、维管束的类型,区别
其为蕨类植物、双子叶植物或单 子叶植物的根茎。 蕨类植物根茎:外层为厚壁性的 表皮及下皮细胞,基本组织较发 达。中柱的类型有:原生中柱、 双韧管状中柱及网状中柱等。
分泌物、病理产物:注意团块的
颜色及其包埋物的性质特征,表 皮脱落组织,毛茸及其它细胞的 形状、大小、颜色等特征,如麝 香、牛黄等。
角甲类: 注意碎块的形状、颜色、横断面
和纵断面观的形态特征及色素颗 粒颜色,如羚羊角等。
(十三)矿物类中药
主要应注意: 晶体的大小、直径或长径;晶形 的棱角、锐角或钝角; 色泽、透明度、表面纹理及方向、 光洁度; 偏光显微镜下的特征,如朱砂、 石膏等。
叶类粉末中药的观察 与叶的表面制片基本一致,但毛 茸多碎断,粉末中还可见到叶片 的横断面及晶体。
(七)花类中药
1.花类中药的显微鉴定 根据不同的中药,将苞片、花萼、 花冠、雄蕊或雌蕊等分别作表面 制片,或将完整的花作表面制片 观察。 苞片、花萼的构造,与叶相似。
2.花类粉末中药的观察 花粉粒:是鉴别花类中药的主要 特征,注意其形状、大小、萌发 孔形态、外壁构造及纹饰(理)等 特征。 花粉囊内壁细胞,毛茸; 注意草酸钙结晶、分泌组织及色 素细胞等。
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