【全国三卷地区适用】精品讲练含答案：选修一 微生物的筛选、鉴定、分离与计数
2021新高考生物人教版一轮复习讲义：选择性必修部分 模块3 第1单元 第2讲 微生物的培养和应用 (含答案)
第2讲微生物的培养和应用考纲研读备考定位考纲要求核心素养1.进行微生物的分离和培养。
2.测定某种微生物的数量。
3.研究培养基对微生物的选择作用。
4.探讨微生物的利用。
5.活动：用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。
6.活动：分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数。
1.理性思维——分析培养基的成分及其作用；比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同。
2.科学探究——设计实验探究微生物培养的条件。
3.社会责任——关注有害微生物的控制和宣传健康生活方式。
基础梳理1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养构成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。
2．无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)关键：防止外来杂菌的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线)思维辨析易错整合，判断正误。
(1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(×)(2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(√)(3)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×)(4)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(√)延伸探究1．(教材选修1P16旁栏思考题)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌？如果需要，请选择合适的方法：(1)培养细菌用的培养基与培养皿(2)玻璃棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手[提示](1)、(2)需要灭菌；方法：(1)高压蒸汽灭菌。
(2)干热灭菌。
(3)需要消毒。
方法：化学药物消毒。
2．(教材选修1P17“倒平板操作讨论”)(1)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？(2)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？[提示](1)通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
高中生物(新人教版)选择性必修三课后习题：微生物的选择培养和计数(课后习题)【含答案及解析】
微生物的选择培养和计数必备知识基础练1.研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使其不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料,还能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料,分解产生燃料物质。
若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在()A.不含氮源的培养基上B.含有蛋白胨的固体培养基上C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上D.不含营养要素的培养基上,改造后的大肠杆菌“能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料,分解产生燃料物质”,因此若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上。
2.用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验,是在某病原菌均匀分布的平板上,铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。
图示为培养的结果,其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。
下列分析正确的是()A.在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌B.未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异C.形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感D.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响,A项错误;病原菌发生抗性变异在与抗生素接触之前,B项错误;微生物对药物较敏感形成的抑菌圈应较大,C项错误;纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后,便不断向纸片周围区域扩散,不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响,D项正确。
3.微生物代谢过程中产生的C O32-,可与环境中的Ca2+反应形成碳酸钙沉淀,这种现象称为微生物诱导碳酸钙沉淀(MICP)。
MICP形成的机制多种多样,通过细菌分解尿素引起碳酸钙沉淀是最常见的方式。
下列相关说法正确的是()A.尿素只有被土壤中的细菌分解成氨后,才能被植物利用B.通常用以尿素为唯一碳源的培养基筛选分解尿素的细菌C.在培养基中加入酚酞指示剂,可以初步鉴定尿素分解菌D.尿素分解菌可以分解碳酸钙质碎石,有效避免土壤板结,只有被土壤中的细菌分解成氨气,氨气再转化为N O3-、N H4+后,才能被植物吸收利用,A项正确;通常用以尿素为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的细菌,B项错误;在培养基中加入酚红指示剂,通过指示剂是否变红可以初步鉴定尿素分解菌,C项错误;尿素分解菌分解尿素可引起碳酸钙沉淀,而不能分解碳酸钙质碎石,D项错误。
新课标版生物选修一（课件）专题三卷高考调研精讲精练
新课标版⽣物选修⼀（课件）专题三卷⾼考调研精讲精练专题检测卷(三)(满分：100分时间：60分钟)⼀、选择题(每⼩题2分,共40分)1.下列有关植物细胞与组织培养的叙述,错误的是( )A.花药、胚不能作为组织培养的材料B.植物细胞具有全能性C.外植体是指离体的⽤于培养的植物组织或器官D.外植体可诱导形成愈伤组织答案A解析花药、胚可以作为组织培养的材料,A项错误；植物细胞含有该个体全部的遗传物质,具有发育成完整个体的潜能,即植物细胞具有全能性,B项正确；外植体是指离体的⽤于培养的植物组织或器官,C 项正确；外植体经脱分化可诱导形成愈伤组织,D项正确。
2.下列不能⽤于植物组织培养材料消毒的化学试剂是( )A.酒精B.次氯酸钙溶液C.氯化钙溶液D.氯化汞溶液答案C解析体积分数为70%的酒精、质量分数为0.1%的氯化汞溶液可⽤于外植体的消毒。
在花药培养时,还可⽤质量分数为1%的次氯酸钙溶液对花蕾进⾏消毒。
氯化钙溶液不能⽤作消毒剂。
3.如图为菊花的组织培养流程图。
据图分析,下列说法正确的是( )A.配制好的培养基在灭菌后要及时分装避免冷却凝固B.图中①②③三种培养基的差异主要表现在植物激素含量⽅⾯C.整个培养过程中需要适宜的温度和不间断的光照D.长出丛芽和⽣根的过程中细胞的遗传物质会发⽣改变答案B解析配制好的培养基应该先分装,后灭菌,A项错误；菊花的组织培养过程中不需要提供持续的光照,⽽是每天⽤⽇光灯光照12 h,C项错误；长出丛芽和⽣根的过程是再分化的过程,是基因选择性表达的结果,该过程中细胞的遗传物质不发⽣改变,D项错误。
4.下图所⽰为植物组织培养过程,据图分析下列叙述正确的是( )A.⑤植株根尖细胞的全能性⽐①植株根尖细胞的全能性强B.②试管的培养基中含有植物⽣长调节剂,不含有有机物C.③试管中的细胞能进⾏减数分裂D.调节④培养基中植物⽣长调节剂的⽐例可诱导产⽣不同的植物器官答案D解析⑤植株根尖细胞的全能性与①植株根尖细胞相同,A项错误；②试管的培养基中含有植物⽣长调节剂和有机物等,B项错误；③试管中的细胞能进⾏的分裂⽅式是有丝分裂,C项错误；调节④培养基中植物⽣长调节剂的⽐例,可诱导产⽣根和芽,D项正确。
金版教程高考总复习生物(经典版)复习讲义选修1第十一单元第40讲
第40讲微生物的培养与应用[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用知识自主梳理一、微生物的实验室培养1.培养基(1)概念：人们按照微生物对□01营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的□02营养基质。
(2)营养成分：水、□03碳源、□04氮源、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对□05pH、特殊营养物质以及□06氧气的要求。
(3)培养基的分类①按物理状态分类②按化学成分分类③按功能分类[深入思考]为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？提示在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。
2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中,所有防止□17杂菌污染的方法。
(2)关键：防止□18外来杂菌的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线)答案①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤19称量→溶化→□20灭菌→□21倒平板计算→□②倒平板的方法及注意事项a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：□22丙→乙→甲→丁。
b.乙中的灭菌方法是□23灼烧灭菌。
c.丁中的操作需要等待□24平板冷却凝固才能进行。
[深入思考](1)倒平板操作为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(2)平板冷凝后,为什么要将平板倒置？提示平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
(2)纯化大肠杆菌的两种方法1)平板划线法25接种环在琼脂固体培养基表面□26连续划线的操作,将聚集的①概念：是通过□菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(完整版)高中生物选修一试题(含答案)
人教版高中生物选修一练习题（含答案）第I卷（选择题）1．在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时,所用微生物的代谢类型分别是A. 兼性厌氧型、需氧型、厌氧型、需氧型B. 厌氧型、厌氧型、厌氧型、需氧型C. 兼性厌氧型、需氧型、需氧型、厌氧型D. 厌氧型、兼性厌氧型、需氧型、厌氧型2．下列关于“DNA粗提取与鉴定”的实验，叙述正确的是A. 酵母、菜花和猪的红细胞均可作为提取DNA的材料B. DNA易溶于氣化钠溶液，不溶于酒精溶液C. 向切碎的植物组织中加入适量蒸馏水，可获得含大量DNA的溶液D. 将提取的丝状物溶解后，加入二苯胺试剂后水浴呈蓝色3．下列有关生物技术实践应用的叙述，正确的是A. 固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显B. 牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，可用高压蒸汽灭菌法灭菌C. 相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D. 向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精，可以获得无杂质的DNA4．下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述中，正确的是A. 一般含糖量较高的水果可用来制作果酒B. 果醋发酵包括有氧发酵和无氧发酵C. 制作腐乳时，应防止毛霉以外的其它微生物生长D. 都是利用微生物胞内酶催化获得最终产品5．果胶酶能使果胶水解，使榨取果汁变得更容易，提高水果的出汁率。
某同学为探究温度对果胶酶活性的影响，在不同温度下，将等量的果胶酶加入到等量的苹果泥中，在反应同样时间后，再将反应液过滤同样时间，用量筒测出滤出苹果汁的体积。
下列能正确反映实验结果的曲线是6．相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个（）【注：图中大圆点代表相对分子质量大的蛋白质】7．下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析，错误的是（）A．干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化B．配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊C．若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目过少D．凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡时间的长短，不影响发酵效果8．如图所示的固定化方式中，适宜固定化酶的方法是（）A．①②③ B．①② C．②③ D．①③9．果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是（）A．葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵B．在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2C．果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃D．在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢10．下列不属于纤维素酶组分的是A．C1酶B．Cx酶C．葡萄糖苷酶D．半乳糖苷酶11．能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是A．C02和N2B．葡萄糖和NH3C．C02和尿素D．葡萄糖和尿素12．下列不属于菌落特征的是A．菌落的形状B．有无荚膜C．菌落的大小D．隆起程度13．变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面有一层膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝B．醋酸菌、毛霉菌丝、毛霉菌丝C．醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌14．从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→发酵培养B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落15．下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，错误的是A．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B．对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验C．纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量测定D．纤维素酶是一种复合酶16．含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。
高中生物 第1章 第1节 微生物的分离和纯培养检测(含解析)中图版高中选修1生物试题
第一节微生物的分离和纯培养一、培养基1．含义由于微生物代谢方式的不同，因而对营养物质的需求也是有差异的。
根据微生物生长繁殖和代谢的需要，将各种营养物质混合在一起而配制的营养基质。
2．平板培养基将溶化后的固体培养基基质倒入无菌培养皿中，冷却凝固后制成的培养基。
二、无菌技术1．目的和要求在微生物的分离和纯培养中，一定不能有外来的污染性杂菌，所以必须采用无菌技术进行操作。
因此，在实验过程中，要对所用的器材、培养基进行严格的灭菌，对工作场所要进行消毒。
2．灭菌和消毒(1)灭菌：用强烈的理化因素杀死环境或物体内外所有的微生物，常用的方法是高温灭菌法。
(2)消毒：用相对温和的理化方法杀死环境或物体上的病原微生物和有害微生物的营养细胞，常用的方法是射线消毒法和化学药剂消毒法。
三、接种技术1．含义把相应的研究对象移入培养基中的过程。
2．分类在平板培养基上接种的方法有平板划线法、稀释平板涂布法、稀释混合平板法等。
预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中问题1问题2问题3问题4一、微生物的概念及特点 1．概念微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。
2．特点微生物⎩⎨⎧小个体微小⎩⎪⎨⎪⎧ μm 微米级：光学显微镜下可见细胞nm 纳米级：电子显微镜下可见细胞器、病毒微生物⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧ 简构造简单⎩⎪⎨⎪⎧单细胞简单多细胞非细胞即“分子生物”低进化地位低⎩⎪⎨⎪⎧原核类：细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、蓝细菌真核类：真菌酵母菌、霉菌、原生生物非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒二、微生物的营养及功能微生物的化学组成成分与其他生物大体相同，也是由C 、H 、O 、N 、P 、S 等元素组成，其中C 、H 、O 、N 占细胞干重的90%以上，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物。
这些化合物可归纳成碳源、氮源、生长因子、无机盐和水这五大类营养要素。
营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质无机化合物：CO 2、NaHCO 3等；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定外界摄入无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素，包括大量元素细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂无机化合物①微生物最常利用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册 第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数含答案
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第1章第2节第2课时微生物的选择培养和计数含答案第2课时微生物的选择培养和计数[学习目标] 1.阐明微生物选择培养的原理。
2.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。
一、选择培养基、微生物的选择培养和数量测定1．选择培养基(1)自然界中目的菌的筛选①实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出的水生栖热菌中提取出来的。
②依据：水生栖热菌能在70～80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
(2)实验室中目的菌的筛选①原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
②方法：利用选择培养基分离。
选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
2．微生物的选择培养(1)方法：对样品进行充分稀释，然后将菌液涂布到制备好的选择培养基上。
(2)稀释涂布平板法的操作过程①系列稀释操作a．编号为1×102～1×107试管中分别盛有9 mL无菌水。
b．将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。
c．取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
②涂布平板操作取菌液：取0.1 mL 菌液，滴加到培养基表面|↓涂布器消毒：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中|↓涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后， 再进行涂布|↓涂布平板：用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
涂布时可转动培养皿，使涂布均匀(3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒温培养箱中培养1～2 d 。
3．微生物的数量测定 (1)稀释涂布平板法①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计数原则：一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册 第1章 本章知识网络含答案
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第1章本章知识网络含答案本章知识网络第1节传统发酵技术的应用[学习目标] 1.简述传统发酵技术的特点，说出常见的传统发酵食品。
2.概述微生物发酵的原理。
3.尝试制作泡菜、果酒和果醋，说出传统发酵技术应用的优点与不足。
一、发酵与传统发酵技术1．发酵的概念发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。
2．腐乳的制作(1)参与的微生物：酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。
(2)腐乳的特点：豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收，便于保存。
3．传统发酵技术(1)概念：直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。
(2)类型：传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的。
(3)发酵产品：利用传统发酵技术制作的食品有腐乳、酱、酱油、醋、泡菜和豆豉等。
判断正误(1)发酵是指人们利用微生物，在缺氧的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物()(2)毛霉主要通过产生蛋白酶分解蛋白质参与腐乳发酵()(3)腐乳制作利用了毛霉等真菌的有氧呼吸()答案(1)×(2)√(3)√解析(1)微生物的细胞呼吸也称为发酵，人们利用微生物的发酵，在适宜的条件下(不一定是缺氧条件)，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物。
任务一：建构发酵的概念请根据资料回答下列问题：资料一夏禹时期，已有了关于杜康造秫酒的传说。
我国酿造白酒的工艺在世界上独树一帜，白酒一般是以谷物为原料，加酒曲发酵而成的。
资料二1857年，法国的微生物学家巴斯德通过实验证明，酒精发酵是由活的酵母菌引起的。
资料三酒曲是用来酿酒的一种原料，又称块曲或砖曲，以大麦、小麦、豌豆等为原料，经过粉碎，加水混捏，压成曲醅，形似砖块，大小不等，让自然界各种微生物在上面生长而制成。
2022届高考生物一轮复习1微生物的培养和利用课堂探究练含解析新人教版选修1
微生物的培养和利用考点一微生物的实验室培养(国考5年8考)(全国卷：2020全国卷Ⅰ；2019全国卷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；2018全国卷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；2016全国卷Ⅲ)【任务驱动探究突破】任务1 据某微生物培养基的配方表回答如下问题(1)于______培养基，因为没有碳源，只有______微生物才能生长(利用空气中的CO2)。
(2)此培养基含有微生物所需的营养成分包括水、______和______三类，假如参加氨基酸，如此它可充当的营养成分包括______、______和生长因子。
(3)假如要观察微生物的菌落特征，培养基中应添加的成分是凝固剂(琼脂)。
(4)假如用该培养基来别离尿素分解菌，应除去表中______成分(填表中序号)，参加______和不含氮元素的有机物。
任务2 据两种接种方法产生的培养效果图完成如下问题(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是______________、____________。
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，其最可能的原因是什么？应当怎样操作才可防止此种现象？任务3 大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算→→溶化→→②倒平板的操作方法与须知事项a．写出上图正确的倒平板操作流程：____________________________________。
b．甲、乙、丙中的灭菌方法是________。
c．丁中的操作需要等待________________后才能进展。
(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤是________。
③常用的微生物接种方法有两种a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基外表________的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表。
b．稀释涂布平板法：是将菌液进展一系列的________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的外表，进展培养。
高考生物考前回归教材选修一(含答案)
高三生物选修一1.1 果酒和果醋的制作1. 葡萄酒呈现深红色，原因是。
2.变酸的酒表面观察到的菌膜是形成的。
3.制作果酒与果醋的发酵瓶的清洗方法是。
4.发酵时应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？，原因是。
5.应该从哪些方面防止发酵液被污染？〔答3点〕。
6.在果醋制作时，要向发酵瓶通气的原因。
7.检验果汁发酵后是否有酒精生成所用的试剂是，原理是。
8.葡萄汁装入发酵瓶时，要留有1/3的空间的原因是。
9.在果酒制作时，应该适时排气，原因是。
10.果酒果醋的发酵装置中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接的原因是。
11.在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是菌。
12.制果酒时，前期要提供一定的氧气的原因是。
1.2 腐乳的制作1.腐乳的制作中起主要作用的微生物是，它能使豆腐发酵成腐乳的原理是。
2.含水量为的豆腐适合用来制作腐乳，原因是。
3.腌制腐乳时，要随着豆腐层的加高而增加盐的用量，并且在接近瓶口的表面要将盐铺厚一些，原因是。
4.腐乳制作过程中，加盐腌制的原因是。
5.卤汤是由酒与香辛料配制而成的，加酒的作用是。
加香辛料的作用是。
6.卤汤中酒的含量应控制在，原因是。
7.用盐腌制时，要注意控制盐的用量，原因是。
1.3泡菜的制作1.日常生活中要多吃新鲜蔬菜，不宜多吃腌制蔬菜，原因是。
2.泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜形成的原因是。
3.结合亚硝酸盐含量的变化趋势，分析在泡菜的腌制过程中，时候食用最好，原因是。
4.在泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量，原因是。
6.向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水的原因是。
2.1 微生物的实验室培养1.平板冷凝后，要将平板倒置的原因是。
2.平板划线操作的第一步、每次划线前、操作结束后均要灼烧接种环，其原因分别是。
3.制备固体培养基操作中，溶化时需要不断用玻棒搅拌，原因是。
4.在倒平板过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部分，这个平板还能用来培养微生物吗？，原因是。
最新微生物的培养和分离选修1答案
微生物的培养和分离选修1答案微生物的营养和培养（人教版选修1 ）一微生物的实验室培养（p14-20）1．营养物质供其生长繁殖的营养基质液体培养基固体培养基是否加入琼脂选择培养基鉴别培养基选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长2．固体培养基菌落种群3．碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。
硝酸盐等无机氮源，CO2, 糖类等有机物，N2, CO2, NH3, 糖类等有机物, 硝酸盐等无机氮源以及含氮的有机物。
4．5.防止外来杂菌入侵，（1）空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒（酒精擦拭、氯气消毒）、紫外线消毒、石炭酸或煤酚皂溶液消毒等。
（2）器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内所有的微生物，包括芽孢和孢子。
灼烧灭菌（接种环、接种针等）、干热灭菌（玻璃器皿和金属用具等）、高压蒸汽灭菌等（培养基、培养皿等），高压蒸汽灭菌法。
（3）酒精灯火焰，灼烧灭菌，接种环、接种针等6．3）pH 4）灭菌，高压蒸汽灭菌法5）倒平板，酒精灯火焰，倒置（即皿盖在下，皿底在上），平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
7平板划线和稀释涂布平板法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经过数次划线后培养可以分离得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，接种环1）操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。
2019-2017年3年全国123卷高考生物试题分类汇编专题16选修一生物技术实践含答案解析
2019-2017 高考生物全国123卷试题选修一汇编（试题答案第5-14 页）1. （2019?全国1卷.11 ）已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。
某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。
I号培养基：在牛肉膏蛋白月东培养基中加入X （5g/L ）。
n号培养基：氯化钠（5g/L）,硝酸镂（3g/L ）,其他无机盐（适量），X （15g/L）。
出号培养基：氯化钠（5g/L）,硝酸镂（3g/L ）,其他无机盐（适量）X （45g/L）。
回答下列问题。
（1）在I号培养基中，为微生物提供氨源的是。
n、出号培养基为微生物提供碳源的有机物是_________（2）若将土壤悬浮液种在n号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_________ ，其原因是_________ 。
（3） n号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是_______________ 。
（4）假设从出号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供__________ 和________ 。
2. （2019?全国2卷.11 ）物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。
W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。
某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。
回答下列问题。
（1 ）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是__________ 。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。
如果要得到目标菌，应该选择_________ 菌落进一步纯化，选择的依据是(3) 土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。
若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即(4)该小组将人工合成的一段DNA专入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W勺酶(酶E)。
2019-2020学年高中生物1.1微生物的分离和培养习题含解析苏教版选修1
第一节 微生物的分离和培养1.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的微生物营养的描述中,不正确的是( )A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一解析:以CO2为唯一碳源可知该微生物为自养型微生物,可以利用CO2合成有机物,该无机碳源不能为微生物提供能量。
答案:B2.右图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1→2→3→4→5。
下列操作方法正确的是( )A.只有操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1→2→3→4→5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌解析:本题考查微生物培养过程中常用的方法之一,即平板划线法。
操作的前后都要对接种环进行灭菌;划线操作须在火焰旁进行,而不是在火焰上;所有的划线区都有可能得到所需菌落,只是5区的菌落纯度相对较高。
答案:D3.不同培养基的具体配方不同,但一般都含有( )A.碳源、磷酸盐和维生素B.氮源和维生素C.水、碳源、氮源和无机盐D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析:培养基中的水、无机盐、碳源和氮源是微生物生长繁殖所必需的营养物质。
答案:C4.下列关于斜面接种操作正确的是( )A.使用已灭菌的接种环、培养皿,在操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管,需通过火焰,取出菌种后,不需通过火焰C.将带有菌种的接种环迅速伸入待接种的试管中,划3~5条平行线即可D.将接种过菌种的试管,放在恒温箱中培养答案:D5.倒平板时需将培养基冷却至( )A.室温B.0 ℃左右C.50 ℃左右D.100 ℃左右答案:C6.检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是( )A.将未接种的培养基放在实验桌上培养B.将未接种的培养基放在窗台上培养C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养解析:检验培养基有没有被杂菌污染,可选取未接种的培养基与接种样品的培养基同时在恒温箱中培养。
高中生物选修一全国卷真题汇总及答案
39．（2016年全国卷3）[生物——选修1：生物技术实践]（15分）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。
分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙。
回答下列问题：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_______________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。
分离纯化时应挑选出______________的菌落作为候选菌。
（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。
39．（2016全国卷2）[生物——选修1：生物技术实践]（15分）苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。
图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________。
（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在_____________条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度__________（填“低于”或“高于”）第二阶段。
（4）醋酸杆菌属于核生物，其细胞结构中（填“含有”或“不含有”）线粒体。
39．（2016全国卷1）[生物——选修1：生物技术实践]（15分）空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
高中生物选择性必修三 练透试卷 第1章 重点突破练(一)
重点突破练(一)题组一传统发酵技术1．下列关于传统发酵的叙述，合理的是()A．每日从泡菜坛中取少量泡菜品尝，以确定自制泡菜是否可以食用B．利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒C．将葡萄汁煮沸冷却后灌入约2/3瓶，密闭发酵即可自制葡萄酒D．腐乳制作过程中需要添加蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等2．北魏时期《齐民要术》中提到制作泡菜时应用酒擦拭泡菜坛，并向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”后密封。
下列说法错误的是()A．用酒擦拭泡菜坛的目的是消毒B．加入“陈泡菜水”的目的是提供菌种C．密封发酵一段时间后泡菜变酸可能是由于坛中混入的醋酸菌发酵产生了醋酸D．制作泡菜的过程中蔬菜中有机物的干重减少而种类增加3．(2023·河北邯郸高二期末)蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。
如图是以新鲜蓝莓为原料制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。
下列叙述错误的是()A．在制作蓝莓酒时，温度应该控制在18～30 ℃B．若氧气、糖源充足，蓝莓汁可直接经过程③发酵为蓝莓醋C．若处理不当，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌可将糖分解为乙酸D．在酸性条件下用重铬酸钾溶液检测，若果汁出现灰绿色说明有蓝莓酒产生4．(2023·江苏徐州高二检测)如图1为果酒、果醋制作装置，图2为果酒发酵中酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线。
下列叙述正确的是()A．制作果酒的整个过程中，夹子①②均关闭，制作果醋时，夹子①②均打开B．制作果酒时应将图1装置放在18～30 ℃环境中，制作果醋时应将温度提高至30～35 ℃C．图2曲线a～b段，瓶内有大量二氧化碳和水产生，导致瓶内气压增大D．随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的产生速率先上升后趋于稳定题组二微生物的基本培养技术5．(2023·贵州贵阳高二期末)以下是对无菌技术几个方面的叙述，其中正确的是() A．紫外线照射前，适量喷洒苯酚等消毒液，可以加强消毒效果B．牛奶的消毒常用紫外线消毒法C．为了防止污染，接种环经灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落D．在微生物接种的实验中，用体积分数为95%的酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒6.(2023·福建福州高二期中)如图是利用平板划线法在培养基上获得微生物单菌落的实验操作，下列叙述错误的是()A．划线操作时，接种环只蘸取一次菌液B．不能将第④区域的划线和第①区域的相连C．观察菌落特征的最佳区域是①区域D．在②～④区域划线前后均要灼烧接种环7．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是()A．制备培养基的过程是先灭菌再调pHB．操作步骤②③④时只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌C．完成上述纯化过程，接种环共需灼烧处理6次D．接种结束后，将平板倒置培养，在皿盖上标注菌种及接种日期等信息8．如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红—美蓝琼脂蒸馏水含量10 g 10 g 2 g 0.46 g 适量 1 000 mL注：伊红—美蓝可用于检测大肠杆菌，使菌落染成深紫色，带金属光泽。
2023-2024学年高中生物浙科版选修1第1部分 微生物的利用单元测试(含答案解析)
2023-2024学年浙科版高中生物单元测试班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________一、选择题（本大题共计14小题每题3分共计42分）1.关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是（）A. 培养基应以尿素为唯一氮源该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B. 选择菌落数在10~300间的所有平板进行计数以平均数为实验结果C. 对10mL土样稀释\ 10^6倍后取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验测得的菌落数分别为18、234、276 则该10mL土样中分解尿素的细菌数为\ 2.55times10^8个D. 应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰提高可信度【答案】D【解析】A．分离土壤中分解尿素的细菌的培养基应以尿素为唯一氮源硝化细菌是自养生物其碳源为二氧化碳故二者利用的碳源不同 A错误B．一般选择菌落数在30~300间的平板进行计数 B错误C．对10mL土样稀释 10^6倍后取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验测得的菌落数分别为18、234、276 则该10mL土样中分解尿素的细菌数为（234+276）/2\div0.1\times10\times10^6=2.55\times10^10（个） C错误D．分离微生物时需要设置不接种的培养基与实验组一起培养作空白对照设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰 D正确故选D2.某兴趣小组在校园土壤中取样进行“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验小明从稀释倍数为 10^6培养基中筛选出约120个菌落而其他同学只筛选出约40个菌落下列有关叙述错误的是（）A. 小明出现这种结果的可能原因是和其他同学取样的土壤不同B. 小明出现这种结果的可能原因是培养基中混入了其他含氮物质C. 要证明培养基是否受到污染可将小明配制的培养基不加土样进行培养D. 在牛肉膏蛋白胨培养基中加入酚红指示剂可初步鉴定尿素分解菌【答案】D【解析】解 A.小明筛选出的菌落数明显比其他同学多出现这种结果的可能原因是小明和其他同学取样的土壤不同也有可能是培养基混入其他氮源或培养基被污染 A正确B.小明出现这种结果的可能原因是培养基中混入了其他含氮物质 B正确C.要证明培养基是否受到污染可将小明配制的培养基不加土样进行培养即进行空白对照 C正确D.在尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂若培养基变红色可初步鉴定尿素分解菌 D错误故选 D3.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌下列实验操作中不正确的是（）A. 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B. 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C. 可将未接种的培养基在相同条件下作为对照进行培养D. 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌【答案】D【解析】解 A、为防止土壤浸出液浓度过高不能获得单菌落要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 A正确B、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板防止偶然因素对实验结果的影响 B正确C 、可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照以判断培养基灭菌是否彻底 C正确D、可筛选出分解尿素的细菌的培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基 D错误．故选 D．4.为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）．下列关于培养基甲和乙是否能用于分离和鉴别纤维素分解菌说法正确的是（）注“+”表示有“-”表示无．A. 培养基甲能培养基乙不能B. 培养基甲不能培养基乙能C. 培养基甲和乙都能D. 培养基甲和乙都不能【答案】D【解析】解 A、维素分解菌分离和鉴别培养基属于固体培养基而培养基甲中没有琼脂是液体培养基 A错误B、维素分解菌分离和鉴别培养基属于固体培养基而乙的碳源为淀粉其他能够利用淀粉为体液的微生物也能在该培养基上生存没有选择作用 B错误C 、根据A、B 选项可知培养基甲和乙都不能 C错误D、根据A、B 选项可知培养基甲和乙都不能 D正确．故选 D．5.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图据图分析不正确的是（）A. 3号试管的稀释倍数为\ 10^4倍B. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×\ 10^7个C. 4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低【答案】B【解析】解 A.从土壤到3号试管中的溶液共稀释了4次因此3号试管溶液的稀释倍数为 10^4倍 A正确B.5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3× 10^5×10=1.7× 10^8个 B错误C.5号试管中稀释液进行平板培养稀释倍数比4号的低10倍如果稀释倍数适当得到的菌落平均数可能是5号的10倍 C正确D.稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低 D正确故选 B6.在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中为判断是否起到了分离效果提高实验结果的可信度需要精心设置对照对照组的设置方式为（）A. 牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液B. 牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水C. 筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种D. 筛选分解尿素细菌的选择培养基上接种无菌水【答案】A【解析】解本实验中目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照接种相同土壤样液观察菌落的多少通过两种培养基上菌落的多少可判断选择培养基是否起到了分离效果故选 A7.下图表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方关于其成分的叙述错误的是（）鉴别纤维素分解菌的培养基配方将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mLA. 琼脂属于凝固剂该培养基为固体培养基B. CMC-Na提供氮源C. 酵母膏和土豆汁中含有生长因子D. 蒸馏水使用前无需灭菌【答案】B【解析】解 A.培养基成分中含有凝固剂（琼脂）说明该培养基是固体培养基 A正确B.CMC-Na提供碳源 B错误C.酵母膏和土豆汁中含有生长因子 C正确D.蒸馏水使用前无需灭菌 D正确故选 B8.下列关于纤维素和纤维素酶的说法正确的是（）A. 纤维素中不含能量且人和其他动物无消化纤维素的酶因此无法作为能源物质B. 纤维素是一种由葡萄糖缩合而成的还原性多糖C. 纤维素酶是一种复合酶至少包括\ C_1酶、\ C_x酶和葡萄糖苷酶三种D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖【答案】C【解析】A．某些动物体内有消化纤维素的微生物因此可作为能源物质 A错误B．纤维素是一种由葡萄糖连接而成的多糖但是不具有还原性 B错误C．纤维素酶是一种复合酶至少包括 C_1酶、 C_x酶和葡萄糖苷酶三种 C正确D．葡萄糖苷酶可把纤维二糖分解成葡萄糖 D错误故选C9.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图．据图分析正确的是（）A. 3号试管中的菌落稀释倍数为10^3倍B. 4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号的10倍C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7times 10^9个D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高【答案】B【解析】解 A、3号试管是稀释10^4倍 A错误B、4号中稀释液进行平板培养稀释倍数比5号的低10倍如果稀释倍数适当得到的菌落平均数可能是5号的10倍 B正确C 、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+ 175+ 167)\div 3\times 10^5\times 10= 1.7\times 10^8个 C错误D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低 D错误．故选 B．10.如图表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方关于其成分的叙述错误的是（）A. 琼脂属于多糖但不提供碳源B. CMC-Na提供氮源C. 酵母膏和土豆汁中含有有机物D. 蒸馏水使用前无需灭菌【答案】B【解析】解 A、琼脂属于多糖但不提供碳源作为固体培养基中的凝固剂 A正确B、CMC-Na是天然纤维素经化学改性后得到的纤维素衍生物是纤维素的羧甲基醚化物不含氮元素 B错误C 、酵母膏和土豆汁中含有有机物 C正确D、蒸馏水使用前无需灭菌 D正确．故选 B．11.下列培养基成分中能用于分离分解尿素的细菌的是（）A. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、牛肉膏、尿素、琼脂、水B. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、琼脂、水C. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、尿素、琼脂、水D. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水【答案】C【解析】解根据题意分析可知分解尿素的细菌需要KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4\cdot 7H_2O等无机盐还要水、碳源和氮源葡萄糖可以为其提供碳源但是其氮源只能是尿素．故选 C．12.下面对“从土壤中分离分解尿素的细菌过程中灭菌”的理解不正确的是（）A. 防止杂菌污染B. 消灭全部微生物C. 稀释土壤溶液的过程必须在火焰旁操作D. 灭菌必须在接种前进行【答案】B【解析】解 A、防止杂菌污染是灭菌的目的因为发酵所用的菌种大多是单一纯种整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌） A正确B、不能消灭所有的微生物因为壤中分离分解尿素的细菌也是微生物 B错误C 、为了防止杂菌污染稀释土壤溶液的过程必须在火焰旁操作 C正确D、发酵所用的微生物是在灭菌后接种的如果在接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死 D 正确．故选 B．13.下列关于分解尿素的细菌说法正确的是（）A. 以尿素作为唯一碳源B. 能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶C. 环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D. 以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红【答案】A【解析】解 A、分离分解尿素的细菌时用尿素作为唯一氮源 A正确B、能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶 B错误C 、该细菌产生脲酶是受基因控制的可以对环境中含有的大量的尿素进行分解 C错误D、分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨氨会使培养基的碱性增强．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌若指示剂变红可确定该种细菌能够分解尿素 D错误．故选 A．14.关于分离土壤尿素分解菌并计数的叙述正确的是（）A. 该实验中采集的土样经高温灭菌后可以用于制取土壤稀释液B. 土壤取样、称取土壤、稀释、涂布培养都在酒精灯火焰旁进行无菌操作C. 用显微镜直接计数法计数得到的结果往往会比实际活菌数目要高D. 取\ 10^4、\ 10^5、\ 10^6倍的土壤稀释液分别涂布于各组平板上得到的所有菌落数再求平均值【答案】C【解析】解 A.在分离土壤中的尿素分解菌实验中采集的土样经高温灭菌后土样中的微生物被杀死再制取土壤稀释液接种并培养不会得到菌落 A错误B.土壤是土壤微生物的培养基土壤取样时不需要在酒精灯火焰旁操作 B错误C.用显微镜直接计数法计数得到的结果包含死的菌体和活的菌体故计数结果往往会比实际活菌数目要高 C正确D.取 10^4、 10^5、 10^6倍的土壤稀释液分别涂布于各组平板上得到的同—稀释倍数下的不同培养基上的菌落数求平均值 D错误故选 C二、解答题（本大题共计7小题每题10分共计70分）15.（1）图中选择培养基应以________为唯一氮源鉴别培养基还需添加________作指示剂分解尿素细菌在该培养基上生长一段时间后其菌落周围的指示剂将变成________色．15.（2）土壤中的细菌将尿素分解为________之后才能被植物利用土壤中的细菌之所以能将尿素分解是因为细菌能合成________．15.（3）制备实验所需的培养基时在各成分都溶化后和分装前要进行的是________和灭菌对培养基进行灭菌的常用方法是________．倒平板时要待平板冷凝后将平板倒置其主要原因是________．15.（4）在5个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10^5的土壤样品溶液0.1 ml 培养一段时间后平板上长出的细菌菌落数分别为191、16、326、173和182．该过程采取的接种方法是________ 每克土壤样品中的细菌数量为________\times 10^8个与血细胞计数板相比此计数方法测得的细菌数目较________（填“多”或“少”）．【答案】尿素, 酚红, 红【解析】能合成脲酶的细菌才能分解尿素．配制以尿素为唯一氮源的培养基能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌．分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨氨会使培养基的碱性增强．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌若指示剂变红可确定该种细菌能够分解尿素．【答案】氨, 脲酶【解析】分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨．【答案】调整pH, 高压蒸汽灭菌, 防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染【解析】制备实验所需的培养基时在各成分都溶化后和分装前要进行的是调整pH和灭菌培养基用高压蒸汽进行灭菌．倒平板时防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染因此要待平板冷凝后将平板倒置．【答案】稀释涂布平板法, 1.82, 少【解析】用于计数细菌菌落数的常用方法是稀释涂布平板法统计的菌落数应介于30\sim 300之间故选择细菌菌落数为191、173和182的平板计数．每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目所以每克该土壤样品中的菌落数为\dfrac\dfrac191 + 173 + 1823\dfrac10100\times 10^5= 1.82\times 10^8个．由于两个或多个细菌连接在一起时往往统计的是一个菌落所以用此计数方法测得的细菌数较少．故答案为（1）尿素酚红红（2）氨脲酶（3）调整pH 高压蒸汽灭菌防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染（4）稀释涂布平板法 1.82 少16.（1）在将样品稀释涂布到鉴别培养基之前可以通过________（填“固体”或“液体”）培养基进行________以增加纤维素分解菌的浓度纤维素酶是一种复合酶其中的葡萄糖苷酶可以将________分解为________16.（2）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应常用的刚果红染色法有两种第一种是先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应第二种是在________时就加入刚果红 ________（填“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂16.（3）如果观察到产生________的菌落说明可能获得了纤维素分解菌为了确定是纤维素分解菌还需要进行________产纤维素酶的实验纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量的测定16.（4）实验结束后使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉这样做的目的是________【答案】（1）液体, 选择培养, 纤维二糖, 葡萄糖【解析】解（1）在将土壤样品涂布到鉴别培养基之前可以在以纤维素为唯一碳源的液体培养基上进行选择培养选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度纤维素酶是一种复合酶包括 C_1酶、 C_x酶和葡萄糖苷酶前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖【答案】（2）倒平板, 第一种【解析】（2）刚果红不与纤维二糖和葡萄糖发生反应常用的染色法有两种第一种是先培养微生物再加入染色剂进行颜色反应第二种是在倒平板时就加入染色剂第一种方法会使菌落之间发生混杂第二种方法产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈游戏微生物能降解色素形成明显的透明圈故两种方法各有缺点【答案】（3）透明圈, 发酵, 葡萄糖【解析】（3）刚果红与纤维素反应呈红色纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色在菌落周围会出现透明圈为了确定是纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定【答案】（4）防止造成环境污染【解析】（4）实验结束后使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉防止造成环境污染17.（1）纤维素分解菌是一类能产生纤维素酶的微生物,纤维素酶是一种复合酶,其中包括 C_1酶、 C_x酶和葡葡糖苷酶其中能将纤维二糖分解为葡萄糖的酶是_______________ 纤维素分解菌也能以葡萄糖为碳源但是实验室中培养纤维素分解菌的培养基一般选用纤维素粉而不选用葡萄糖该培养基不选用葡萄糖作为碳源的原因是______________________________________________17.（2）自然界中许多真菌能产生胞外纤维素分解酶其分解纤维素的能力远远高于细菌从细胞结构的角度分析真菌能产生胞外纤维素分解酶的原因可能是___________________________________________________ 若要分离出耐高温的能分解纤维素的真菌为了防止其他微生物的繁殖对培养基可采取的措施是___________________________________________________________________________ ___（答出3点）17.（3）为了鉴别纤维素分解菌培养基中要加入________________以形成红色复合物为方便鉴定和筛选将菌液接种到培养基上的一般方法为_______________ 实验过程中发现许多能分解纤维素粉的菌株不一定能分解天然的烟秆粉末针对这一现象在制备纤维素分解菌制剂降解烟秆时需对培养基进行改进请写出改进方法:___________________________________________【答案】（1）葡萄糖苷酶, 葡萄糖是微生物均可利用的碳源用葡萄糖作为碳源易造成杂菌污染【解析】解（1）筛选纤维素分解菌的培养基应该以纤维素为唯一的碳源有利于纤维素分解菌生长同时抑制其他微生物生长葡萄糖是微生物均可利用的碳源用葡萄糖作为碳源易造成杂菌污染所以不能选择葡萄糖作为碳源【答案】（2）真菌是真核生物具有高尔基体和内质网能合成大量分泌蛋白, 培养基中以纤维素为唯一碳源并加入一定量的抗生素在高温环境下培养【解析】（2）纤维素分解酶为一种分泌蛋白有高尔基体和内质网的细胞都能产生分泌蛋白分离出耐高温的能分解纤维素的真菌就需要在高温下培养以纤维素作为唯一的碳源【答案】（3）刚果红, 稀释涂布平板法, 培养基中直接以烟秆粉末作为唯一碳源【解析】（3）筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法该方法可以通过颜色反应直接筛选刚果红可以与纤维素形成红色复合物稀释涂布平板法是对微生物计数常用的方法18.（1）食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成________________酶的微生物能够降解纤维素该酶是一种复合酶它至少包括________________________18.（2）目前研究者多利用以________为唯一碳源的培养基从土壤中分离纤维素分解菌为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入________染料形成________色复合物若产生________ 则证明有纤维素分解菌存在18.（3）下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程上述工艺流程中环节①需要的微生物大多分布在________的环境中④过程要注意对接种器材进行________【答案】（1）纤维素 , \ C_1酶、\ C_x酶和葡萄糖苷酶【解析】解（1）纤维素酶是一种复合酶一般认为它至少包括三种组分即 C_1酶、C_x酶和葡萄糖苷酶前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖正是在这三种酶的协同作用下纤维素最终被水解成葡萄糖为微生物的生长提供营养同样也可以为人类所利用【答案】（2）纤维素 , 刚果红, 红, 透明圈【解析】（2）一般利用添加了纤维素的选择培养基分离纤维素分解菌利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌这种方法能够通过在培养基中加入刚果红看是否产生透明圈直接对微生物进行筛选【答案】（3）富含纤维素 , 灭菌【解析】（3）能产纤维零酶的微生物应多分布于富含纤维素的环境接种前要对接种器材进行灭菌处理19.（1）甲中细菌培养基和选择培养基成分上的主要区别是后者________19.（2）土壤样品需稀释后震荡摇匀用________准确吸取0.1mL土壤悬液滴加在培养基中均匀涂布将培养皿倒置后放在________中培养一段时间获得细菌菌落19.（3）5个细菌培养基平板上共接种稀释倍数为 10^5的土壤样品液0.5mL 培养一段时间后平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191 则每毫升土壤样品中的细菌数量为________个19.（4）研究人员用鉴别培养基来鉴定细菌已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应研究人员在刚果红培养基平板上得到部分有透明圈降解圈的菌落（见图丙）图中菌落________的细菌最适合作为目的菌保存不考虑基因突变上图甲中鉴别培养基中的菌落周围是否都有透明圈？________19.（5）图中菌种若要长期保存应该将其放在________条件下若在保存过程中有一菌株因基因突变导致纤维素酶失活突变后的基因转录形成的mRNA在图乙箭头处增加了70个核苷酸（无终止密码子）使该酶的结构发生变化（假设图中271位之前无终止密码子）则该酶的氨基酸数量比原来多________个假设氨基酸平均分子量为130 则突变后的蛋白质（两条肽链）分子量为________【答案】（1）以纤维素为唯一碳源【解析】解（1）图甲中细菌培养基为完全培养基选择培养基需要筛选产纤维素酶细菌因此选择培养基需要以纤维素为唯一碳源【答案】（2）移液管或移液枪, 恒温箱【解析】（2）土壤样品需稀释后震荡摇匀用移液管或移液枪准确吸取0.1mL土壤悬液滴加在培养基中均匀涂布将培养皿倒置后放在恒温箱中培养一段时间获得细菌菌落【答案】（3）\ 1.75×10^8【解析】（3）为了保证结果准确一般选择菌落数在30∼300的平板进行计数即选择156、178和191进行计算共接种稀释倍数为 10^5的土壤样品液0.5mL 培养一段时间后则每毫升土壤样品中的细菌数量=(156+178+191)÷3÷0.5× 10^5= 1.75×10^8个【答案】（4）①, 是【解析】（4）分析图解图中菌落①周围的降解圈最大说明分解纤维素的能力最强因此最适合作为目的菌保存鉴别培养基来鉴定细菌已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应因此上图甲中鉴别培养基中的菌落周围都有透明圈【答案】（5）-20℃, 21, 12916【解析】（5）图中菌种若要长期保存应该将其放在−20℃条件下若在保存过程中有一菌株因基因突变导致纤维素酶失活突变后的基因转录形成的mRNA在图乙箭头处增加了70个核苷酸（无终止密码子）使该酶的结构发生变化（假设图中271位之前无终止密码子）根据终止密码子的种类可知原来276、277、278三个碱基将构成终止密码子UGA 终止密码子之前共有273+70+2=345 一个密码子由mRNA上3个相邻的碱基构成因此该酶的氨基酸数量=345÷3=115 原来mRNA上的终止密码子为UAA 翻译出来的氨基酸数有94个即比原来多21个假设氨基酸平均分子量为130 则突变后的蛋白质（两条肽链）分子量=115×130−(115−2)×18=1291620.（1）土壤中的有些细菌能分解尿素是因为其能合成________________20.（2）分离尿素分解菌时需要配制以____________为唯一氮源的培养基20.（3）选取10g土样后进行一系列稀释分别吸取0.1mL的 10^4、 10^5、 10^6倍稀释的菌液在灭菌板上进行_______________接种采用该种接种方法的目的是_______________________________________ 该实验过程中还设置了一个空白平板空白平板可起___________作用实验结果显示 10^6倍稀释的菌液对应平板上的菌落数为。
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重点题型1 目标微生物的筛选与鉴定
1.分离微生物的原理与措施
(1)原理：自然环境中的微生物是混杂在一起的，因此分离获得纯培养物应首先采用的方法是将单个的细胞与其他细胞分离，再给细胞提供合适的营养和条件，使其生长成为可见的群体。
1
(2)常用措施
①接种过程中尽量使细胞分散开来，如平板划线法、稀释涂布平板法。
②运用选择培养基的作用特点，在培养基中添加某种特定的物质，抑制不需要的微生物的生长，促进所需微生物的生长。
2.选择培养基四种常见制备方法或实例
2
【例证1】(2017·全国卷Ⅰ，37)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。
回答下列问题：
(1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是_______________
___________________________________________________________________，
但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_____________(答出两点即可)。
(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是_________________________________________________________________
____________________________________________________________________。
3
(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有____________________________________________________________________
______________________________________________________(答出两点即可)。
解析(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。
能分解尿素的细菌是一种分解者，属于异养型生物，不能以尿素的分解产物CO2作为碳源。
能分解尿素的细菌可以以葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解为细胞生命活动提供能量，另一方面其代谢中间产物可为多种有机物的合成提供原料。
(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择以尿素作为唯一氮源的选择培养基，而其他两组都含有含氮物质NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3不能起到筛选作用。
(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用：KH2PO4和Na2HPO4构成缓冲液，可维持培养基的pH相对稳定；KH2PO4和Na2HPO4能为微生物生长提供无机盐。
答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料(2) 尿素其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机盐离子，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
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【例证2】(2014·全国卷Ⅰ)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。
回答下列问题。
(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。
(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成色复合物。
用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。
(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：
据表判断，培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解
菌，原因是；培养基乙(填“能”或“不能”)用
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于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是__________________________________。
解析 (1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。
纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图： 纤维素――――――→C 1酶、C x 酶纤维二糖――――――→葡萄糖苷酶葡萄糖
(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
(3)分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，且需以纤维素为唯一碳源。
答案 (1)纤维二糖 葡萄糖 (2)红 透明圈
(3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR —纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
1.(2019·湖南、江西十四校联考)马、牛羊的食物主要是草茎类，其中还有大量的纤维素。
它们胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用，土壤中也存在着分解纤维素的微生物。
请根据所学的知识，回答下列问题：
(1)纤维素酶是一种复合酶，主要包括、、。
(2)在培养基中进入刚果红染液可以鉴别纤维素分解菌，其原因是______________
____________________________________________________________________。
(3)分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是。
①稀释倒平板法②涂布平板法③单细胞挑取法
④选择培养分离
A.①②
B.②③④
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C.②③
D.①③④
(4)在微生物的分离与培养的过程中，为了防止杂菌的污染，需要进行严格的无菌操作，如接种环和接种针需要，培养基需要等。
(5)下表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方，请判断该培养基为培养基，酵母膏和土豆汁在实验中的作用是________________________________________
_________________________________________________________________。
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。
解析(1)纤维素酶包括C1酶、C X酶和葡萄糖苷酶。
(2)刚果红染液可以与纤维素结合形成红色的复合物，纤维素分解菌产生的纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖而使其菌落周围出现透明圈，所以在培养基中加入刚果红染液可以鉴别纤维素分解菌。
8。