雨生红球藻培养生产天然虾青素项目环境影响报告书

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[ 12] Bradford M . A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye - binding [ J] . Analyt Biochem, 72: 248~ 254 [ 13] 高希武 , 赵颖 , 王旭 , 等 . 杀虫药剂和植物次生性物质对棉铃虫羧酸酯酶的诱导作用 [ J] . 昆虫学报 , 1998, 41( 增刊 ) : 5~ 10 [ 14] Nauen R, Koob B, Elbert A. Antifeedant effects of sublethal dosages of imidacloprid on Bemisia tabaci [ J] . Entomologia Experimentalis et Applicata, 1998, 88( 3) : 287~ 293 [ 15] 徐学农 , 王刚 , 高仕朋 . 杀螨王的亚致死浓度处理桃叶对山楂叶雌成螨生殖的影响 [ J] . 安徽农业大学学报 , 1998, 25( 4) : 352~ 355
科研简讯
猪高产仔数 FSH 基因发现及其应用研究该项目通过教育部主持的技术鉴定。该项成果是在国家自然科学重点基金项目太湖猪高繁殖力的分子遗传基础研究和国家 973 项目动物遗产育种与克隆的分子生物学基础研究资助下, 由中国农业大学生物技术国家重点实验室李宁教授主持, 从遗传学和分子生物学角度研究了我国优良地方猪种高产仔数的分子机理。该技术已获国际专利。大豆胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备及其检测试剂盒的研制该项目是我校农业部饲料工业中心李德发教授和谯仕彦教授共同主持完成的国家十五科技攻关项目。该项目 2003 年通过教育部组织的鉴定。目前世界上的畜禽饲料主要用玉米豆粕配合型饲料, 豆粕的产量占世界饼粕类产品生产总量的 2/ 3 及出口总量的 68% 。2001 年世界豆粕进出口量均超过 4 000 万 t 。但是由于加工水平和豆粕质量的较大差异对饲料质量造成相当大的影响 , 因此对豆粕质量的检测就十分重要。通过检测大豆中的主要抗营养因子大豆胰蛋白酶抑制因子判断饲料的蛋白含量是一种十分有效的检测手段, 而目前食品工业及饲料厂只能用尿酶活性来间接表示。但因为酶化学检测方法步骤繁琐 , 每次检样量少 , 结果差异性大 , 效果不理想。该课题研制成功的大豆胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体试剂盒检测法具有快速、简便的特点, 解决了目前的检测难题, 可以应用于大豆、豆饼、豆粕等饲料原料的蛋白质检测。培养雨生红球藻生产天然虾青素研究该项目是我校农业部饲料工业中心李德发教授等主持的国家十五科技攻关项目, 近日通过了教育部的成果鉴定, 这一成果使我国生产天然虾青素技术取得重要突破。天然虾青素是一种优质、高效、安全的着色剂和天然抗氧化剂, 能提高动物的免疫力和存活率 , 增加动物产品的营养价值和外观色泽。国外已有天然虾青素的工业化生产, 但我国天然虾青素尚未形成生产规模。课题组选择了已知的自然界中虾青素含量最高的雨生红球藻来生产虾青素 , 运用微藻生物学、微生物学和动物营养学的研究技术 , 研究了整个技术环节 , 建立了准确、快速的虾青素含量高效液相色谱检测方法。结果表明, 该产品对肉鸡的生产性能无显著影响, 但有提高全期饲料转化效率的趋势, 还可以提高胸肌的色度、降低亮度从而改善鸡肉品质。 ( 科年

生产虾青素的雨生红球藻藻株及其培养基筛选

生产虾青素的雨生红球藻藻株及其培养基筛选吴晓娟;唐小平;苏艳秋;罗国强【摘要】In order to gain the suitable algae and culture medium for astaxanthin production,the influence of culture medium on the cell growth and astaxanthin accumulation of Haematococcus pluvialis were studied and compared.Three strains of Haematacoccus pluvialis (H2,H3 and H4) were cultured in four different media (BBM,BBM+1 g/L NaAC,SM andBG11).The results showed that the SM medium was benefit for the growth and biomass accumulation of Haematacoc-cus pluvialis.In the same medium,the growth rate was faster in H3 than H2 and H4.In all experimental groups,the strain H3 had the fastest growth rate and biomass accumulation rate in the medium SM,and had the highest astaxanthin content (2.17%)and astaxanthin yield(30.1 mg/L)in BBM+1 g/L NaAC medium,reaching 1.16~4.72 times(P<0.05)and 1.18~6.28 times(P<0.01)of those of other experimental groups,respectively.So,the strain H3 was fit for large scale cultivation, and its optimal medium for growth and astaxanthin accumulation were SM and BBM+1 g/L NaAC,respectively.%为筛选获得适合大规模生产虾青素的藻株及适宜其生长和虾青素积累的培养基，研究比较了3个不同品系的雨生红球藻H2、H3、H4在4种不同培养基BBM、BBM+1 g/L NaAC、SM、BG11中的生长和虾青素积累情况。

虾壳中虾青素的提取实验报告

虾青素（Astaxanthin），即3,3’-二羟基-4,4’-二酮基-β,β’-胡萝卜素，分子式为C40H52O4，相对分子质量为596，其结构式如下(其中R= CH3)。

呈鲜红色，在水生动物、鸟类羽毛及植物叶、花、果中广泛存在，具有极强的抗氧化、抗癌变、增强免疫作用的功能。

一虾青素的生理功能虾青素可淬灭单线态氧，清除自由基，阻止脂质过氧化，保护机体免受伤害, 预防癌症发生，还能促进人体免疫球蛋白的产生，具有更高的免疫调节活性。

研究表明，虾青素具有抗氧化活性的类胡萝卜素,虾青素的抗氧化性比β-胡萝卜素高约10倍，比维生素E高约500倍。

虾青素已被认为是“超级维生素E”。

体外细胞培养试验研究虾青素对鼠免疫活性细胞的繁殖及功能的影响，结果显示虾青素比裸藻酮和β-胡萝卜素具有更高的免疫调节活性。

最新研究表明，虾青素具有比β-胡萝卜素更强的抑制癌变的能力。

二虾青素的商业开发由于动物本身不能够合成虾青素，而且绝大部分动物也不能把其他类胡萝卜素转化成虾青素，因此必须从食物中摄取虾青素。

目前虾青素已经在美国被批准为食品添加剂，并且在三文鱼的养殖中得到了很好的应用。

现在市场上虾青素的售价很高，单价达2000-2500美元每公斤（虾青素含量3%），而虾青素软胶囊每瓶140元，每瓶虾青素总量为360mg。

在2000年，虾青素的市场容量估计就已经达到了每年2亿美元。

因此进一步研究虾青素对人体的作用，开发相关的保健品和保健化妆品，则可以扩大天然虾青素的应用范围和市场。

三虾青素的来源虾青素主要有两种生产方式，即化学合成和天然提取。

一）化学合成虾青素化学合成法要经过多步化学和生物催化反应才能完成，其化学合成的前体物质为（S-3-乙酸基-4-氧代-β-紫罗酮，它是不同的微生物对（R）萜烯醇醋酸盐不对称水解，经过萃取，反流分布及重结晶等技术处理而得到产物。

人工合成的虾青素大多为顺式结构，而生物体合成的虾青素大多为反式结构。

动物体对人工合成的虾青素吸收能力较弱，而且人工合成的虾青素的着色能力和生物效价远比天然虾青素低。

影响雨生红球藻中虾青素的提取条件的研究_赵立艳

虾青素（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）化学名称为３，３’－二羟基－４，４’－二酮基－ β －胡萝卜素，是一种非维生素Ａ原的类胡萝卜素。虾青素具有多种生物功能：具有很强的抗氧化功能，能清除体内由紫外线照射产生的自由基，调节降低由光化学引起的危害，对紫外线引起的皮肤癌有很好的疗效，增强免疫力，具有抗癌、抗肿瘤的功能等［１］。目前主要作为人类的高级保健食品、药品，以及水产养殖动物和家禽、家畜的饲料添加剂。随着虾青素多种生理功能的发现，在国内外引起了虾青素的研究热潮。
３结论
３．１采用超临界ＣＯ２流体萃取技术脱除蒙古口蘑中脂类物质，具有高效、无污染、无萃取剂残留等优点，同时还具有脱色脱异味作用，对提高蒙古口蘑多糖的提取率及改善蒙古口蘑多糖的颜色和风味极为有利。３．２超临界ＣＯ２流体萃取最佳工艺条件为：萃取压力
３０ＭＰａ，萃取温度４５ ℃，萃取时间６０ｍｉｎ，萃取剂流量２５Ｌ／ｈ，以此条件萃取脂类物质，萃取率为２．０６％。萃取后蒙古口蘑粉呈乳白色，风味纯正，粗脂肪含量０．０１％。３．３超临界ＣＯ２萃取处理蒙古口蘑粉后，其蒙古口蘑多糖的提取率为６．２４％，是未处理样及溶剂处理样的４．２和１．８倍。
表１提取条件的因素水平表Ｔａｂｌｅ１Ｆａｃｔｏｒｓａｎｄｌｅｖｅｌｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
水平１２３
Ａ提取时间（ｈ）４６８
因素Ｂ乙酸乙酯／乙醇（体积比）
１：１１：２１：３
Ｃ固液比（ｇ／ｍｌ）１：８０１：１００１：１２０
虾青素的提取一般采用溶剂浸提法，溶剂的选用一般即要考虑到虾青素在其中的溶解度，又要考虑到它的极性，极性太弱不利于溶剂向细胞内渗透，因此一般选用混合溶剂［３～５］。本文选用乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂与常用提取溶剂进行了比较，在保证较高提取率的条件下，尽量选用无毒的溶剂进行提取。藻类中的虾青素大部分以酯类形式存在，从藻类中制备虾青素需要将粗提物中虾青素酯进行皂化，得到其单体。对于一个水解反应来说，温度高时反应快，但虾青素对热不稳定，因此，本试验对４℃和４０℃的皂化条件分别进行了研究，比较了低温皂化和加热皂化对提取效果的影响，确定了两种温度下的适宜提取条件。

雨生红球藻养殖项目简介

雨生红球藻养殖项目简介
2020/7/22
云南爱尔发生物
一.公司项目单位概况:
云南爱尔发生物技术有限公司成立于2007年5月10日，公司主要从事细胞工程技术培养雨生红球藻生产天然虾青素项目。法人代表为张勇，注册资金为人民币1000万元，项目分四期进行，计划总投资8000万元，一期工程已投入 2000余万元。
:200910300290.0)
⑤支撑生物反应器组运转的附属管道系统-新型(申请受理号:200920300330.7) ⑥雨生红球藻细胞生长促进剂及其使用方法（申请受理号：200910300102.2） ⑦利用荒山资源培养微藻的模式(申请受理号:200910300543.4)
2020/7/22
本企业被楚雄州认定为农业产业化经营州级龙头企业。
积累水池
一级藻种培养中心
水池
阳光大棚积累水池
水井
变电房
技术中心
收集车间
水
间
司
规
四合院
划
办公大楼
效
果
综合楼
图
2020/7/22
. 经济效益分析
项目全部建成 7万平米的培养车间，20万平米养殖水池，年达产藻粉100余吨，产值超1亿元，实现利税4000余万元。可解决300人的劳动就业问题。
①微藻规模培养的管道光生物反应器（发明专利；专利号:ZL200410020978.0） ②微藻培养的光生物反应器装置(发明专利；专利号:ZL200410020946.0) ③微藻细胞破壁方法（发明专利；专利号：ZL200410082921.3) ④支撑生物反应器组运转的附属管道系统及其操作工艺-发明(申请受理号
2020/7/22
本企业已通过云南省2009年第二批高新技术企业认定，证书编号：GR200953000022。

雨生红球藻的培养

[摘要]虾青素(astaxanthin)具有抗氧化、抗癌变、增强免疫等功能,可用作抗癌变预防治疗剂、抗衰老剂、饲料添加剂、食品和化妆品的着色剂,是一种具有很大发展前途的新资源性天然产物。

雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)是天然虾青素的重要来源，但是，雨生红球藻的养殖与保存相对来说比较困难，所以一直是不少科研人员的研究对象。

试验首先在最适生长条件下培养雨生红球藻的运动细胞，使游动细胞的细胞密度变的尽可能的高，培养条件为：光照强度1000~1500 lx；光照周期24 h；光质为LED 白光；温度为室温10±1 ℃；通空气；初始pH≈7.0。

然后改变培养基的成分，探讨单因素条件对虾青素积累量的影响，实验条件：光照强度15000~20000 lx；光照周期24 h；光质为LED白光；温度为室温17±1℃；不通气；初始pH≈7.0。

最终的结果表明，在氮饥的饿情况下虾青素百分含量为3.465%和3.484%，磷饥饿情况下虾青素百分含量为1.414%和1.435%，盐胁迫环境下虾青素百分含量为0.738%和0.650%，说明氮元素的缺乏比磷元素的缺乏和盐胁迫，更有利于雨生红球藻积累虾青素。

[关键词]虾青素;氮饥饿;磷饥饿;盐胁迫Abstract:Astaxanthin has antioxidant, anticancer and function of enhancing immune. It can be used as anti-cancer prevention and treatment agent, anti-aging agent, feed additive and coloring agents of food and cosmetic. So it is a kind of promising “new resources of food”. With the rapid development of medicine industry, food industry and aquaculture, the demand for Astaxanthin will must grow. In the experiment, the green movement cells of Haematococcus pluvialis were cultivated under optimal growth conditions in order to obtain maximum biomass. The conditions of culture were as following: light intensity was 1000~1500 lx; light cycle was 24 h; light quality was white; temperature was 10±1℃ and pH was about 7.0. Then the components of culture medium were changed for investigation on the effect of single factor on astaxanthin accumulation. The final results show that in the same external conditions, the lack of nitrogen was more conducive than those of phosphorus and salt stress to the accumulation of astaxanthin in Haematococcus pluvialis.Key word:Astaxanthin, Nitrogen starvation, Phosphorus starvation, Salt stress.目录1 前言............................................................ - 1 - 1.1雨生红球藻 .. (1)1.1.1 雨生红球藻形态及分类学特点 ................................ - 1 -1.1.2雨生红球藻生活周期......................................... - 1 -1.1.3雨生红球藻培养............................................. - 2 -1.1.4外界环境对雨生红球藻生长的影响............................. - 2 - 1.2虾青素. (2)1.2.1虾青素的化学特征及来源..................................... - 2 -1.2.2雨生红球藻细胞内虾青素合成及积累........................... - 3 -1.2.3外界环境对虾青素合成的影响................................. - 4 -1.2.4虾青素的生理功能及实际应用................................. - 4 -2 试验材料与方法.................................................... - 6 - 2.1主要试验材料 (6)2.1.1 藻种 ...................................................... - 6 -2.1.2 主要试验试剂 .............................................. - 6 -2.1.3主要试验仪器与设备......................................... - 6 - 2.2试验方法.. (7)2.2.1雨生红球藻的培养........................................... - 7 -2.2.2雨生红球藻的生长检测....................................... - 7 -2.2.3虾青素的积累............................................... - 7 -2.2.4虾青素含量的检测........................................... - 7 -3 试验内容.......................................................... - 8 - 3.1雨生红球藻的培养 .. (8)3.1.1 培养基的配置 .............................................. - 8 -3.1.2 试验材料的灭菌 ............................................ - 8 -3.1.3接种....................................................... - 9 -3.1.4培养....................................................... - 9 -3.1.5生长检测.................................................. - 10 - 3.2诱导虾青素.. (11)3.3虾青素含量的测定 (12)4 结果与讨论....................................................... - 13 - 结论............................................................. - 18 - 参考文献........................................................... - 19 - 致谢.................................................. 错误!未定义书签。

非连续性两步法培养雨生红球藻生产虾青素的方法与相关技术

本技术公开了非连续性两步法培养雨生红球藻生产虾青素的方法，在室内培养和室外诱导培养之间，增加如下步骤：步骤一、改变培养条件，将室内培养得到的雨生红球藻游动营养细胞转变为不动营养细胞；步骤二、收集并浓缩步骤一中所得藻液，加入抗生素和/或防腐剂，低温冷藏；步骤三、除去冷藏后的藻液中的抗生素和/或防腐剂，加入稀释的培养基，在弱光照条件下通气培养，对所述不动营养细胞进行活化。

本技术的方法能够在室外诱导培养中断的情况下，将室内培养的营养细胞进行浓缩储藏，在气候适宜的时候，将储藏的营养细胞快速活化并进行室外诱导培养，以大幅缩短整体培养周期，提高设备利用率和生产率，从而提高生产的稳定性。

权利要求书1.非连续性两步法培养雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，在室内培养和室外诱导培养之间，增加如下步骤：步骤一、改变培养条件，将室内培养得到的雨生红球藻游动营养细胞转变为不动营养细胞；步骤二、收集并浓缩步骤一中所得藻液，加入抗生素和/或防腐剂，低温冷藏；步骤三、除去冷藏后的藻液中的抗生素和/或防腐剂，加入稀释的培养基，在弱光照条件下通气培养，对所述不动营养细胞进行活化。

2.如权利要求1所述的非连续性两步法培养雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，所述室内培养具体为：将雨生红球藻藻种置于BG11培养基中进行培养，初始接种量为5～30万个细胞/ml，培养温度为15～25℃，白色荧光灯24小时连续单侧光照，光照强度为50～100μE/m2/s，pH为7.0～8.0，培养7～15天，游动营养细胞比例为80～100％。

3.如权利要求1所述的非连续性两步法培养雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，所述步骤一，具体为：将室内培养的温度提升至28-35℃和/或将pH提高至8.5-9.5，继续培养1-5天，当90％以上游动营养细胞转变为不动营养细胞时，停止培养。

4.如权利要求3所述的非连续性两步法培养雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，所述步骤二，具体为：将步骤一中所得藻液进行沉降浓缩后，离心，去除上清液，向所得藻泥中加入防腐剂溶液和/或抗生素溶液，震荡混匀，在4℃下进行储藏，储藏周期为2～12周，其中，所述防腐剂溶液和/或抗生素溶液用灭菌水配制，经过滤除菌后，再加入所述藻泥中，所述防腐剂溶液和/或抗生素溶液为乳酸链球菌素溶液、纳他霉素溶液、ε-聚赖氨酸溶液、卡那霉素溶液、硫酸庆大霉素溶液以及山梨酸钾溶液中的一种或几种的混合液。

2022年高考生物真题呼吸作用和光合作用

2022年高考生物真题呼吸作用和光合作用（2022新课标II卷,3）下列与微生物呼吸有关的叙述，错误．．的是（）A.肺炎双球菌无线粒体，但能进行有氧呼吸B.与细菌呼吸有关的酶由拟核中的基因编码C.破伤风芽孢杆菌适宜生活在有氧的环境中D.有氧和无氧时，酵母菌呼吸作用产物不同【答案】C（2022新课标II卷,2）关于叶绿素的叙述，错误．．的是（）A.叶绿素a和叶绿素b都含有镁元素B.被叶绿素吸收的光可用于光合作用C.叶绿素a和叶绿素b在红光区的吸收峰值不同D.植物呈现绿色是由于叶绿素能有效地吸收绿光【答案】D（2022安徽卷,3）右图为每10粒水稻种子在成熟过程中于物质和呼吸速率变化的示意图。

下列分析不正确．．．的是A．种子干物质快速积累时期，呼吸作用旺盛B．种子成熟后期自由水减少，呼吸速率下降C．种子成熟后期脱落酸含量较高，呼吸速率下降D．种子呼吸速率下降有利于干物质合成【答案】D（2022大纲卷,31）某研究小组测得在适宜条件下某植物叶片遮光前吸收CO２的速率和遮光（完全黑暗）后释放CO２的速率。

吸收或释放CO２的速率随时间变化趋势的示意图如下（吸收或释放CO２的速率是指单位面积叶片在单位时间内吸收或释放CO２的量），回答下列问题：（１）在光照条件下，图形A＋B＋C的面积表示该植物在一定时间内单位面积叶片光合作用，其中图形B的面积表示，从图形C可推测该植物存在另一个的途径，CO２进出叶肉细胞都是通过）的方式进行的。

（２）在上述实验中，若提高温度、降低光照，则图形（填“A”或“B”）的面积变小，图形（填“A”或“B”）的面积增大，原因是。

【答案】（1）固定的CO2总量呼吸作用释放出的CO2量释放CO2 自由扩散（2）A B 光合速率降低，呼吸速率增强（2022新课标Ⅰ卷,29）（11分）某油料作物种子中脂肪含量为种子干重的70%。

为探究该植物种子萌发过程中干重及脂肪的含量变化，某研究小组将种子置于温度、水分（蒸馏水）、通气等条件适宜的黑暗环境中培养，定期检查萌发种子（含幼苗）的脂肪含量和干重，结果表明：脂肪含量逐渐减少，到第11d时减少了90%，干重变化如图所示。

雨生红球藻营养细胞的虾青素累积

雨生红球藻的绿色营养细胞，在电镜下显示具有发达的周缘位网状叶绿体，细胞核位于细胞中部，周围具数个大液泡。细胞壁与原生质体分离（图版 R：。此观察结果与前 :， 4）
［7］人的工作基本一致。
暴露在胁迫环境 6—"C 的雨生红球藻细胞，光镜下除细胞中部或大部分呈桔红色外，大小与绿色营养细胞无差异。电镜观察表明，红色的营养细胞基本保持上述绿色营养细细胞质中核周围出现许多大小不一，或不规则形状的中等胞的特征结构。但暴露 6C 时，万方数据电子密度色素颗粒（图版 R：。暴露 "C 时，色素颗粒已充满细胞内的大部分区域，此时液 .）
$%&&&(）
（! # 福建师范大学生物工程学院，福州
福州 $%&&&’；" # 福建医科大学电子显微镜室，
摘要：接种于缺氮培养基的雨生红球藻。当置于光强为 !&—!")*+，温度 "%, - !.%, 条件下运动细胞占细胞总数的 0&1 ，细胞内的培养时，营养细胞迅速由绿色变成红色。接种 (/ 时，虾青素含量（$$.&23 4 56**）占最终色素累积量的（7&.&23 4 56**）的 %%1 。接种 7/ 时，虾青素含量已占最终累积量的 ’%1 。电镜观察显示，红色的运动细胞除细胞质的大部分区域充满色素颗粒外，细胞的形态结构与绿色细胞基本一致。实验还表明，当接种物置于低光（ &.%— 下培养时，营养细胞仍有色素沉积，但累积缓慢。当只有高光胁迫（!&—!")*+，完全培 !.&)*+）养基培养）时，营养细胞转变成厚壁孢子后（%/ 后），才大量积累色素。关键词：雨生红球藻；营养细胞；虾青素；胁迫条件；超微结构中图分类号：80(0 # " 文献标识码：9 文章编号：!&&& : $"&’ （"&&!） &( : &$’7 : &%

雨生红球藻中虾青素的提取和稳定性研究

雨生红球藻中虾青素的提取和稳定性研究刘铁楠;吴春涛;苏鹏宇;李素新;张志婓【摘要】Objective To study the conditions and stability of astaxanthin extracted by organic solvent, taking Haema-tococcus pluvialis as raw materials. Methods The ethyl acetate, acetone, methylene chloride, absolute ethyl alcohol and methylene chloride : acetone (2:1) were selected as extraction solvent by experiments, the effect of different extraction solvents for extraction of astaxanthin was studied; the optimum solvent gained from the experiment was used to extract astaxanthin at 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80℃, so as to determine the optimum extraction temperature; under the gained optimum temperature and solvent, the astaxanthin was extracted for 1, 1.5, 2, 2.5, 3 h respectively, so as to determine the optimum extraction time;the extraction times were set as 1, 2, 3 times, OD480 was measured after extraction, so as to study the effect of extraction times for extraction of astaxanthin; under the gained optimum solvent, temperature and time in the above experiments, the ratios of material to solvent were taken as 1:5, 1:10, 1:15, 1:20, 1:25, 1:30, 1:35, 1:40, OD480 was measured after extraction, so as to investigate the effect of different ratios of material to solvent for extraction of astaxanthin. The stability of astaxanthin was researched, and the absorbance of astaxanthin extracting solution was determined at different conditions of light (natural light, sunlight, lucifuge), temperature (30, 40, 50, 60, 70, 80℃), acid-base (pH 8-14), and so on. Results In the extraction of astaxanthin, thesecondary extraction can obtain 90% of astaxanthin. When the ratio of material to solvent was 1:25, the measured absorbance was maximum. Methylene chlo-ride:acetone (2:1) was the best extracting solution. The degradation of astaxanthin increased with the increase of light in-tensity and the increase of alkali concentration. Below 60℃, the effect of temperature on astaxanthin was small. Above 60℃, astaxanthin began tobe heated and damaged. Conclusion Methylene chloride : acetone (2:1) is best extracting solution, and 1:25 is the best ratio of material to solvent.the secondary extraction can extract most of astaxanthin, light can lead to degradation of astaxanthin, astaxanthin is unstable to alkali, astaxanthin is relatively stable b elow 60℃.%目的：以雨生红球藻为原料,研究有机溶剂提取虾青素的条件及其稳定性。

雨生红球藻生产虾青素的研究进展

别为３．１２和１．６１ｍｇ／ｇ（干重）¨“。３雨生红球藻的规模化培养３．１两步式两阶段法所谓两步式两阶段法就是根据雨生
条件下胁迫培养雨生红球藻５ｄ，虾青素含量达到了１２．３７ｍｇ／Ｌ，是自养条件下的１６倍多‘１“。Ｖｉｄｈｙａｖａｔｈ等人同样利用乙酸钠作为碳源，同时利用氮缺乏、１７．１ｍｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ
和６０ｉ．Ｌｍｏｌ／ｍ２・ｓ的光照作为胁迫条件培养雨生红球藻，９
ｄ
后每克干藻粉的虾青素含量达到２４．５
慢，大多还停留在使用基因枪这种低效率的转入方法上。
Ｓｔｅｉｎｂｒｅｎｎｅｒ等使用基因枪的方法将定点诱变后的八氢番茄红素脱饱和酶基因打入雨生红球藻细胞内进行同源表达，得到稳定的转化子，其中有转化子表现出虾青素高含量性瞄Ｊ。虽然Ｋａｔｈｉｒｅｓａｎ等利用含穿梭载体ｐＣＡＭＢＩＡｌ３０１的农杆菌侵染雨生红球藻，成功地构建了转基因表达所需的抗性标记，但并未实现相关基因的同源表达脚ｏ。
虾青素（３，３’．二羟基．１３，Ｂ’．胡萝卜素４，４’一二酮）是一种红色的类胡萝卜素衍生物，分子两端各有一个紫罗酮环，环上各有一个羟基，根据羟基与整个分子平面的位置关系虾青素分为４种光学异构体…：２个羟基位于平面下方构成ｓ构象（３ｓ，３’ｓ－虾青素）；２个羟基位于平面上方构成Ｒ构象（３Ｒ，３’Ｒ．虾青素）；１个羟基位于乎面上方，１个位于平面下方的构成ｓ，Ｒ构象（３Ｓ，３’Ｒ－虾青素和３Ｒ，３’ｓ．虾青素）。研究表明，虾青素有极强的染色、抗氧化和增强机体免疫的能力，这些特性使得虾青素在水产养殖业中作为饲料添加剂不仅可以增加水生动物的着色还可以增强鱼类卵子的质量口司１，在化妆品中还能够有效地延迟皮肤老化。４１；在临床医药上能够有效地促进癌细胞凋亡忙ｏ，抑制心血管疾病引发的炎症旧ｏ。如此广泛的用途使得虾青素的需求量越来越大，２０１０年全球的水产养殖业的市场需求量就达到了２亿美元…。现阶段虾青素的生产主要有以下３种方法：化学合

不同培养模式对雨生红球藻细胞绿色生长以及虾青素积累的影响研究

不同培养模式对雨生红球藻细胞绿色生长以及虾青素积累的影响研究摘要：在雨生红球藻的不同培养模式下进行红球藻绿色生长细胞的培养，在培养中会由于不同的培养模式的差别导致在红球藻的绿色生长细胞的生长控制中出现较为明显的生长差异，在研究控制中，通过控制不同的培养环境中的模式和方法，会进一步的影响到培养过程中雨生红球藻中虾青素的积累，因此在开展控制研究中，应该对不同培养模式之下的应用对于雨生红球藻中绿色细胞生长环境造成的影响开展试验和研究，在研究中通过不同模式对红球藻的绿色细胞造成的影响程度分析得出，在雨生红球藻中不同的培养模式采用，造成的影响排列分析做出明确的数据试验报告。

通过数据试验的有效研究，使雨生红球藻中的培养模式应用能够有效的促进红球藻中绿色细胞物质的有效繁殖，使绿色细胞的繁殖有利于雨生红球藻中虾青素物质的形成。

在控制试验研究中，应该对不同模式应用中的环境控制变量进行控制，确保在试验开展过程中，试验中影响因素不会由于环境变量方面控制不到位，导致试验研究的结构出现一定程度的偏差，在试验的研究控制中，应该针对雨生红球藻开展分批培养的方式来进行，在分批培养中应该在补料营养物质方面的控制中，对PH值方面含量开展控制，同时应该及时的反馈培养补料中的成分。

关键词：雨生红球藻;虾青素;培养开展模式，绿色细胞活性;生物量在开展雨生红球藻的绿色细胞培养和虾青素的培养研究中，在研究开展的方式中，应该通过不同的培养模式应用，对于绿色细胞的培养量和虾青素物质的积累量影响进行试验，开展相同环境下的控制变量试验研究，在研究中采用严格控制定量培养补给液体的方式，将不同培养模式导致的差异性进行研究，在研究中应该对培养基方面的更换情况，完全采用不同的模式类型来开展，对于不同培养模式中雨生红球藻中绿色细胞的生长培养和虾青素方面物质含量的研究，通过有效控制培养模式中的变量，进一步的将控制的影响成分降到最低。

在研究试验中，通过控制不同培养模式类型中的变量，得出在雨生红球藻的绿色细胞培养中，当绿色的细胞在生长中处于完全培养控制阶段，培养基方面的更换和模式应用选择较为灵活，能够有效的促进红球藻中绿色细胞在生长分裂阶段的细胞分裂和生长，同时采用相同的培养模式中，不同方法应用能够进一步的提高红球藻中绿色细胞的培养活性。