放线菌LA5菌株产生的抗真菌抗生素的初步研究

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参考文献

[1]中国农作物病虫害编辑委员会编.中国农作物病虫害(下册)1981,北京:农业出版社.1849—1850

[2]黄秀丽.微生物学实验指导.高等教育出版社,1999

[3]赵 斌,何绍江主编.微生物学实验.北京:科学出版社 2002

[4]Bio Merievx IDENYIFICATION AND SUSCEPTIBILITY TESTING API ATB SYSTEM

[5]戈登·海恩斯·帕格著.蔡秒英,刘津太,战立克译.芽孢杆菌属.北京:农业出版社1983

[6]褚西宁,卫军,陈海波,刘东兴,袁滔著.微生物学通报.1991,18(3)

注——* 承蒙广州市教育局资助;

对广东省微生物研究所欧阳友、陈仪本老师指导,以及提供试验条件表示衷心感谢!

放线菌LA5菌株产生的抗真菌抗生素的初步研究*

曾会才♦邬国良余凤玉李振华

(中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 海南儋州 571737)

摘 要:对放线菌LA5菌株的抑菌谱进行了初步测定,结果表明:放线菌LA5菌株对辣椒疫霉菌Phytophthora capsici、稻瘟菌Pyricularia grisea、香蕉炭疽菌Colletotrichum musae、香蕉枯萎镰刀菌Fusarium oxysporum sp.cubense、香蕉黑星病菌Phyllosticta musarum和芒果炭疽菌Colletotrichum gloeosporiodies等6种植物病原菌表现很强的抗菌活性,对茄子腐皮镰刀菌Fusarium solani具有明显的抑效果;通过阳离子交换层析法对LA5菌株产生的抗生素进行了分离纯化,获得了抗生素LA5的结晶,理化性质测定结果表明,这种抗生素属水溶性、弱碱性抗生素,对光、热稳定,符合农药贮藏稳定性要求。

关键词:放线菌LA5菌株 抑菌谱 抗真菌抗生素

Testing on Antifungal Spectrum of and Isolation and purification of Antagonistic produced by Actinomycetales Strain LA5*

ZENG Hui-Cai♦ WU Guo-liang YU Feng-Yu LI Zheng-Hua

Supervisor: Vice Prof. Zeng Huicai

*基金项目:中国热带农业科学院科技基金重点支助项目。

♦作者简介:曾会才(1964-),男,博士,副研究员, E-mail: zhc081@。

* Supported by the Science and Technology Foundation of Chinese Academy of Tropical Agricultural Science.

♦ Corresponding author: Zeng Hui-Cai, Ph.D, Associate Professor, E-mail:zhc081@

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(Department of Plant Protection, SCUTA, 571737, Danzhou, Hainan, China)

Abstract:The experiment of testing on antifungal spectrum of Actinomycetales strain LA5 was conducted. The results showed that actinomycetales strain LA5 had strong antagonistic action against Phytophthora capsici, Pyricularia grisea, Colletotrichum gloeosporioides, Fusarium oxysporum f. sp. Cubense, Colletotrichum musae and Phyllosticta musarum in carrot agar. The crystal of antibiotic LA5 was gained by the methods of Ion exchange chromatography combined with crystallization. The antibiotic LA5 can maintain antifungal activity in the conditions of neutral, weak alkaline, light and 54℃for 15 days , respectively, that indicated antibiotic LA5 accord with stability requirement of pesticide.

Key words:Actinomycetales Strain LA5 antifungal spectrum antifungal antagonistic

植物疫霉菌病害是一类世界性分布的重要土传病害,危害作物种类多,流行速度快,损失巨大,海南许多市县的瓜菜基地常因辣椒疫病的流行而造成大面积辣椒绝产,其防治主要依靠瑞毒霉、霜脲氰等系列化学杀菌剂,但疫霉菌对使用过的内吸杀菌剂易产生抗药性而导致防效下降,同时化学农药的长期大量使用还会造成环境污染,而抗生素等生物农药则不存在环境污染问题,但目前国内外尚无用于植物疫病防治的商品抗生素[14]。在植物疫病防治用抗生素的研究方面,韩国分别从链霉菌、青蓝小单孢菌、浅玫瑰马杜拉放线菌、铜绿假单孢菌和荧光假单孢菌中获得了寡霉素、链霉戊二亚胺、格尔德霉素、放线菌素、道诺霉素、吩嗪-1-羧酸和aerugine等对辣椒疫霉菌具抑制活性的抗生素[1-14],国内林壁润等从一株链霉菌中获得的抗生素2507对黄瓜苗期疫病具防治作用[15-16],其它国家尚未见有关疫霉菌病害防治用抗生素研究的文献报道。放线菌LA5菌株是从海南辣椒疫病样本上分离得到的一株生防菌,在室内对辣椒疫霉菌具有十分显著的拮抗作用,在盆栽试验中对辣椒疫病具有90%的防治效果。LA5菌株菌落灰白色,菌落边缘呈放射状,初生菌丝有分隔,基质菌丝发达,气生菌丝少,培养4-7d断裂为杆状小体,孢子丝为链状,有些有分枝,直形,偶有波折,在扫描电镜下观察,孢子为杆状或椭圆小体,表面光滑,链生,孢子大小0.3~0.5×0.8~1.2µm,不同于韩国报道的放线菌菌株及国内林壁润、谢大双等分离到的链霉菌菌株。本文报道放线菌LA5菌株的抑菌谱和所产生活性物质的初步研究结果。

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.1.1 参试病原菌

a. 辣椒疫霉菌Phytophthora capsici

b. 黄瓜瓜果腐霉菌Pythium aphanidermatum

c. 香蕉枯萎镰刀菌Fusarium oxysporum sp.cubense

d. 香蕉炭疽病菌Colletotrichum musae

e. 香蕉黑星病菌Phyllosticta musarum (Cooke) Petrak

f. 芒果炭疽菌Colletotrichum gloeosporiodies

g. 芒果果腐链格孢菌Alternaria a lternata

h. 稻瘟菌Pyricularia grisea

i. 柑桔指状青霉菌 Penicillium digitatum

j. 茄子根腐病菌Fusarium solani(mart.)Sacc.

k. 西番莲枯萎病菌Fusarium decemcelulare Brick

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