关于胶回收
胶回收dna注意事项
胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积，我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳，通常只要够点样即可，或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时，要衬以干净的塑料薄膜，使用无DNA污染的新刀片，其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因：胶块未完全溶解，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数辅助溶解；胶块体积太大，应先将其切为小块，分多次回收；电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH结合DNA，如pH太高，应作适当调整；漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低，可利用NaOH适当调高其pH 值，以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验，请确保彻底去除漂洗缓冲液，具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积（小于说明书提供的最小洗脱体积）进行洗脱以提高浓度，因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带，可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高，建议即使只有一条带，也可以切胶纯化，其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因：琼脂糖质量不好；含目的片段的凝胶再空气中放置过久，使胶块失水、干燥，建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃；制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
胶回收 PPT
➢ 丙烯酰胺电泳凝胶产物回收的方法之一。
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2.1.5 DEAE纤维素膜纸片法
➢ 将DEAE纤维素膜裁成小条活化处理。电泳后在 目的条带前切一刀，将比条带略宽的DEAE 纤维 素膜插入切口，不留气泡，继续电泳，条带上的 DNA被膜片截留，取出膜片冲洗后转移到离心管 中加缓冲液65℃保温洗脱，直到膜上DNA被完 全洗脱，将溶液用酚氯仿抽提沉淀。
2
向吸附柱CA2中 加入μL漂洗液PW
12000rpm, 离心30~60sec
3
弃废液，将吸附 柱重新放回收集管 中。重复操作1,2,3
注：1.漂洗液PW使用前先检查是否已加入无水乙醇。 2.如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或
直接测序，建议PW加入后静置2~5min再离心。
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4.1 实验流程
4.1.6 去除漂洗液
1
2
将吸附柱CA2放回 收集管中
12000rpm, 离心2min
3
将吸附柱CA2置于 室温放置数分钟，
晾干
注：1.尽量除尽漂洗液，以防止残留的漂洗液中的乙醇影响下一步的 实验（如酶切、PCR等）。
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4.1 实验流程
4.1.7 收集DNA
1
2
将吸附柱CA2放到 一个干净离心管中
胶回收
目录
一 胶回收基础知识 二 方法及应用 三 试剂耗材与设备 四 操作流程 五 常见问题解答
目录
一 胶回收基础知识 二 方法及应用 三 试剂耗材与设备 四 操作流程 五 常见问题解答
1.胶回收的概念 2.胶回收的原理
1.1 胶回收概念
➢ 从电泳后的凝胶中回收目的DNA的过程，其目的 是将目标DNA重新利用。
胶回收
除了选择合适的方法外,实验中还要注意以下几点:(1)防止抽提过程中污染DNA酶与回收片段接触的试剂与器皿等都应进行灭菌(酶)处理,即使是不能用干热或湿热法灭菌的器皿也要用乙醇浸泡以灭杀活菌与DNA酶,不然可能发生回收片段部分降解的现象,有时甚至一无所获.即使是轻微的降解反应——当发生在粘性末端时也会导致严重的连接困难.(2)紫外照射选择长波段回收过程往往需在紫外等监测下进行,与一般观察电泳结果不同的是这时应用长波紫外灯.因为短波紫外线(254nm)会引起DNA的断裂或是形成TT二聚体,前者会使以后的连接与转化等实验失败,后者可能造成基因突变,给克隆工作带来麻烦.即使是使用了长波紫外照射,回收DNA时也要尽量短时照射,避免连续长时间照射.(3)实验操作要轻柔特别在处理较大片段时应防止机械剪切作用DNA对的破坏,如吸取液体,转动离心管等操作均应缓慢,轻柔.综上所述,只有在合适的回收方法基础上注意具体操作步骤是才能有效回收所需片段,为以后的酶切,连接,标记等工作打下良好基础.3 实验步骤一、试剂盒法(Kit回收法,以上海申能博彩生物科技有限公司生产的试剂盒为例)(1)从电泳板上切割含目的DNA片段的凝胶块(割胶尽可能的小,提供后续回收效率)(2)凝胶称重后并将其放入1.5ml管中,将其适当切小,加速溶解.每100mg凝胶加入400μl solution SN.(若称重省略,一般加入400μl SN)(3)凝胶溶解:55-60℃,保温5-10分钟,每2分钟混匀一下,使凝胶溶解,胶完全融化后每400μl solution SN中加入solution B 100μl,混匀.(4)将3S柱装入2ml洗管,将上述混合液转移至3S柱,室温放置2min.室温10 000 rpm离心1分钟,稳定45秒.(5)取下3S柱,倒掉收集管中的废液,将3S柱放入同一收集管中,加入600μl Wash Solution,室温10 000 rpm离心1分钟.(6)重复步骤5一次.(7)取下3S柱,倒掉收集管中废液,将3S柱放入同一收集管中,室温10 000 rpm离心2分钟.(8)将3S柱放入新的离心管中,在3S柱子膜中央加30μl ddH2O,不加盖室温放置2分钟.(9)盖上离心管,室温10 000 rpm离心1分钟,离心管中的液体即为回收的DNA片段.胶回收一. 提高胶回收量的办法：1) 增加电泳时的上样量。
axygen胶回收说明书
axygen胶回收说明书1.介绍Axigen胶是一种环保型的胶水，它具有出色的粘性和耐久性，适用于多种材料的粘接。
Axigen胶的独特之处在于，它可以被回收再利用，减少了对环境的负面影响。
本说明书将详细介绍Axigen胶的回收方法和操作步骤。
2. Axigen胶的回收原理Axigen胶属于热熔胶，其回收原理是通过加热将已干固的胶水重新融化成液态，并进行再生处理，使其能够再次使用。
回收后的Axigen胶具有与原始胶水相同的性能和粘接能力。
3. Axigen胶的回收设备进行Axigen胶回收所需的设备包括：- 融化器：用于加热和融化Axigen胶-滤网：用于去除杂质和颗粒- 冷却器：用于将重新融化的Axigen胶迅速冷却固化- 再生剂：用于恢复Axigen胶的黏度和性能- 称重器：用于测量回收的Axigen胶的重量4. Axigen胶的回收步骤以下是Axigen胶的回收步骤：步骤1：准备回收设备，确保设备干净并符合卫生标准。
步骤2：将需要回收的Axigen胶切成小块，以便更好地加热和融化。
步骤3：将Axigen胶块放入融化器中，加热到适宜的温度。
具体的温度应根据Axigen胶的配方和要求确定。
步骤4：在加热过程中，使用搅拌器将Axigen胶块搅拌均匀，以确保完全融化。
步骤5：一旦Axigen胶完全融化，将其通过滤网过滤以去除杂质和颗粒。
步骤6：将过滤后的Axigen胶迅速注入冷却器中，使其迅速冷却和固化。
步骤7：在固化过程中，根据需要添加再生剂以恢复Axigen胶的黏度和性能。
步骤8：冷却和固化后，取出回收的Axigen胶。
步骤9：使用称重器进行称重，记录回收的Axigen胶重量。
步骤10：将回收的Axigen胶进行包装或存储，以备再次使用。
5. Axigen胶回收的注意事项在进行Axigen胶回收时，需要注意以下事项：-遵守安全操作规程，确保操作人员的人身安全。
-确保回收设备的正常运行和维护。
- 确保Axigen胶的加热温度和时间在适宜范围内，以防止过热和损坏。
切胶回收的原理
切胶回收的原理咱来聊聊切胶回收这事儿。
这就像是从一堆宝藏里挑出咱想要的那一件宝贝，然后把它单独拿出来好好保存起来。
先说说凝胶电泳吧。
想象一下，各种大小的分子就像一群小伙伴在参加一场马拉松比赛，跑道就是琼脂糖凝胶。
那些小的分子啊，它们身子轻，跑起来就快，能在凝胶里跑得老远；而那些大的分子呢，就像背着重重行囊的人，跑得慢，没跑多远就被落下了。
这样一来，不同大小的分子就按照自己的速度在凝胶里拉开了距离，形成了一条条不同的条带。
这就好比是小伙伴们按照不同的速度在跑道上分散开来，各自在自己的位置上。
然后呢，咱就看到了那凝胶里的条条带带，这里面就有我们感兴趣的那部分。
这时候切胶回收就登场了。
就好像我们在那跑道上，看到了那个我们一直在找的小伙伴，然后把他所在的那一小段跑道给切下来。
那凝胶里的目标条带就像是藏着宝藏的那一小块地方。
那切下来的胶块里可都是宝贝啊。
可是怎么把这宝贝拿出来呢？这就涉及到切胶回收的核心原理啦。
有一种办法呢，是利用溶胶液。
这溶胶液就像是一个超级魔法溶剂。
把切下来的胶块放到溶胶液里，就像把那藏着宝贝的小盒子放到一个能打开它的魔法池子里。
溶胶液会把凝胶慢慢溶解掉，那些原本被困在凝胶里的DNA分子就被释放出来了。
这就好比是把宝贝从那个锁住它的小盒子里解救出来了。
还有一种情况呢，是和吸附有关的。
就像小磁石吸引小铁屑一样。
有些材料可以专门吸附DNA分子。
当把切下来的胶块处理后，那些DNA 分子就被吸附到特定的材料上了。
这时候其他的杂质就被留在一边了，就像把沙子和金子分开一样。
然后再通过一些特殊的溶液把吸附着的DNA 分子从材料上洗脱下来，这样就得到了比较纯净的我们想要的DNA分子啦。
在这个过程中，温度有时候也很关键。
就像不同的花朵需要不同的温度来生长一样。
合适的温度能让溶胶的过程更顺利，也能让吸附和洗脱的效果更好。
如果温度不合适，就像花儿在不合适的温度下长不好一样，切胶回收的效果可能就会大打折扣。
咱再从一个更形象的角度看。
胶回收试剂盒成分及作用
胶回收试剂盒成分及作用
小伙伴们！今天咱们来唠唠胶回收试剂盒的那些事儿。
首先呢，胶回收试剂盒里有结合缓冲液。
这东西可重要啦！它的作用就是为了让咱们从琼脂糖凝胶里切下来的DNA片段能够很好地结合到硅胶膜上。
你想啊，如果没有这个结合缓冲液，那DNA片段就像没头的苍蝇似的，到处乱飘，根本没法好好进行下一步回收工作呢！我感觉这个结合缓冲液的量得控制好，不过具体多少有时候也得根据实际情况来定，多一点少一点可能不会有太大影响，但也别太离谱啦。
还有洗脱缓冲液。
这是干啥用的呢？它就是把吸附在硅胶膜上的DNA给洗下来。
我就这么跟你说吧，要是没有洗脱缓冲液，咱们千辛万苦把DNA吸附上去了，结果却拿不下来，那不是白忙活了嘛！一般来说按照试剂盒的说明加就好，但是呢，我试过稍微改变一点洗脱缓冲液的量，好像也能得到不错的结果，当然啦，这只是我的一点小经验哈。
另外，试剂盒里肯定有硅胶膜啦。
这个硅胶膜就像是一个小小的“DNA捕捉器”。
DNA片段经过结合缓冲液的作用后，就乖乖地被吸附在这个硅胶膜上了。
不过要注意哦，在操作的时候千万别把硅胶膜弄破了，一旦破了，那整个回收过程可能就会出问题啦！这一步一定要小心谨慎呀！
有些胶回收试剂盒可能还含有一些特殊的试剂成分，虽然我不太清楚具体每一个都是干啥的，但是它们肯定都是为了让胶回收这个过程更加顺利而存在的。
胶回收攻略
胶回收攻略一、这个回收小片断,我还比较在行,我以前的片断只有100bp市售的试剂盒常常有小片断回收效率很低的问题。
PCR产物经过酶切、回收等步骤后，损失太大。
进入连接反应的PCR片断量太小常常是试验失败的原因。
我的做法是，简化步骤、减少核酸在处理过程中的损失，让较多量的PCR产物和质粒片断进入酶连反应——以量取胜。
我的做法是很粗放型的，但是成功率很高。
如果愿意，你可以试试。
大致的做法是：制作100微升PCR产物；酒精沉淀回收PCR产物；PCR产物及载体酶切；跑回收胶；将回收胶上的PCR产物和载体片断切下，回收到一个试管中；冰冻、碎胶，酚、氯仿抽提，酒精沉淀；加入8微升水、1微升连接酶和1微升连接buffer，4度过夜；转化涂板。
具体的操作：PCR产物回收1. 制备100μL PCR产物。
2. 将100μL PCR产物加入一1.5mL离心管中，再加入400μL双蒸水，颠倒混匀。
加入 900μL 预冷无水乙醇、20μL 3M的醋酸钠。
颠倒数次混匀。
（提示本方法使用的醋酸钠量较小，但足够沉淀核酸，并且无需洗盐。
）3. 4℃静置30分钟，以利于核酸沉淀。
4. 12000rpm 4℃离心15分钟，沉淀核酸。
5. 弃上清，将离心管倒置于干净吸水纸巾上5分钟。
室温下吹风干燥。
（提示可将试管至于超净台吹风干燥。
如果管底有较多液体聚集，可盖好管盖后，轻弹管底数次，将液体分散挂在管壁上，再打开管盖吹风。
）酶切直接在回收PCR产物的试管中配置酶切体系：PCR产物酶切－制作插入片断10×Buffer 6μLSal I 5μLPCR产物——双蒸水 49μL合计 60μL要将PCR产物接入的质粒载体A，取A质粒（小提的质粒即可）3μL进行酶切。
A质粒酶切－制作载体片断10×Buffer 3μLSal I 1μL质粒 3μL双蒸水 23μL合计 30μL混匀。
37℃，酶切3小时。
1%琼脂糖回收胶回收（碎胶、酚氯仿抽提法）1. 酶切产物加入10％量的上样Buffer，混匀。
割胶回收实验报告
割胶回收实验报告【割胶回收实验报告】一、实验目的1. 了解割胶回收的原理及方法；2. 探究割胶回收对胶水质量的影响；3. 讨论割胶回收的应用价值。
二、实验原理胶水在固化后会形成固态胶块，割胶回收利用物理方法将固态胶块切割成小颗粒或粉末状，以便于再利用。
主要包括以下步骤：1. 将固态胶块放置在切割设备中，通过切割刀进行切割；2. 切割后的碎片经过筛网筛选出所需颗粒大小；3. 经过处理的胶粒可以进行再利用或进行再加工制成其他产品。
三、实验步骤1. 准备实验材料和设备：割胶刀、固态胶块、切割设备、筛网等；2. 将固态胶块放置在切割设备中，启动设备进行切割；3. 调整切割设备的刀片角度和速度，以获得所需颗粒大小；4. 将切割后的胶粒经过筛网进行筛选；5. 收集筛选后的胶粒，并进行相关分析和测试。
四、实验结果与分析通过实验得到的割胶回收的胶粒质量较好，具有较高的粒度均匀性和颗粒度适宜性。
在调整切割设备的刀片角度和速度时，发现角度过小会导致切割过程困难，角度过大则可能影响切割后的颗粒形状。
速度过快会导致切割不充分，速度过慢则可能导致切割割度不匀。
通过筛网筛选后的胶粒具有较好的颗粒分布和筛选效果。
五、实验讨论割胶回收可以将废弃胶水固态块进行有效利用，减少资源浪费和环境污染。
通过合理调整切割设备的刀片角度和速度，可以获得理想的胶粒颗粒度和颗粒形状。
割胶回收的胶粒可以用于再利用或再加工制成其他产品，具有较高的应用价值。
六、实验总结割胶回收是一种有效的胶水再利用方法，可以将废弃胶水固态块变为可再加工的胶粒。
实验结果表明，合理调整切割设备的刀片角度和速度对割胶回收的胶粒质量有较大影响。
割胶回收具有较高的应用价值，可减少资源浪费和环境污染，值得进一步推广和应用。
七、实验改进1. 考虑引入自动化设备，提高割胶回收的效率和精准度；2. 进一步研究和优化割胶设备的切割参数，使得割胶回收的胶粒更加均匀和适宜；3. 割胶回收后的胶粒可以进行再利用或再加工，可以进一步研究开发具有特殊功能的胶粒产品。
关于胶回收
胶回收一. 提高胶回收量的办法：1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul （PH 5.0，3mol/L的 NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7）加洗脱液之前，将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以使乙醇充分挥发。
8）最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9）可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10）将离心后的洗脱液加回吸附柱，再次离心。
DNA胶回收实验技术总结胶回收一. 提高胶回收量的办法：1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul（PH 5.0，3mol/L的 NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
胶回收的原理
胶回收的原理
胶是一种常见的塑料制品，由于其在生产和使用过程中会产生
大量的废弃物，对环境造成了严重的污染。
因此，胶的回收和再利
用成为了当前环保领域的热点问题。
那么，胶回收的原理是什么呢？
首先，胶的回收可以通过物理方法进行。
物理方法主要包括破碎、洗涤、干燥等步骤。
首先，将废弃的胶制品进行破碎，将其打
成小颗粒状，以便后续的处理。
然后，通过洗涤的方式去除胶表面
的污物和杂质，使胶颗粒变得干净。
最后，将洗净的胶颗粒进行干燥，去除其中的水分，以便后续的加工和再利用。
其次，胶的回收也可以通过化学方法进行。
化学方法主要包括
溶解、聚合等步骤。
首先，将废弃的胶制品投入相应的溶剂中，使
其溶解。
然后，通过控制溶解液的温度和压力，将溶解的胶分离出来。
最后，将分离出来的胶进行聚合反应，使其重新形成新的胶制品。
另外，胶的回收还可以通过生物方法进行。
生物方法主要包括
微生物降解、生物质转化等步骤。
首先，利用特定的微生物对废弃
的胶制品进行降解，将其分解成简单的有机物。
然后，利用生物质
转化的方式，将分解后的有机物转化为生物质能源或者其他有用的化合物。
总的来说，胶的回收原理主要包括物理方法、化学方法和生物方法。
通过这些方法，可以将废弃的胶制品进行有效的回收和再利用，减少对环境的污染，实现资源的循环利用。
同时，这也需要社会各界的共同努力，包括政府、企业和个人，共同推动胶回收工作的开展，为建设美丽的地球作出贡献。
胶回收的原理
胶回收的原理胶是一种常见的粘合材料，广泛应用于各个领域，如包装、建筑、家具等。
然而，随着胶制品的使用量不断增加，胶废弃物也在不断增加，给环境带来了很大的压力。
因此，胶的回收和再利用变得尤为重要。
那么，胶回收的原理是什么呢？首先，胶的回收可以通过物理方法进行。
比如，利用溶剂将废弃的胶制品溶解，然后通过蒸发或其他方法将溶剂分离出来，最终得到原料胶。
这种方法的优点是操作简单，但也存在着溶剂回收困难、成本高等缺点。
其次，胶的回收也可以通过化学方法进行。
例如，利用酸碱或其他化学试剂将废弃的胶制品进行降解，再经过一系列的处理步骤得到原料胶。
这种方法的优点是可以高效地将废弃的胶制品转化为原料胶，但也存在着化学试剂的回收和处理难题。
另外，生物方法也可以用于胶的回收。
通过利用微生物或酶类对废弃的胶制品进行降解，最终得到原料胶。
这种方法的优点是环保、能耗低，但也存在着降解速度慢、操作条件苛刻等问题。
除了以上几种方法，还有一些新型的胶回收技术不断涌现。
比如，利用超临界流体技术、离子液体技术等进行胶的回收，这些新技术在提高回收效率的同时也减少了对环境的影响。
总的来说，胶回收的原理是通过物理、化学或生物方法将废弃的胶制品转化为原料胶，以实现资源的再利用。
在实际操作中，可以根据胶制品的性质和回收条件选择合适的回收方法，以达到高效、环保的目的。
综上所述，胶回收的原理涉及到物理、化学、生物等多个方面，需要综合考虑各种因素，以实现胶的有效回收和再利用。
希望随着科技的不断进步，胶回收技术能够不断完善，为环境保护和资源节约做出更大的贡献。
胶回收原理及注意事项
DNA的凝胶回收一、琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法介绍：1.柱回收试剂盒：可谓目前最简单快速的回收方法，只需要将电泳凝胶中的产物条带切下，用溶解Buffer彻底溶解，上包埋有纯化填料的纯化柱，离心，再洗涤一次，离心后用洗脱缓冲液洗脱。
全程不过10多分钟，得到的产物溶液可以直接用于后继实验。
这个方法几乎不需要什么技巧就能得到稳定的结果，也是目前最多商品化试剂盒选择的方法。
但是这个方法不适合用于大片段的回收。
2.玻璃奶/纯化填料胶回收试剂盒：这个方法比前面的方法更为灵活，可以根据每次回收实验时预期回收量来调整纯化填料的量，使得实验不受限于柱子的载量，也不会造成浪费。
前面的操作步骤和上者一样，将电泳凝胶的条带切下，B uffer溶解，(区别在于这里)加入纯化填料吸附混合，快速离心沉淀去上清，洗涤沉淀后，干燥沉淀，最后用洗脱液纯化介质中吸附的片段释放出来，离心，取上清，就是回收的产物。
这个方法适合各种不同大小的片段，特别是大片段的回收，但是操作就较前者复杂一些，涉及到多次离心沉淀和取上清，有可能会误吸了微量的沉淀;另外干燥的程度也有点技巧，干过了不好洗脱，没干透又影响结果。
后来的改进版本有将混合了纯化介质后的凝胶溶解液加入到一种离心过滤柱上，这种柱子不带纯化填料，只有一层过滤膜，离心过滤后，填料在柱子里，溶液被甩掉，这样就避免了上述的问题。
3.低熔点琼脂糖：传统手工操作方法之一，低熔点琼脂糖制备凝胶，电泳后切割目的条带，在TE溶液中65度保温融化，用传统的酚氯仿抽提，乙醇沉淀。
这个方法需要用到酚氯仿等有机试剂，由于乙醇沉淀需时较长，而且低熔点琼脂糖价格较高现在用的人已经不多了，除非用于大片段的回收。
4.透析带电洗脱法。
切下的条带放在充满TAE的透析带中再电泳一段时间，让DNA走出凝胶，走向溶液中，再反向电泳一会儿，将附在透析带上的DNA赶回溶液中，取溶液部分，再用TAE洗洗袋子，合并溶液后传统方法酚抽沉淀，那块胶通常还要再染色看看残留。
胶回收的方法、注意事项以及实验步骤
胶回收的方法、注意事项以及实验步骤DNA片段的分离与回收是基因工程操作中一项重要的技术,如可收集特定酶切片段用于基因克隆或是制备探针,回收PCR产物用于再次鉴定等。
1 各类常用回收方法由于分离方法众多,且各种不同的方法可能同时依据多项原理,所以只能粗略地将各种方法分成五大类:电泳法,收集孔法,机械破碎法,溶(熔)胶法与酶处理法:一,电泳法根据凝胶割否分透析袋法与流动电洗脱法(割胶),滤纸-透析膜法与DEAE膜法(不割胶).(1)透析袋法该方法可回收大于5kb的片段,缺点是操作麻烦并易造成DNA酶的污染.(2)流动电洗脱法该方法回收片段大小为4～50kb,且回收效率高达94～100%,极端条件下可回收大至550kb的片段.缺点是操作繁琐,而且为了取得较高的回收率,需特定的流动电洗脱槽.(3)滤纸-透析膜法回收率平均达70%左右,不需割胶,操作相对简单,但实验中需将滤纸上的DNA洗脱,也较繁琐,也不易控制.(4)滤纸-透析膜法此方法用于回收小片段,一般小于5kb的片段回收效率较高,可达70%以上;对于大片段(>15kb)则难以从DEAE膜上洗脱下.二,收集孔法(1)蔗糖法回收小片段效率较高,564bp的PCR产物带回收效率高达97.6%,并且回收中能将较宽的条带浓缩于收集孔中,但回收中制作收集孔较麻烦,并且收集孔中要加入蔗糖,故获得的DNA样品不能直接用于后续实验.(2)羟基磷灰石法该方法回收效率也较高,不利之处与上述方法相同,获得的DNA需再纯化,操作也较繁琐.三,机械破碎法指用机械力将凝胶压碎后再行回收DNA片段,有冻挤法,冻融法,压碎浸泡法,(单层)滤膜过滤法及双层(亲和)膜过滤法.(1)冻挤法将胶条割下置于塞有玻璃棉的吸嘴或是管底刺有小孔的eppendorf管中,冰冻30min后全速离心5min,收集清液,再经酚抽提,乙醇沉淀等纯化浓缩处理(也可直接沉淀).其基本原理理是利用离心力将凝胶中原有的液体挤出,同时也带出胶中的DNA.从胶浓度为1%琼脂糖中回收650bp,1.1kb,2.0kb,4.5kb的片段时,回收率分别为90%,74%,56%,30%.这是因为大分子DNA更难于被胶中的缓冲液带出,所以此法只适用于回收较小的DNA片段.(2)冻融法割下的胶条放在eppendorf管中,将之捣碎并放于-80℃冰冻5min,取出后迅速放置于37℃保温10min,如此反复3次能使DNA从胶中游离出来,离心获得上清中即含有目的DNA,可通过沉淀浓缩获得高浓度.对一般的DNA片段回收效率在60～80%.操作简单,并不需特殊设备.(3)压碎浸泡法又称醋酸铵法,操作较费时,回收效率较低,一般改良的方法是在冻挤法操作中,加入一定的水并浸泡10min,增加DNA的回收率.四,溶胶法根据物理或化学溶胶可分为低融点法(物理熔胶)与NaI,KI,NaClO4溶胶法(化学溶胶).(1)低融点胶法采用特殊的低融点凝胶,该胶在65℃即溶化,实验中是先灌制正常的凝胶,然后用低融点胶取代其中的部分(即可节约低融点凝胶用量,也能保证电泳中整块凝胶的完整性.)电泳完成后割下的凝胶可于65℃下保温溶解,后直接用于酶切,连接,DNA标记的实验.操作方便简单,但需特殊的低融点凝胶,成本较高,且回收得到的样品浓度较低.(2)化学融胶法琼脂糖能溶解于一些盐溶液中(NaI,KI,NaClO4),然后可用特殊的纯化柱将DNA样品溶液纯化,现在广泛使用的凝胶电泳中DNA片段回收试剂盒基本采用了此中回收原理,能在短时间内获得目的DNA片段,成本也较低.五,酶处理法对于大片段DNA的回收,象酵母人工染色体的克隆实验中,克隆片段可大到2 000kb,一般采用此方法.利用琼脂糖酶降解琼脂糖,能较温和的裂解琼脂糖,最终成功回收DNA片段.2 DNA回收中的注意事项除了选择合适的方法外,实验中还要注意以下几点:(1)防止抽提过程中污染DNA酶与回收片段接触的试剂与器皿等都应进行灭菌(酶)处理,即使是不能用干热或湿热法灭菌的器皿也要用乙醇浸泡以灭杀活菌与DNA酶,不然可能发生回收片段部分降解的现象,有时甚至一无所获.即使是轻微的降解反应——当发生在粘性末端时也会导致严重的连接困难.(2)紫外照射选择长波段回收过程往往需在紫外等监测下进行,与一般观察电泳结果不同的是这时应用长波紫外灯.因为短波紫外线(254nm)会引起DNA的断裂或是形成TT二聚体,前者会使以后的连接与转化等实验失败,后者可能造成基因突变,给克隆工作带来麻烦.即使是使用了长波紫外照射,回收DNA时也要尽量短时照射,避免连续长时间照射.(3)实验操作要轻柔特别在处理较大片段时应防止机械剪切作用DNA对的破坏,如吸取液体,转动离心管等操作均应缓慢,轻柔.综上所述,只有在合适的回收方法基础上注意具体操作步骤是才能有效回收所需片段,为以后的酶切,连接,标记等工作打下良好基础.3 实验步骤一、试剂盒法(Kit回收法,以上海申能博彩生物科技有限公司生产的试剂盒为例)(1)从电泳板上切割含目的DNA片段的凝胶块(割胶尽可能的小,提供后续回收效率)(2)凝胶称重后并将其放入1.5ml管中,将其适当切小,加速溶解.每100mg凝胶加入400μl solution SN.(若称重省略,一般加入400μl SN)(3)凝胶溶解:55-60℃,保温5-10分钟,每2分钟混匀一下,使凝胶溶解,胶完全融化后每400μl solution SN中加入solution B 100μl,混匀.(4)将3S柱装入2ml洗管,将上述混合液转移至3S柱,室温放置2min.室温10 000 rpm离心1分钟,稳定45秒.(5)取下3S柱,倒掉收集管中的废液,将3S柱放入同一收集管中,加入600μl Wash Solution,室温10 000 rpm离心1分钟.(6)重复步骤5一次.(7)取下3S柱,倒掉收集管中废液,将3S柱放入同一收集管中,室温10 000 rpm离心2分钟.(8)将3S柱放入新的离心管中,在3S柱子膜中央加30μl ddH2O,不加盖室温放置2分钟.(9)盖上离心管,室温10 000 rpm离心1分钟,离心管中的液体即为回收的DNA片段.二、冻融,挤压回收法(1)用手术刀在DNA紫外检测仪下切割下含有所要DNA片段的凝胶块置于Eppendorf管中,甩至管底,-20℃冻存30min,(2)取出后用牙签将凝胶块尽量捣碎,剪去管上部,用烧红的针头在管底扎几个微孔,孔径越细越好.(3)将管套入另一个Eppendorf管中,常温下,15 000rpm离心10分钟.(4)将上清液吸到收集管中,向沉淀中加入100μl重蒸水.(5)重复步骤(2),(3),(4)两遍(如图所示).(6)收集的上清于15 000rpm,4℃离心20分钟,吸取上清液,补足400μl.(7)收集的上清液加入0.1V 的KAc(pH=5.5,3M)和2.0～2.5V 的无水乙醇,充分混匀后-20℃放置30min,取出15 000rpm,4℃离心30min.(8)弃上清,加入400μl 70%的乙醇,15 000rpm,4℃离心5min.(9)弃上清并倒扣3~5min,然后37℃烘干(30min左右即可).(10)烘干沉淀可用30ml ddH2O溶解,待用.。
废胶处理方法
废胶处理方法
废胶处理是一个非常重要的环节，因为废胶随处可见，已经成为环保的难点之一。
废胶主要来自于轮胎、橡胶管、橡胶鞋、除霜器擦片等废弃物品。
对于废胶的处理，我们可以分为以下几种方法：
1.机械回收：对于废轮胎、橡胶管等大型橡胶制品，我们可以直接采用机械回收的方式进行处理。
将这些大块的废胶加热软化后进行撕碎或切割，然后通过一系列的振动筛分和气流筛分来获得各种粒径的橡胶颗粒，这些颗粒可以用于再生橡胶、橡胶制品的生产，或者用于沥青混合料等建筑材料的生产。
2.化学回收：废胶中的橡胶和其他有机物可以通过化学反应进行回收。
目前，催化剂的研究和应用已经成为了废胶回收的重要途径。
大量的研究已经表明，采用新型催化剂可将橡胶催化裂解变为液体油，供化工企业用于再生橡胶、橡胶制品、油料、香料等方面的生产。
3.热解回收：将废胶暴露于高温环境中，用刻板气氛来分解其组分，从而分离出有用的物质。
热解后的废胶物质可进行基层覆盖等方面的利用。
而对于热解出来的结焦物，通常经粉碎处理后供用于炼钢企业、液化气灶上的燃料。
无论采用何种方式进行处理，废胶的回收利用不仅可以降低环境污染，还能节省原材料，减少社会资源浪费。
因此，我们应该从各个层面上
加强对废胶处理利用的研究，尽可能多的将其回收利用，切实为环保
事业作出贡献。
PCR产物胶回收实验【范本模板】
实验六 PCR产物胶回收实验一、实验目的1。
掌握胶回收的常规操作2. 了解胶回收PCR产物的目的二、实验原理利用胶回收试剂盒纯化PCR产物。
本试剂盒提供一个从TBE或TAE电泳缓冲液配制的琼脂糖凝胶中提取高质量DNA的简单、快速、有效的技术,适合从浓度≤3％，高，低熔点琼脂糖凝胶中，回收长度为60bp~23Kb的DNA片段，小于100bpDNA片段回收率为10％~55％，0。
1~10kbDNA片段回收率最大为99%，大于10kbDNA片段回收率为20~70％。
回收的基因组DNA可以应用到克隆,测序,限制性酶切等各类下游分子生物学实验。
三、试剂及配套设备和材料3.1 试剂Extraction buffer Wash buffer Elution buffer3.2 配套设备和材料无菌1.5ml离心管各种规格移液器和无菌移液器吸头无水乙醇异丙醇可能需要3M KAc (pH 5。
0）离心机四、基本技术参数五、操作步骤1. 用干净、锋利的手术刀，将含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶切下，并放入1。
5或2.0 ml离心管中。
请尽量切去不包含DNA片段的凝胶.一般情况下，电泳的DNA上样量≥50 ul （50ul为最终洗脱体积).2. 按1：3的比例（凝胶质量毫克数:融胶液体积微升数）加入Extraction buffer。
例如:100mg凝胶应加入300ul Extraction Buffer.对于每人份试剂用量，凝胶质量不能超过400mg.3. 于恒温水浴或金属浴中50℃温育，直到凝胶融化。
一般温育时间为10分钟，温育过程中没隔2—3分钟混匀一次.如果温育后，混合液体颜色变紫,请加入10 ul 3M KAc （pH 5。
0），使混合液颜色变回黄色。
4。
可选：按1：1的比例（凝胶质量毫克数：异丙醇体积微升数）加入异丙醇，并混合均匀。
如DNA片段大于500bp/小于4kb,不需要加异丙醇.5。
将混合液全部转移到Spin column内，于6,000g离心1分钟，并弃去接液管内液体.如混合液体积大于750ul可先转移750ul，其余的液体待离心弃液后，再转移.6. 向Spin column内加500ul Extraction Buffer，于12，000g离心30～60秒，并弃去接液管内液体。
废胶处理方法
废胶处理方法引言废胶是指在生产、使用或处理过程中产生的废弃橡胶制品，如废旧轮胎、废橡胶管、废橡胶板等。
由于橡胶制品具有耐磨损、耐腐蚀、弹性好等特性，使得其处理成为一个全球性的环境问题。
本文将介绍一些常见的废胶处理方法，包括回收再利用、焚烧、填埋和物理化学方法。
1. 回收再利用1.1 橡胶粉碎与再加工将废旧橡胶制品进行机械粉碎，得到橡胶颗粒，然后通过加入适量的添加剂和再加工工艺，将其重新制成可用于生产新型橡胶制品的再生橡胶。
这种方法可以最大限度地利用废旧橡胶资源，并减少对原材料的需求。
1.2 橡胶回收利用技术通过高温和高压条件下的物理或化学反应，将废旧橡胶转化为可供再利用的产品。
例如，通过热解方法可以将废胶转化为燃料油、炭黑和钢丝等。
而通过溶解再生法可以将废胶溶解在溶剂中，然后再重新制备出橡胶制品。
1.3 废胶回收利用的优势•减少资源消耗：废胶回收再利用可以减少对新原材料的需求，降低资源消耗。
•减少环境污染：废胶处理过程中产生的废气、废水和固体废物可以得到有效处理，减少对环境的污染。
•节约能源：回收再利用橡胶制品所需的能量比生产新产品要低，可以节约能源。
2. 焚烧2.1 橡胶焚烧工艺将废旧橡胶制品进行高温焚烧，使其完全燃烧，并通过合理的控制工艺参数和排放治理设施，使排放物达到国家标准。
焚烧过程中产生的高温还可以用于发电或供暖，实现能量的综合利用。
2.2 焚烧处理的优势与不足优势：•高效处理：焚烧可以将废胶迅速处理，并将其转化为能量。
•减少体积：焚烧后的废渣体积大大减小，方便后续处理。
•能量综合利用：焚烧过程中产生的高温可以用于发电或供暖，提高能源利用效率。
不足：•燃烧排放物：焚烧过程中会产生一些有害气体和固体废物，需要通过排放治理设施进行处理，以保证排放符合环保要求。
•能耗较高：焚烧过程需要大量能源供应，对环境造成额外负担。
3. 填埋3.1 废胶填埋方法将废旧橡胶制品埋入地下填埋场，并采取覆盖措施，防止有害气体和液体渗漏。
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[转载]胶回收注意事项已有735 次阅读2010-7-7 20:37|个人分类:从零开始学技术|系统分类:科研笔记胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积，我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳，通常只要够点样即可，或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时，要衬以干净的塑料薄膜，使用无DNA污染的新刀片，其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因：胶块未完全溶解，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数辅助溶解；胶块体积太大，应先将其切为小块，分多次回收；电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH结合DNA，如pH太高，应作适当调整；漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低，可利用NaOH适当调高其pH 值，以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验，请确保彻底去除漂洗缓冲液，具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积（小于说明书提供的最小洗脱体积）进行洗脱以提高浓度，因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带，可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高，建议即使只有一条带，也可以切胶纯化，其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因：琼脂糖质量不好；含目的片段的凝胶再空气中放置过久，使胶块失水、干燥，建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃；制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
回收胶水的合同模板
回收胶水的合同模板甲方（收购方）：____________（单位名称）乙方（供应方）：____________（单位名称）根据《中华人民共和国合同法》及相关法律法规的规定，甲乙双方本着互利互惠、诚实信用的原则，经友好协商，就胶水回收事宜达成如下协议：第一条合作内容1.1 乙方同意向甲方提供废弃胶水，在甲方指定的时间和地点进行回收。
1.2 甲方将回收来的胶水进行整理、清洗、处理，并按照约定的价格进行收购。
第二条资质要求2.1 乙方需具备相关的生产、销售资质，并且在国家法律法规许可范围内开展业务。
2.2 乙方需保证提供的废弃胶水符合国家相关标准，不存在有害物质，不得造成环境污染。
第三条交易价格3.1 甲方与乙方约定的胶水回收价格为______元/吨。
3.2 价格若有变动，甲乙双方应在变动前协商一致，并签订书面补充协议。
3.3 乙方应按照甲方规定的结算方式和时间，收取胶水回收款项。
第四条回收流程4.1 废弃胶水交接：乙方按照甲方的要求将废弃胶水送到指定地点，并经过验收确认。
4.2 处理过程：甲方对接收的胶水进行清洗、分类等处理，并进行质量检测。
4.3 结算付款：甲方根据回收的胶水数量和质量进行结算，付款给乙方。
第五条保密条款5.1 甲乙双方在合作中涉及到的涉密信息，包括但不限于商业秘密、技术资料等，应当予以保密。
5.2 未经对方书面同意，任何一方不得向第三方透露或泄露保密信息。
第六条违约责任6.1 若乙方未按照约定时间、数量提供废弃胶水或提供的废弃胶水不符合要求，应承担违约责任。
6.2 若甲方未按照约定支付胶水回收款项或未按照约定将处理结果返还乙方，应承担违约责任。
第七条协议的生效与解除7.1 本协议自双方签字盖章之日起生效，至双方协商一致终止之日止。
7.2 本协议解除时，双方应协商处理尚未解决的问题，保留各自的权利。
第八条争议解决8.1 本协议在履行过程中如有争议，双方应友好协商解决；协商不成，可向有管辖权的人民法院提起诉讼解决。
收胶站的规章制度
收胶站的规章制度一、总则收胶站是指专门从事胶水回收和再利用的企事业单位，为了规范收胶站的运行，确保胶水回收工作的安全、高效进行，特制定本规章制度。
二、收胶站的主要职责1.负责胶水的回收、保管和再利用工作。
2.确保胶水回收过程的环境、设备和产品符合国家相关标准。
3.根据实际情况，制定胶水回收的具体操作流程和工艺，并不断改进和完善。
4.开展胶水回收相关技术的培训和宣传工作，提高胶水回收工作的质量和效益。
5.配合监管部门对胶水回收过程进行检查和验收，并及时改正存在的问题。
三、安全管理1.收胶站要建立健全安全管理制度，制定防火、防爆、防毒、防污染等管理措施，并进行定期检查和评估。
2.所有从事胶水回收工作的人员必须经过专业培训和考核合格后才能上岗。
3.严禁在收胶站内吸烟、违规用火，必须定期检查并维护消防设施和器材的正常运转。
4.胶水回收过程中必须穿戴符合要求的个人防护装备，如安全手套、防护眼镜、口罩等。
5.特殊领域的胶水回收操作，必须经过专业人员的指导和监督。
四、环境保护1.收胶站必须符合国家相关环境保护政策和标准，建立健全环境监测和治理体系。
2.胶水回收过程中产生的废气、废水和废渣必须经过正确处理和处置，并且达到国家相关排放标准。
3.收胶站必须定期清洁场地和设备，保持整洁，减少环境污染。
4.收胶站内禁止乱倒废弃胶水或将其倒出场地，必须按规定进行集中收集和处理。
五、设备维护1.收胶站必须按照相关规定检查、维护和保养收胶设备和防护设备，确保其正常运转和安全使用。
2.维修工作必须由经过培训合格的专业人员进行，严禁私自拆卸、改装设备。
3.维修设备必须依据使用说明书和工作规范进行操作，防止人身伤害和设备故障。
六、纪律要求1.所有从事胶水回收工作的人员必须严格遵守工作纪律和操作规程，不得擅自改变工艺或违规操作。
2.必须按规定穿戴工作服装，严禁穿戴过于宽松、易燃易爆或与工作环境不相符的服装。
3.不得在工作过程中饮食，不得携带易燃、易爆、有毒等危险物品进入作业场所。
切胶回收注意事项
胶回收DNA注意事项胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积，我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳，通常只要够点样即可，或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时，要衬以干净的塑料薄膜，使用无DNA 污染的新刀片，其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因：胶块未完全溶解，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数辅助溶解；胶块体积太大，应先将其切为小块，分多次回收；电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH结合DNA，如pH太高，应作适当调整；漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低，可利用NaOH适当调高其pH值，以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验，请确保彻底去除漂洗缓冲液，具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积（小于说明书提供的最小洗脱体积）进行洗脱以提高浓度，因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带，可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高，建议即使只有一条带，也可以切胶纯化，其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因：琼脂糖质量不好；含目的片段的凝胶再空气中放置过久，使胶块失水、干燥，建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃；制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
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胶回收
一. 提高胶回收量的办法：
1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul （PH 5.0，3mol/L的 NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7）加洗脱液之前，将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以
使乙醇充分挥发。
8）最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液
洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充
分洗脱结合在膜上的DNA。
9）可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴
10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10）将离心后的洗脱液加回吸附柱，再次离心。
DNA胶回收实验技术总结
胶回收
一. 提高胶回收量的办法：
1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul（PH 5.0，3mol/L的 NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7）加洗脱液之前，将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以使乙醇充分挥发。
8）最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反
而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9）可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10）将离心后的洗脱液加回吸附柱，再次离心。
二. 几种PCR 产物回收的详方法和步骤
1）普通胶回收
如果要胶回收，最好还是用试剂盒，方便，回收率也略高，实在要手工回收，可以切胶后加入3倍体积TE，水浴熔化后，酚、酚／氯仿抽提干净，乙醇沉淀即可。
另外好像还有冷冻法，没作过，不是很清楚。
2）从低熔点凝胶回收DNA
纯化DNA片段加与凝胶体积相等的TE（10mmol/l Tris-HCl pH8.0，0.1mmol/l EDTA），置65℃水浴5
分钟保温，使凝胶完全溶解。
待放至室温，加等量酚（TE饱和，TE封在上层，取下层酚），轻轻混匀（不用混匀），12000rpm，3分钟离心。
反复1-2次。
取上层液，加0.1体积3mol/L醋酸钠（pH5.2）和2.5倍体积无水乙醇，进行乙醇沉淀。
将纯化的DNA加适量TE溶解，测定含量，备用（可用于目的基因结构分析，探针制备等）。
3）扩增特异性好的PCR回收
如果PCR扩增特异性好，只是简单的PCR产物纯化回收，可以在PCR产物中加入50ug／ml 的蛋白酶K，37度1h，酚／氯仿抽提一次，氯仿抽提一次，上清加入0.1体积的醋酸钠，2.5体积的无水乙醇沉淀回收。
三. 不需胶回收就可直接连接的方法。