组织学与胚胎学-绪论
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检测组织活细胞中有无多糖存在。
原理: 多糖 PA
氧化
Schiff
醛 试剂
紫红色沉淀
☆酶类显示法
☆脂类显示法
☆核酸显示法
PAS反应,小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒
(四)、免疫组织化学和细胞化学技术
利用抗原(antigen, Ag ),抗体(antibody )特异 结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法 。
一、组织学研究内容 组织学(histology ):
----研究机体微细结构及其相关功能的科学
机体—细胞、组织、器官、系统 方法—利用显微镜观察组织切片
构成人体的基本组织有四大类
上皮组织
结缔组织
神经组织 肌组织
器官是由不同的组织发育分化而成
肌组织
上皮组织
神经组织
结缔组织
研究内容
细胞 (cell)
? 常用标记物有放射性核素和地高辛
(六)、细胞培养
实验中的组织工程耳
(七)、共焦激光扫描显微镜 (八) 、放射自显影术( autoradiography ) (九) 、图像分析术( image analysis ):
又称体视学 (十) 、组织工程术( tissue engineering )
三、组织胚胎学在基础医学中的地位
可被苏木精染成蓝紫色。
嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。
可被伊红染成红色。
中 性:对于两种燃料亲和力பைடு நூலகம்
都不强的性质。 HE 染色着色淡。
HE 染色
★其他染色:
硝酸银染色:组织经硝酸银处理,呈棕
黑色,主要用于神经组织和内分泌细胞研究
重铬酸盐染色法
异染性 : 肥大细胞中的颗粒经甲苯胺蓝等蓝色染料染色 后,呈紫红色,称为异染性。
? 冰冻蚀刻 (freeze etching method ) 观察细胞断裂表面的形态结构
? 分析电镜 X-射线显微分析术(analytical electron micro-scope ) 研究细胞、组织内元素种类分布和含量
TEM,浆细胞
SEM ,纤毛
SEM ,微绒毛
透射电子显微镜
1.电子密度高 (electron dense) 电子束投射到密度大的样品,
? 组织学 =显微解剖学 ?? 大体 to 微细
?不同组织的功能 ?? 生理学(physiology)
?正常与异常 ?? 病理学(pathology)
?临床课的基础 ?For a good doctor needed in future
四、组织学的学习方法
1. 尽可能多地观察切片、插图、图谱、网上 图库等。注意观察角度、倍率、染色方法
载玻片
标签
组织标本 盖玻片
石蜡切片:
取材? 固定? 脱水透明 ? 浸蜡包埋 ? 切片? 染色? 封片
最常用的染色方法是: 苏木精-伊红染色( HE染色) ? 苏木精(hematoxylin):
碱性染料,能将细胞核染成蓝紫色。
?伊红(eosin):
酸性染料,能将细胞质染成红色。
组织结构的嗜色性
嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。
可将物体放大几千到几十万倍。
人眼 普通光镜 透射电镜 扫描电镜
分辨率 0.2 mm 0.2 μm 0.1~0.2 nm 2.5 nm
? 透射电镜术 (transmission electron microscopy, TEM) 观察组织细胞的内部结构
? 扫描电镜术 (scanning electron microscopy, SEM) 观察组织细胞表面的立体结构
辣根过氧化物酶标记 荧光素标记
(五)、原位杂交技术(in situ hybridization )
? 特异性核酸组织化学术检测基因(DNA片段)的有无、 及在转录水平检测基因的活性(mRNA) 。
? 原理:用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待 测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合(杂交),并 通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量
体发生、发育、发展及其机理的科学。
二、组织学常用研究技术
(一)一般光学显微镜技术 (简称光镜 light microscopy, LM )
分辨率为0.2 μ m 可将组织放大 1500倍左右。
目镜
镜臂
物镜
聚光器
光源 显微镜的构造
载物台 粗细调 节螺旋
镜座
显微镜镜下观察组织,必须 制作成组织标本
细胞骨架
胞
糖元
包涵物
脂滴
色素
细胞核
核膜-核孔
核仁
核基质 染色质
常染色质 异染色质
核被膜
核外膜 核周隙
核内膜 核孔 核质侧—核纤层(支架)
细
染色质
常染色质—功能活跃 异染色质—功能静止
胞
遗传物质DNA和组蛋白在细胞间期的形态
核
细丝
核 仁 颗粒
相随染色质
核基质
核液 核骨架
胚胎学( Embryology )是研究生物个
电子散射多,投射到荧光屏上的电 子少而呈暗像,电镜照片上则呈黑 色,称电子密度高。 2.电子密度低 (electron lucent )
反之,称电子密度低。
(三)、组织化学和细胞化学技术
☆糖类显示法——PAS反应:过碘酸—Schiff 反应,简称PAS反应
(periodic acid Schiff reaction )
?“将知识装进大脑,将垃圾打包带走”
组织学 与胚胎学
Histology and Embryology
基础医学院形态学教研室 程艳华
第1章 绪 论
重点:组织学的定义 人体的基本组织 石蜡切片术 HE染色
?实验考试: 20分 ?期中考试: 20分 ?期末考试: 60分
考试模式
100 分
第1章 绪 论
2. 深入思考,注意三个关系 平面与立体 多角度直观与合理想象 静态与动态 随机能状态而变化 结构与功能 辩证统一
? 其他常用的制片方法
? 冰冻切片 ? 涂片、铺片 ? 磨片
? 其它光学显微镜技术:
? 荧光显微镜 ? 相差显微镜 ? 暗视野显微镜 ? 激光扫描共聚焦显微镜
(二)电镜技术
(electron microscope EM ,简称电镜 ) 以电子束代替光源,以磁场代替透镜,进行聚集和放大, 最后将物体的影象投射到荧光屏或照相底片上。 分辨率为0.2nm
细胞间质
组织 (tissue)
上皮组织 (epithelial tissue) 结缔组织 (connective tissue) 肌肉组织 (muscle tissue) 神经组织 (nerve tissue)
器官、系统
线粒体
细胞膜
内质网 核糖体
细胞器
高尔基复合体 溶酶体
微体
细
细胞质 细胞基质 中心体