黑曲霉
黑曲霉基因组和柠檬酸生产菌种改造护理课件
发酵工艺优化
讨论如何通过调整培养基成分、 温度、pH等参数，优化黑曲霉 发酵生产柠檬酸的过程。
菌种筛选与改良
阐述如何通过选择性培养基和 基因敲除等技术筛选高产柠檬 酸的菌种，以及如何对菌种进 行遗传改良。
产物提取与纯化
介绍柠檬酸提取和纯化的常用 方法，如离子交换、电渗析、 结晶等。
黑曲霉基因组和柠檬酸生产菌种改造的护理实例
基因表达调控优化发酵
利用CRISPR-Cas9系统对关键酶编码 基因进行调控，优化发酵过程。
03 黑曲霉基因组在柠檬酸 生产菌种改造中的应用
黑曲霉基因组在柠檬酸生产菌种改造中的作用
提高柠檬酸产量
通过基因工程技术对黑曲霉基因组进行改造，可以增强其柠檬酸 合成酶的活性，从而提高柠檬酸的产量。
优化发酵过程
黑曲霉基因组和柠檬酸生 产菌种改造护理课件
目 录
• 黑曲霉基因组概述 • 柠檬酸生产菌种改造 • 黑曲霉基因组在柠檬酸生产菌
• 黑曲霉基因组和柠檬酸生产菌
01 黑曲霉基因组概述
黑曲霉基因组的基本特征
01
02
03
染色体数量
黑曲霉含有多个染色体， 通常为六到八个染色体。
基因组大小
每个染色体的基因组大小 在15-25Mb之间。
黑曲霉基因组的研究进展
全基因组测序
随着测序技术的发展，黑曲霉的 全基因组测序已经完成，为研究 其生物学特性提供了全面的分子 基础。
基因编辑技术
近年来，CRISPR-Cas9等基因编 辑技术被应用于黑曲霉基因组的 编辑，为改良其生产性能和耐受 性提供了有力工具。
02 柠檬酸生产菌种改造
柠檬酸生产菌种改造的必要性
提高柠檬酸产量
黑曲霉的发展历程
黑曲霉的发展历程
黑曲霉最早可以追溯到公元前3000年的古埃及时期。
当时，
人们意外地发现面团在发酵过程中变黑，产生了一种奇特而美味的香味。
然而，人们并不了解这种黑色霉菌的真正来源和发酵机制。
随着时间的推移，黑曲霉逐渐被用于食品加工。
在中国，黑曲霉是酱油和豆瓣酱等传统调味品的重要成分。
在日本，黑曲霉被广泛应用于酱油、味噌汤和其他传统食品的制作过程中。
黑曲霉能够产生丰富的酶和香气物质，为这些食品增添了风味和口感。
然而，直到20世纪初，人们对黑曲霉的掌控仍然非常有限。
这是因为黑曲霉存在多种亚种，每种亚种都有着不同的发酵特性和产物生成能力。
为了进一步了解黑曲霉的发酵机制和利用价值，科学家们开始对黑曲霉进行深入研究。
经过多年的努力，科学家们逐渐揭示了黑曲霉发酵的基本原理。
他们发现黑曲霉能够通过代谢产生一系列有机酸、氨基酸和香气物质，这些物质对食品的风味和营养价值具有重要作用。
通过对黑曲霉的改良和优化，科学家们成功地开发出了一系列高效的黑曲霉株，为食品行业带来了巨大的发展机遇。
如今，黑曲霉已成为食品工业中不可或缺的一部分。
除了传统的调味品之外，黑曲霉还被广泛应用于肉制品、食品添加剂、保健品等领域。
科学家们也在不断探索黑曲霉在生物制药和环境修复等方面的潜力。
总之，黑曲霉作为一种重要的霉菌资源，经历了从未知到被利用的发展历程。
科学家们通过不断的研究和改良，使得黑曲霉在食品工业中发挥了巨大的作用，为人们带来了更美味和健康的食品。
黑曲霉菌落特征
黑曲霉菌落特征黑曲霉是一种广泛存在于自然界中的真菌，其在食品、药品、化妆品等领域中具有重要的应用价值。
在实验室中，人们经常利用黑曲霉来进行发酵、合成有机化合物等研究。
本文将重点介绍黑曲霉菌落的特征。
一、黑曲霉的基本特征黑曲霉是一种革兰氏阳性菌，其菌丝多为单核性，呈灰色至黑色。
黑曲霉的生长温度范围较广，一般在15-40℃之间可以生长，但在20-30℃时生长最佳。
黑曲霉对氧气需求较高，需要在氧气充足的环境中生长。
黑曲霉在菌落形态上呈现出明显的特征。
其菌落表面为光滑、平整，呈现出深灰色至黑色的颜色。
菌落边缘呈现出半透明的颜色，有时会出现白色的霉毛。
黑曲霉菌落的直径一般在1-3厘米之间，但在适宜的培养条件下，其直径可达到5-6厘米。
二、黑曲霉菌落的形态特征黑曲霉菌落的形态特征是其最为显著的特点之一。
在培养基上生长的黑曲霉菌落表现出明显的变化。
在最初的生长阶段，黑曲霉菌落呈现出灰色至浅灰色的颜色，表面平整光滑。
随着时间的推移，黑曲霉菌落的颜色逐渐加深，变为深灰色至黑色，而且表面会出现裂纹、皱褶等不规则形态。
黑曲霉菌落的形态特征还包括其菌丝的形态。
在黑曲霉菌落的中央区域，菌丝呈现出放射状生长的形态，而在周边区域，菌丝则呈现出不规则分支的形态。
黑曲霉菌丝的直径一般在2-3微米之间。
三、黑曲霉菌落的生长条件黑曲霉菌落的生长条件主要包括温度、湿度、营养物质等方面。
在适宜的生长条件下，黑曲霉菌落可以生长得很快，形成大片的菌落。
黑曲霉对温度的适应范围较广，一般在15-40℃之间可以生长，但在20-30℃时生长最佳。
黑曲霉对湿度的要求较高，需要在相对湿度在80%以上的环境中生长。
此外，黑曲霉还需要一定的营养物质来维持其生长和代谢，包括碳源、氮源、矿物质等。
四、黑曲霉菌落的应用价值黑曲霉在食品、药品、化妆品等领域中具有广泛的应用价值。
在食品方面，黑曲霉可以用来制作豆腐乳、臭豆腐等发酵食品，其所产生的多种酶可以增强食品的口感和营养价值。
霉菌名词解释
霉菌名词解释霉菌是一类微生物，它们是真菌界中的一种。
霉菌是一种单细胞或多细胞的生物，它们通常以孢子的形式存在。
霉菌在自然界中广泛分布，可以生长在土壤、水、植物、动物和人类身上。
霉菌可以分解有机物质，也可以引起疾病。
以下是一些常见的霉菌名词解释：1. 黑曲霉（Aspergillus niger）黑曲霉是一种广泛存在于自然界中的真菌，它们通常生长在植物和土壤中。
黑曲霉可以分解有机物质，也可以用于制作酶和酸。
此外，黑曲霉还被用于制作一些食品和饮料，如黑啤酒和黑曲霉豆腐。
2. 霉菌素（Myco-toxin）霉菌素是一种由霉菌分泌的毒素，它们可以在食品和饲料中被发现。
霉菌素可以引起广泛的健康问题，包括呼吸道感染、肝脏损伤和肾脏损伤。
霉菌素的危害在于它们可以在食品和饲料中积累，因此需要采取措施来避免霉菌素的污染。
3. 霉菌感染（Mycosis）霉菌感染是一种由霉菌引起的疾病，它们通常影响皮肤、毛发和指甲。
霉菌感染可以通过直接接触感染源或在潮湿环境中感染。
霉菌感染的治疗通常包括使用抗真菌药物。
4. 霉菌病（Mycotoxicosis）霉菌病是一种由霉菌素引起的疾病，它们通常通过食品和饲料中的霉菌素污染引起。
霉菌病的症状包括恶心、呕吐、腹泻、头痛和发热。
霉菌病的治疗通常包括使用抗真菌药物和支持性治疗。
5. 霉菌培养基（Mycological media）霉菌培养基是一种用于培养霉菌的营养基质，它们通常包括葡萄糖、酵母提取物和肉汤。
霉菌培养基可以用于分离和鉴定霉菌，以及研究霉菌的生长和代谢。
6. 真菌感染（Fungal infection）真菌感染是一种由真菌引起的疾病，包括霉菌感染和酵母菌感染。
真菌感染通常影响皮肤、呼吸道、消化道和泌尿生殖系统。
真菌感染的治疗通常包括使用抗真菌药物和支持性治疗。
7. 真菌学（Mycology）真菌学是研究真菌的科学，包括霉菌和酵母菌。
真菌学涉及真菌的形态、生长、代谢和分类等方面的研究。
黑曲霉的发展历程
黑曲霉的发展历程黑曲霉是一种常见的真菌，它的发展历程可以追溯到几千年前的古代。
黑曲霉最早是在古埃及时期被人们发现的。
那个时候，人们发现在存放粮食和谷物的仓库中会出现一种黑色的霉菌，这种霉菌会迅速繁殖，导致粮食腐败并产生毒素。
那个时候，人们还不了解黑曲霉的危害性，只是简单地将感染的粮食丢弃掉，没有进行深入的研究。
在19世纪初的英国，科学家开始对黑曲霉进行研究。
他们发现黑曲霉所产生的毒素可以对人和动物造成严重的健康问题，包括肝脏损伤、免疫系统抑制和癌症等。
这些研究结果引起了人们的广泛关注，使得对黑曲霉的研究得到了更多的投入和重视。
随着科学技术的发展，人们对黑曲霉的了解日益加深。
科学家发现，黑曲霉除了对粮食和谷物的感染外，还可以在一些食品和饮料上生长，比如面包、奶酪和啤酒等。
他们还发现黑曲霉所产生的毒素可以通过食物链进入人类体内，对人的健康产生潜在影响。
为了保护人类健康，许多国家和地区都制定了严格的黑曲霉监测和控制标准。
食品加工企业采取了一系列预防措施，包括改良种植和储存技术、加强食品检测和处理等。
此外，消费者也需要加强自我保护意识，注意食品的选择和储存，避免食用感染黑曲霉的食物。
随着时间的推移，黑曲霉的研究逐渐向着更深层次发展。
科学家发现，黑曲霉不仅可以对粮食和食品造成危害，还可以用于生物工程和医学研究。
黑曲霉可以产生一些重要的生化物质，比如抗生素、酶和代谢产物等。
科学家利用黑曲霉的这些特性，开展了许多相关研究，并取得了重要的成果。
未来，黑曲霉的研究还将继续进行。
科学家将继续探索黑曲霉的生长和繁殖机制，寻找新的应用领域，并为黑曲霉的监测和控制提供更有效的技术和方法。
相信在不久的将来，黑曲霉的发展历程将会取得新的进展，为保护人类健康和推动科学研究做出更大的贡献。
黑曲霉的使用范围
一、黑曲霉在发酵饲料方面的应用：《2014年饲料添加剂目录》有关于黑曲霉可以直接添加使用的决定。
1、黑曲霉能够提高发酵后饲料的营养水平和消化吸收率。
本品所含的微生物能分解饲料中的大分子糖类为单糖和寡糖,并生成多种有机酸、维生素、生物酶、未知生长因子，大大提高了发酵饲料的营养水平和消化吸收率；2、使饲料脱毒。
通过微生物自身的生命活动，使饲料内所含的有毒有害物质被降解而脱除，从而大大提高了饲料的安全性；3、提高动物的抗病力。
本品所含的微生物直接参与动物肠道的屏障作用，补充动物肠道有益微生物的数量，通过生物竞争机制阻止病原微生物的定植和生长繁殖.恢复和维护动物肠道的微生态平衡，从而提高动物的免疫力和抗病能力；4、提高饲料的适口性，显著增加食欲。
在饲料中添加本产品可以提高饲料利用率、提高动物的生产性能，降低生产成本，改善养殖环境。
黑曲霉在发酵剂方面还能发酵能量饲料、蛋白饲料、粗饲料等所有种类饲料。
发酵的饲料既适用于猪、牛、羊等家畜动物，又适用于鸡、鸭、鹅等家禽动物，而且适用于鱼虾水产、黄粉虫昆虫等各种动物。
发酵饲料能使饲料解毒脱毒，大大提高饲料的安全性，而且在发酵的过程中会产生淡淡的香味，从而增加了动物的适口性；发酵过程中还能生成多种有机酸、维生素、生物酶、氨基酸及其他多种未知生长因子，大大提高了发酵饲料的营养水平和消化利用率；提高动物的抵抗力，降低饲料成本。
二、黑曲霉孢子粉使用说明：《2014年饲料添加剂目录》有关于黑曲霉可以直接添加使用的决定。
产品优势：1.孢子含量高，便于产品的存放2.产品有效菌对环境的适应性强3.孢子的发酵再生能力高产品用途：1.用于生物肥料秸秆腐熟剂等发酵时添加；2.用于复合微生物肥料接种剂；3.用于禽畜的粪便、有机垃圾发酵剂；4.用于动物饲料发酵时添加；产品配方：麦片、豆皮、微量元素、纯种米曲霉/黑曲霉菌株等。
使用量：万分之三到万分之五，即每吨加300克——500克（根据实际菌孢子量和生产工艺的要求添加）。
菌种报告-黑曲霉
菌种报告—黑曲霉一、黑曲霉简介①、黑曲霉（Aspergillus niger）属于半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属真菌中的一个常见种。
可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等，是重要的发酵工业菌种。
②、培养温度23～28℃，好氧二、使用注意事项①、是四类病原微生物，即在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。
但由于生长快速，极易通过空气扩散污染环境，对产品的生产检验人员与环境构成威胁。
故操作过程要在阳性室生物安全柜中进行。
②、所有的培养物、储存物及其它的废物在释放前，均应121℃，30min湿热蒸汽灭菌。
实验结束后，用0.1%的新洁尔灭擦拭台面，照紫外消毒。
菌种保存方案—黑曲霉（Aspergillus niger）1、实验材料：器具：-80℃冰箱，2～8℃冰箱，试管，电动助吸器，锥形瓶，恒温培养摇床，1ml移液管，10ml移液管，冷冻管，振荡器，棉塞，接种环，250ml盐水瓶，500ml 盐水瓶试剂：冻干菌种，改良马丁培养基，改良马丁琼脂培养基，TSA平板，SDA平板，20%甘油，含0.05%（v/v）聚山梨酯80的生理盐水2、实验步骤：2.1 菌种复苏和复壮（改良马丁培养基）2.1.1 将干菌种（0代）按上述步骤转移到装有100ml改良马丁液体培养基的锥形瓶中复苏（第1代），23～28℃摇床震荡培养5天。
2.1.2 用接种环挑起活化后的孢子悬液，划线到改良马丁琼脂斜面复壮，接种10支试管（第2代），23～28℃静置培养5～7天。
2.1.3 向每支试管中加入5ml含0.05%（v/v）聚山梨酯80的生理盐水，反复吹打洗脱孢子。
将孢子悬液全部转移至250ml盐水瓶中，2～8℃冻存备用。
2.2 稀释倍数探索2.2.1 取1ml孢子悬液加入9ml生理盐水中，混匀得10-1管，同法依次稀释至10-6。
2.2.2 取10-3～10-6梯度稀释孢子悬液，1ml涂布SDA平板，各做3个平行。
黑曲霉的分离
黑曲霉的分离筛选一、实验简介黑曲霉广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。
黑曲霉的最适温度为37℃，黑曲霉对营养要求较低,只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素即能生长良好，实验中采用察氏培养基进行培养。
黑曲霉的菌落蔓延迅速，但生长稍局限，菌丝初为白色，后变成鲜黄色直至黑色厚绒状，背面无色或中央略带黄褐色。
顶部形成球形顶囊，其上全面覆盖一层梗基和一层小梗，小梗双层褐色，梗基较短，上长有成串褐黑色的球状分生孢子。
孢子直径2.5～4.0μm。
分生孢子头球状，直径700～800μm，褐黑色。
黑曲霉的个体形态和菌落形态都比较特殊，容易分辨，可利用平板划线法或稀释涂布法，得到单菌落，并结合显微镜检测，多步鉴定、纯化，得到的纯的菌种。
二、实验试剂与材料1、材料：黑曲霉孢子悬浮液2、溶液和试剂：硝酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁、蔗糖、琼脂、1mol/L氢氧化钠溶液、1mol/L氯化氢溶液、75%乙醇、乙醇乙醚混合液、溴甲酚绿、水。
3、器材和其他用品：三角瓶、试管、搪瓷杯、培养皿、接种环、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅、试管架、载玻片、盖玻片、光学显微镜、恒温培养箱、纱布、牛皮纸、滤纸、pH试纸、擦镜纸。
三、实验步骤和过程1、无菌器材及无菌水的准备1.1 培养皿：洗净的培养皿烘干后，每组将5套培养皿叠在一起，用报纸卷成一筒，然后进行灭菌。
注意，一定要卷紧。
1.2 试管：做合适的棉塞，每组捆扎5支试管，用报纸包在一起后，用线绳扎紧，扎成活结，另一头再用皮筋扎好，然后进行灭菌。
1.3 三角瓶：在三角瓶瓶口塞一八层纱布，盖上牛皮纸，用线绳扎成活结，然后进行灭菌。
注意，装入的培养基不超过三角瓶的1/2。
上述物品均要用记号笔注明班级、组别、日期。
1.4 高压蒸汽灭菌2、查氏培养基的配制称量→熔化→定容→调pH→分装→加塞→包扎标记→灭菌→搁置斜面与倒平板→无菌检查培养基配方：硝酸钠3g 磷酸氢二钾1g 硫酸镁（MgSO4·H2O）0.5g 氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g 蔗糖30g 琼脂20g 蒸馏水1000ml pH5.0-6.0 2.1 称量：按照培养基配方，依次准确地称取药品，放入搪瓷杯中。
黑曲霉发酵条件
黑曲霉发酵条件1. 嘿，你知道黑曲霉发酵不？这就像一场神秘的魔法秀呢！温度啊，那可是关键得很。
就好比咱们人，太热了会烦躁，太冷了会打哆嗦。
黑曲霉发酵也一样，温度不合适，它就不好好干活。
我有个朋友，搞这个发酵，温度没控制好，结果那黑曲霉就像闹脾气的小孩，产量低得可怜。
2. 咱再说说湿度这事儿，黑曲霉发酵的时候，湿度就像它的小窝的舒适度。
你想啊，要是你住的地方又干又燥或者又湿又潮，你能舒服吗？肯定不能啊！这黑曲霉也是，湿度不合适，它就没法大展身手。
我邻居尝试发酵的时候，湿度没弄对，那黑曲霉就像霜打的茄子，焉巴巴的。
3. 黑曲霉发酵还离不开合适的营养物质呢。
这营养物质就像是它的美食，没有美食，它哪有力气干活呀。
就好比你饿着肚子，能精神饱满地工作吗？不可能嘛！我认识的一个大叔，在给黑曲霉准备营养物质的时候出了岔子，结果那黑曲霉就像没吃饱饭的工人，发酵得一塌糊涂。
4. 还有啊，氧气对黑曲霉发酵也很重要。
氧气就像黑曲霉的呼吸通道，要是把它的呼吸通道堵住了，那可就糟糕了。
这就像把你的鼻子嘴巴捂住，你能好受吗？肯定不好受呀。
我见过有人在发酵时没控制好氧气量，那黑曲霉就像被掐住脖子的人，奄奄一息，发酵根本进行不下去。
5. 发酵的时间也是个大学问。
黑曲霉发酵的时间啊，就像煮一锅好菜的火候时间。
时间短了，菜不熟；时间长了，菜就糊了。
黑曲霉发酵也一样，时间没把握好，要么没发酵好，要么就发酵过头了。
我有个同学做实验，没注意时间，最后那黑曲霉发酵的结果，就像一锅烧焦的菜，完全失败了。
6. 培养基的酸碱度对黑曲霉发酵影响可不小呢。
这酸碱度就像黑曲霉生活的土壤酸碱度，太酸或者太碱，就像把你扔到特别恶劣的环境里，你能好好生存吗？肯定不能啊。
我之前看过一个报道，有个实验室的酸碱度没调好，那黑曲霉就像在毒药里生存一样，死的死，病的病，发酵根本没法成功。
7. 搅拌也是黑曲霉发酵过程中容易被忽视的环节。
搅拌就像是给黑曲霉做按摩，让它能均匀地接触各种条件。
黑曲霉形态观察注意事项
黑曲霉形态观察注意事项
黑曲霉是一种常见的真菌，具有许多重要的生物活性成分，因而广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。
为了更好地了解黑曲霉的形态特征，我们需要注意以下几点：
一、样品的采集及处理
样品的采集应遵循一定的规范，避免人为的操作对样品带来的污染。
对于不同类型的样品，处理方式也可能不同，如：对于食品、化妆品等样品，可以通过高温灭菌的方法来杀死潜在的生物病原体；对于土壤、空气等样品，则需要通过不同的方法来清洗、过滤，以减少杂质和干扰因素的干扰。
二、培养基的选择
培养基的选择应根据所研究的黑曲霉的生长需求来选择。
常用的培养基有马铃薯葡萄糖琼脂、玉米粉葡萄糖琼脂等。
不同的培养基不仅影响到黑曲霉的形态特征，还会影响到其生物活性成分的产生和含量。
三、观察条件的控制
对于黑曲霉形态观察，需要控制环境温度、湿度、光照等条件，以确保黑曲霉能正常生长并显示其形态特征。
温度通常控制在25-30℃之间，湿度控制在60-80%左右。
合适的光照条件也有利于观察和照相。
四、形态特征的观察
黑曲霉的形态特征主要包括白色菌丝、黑色分生孢子的产生和分布情况等。
观察时需要用放大镜或显微镜加以辨别。
白色菌丝通常呈菜花状或网状分布，黑色分生孢子则形成束状或球形的结构，具有不同大小的孢子。
通过观察菌丝和孢子的形态特征可以确定黑曲霉的种类。
总之，对于黑曲霉形态观察，需要注意样品的采集及处理、培养基的选择、观察条件的控制和形态特征的观察。
这些措施有助于更好地了解黑曲霉的形态特征，从而为其应用和研究提供有力支持。
黑曲霉使用说明
储存温度：-‐80℃
基 因 组 ：
黑曲霉
简 介 ：
黑曲霉，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属真菌中的
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 ：
用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌 株 复 溶 ：
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取 1ml 左右复溶液，加入到冷冻
管中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培
一个常见种。广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。是重要
的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄
糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等。有的菌株还可将羟基孕甾酮转
化为雄烯。生长适温 37℃，最低相对湿度为 88%，能引致水分较高的粮
食 霉 变 和 其 他 工 业 器 材 霉 变 。
操 作 说 明 ：
1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数
的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆
养。细菌在 30-‐35℃培养箱中培养 24-‐48h，真菌在 23-‐28℃培养箱中培养 24-‐72h
（必要时，可适当延长培养时间）。
菌 株 传 代 ：
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量
增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓
黑曲霉
编号 名称 ຫໍສະໝຸດ 北京华越洋生物 NRR00430
黑曲霉菌落特征
黑曲霉菌落特征黑曲霉（Aspergillusniger）是一种常见的真菌，广泛分布于自然界中，尤其是在土壤、植物和食品等环境中。
它是一种非常重要的工业微生物，可以用于生产多种化学品和酶。
此外，黑曲霉也是一种致病菌，会引起人和动物的感染。
因此，对黑曲霉的研究十分重要。
黑曲霉的营养基质很广，包括各种植物和动物的残渣、玉米、糖蜜、麦芽等。
它可以在不同的环境中生长和繁殖，但是它的生长需要一定的条件。
黑曲霉需要适宜的温度、水分和pH值等条件才能生长和繁殖。
在适宜的条件下，黑曲霉的生长速度非常快，可以在短时间内形成大量的菌落。
黑曲霉的菌落特征可以用于鉴定和分类。
黑曲霉的菌落通常呈现出黑色或暗棕色，有时会出现灰色或绿色。
黑曲霉的菌落表面比较光滑，有时会出现皱纹或裂缝。
黑曲霉的菌落边缘比较整齐，有时会出现不规则的形状。
菌落的直径通常为2-4厘米，但是在适宜的条件下，菌落可以达到10厘米以上。
黑曲霉的菌落形态也有一定的变异性。
在不同的营养基质和环境条件下，黑曲霉的菌落形态会有所不同。
有些黑曲霉的菌落呈现出浅色或白色，这可能是因为它们生长在不同的营养基质上，或者是因为它们缺乏某些必需营养物质。
此外，黑曲霉的菌落形态还可能受到其他微生物的影响，比如与其他菌株竞争时，黑曲霉的菌落可能会变得更小或更不规则。
除了菌落特征之外，黑曲霉的生长和繁殖还有其他特征。
例如，黑曲霉的孢子呈球形或椭圆形，通常呈黑色或暗棕色。
黑曲霉的菌丝比较细长，通常呈白色或浅灰色。
黑曲霉的产酸特征也比较显著，它可以产生大量的有机酸，例如柠檬酸、苹果酸和酒石酸等。
总之，黑曲霉是一种非常重要的微生物，具有广泛的应用价值。
对于黑曲霉的鉴定和分类，可以通过观察其菌落特征、孢子形态、菌丝形态和产酸特征等来进行。
这些特征不仅可以用于鉴定和分类，还可以用于研究黑曲霉的生长和繁殖机制，进一步探索其应用价值。
黑曲霉
化饲料的菌种。可用来测定锰、铜、钼、锌等微量元素和作
为霉腐试验菌。
黑曲霉的危害：
在高温、高湿环境下，黑曲霉容易大量生长
繁殖产酶生热，侵染棉花时引起落花或烂铃，
或生于多汁的果实上，引起腐烂或软腐，侵染 洋葱鳞片表面生大量黑粉；梅雨季节亦容易引 起衣物发霉等。
洋葱黑曲霉病
分布 ： 分布较广，发生较普遍。 侵染循环 ： 病菌以菌丝体在土壤中的病残体上存活越冬。 发病条件 ： 翌春产生分生孢子借气流传播，从伤口或穿透 表皮直接侵入，高温、高湿条件或土温变化激烈时易发病。 危害部位 ： 球茎。 危害症状 ：洋葱收获后至贮藏期，在球茎表面生褐色至黑色 斑，病菌在球茎表面扩展，有的侵入1-2个鳞片，初呈褐色 水演状，后干燥，长出黑霉，即病原菌子实体。 防治方法 ： 1.重病地块避免连茬种植。采用高畦或高垄栽培。 2.施用充分腐熟的有机肥，氮、磷、钾肥配合施用。防止大 水漫灌，雨后及时排水。发病初期及时清除病株带到田外妥 善处理。
黑曲霉在农业生产中的应用
原理及意义：细菌多属于非发酵菌株，生物有机肥中的 细菌成分只起到腐殖降解作用，除此之外还需深层发酵 达到营养转化，这就需要霉菌、酵母菌等菌株的后续催 化酶解，从而达到叶落归根。 用途：1、生物有机肥料发酵剂。 2、秸秆腐熟剂和畜禽粪便、有机垃圾发酵剂。 3、复合微生物肥料接种剂。 配方：黑曲霉等多种菌株，经特殊培养基质诱导，纯种 大培养、混合复配精制而成。
菌丛呈黑褐色，顶囊大球形，小梗双层，分生 孢子为球形，呈黑、黑褐色，平滑或粗糙。对 紫外线以及臭氧的耐性强。菌丝发达，多分枝， 有多核的多细胞真菌。分生孢子梗由特化了的 厚壁从膨大的菌丝细胞（足细胞）上垂直生出； 分生孢子头状如“菊花”。黑曲霉的菌丝、孢 子经常呈现各种颜色，如：黑、棕、绿、黄、
黑曲霉菌产孢子营养条件
黑曲霉菌产孢子营养条件
黑曲霉菌（Aspergillus niger）是一种广泛存在于环境中的真菌，常见于土壤、水体、植物和食品中。
黑曲霉菌产孢子的营养条件如下：
1. pH值：黑曲霉菌的最佳生长pH范围为3.5-6.0，但它可以
在pH范围为2.0-8.0的条件下生长和产孢。
在弱酸性条件下，如pH 4.0左右，黑曲霉菌产孢能力较强。
2. 温度：黑曲霉菌的最适生长温度为25-37摄氏度，但它可以
在较低温度下生长，最低为4摄氏度。
产孢较多的温度范围为20-30摄氏度。
3. 氧气浓度：黑曲霉菌需要较高的氧气浓度来进行产孢。
因此，比较通风的环境有利于黑曲霉菌产孢。
4. 湿度：黑曲霉菌对高湿度环境较为适应，相对湿度在70%
以上能够促进其产孢。
5. 培养基：黑曲霉菌可以在多种培养基上生长和产孢。
常用的培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）、琼脂糖葡萄液培养
基等。
需要注意的是，黑曲霉菌在合适的营养条件下会大量产孢，如果对人类和动物的健康构成威胁，如空气中存在大量黑曲霉菌孢子，可能引发过敏反应和呼吸道问题。
因此，在实验室和食
品生产等场所中，需要采取相应的预防措施，控制黑曲霉菌的生长和繁殖。
黑曲霉形态观察注意事项
黑曲霉形态观察注意事项黑曲霉 (Aspergillus niger) 是一种广泛存在于自然环境中的真菌，常见于土壤、水和食品中。
它是一种害群体的真菌，可以引起腐烂和分解有机物质，但有时也可以对人类和动物造成危害。
观察黑曲霉的形态时，有一些注意事项需要注意。
以下是一些观察该真菌形态的注意事项：1.采样：在进行黑曲霉形态观察前，首先要采集适当的样本。
可以在可能存在黑曲霉的环境中，如室内潮湿区域、腐烂的食物或发霉的物品上采集样本。
使用消毒的采样工具，如消毒的勺子或棉签，直接采集样本。
2.形态特征：观察黑曲霉的形态特征时，要注意以下几个方面：-子实体：黑曲霉的子实体为黑色或暗褐色，呈圆锥状或球状，具有细菌丝。
观察子实体的大小、形状和颜色。
-菌丝体：黑曲霉的菌丝体是光滑和无色的，可通过显微镜观察到。
注意观察菌丝的密度和长度。
-孢子囊：黑曲霉的孢子囊位于子实体中，呈黑色或暗褐色。
注意观察孢子囊的形状、大小和数量。
3. 培养基：黑曲霉的形态观察可以在适当的培养基上进行。
选择含有碳源和氮源的培养基，如马铃薯葡萄糖琼脂 (Potato Dextrose Agar, PDA)。
在无菌条件下将采样物均匀涂抹在培养基上，然后培养在适当的温度和湿度下。
4.温度和湿度：黑曲霉的形态特征可能会受到温度和湿度的影响。
根据黑曲霉的生长条件进行观察。
一般来说，黑曲霉在25-30摄氏度的温暖和潮湿环境中生长最为适宜。
5.显微镜观察：为了观察黑曲霉的微观形态，需要使用显微镜进行观察。
将样本放在显微镜载片上，加一滴适当的染色剂，如甲苯胺蓝或墨汁，然后用盖片覆盖。
将载片插入显微镜中，在适当的放大倍数下观察黑曲霉的细节。
6.空气污染：在进行黑曲霉形态观察时，要注意空气中的污染。
尽量在无菌条件下操作，如在无菌柜中进行观察。
避免将空气中的其他真菌和细菌污染样本，以免干扰观察结果。
7.安全注意事项：黑曲霉可以产生有害的毒素，对人类和动物有害。
在观察黑曲霉时，要采取适当的安全措施，如佩戴手套、口罩和实验室衣物，以防止直接接触和吸入孢子。
冻干黑曲霉 法规-概述说明以及解释
冻干黑曲霉法规-概述说明以及解释1.引言1.1 概述冻干黑曲霉是一种常见的食品添加剂，被广泛应用于食品工业中。
它是由经过发酵培养的曲霉菌经过冷冻和真空干燥处理而得到的。
这种食品添加剂具有丰富的营养价值和独特的风味，在食品加工中起到改善口感、增加食品特色的作用。
冻干黑曲霉的生产和使用受到法规的严格监管。
各国针对食品添加剂的使用都有一系列的规章制度和标准，以确保食品的安全性和质量。
在我国，冻干黑曲霉的生产和使用受到《食品安全法》等相关法律法规的限制和规范。
根据这些法规，冻干黑曲霉的生产企业必须符合一系列的生产标准和要求。
生产过程中需要采用先进的生产设备和工艺，确保冻干黑曲霉产品的纯度和质量。
同时，生产企业还需要进行严格的质量控制，对原材料、生产过程和成品进行监测和检验，以保证产品的安全性。
此外，对于冻干黑曲霉的使用，也需要遵循一定的规定和限制，必须在符合规定的用量范围内使用，且不能用于特定的食品或特定人群。
冻干黑曲霉作为一种食品添加剂，在食品加工中具有广泛的应用前景。
未来，随着人们对食品安全和品质的要求越来越高，对冻干黑曲霉的需求也将相应增加。
因此，我们需要进一步加强对冻干黑曲霉的研究和监管，确保其生产和使用的安全性，同时促进其在食品工业中的合理利用。
1.2 文章结构文章结构部分是为了让读者对整篇文章的内容有一个清晰的了解，并引导读者对文章的主要部分进行阅读。
文章结构有助于读者理解文章的组织结构和逻辑关系。
本文旨在探讨冻干黑曲霉的相关法规，为此，文章的结构如下：2. 正文在正文部分，我们将详细介绍冻干黑曲霉的相关法规。
为了客观全面地讨论该议题，我们将从两个方面进行阐述：2.1 法规1首先，我们将介绍与冻干黑曲霉相关的第一个法规。
通过对该法规的解读和分析，我们将了解到冻干黑曲霉的相关规定、控制措施以及监管要求等内容。
这将有助于我们深入了解冻干黑曲霉的法规体系。
2.2 法规2接下来，我们将深入研究与冻干黑曲霉相关的第二个法规。
黑曲霉菌
曲霉属的一种
01 形态特征
03 生理特征
目录
02 培养特性 04 鉴别要点
05 分布区域
07 主要危害
目录
06 主要价值
黑曲霉是半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属中的一个常见种。黑曲霉生孢子梗自基质中伸出， 直径15-20微米，长1-3毫米，壁厚而光滑。顶部形成球形顶囊，其上全面覆盖一层梗基和一层小梗，小梗上长有 成串褐黑色的球状分生孢子。孢子直径2.5-4微米。分生孢子头球状，直径700-800微米，褐黑色。菌落蔓延迅速， 初为白色，后变成鲜黄色直至黑色厚绒状。背面无色或中央略带黄褐色。有时在新分离的菌株中能找到白色、圆 形、直径约l毫米的菌核。分生孢子头褐黑色放射状，分生孢子梗长短不一。顶囊球形，双层小梗。分生孢子褐色 球形。
形态特征
பைடு நூலகம்
黑曲霉菌（1）菌丛呈黑褐色，分生孢子为球形，呈黑或黑褐色，平滑或粗糙。菌丝发达，有隔膜和多分 枝。
（2）顶部形成球形顶囊，其上全面覆盖一层梗基和一层小梗，小梗上长有成串褐黑色的球状，直径2.5-4. 0μm。
（3）分生孢子头球状或呈放射状，形似菊花，直径700-800μm，褐黑色。蔓延迅速，初为白色，后变成鲜 黄色直至黑色厚绒状，背面无色或中央略带黄褐色。
黑曲霉是免疫正常人耳真菌病中最常见分离菌，还可引起免疫低下患者深部真菌感染，可导致真菌性角膜炎 等。
黑曲霉除能引起曲霉病外，也能产生黑曲霉毒素。 干酪成熟中污染会使干酪表面变黑、变质，对奶油也会产生变色。 黑曲霉菌可引起肺部感染。
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鉴别要点
根据培养与镜检，菌落生长快，黑色或黑褐色，1-4d即可进行鉴定。顶囊球形或近球形，小梗双层、密生于 顶囊全部表面。镜检注意与亮白曲霉进行区分，后者菌落颜色为白色，生长慢。幼龄时黄色菌落注意与黄曲霉相 区分：前者菌落表面黄色颗粒稀疏、为淡黄色，后者黄色颗粒较粗、密，为金黄色，两者镜下差异显著。
黑曲霉基因组
黑曲霉基因组1. 引言黑曲霉（Aspergillus niger）是一种常见的真菌，广泛存在于自然环境中。
它在工业生产中具有重要的应用价值，被广泛用于酶制剂、食品添加剂和有机酸的生产等领域。
了解黑曲霉的基因组结构对于深入研究其代谢途径、发酵能力以及应用潜力具有重要意义。
2. 基因组测序与分析2.1 基因组测序技术基因组测序是指对一个生物体的所有基因组进行测序并获得其DNA序列信息的过程。
目前常用的基因组测序技术主要包括Sanger测序、二代测序和三代测序。
2.2 黑曲霉基因组测序与装配黑曲霉基因组的测序工作已经在近年取得了重要进展。
通过二代测序技术，可以快速高效地获得大量的短读段数据，从而实现对黑曲霉基因组的全面覆盖。
接下来利用生物信息学分析软件对这些读段进行装配，得到黑曲霉的基因组序列。
2.3 黑曲霉基因组结构与特点黑曲霉的基因组由多个染色体组成，其中包含了大量的基因和非编码区域。
通过对黑曲霉基因组的分析，发现其具有丰富的代谢途径和调控网络，这些特点使得黑曲霉在产酸、产酶等方面具有较强的能力。
3. 黑曲霉基因组注释与功能预测3.1 基因预测与注释通过生物信息学方法，可以对黑曲霉基因组中的基因进行预测和注释。
首先利用计算方法识别出编码蛋白质的开放阅读框（ORF），然后通过比对已知蛋白质序列数据库，进行功能注释和分类。
3.2 功能预测与代谢途径分析通过对黑曲霉基因组进行功能预测和代谢途径分析，可以深入了解其在产酸、产酶等方面的潜力。
此外，还可以通过比较不同菌株之间的差异来研究黑曲霉适应不同环境条件下的遗传调控机制。
4. 黑曲霉基因组的应用潜力4.1 酶制剂生产黑曲霉具有丰富的酶系统，可以产生多种酶，如纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶等。
这些酶在工业生产中具有广泛的应用价值，可以用于纺织、造纸、食品等领域。
4.2 食品添加剂生产黑曲霉可以利用废弃物进行发酵，产生柠檬酸等有机酸。
这些有机酸被广泛应用于食品添加剂的生产中，如调味品、果汁等产品。
黑曲霉发酵
黑曲霉，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属真菌中的一个常见种。
广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。
是重要的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等。
有的菌株还可将羟基孕甾酮转化为雄烯。
生长适温37℃，最低相对湿度为88%，能引致水分较高的粮食霉变和其他工业器材霉变。
黑曲霉是发酵常用的菌种。
食品工业上用作发酵菌种，如用于食醋生产制曲、麸曲法白酒生产制曲、柠檬酸发酵等，主要是利用此黑曲霉分泌产生淀粉酶、糖化酶、柠檬酸、葡萄糖酸、五倍子酸等的功能；在生物肥料工业上，黑曲霉具有裂解大分子有机物和难溶无机物，便于作物吸收利用，改善土壤结构，增强土壤肥力，提高作物产量的效果。
黑曲霉产生的孢子很多，很适合于用沙土管法进行保存。
沙土管保藏法。
取河沙用水浸泡洗涤数次，过60目筛除去粗粒，再用10%盐酸浸泡2～4小时，除去其中有机物质，再用水冲洗至流水的pH达到中性，烘干备用。
同时取贫脊土或菜园土用水浸泡，使呈中性，沉淀后弃去上清液，烘干碾细，用100目筛子过筛，将处理好的沙与土以（2～4）:1混匀，用磁铁吸出其中的铁质，然后分装小试管或安瓿内，每管装量0.5～2克，塞棉塞，用纸包扎灭菌（1.5公斤/平方厘米，1小时），再干热灭菌（160℃，2～3小时）1～2次，进行无菌检验，合格后使用。
将已形成孢子的斜面菌种，在无菌条件下注入无菌水3～5毫升，刮菌苔，制成菌悬液，再用无菌吸管吸取菌液滴入砂土管中，以浸透砂土为止。
将接种后的沙土管放入盛有干燥剂的真空干燥器内，接上真空泵抽气数小时，至沙土干燥为止。
真空干燥操作需在孢子接入后48小时内完成，以免孢子发芽。
制备好的沙土管用石蜡封口，在低温下可保藏2～10年。
但是沙土管保存使用起来不是很方便，而且只是适用于长期的保存，容易导致大量的孢子特性下降，用之前需要进行分离纯化。
还有以下保藏方法可以应用：1、斜面保藏方法，可以取部分孢子重新分离，然后传斜面待斜面张满孢子后在4度冰箱进行保存可以保存1－2个月没有问题，我们做过相关的试验。
黑曲霉孢子质量鉴定方法
黑曲霉孢子质量鉴定方法
黑曲霉是一种引起害虫的有毒病原菌，对环境、人类和动物健康都具有危害性。
黑曲霉孢子质量鉴定是识别黑曲霉污染、监测食品中害虫和评价农业生产中毒性孢子活力的重要手段。
本文着重介绍了黑曲霉孢子质量鉴定的方法。
首先，要准备好收集样品材料，如粮食、土壤、蔬果及其他可能含有黑曲霉污染的物质;在细胞遗传学上检测样品，以确定是否含有黑曲霉孢子；如果含有黑曲霉孢子，就可以开展进一步检测，如光学显微镜确定孢子形态及其多样性；运用放射性核素法检测孢子质量，可以判断孢子死活；检测孢子染色体，了解孢子性状特征等都有助于进一步评估食品中活性的有害孢子。
其次，要利用序列分析手段，如PCR-RFLP等，对样品中的毒素和有害孢子种进行检测，通过检测和识别B-Trichothecenes类毒素及黑曲霉孢子，以确定其含有毒性及致病性；通过PCR反应对样品中的有毒成分进行指纹图谱分析，判断有害孢子质量。
例如可利用DArT（重叠相关型指纹图谱）技术进行有害孢子质量分析;利用ELISA来判定样品中黑曲霉孢子毒素的检测;利用AFLP和PCR/RFLP（限制性片段长度多态性）方法，充分发挥有毒孢子的分子鉴定特性。
最后，可以采用标准试剂进行对比测定，以及利用不同技术对黑曲霉孢子的遗传稳定性的特征进行检测，以全面识别和定量分析黑曲霉孢子质量。
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黑曲霉的分离筛选
一、实验简介
黑曲霉广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。
黑曲霉的最适温度为37℃，黑曲霉对营养要求较低,只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素即能生长良好，实验中采用察氏培养基进行培养。
黑曲霉的菌落蔓延迅速，但生长稍局限，菌丝初为白色，后变成鲜黄色直至黑色厚绒状，背面无色或中央略带黄褐色。
顶部形成球形顶囊，其上全面覆盖一层梗基和一层小梗，小梗双层褐色，梗基较短，上长有成串褐黑色的球状分生孢子。
孢子直径2.5～4.0μm。
分生孢子头球状，直径700～800μm，褐黑色。
黑曲霉的个体形态和菌落形态都比较特殊，容易分辨，可利用平板划线法或稀释涂布法，得到单菌落，并结合显微镜检测，多步鉴定、纯化，得到的纯的菌种。
二、实验试剂与材料
1、材料：黑曲霉
2、溶液和试剂：PDA液体与固体培养基、1mol/L氢氧化钠溶液、1mol/L 氯化氢溶液、75%乙醇
3、器材和其他用品：三角瓶、试管、搪瓷杯、无菌培养皿（6组）、接种环、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅、试管架、恒温培养箱、牛皮纸（报纸）、pH试纸、移液枪枪头（100ul、1ml各5个）、无菌水（蓝瓶子装100ml,两瓶，灭菌）
三、实验步骤和过程
（一）培养基的准备
1、PDA培养基的制备：按照PDA的配方，称量40.1g样品于大烧杯中，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，测试PH值（待培养基稍冷却后，用精密pH试纸测量培养基的原始pH，若偏酸，用1mol/L NaOH边滴加边搅拌，使之达到（6.0±0.2）。
若偏碱，则用1mol/L HCl调节。
）
2、分装：用分装装置将培养基装入试管，高度为试管总长的1/5-1/4，共x支。
余下培养基转入锥形瓶中，培养基的量为三角瓶容量的1/3-1/2。
3、加塞、包扎、标记：试管加胶塞（封口膜将接口处封紧），一捆包扎好，用玻璃杯装着以固定试管；三角瓶用保鲜膜蓬松的塞住瓶口，并用报纸和线绳包扎好瓶口处。
4、灭菌：121℃，20min高压蒸汽灭菌。
5、斜面培养基制作：待已灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管口端搁置在有合适高度的器具上，使培养基斜面长度不超过试管总长的一半为宜。
6、无菌检查：灭菌培养基放入37℃培养箱中一天，若无细菌污染则说明灭菌彻底。
7、培养基放置于冰箱4 ℃保存备用。
（二）黑曲霉菌激活
用接种环从黑曲霉保存斜面培养基，接种于小试管斜面中培养（2支）。
然后放37℃培养箱中培养24小时。
（三）黑曲霉菌拓培
用接种环从黑曲霉小试管斜面培养基，接种于锥形瓶PDA液体锥形瓶培养基中，然后37℃浴摇床培养2天（在液体培养基中是没办法观察其生长的状况的）
（四）稀释菌液：用无菌移液枪吸取分别100ul和200ul菌液到100ml的无菌水中稀释，摇床摇动30min.
（五）涂布平板：先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中，待凝固后编号，然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在平板上（每个编号设两个重复）。
再用无菌刮铲将菌液在平板上涂抹均匀，每个稀释度用一个灭菌刮铲，更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。
在由低浓度向高浓度涂抹时，也可以不更换刮铲。
将涂抹好的平板平放于桌上20—30min，使菌液渗透入培养基内，然后将平板倒转，37℃保温培养，观察其生长情况。
（六）平板划线：先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中，待凝固后编号。
左手拿培养皿，右手拿接种环，分别蘸取经过稀释后的菌液，左手抿开培养皿，进行划线造作。
（线条尽可能多，但不许交叉，平行划线，规律分布）划线完毕后，盖上培养皿盖，20—30min，使菌液渗透入培养基内，然后将平板倒转，37℃保温培养，观察其生长情况。
附：。