BS-100A自动部分收集器上海沪西
苦瓜茎_叶中皂苷类物质的提取及分离纯化
苦瓜叶
6.90
13.60
50.10
由表 1 可知，在苦瓜茎叶中含有丰富的皂苷类物 质，尤其是苦瓜叶中，含量高达 6.90 %（干叶），茎叶中 平均含量也达到了 4.90 %左右。按照本实验室确定的 提取工艺和技术条件，苦瓜茎叶中皂苷粗提物提取率 分别为 5.90 %和 13.60 %，其中总皂苷的含量都达到 了 50 %左右，可见，被废弃的苦瓜茎叶具有很高的开 发利用价值。 3.2 苦瓜茎、叶皂苷纯化结果
加甲醇溶液定容到 5 mL，摇匀，作为对照品溶液，即 2.2.2.2 苦瓜叶中皂苷的提取
1 mg/mL 的人参皂苷标准溶液。准确称取标准皂苷溶
称取苦瓜叶（干叶）1.2 kg，加 15 L 60 %乙醇与 70 ℃
液 0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16、0.18、 下浸提 3 h，过滤，再加 12 L 60 %乙醇与 70 ℃下浸提 3 h，
苦瓜（Momordicac harantia L．）别名锦荔枝、凉瓜、 癫 蛤 蟆 、红 羊 、癫 葡 萄 ，是 葫 芦 科 苦 瓜 属 蔓 性 草 本 植 物，苦瓜性味苦寒，具有清热解毒、滋养强壮、抗肿瘤[1] 以及提高人体免疫力[2-3]等功效。近十年来对苦瓜皂苷 的研究比较多，研究表明，苦瓜的醇提物，水提物均含 有皂苷类物质，具有降血糖等功效[4-6]。但是大部分的 研究都是以苦瓜的果实，果肉或种籽为原料，对苦瓜 茎叶中皂苷类物质的提取及功效的研究鲜见报道。植 物茎叶中往往含有丰富的次生代谢产物，并具有明显 的生物活性，如沙棘黄酮[7-9]、苦荞黄酮[10-11]、银杏茎叶 黄酮[12-13]等等。本研究对苦瓜茎叶中的皂苷类物质进 行提取、纯化，并测定其含量，为对其生物活性进行研
几种金属离子的柱层析实验报告
几种金属离子的柱层析实验报告一、原理：有些高分子物质含有一些可以分离的基因，例如-SO3H，-COOH等，因此可以和溶液中的离子产生交换反应。
如：R-SO3H＋M+ ————R-S3M＋H+或R-NH3OH＋CL－—————R-NH3CL＋OH－这类高分子物质通称离子交换剂，其中使用最普遍的是离子交换树脂。
由于一定的离子交换剂对不同离子的亲和力不同，因此在洗提过程中，不同的离子在离子交换柱上的迁移速度也不同，最后得到分离。
二、目的与要求：本实验是采用Zerolit225型阳离子交换树脂所装的柱，选以特定的PH缓冲洗脱液来分离含有两个性质不同的氨基酸溶液。
通过实验要求掌握装柱、上样、洗脱、收集等离子交换柱层析技术的要点。
三、仪器与装置：玻璃层析柱：长475px，内径30px，3# 砂芯。
HL-2B型恒流泵。
HD-4型电脑核酸蛋白检测仪。
BS-100A自动部份收集器。
250ml烧杯。
1ml吸管。
水浴锅。
72型（或721型）分光光度计。
四、试剂与药品：树脂：Zerolit225型阳离子交换树脂。
洗脱液：0.45N，PH5.3柠檬酸缓冲液，取285g柠檬酸（C6O7H8·H2O）；186g 97℅NaOH；105ml浓硫酸溶于水中稀释至10升。
样品液：0.005M ASP和LYs的0.02N HCL混合溶液。
显色剂：显色剂列出两种可任选一种。
显色剂（Ⅰ）茚三酮-TiCL3溶液。
10g茚三酮溶于500ml乙二醇甲醚，再加入0.85 ml TiCL3（15%）显色剂（Ⅱ）：茚三酮-KCN溶液。
0.1M KCN:0.1628g KCN溶于水中稀释至250mlA、将1.25g茚三酮溶于25ml乙二醇甲醚，配成5%（W/V）浓度的溶液。
B、将2.5ml 0.01M KCN溶液与125ml乙醇甲醚混合。
将A和B合并置棕色瓶中过夜即可使用。
此溶剂用时，A、B两溶液在前一天合并，配好的溶液仅能在1-2天内使用，过时失效须重配。
酶法合成麦芽糖醇脂肪酸单酯的抑菌性
酶法合成麦芽糖醇脂肪酸单酯的抑菌性*何志勇，王洁，曾茂茂，秦昉，陈洁(江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡，214122)摘要采用脂肪酶NOV435 催化麦芽糖醇分别与4 种脂肪酸( 月桂酸、辛酸、油酸和硬脂酸) 反应合成相应的麦芽糖醇脂肪酸酯，并经分离纯化制备获得高纯度的单酯产品，测定了它们在0.0625 ～6 m g/m L 质量浓度下对不同细菌和酵母的抑菌率及最低抑菌浓度( M I C) 。
结果表明，麦芽糖醇脂肪酸单酯具有良好的抑菌性能，对枯草芽孢杆菌和变异链球菌显示出很强的抑制作用，对大肠杆菌有较好的抑制效果，对酵母菌也有一定抑制能力。
比较不同脂肪酸酰基麦芽糖醇单酯的抑菌性发现，月桂酸单酯抑菌能力最强，辛酸单酯和油酸单酯次之，硬脂酸单酯较弱。
麦芽糖醇月桂酸单酯对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和变异链球菌的M I C值分别为2.0 m g/m L、0.5 m g/ m L 和0.25 m g/m L，具有比麦芽糖和蔗糖等亲水基月桂酸单酯更好的抑菌性。
关键词麦芽糖醇脂肪酸单酯，分离纯化，抑菌性，最低抑菌浓度( M I C)脂肪酸酯不仅是一类优良的表面活性剂，还具有较好的防腐抗菌功能。
目前国内外研究较多的主要是蔗糖酯类和甘油单脂肪酸酯类的抑菌性［1－5］，且研究发现，糖酯的酯化度会影响其抑菌性，蔗糖单酯的抑菌能力远远强于二酯或多酯［6］。
麦芽糖醇脂肪酸酯是由麦芽糖醇与脂肪酸反应而成的一类新型优良的非离子型表面活性剂［7］，但有关其抗菌功能性质的研究较少。
而且现有文献报道的大多是麦芽糖醇酯混合物的性质［8－9］，这样麦芽糖醇酯抑菌性与其化学结构和组成的关系就不是很清楚。
因此，为了探讨不同脂肪酸酰基和不同亲水基团对糖酯抑菌性质的影响，本论文通过脂肪酶NOV435 催化合成系列麦芽糖醇脂肪酸酯，经过分离纯化制备获得高纯度麦芽糖醇脂肪酸单酯产品，并重点研究不同单酯对细菌和酵母的抑菌性能，分析单酯结构与抑菌功能的关系，为其在食品工业中的进一步应用提供依据。
灵芝菌丝体多糖的分离纯化及其单糖组成分析与分子量测定
灵芝菌丝体多糖的分离纯化及其单糖组成分析与分子量测定王海燕;戴军;陈尚卫【摘要】前期杂交优化后赤芝菌种经液体深层发酵后,提取灵芝菌丝体多糖,并过DEAE-Sepharose Fast Flow柱分离纯化,利用高效体积排阻色谱(HPSEC)检测多糖级分的纯度,采用完全酸水解PMP柱前衍生化RP HPLC测定多糖级分的单糖组成,多角度光散射仪联用装置(SEC MALLS)测定其绝对重均分子量(Mw),并且根据分子旋转半径与分子摩尔数的关系曲线斜率初步推断其空间构象.结果显示:分离纯化得到3个多糖级分GLMP1、GLMP2和GLMP3,HPSEC检测其峰面积百分比分别为93.58％,97.64％,99.19％,单糖组成分析结果表明GLMP1、GLMP2和GLMP3均含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖,但单糖摩尔比各异.SEC-MALLS测试GLMP1、GLMP2和GLMP3的Mw分别为4.526×105,4.603×104,3.760×103 g/mol,3个多糖级分构象可能均为高度紧缩且具有分支结构的聚合物.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2015(031)005【总页数】5页(P201-205)【关键词】灵芝;菌丝体;多糖;级分;分离纯化;分子量【作者】王海燕;戴军;陈尚卫【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡214022;江南大学食品学院,江苏无锡214022;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214022【正文语种】中文灵芝（G.lucidum）属担子菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属［1］，按其生长过程可分为菌丝体、子实体和孢子粉3个阶段。
中国灵芝属真菌有75种，常见的有赤芝、紫芝、黑芝、松杉灵芝等。
近年来，研究发现灵芝具有降血糖［2，3］、降血脂［4］、免疫调节［5］、抗肿瘤［6］、抗氧化［7］等保健功能，其主要功效成分为多糖和三萜［8］。
香菇多糖的纯化工艺优化
香菇多糖的纯化工艺优化梁敏【摘要】为获得纯度较高的香菇多糖,以香菇为原料,采用复合酶法提取香菇多糖并对其进行纯化,在单因素试验的基础上,对脱色温度、活性炭用量、脱色时间和pH 值4个因素进行正交试验并选取香菇多糖脱色的最佳工艺条件,采用酶法结合Sevage法脱除蛋白质对脱色后的香菇多糖进行纯化.结果表明:在脱色温度20℃,活性炭用量1.0％,脱色时间90 min,pH 3的条件下,香菇多糖脱色率为71.3％,多糖损失较低,为7.8％.脱色纯化后的香菇多糖为白色,蛋白去除率为90.26％.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2013(041)010【总页数】4页(P165-167,171)【关键词】香菇多糖;纯化;工艺优化【作者】梁敏【作者单位】齐齐哈尔大学化学化工学院,黑龙江,齐齐哈尔161006【正文语种】中文【中图分类】S39香菇(Lentinus edodes)是侧耳科(Pleurota ceae)的担子菌，世界名贵食用兼药用菌之一。
香菇子实体中除含有蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素和对人体有益的微量元素外还含有一种重要的生物活性高分子多糖。
现代研究表明，香菇多糖具有抑制肿瘤、抗病毒和抗氧化等药理活性，对提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有较好的作用，且无任何毒副作用[1]。
Chihara等[2-3]从香菇子实体中分离得到一种具有抗肿瘤活性的β-(1-3)-D-葡聚糖，其抑制癌症和抗肿瘤效果不是直接作用于移植性癌细胞，而是通过宿主调节发生作用，其抗肿瘤的药理作用并非直接杀伤细胞或抑制细胞生长，而是表现在增强人体免疫调节作用。
因此，人们常称香菇多糖为生物反应修饰剂[4]。
香菇多糖通常被包裹在细胞壁内，往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在，中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来，提高多糖的得率，降低多糖中蛋白质的含量，提高多糖的纯度。
传统的浸提法虽然是提取多糖的经典方法，但时间长、能耗大、效率低，酶法处理可以提高多糖的提取率、减少能源消耗、缩短提取时间。
DEAE纤维素分离猪血清蛋白
摘 要：对ＤＥＡＥ纤维素５２（简称ＤＥ５２）分离猪血清蛋白进行了研究。结果表明：ｐＨ ７．４时，以Ｏ
～０．３ ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ磷酸盐缓冲液梯度洗脱，ＤＥ５２可以将血清蛋白分为７个部分。在梯度洗脱
的基础上，分别以ＮａＣｌ浓度０、０．０５、０．０８、０．１、０．１２、０．１５、０．２ ｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲液进行阶段
２）猪血清蛋白的阶段洗脱：取０．５ ｍＬ离心后 的血清上样，以ｐＨ ７．４并选取合适ＮａＣＩ浓度的 ０．０１ ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐ＮａＣｌ缓冲液进行阶段洗脱，体 积流量１ ｍＬ／ｍｉｎ。 １．２．３ ＤＥ５２色谱柱的再生和平衡用１ ０００ ｍＬ ２０ ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ溶液洗脱再生，用１ ０００ ｍＩ。ｐＨ ７．４的０．０１ ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液平衡，然后即可再 次上样。 １．２．４ 样品洗脱峰蛋白组成检测 用非变性 ＰＡＧＥ电泳检测，电泳条带扫描后用分析软件分 析［５］。 １．２．５ ＩｇＧ定性检测 用ＥＬＩＳＡ法测定样品蛋白 ＩｇＧ含量，鉴定样品蛋白是否是ＩｇＧ［６］。
ＨＤ－３型紫外检测仪，上海沪西仪器厂制造；ＤＢ－３ 型层析谱数据分析系统，南京新校园生物技术研究 所制造；ＨＬ－１型恒流泵，ＢＳＺ～１００型自动分步收集 器，上海沪西仪器厂制造；ＴＢ２０—１０００型梯度搅拌 器，上海新波无线电厂制造；ＭＫ３型酶标仪，上海雷 勃仪器厂制造；ＤＹＣＺ一２４Ｄ型电泳槽，北京市六一 仪器厂制造。猪血采自无锡市肉联厂，４℃８ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，除去血球和纤维蛋白原，得到血 清。猪ＩｇＧ，白蛋白标样自Ｓｉｇｍａ公司购得。 １．２试验方法 １．２．１ ＤＥ５２色谱柱的制备
２结果与分析
２．１猪血清ＤＥ５２梯度洗脱
血清中蛋白质种类很多，组成复杂，为了研究
ＤＥ５２对血清蛋白的分离效果，在保持洗脱液ｐＨ
SBS-100自动部分收集器和自动部分收集器价格
标题：JC-200B恒温培养摇床
恒温培养摇床系列JC-200B产品特点u集恒温培养箱与震荡器与一体，节约空间占地少，功能多投资少。uABS工程塑料外壳、镜面不锈钢内衬、不锈钢弹簧夹具等腔体组建。u设有来电恢复功能，不受电源间断影响，设备可自动按原设定程序恢复运行。u设有开门自停保护装置，保护人体安全并配有高强度气拉杆，开门更轻松自如。u实测温度偏离设定温度超过3℃时，自动停止加热并发出声光报警。u最先进大力矩电机保证持续工作毋须保养。u升温速度可以根据实验的具体要求进行加快或减慢。u整机静音设计，静电喷塑箱体，钢化玻璃超大可视窗，造型豪华美观。u一次成型大视角热弯化玻璃，使您能够安全看到整个工作状态。u控制加速的线路确保摇床缓缓启动，平稳加速，保证实验样品的安全。...
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SBS-100自动部分收集器
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香菇中糖类物质离与测定
香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：香菇中糖类物质的分离与测定摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。
用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。
气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。
关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract：This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words： Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言：糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。
自动部分收集器
BSZ-100自动部分收集器使用说明书一、BSZ-100自动部分收集器使用说明书机身简介图二、BSZ-100自动部分收集器使用说明书指标参数外形尺寸LWH: 265350360主要技术参数: BSZ-100收集试管100支,每支最大容量12ml定时收集范围: 1秒—24小时;任意选择.特点: 操作简单,使用方便.断电数据保存时间：十年；特点：新型单片机芯片控制；六位超高亮数码管显示；菜单操作；功能提示；倒、顺定时选择;三、BSZ-100自动部分收集器使用说明书控制面板功能说明前面板按键功能说明“功能”键：设置操作功能;变化顺序：手动→顺计时→倒计时→计滴ASS特有具体符号参照面板“功能参数定义”;复位后不能直接按该键,需按“运行”键后才能激活该键;“”键：选择设置参数的位置;选择顺序从右第1位开始;“”键：在参数设置状态该位闪烁时,按此键可递增数值；在运行状态下,按此键可查阅设置的参数;“”键：在参数设置状态该位闪烁时,按此键可递减数值；在报警时,按此键可解除报警声;在参数设置状态,若将“”键与“”键同时按下,可将原有数值清零;“运行”键：功能参数设置完毕后,按此键能将仪器从参数设置转入实际正常运行状态;“手动”键：当功能设置为“S”,即手动功能时,在按下“运行”键后再按“手动”键,能将试管盘进行步进操作,按住不放能进行快速步进定位操作;按“复位”键后再按“运行”、“手动”键,能自动计管;“复位”键：进入运行状态后按此键,能将滴管口快速回到试管盘的第一支试管的上方;后面板插键说明“计滴传感器”插座：用于插入“计滴传感器”,输入计滴信号;“安全阀”插座：用于插入“安全阀”;“HL-2型恒流泵”插座：用于插入该型号泵的连接线接入HL-2型恒流泵,实现对该泵的联动输出控制;“记录仪”插座：用于插入记录仪连线,实现对记录仪的联动输出控制;“警控”插座：用于插入漏液报警板连线,实现漏液输入控制;“DHL-A/B型恒流泵”插座：用于插入该型号泵的连接线接入DHL-A/B型恒流泵,实现对该泵的联动输出控制;“电源”插座：用于接入总电源;四、BSZ-100自动部分收集器使用说明书使用操作准备工作将电源线、竖杆、安全阀、漏液报警板等按以下要求连接好;将电源线圆插头插入仪器后面板的“电源”插座中,另一头的三芯插头插入AC220V的三芯电源插座中;将“竖杆”插入仪器右后角的“竖杆”固定座中,同时旋紧固定螺钉;将“安全阀”安装在“竖杆”的上部,高低位置以“安全阀”前的“计滴传感器”中的滴管口或横杆中的滴管口与试管口略高2-5mm为宜,同时将连线插头四芯插入仪器后面板的“安全阀”插座中;将“漏液报警板”放入积液盘黑色胶木圆盘的方框中,同时将连接线插头从积液盘中间凹孔从上往下穿过,并插入仪器后面板的“警控”插座中;“积液盘”放置的位置以“积液盘”下面的三脚放入主机上面板的三个凹档,且将“漏液报警板”处于“计滴传感器”滴管口的下方为宜;定位开启电源后的定位开启电源后初始功能为手动状态,即数码管显示“S-----”,按“运行”键后再按“复位”键,仪器自动复位“秒”位数码管显示半个0;将滴管口手动对准试管盘中的起点第一支试管外圈第一根试管的中心位置;对准后固定好各自的固定螺钉;注意：在收集过程中,不能再移动滴管口的位置收集过程中的定位在收集过程中,若要重新定位可直接按“复位”键,仪器同样会自动复位重复步骤功能及参数设置手动设定及操作开启电源后初始功能为手动功能状态,即数码管显示“S-----”按“功能”键可改变功能设置;按“运行”键后再按“手动”键,可进行手动走管操作按一下走一管；按住不放可连续走管;自动收集顺定时收集顺定时功能及参数设置完毕后,按“运行”键即进入顺定时收集,直至终点最后一管报警数码管显示“STOP”;按“解警”键可解除报警声,按“复位”键,不但能解除报警声,还能复位至第一支试管复位后需重新定位,即重复步骤;逆定时收集逆定时功能及参数设置完毕后,按“运行”键即进入逆定时收集,直至终点最后一管报警数码管显示“STOP”;按“解警”键可解除报警声,按“复位”键,不但能解除报警声,还能复位至第一支试管复位后需重新定位,即重复步骤;定滴收集ASS特有定滴功能及参数设置完毕后,按“运行”键即进入定滴收集,直至终点最后一管报警数码管显示“STOP”;按“解警”键可解除报警声,按“复位”键,不但能解除报警声,还能复位至第一支试管复位后需重新定位,即重复步骤;若在定滴收集过程中发生断液8分钟后报警数码管显示“Err2”,则加入液体后自动解除报警,且继续进行定滴收集;注：在收集过程中,若要停止收集或终止正在进行的功能而进入其它功能,则可直接按“功能”键进入待机状态,即进入功能及参数设置；在收集过程中,若发生漏液故障而报警数码管显示“Err1”,则必须关闭电源,待漏液故障排除后,方可重新开启电源;操作举例顺定时6分38秒收集接通电源：按下机器后面板上的电源开关,数码管显示“S-----”,仪器处于手动功能状态;定位：按“运行”键后再按“复位”键,仪器自动复位“秒”位数码管显示半个0;将滴管口手动对准试管盘中的起点第一支试管外圈第一根试管的中心位置;对准后固定好各自的固定螺钉;在收集过程中,不能再移动滴管口的位置一管结束后报警数码管显示“STOP”;注意事项本仪器必须使用标准的三芯电源插座,应有可靠接地,确保安全;使用时将“漏液报警板”安放在滴管口下方的积液盘中的方框内,电线从积液盘中间孔通过,插头插入仪器后面板的“警控”插座中,可实现漏液报警;在收集过程中,若发生漏液故障而报警数码管显示“Err1”,则必须关闭电源;待漏液故障排除后,方可重新开启电源;每次使用前必须重新定位,按“”、“”步骤操作;仪器按“复位”键滴管口回到第一管后“秒”位数码管显示半个0,必须重新对滴管口进行调整,确保滴管口在第一管的中心位置;若要马上进入自动收集,则需按一下“运行”键;在正常使用过程中不可将安全阀、警控插头等拨出,若要插拨则必须在关闭电源后进行;试管盘的编号应与仪器的编号在后面板的右上方保持一致,不能配错、不可调换;。
生化 黄芪
黄芪多糖的提取、分离纯化及分子量测定伍兵靳凡张栋东北师范大学生科院长春130024摘要黄芪是一种常用中药，含有多种生物活性物质，其中黄芪多糖(Astragaluspolysaccharide，APS)是黄芪中最重要的天然有效成分。
黄芪多糖的生物活性与分子量、溶解度、粘度、一级结构和高级结构有关。
本实验通过苯酚-硫酸法对黄芪中多糖含量进行了测定、通过薄层层析法对多糖的单糖组成进行了分析、通过Sepharose CL-6B柱层析法对糖分子量分布进行了分析。
关键词：其中黄芪多糖(Astragaluspolysaccharide，APS) 提取苯酚-硫酸法柱层析关键词；多糖；分离；分子量分布、黄芪多糖Abstract:Astragalus is a commonly used traditional Chinese medicine, contains a variety of bioactive substances, including astragalus polysaccharide (Astragaluspolysaccharide, APS) is the most important Astragalus natural active ingredients. Astragalus Polysaccharide biological activity and molecular weight, solubility, viscosity, structure and a high-level structure. In this study, phenol - sulfuric acid method of astragalus polysaccharide content was determined by thin-layer chromatography of the monosaccharide composition of polysaccharides were analyzed by Sepharose CL-6B column chromatography molecular weight distribution of sugar analyzed.Key words:Polysaccharide；Extracting；molecular mass distribution、Astragaluspolysaccharide，APS前言黄芪(Radix Astragalus)是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根,是重要的益气中药,主要产于山西、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙等地,大兴安岭的黄芪又叫北芪,古书记载“北芪,生津滋阳、补阳血、补虚损、愈肾衰”被誉为“小人参”且比人参、西洋参更温和,男女老少皆宜,其味甘,性微温,具有益气补虚之功效,可生用,亦可炙用。
BS-100 自动收集器使用说明书
一、用途：在科研、医疗、高等院校及厂矿企业实验室等有关部门进行液相色谱层析分析时，本仪器能自动分量收集层析液，从而代替手工操作，提高工作效率。
本仪器可与本厂生产的HD系列紫外检测仪、HL系列恒流泵、SJX-3数字计器、TH系列梯度混合仪配套使用，也可单独使用。
二、特点：BSZ系列是一种全新的改进型新产品，能显示即时走时时刻及定时时间，性能质量较之过去又有很大的提高。
三、主要技术参数：使用环境条件：温度0℃～+40℃，相对湿度：85%容量：BSZ-16 100ml试管16支BSZ-30 收集漏斗30支，收集量无限BSZ-40 50ml试管40支BSZ-100 12ml试管100支BSZ-160 5ml试管160支3、定时收集范围：1分～24小时，任意选择4、连续工作时间：一周左右5、工作电源：AC220V±10%，50Hz6、功耗：<16W7、重量：8.5Kg8、外形尺寸：260×250×340mm四、使用说明：（1）准备（2）工作1、将电源线、试管盘、竖杆、安全阀、接液盘等按正确方法固定连接好：2、按“电源”开关，3、电子钟显示屏则按“1Hz”频率闪烁。
显示的内容是随机的，4、按“时控”框内的“停”键则停止闪烁。
5、按“手动”框内的“按”键，6、手动指7、示灯亮一次，8、试管架也相应转动一管，9、连续按“按”键，10、则试管架连续转动。
（3）自动定时收集1、设定定时设定：在“手动”状态，同时按“定”和“停”，使定时间为零，放开“停”再按“快”或“慢”（“定”仍按着）至所需的定时间，同时放开后设定定时时间工作就完毕。
若要查看设置时间是否正确，则只需按一下“定”键，就能显示上一次所设时间。
若要以秒显示走时时刻，则需按下“秒”键（此键带锁，松开则以分显示）。
若要作为时钟之用，（需在手动状态下）则应先按“校”，再按“快”或“慢”，能校正时间，显示即时时间，校正完毕先松“慢”，后松“校”，校正工作即完毕。
酶凝与酸凝牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的比较
酶凝与酸凝牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的比较张义全;梁琪;赵春燕;吴晗;宋雪梅;张炎【摘要】[目的]比较酶凝和酸凝两种凝乳方式制作的牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的差异.[方法]以牦牛乳为原料,制作酶凝和酸凝牦牛乳硬质干酪,对其感官品质、质构特性、理化特性以及苦味肽分子量分布进行比较.[结果]酶凝干酪出品率高于酸凝干酪,在成熟过程中质构特性各指标也优于酸凝干酪,而水分含量低于酸凝干酪;成熟90 d时,酸凝干酪感官品质达到最佳,具有均匀色泽、适宜乳香味和乳酸味,但其组织状态较差,总体感官评分低于酶凝干酪;在整个成熟期酸凝干酪苦味值低于酶凝干酪,成熟120 d时,酶凝与酸凝干酪苦味肽分子量范围分别在428～3908 u和1127～9375 u之间,酸凝干酪苦味肽分子量范围大于酶凝干酪分子量范围;酶凝干酪苦味肽分子量在663～1352 u时苦味值达到最大,酸凝干酪苦味肽分子量在2249～3564 u时苦味值最大.[结论]酸凝牦牛乳硬质干酪组织状态松散,质构欠佳,但色泽均匀,滋气味清淡,苦味值低;酶凝牦牛乳硬质干酪出品率高,水分含量较低,质构品质较好,但苦味值较高.【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2019(054)001【总页数】8页(P190-197)【关键词】牦牛乳硬质干酪;酸凝;酶凝;质量特性【作者】张义全;梁琪;赵春燕;吴晗;宋雪梅;张炎【作者单位】甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃省功能乳品工程实验室,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃省功能乳品工程实验室,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃省功能乳品工程实验室,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃省功能乳品工程实验室,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃省功能乳品工程实验室,甘肃兰州 730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃省功能乳品工程实验室,甘肃兰州 730070【正文语种】中文【中图分类】TS252.4牦牛乳功能性营养成分(氨基酸、酪蛋白和免疫球蛋白)含量较高，是一种优质的乳品[1-2]，也是干酪加工的优质乳源[3].凝乳是干酪生产的关键环节之一.干酪成熟过程中伴随着复杂的生物化学变化，酸凝与酶凝是两种不同的促进凝胶形成的方法[4]，会影响干酪的质构特性和风味.传统干酪的生产多是以酶凝方式为主，需要动物性凝乳酶，如小牛皱胃酶等，但这些酶资源短缺，价格昂贵.酸凝干酪可以不添加凝乳酶，通过直接添加酸化剂使牛乳发生凝结而制得干酪，其生产工艺简单，成本较低，风味清新，适合中国人的口味[5].Breene等[6]首次通过酸凝法生产Mozzarella干酪.Quarne等[7]研究了不同酸化剂和凝乳酶对农家干酪的出品率、感官品质以及蛋白质降解的影响.Ralph[8]首次通过感官分析评价了酸凝Mozzarella干酪.马玲等[9]和马杨等[10]研究了酸凝干酪成熟期间理化特性的变化.综上所述，国内外对酸凝干酪品质特性的研究较多，但鲜见酸凝牦牛乳硬质干酪的研究报道，并且酸凝和酶凝牦牛乳硬干酪的对比性研究也较少.本试验以酶凝和酸凝牦牛乳硬质干酪为研究对象，通过对其感官品质、质构特性、理化特性以及苦味肽分子量分布的测定，揭示不同凝乳方式(酶凝和酸凝)的牦牛乳硬质干酪在成熟过程中质量特性差异，对影响酸凝和酶凝干酪成熟期品质的因素进行系统分析，旨为改进牦牛乳硬质干酪成熟期品质提供理论参考.1 材料与方法1.1 材料与仪器新鲜牦牛乳：采自甘肃省天祝藏族自治县抓喜秀龙乡；混合发酵剂：嗜热发酵剂(嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌)与嗜温发酵剂(乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种)按1∶1组成，均来自丹麦丹尼斯克公司；微生物凝乳酶：酶活为1.95×104SU/g，甘肃华羚生物技术研究中心；Sephadex G-25葡聚糖凝胶(色谱纯)美国GE公司；细胞色素C、抑肽酶、氰钴胺素VB12、氧化性谷胱甘肽均为标准品.1.2 仪器与设备Scientz-ND真空冷冻干燥机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；SBS-100数控计滴自动部分收集器(上海青浦沪西仪器厂)；SBS-100蛋白纯化层析系统和组分收集器(上海青浦沪西仪器厂)；TA.XT Express质构仪(美国FTC公司).1.3 方法1.3.1 干酪的制作新鲜牦牛乳→过滤→检验→巴氏杀菌(63 ℃，30 min)→冷却(35 ℃)→添加发酵剂(0.006 25 g/L)→添加CaCl2(0.3 g/L)→添加凝乳酶(100.9 U/mL)/添加乳酸(切割pH值达到4.6)→35 ℃凝乳→切割→45 ℃二次加热→排乳清→搅拌、加盐(用量为凝块的2%)→35 ℃堆酿(30 min)→压榨成型(4～5 h)→真空包装→成熟[11].1.3.2 操作要点 1)新鲜牦牛乳：选用理化、微生物指标合格，无抗生素的牦牛鲜乳.2)杀菌：采用巴氏杀菌，在62～65 ℃保温杀菌30 min.3)添加发酵剂：将杀菌乳冷却至35 ℃左右，添加1%食盐水，配制成相应浓度的发酵剂，使原料乳产酸.4)添加氯化钙：在干酪生产过程中添加0.3 g/L氯化钙，可提高干酪凝块的质构，并抑制原料乳中的杂菌.5)添加凝乳酶/乳酸：加入氯化钙10 min以后，向酶凝干酪中添加由1%的食盐水溶解，在35 ℃活化30 min的微生物凝乳酶；向酸凝干酪中添加适宜浓度的乳酸，使pH值达到4.6，促进凝乳.6)凝块切割、搅拌和加热：凝块达到一定硬度后，切割成立方体小块，轻微搅拌，使凝块颗粒悬浮在乳清中，使乳清分离，加热可使凝块颗粒稍微收缩，有利于乳清从凝块中排出.7)加盐：待排出乳清后，向其中加入2%的食盐.8)堆酿：为提高干酪质地，堆酿2 h.9)压榨：促使干酪中的乳清进一步排除，并让干酪具备一定的组织状态.10)真空包装：干酪成品用LDPE袋进行真空包装.11)成熟：将制作的新鲜干酪在10 ℃条件下分别成熟0、30、60、90、120、150、180 d.1.3.3 干酪感官品质的评定感官评定方法参照GB 5420-2010的方法并改进.随机抽取成熟第0、30、60、90、120、150、180 d干酪样品，在25 ℃下放置1 h 后.组成经过培训筛选的10人评定小组，采用100分制，从色泽(20%)、组织状态(30%)、滋味和气味(50%)进行质量感官评定.具体评价标准见表1.表1 牦牛乳硬质干酪质量评定标准Table 1 Evaluation standards of hard cheese quality of yak milk评分指标Score index标准Standard分值 Score色泽Colour and lustre色泽为白色或乳黄色且均匀;14～20色泽有变化且不均匀;8～13组织状态Tissue condition组织细腻,光滑,硬度适中;15～30组织状态粗糙,较硬,易碎;9～14滋味、气味Taste and odour滋味和气味较佳,奶香味浓郁;38～50滋味和气味良好,奶香味较淡;28～37滋味和气味平淡无奶香;16～27有霉味、苦味、异味、氧化味;11～151.3.4 干酪苦味值的测定参照Emmons等[12]的方法测定.评定小组由经培训筛选的18人组成(男女比例为1∶1，均为不吸烟者)，评定员用蒸馏水漱口后，取适量干酪样品置于口中5～10 s后吐出.用不同浓度的硫酸奎宁(0，2.9×10-3，5.8×10-3，1.2×10-2和2.4×10-2 mmol/L)作为参照物.0分表示完全无苦味；0～1.0分表示非常轻微苦味(包括1分)；1.0～2.0分表示轻微苦味(包括2分)；2.0～3.0分表示中等苦味(包括3分)；3.0～4.0分表示强苦味(包括4分)；4.0～5.0分表示非常强苦味(包括5分).1.3.5 干酪质构品质的测定参照孙彩玲等[13]的方法测定.样品制备：测试样品的尺寸为10 mm×10 mm×10 mm，在室温(25±2)℃下平衡1 h后进行质构测试.质构参数：探头类型为P/50，测试前速率为5.0 mm/s，测试中速率为1.0 mm/s，测试后速率为5.0 mm/s，下压变形为50%，触发力为0.2 N.1.3.6 干酪出品率测定参照任娟[14]的方法，将牦牛乳干酪压榨完后称质量，根据干酪原料乳质量与干酪质量计算干酪出品率.实测出品率为了更加准确地比较2种牦牛乳硬质干酪的出品率，将干酪的实测出品率校正到水分含量为45%时再进行计算.校正出品率1.3.7 干酪水分含量的测定根据GB 5009.3-2010中直接干燥法进行水分含量测定.1.3.8 干酪苦味肽的分离纯化1.3.8.1 干酪苦味肽的提取参照Konstantinia等[15]的方法.将成熟120 d的酶凝和酸凝牦牛乳硬质干酪真空冻干，分别取50 g干酪切成碎片，加入150 mL蒸馏水用小型均质机高速搅拌2～15 s，然后通过Whatman.No 1滤纸抽真空过滤，在4 ℃下放置30 min除去脂肪.将沉淀物用100 mL和50 mL的蒸馏水两次抽提.然后在水层中加入无水乙醇，调整其最终浓度达到60%，除去蛋白质.在4 ℃下低速搅拌1 h，在10 000 r/min离心30 min，除去不溶物.取上清液旋转蒸发除去水和乙醇，浓缩液真空冷冻干燥备用.1.3.8.2 干酪苦味肽的分离纯化将提取的干酪苦味肽配制成20 mg/mL，采用Sephadex G-25凝胶渗透层析分离纯化.分离条件为凝胶柱1.6 cm×70 cm；上样量1 mL；洗脱液为蒸馏水；流速为0.5 mL/min；紫外检测仪在波长280 nm处进行检测，以保留时间为横坐标，洗脱液吸光值为纵坐标绘制洗脱曲线.收集组分峰，冷冻干燥备用.1.3.8.3 干酪苦味肽分子量分布的测定将分子量已知的标准品：氧化性谷胱甘肽(600 u)、氰钴胺VB12(1 302 u)、抑肽酶(6 512 u)、细胞色素C(12 500 u)、卵清蛋白(43 000 u)分别溶于Tris-HCl缓冲溶液(pH8.0)中，将上述真空冻干蛋白质配制成浓度为2 mg/mL的标准品溶液.将4种标准品溶液混合均匀，抽取混合样品溶液1 mL上样，紫外检测仪在波长280 nm处进行检测.以标准品分子量的对数为纵坐标，保留时间为横坐标绘制标准曲线，标准曲线见图1.图1 分子量标准曲线Figure 1 Standard curve of molecular weight将干酪苦味肽进行层析分离，确定出峰时间，通过分子量标准曲线，将样品峰的保留时间代入回归方程y=-0.010 9x+4.652 7，计算干酪苦味肽分子量分布.用峰面积归一化法，确定不同分子量范围苦味肽的相对百分含量.1.3.8.4 干酪不同分子量苦味肽苦味值测定测定方法同1.3.4.1.4 数据分析试验每个处理重复3次，采用Orign8.0软件分析数据并作图.2 结果与分析2.1 酸凝和酶凝干酪感官评分由图2可知，在整个成熟过程中，酶凝与酸凝干酪的感官评分均呈先升高后降低的趋势，并且在90 d时感官品质都达到最佳.酶凝干酪风味浓郁，组织状态好，苦味重；酸凝干酪由于没有添加凝乳酶，其蛋白质降解程度小，色泽均匀，呈乳白色，滋气味清淡，有适宜的乳香味和乳酸味，但其组织状态松散，凝块无弹性易碎，因此其总体感官评分较低.图2 酶凝与酸凝干酪感官评定Figure 2 Sensory evaluation of rennet-coagulated and acid-coagulated cheese2.2 酸凝和酶凝干酪苦味值差异从图3可以看出，随着成熟时间的延长，酶凝与酸凝干酪的苦味值呈先升高后下降的趋势，并且都在120 d时苦味达到最大值，分别达到3.1(强苦味)和1.9(轻微苦味).成熟期0 d时，两种干酪的苦味值均为0；在成熟30 d时，酸凝干酪苦味值仍为0；随着成熟时间的增加，在30～180 d内，酶凝干酪的苦味值始终高于酸凝干酪，说明凝乳酶对干酪苦味形成的影响很大.图3 酶凝与酸凝干酪苦味值评价Figure 3 Bitter value of rennet-coagulated and acid-coagulated cheese2.3 酸凝和酶凝干酪质构品质的差异2.3.1 硬度硬度反映干酪对变形抵抗的程度.由图4可知，随着成熟时间的延长，酶凝和酸凝干酪的硬度呈先增大后减小的趋势，在成熟90 d时均达到最大值，分别为13.01 N和6.28 N.在整个成熟期，酸凝干酪的硬度始终小于酶凝干酪，主要是因为酸凝干酪在凝结时本身水分含量较高，干酪蛋白质分子中包含较多的结合水所致.90 d后干酪硬度发生下降，主要是因为成熟中期酶凝干酪蛋白质降解程度较大，使酪蛋白的凝胶网状结构被破坏，干酪中的部分结合水进入干酪蛋白分子中，从而使干酪的硬度逐渐减小.图4 酶凝与酸凝干酪的硬度Figure 4 Hardness of rennet-coagulated andacid-coagulated cheese2.3.2 弹性由图5可知，随着成熟时间的延长，酶凝和酸凝干酪的弹性呈先增大后减小的趋势，在成熟90 d时均达到最大值，分别为0.78和0.47.在整个成熟期，酶凝干酪的弹性值始终大于酸凝干酪.这主要是由于适宜的水解可使干酪高度交联的酪蛋白微胶束表现出较高的抗变形能力，体现出较高的弹性.随着干酪的进一步水解，干酪长链结构蛋白不断变短，直至酪蛋白网状结构坍陷交融，干酪的弹性减小[16].2.3.3 黏着性黏着性反映了咀嚼时干酪对上腭、牙齿、舌头等接触面的黏性大小.干酪黏着性值的负号代表测试探头受到的作用力方向向下，与大小无关.由图6可知，在整个成熟期，两种干酪的黏着性呈无规律的变化趋势，在成熟中后期(即90 d以后)两种干酪的黏着性下降，适口性较好.图5 酶凝与酸凝干酪的弹性Figure 5 Elasticity of rennet-coagulated and acid-coagulated cheese图6 酶凝与酸凝干酪的黏着性Figure 6 Adhesiveness of rennet-coagulated and acid-coagulated cheese2.4 酸凝和酶凝干酪理化性质的差异2.4.1 出品率将干酪水分调整到45%，采用校正出品率进行比较，可忽略干酪中水分含量的影响.从表2可知，酶凝干酪校正出品率为22.87%，酸凝干酪校正出品率为19.44%.2.4.2 水分含量水分不仅影响干酪出品率，对干酪品质也有显著影响.由图7可知，酶凝和酸凝干酪水分含量在整个成熟期均呈逐渐下降的趋势，由于干酪采用真空包装，因此其水分含量降低程度很小，分别下降了0.73%、1.01%.在成熟0 d时，酶凝干酪水分含量为41.44%，酸凝干酪的水分含量为46.12%，高于酶凝干酪.说明凝乳酶在干酪生产过程中可促进乳清的排出，而在成熟过程中，虽然酸凝表2 酶凝与酸凝干酪的出品率Table 2 The yield of rennet-coagulated andacid- coagulated cheese %指标Index酶凝干酪Rennet-coagulated cheese酸凝干酪Acid-coagulated cheese实测出品率Actual yield rate21.4819.84校正出品率Correction yield rate22.8719.44图7 酶凝与酸凝干酪的水分含量Figure 7 Moisture content of rennet-coagulated and acid-coagulated cheese干酪有较低的蛋白水解能力，但其较差的网状结构导致较多的水分析出.2.5 酸凝和酶凝干酪苦味肽分子量的分布2.5.1 酶凝干酪苦味肽的分离由图8可知，成熟120 d的酶凝干酪中提取的苦味肽经Sephadex G-25凝胶层析分离，得到4个大的组分峰，分别编号为A1，A2，A3，A4.由图8可看出，在选定条件下层析分离时干酪苦味肽出峰较多且峰距适中，提取肽的分离效果较好.将4种组分的出峰保留时间代入标准曲线回归方程，测得相应分子量，并分别收集各组分峰，测定酶凝干酪不同分子量苦味肽的苦味值.图8 酶凝干酪苦味肽葡聚糖凝胶层析谱图Figure 8 Glucan gel chromatography spectrum diagram of rennt-coagulated cheese bitter peptide2.5.2 酶凝干酪苦味肽分子量分布及苦味的测定由表3可知，酶凝干酪成熟120 d 时，其苦味肽分子量分布大约在428～3 908 u，其中2 466～3 908 u、1 386～2 249 u和663～1 352 u这3段苦味肽分子量范围占到了总量的79.24%，并且表现出较强烈的苦味值，是酶凝干酪成熟120 d时苦味形成的重要贡献者.低分子量肽段(428～648 u)由于苦味肽疏水性片段的进一步降解，生成较多的游离氨基酸，因此其苦味值相对其他3种组分低.表3 酶凝干酪苦味肽分子量分布及苦味值Table 3 Molecular weight and bitter value of rennt-coagulated cheese bitter peptide组分Composition分子量/uModecular weight相对百分含量/%Concent 苦味值Bitter valueA12 466～3 90829.343.655A21 386～2 24925.023.765A3663～1 35224.883.976A4428～64819.482.8352.5.3 酸凝干酪苦味肽的分离由图9可知，成熟120 d的酸凝干酪中提取的苦味肽经Sephadex G-25凝胶层析分离，得到4个大的组分峰，分别编号为C1，C2，C3，C4.由图9看出，在选定条件下提取肽的分离效果较好.将4种组分的出峰保留时间代入标准曲线回归方程，测得相应分子量，并分别收集各组分峰，测定酸凝干酪不同分子量苦味肽的苦味值.图9 酸凝干酪苦味肽葡聚糖凝胶层析谱图Figure 9 Glucan gel chromatography spectrum diagram of acid-coagulated cheese bitter peptide2.5.4 酸凝干酪苦味肽分子量分布及苦味值的测定由表4可知，酸凝干酪成熟120 d时，其苦味肽分子量分布大约在1 127～9 375 u，其中4 487～5 395 u、2 249～3 564 u这两段苦味肽分子量范围占到了总量的65.44%.分子量2 249～3 564 u的苦味肽表现出一定的苦味值，是成熟120 d酸凝干酪苦味形成的重要贡献者.由于酸凝干酪中没有添加凝乳酶，使其蛋白质降解程度和苦味值均小于酶凝干酪.表4 酸凝干酪苦味肽分子量分布及苦味值Table 4 Molecular weight and bitter value of acid-coagulated cheese bitter peptide组分Composition分子量/uModecular weight相对百分含量/%Concent苦味值Bitter valueC16 486～9 37521.720.823C24 487～5 39531.011.776C32 249～3 56434.432.901C41 127～1 48610.112.0033 讨论本试验结果表明，酸凝干酪产率低，水分含量高，滋气味较好，苦味值低于酶凝干酪，组织状态，硬度、弹性较差.凝乳酶是凝乳过程中的关键酶，其主要作用是促进牛乳的凝结，便于乳清析出，对干酪成熟过程中良好的质地与口感形成有重要影响.然而，酶凝干酪在成熟过程中残留的凝乳酶对蛋白质的降解依然难以控制，易降解过度，导致干酪产生苦味物质、过于浓郁的风味或其他不良风味.因此，干酪加工生产过程中，凝乳酶添加量过高，会使干酪产生苦味，影响干酪风味及质地，这与García等[17]研究发现相似.牦牛乳中干物质含量高，凝乳性能良好，出品率可达到20%左右[18].发酵剂中乳酸菌会利用原料乳中乳糖产生大量乳酸，为凝乳酶创造较好的凝乳条件，有利于凝块的收缩并加速乳清排出，因此干酪水分含量低，出品率高[19].只用乳酸对原料乳进行凝固不易形成干酪优良的蛋白质网状结构，致使形成的凝块也比较松散无弹性，用小刀切割过程中易破裂，排出乳清时易损失，因此酸凝干酪产率较低[20].试验中干酪采用真空包装，成熟过程中干酪水分含量呈现略微降低的趋势，这与高婉伟等[21]的研究结果一致.Topcu等[22]曾发现Kasar干酪中苦味肽分子量在500～4 000 u和200～700 u.本试验中酶凝与酸凝牦牛乳硬质干酪产生的苦味主要是500～5 000 u的疏水性多肽所引起的，这与Lee等[23]关于苦味肽的分子量分布研究结果基本一致.酶凝干酪苦味肽分子量小于酸凝干酪苦味肽分子量，说明凝乳酶对苦味肽的降解程度较大.4 结论1) 酸凝牦牛乳硬质干酪组织状态松散，质构欠佳，但色泽均匀，滋气味清淡，苦味值低.2) 酶凝牦牛乳硬质干酪校正出品率高，水分含量较低，质构品质较好，说明凝乳酶的添加有利于凝块的收缩并加速乳清排出，干酪产率较高.3) 干酪成熟120 d时，酶凝牦牛乳硬质干酪中酪蛋白的降解更加充分，且降解产生的苦味肽苦味值较强烈；酸凝牦牛乳硬质干酪中苦味肽分子量较大，且苦味肽的苦味值较低.参考文献【相关文献】[1] 李亚茹,郝力壮,牛建章,等.牦牛乳与其他哺乳动物乳功能性营养成分的比较分析[J].食品科学,2016,37(7):249-253.[2] Cui G X,Yuan F,Degen A A,et position of the milk of yaks raised at different 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生物炭对水中对乙酰氨基酚的去除性能及机理研究
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｅｍｏｖａｌ ｏｆ ａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎ( ＡＰ) ｆｒｏｍ ａｑｕｅｏｕｓ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｂｙ ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｂｉｏｃｈａｒ. Ｔｈｅ ｓｏｒｐｔｉｏｎ ｋｉｎｅｔｉｃｓ
ｐｒｏｓｐｅｃｔ ｏｆ ｂｉｏｃｈａｒ ｉｎ ｌａｒｇｅ￣ｓｃａｌｅ ＡＰ ｒｅｍｏｖａｌ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ:ｂｉｏｃｈａｒꎬａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎꎬａｄｓｏｒｐｔｉｏｎꎬｆｉｘｅｄ￣ｂｅｄ
药物及个人护理产品( ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ ｐｅｒｓｏｎａｌ ｃａｒｅ ｐｒｏｄｕｃｔｓꎬＰＰＣＰｓ) 是环境中一类重要的新型有
ｒａｔｅ ａｆｆｅｃｔ ｔｈｅ ｄｙｎａｍｉｃ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｆｉｘｅｄ￣ｂｅｄ ｃｏｌｕｍｎｓ. Ｔｈｏｍａｓ ｍｏｄｅｌꎬＹｏｏｎ￣Ｎｅｌｓｏｎ ｍｏｄｅｌꎬＣｌａｒｋ ｍｏｄｅｌ
ａｎｄ ＢＤＳＴ ｍｏｄｅｌ ａｌｌ ｗｅｌｌ ｓｉｍｕｌａｔｅ ａｎｄ Байду номын сангаасｒｅｄｉｃｔ ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄａｔａ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｇｒｅａｔ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ
南京师范大学海洋科学与工程学院大学生创新创业计划项目.
通讯作者:李宵慧ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ研究方向:污染物迁移、转化及修复. Ｅ￣ｍａｉｌ:ｘｈｌｉ＠ ｎｊｎｕ.ｅｄｕ.ｃｎ
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第 ２４ 卷第 １ 期(２０２４ 年)
麦冬中几种二氢高异黄酮的立体结构
麦冬中几种二氢高异黄酮的立体结构江洪波，田祥琴，胡晓斌，孙奇，陈渝，黄静*（四川大学华西药学院，成都，610041）E-mail：jianghongbobest@摘要：目的麦冬中几种二氢高异黄酮的立体结构。
方法采用光谱方法，特别是圆二色谱确定立体结构。
结果确定6个二氢高异黄酮的立体结构，鉴定结果为：5，7，2′-trihydroxy-6-methyl-8-methoxy-3(R)-(4′-methoxybenzyl)chroman-4-one(I a)，5，7，2′-trihydroxy-6-methyl-8-methoxy-3(S)-(4′-methoxybenzyl)chroman-4-one(I b)，5，7-dihydroxy-6，8-dimethyl-3(S)-(4′-hydroxy-3′-methoxybenzyl)-chroman-4-one (II a)，5，7-dihydroxy-6，8-dimethyl-3(R)-(4′-hydroxy-3′-methoxybenzyl)-chroman- 4 one (II b)，R-甲基麦冬黄烷酮B(III)，R-甲基麦冬黄烷酮A (IV)。
结论首次确定6个二氢高异黄酮(I-IV)的立体构型。
关键词：麦冬；高异黄酮；圆二色谱（CD）；立体构型1.引言涪麦冬来源于百合科沿阶草属植物麦冬Ophiopogon japonicus (Thunb.)Ker -Gawler 的干燥块茎，是中药川麦冬的主要品种，其味甘、微苦，性微寒，归心、肺、胃经，有养阴生津、润肺清心的功效，用于肺燥干咳、虚痨咳嗽、津伤口渴、心烦失眠、内热消渴、肠燥便秘、咽白喉[1]。
国内外研究表明[2]，麦冬化学成分有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸、挥发油等。
其中高异黄酮类成分具有良好的抗炎、抗应激、抗组胺、心血管保护功能和磷酸化抑制剂的作用。
麦冬乙酸乙酯提取物中的甲基麦冬黄烷酮A，B等高异黄酮类成分对HeLa-S3细胞有很强的细胞毒性(IC50<10 g﹒m1-1)作用[3]。
凝胶排阻层析纯化破伤风抗毒素条件优化的研究
2020年10月 第17卷 第20期破伤风抗毒素是经典的一种马抗血清制品，它能中和血液中破伤风梭菌产生的破伤风毒素，缓解破伤风症状和降低病死率。
人类应用破伤风抗毒素防治破伤风历史已近百年，挽救了许多人的生命，但其临床应用存在一定的局限性［1］。
传统工艺生产的破伤风抗毒素有效成分F（ab'）2纯度较低，残存的大分子马免疫球蛋白（IgG）及小分子杂蛋白引起的不良反应发生率高，制约了破伤风抗毒素的临床应用和进一步发展。
因此本研究根据破伤风抗毒素成品中F（ab'）2、IgG及小分子杂蛋白分子量的不同，拟应用凝胶排阻层析，以紫外检测蛋白质特征峰A280nm绘制的散点图为评价指标，考察不同流速、洗脱剂、样品浓度对破伤风抗毒素蛋白分离的影响，经非还原型十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE）凝胶电泳后对不同组分染色结果进行扫描对比；按照《中国药典》2015版异常毒性检查法对纯化后的组分进行安全性检查。
1 材料与方法1.1 材料破伤风抗毒素（0.75 mL，1 500 IU/支），购自江西生物制品研究所，批号：20180106；葡聚糖凝凝胶排阻层析纯化破伤风抗毒素条件优化的研究周年1，王安华2，洪燕1，郑洋滨1，刘宁11.江西省药品检验检测研究院，国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室，江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心，南昌 330029；2.南昌轨道交通集团有限公司，南昌 330038［摘要］目的：探讨凝胶排阻层析纯化破伤风抗毒素的条件。
方法：使用Sephadex G-100装柱，以紫外检测蛋白质特征峰A280nm绘制的散点图为评价指标，采用单因素试验考察不同流速、洗脱剂、样品浓度对破伤风抗毒素蛋白分离的影响；经非还原型SDS-PAGE凝胶电泳后对染色结果进行扫描对比；按照《中国药典》异常毒性检查法对纯化后的组分进行安全性检查。
结果：凝胶排阻层析纯化破伤风抗毒素的最佳条件为以磷酸盐缓冲液（pH6.5）为洗脱液，样品浓度为100%，流速为0.3 mL/min；SDS-PAGE凝胶电泳结果表明在该条件下可以较好地纯化破伤风抗毒素有效成分F（ab'）2；异常毒性检查结果为小鼠及豚鼠均正常存活，无异常毒性。
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有减 肥 、 润肠 通 便 、 脂 、 降 抗氧 化 等 一些 重要 的 生
理 功 能 ’ ．
我 国是 小麦生 产大 国 ， 在小 麦 的加 工 中 ， 皮 麸
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海沪 西分析 仪器 厂 ； 自动部分 收集器 ： 海沪 西分 上 析仪 器 厂 ； Ｃ １ Ａ型 气 相 色 谱 仪 ： 国 Ｗａ ｒ Ｇ－ ４ 美 ｔｓ ｅ 公司； 高效 液 相 色 谱 （ Ｐ Ｃ 系 统 ： 国 ｗａ ｒ ＨＬ ） 美 ｌｓ公 ｅ
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维普资讯
第２ ３卷 第 １ 期
２０ ０ ２年 ３月
郑 州工程 学院学报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＺ ｅ ｇ ｈ ｕ Ｉ ｓ ｔｔ ｆＴ ｃ ｎ ｌ ｏ ｒａ ｈ ｎ ｚ ｏ ｎ ｔ ｕｅ ｏ ｅ ｈ ｏｏ ｏ ｉ ￣，
Ｖ０ ． ３ １２ Ｎｏ． １ Ｍ ａ 咖 Ｉ ｒ２ ２
现麸皮 的有效增殖 和利用 ， 将具有 十分重要的经
济 效益 和社 会效益 ． ’
２ 实验 方 法
２ １ 麸皮 中戊聚 糖 的制备 ． 麸皮 中水溶戊 聚糖 及水 不溶戊 聚糖 的制备方 案见 图 １ ． ２ ２ 戊聚 糖的分级 纯 化 ．
氢过氧化物裂解酶的筛选及纯化
氢过氧化物裂解酶的筛选及纯化龙祯;阮奇珺n;孔祥珍;张彩猛;华欲飞;江波【摘要】Amaranthus tricolor leaves were identified as a particularly rich source of HPL activity. Hydroperoxide lyase (HPL) was purified to electrophoretic homogeneity from high speed centrifigation, solubilized by Tritron X-100,ammonium sulfate precipitation, hydroxypatite chromatography and DEAE Toyopearl chromatography. The purified HPL preparation consisted of a single band with a molecular mass of about 55 ku in SDSPAGE. The HPL showed higher activity against 13 - hydroperoxy-linolenic acid compared to 13-hydroxy-linoleic acid. Maximum HPL activity was observed at pH 6.0 and 25 ℃, and room temperature sustains high enzyme activity.%研究了不同植物原料中氢过氧化物裂解酶的含量,并最后筛选出苋菜作为提取原料.利用高速离心、表面活性剂溶解、硫酸铵分级沉淀、羟基磷灰石柱层析和离子交换色谱对苋菜氢过氧化物裂解酶进行纯化至电泳纯.结果表明,纯化的苋菜氢过氧化物裂解酶分子量约为55ku,对于13-亚麻酸氢过氧化物的活力高于13-亚油酸氢过氧化物,最适pH6.0,最适温度为25℃,在常温下酶能保持较高水平的活力.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2011(037)002【总页数】4页(P17-20)【关键词】氢过氧化物裂解酶;苋菜;纯化;特性【作者】龙祯;阮奇珺n;孔祥珍;张彩猛;华欲飞;江波【作者单位】江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122【正文语种】中文植物氢过氧化物裂解酶(HPL)是植物脂氧化途径中脂肪氧合酶(LOX)下游的酶，可将脂肪氧合酶和多不饱和脂肪酸形成的氢过氧化脂肪酸裂解形成含氧酸和挥发性醛类。
纳豆激酶分离纯化与鉴定
ml) ,立即用移液管取 15 ml 放入平皿 ,静置 20 min ,
凝固 。
2. 3. 2. 2 标准曲线的制作 取蚓激酶标准品 ,以
0.9 % 氯 化 钠 溶 液 分 别 配 制 每 ml 中 含 10 000 、
8 000 、6 000 、4 000 和 2 000 蚓激酶单位的溶液 。在
活力进行了测定 ,在对照管和测定管中分别加入 1 号试剂 1 ml ,对照管中加入蒸馏水 ,测定管中加入
收集液 ,依次加入 2 、3 、4 号试剂各 0. 1 ml 。用旋涡
混匀器充分混匀 ,置 37 ℃恒温水浴 40 min ,然后加 入显色剂 2 ml ,混匀 ,10 min 后倒入 1 cm 光径比色
2 实验方法
2. 1 NK的提取 固体发酵得到的纳豆用 0. 1molΠL NaCl 溶液在
4～10 ℃搅拌提取 ,过滤 ,滤液加 0. 03 %CaCl2 ,低温 超滤浓缩 ,加冷酒精至乙醇含量达 75 %～80 % ,以 使 NK 沉淀[5] 。 2. 2 NK的分离纯化 2. 2. 1 纳豆粗提物的处理 将 4 g 纳豆粗提物溶 解于 20 ml 含 2 mmolΠL CaCl2 的生理盐水中 ,匀浆 , 7000 rΠmin 离心 40 min , 缓慢加入硫酸铵使其成 40 %的硫酸铵饱和溶液 ,待充分溶解后 ,静置过夜 。 以 7000 rΠmin 离心 40 min ,上清液留待上柱 。 2. 2. 2 Butyl2Toyopearl 柱层析分离 NK 将充分溶 胀并去除微细颗粒 Butyl2Toyopearl 650 装柱后 ,用 10 mmolΠL Tris2HCl pH 8. 0 含 2 mmolΠL CaCl2 缓冲液 进行预平衡 。将 10 ml 纳豆粗提物的盐析上清液 , 上样至 Butyl2Toyopearl 650 柱 ,用相同缓冲液进行 洗脱 。用自动部分收集器 ,以每 5 ml 为一管 ,收集 洗脱液 ,供检测 NK的活力与分子量 。 2. 3 NK活力测定 2. 3. 1 试管法[6] 于直径 15 mm 的硅化试管中依
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2.4运行状态
在显示运行状态时，按确定键，显示收集状态，处于待机收集状态，按启动键，收集器开始收集，进入运行状态，工作完毕，仪器会报警提示“完成”，按任意键消除报警，收集器返回待机状态。
3.1本仪器必须使用标准的三芯电源插座，应有可靠接地，确保安全。
3.6在正常使用过程中不可将安全阀、警控插头等拨出，若要插拨则必须在关闭电源后进行。
3.7使用有机溶剂，请配置耐有机溶液的试管盘和进口硅胶管。
文件名称:BS-100A自动部分收集器标准操作规程
文件编号:
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制定人
制定日期
审核人
审核日期
批准人
批准日期
执行日期
颁发部门: 质量保证部
分发部门:化验室
项 目
正 文
目 的
适用范围
责任对象
内 容
1 基本信息
2 操作步骤
3注意事项
建立BS-100A自动部分收集器操作规程，以便正确使用及维护保养。
3.2使用时将“漏液报警板”安放在滴管口下方的积液盘中的方框内，电线从积液盘中间孔通过，插头插入仪器后面板的“警控”插座中，可实现漏液报警。
3.3在收集过程中，若发生，漏液故障而报警，则必须关闭电源。待漏液故障排除后，方可重新开启电源。
3.4每次使用前必须重新定位。
3.5仪器按“复位”键滴管口回到第一管后，必须重新对滴管口进行ຫໍສະໝຸດ 整，确保滴管口在第一管的中心位置。
2.1.2开启电源：按“电源”开关（在仪器后面板上），试管盘自动复位至起点，液晶显示屏亮，全中文显示，按任意键，进入待机状态。
2.2滴头定位
2.2.1调节滴头管到第一个试管的中心位置（外圈第一管），拧紧竖杆固定螺丝、安全阀固定螺丝、小横杆固定螺丝，完成滴头定位。
2.3参数设置
按键，选择参数设置，按“确定”键，进入定时参数设置状态。
2.3.1按“确定”键，选择“起始管号”，进入“起始管号”的设置。按确定键，显示“起始管号”，通过 键，设置起始管号，再按“确定”键，完成起始管号的设置。
2.3.2按 键，选择“结束管号”，进入结束管号设置。按确定键，显示“结束管号”，通过 键，设置结束管号，再按“确定”键，完成结束管号的设置。
2.3.3按 键，选择“收集时间”。按确定键，显示“收集时间”，通过 键，设置收集时间，再按“确定”键，完成收集时间的设置。
BS-100A自动部分收集器。
QC人员、QC负责人。
1.1主要技术参数
使用环境条件：温度0℃-40℃，相对湿度：<85%
收集试管100支,每支最大容量12ml
定时收集范围: 1秒—9999分;任意选择.
连续工作时间：一周。
2.1准备工作（使用时请取下防尘罩）
2.1.1将电源线、试管盘、竖杆、安全阀、接液盘等按照正确方法固定链接好。