小鼠透明质酸HA试剂盒使用方法.doc
透明质酸测定试剂盒(上转发光法)产品技术要求热景
透明质酸测定试剂盒（上转发光法）
适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中透明质酸(HA)的含量。
1.1 包装规格：40人份/盒。
1.2 主要组成成分：
2.1 外观
液体组分应澄清透明、无沉淀或絮状物，铝箔袋应无破损漏气现象。
2.2 准确度
检测透明质酸（HA）纯品，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.3 线性
[5,1000]ng/mL范围内，相关系数（r）应不低于0.9900。
2.4 精密度
2.4.1 批内变异系数（CV）应不高于15.0%。
2.4.2 批间变异系数（CV）应不高于15.0%。
2.5 空白限
空白限应不大于5ng/mL。
2.6 特异性
与人血清白蛋白（HSA）、胆红素无显著交叉反应。
表1 与其它物质的交叉反应数据
2.7 溯源性
根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准信息的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，校准信息溯源至企业内部工作校准品，并与已上市产品比对赋值。
2.8 稳定性
本产品有效期18个月，取到效期产品在2个月内进行检测，测定结果应符合上述2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6项要求。
低分子量透明质酸增强HAV抗原诱导的小鼠体液免疫应答的研究.
低分子量透明质酸增强HAV抗原诱导的小鼠体液免疫应答的研究作者：舒晓明, 胡凝珠, 兰芸, 陶里, 陈阳, 罗爱华, 胡云章【摘要】目的: 研究内源性危险信号分子低分子量透明质酸作为天然佐剂对HAV抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。
方法: 将ICR小鼠分成9组, 分别设生理盐水对照组、 HAV抗原组、 HAV抗原+铝佐剂组、 HAV抗原+低分子量透明质酸50 μg组、 HAV抗原+低分子量透明质酸100 μg、 HAV抗原+低分子量透明质酸200 μg、 HAV抗原+低分子量透明质酸300 μg、 HAV抗原+低分子量透明质酸500 μg、 HAV抗原+低分子量透明质酸1 mg组, 皮下免疫小鼠。
分别在4、 8、 12 、 16周用ELISA法检测小鼠血清抗HAV IgG水平。
结果: （1）空白对照组在4、 8、 12 和16周未见抗HAV IgG产生; 各实验组抗HAV IgG水平在8周时达到最高; 12周和16周时各免疫组的抗HAV IgG 水平逐渐下降, 尤以铝佐剂组下降明显; （2）与HAV抗原组相比, 低分子量透明质酸各免疫组小鼠血清抗HAV IgG水平明显升高（P<0.05）; 与铝佐剂组相比, 低分子量透明质酸免疫组明显增强特异性抗HAV IgG水平（P<0.05或P>0.05）; （3）低分子量透明质酸安全无毒, 无过敏反应。
结论: 低分子量透明质酸能够明显增强灭活HAV抗原的体液免疫应答, 具有强的免疫佐剂作用。
其免疫佐剂效应优于铝佐剂。
免费论文【关键词】透明质酸危险信号佐剂理学论文免疫佐剂对辅助抗原诱导机体产生持久高水平的免疫应答十分重要[1], 透明质酸（hyalouronan acid, HA）是从动物组织提取的一种黏多糖, 由（1β4）D葡糖醛酸和（1β3）N乙酰基D氨基葡糖双糖单位重复连接组成。
透明质酸是细胞外基质的重要成分而广泛分布于细胞外基质, 它是构成皮肤、玻璃体、关节滑液和软骨组织的重要成分, 具有独特的理化性质和生物学功能。
透明质酸测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求wanfu
1性能指标
1.1外观
外观应符合如下要求：
a)磁珠包被物R1摇匀后应为棕褐色悬浊液；静止久后，棕褐色磁珠沉降于底部，上清液应为无色液体；酶标记物R2应为无色液体，无沉淀或絮状物；校准品和质控品应为外观均匀，成形完整，呈乳白色的冻干品，复溶后较清亮，无浑浊及沉淀；
b)试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
c)中文包装标签清晰，无磨损。
1.2准确度
将具有溯源性的两个浓度准确度参考品进行检测，检测结果与标定浓度的相对偏差在±10%范围内。
1.3空白限
不大于 5.0ng/mL。
1.4线性
在（20.0-2000.0）ng/ml 浓度范围内，线性相关性系数（r）绝对值应大于0.9900。
1.5重复性
变异系数CV≤8%。
1.6批间差
变异系数CV≤10%。
1.7校准品
1.7.1校准品准确度
测定校准品，C1，C2 测定结果的相对偏差在±10%范围内。
1.7.2校准品瓶内均一性
校准品C1，C2 瓶内均一性≤8%。
1.7.3校准品瓶间均一性
校准品C1，C2 瓶间均一性≤5%。
1.8质控品
1.8.1瓶内均一性
变异系数CV≤8.0%。
1.8.2瓶间均一性
变异系数CV≤5.0%。
1.8.3靶值及靶值范围
每批质控品均应提供本批产品的靶值单，并应提供赋值方法程序文件。
质控品的测试值应在靶值范围内。
透明质酸(HA)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求bf
透明质酸（HA）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）
适用范围：用于体外定量测定人血清中透明质酸的含量。
1.1 本试剂盒由8种组分、封板膜、自封袋和说明书组合而成，由硬纸板包装盒进行包装。
8种组分中除HA包被板组分为真空包装的微孔板外，其他7种组分均为塑料瓶包装的液体组分。
试剂盒包装规格为96人份/盒，具体组成见表1：
表1试剂盒主要组成成分
2.1物理性能
液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；所有组分应无包装破损。
各组分装量不少于表1中要求。
2.2准确性
回收率应在90.0～110.0%范围内。
2.3线性
用Log-Logit（四参数logistic、样条曲线）数学模型拟合，在20～1000ng/ml 范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）的绝对值应不低于0.9900。
2.4精密度
2.4.1批内精密度（CV%）应不高于15%。
2.4.2批间精密度（CV%）应不高于20%。
2.5最低检测限
应不大于10ng/ml。
2.6质控血清测定值
每次检测结果均应在允许范围内。
2.7特异性
检测浓度为2000ng/ml的LN结果不大于20ng/ml；
检测浓度为2000ng/ml的CIV结果不大于20ng/ml；
检测浓度为2000ng/ml的PIIINP结果不大于20ng/ml。
2.8稳定性
试剂盒在2～8℃保存12个月，测定结果应符合上述2.1、2.2、2.3、2.4.1、2.5要求。
小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒操作说明操作说明
小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒操作说明操作说明小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒操作说明小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒实验原理小鼠乳酸脱氢酶(LDH）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被小鼠乳酸脱氢酶(LDH）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的小鼠乳酸脱氢酶(LDH）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
透明质酸检验操作规程
透明质酸检验操作规程透明质酸（hyaluronic acid，简称HA）检验操作规程一、实验目的：通过透明质酸检验，了解样品中透明质酸的含量，判断其质量和纯度。
二、实验原理：透明质酸是一种由N-乙酰-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸通过β-1,3-和β-1,4-糖苷键连接而成的聚糖。
其含量的测定一般采用比色法或溶胀法。
三、实验材料：1. 透明质酸标准溶液2. 待测样品3. 0.1mol/L盐酸溶液4. 稀释剂5. 甲醇6. 氢氧化钠溶液7. 硫酸8. 硫酸铵四、实验步骤：1. 准备工作：（1）将透明质酸标准溶液稀释至一定浓度，制备浓度梯度。
（2）准备待测样品，确保其干燥和无杂质。
2. 比色法测定透明质酸含量：（1）取透明质酸标准溶液的一定体积，加入试管中。
（2）加入足够的稀释剂将溶液稀释至合适浓度。
（3）加入甲醇溶液溶解样品，使其溶解均匀。
（4）加入适量的氢氧化钠溶液，使溶液呈现碱性。
（5）加入硫酸铵溶液，使溶液呈现酸性。
（6）酸性溶液与盐酸溶液反应生成甲胺。
（7）甲胺与硫酸反应生成氮气。
（8）利用氮气生成的浑浊度与透明质酸含量成正比关系，通过比色计测定溶液的浑浊度。
（9）将待测样品按照相同的步骤进行测定。
（10）根据透明质酸标准曲线，计算出待测样品中透明质酸的含量。
3. 溶胀法测定透明质酸含量：（1）取一定量的待测样品，加入容量瓶中。
（2）加入足够的溶胀剂溶解样品，使其溶解均匀。
（3）将容量瓶体积定至一定体积，充分摇匀。
（4）取一定体积的溶液进行取样。
（5）通过比重计或其他方法测定样品的溶液密度。
（6）将样品的溶液密度与标准溶液的溶液密度进行比较，根据比例关系计算出透明质酸的含量。
五、实验注意事项：1. 实验过程应严格按照操作规程进行，避免误差的产生。
2. 透明质酸标准溶液的稀释要根据实验需求进而进行，避免过高或过低的浓度对实验结果的影响。
3. 样品的制备要求干燥和纯净，避免水分和杂质的干扰。
4. 比色法和溶胀法的选择要根据实验要求进行，确保结果的准确性。
透明质酸(HA)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求北京联众泰克
透明质酸（HA）测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中透明质酸（HA）的含量。
1.1包装规格： 50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成成分试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（HA-Cal）（选配）组成。
组成及含量见下表：注：1、定标品靶值批特异，详见靶值单。
2、试剂盒条码卡内含主校准曲线。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于10.0ng/mL。
2.3 准确度将已知浓度的HA标准溶液加入到血清中，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.4 线性在[20.0，1000.0] ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 分析内精密度在试剂盒的线性范围内，浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（300.0±60.0ng/mL）的样品检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间精密度在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（300.0±60.0ng/mL）的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 特异性试剂盒与表1中有关潜在交叉反应物应无显著的交叉反应表1 交叉反应2.8 溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供透明质酸（HA）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源到企业工作校准品。
透明质酸ELISA试剂盒说明书
透明质酸ELISA试剂盒产品编号：SEKH-0509该试剂盒用于定量检测血清、血浆或细胞上清等样本中Hyaluronan的浓度仅供研究，不用于临床诊断订购热线:400-968-6088﹡技术支持邮箱:公司官网:目录背景介绍 (1)检测原理 (1)检测原理图 (2)注意事项 (2)技术要点 (3)试剂盒组成及储存 (4)自备实验器材（不提供，可代购） (4)样本收集及储存 (5)试剂准备 (6)检测步骤 (8)操作流程图 (10)结果计算 (11)典型数据 (11)常见问题及解决方法 (14)相关产品 (15)发表优秀文献 (15)透明质酸，又称透明质酸(HA)或透明质酸钠，是一种天然存在的线性聚合物。
透明质酸是一种糖胺聚糖(GAG)，广泛存在于所有脊椎动物的细胞外基质中，也存在于链球菌的某些菌株的囊中。
哺乳动物透明质酸是由三种不同的透明质酸合成酶(HAS1、2和3)之一合成的，它们产生不同链长和不同合成速率的HA聚合物。
高分子量HA(>；500kDa)具有抗血管生成、抗炎和免疫抑制作用，低分子量HA(10-500kDa)具有高血管生成和促炎作用。
HA寡聚体具有抗凋亡和上调热休克蛋白表达的作用。
在功能上，透明质酸分子对于维持组织中高度水化的细胞外基质很重要，它参与细胞粘附，支持细胞迁移。
检测原理Solarbio（Solarbio®）ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。
将抗Hyaluronan单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的Hyaluronan 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗Hyaluronan 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的Hyaluronan 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的Hyaluronan，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的Hyaluronan浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中Hyaluronan的浓度。
大鼠透明质酸(HA)ELISA说明书
大鼠透明质酸(HA)酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用—北京奇松生物科技有限公司产品编号：QS42052预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆以及蛋清和蛋黄中透明质酸（HA）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中透明质酸水平。
用纯化的透明质酸结合蛋白(HABP)包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入透明质酸、生物素化的抗大鼠透明质酸结合蛋白（HABP）、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的透明质酸呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 nmol/L，做系列倍比稀释后，分别稀释成100 nmol/L，50 nmol/L ，25 nmol/L，12.5 nmol/L，6.25 nmol/L，3.12 nmol/L，1.56 nmol/L，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 nmol/L，临用前15分钟内配制。
如配制50 nmol/L标准品：取0.5ml 100 nmol/L的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
2.样品稀释液：1×20ml/瓶。
3.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
4.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
5.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
透明质酸实验方法
透明质酸HA ( Hyaluronic Acid ) 是由(1 - β- 4) D - 葡糖醛酸和(1 - β- 3) N - 乙酰基- D -氨基葡糖组成的双糖单位重复连接构成的大分子糖胺聚糖[1 ] 。
由于其具有特殊的生理作用、独特的流变学特性和极强的持水保湿能力,在化妆品工业、医学研究、临床治疗等领域得到了广泛的应用[2 ,3 ] 。
微生物发酵法是利用某些种属的链球菌在生长繁殖过程中向胞外分泌以HA 为主要成分的荚膜来生产HA。
与组织提取法相比,具有成本低、生产规模不受动物原料限制、发酵液HA以游离态存在、易于分离纯化和形成规模化生产、无动物来源的致病病毒污染的危险等优点[ 4 ] 。
利用链球菌发酵法生产HA 的研究主要集中在日第2 期邓开野,等:透明质酸产生菌的筛选及诱变本,英美等国也有少量报道,大多见于专利。
作者对牛鼻黏膜进行了透明质酸产生菌野生型的分离,同时利用复合诱变育种方法处理HA产生菌,以期得到既不产生乙型溶血素、HA 产量又有提高的发酵HA 所适用的菌种。
1 实验材料采集的样品为长春皓月肉牛公司和海南省三亚市防疫站的牛鼻黏膜140 份。
培养基有以下几种: ①斜面培养基。
牛脑沁液800 mL ,牛心沁液200 mL ,牛肉膏的质量分数为0. 3 % ,蛋白胨为1 % ,NaCl 为0. 5 % ,琼脂为1. 8 % ,灭菌前p H = 7. 0 ,121 ℃灭菌20 min 。
②血琼脂平板培养基。
葡萄糖的质量分数为2 %,蛋白胨为1 %,牛肉膏为1 % ,MgSO4 ·7H2O 为0. 1 % , KH2 PO4 为0. 2 % ,琼脂为1. 6 %,灭菌前p H = 7. 0 ,121 ℃灭菌20 min. ,冷却至50 ℃以下,无菌条件下加入无菌脱纤维兔血。
③摇瓶培养基。
葡萄糖的质量分数为4 % ,蛋白胨为1 % ,牛肉膏为1 %,MgSO4 ·7H2O 为0. 1 % , KH2 PO4为0. 2 % ,灭菌前p H = 7.0 ,121 ℃灭菌20 min ,冷却至50 ℃以下,无菌条件下加入体积分数为10 %的小牛血清。
透明质酸测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求huadajibiai
透明质酸测定试剂盒（化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中透明质酸（HA）的含量。
1.1包装规格：96人份/盒
1.2主要组成成分
表1 产品的主要组分
注：校准品和质控品具有批特异性，具体浓度见瓶签。
2.1外观
2.1.1试剂（盒）各组份应齐全、完整，液体应为透明溶液，无渗漏，无混浊，无未溶解物；
2.1.2包装标签应清晰，无磨损。
2.2 准确度
回收率应在85%~115%范围内。
2.3空白限
试剂盒的空白限不大于93 μg/L。
2.4 线性
在[186，3730]μg/L线性范围内，试剂盒的相关系数r应不低于0.990。
2.5 重复性
批内变异系数（CV）应不大于15.0%。
2.6 批间差
批间变异系数（CV）应不大于20.0%。
2.7 稳定性
2℃～8℃保存，有效期12个月。
取失效期的试剂盒检测其准确度、空白限、线性和重复性，应符合2.2-2.5的要求。
2.8 校准品溯源性
应根据GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定，提供所用企业产品校准品来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，校准品溯源至企业工作校准品，工作校准品与已上市产品比对赋值。
人血清透明质酸(HA)竞争ELISA 定量检测说明书
人血清透明质酸（HA）竞争ELISA定量检测说明书1.试剂：透明质酸酶免诊断试剂盒（4℃保存3~6月质量稳定）① HA包被板8孔×12② HA标准品：HA standard 3200ng/ml 1管③标准品稀释液：Standard diluents 1瓶④ HA酶结合物：HA Enzyme tracer 1.1 ml 1管⑤洗涤缓冲液：（10ml），用蒸馏水20倍稀释1瓶⑥ p-NPP：（少量白色粉末，需闭光保存）1管⑦ HA底物缓冲液：使用前将1管p-NPP加至1瓶底物缓冲液中混匀备用。
剩余者于-20℃保存，下次室温溶解后直接使用。
1瓶2.操作程序：步骤内容操作步骤条件、时间★（试剂配制）按试剂组成说明操作标准曲线H1~A1加【标准品稀释液】 100µl，取【HA 标准品】100µl 自H1→B1依次倍比稀释。
A1为空白孔。
①加样待测血清100µl 待测血清加10 µ lHA酶结合物充分混匀！37℃，60min（洗板） PBS（每孔加400µl，摔干）5次②（HA底物）配制好的底物缓冲液110µl（或2滴）37℃，15～30min左右3.结果判断：酶标仪A405nm测定。
酶标仪定量（设立程序）或电脑软件定量。
4.正常参考值：（<110 ng/ml）青年：47.6±22ng/ml；中年：76.1±51.8ng/ml；老年：108.5±74.6ng/ml人血清三型前胶原蛋白（PcIII）ELISA定量检测说明书1.试剂：PcIII酶免诊断试剂盒组成（按相应条件保存）① PcIII包被板（需-20℃保存！），使用前洗涤2次。
8孔×12② PcIII标准品：PcIII standard (2000ng/ml，长期保存在-20℃) 。
1管③标准品稀释液：Standard diluents1瓶④ PcIII酶结合物：PcIII Enzyme tracer (1.1 m l，长期保存在-20℃) 1管⑤洗涤缓冲液：（10ml），用蒸馏水20倍稀释1瓶⑥显色液A / 显色液B（6 ml）各1瓶⑦终止液1瓶3.结果判断：酶标仪A450nm测定。
透明质酸(HA)测定试剂盒(磁微粒化学发光法)产品技术要求lideman
透明质酸（HA）测定试剂盒（磁微粒化学发光法）适用范围：该产品用于体外定量测定人血清样本中的透明质酸（HA）含量。
1.1 规格100测试/盒50测试/盒。
1.2 主要组成成分试剂盒由试剂1、试剂2、磁分离试剂、校准品和质控品组成。
校准品和质控品浓度具有批特异性，具体浓度见瓶标签。
2.1外观2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液，无明显凝集；2.1.3液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；2.1.4包装标签应清晰，易识别。
2.2准确度回收率应在85.0%～115.0%范围内。
2.3最低检测限应不大于20.0ng/mL。
2.4线性在(20.0，1500.0)ng/mL的测量范围内，试剂盒的相关系数r应≥0.9900。
2.5重复性用（200.0±40.0）ng/mL和（1000.0±200.0）ng/mL的样本各重复检测10次，变异系数（CV）应不大于10.0%。
2.6批间差用三个不同批号的试剂盒分别检测（200.0±40.0）ng/mL和（1000.0±200.0）ng/mL的样本，重复检测10次，其批间变异系数应≤15%。
2.7质控品的赋值有效性质控品的测量值应在质控范围内。
2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃条件下储存，有效期为12个月，在有效期满后一个月内的任一天检测试剂盒的准确度、最低检测限、线性、重复性和质控品的赋值有效性，应符合2.2、2.3、2.4、2.5和2.7的要求。
2.9溯源性根据GB/T 21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程以及不确定度等内容，校准品溯源至企业标准品，企业标准品与已上市产品比对赋值。
透明质酸(HA)测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求科美
透明质酸（HA）测定试剂盒（化学发光法）
适用范围：本试剂盒用于定量测定人血清中透明质酸（HA）的含量。
1.1包装规格
2.1外观
试剂盒组分齐全、完整；溶液无混浊，无沉淀或絮状物；微孔板包装袋无破损、漏气现象。
2.2 准确性
平均回收率应在90～110%范围内。
2.3 剂量反应曲线的线性
在（50～800ng/mL）浓度范围内，剂量反应曲线的相关系数r应不小于0.9900。
2.4 空白检测限
应不大于10.0ng/mL。
2.5精密度
2.5.1分析内精密度
测定QC血清，变异系数(CV)应小于15.0%。
2.5.2分析间精密度
测定QC血清，变异系数(CV)应小于20.0%。
2.6批间差
用三个批号的试剂盒，分别测量同一质控血清，变异系数(CV)应小于20.0%。
2.7 质控血清测定值
应在允许的范围内。
2.8 特异性
2.8.1与人Ⅳ型胶原(IVC)的交叉反应
检测浓度为640 ng/mL的IVC，测定值应小于6 ng/mL。
2.8.2与Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢNP）的交叉反应
检测浓度为120 ng/mL的PⅢNP，测定值应小于6 ng/mL。
2.8.3与人层粘连蛋白（LN）的交叉反应
检测浓度为800 ng/mL的LN，测定值应小于6 ng/mL 。
2.9 稳定性
HA试剂盒在2～8℃避光保存，有效期12个月。
在HA试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
小鼠IgG1抗体亚型(IgG1)酶联免疫分析方法操作步骤
小鼠IgG1抗体亚型（IgG1）酶联免疫分析方法操作步骤编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠IgG1抗体亚型（IgG1）酶联免疫分析方法实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠 IgG1抗体亚型（ IgG1）表达。
用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中 IgG1抗体亚型（ IgG1）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中小鼠 IgG1抗体亚型（ IgG1）的存在与否。
E-(Mu)（02）-00370 小鼠弹性蛋白酶(Elastase)Elisa试剂盒，英文名：Elastase ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00371 小鼠白细胞弹性蛋白酶(HLE)Elisa试剂盒，英文名：leukocyte exastase，HLE ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00372 小鼠α淀粉酶(AMS/AMY)Elisa试剂盒，英文名：α-Amylase，AMS/AMY ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00373 小鼠碱性磷酸酶(ALP)Elisa试剂盒，英文名：alkaline phosphatase，ALP ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00374 小鼠胶原酶II(Collagenase II)Elisa试剂盒，英文名：Collagenase Type II ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00375 小鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)Elisa试剂盒，英文名：Acetylcholinesterase，AChE ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00376 小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)Elisa试剂盒，英文名：glucose oxidase，GOD ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00377 小鼠透明质酸酶(HAase)Elisa试剂盒，英文名：Hyaluronidase，HAase ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00378 小鼠酸性磷酸酶(ACP)Elisa试剂盒，英文名：Acid Phosphatase，ACP ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00379 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)Elisa试剂盒，英文名：β-glucuronidase，βGD ELISA Kit ，规格：96T/48TE-(Mu)（02）-00380 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)Elisa试剂盒，英文名：β-glucosidase ELISA Kit ，小鼠IgG1抗体亚型（IgG1）酶联免疫分析方法规格：96T/48T E-(Mu)（02）-00381 小鼠β内酰铵酶(β-lactamase)Elisa试剂盒，英文名：β-lactamase ELISA Kit ，规格：96T/48T。
透明质酸_HA_检测中的某些问题探讨
69
53. 63 ? 45. 92 39. 46 ? 30. 22
成年人
46
50. 76 ? 38. 81
表 2 正常参考值与文献参考值的比 较( Lg/ L)
作者
例数 实测范围
平均值 ? 标准值
置信区间
年龄
实验方法
统计方法
Manley[ 8] Laur en[ 9 ] Fr ebo ur [ 1 0] 张鲁榕[ 12] 高峰[ 7]
本文研 究发 现, 血 清 HA 在胚 胎 儿 和 新生 儿 组 含 量较 高, Breen[ 13] 在实验中 曾 发现 胎儿 血液 和 尿液 中 HA 含 量很 高,但 没有 引 起人 们 的重 视。我 们 认 为 HA 存 在 着 胚 胎现 象, 低龄婴儿不宜选用 HA 指标。
正常值范围的 确定 目前 均 采用 正 态分 布法, 文 献[ 7~ 10] 未说明是否做数据的正态分布检 验, 同时血 清 HA 值 以过高 为异常, 我们 认 为 选 用 95% 的 单 侧上 限 较 为 合理, 若 选用 95% 双侧检验将会出现 2. 5% 的过诊率。本文用 对数正态分 布法与百分位数法求得合并组 95% 上限值 分别为 117. 91Lg/ L 和 117. 25Lg/ L, 两者极为接近。
检验核医学[ 11] Pharmacia 本文( 新生儿) 本文( 合并组) 本文( 合并组)
50 500~ 4000
1090
27~ 86 岁
207
8~ 172
36
10~ 100
22~ 79 岁
94
0~ 57
23 ? 17
56
9~ 119
56. 80 ? 27. 42
2~ 111
大鼠透明质酸(HA)酶联免疫吸附测定试剂盒 说明书
Uscn Life Science Inc.Wuhan网址: 电话:+862784259552传真:+862784259551E-mail:***************大鼠透明质酸(HA)酶联免疫吸附测定试剂盒使用酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书说明书产品编号：E0182Ra规格：96T本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!预期应用本酶联免疫吸附测定试剂盒运用双抗体夹心ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中HA 含量。
本试剂盒试剂盒未提供但需自备的设备及试剂未提供但需自备的设备及试剂1、450±10nm 滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热）2、单道和多道微量加液器及吸头3、稀释样品的EP 管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器试剂盒的储存及有效期所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A 、检测溶液B 以及96孔板保存于-20。
开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20，避免潮湿。
有效期为6个月。
实验原理将HA 抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中依次加入标准品和标本，其中的HA 与连接于固相载体上的抗体结合，洗板之后加入生物素化的HA 抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP 标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的HA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。
标本的采集与与保存标本的采集1、血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置30分钟或4过夜，然后1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-81000g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
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小鼠透明质酸 (HA) 试剂盒使用方法
96T
检测范围：
40μg/L -1100 μg/L
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中透明质酸(HA) 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠透明质酸(HA) 水平。
用纯化的小鼠透明质
酸 (HA) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入透明质酸(HA) ，再与 HRP 标记的透明质酸 (HA) 抗体结合，形成抗体 - 抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加
底物 TMB 显色。
TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄
色。
颜色的深浅和样品中的透明质酸(HA) 呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠透明质酸(HA) 浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml× 1 瓶7 终止液6ml ×1 瓶
2 酶标试剂6ml × 1 瓶8 标准品（ 2000 μg/L ）0.5ml × 1 瓶
3 酶标包被板12孔× 8条9 标准品稀释液 1.5ml × 1 瓶
4 样品稀释液6ml × 1 瓶10 说明书 1 份
5 显色剂 A液6ml × 1 瓶11 封板膜 2 张
6 显色剂 B液6ml × 1/瓶12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
1000 μg/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
500 μg/L 4 号标准品150μl 的 5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
250 μg/L 3 号标准品150μl 的 4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
125 μg/L 2 号标准品150μl 的 3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
62.5 μg/L 1 号标准品150μl 的 2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50 μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀， 37℃避光显色
10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
OD 值）。
测定应在加终止11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（
液后 15 分钟以内进行。
操作程序总结：Array
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n× 5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：； 2-8℃。
2．有效期： 6 个月。