生化试剂参数
生化及分子生物实验常用技术参数资料(包括常用缓冲液和酶的配制等等[1]....)
实验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数2.常用核酸的长度与分子量3.常用核酸蛋白换算数据(1)重量换算1μg=10-6g1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g(2)分光光度换算:1A260双链DNA=50μg/ml1A260单链DNA=30μg/ml1A260单链RNA=40μg/ml(3)DNA摩尔换算:1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μg1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿(4)蛋白摩尔换算:100pmol分子量100,000蛋白质=10μg100pmol分子量50,000蛋白质=5μg100pmol分子量10,000蛋白质=1μg氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿(5)蛋白质/DNA换算:1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10,000MW蛋白质=270bp DNA30,000MW蛋白质=810bp DNA50,000MW蛋白质=1.35kb100,000MW蛋白质=2.7kb DNA4.常用蛋白质分子量标准参照物5.常用DNA分子量标准参照物续上表二、常用缓冲液1.分子克隆常用缓冲液2.磷酸缓冲液(1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※(2)25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml,根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH 值:pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])在此,pK’=6.86(25℃)。
3.电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,无须再进行处理。
生化试剂br
生化试剂br
生化试剂(BR):配制生物化学检验试液和生化合成。
质量指标注重生物活性杂质。
可用于有机合成。
化学试剂规格目前在我国划分为:
国标试剂:该类试剂为我国国家标准所规定,适用于检验、鉴定、检测。
基准试剂:含量应该是99.9%到100%。
随着科学技术和新兴工业的发展,对化学试剂的纯度、净度以及精密度要求愈加严格和专门化。
优级纯(GR,绿标)(一级品):主成分含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究,有的可作基准物质。
分析纯(AR,红标)(二级品):主成分含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,适用于工业分析及化学实验。
化学纯(CP,蓝标)(三级品):主成分含量高、纯度较高,存在干扰杂质,适用于化学实验和合成制备。
实验纯(LR,黄标):主成分含量高,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。
(注:此规格已很少使用)。
生化试剂参数..
A1,延迟一定时间后读取吸光度A2,计算吸光度差值与标准比较求得结果。 如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法:(两点速率法)样本与试剂反应不断消耗反应物,反应速度
不断减小,吸光度变化不断减小,在特定时间段内进行监测,该时间段内吸 光度升高或降低与样本浓度成正比,如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度范围(Linearity) 线性度不能超过设定界限,超限时说明吸光度的变化量之间已经不成 线性或说明底物不足,检测结果会变低。
试剂线性范围(Dynamic Range/Technical Limit) 与试剂/样本比值有关,超出范围的样本应增加样本量重测或样本稀释 后重测。
生化试剂其他参数及意义
前区检查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比浊法项目,可根据项目要求选YES或NO,比较终点法 后两个读数点的差别,如果后一点比前一点的吸光度低,表示已经有 抗原过剩,样本应稀释后重测 方程式(Fomular) Y=aX+b a为截距,b为斜率。用于校正检测结果,一般a为1.000,b为0.000,
生化试剂主要参数及意义
测定波长(wavelength): 不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长(main
wavelength/primary wavelength )
根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。
副波长(次波长sub
wavelength/second wavelength )
生化试剂各机型参数确定
目录
【2017年整理】常用生化试剂作用
常用生化试剂作用:1、蛋白酶K:能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,在尿素和SDS中稳定。
一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸钠,溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。
3、IPTG:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于蓝白斑筛选及IPTG 诱导的细菌内的蛋白表达等。
IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。
与乳糖不同的是,IPTG不被β-半乳糖苷酶水解。
常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。
作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的显色试剂,在IPTG的催化下显蓝色。
常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。
5、G418:一种抗生素,对几乎所有的细胞都有毒性,是稳定转染最常用的选择试剂。
当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。
G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
6、DMSO:二甲基亚砜。
实验室常用于作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。
能溶于所有烷烃和烯烃。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用,能力介于NP40和SDS之间,偏向于NP40。
8、NP-40:很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
体外诊断生化试剂应用参数
CHEMISTRY ACP ALB ALP ALT AM 货号270010036008201110060180006051000503601850111018018001803601870111050018005003600930TEST ACP ALB ALP ALT AM SAMPLE VOL.20371025 DILUTION0101000 REAGENT VOL.1-STEP250300270290250 DILUTION00000 2-STEP50[N] DILUTION00000 WAVE-LENGTH-1410600410340340 WAVE-LENGTH-2450700480410700 METHOD RATE END RATE RATE END REACTION+++--FIRST-POINT-160439 LAST-POINT-1166161616 FIRST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A LAST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A NO LAG-TIME YES NO YES YES NO TURBIDITY NO NO NO NO NO PROZONE CHECK NO NO NO NO NO REAGENT OD L-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 H 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 SERUM BLANK L N/A N/A N/A N/A N/A REAGENT OD H N/A N/A N/A N/A N/A MIN-OD-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 MAX-OD 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 LINEARITYDYNAMIC RANGE L00000 H8060100010001180 UNIT U/L g/L U/L U/L umol/L CORRELATION FACTORA=11111 B=00000 COUNT11111 DILUTION VOLUME00000 CONDENSE VOLUME00000 MONITOR SPAN11111 AGC POINT00000 K.FACTOR1308.42628.260780上述参数仅供参考,详情请参阅试剂说明及仪器说明。
常用生化检测项目分析方法及参数设置
常用生化检测项目分析方法及参数设置一、常用生化检测项目分析方法举例1.终点法检测常用的有总胆红素(氧化法或重氮法)、结合胆红素(氧化法或重氮法)、血清总蛋白(双缩脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、总胆汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白胆固醇(直接测定法)、钙(偶氮砷Ⅲ法)、磷(紫外法)、镁(二甲苯胺蓝法)等.以上项目中,除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外,其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法,包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用.2.固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
3.连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法,如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等,也可用连续监测法。
4.透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目,多数属免疫比浊法,载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗”O”、类风湿因子,以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法.二、分析参数设置分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等,其程序均已经固化在存储器里,用户不能修改.各种测定项目的分析参数(analysis paramete)大部分也已设计好,存于磁盘中,供用户使用;目前大多数生化分析仪为开放式,用户可以更改这些参数。
生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道,由用户自己设定分析参数。
因此必须理解各参数的确切意义。
一、分析参数介绍(一)必选分析参数这类参数是分析仪检测的前提条件,没有这些参数无法进行检测.1.试验名称试验名称(test code)是指测定项目的标示符,常以项目的英文缩写来表示。
2.方法类型(也称反应模式) 方法类型(assay)有终点法、两点法、连续监测法等,根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方1.常用抗生素配制以及使用说明(参考链霉菌室操作手册2019版)抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml) 10025(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 3525(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)50 50MM使用终浓度(μg/ml)链霉菌2CMYEME大肠杆菌LA或LB氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMPAmpicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprimcat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph-* 10 10 2 5 10 5 100 10-- 25 25 20 25 10 - 50------ 2.5 - 550-100 25 - 25 50 25 25 20 10-30注意事项:(1) –表示无记录或不能使用,贮存液除特别说明外均用无菌水配制,配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装;(2)Km 和Am有交叉抗性,同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量,并设置阴性对照;(3)Hyg、Vio易见光分解,配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境(如DNA培养基)下筛选效率较高,如Hyg, Km, Vio(4)用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并分装;氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装,无需过滤除菌,但需确保配制贮存液所用溶剂(无水乙醇、DMSO)未遭受污染,建议配制氯霉素时使用新的无水乙醇,不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇,以防止污染;DMSO,即二甲亚砜,易挥发,有剧毒;(5)长期不用的抗生素请置于-20℃保存,抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存,经常使用时可以暂置于4℃保存;(6)抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整;(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末,配制过程中建议穿工作服,戴一次性橡胶手套及口罩,及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具,以避免抗生素及溶剂对自身的损伤及对工作环境的污染。
生化试剂参数
在特定的温度下,一般是37度,待测物质直接或是间接或试剂中的底物发生反应,使整个液体环境的吸光度或是颜色发生变化,这个变化可能是变深或变淡,根据朗伯比尔定律,然后我们用数字光电设备去监测发生的变化,把颜色转化成电信号再转化成数字,电脑再加以计算,套入我们预先设定好的公式,这样就有结果了。
*朗伯比尔定律又称比尔定律,是光吸收的基本定律,适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质,包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。
光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目,在我们生化分析上通俗的说就是光通过颜色均匀的液体光被吸收的多少或是颜色的变化和液体中物质的浓度成线性关系。
例如AST和GLU的检测原理:L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸—AST—草酰乙酸+ L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ —MDH— L-苹果酸+ NAD+ + H2ONADH在340nm有吸收峰,所以NADH的减少速度就可以反应出AST的含量葡萄糖 + H2O + O2 —葡萄糖氧化酶—H2O2 + 葡萄糖酸2 H2O2+ 4-氨基安替比林+酚—过氧化物酶—醌亚胺(红色)+ 4 H2O生成红色的醌亚胺在500nm波长就可以检测到。
一、分析方法的选择:常见的分析方法有:终点法,速率法。
1 终点法:一般分一点终点法和两点终点法,一点法其原理是经过一定反应时间后,反应达到平衡时进行的一点分析。
例如:溴甲酚绿法测定白蛋白均用该法。
对于反应快的物质选用一点终点分析法。
二点终点法,是用二点的吸光度之差进行计算。
2速率法:也叫速度法或连续监测法,多数用于酶活力的测定。
所有酶活力测定均选用速率法。
其原理是根据酶所催化反应的速率来测定酶活力的大小,实际操作时要注意反应的方向,正反应和负反应。
二、双波长测定中辅波长的选择:双波长的应用是为了消除样品中对测定有干扰的物质的影响,而实际应用中选择第二波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸等的干扰。
例如:钼酸铵法测定无机磷,其测定波长为340nm,对于溶血样品,血红蛋白在340nm有较强吸收,其吸光度同380nm处吸光度相同,选用380nm作辅助波长,可消除溶血对测定的干扰。
生化试剂溶解方式及溶液状态
溶于水,微溶于乙醇和乙醚。
ADP Na25′-二磷酸腺苷二钠
溶于水。
琼脂
缓溶于热水成湖状,呈中性。不溶于冷水和乙醇。
琼脂糖
溶于热水,遇冷凝结成胶
L-丙氨酸
溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚和丙酮。
卵清白蛋白
溶于水和缓冲液
BSA V牛血清白蛋白V
溶于水、氯化钠溶液及缓冲液后,成澄清溶液。
过硫酸铵
溶于水,但能缓慢水解并生成过氧化氢,热至120℃开始分解。
苦杏苷
味苦,溶于水和乙醇,不溶于乙醚。
AMV反转录酶
溶于PH缓冲液中,一般试剂1ul含有10-100单位。
α-淀粉酶
溶于水
L-精氨酸
易溶于水,不溶于乙醇和乙醚。
L-精氨酸盐酸盐
溶于水,微溶于乙醇。
抗坏血酸(维生素C)
溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚、苯、三氯甲烷和石蜡醚等。
L-天门冬酰胺
无色或白色晶体。溶于酸和碱溶液,不溶于乙醇、乙醚和苯。
胃蛋白酶
溶于稀酸。
蛋白胨
溶于水,不溶于乙醇。
酚红
溶于乙醇,氢氧化钠和碳酸钠溶液,不溶于水、三氯甲烷和乙醚。
L-苯丙氨酸
溶于水,不溶于乙醇和乙醚。
L-多聚赖氨酸
易溶于水,几乎不溶于常用有机溶剂。
蛋白酶A
该品0.5mg完全溶于1ml水中,溶液无色透明。
PVP K-30
能溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于乙醚。溶于水中呈胶状溶液。
辅酶A
溶于水和生理盐水,几乎不溶于乙醇、乙醚、丙酮。
秋水仙碱
1g能溶于22ml水,220ml乙醚和100ml苯易溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于石蜡醚。
刀豆蛋白A
用10mM、Ph8.5、含100uMCaCI2的PHEPES缓冲液溶解。
生化试剂溶解方式及溶液状态
能溶于水。
铁蛋白
系水溶性蛋白。
FITC异硫氰酸荧光素
能溶于水,在水中分解。
6-呋喃氨基嘌呤(激动素)
白色片状结晶。为两性化合物,易溶于稀酸或稀碱溶液,难溶于水、乙醇、乙醚和丙酮。
明胶
溶于若随、甘油和乙酸,不溶于乙醇、乙醚和三氯甲烷等有机溶剂。
G-418硫酸盐
溶于水。
赤霉素
易溶于甲醇、乙醇、丙酮;适度的溶于乙酸乙酯。
胃蛋白酶
溶于稀酸。
蛋白胨
溶于水,不溶于乙醇。
酚红
溶于乙醇,氢氧化钠和碳酸钠溶液,不溶于水、三氯甲烷和乙醚。
L-苯丙氨酸
溶于水,不溶于乙醇和乙醚。
L-多聚赖氨酸
易溶于水,几乎不溶于常用有机溶剂。
蛋白酶A
该品0.5mg完全溶于1ml水中,溶液无色透明。
PVP K-30
能溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于乙醚。溶于水中呈胶状溶液。
能与甲醇、乙醇和乙醚相混溶,遇水逐渐分解。
硫酸葡聚糖钠
不溶于乙醇。在强碱溶液中能与多种金属离子络合。
2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸
溶于乙醇、乙醚和丙酮,难溶于水。
二氯二甲基硅烷
能溶于乙醚、苯等相混溶。遇水和乙醇易分解。
二甲基甲酰胺
能与水、乙醇、甲醇、乙醚和三氯甲烷等任意混溶。
DMSO二甲基亚砜
由吸湿性。能与水、乙醇、乙醚、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁脂、二烷和芳烃化合物等任意混溶,不溶于乙炔以外额脂肪烃化合物。
吲哚-3-丁酸
溶于乙醇、乙醚和丙酮,不溶于水和三氯甲烷那。
肌醇
白色结晶性粉末。溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。
胰岛素
用0.01N盐酸溶解,使用前用20Mm NaOH调至Ph7.5
生化试剂
常用生化试剂品名Tris:Tris(Hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷分子式: NH2C(CH2OH)3 分子量: 121.14TRIS是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH值为6.8,7.4,8.0,8.8。
其PH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高一度,PH值下降0.03。
EDTA:Ethylene Diamine Tetraacetic Acid乙二胺四乙酸分子式: C10H16N2O8 分子量: 292.248EDTA是化学中一种良好的配合剂,它有六个配位原子,形成的配合物叫做鳌合物,EDTA在配位滴定中经常用到,一般是测定金属离子的含量。
尿素:(脲; 碳酰胺; 碳酰二胺脲)Urea分子式: CH4N2O分子量: 60.05尿素易溶于水,在20℃时100毫升水中可溶解105克。
SDS:dodecyl sulfate, sodium salt十二烷基硫酸钠分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38溶解性:溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿、醚。
健康危害:对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用。
可引起呼吸系统过敏性反应。
SDS是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。
它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物。
在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂。
DTT:DL-Dithiothreitol二硫苏糖醇分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。
DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。
DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。
巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。
这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA 溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA的二聚化。
生化试剂的种类与意义
考核生化试剂的种类及意义一、血脂类检查工程〔13项〕1.总胆固醇〔CHO〕参考值:0~5.2mmol/L〔90~200mg/dL〕高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确关系,血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低,糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良,肝功能严重低下等。
血清胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。
它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。
血清总胆固醇超过5.70mmol/L可考虑为高胆固醇血症,高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化,造成堵塞性心脑血管疾病,病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。
胆固醇降低常见于:贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。
因此,胆固醇的测定对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。
2.甘油三酯〔TG〕参考值:0.7~1.7mmol/L高甘油三酯血症为心血管疾病的危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。
测定甘油三酯的重要意义在于诊断和处理高脂血症。
这些疾病可能是原发性的,或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。
甘油三酯增高常见于:高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。
甘油三酯降低常见于:严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。
甘油三酯升高已被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。
因此,甘油三酯的测定是对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。
3.高密度脂蛋白胆固醇〔HDL-C〕参考值:0.77~2.25mmol/L〔47~65mg/dl〕降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等高密度脂蛋白胆固醇的主要生理功能是转运磷脂和胆固醇,它是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白,是冠心病的保护因子,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。
临床上以不同种类脂蛋白比例的分析作为不同类型的高脂蛋白症的鉴别诊断。
高密度脂蛋白胆固醇增高常见于:饮酒、长期体力活动等。
高密度脂蛋白胆固醇降低常见于:冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。
实验室试剂分类
生物试剂分类生物试剂〔BR:Biological reagent〕涉及到化学试剂分类。
我国试剂规格根本上按纯度〔杂质含量多少〕划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析与化学纯等7种。
国家与主管部门公布质量指标主要优级纯、分级纯与化学纯3种。
〔1〕优级纯〔GR:Guaranteed reagent〕,又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精细分析工作与科学研究工作,使用绿色瓶签。
〔2〕分析纯〔AR〕,又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
〔3〕化学纯〔CP〕,又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。
使用蓝色〔深蓝色〕标签。
〔4〕实验试剂〔LR:Laboratory reagent〕,又称四级试剂。
除了上述四个级别外,目前市场上尚有:基准试剂〔PT:Primary Reagent〕:专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。
光谱纯试剂〔SP:Spectrum pure〕:表示光谱纯洁。
但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进展标定。
纯度远高于优级纯试剂叫做高纯试剂〔≥ 99.99%〕。
目前,国外试剂厂生产化学试剂规格趋向于按用途划分,常见如下:生化试剂〔BC:Biochemical〕生物试剂〔BR:Biological reagent〕生物染色剂〔BS:Biological Stain〕络合滴定用〔FCM:For Complexometry〕层析用〔FCP:For chromatography purpose〕荧光分析〔FIA〕微生物用〔FMB〕显微镜用〔FMP:For microscopic purpose〕合成用〔FS:For synthesis〕气相色谱〔GC:Gas chromatography〕高压液相色谱〔HPLC:High Pressure Liquid chromatography〕指示剂〔Ind:Indicator〕红外吸收〔IR〕液相色谱〔LC〕核磁共振〔NMR〕有机分析标准〔OSA:Organic analytical standard〕分析用〔PA:Pro analysis〕实习用〔Pract:Practical use〕〔Pure purum 纯〕Puriss 〔Purissmum 特纯〕合成〔SYN〕工业用Tech:Techincal grade〕薄层色谱〔TLC:Thin Layer chromatography〕分光纯、光学纯、紫析分光光度纯〔UV:Ultra violet pure生化试剂生化试剂〔Biochemical reagent〕是指有关生命科学研究生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用试剂。
生化试剂配制实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。
2. 熟悉实验操作规范,提高实验技能。
3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。
二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用,它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。
本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂,加深对实验原理和操作步骤的理解。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。
2. 试剂:氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。
四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚,置于烧杯中。
生化试剂的CAS号码
⽣化试剂的CAS号码CAS NO名称50-14-6维⽣素D2 (+4℃)50-23-7氢化可的松50-27-1雌三醇50-69-1D-核糖(+4℃)50-70-4D-⼭梨醇50-81-7维⽣素C50-99-7⽆⽔葡萄糖51-35-44-羟基-L-脯氨酸51-49-0L-甲状腺素52-39-1醛固酮(+4℃)52-90-4L-半胱氨酸53-06-5可的松53-16-7雌酮53-43-0脱氢异雄甾酮53-59-8辅酶Ⅱ(+4°C)53-84-9辅酶Ⅰ(+4°C)54-12-6DL-⾊氨酸54-47-4磷酸吡哆醛56-12-24-氨基丁酸56-40-6⽢氨酸56-41-7L-α-丙氨酸56-45-1L-丝氨酸56-69-95-羟基-DL-⾊氨酸(+4°C) 56-84-8L-天冬酸56-85-9L-⾕氨酰胺56-89-3L-胱氨酸56-92-8⼆盐酸组胺57-48-7D-果糖58-55-9茶碱58-56-0吡哆⾟盐酸58-85-5⽣物素58-86-6D(+)⽊糖59-23-4D(+)半乳糖59-51-8DL-甲硫氨基酸59-67-6烟酸60-18-4L-酪氨酸60-32-26-氨基⼰酸60-32-26-氨基⼰酸61-90-5L-⽩氨酸63-68-3L-甲硫氨基酸63-91-2L-苯丙氨酸64-86-8秋⽔仙碱65-19-0盐酸育亨宾65-22-5吡哆醛盐酸盐66-84-2氨基葡萄糖盐酸盐67-03-8盐酸硫胺67-21-0DL-⼄硫氨酸 98%67-97-0维⽣素D3 (+4℃)68-19-9维⽣素B1268-26-8维⽣素 A 醇溶 (-20℃) 69-65-8⽢露醇70-54-2DL-赖氨酸71-00-1L-组氨酸72-18-4L-缬氨酸72-19-5L-苏氨酸73-22-3L-⾊氨酸73-32-5L-异⽩氨酸74-79-3L-精氨酸77-06-5⾚霉素(+4℃)78-92-2(+/-)-2-丁醇79-06-1丙烯酰胺79-81-2维⽣素A棕榈酸酯(+4℃) 79-83-4D-泛酸80-68-2DL-苏氨酸80-92-2孕⼆醇83-48-7⾖甾醇83-86-3植酸83-88-5核黄素84-80-0维⽣素K1 (+4℃)87-69-4L(+)-酒⽯酸87-72-9L(+)树胶醛糖(阿拉伯糖)87-79-6L-⼭梨糖87-89-8肌醇87-99-0⽊糖醇89-65-6异维⽣素C89-78-1(+/-)-薄荷醇90-80-2葡糖酸内酯94-62-2胡椒碱96-20-8(±)-2-氨基-1-丁醇97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷98-92-0烟酰胺107-43-7三甲基⽢氨酸107-95-9β-丙氨酸112-84-5(Z)-13-⼆⼗⼆烯酰胺114-49-8东莨菪碱盐氢溴酸115-02-6氮杂丝氨酸118-10-5⾟可宁121-79-9没⾷⼦酸丙酯124-83-4(+)-樟脑酸130-95-0奎宁131-48-6N-⼄酰神经氨酸134-03-2L(+)抗坏⾎酸钠134-63-4盐酸-L-⼭梗碱137-08-6D-泛酸钙137-16-6N-⽉桂酰肌氨酸钠盐147-85-3L-脯氨酸151-21-3⼗⼆烷基硫酸钠153-94-6D-⾊氨酸154-17-62-脱氧-D-葡萄糖157-06-2D-精氨酸299-28-5D-葡萄糖酸钙300-38-93,5-⼆溴-L-酪氨酸300-39-0L-3,5-⼆碘酪氨酸301-02-0(Z)-9-⼗⼋烯酸酰胺302-84-1DL-丝氨酸312-84-5D-丝氨酸327-57-1L-正亮氨酸327-97-9绿原酸328-38-1D-亮氨酸328-39-2DL-⽩氨酸338-69-2D-α-丙氨酸344-25-2D-脯氨酸348-67-4D-甲硫氨基酸351-50-8D-组氨酸367-93-1异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(+4℃)369-07-32-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(+4°C)486-66-8⼤⾖黄酮488-81-3核糖醇,99%498-23-7(Z)-2-甲基-2-丁烯⼆酸516-06-3DL-缬氨酸527-07-1D-葡萄糖酸钠528-50-7纤维⼆糖533-67-52-脱氧-D-核糖537-55-3N-⼄酰-L-酪氨酸543-24-8N-⼄酰⽢氨酸556-02-5D-酪氨酸556-03-6DL-酪氨酸556-50-3N-⽢氨酰⽢氨酸582-84-3(±)-脱氧肾上腺素(+4℃)598-78-7(+/-)-2-氯丙酸 98%599-04-2(R)-3-羟基-4,4-⼆甲基-⼆氢-2(3H)-呋喃酮 606-68-8还原型辅酶Ⅰ⼆钠盐(+4°C) 608-66-2甜醇609-36-9DL-脯氨酸614-19-7DL-β苯丙氨酸616-06-8DL-正⽩氨酸616-91-1N-⼄酰-L-半胱氨酸617-04-9α-甲基-D-⽢露糖苷617-45-8DL-天冬酸618-27-9顺-4-羟基-L-脯氨酸623-33-6⽢氨酸⼄酯盐酸盐640-68-6D-缬氨酸657-27-2L-赖氨酸672-15-1L-⾼丝氨酸673-06-3D-苯丙氨酸744-59-2马尿酸-L-苯丙氨酸(+4℃)760-78-1DL-正缬氨酸869-19-2N-CBZ(β)⽢氨酰-L-亮氨酸911-77-3Na-苯甲酰-DL-精氨酸-4-硝基苯胺盐酸盐 928-96-1(Z)-3-⼰烯-1-醇1012-05-1DL-⾼苯丙氨酸1041-01-63,5-⼆碘-L-甲腺氨酸(+4℃)1069-31-4DL-鸟氨酸盐酸盐1098-45-9孕三醇1115-59-9盐酸-L-丙氨酸⼄酯(+4℃)1115-69-1N-⼄酰-DL-α-丙氨酸1119-34-2L-精氨酸盐酸盐1121-22-8(+/-)-反式-1.2-⼆氨基环⼰烷 (+4℃) 1132-61-2(N-吗啉)丙磺酸1145-80-8N-苄氧羰基-L-丝氨酸1148-11-4N-苄氧羰基-L-脯氨酸1149-26-4N-苯甲氧羰基-L-缬氨酸1161-13-3N-苄氧羰基-L-苯丙氨酸1165-39-5黄曲霉毒素 G1(+4℃)1234-35-0N-苄氧羰基-L-精氨酸1483-01-8L-⾼精氨酸盐酸盐1624-62-0雌酮-3-甲醚1783-96-6D-天门冬氨酸1927-25-9DL-⾼丝氨酸2001-95-8缬氨霉素(+4℃)2232-73-1酵母膏2344-83-4(3-氯丙基)三甲基硅烷,98%2438-80-4L(-)岩藻糖(阴凉)2480-23-1N-甲基-L-缬氨酸2521-86-0D-环戊基⽢氨酸2530-83-8(3-环氧丙氧基丙基)三甲氧基硅烷,98% 2530-87-2(3-氯丙基)三甲氧基硅烷2623-91-8D-2-氨基丁酸2627-86-3(S)-(-)-1-苯⼄胺2645-08-1N-苯甲酰-L-精氨酸⼄酯盐酸盐2646-71-1还原型辅酶Ⅱ四钠盐(+4°C)2650-64-8N-苄氧羰基-L-⾕氨酰胺2809-21-4(1-羟基亚⼄基)⼆膦酸2835-81-6DL-2-氨基丁酸2867-20-1DL-丙氨酰-DL-丙氨酸(-20℃)2935-35-5L-苯⽢氨酸3042-81-7(±)-α-溴代苯基⼄酸甲酯 (+4℃) 3130-87-8DL-天冬碱3184-13-2L-鸟氨酸盐酸盐3184-13-2L-鸟氨酸盐酸盐3374-22-9DL-半胱氨酸3398-40-12-甲基-DL-丝氨酸3401-36-3N-苄氧羰基-L-丙氨酸3458-28-4D-⽢露糖3615-37-0D(+)-岩藻糖3671-99-6D-葡萄糖-6-磷酸⼆钠盐(-20℃)3767-28-0对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(-20℃)3779-42-8(3-溴丙基)三甲基溴化铵3789-60-4(S)-1-苯基丁氨 98+%3792-50-5L-天冬氨酸钠盐,⼀⽔3891-79-0磷酸精胺(+4℃)4306-24-5⽢氨酰-L-亮氨酰-L-酪氨酸4358-87-6(+/-)扁桃酸甲酯,97%4420-74-0(3-巯基丙基)三甲氧基硅烷4530-20-5N-叔丁氧羰基-⽢氨酸4618-18-2乳果糖4852-22-6低聚原花青素5262-10-2(2S-顺式)-(-)-5-苄基-3,6-⼆氧基-2-哌嗪 5328-37-0L(+)树胶醛糖(阿拉伯糖) 5451-09-25-氨基左旋糖酸盐酸盐(+4°C)5680-80-8L-丝氨酸甲酯盐酸盐5704-04-1三(羟甲基)甲基⽢氨酸5743-27-1抗坏⾎酸钙5794-13-8L-天冬碱(+4℃)5934-29-2L-组氨酸盐酸盐5989-27-5(R)-(+)-苎烯,97%6025-53-2反式-9-(β-D-呋喃核糖⽟⽶素) (-20℃) 6104-58-1考马斯亮蓝G250 6106-04-3L-⾕氨酸钠盐6119-70-6硫酸奎宁6138-23-4海藻糖6155-35-7L(+)-⿏李糖6160-12-9硫酸鹰⽖⾖碱(+4℃)6184-17-4核黄素-5-磷酸钠(+4℃)6249-56-5(3-羧丙基)三甲基氯化铵6284-40-8N-甲基-D-葡糖胺6363-53-7麦芽糖6381-77-7异抗坏⾎酸钠6556-12-3D-葡萄糖醛酸6591-63-5硫酸奎尼丁6600-40-4L-正缬氨酸6892-68-8⼆硫⾚⾊草醇(+4℃)6974-32-91-O-⼄酰-2,3,5-三-O-苯甲酰-β-D-呋喃核糖 7048-04-6L-半胱氨酸盐酸盐(⼀⽔)7200-25-1DL-精氨酸7241-98-7黄曲霉毒素 G2(+4℃)7274-88-6D-赖氨酸盐酸盐7512-17-6N-⼄酰-D-氨基葡萄糖(+4℃)7524-50-7L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐7524-52-9L-⾊氨酸甲酯盐酸盐7533-40-6L-⽩氨醇7695-91-2维⽣素E(⼄酸维⽣素E)7764-95-6N-叔丁氧羰基-D-丙氨酸7785-70-8(1R)-(+)-α-蒎烯8049-47-6胰酶(+4℃)9000-90-2a-淀粉酶(+4°C)9000-91-3β-淀粉酶(+4°C)9000-92-4淀粉酶(+4°C)9001-19-8⾼峰淀粉酶 (2-8℃)9001-59-6丙酮酸激酶(+4℃)9001-60-9乳酸脱氢酶(+4℃)9001-62-1脂肪酶(+4℃)9001-64-3苹果酸脱氢酶(+4℃)9001-67-6神经氨酸酶(+4℃)9001-73-4⽊⽠蛋⽩酶(+4℃)9001-75-6胃蛋⽩酶(+4℃)9001-99-4核糖核酸酶(+4℃)9002-07-7胰蛋⽩酶(+4℃)9002-13-5脲酶(-20℃)9003-98-9脱氧核糖核酸酶(+4°C)9003-99-0过氧化物酶(辣根)(+4℃)9004-02-8脂蛋⽩脂肪酶(-20℃)9004-07-3α-糜蛋⽩酶(+4℃)9005-79-2糖原9005-80-5菊糖9007-34-5⾻胶原酶(+4°C)9012-36-6琼脂糖9012-76-4壳聚糖9013-02-9肌激酶(+4℃)9014-63-5⽊聚糖9028-76-6胆甾醇氧化酶(+4℃)9035-81-8胰蛋⽩酶抑制剂(⼤⾖)(+4℃)9041-08-1肝素钠10191-41-0(±)-α-⽣育酚 (+4℃)10318-18-0DL-半胱氨酸盐酸盐10323-20-3D-(-)-树胶醛糖(阿拉伯糖)11024-24-1⽑地黄皂苷13078-04-1(±)新烟碱14525-44-1N-(γ-L-⾕氨酰)-1-萘胺(+4°C)14676-01-83-(Boc-amino)-3-phenylpropionic acid 15761-38-3N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸15761-39-4N-叔丁氧羰基-L-脯氨酸16409-43-1(+)-玫瑰醚16652-71-4L-脯氨酸苄酯盐酸盐16948-16-6N-甲基-L-丙氨酸17609-47-1L-缬氨酸甲酯盐酸盐17629-30-0D(+)棉⼦糖五⽔的化合物18531-94-7(R)-(+)-1,1-联-2-萘酚18598-74-8L-异亮氨酸甲酯盐酸盐18680-27-8(1S 2S 3R 5S)-(+)-蒎烷⼆醇 99%18942-49-9N-叔丁氧羰基-D-苯丙氨酸19777-67-4(R)-(+)-⼆氨基丙烷⼆盐酸盐20071-00-5(ASN1 VAL 5)-⾎管紧张系II (-20`C)20445-33-4(s)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯⼄酰氯 20859-02-3L-叔亮氨酸22059-21-81-氨基环丙烷羧酸22161-81-5(S)-(+)-酮洛芬22644-28-6(R)-2-甲基-1,4-丁⼆醇25952-53-8L-2-氨基丁酸25988-63-0聚-L-赖氨酸氢溴酸盐(+4°C)26177-86-6D-果糖-6-磷酸⼆钠(-20℃)27565-41-91,4-⼆硫代苏糖醇(+4℃)29617-66-1(S)-(-)- 2-氯丙酸31828-68-9L-⾼胱氨酸硫内酯盐酸盐33375-06-3(R)-(+)-1-苯⼄基异氰酸酯 ≥99.0%34484-17-1N-叔丁氧羰基-D-脯氨酸35193-64-7(S)-(+)-联萘酚磷酸酯37067-30-44-甲基伞形酮基-N-⼄酰-β-D-氨基葡糖苷 39637-99-5(r)-(-)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯⼄酰氯 39648-67-4(R)-(-)-联萘酚磷酸酯57090-45-6(R)-(-)-3-氯-1,2-丙⼆醇66009-10-7D(+)-密⼆糖⼀⽔》99.0%71989-35-0芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酸71989-38-3芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸73913-64-1D-缬氨酸⼄酯盐酸盐78348-24-0(RS)-1H-吲哚-2-羧酸79990-15-1N-芴甲氧羰酰基-D-丙氨酸81678-16-2亮氨酸脑啡肽84000-07-7N-芴甲氧羰酰基-N-甲基-L-丙氨酸84650-60-2茶多酚86087-24-3(R)-(-)-3-羟基四氢呋喃 98%90224-21-8(2-⼄基⼰基)溴化镁90719-32-7(S)-4-苄基-2-恶唑酮91510-62-2D-(+)半乳糖醛酸 BC≥93%95061-46-4(R)-(+)-1,1,2-三苯基-1,2-⼄⼆醇98327-87-8(+/-)-2,2’-双(⼆苯膦基)1,1-联萘99241-25-5(2-羟丙基)-gamma-环糊精99636-32-5(S)-(+)-1-甲氧基-2-丙胺102029-44-7(R)-4-苄基-2-噁唑烷酮103765-03-3(R)-(–)-2-氨基丁酰胺盐酸盐 97%128446-35-5(2-羟丙基)-β-环糊精132327-80-1芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-⾕氨酰胺136030-00-7(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇143824-78-6N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-⾊氨酸 147081-44-5(3S)-(-)-1-(叔丁氧羰基)-3-氨基吡咯烷 147081-49-0(3R)-(+)-1-(叔丁氧羰基)-3-氨基吡咯烷 196929-78-9(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺343338-28-3(S)-(-)-叔丁基亚磺酰胺。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种,下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍:1.磷酸缓冲液(PBS)PBS是一种常用的缓冲液,用于洗涤细胞和组织,以及稀释试剂等。
它的配方通常包括:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.44g-KH2PO4:0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中,调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值,常用于分子生物学实验。
其配方为:- Tris-HCl:12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
3.氢氧化钠(NaOH)溶液NaOH是一种常用的碱试剂,可用于调节pH、溶解蛋白质等。
其常见配方为:-NaOH:4g将NaOH溶解于1L去离子水中。
4.氯仿/异丙醇提取液氯仿/异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。
其配方为:-氯仿:24mL-异丙醇:25mL-TE缓冲液:1mL将以上试剂混合,并轻轻摇匀。
5.碳酸氢钠(NaHCO3)缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液,可用于调节溶液的pH值。
其配方为:-NaHCO3:8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
6.绿色荧光蛋白(GFP)提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。
其配方为:- Tris-HCl(pH 7.5):50 mM-NaCl:150mM-EDTA:1mM- Triton X-100:1%将以上试剂混合,并用PBS稀释至所需浓度。
7.锌离子(Zn2+)溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。
其配方为:-ZnSO4·7H2O:2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。
8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。
其配方为:-生理盐水:9mL-甲苯:1mL将以上试剂混合,即可得到溶血液。
这只是一小部分生化试剂配方的介绍,实验室中常用的试剂配方非常多,根据具体实验的需要,需要选择合适的试剂及其配方。
常用生化试剂
常用生化试剂货号品名规格价格(元) 备注B1005 Acridine Orange,1/2 ZnCI2 (吖啶橙) 5g/10g 190/320 Sigma分装B1006 Acrylamide (电泳级丙烯酰胺) 100g/500g 120/500 Sigma分装B1007 Acrylamide,Ultra Pure 丙烯酰胺(超纯) 100g/200g 140/260 Amresco分装B1008 Acryl/Bis 19:1, 30% Solution 250ml 150 进口原料自产B1009 Acryl/Bis 29:1, 30% Solution 250ml 100 进口原料自产B1010 Acryl/Bis 37.5:1, 30% Solution 250ml 120 进口原料自产B1011 Acetyl Coenzyme A(乙酰辅酶A) 10mg 900 Roche分装B1014 A DP,2Na,2H2O (腺苷-5'-二磷酸腺苷) 100mg/250mg/1g 60/150/500 Sigma分装B1017 Agar,Bacterological (琼脂粉-细菌培养级) 100g 100 日本分装B1018 Agarose, Type A (琼脂糖) 100g 350 Spannish原装B1020 Agarose Ⅱ,Low Melt Point (琼脂糖-低熔点) 5g/25g 200/860 Amresco分装B1021 Actidione(Cycloheximide)放线菌酮100mg 200 Sigma分装B1022 ActinomycinD 放线菌素D 1mg 250 Sigma分装B1025 A lcian Blue 8 GX (阿尔新蓝,阿利新兰) 1g/5g 120/400 Amresco分装B1026★Alloxan(四氧嘧啶)10g 350 Sigma分装B1027 A mido Black 10B (氨基黑) 5g/10g/100ml 80/120/50 Amresco分装B1029 Ammonium Persulfate (过硫酸铵) 50g/100g 80/120 Sigma分装B1030 Ampholine(两性电解质)PH3.0-9.5 12ml 580 国产B1032 A mpicilin,Na (氨苄青霉素钠盐) 1g/5g 40/150 Amresco分装B1033 AMV Reverse Transcriptase(逆转录酶) 300u/1000u 680/1750 Promega原装B1034★Aprotinin (抑蛋白酶肽,抑肽酶) 6ku/25ku 150/500 Usbio分装B1036 L-Ascorbic Acid (L-抗坏血酸,维生素C) 100g/500g 60/250 Amresco分装B1039 A TP,2Na,3H2O 5'-三磷酸腺苷1g/2g 50/100 Amresco分装B1041 BCIP (5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸) 50mg/100mg 80/120 Amresco分装B1043 Benzamidine,HCI (盐酸苯甲脒,盐酸苄脒) 5g/25g 100/400 Amresco分装B1045 D-Biotin (生物素) 250mg/1g 50/170 Amresco分装B1046 Bis-Acrylamide 双丙烯酰胺10g/25g 60/120 Amresco分装B1051 Bromcresol Green,Na (溴甲酚绿,溴甲酚蓝) 1g/5g 40/160 Amresco分装B1052 Bromcresol Blue,Na (溴酚兰) 5g/25g 70/310 Amresco分装B1053 5-Bromo-2'-Deoxyuridine(5-溴-2-脱氧尿苷) 250mg 450 Fluka分装B1054 BSA,Fraction V (牛血清白蛋白) 5g/25g/100g 70/250/700 Sigma分装B1060 CHAPS 1g/2.5g/10g 180/300/1000 Amresco分装B1063 Collagenase V (V型胶原酶)100mg 500 Sigma分装B1065 Citric Acid,3Na,2H2O (柠檬酸钠) 250g 70 Amresco分装B1066 Colchicine 秋水仙碱(素) 250mg 230 Sigma分装B1067 Collagen I(I型胶原酶) 100mg/1g 300/2500 Gibco分装/Worth 原装B1068 Collagen II(II型胶原酶) 100mg/1g 300/2500 Gibco分装/Worth 原装B1069 Collagen IV(IV型胶原酶) 100mg/1g 300/2500 Gibco分装/Worth原装B1070 Concanavalin A (刀豆球蛋白A,伴刀豆球蛋白A) 25mg/100mg 150/520 Amresco分装B1071 Coomassie G-250,Na (考马斯亮蓝G-250) 5g/10g/100ml 90/170/50 Amresco分装B1072 Coomassie R-250,Na (考马斯亮蓝R-250) 5g/10g/100ml 80/140/50 Amresco分装B1073 Cytochalasin B 细胞松弛素B 1mg 590 Sigma分装B1075 DAB,4HCI (二氨基联苯胺) 250mg/1g/1ml 50/90/140 Amresco分装B1077 DAPI 10mg 850 Roche原装B1078 DEAE Dextran (DEAE-葡聚糖) 10g/20g/100g 110/190/950 Amresco分装B1081 DEPC (焦炭酸二乙脂) 10ml 280 Sigma分装B1083Dextran Blue 2000(蓝色葡聚糖2000) 1g/10g 280/2200 Pharmacia分装★B1084Dextran T10/40/70/500/2000(葡聚糖) 10g/100g 250/1700 Pharmacia分装★B1085 Dextran Sulfate,Na (硫酸葡聚糖) 10g/25g/50g 280/350/680 Amresco分装B1086 DMF (N'N二甲基酰胺) 100ml/500ml 50/210 Amresco分装B1087 DMSO (二甲亚砜) 100ml/500ml 78/310 Amresco分装B1088 DNA,Calf Thymus,Na (小牛胸腺DNA) 50mg/250mg 200/770 Sigma分装B1089 DNA,Sheared (鱼精DNA) 50mg/200mg 70/250 Amresco分装B1090 DNA Marker Ⅰ,Wide(DNA低分子量标准) 10次/30次160/350 Gibco分装B1091 DNA Marker Ⅲ,High (DNA高分子量标准) 10ug 220 Gibco分装B1092 DNAse Ⅰ,Bovine (脱氧核糖核酸酶) 25mg/100mg 230/430 Sigma分装B1093 dNTP Mixture,50X (dNTP混合物) 4x 4uM/4x 10uM 160/350 Amresco分装B1094 DTT (二硫代苏糖醇) 1g/2g/5g 100/200/450 Amresco分装B1096 EB (溴化乙啶) 1mL/1g 30/170 Amresco分装B1098 EDTA,2Na,2H2O (乙二胺四乙酸) 100g 90 Amresco分装B1099 EGTA 乙二醇-双-(2-氨基乙基)-四乙酸5g/10g 100/160 Amresco分装B1102 Ficoll 400 (聚蔗糖) 5g/10g 120/220 Amresco分装B1103 FITC,Isomer Ⅰ(异硫氰酸荧光素) 100mg/500mg 280/900 Amresco分装B1109 Formamide,Deionized(去离子甲酰胺) 100ml/250ml 140/330 Amresco分装B1110 Freund's CA(佛氏完全试剂) 10ml 220 Sigma原装B1111 Freund's IA(佛氏不完全试剂) 10ml 190 Sigma原装B1114 G-418,sulfate 250mg/1g 250/750 Gibco分装B1115 G-418,Solution G-418(无菌,溶液) 250mg/1g 250/700 Gibco分装B1116 D+Galactose (D-半乳糖) 25g/50g 120/220 Amresco分装B1121 L-Glutamic Acid (L-谷氨酸) 200g 70 Amresco分装B1122 L-Glutamine (谷氨酰胺) 50g/250g 95/450 Amresco分装B1123 Glutathion, Oxidozed (谷胱苷肽-氧化型) 250mg/1g 100/300 Amresco分装B1124 G lutathion, Reduced (谷胱苷肽-还原型) 5g/10g 150/250 Amresco分装B1125 Glycerol (甘油) 100ml/250ml 50/120 Amresco分装B1126 Glycine (甘氨酸) 50g/250g 30/100 Amresco分装B1128 Guanidine Hydrochloride (盐酸胍) 25g/100g 40/150 Amresco分装B1129 G uanidine Isothiocyanate 异硫氰酸胍25g/100g 40/150 Amresco分装B1134 Hepes(N- 2 -羟乙基哌嗪- N'-2-乙磺酸) 25g/50g/100g 100/180/300 Amresco分装B1135 L-Histidine (L-组氨酸) 5g/10g 70/120 Sigma分装B1136 HRP(辣根过氧化物酶) 10mg/100mg 280/360 Roche分装/国产B1138 Hyaluronidase(透明质酸酶) 100mg/250mg 250/500 Sigma分装B1139 Imidazole (咪唑) 10g/50g/250g 30/130/530 Sigma分装B1141 IPTG 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷1g/5g/10g 90/360/700 Amresco分装B1142 Isoamyl Alcohol (异戊醇) 100ml/1000ml 50/400 Amresco分装B1144 Isopropanol (异丙醇) 100ml/250ml 60/100 Amresco分装B1147 Lactate dehydrogenase(乳酸脱氢酶) 100mg 250 Amresco分装B1151 Leupeptin (亮抑蛋白酶肽) 5mg/10mg 380/650 CNI分装B1152 Lipofectamine 2000(脂质体2000转染试剂) 0.75ml/1.5ml 1900/3500 Invitrogen原装B1153 Lithium Chloride (氯化锂) 100g/500g 120/540 Amresco分装B1154 Lithium Chloride,8M (氯化锂溶液) 100ml 80 进口原料自产B1155LPS(脂多糖、内毒素) 10mg 350 Sigma分装★B1166 2-Mercaptoethanol (b-巯基乙醇) 50ml/250ml 70/250 Amresco分装B1169 Methl Green ZnCI4 (甲基绿) 2.5g/10g 60/200 Amresco分装B1170 Methykene Blue (亚甲蓝,美蓝,次甲基蓝) 10g/100g 60/350 Amresco分装B1176 MTT (噻唑蓝) 250mg/500mg/1g 130/230/380 Amresco分装B1177 NAD,3H2O (辅酶Ⅰ-氧化型) 500mg/1g 160/250 Amresco分装B1178 NADH,2Na,3H2O (辅酶Ⅰ-还原型) 250mg/1g 150/400 Amresco分装B1181 NBT (硝基四氮唑蓝) 200mg/1g 160/750 Amresco分装B1182 Percoll 细胞分离液100ml 400 PharmaciaB1197 PEG 400 (聚乙二醇400) 200g 200 Sigma分装B1198 PEG 3350 (聚乙二醇3350) 100g 140 Sigma分装B1199 PEG 6000 (聚乙二醇6000) 200g 160 Sigma分装B1200 PEG 8000 (聚乙二醇8000) 200g 80 Amresco分装B1202Pentobarbital Sodium(戊巴比妥钠) 5g/10g/25g 200/380/750 Fluka分装★B1204 Pepstatin A (抑胃肽) 5mg/10mg 300/500 CNI分装B1205 Peroxidase(Horseradish)辣根过氧化物酶10mg/100mg 140/1000 国产B1206 P H Standard SET (PH标准液) set 170 Amresco分装B1207 PHA-P (植物凝集素P) 5mg/25mg 160/750 Sigma分装B1212 PMS (甲基吩嗪甲基硫酸盐,吩嗪硫酸甲酯) 1g 250 Amresco分装B1213 PMSF (苯甲基磺酰氟) 1g/5g 80/340 Amresco分装B1215 Polymyxin B Sulfate (多粘菌素B) 1mu/2.5mu/5mu 130/290/550 Amresco分装B1216Pronase(链酶蛋白酶) 250mg/1g 300/880 Roche分装★B1217 Ponceau S (丽春红) 10g/25g/100ml 70/160/50 Amresco分装B1221 Propidium lodide (碘化丙啶) 10mg/20mg/100mg 170/330/1300 Sigma分装B1222 Proteinase K (蛋白酶K) 100mg 380 Amresco原装B1225 Putrescine Hydrochloride(腐胺) 5g 160 分装:SigmaB1227 Pyruvic Acid,Na (丙酮酸钠) 20g/100g 100/450 Amresco分装B1235 RNase A (核糖核酸酶A) 25mg/100mg 130/360 Sigma分装B1236 RNase Inhibitor (RNA酶抑制剂) 2500u/1000u 850/280 Promega原装/CNI B1237 SDS 十二烷基磺酸(硫酸)钠100g/100ml 90/50 CNI分装B1245 S odium Cholate (胆酸钠) 25g/100g 250/700 Amresco分装B1246 Sodium Phosphate (磷酸氢二钠) 500g 280 Amresco分装B1247 Sodium Phosphate (磷酸二氢钠) 500g 200 Amresco分装B1250 Spermidine,3HCI (亚精胺,精脒) 1g/5g 190/780 Sigma分装B1251 Spermine,4HCI (精胺) 500mg/1g 190/350 Sigma分装B1252 20X SSC溶液100ml 50 Sigma分装B1254Streptozocin(链脲佐菌素)100mg/500mg 280/1400 Sigma分装★B1259 S uperscript II(逆转录酶) 2000u/10000u 890/2900 Invitrogen原装B1260 TAE (50X)溶液100ml 50 Sigma原料自产B1261 TBE (10X)溶液100ml 50 Sigma原料自产B1263 Taq DNA Polymerase(Taq酶) 100u/1000u 220/200 Promega原装/国产B1264 TEMED (四甲基乙二胺) 20ml/100ml 70/250 Sigma分装B1271 TMB,2HCI (四甲基联苯胺) 250mg/1g/100ml 80/290/150 Amresco分装B1273 T ricine N-(三(羟甲基)甲基)甘氨酸20g/100g 60/250 Amresco分装B1274 Tris (三羟甲基氨基甲烷)250g/500g 100/170 Amresco分装B1275 Tris-HCL (三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)100g/500g 150/620 Amresco分装B1276 T riton X-100 (曲拉通X-100) 250ml/1000ml 80/300 Amresco分装B1277 Trizol Reagent 100ml 700 Invitrogen原装B1279 Ttypan Blue (台盘兰,曲利本兰) 10g 200 Sigma分装B1280 T rypsin 1:250, (胰蛋白酶1:250) 25g 180 Amresco分装B1281 Trypsin Inhibitor, (胰蛋白酶抑制剂) 100mg 140 Amresco分装B1282 Tryptone(胰蛋白胨) 500g 380 Oxoid原装B1283 酵母粉500g 200 Oxoid原装B1284 Tween 20 (吐温20) 100ml 45 Sigma分装B1285 Tween 60 (吐温60) 100ml 45 Sigma分装B1286 T ween 80 (吐温80) 100ml 45 Sigma分装B1297 X-Gal (5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖苷) 250mg/1g/5×1ml 120/400/150 Amresco分装B1299 Xylene Cyanol FF (二甲苯蓝,二甲苯青) 2g/5g/20g 60/150/570 Amresco分装B1300 SephadexG-10 葡聚糖凝胶G-10 25g 550 Pharmacia分装B1301 SephadexG-15 葡聚糖凝胶G-15 25g 580 Pharmacia分装B1302 SephadexG-25 葡聚糖凝胶G-25 25g 580 Pharmacia分装B1303 SephadexG-50 葡聚糖凝胶G-50 25g 680 Pharmacia分装B1304 SephadexG-75 葡聚糖凝胶G-75 25g 700 Pharmacia分装B1305 SephadexG-100 葡聚糖凝胶G-100 25g 900 Pharmacia分装B1306 SephadexG-150 葡聚糖凝胶G-150 25g 900 Pharmacia分装B1307 SephadexG-200 葡聚糖凝胶G-200 25g 950 Pharmacia分装B1308 Sephadex CL-4B 琼脂糖凝胶CL-4B 100ml 800 Pharmacia分装B1309 Sephadex CL-6B 琼脂糖凝胶CL-6B 100ml 800 Pharmacia分装B1310 SephadexLH-20 葡聚糖凝胶LH-20 25g 1200 Pharmacia分装B1311 DEAE Sephadex 葡聚糖凝胶A-25 25g 800 Pharmacia分装B1312 DEAE Sephadex 葡聚糖凝胶A-50 25g 820 Pharmacia分装B1313 DEAE Sepharose fast flow DEAE琼脂凝胶FF 25ml 600 Pharmacia分装B1314 CNBR Activated Sepharose 4B 溴化氰活化琼脂糖5g 1320 Pharmacia分装凝胶4B。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
生化试剂主要参数及意义
一级动力学法:(两点速率法)
精品课件
生化试剂主要参数及意义
零级动力学法:(连续监测法,用于酶活性监测)
精品课件
生化试剂主要参数及意义
ü反应方向(response direction) u正向反应(UP/INC/+):吸光度增加。 u负向反应(DOWN/DEC/-):吸光度下降。
检测时吸光度值为主波长的吸光度减去副波长的吸光度。
精品课件
生化试剂主要参数及意义
✓分析时间: 孵育时间(incubate time) 一点终点法的孵育时间是指样本与试剂开始到反应终点的时间;两点 终点法是指第一个吸光度反应点开始到第二个吸光度点为止时间。一 般为5min。 延迟时间(delay time) 加入第二反应试剂后到第一个吸光度监测点开始的时间。即样本与反 应试剂(第二试剂)混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。单 试剂一般设置为30s,双底物反应或酶类反应一般设置为1-3min。 连续监测时间( continuous monitoring time) 在延迟时间后的零级反应开始,监测至少4个点(3个吸光度变化值), 一般为1-2min。
精品课件
生化试剂其他参数及意义
ü 试剂吸光度范围(Linearity) 线性度不能超过设定界限,超限时说明吸光度的变化量之间已经不成 线性或说明底物不足,检测结果会变低。 ü试剂线性范围(Dynamic Range/Technical Limit) 与试剂/样本比值有关,超出范围的样本应增加样本量重测或样本稀释 后重测。
精品课件
生化试剂主要参数及意义
ü项目名称(test name): 常以项目的英文缩写来设置。 ü方法类型(assay/Method )(适用于仪器的方法): 方法类型主要分为:终点法和动力学法 u终点法 u一点终点法:样本与试剂混匀一定时间后读取反应终点吸光度,如血糖氧化 酶法、总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法等。 u两点终点法:(又称固定时间法)样本与试剂混匀一定时间后先读取吸光度 A1,延迟一定时间后读取吸光度A2,计算吸光度差值与标准比较求得结果。 如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
多用于连续监测法测定酶活时,无Байду номын сангаас定标曲线,根据摩尔消光系数计
算得到结果。
106× V
F= —————— ɛ×v×L
V:反应体系总体积(ml);v:样本体积(ml)
ɛ:摩尔消光系数(cm2/mol) L:比色杯光径(cm);106:将mol换算为μmol
精品课件
生化试剂其他参数及意义
ü试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) ü底物耗尽限额(substrate exhaust limit) ü试剂吸光度线性范围(Linearity) ü 试剂线性范围(Technical Limit) ü前区检查限(Prozone Check Limt) ü方程式(Fomular) ü小数位(Decimal Places) ü双份界限(Duplicate Limit) ü敏感性界限(Sensitivity Limit) ü第一标准吸光度界限(S1 Abs.limt) ü反应过程吸光度界限(Absorbance Limit)
精品课件
生化试剂其他参数及意义
ü前区检查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比浊法项目,可根据项目要求选YES或NO,比较终点法后 两个读数点的差别,如果后一点比前一点的吸光度低,表示已经有抗 原过剩,样本应稀释后重测
生化试剂各机型参数确定
精品课件
目录
➢生化试剂主要参数及意义 ➢生化试剂其他参数及意义 ➢各机型生化分析仪概括介绍 ➢各机型参数特点
精品课件
生化试剂主要参数及意义
生
化
试
剂
说
明
书
中
各
参
数
(
例
:
脂
肪
酶
)
精品课件
生化试剂主要参数及意义
✓项目名称 ✓方法类型 ✓反应方向 ✓测定波长 ✓测定温度 ✓样本体积 ✓试剂量 ✓分析时间 ✓校正方法
精品课件
生化试剂主要参数及意义
ü校正方法(Calibration Type):
可采用标准液(校准液)定标方式或理论K值方式获取标准曲线。
u线性定标( Linear/AB):
两点定标,标准曲线呈直线。
u非线性定标(Spline/4AB/polygonal):
多点定标,标准曲线近似于直线。
u理论K值 (Factor/MB):
精品课件
生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法:(两点速率法)样本与试剂反应不断消耗反应物,反应速度 不断减小,吸光度变化不断减小,在特定时间段内进行监测,该时间段内吸 光度升高或降低与样本浓度成正比,如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
零级动力学法:(连续监测法,用于酶活性监测)样本与试剂反应,反应物 可匀速生成某个产物,如NADH,在特定波长下吸光度均匀的增大或减小,增 大或减小的速度与样本浓度呈正比。如碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。
精品课件
生化试剂其他参数及意义
ü试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) 常用规定波长及光径下的吸光度值表示。终点法常在0点读数,连续监 测法常以反应监测起始点来判读该吸光度值。 可用于判断试剂质量。检测试剂空白时,若超过此参数的限值,则提 示试剂可能失效。
ü底物耗尽限额(substrate exhaust limit) 连续监测法或两点终点法时设置。 根据吸光度上升或下降设定MAX-OD/MIN-OD,吸光度超过设定界限时, 代表样品酶活非常高,底物消耗太快,所测得结果不能代表真实酶活 力。
ü测定温度 30℃、37℃、25℃
ü样本体积(sample volum) 一般为2-35μl ,以0.1μl步进。
ü试剂量(regengt volum) 一般为20-300μl ,以1μl步进。
不同机型生化分析仪的样本量及试剂量限制不同,样本与试剂可根据比例进行增大
或减少。
精品课件
生化试剂主要参数及意义
✓测定波长(wavelength): 不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长(main wavelength/primary wavelength ) 根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。 副波长(次波长sub wavelength/second wavelength ) 可不选择设定。副波长可消除样本溶血,血清浑浊的干扰影响,副波 长与主波长越接近越好。