HC2产品基本知识介绍

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外插 宫入 颈宫 逆颈 时口 针 1 方 Capture®2 HPV DNA 向 1 Cervical Sampler™ 旋 5 转 三, 圈直 到 停刷 留子 十最 秒外 圈 接 触 到 . cm , ,
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测宫颈取样标本保存
将刷子底部放到转移管中,在划线处折断杆子,将整个刷子留在转移管中
Sample & Assay Technologies
digene HC2 HPV检测临床应用及其优势介绍
WH市场部
Sample & Assay Technologies
Hybrid Capture® 2(HC2 )--杂交捕获二代
利用基因杂交、化学发光、信号放大的原理
在分子水平同时检测被WHO确认的13种高危型-HPV 病毒DNA
Step 2:杂交 全长病毒 RNA探针与 HPV病毒靶DNA结合, 形成RNA:DNA 复合物
二 抗
偶联的 碱性磷 酸酶
Step 3:捕获
RNA:DNA 复合物被包被 在微孔板上的抗体捕获 一抗特异性结RNA:DNA 复合物
Step 5:产生发光信号 加入碱性磷酸酶的底物 产生化学发光信号,仪 器判读发光信号
65° 水浴 15 min. 漩涡混合15-30 sec. 在水浴 30 min.
加盖漩涡混合 30 sec
150 uL 变性液
取出残余液态
Sample & Assay Technologies
用Digene自己的采样标本,可直接进行检测!
Step 1
Step 2

Step 3
500uL混有指示剂的变性剂加入样本
少量血液不影响检测结果
在试管壁上标明患者名称和年龄盖紧瓶盖
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测流程:
1.样本收集:样本类型及采样注意事项
2.样本处理过程
3.检测步骤
Sample & Assay Technologies
不同类型的样本
hc2 DNA Collection Device采样器
Step 1
Step 2
Step 3
Step 4
Step 5
摇动 / 漩涡混合 10 sec. 取出 4 mL
加入 400uL 转换缓冲液
加盖和漩涡混合
离心 15 min
取出上清液
Step 10
Step 9
Step 8
CCU
Step 7
Step 6
漩涡混合 5 sec. 去盖,取75 uL 加入微孔板

– 二抗偶联有碱性磷酸酶
Luminescence
加入碱性磷酸酶的底物
产生化学发光信号
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测步骤-----简单的5步
Step 1:变性 溶解细胞,解链和变性 核酸, 释放HPV DNA单 链
Step 4:杂交检测 用二抗结合捕获后的 复合物二抗偶联有碱 性磷酸酶
加盖和漩涡混合 (MST)
65° 水浴 45 min. 漩涡混合 5 sec
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测流程:
1.样本收集:样本类型及采样注意事项
2.样本处理过程
3.检测步骤
Sample & Assay Technologies
HC2 技术的检测步骤
Hc2检测方法分为简单的5部 变性 溶解细胞,释放DNA单链 杂交 全长病毒 RNA探针与病毒靶DNA结合
HPV标本的保存
1、室温下:保存2周 2、 2-8℃:再保存1周 3、 -20℃:保存3个月或更长
Sample & Assay Technologies
标本保存注意事项
使用专用的DIGENE HPV采样器(含试剂,可抑制细菌生长,保持DNA完整 性) 注:切勿将小刷子扔掉,以保留足量标本 采样前三天内不要阴道内用药或冲洗,避免经期采样 采样前不要进行醋酸/碘液涂抹 开盖、折断小刷子时勿大力震荡试管,以免试剂溅出影响检测或标本溅 出造成污染
The ThinPrep 细胞保存液
细胞溶解: 只保留DNA
保留细胞
Sample & Assay Technologies
不同类型的样本处理
Thinprep 样本在进行 hc2检测前进行转换
样本转换试剂盒
Sample & Assay Technologies
PreservCyt (即Thinprep样本)的转换流程
The hc2 DNA Collection Device采样器™采集的STM标本 The ThinPrep® 样本 (Hologic) 新鲜宫颈活检标本(截面为2-5mm的宫颈活检组织)
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测宫颈取样
ybrid Test
96test/kit( 88病人标本/盒)
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测流程:
样本收集:样本类型及采样注意事项
样本处理过程
检测步骤
Sample & Assay Technologies
HC2 HPV检测 采样器
用于HPV检测的最常见的样本 是:
捕获 DNA:RNA 复合物被包被在微孔板上的抗体捕获
– 一抗特异性结合DNA:RNA 复合物
杂交检测 用二抗结合捕获后的复合物
Denature specimen
Capture and detect 发光信号产生 hybrids Hybridize– with RNA probe
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