三合一清洗验证方案

2006年新车间杆菌肽洗涤过滤干燥机

清洗验证方案

文件编号：三合一清洗AmB-PV-F

1 目的

通过清洗验证，验证杆菌肽洗涤过滤干燥机清洗操作的适用性及有效性，确认按照清洗操作规程操作，设备上的杆菌肽的残留达到了规定的清洁限度要求，不会对下批或更换品种后的生产造成交叉污染。

2 系统简介

2.1 设备简图

电机

废乙醇或丙酮

2.2 概述：

洗涤过滤干燥机是将杆菌肽结晶液进行最后精处理的主要设备。结晶液压入洗涤过滤干燥机进行过滤，收集滤液到废乙醇贮罐。过滤完毕，氮气吹净液相，将搅拌桨下降至与滤饼刚好接触，通过搅拌桨位置读出滤饼厚度。并据此计算出工业乙

醇、工业丙酮洗涤用量，按每次洗涤加量90～140L工业乙醇、工业丙酮分次洗涤。洗涤液通过精滤器进入洗涤过滤干燥机。先用工业乙醇洗涤，再用工业丙酮洗涤，浸泡一定时间后将液相过滤至废溶媒贮罐，用氮气吹净液相。每次洗涤前将搅拌桨慢下到最低位置，疏松并搅拌滤饼。在加洗涤液的同时，将搅拌桨上升至最高位置。最后用氮气吹干60~120分钟。

开洗涤过滤干燥机搅拌，确认搅拌转速为最小值，将搅拌桨慢下至最低位置。打开平衡阀、真空阀，保持一定的真空度。打开夹套热水阀门，调节水温在所需范围内，待洗涤过滤干燥机温度（下部温度计）升到40℃以上时，开始进行真空干燥。控制洗涤过滤干燥机温度，干燥36~37小时。

本系统为温州亚光机械制造有限公司生产的集过滤、洗涤、干燥为一体的三合一设备。该设备为不锈钢制立式容器，由罐体装置、搅拌装置、轴端密封装置、升降机构、液压装置、罐底座（可拆卸）、加热装置、传动装置、过滤装置、卸料装置、取样装置、洗涤灭菌装置、行程指示装置、触摸屏与手动操作控制装置等部件组成。可在同一容器内完成滤、洗涤、干燥全过程连续操作。设备在真空状态下操作，实现固液分离；其内侧装有两个360°旋转的喷淋球，使清洗液均匀分布于容器内，通过升降桨叶搅拌将滤饼和清洗液混合，使浆状结晶及滤饼得到充分洗涤；滤饼被搅拌桨叶逐层刮松，均匀对滤饼加热，同时用热水对湿物料加热，加速蒸发干燥。排气口安装有过滤精度为0.2µm的呼吸器，进罐溶媒经过0.2μm的过滤器。管路全部使用卫生级不锈钢管道连接，设计和安装时避免了死角、盲端。

杆菌肽在生产过程中容易附着在洗涤过滤干燥机的内壁、搅拌桨等部位上。在批号结束时，需要将这些残留在设备上的杆菌肽清洗干净才能进行下一批的生产，以避免对下一批产品产生污染。

两性霉素B不易溶于水，所以采用人工擦拭与三乙胺的乙醇溶液浸泡的方法，用注射用水进行最后的冲洗。

洗涤过滤干燥机每批清洗一次。

3 范围

本验证是对杆菌肽洗涤过滤干燥机的清洗方法的验证。

4 可接受的标准

4.1注射用水

4.2清洗水样

4.3表面擦拭样

3000g )

cm ()g/cm (B cm 222积洗涤过滤干燥机内表面的含量两性霉素每 ＜0.1%

其中：3000g 为试生产以来的最小投料量。 5 验证小组

6 验证方案 6.1 仪器仪表检测

a ） H PLC 仪

b ） 气相色谱仪

6.2 清洗方法

批号结束后，打开并卸下洗涤过滤干燥机底部滤板，1小时后操作人进入洗涤过滤干燥机内，用洁净抹布擦拭内壁、搅拌桨、波纹管、出料口等部位，直至目测无可见污物。擦拭完毕后上好滤板。拆洗真空捕集器。

打开洗涤过滤干燥机注射用水阀及两个清洗球阀，冲洗溶媒过滤器及洗涤过滤干燥机5～10分钟。清洗过程中，开搅拌，打开洗涤过滤干燥机排水阀排水。清洗结束后，排干净洗涤过滤干燥机中的水后关闭排水阀。

检查并确认结晶罐可以向洗涤过滤干燥机加三乙胺乙醇溶液。打开洗涤过滤干燥机进料阀，用氮气将结晶罐内三乙胺乙醇溶液压到洗涤过滤干燥机中。溶液压完后浸泡30～60分钟，浸泡时开着搅拌（搅拌桨处于最低位）。浸泡结束后，打开洗涤过滤干燥机排水阀，排干净溶液。

排干净三乙胺乙醇溶液后从结晶罐向洗涤过滤干燥机中压注射用水，冲洗进料管道。

打开洗涤过滤干燥机注射用水阀及两个清洗球阀，冲洗溶媒过滤器及洗涤过滤干燥机15～20分钟。清洗过程中，开搅拌，打开洗涤过滤干燥机排水阀排水。清洗结束后，排干净洗涤过滤干燥机中的水后关闭排水阀。

6.3 取样方法

6.3.1清洗水样

在注射用水清洗过程中，取第5，10分钟的清洗水样各20ml；在清洗结束后，打开注射用水阀2~3分钟，由罐底排水处取最终淋洗水样20ml于洁净取样瓶中，标明名称、编号及取样日期。

6.3.2 表面擦拭样

6.3.2.1清洗结束后，用DMSO润湿棉签，并将其靠在溶剂瓶上挤压除去多余的DMSO，擦拭设备的指定部位A、B、C点（见设备简图）。

6.3.2.2将棉签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。擦拭过程应覆盖整个表面，翻转棉签，将棉签的另一面也在取样表面上擦拭，但与前次擦拭方向垂直（见下图）。擦拭区域约为10cm×10cm，每擦拭一个区域，换一根棉签。

6.3.2.4擦拭完毕后将棉签放入盛有5mlDMSO的试管中，加塞，标识次序。放置10min 钟使两性霉素B溶出，挤干棉签，用5mlDMSO润洗三次，测定DMSO溶液中两性霉素B的含量。

6.3.2.5 制备对照样品：按照6.3.2.2相关内容，湿润棉签，将棉签直接放入试管并加塞。

6.3.2.6 在试管上标明名称、位置、编号及取样日期。

6.3.3 取样方法验证

6.3.3.1 准备一块500×500mm的不锈钢板，平整即可。

6.3.3.2 用钢锥划出400×400mm的区域，每搁100mm划线，形成16个100×100mm 的方块。

6.3.3.3 精密称取0.0080g两性霉素B，DMSO溶解后用乙醇定容至50ml。

6.3.3.4 用微量移液器准确移取0.625ml上述溶液，分五次移至100×100mm的方块中，使其均匀分布。

6.3.3.5 根据实际转移的溶液体积计算单位面积的两性霉素B的含量（约1µg/cm2）。

6.3.3.6 自然干燥或用电吹风温和地吹干表面。

6.3.3.7 按照6.3.2.2擦拭表面，每擦一个方块（100cm2）换一根擦拭棒，共擦6个方块。

6.3.3.8擦拭完成后，将棉签放入盛有5mlDMSO的试管中，加塞。放置10min钟使两性霉素B溶出，挤干棉签，用5mlDMSO润洗三次，测定DMSO溶液中两性霉素B的含量。

6.3.3.9 计算回收率和回收率的RSD。

6.3.3.10 可接受的标准

取样回收率大于70%，体现重现性多次取样回收率的RSD小于20%。