GBS核酸检测ppt课件
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GBS核酸检测
1
GBS概述
2
GBS概述
B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS) 学名无乳链球菌，革兰氏阳性链球菌，正常寄
居于阴道和直肠，属于条件致病菌。
在20世纪70年代，GBS已被证实为围产 期母婴感染的主要致病菌之一，在围产医学中 占有不可忽视的地位。
3
什么是围产期……
细菌抗原检 测
乳胶微粒凝集试验、协 同凝集试验、对流免疫 电泳试验及酶联免疫试 验等。
操作比培养法简便，成 本低。
由于B族链球菌血清型 较多，容易造成漏检， 灵敏度相对较低。
采用的是所有B族链球菌
荧 光 PCR 方 法 检测
荧光探针，PCR法扩增核 酸。
cG出fBb结S基都果因存快保在（守；<序2灵h列）敏，度，所最操高有作，需 及荧要光专P门CR的仪P。CR实验室
GBS阳性患者应用抗生素进行预防性治疗
➢ Boyer在1989年研究中指出，产时氨苄青霉素使用超过1小时就可以 使得新生儿感染从28%减少到4%。LIN在2001年的研究中表明，与 无产时应用抗生素相比，抗生素预防超过2小时的有效率是89%，不 足2小时的有效率为71%。
挑战：我妈妈会
进行IAP治疗吗？
➢ GBS是造成产褥感染的主要致病菌之一 产褥感染是指分娩时及产褥期生殖道受病原体感染，引起局部 和全身的炎性应化。产褥感染发病率为1%～7.2%，是产妇死
亡的原因之一 。
5
GBS对新生儿的影响
GBS感染是新生儿感染的主要原因 ➢ 早发型感染 多见于出生后1周内。 母婴垂直传播是其主要传播途径。 主要临床表现为败血症（80%）、肺炎（7%）、脑膜炎（6%）；若治
11
有无青霉素过敏
《围产期GBS预防指南》
否
青霉素G，首次剂量500万单位 （静脉注射）然后每4小时250〜 300万单位，直至分娩或者氨苄青 霉素，首次剂量2g（静脉注射）， 然后每4个小时1g，直到分娩
是
病人在接受青霉素或 头孢菌素时有无出现 下列任一症状？ 过敏症、血管性水肿、 呼吸窘迫、荨麻疹
4
GBS对孕妇的影响
➢ GBS感染是胎膜早破的重要发病因素 GBS对绒毛膜有较强吸附能力和穿透能力，接种2小时内即可 吸附于母体组织，继而侵入绒毛膜，通过炎症细胞的吞噬作用 及细菌产生的蛋白水解酶的直接侵袭，使胎膜局部张力减低， 从而导致胎膜早破 。
➢ GBS生殖道感染是导致早产的重要因素 GBS引起泌尿生殖道感染时，会引起磷脂酶A2和前列腺素及 细胞因子的释放，刺激子宫收缩导致早产。
疗不及时，可引发远期后遗症，如智力发育迟缓、视觉听觉丧失等。
➢ 晚发型感染 多发生于出生1周后。 主要为水平传播：可能与院内感染或家庭接触有关。 常呈隐匿性发病，其特征表现为脑膜炎；1/3的晚 发型疾病出现脑膜炎，故这些生存下来的新生儿中更 易发生神经系统后遗症。
6
GBS的传播与感染
感染GBS产妇
9
GBS的筛查与预防
孕35-37周取阴道和直肠拭子作GBS检测
阳性(+)
抗生素预防
阴性(－)
未检测
临产后GBS检测
阴性( － ) 且无产时高危因素
阳性(+)
或产时高危因素：早产，产时发热 ≥38 ℃，胎膜早破≥18小时
抗生素预防
不需要抗生素预防
10
预防GBS疾病的抗生素使用方案举例:
➢ 《围产期GBS预防指南》指出：
➢ 在我国，2011年，中华医学会妇产科学分会产科学组在《孕前和 孕期保健指南(第1版)》中已将B族链球菌筛查作为一个备查项目。
8
《围产期GBS预防指南》指出
➢ 对所有孕妇于妊娠35～37 周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗
➢ 以下情况应进行预防性治疗 ： 本次妊娠有GBS 菌尿 上次新生儿GBS 感染史 在妊娠37 周之前分娩 破膜时间超过18小时 分娩体温超过38.0度
✓ 是指怀孕28 周到产后一周这一分娩前后的重要时期 ✓ 围产期保健是指产前、产时和产后的一段时间内，对母亲、胎儿和
新生儿进行一系列的保健工作，使母亲健康和胎儿、新生儿的成长发育 得到很好的保护。
人群GBS带菌率
国外研究表明 ，不同地区、不同种族的妊娠晚期妇女GBS带菌率约 为6.5％～36.0％，国内报道的妊娠妇女GBS带菌率为3.5%～32.4％， 新生儿体表带菌率与母体带菌率相似。在一些特殊人群，如肥胖、糖 耐量异常、多次妊娠以及性生活活跃的妇女中带菌率较高。
否
头孢唑啉，首次剂量 2G，然后每8个小时 1g，直到分娩
是
红霉素和克 林霉素治疗 是否有效
否
万古霉素每12小时1g（静 脉注射）直至分娩
是
克林霉素每8小时900mg 12 （静脉注射）直至分娩
GBS检测方法比较
方法学
具体方法
优势
劣势
细菌培养
选 血 后 签 药平 敏续定择皿 学药板肉培 分敏条汤养 析学培培1。实养8养-验43液-62：h41；hS8后T-2A4E，hP，结成分析果本。判低读，直可观进，行易药开敏展学，周 特 妇 G度 员B需别 不 较期S感要不 知 低长染较道适 ；（的深自合 实1情8的-身临 验况6经0是产 操h；验) ，否作时灵。敏有， 人孕
简单。
13
PCR介绍
14
什么是PCR……
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种 分子生物学技术，用于放大扩增特定的DNA片段；可看作生物 体外的特殊DNA复制。
PCR原理
PCR一般由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成： ①DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂， 形成单链DNA 。 ②退火 ：（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成 局部双链。 ③延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，以dNTP为原料，从引物 的3′端→5′端延伸，合成与模板互补的DNA链。 每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍;2～3小时就能 将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
பைடு நூலகம்30~60% 未传染给新生儿
40%~70% 传染给新生儿
97% 无症状
1%~3%
早发性疾病：败血症，肺炎 或脑膜炎
5%会导致死亡
7
国内外GBS筛查现状
➢ 美国疾病控制中心(CDC) 制定了《围产期GBS预防指南》 该指南已经获得以下认可： 美国妇产科学院 美国儿科学会 美国护士助产士协会 美国家庭医生协会 美国微生物学会 美国流行病学会 美国药理学会
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GBS概述
2
GBS概述
B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS) 学名无乳链球菌，革兰氏阳性链球菌，正常寄
居于阴道和直肠，属于条件致病菌。
在20世纪70年代，GBS已被证实为围产 期母婴感染的主要致病菌之一，在围产医学中 占有不可忽视的地位。
3
什么是围产期……
细菌抗原检 测
乳胶微粒凝集试验、协 同凝集试验、对流免疫 电泳试验及酶联免疫试 验等。
操作比培养法简便，成 本低。
由于B族链球菌血清型 较多，容易造成漏检， 灵敏度相对较低。
采用的是所有B族链球菌
荧 光 PCR 方 法 检测
荧光探针，PCR法扩增核 酸。
cG出fBb结S基都果因存快保在（守；<序2灵h列）敏，度，所最操高有作，需 及荧要光专P门CR的仪P。CR实验室
GBS阳性患者应用抗生素进行预防性治疗
➢ Boyer在1989年研究中指出，产时氨苄青霉素使用超过1小时就可以 使得新生儿感染从28%减少到4%。LIN在2001年的研究中表明，与 无产时应用抗生素相比，抗生素预防超过2小时的有效率是89%，不 足2小时的有效率为71%。
挑战：我妈妈会
进行IAP治疗吗？
➢ GBS是造成产褥感染的主要致病菌之一 产褥感染是指分娩时及产褥期生殖道受病原体感染，引起局部 和全身的炎性应化。产褥感染发病率为1%～7.2%，是产妇死
亡的原因之一 。
5
GBS对新生儿的影响
GBS感染是新生儿感染的主要原因 ➢ 早发型感染 多见于出生后1周内。 母婴垂直传播是其主要传播途径。 主要临床表现为败血症（80%）、肺炎（7%）、脑膜炎（6%）；若治
11
有无青霉素过敏
《围产期GBS预防指南》
否
青霉素G，首次剂量500万单位 （静脉注射）然后每4小时250〜 300万单位，直至分娩或者氨苄青 霉素，首次剂量2g（静脉注射）， 然后每4个小时1g，直到分娩
是
病人在接受青霉素或 头孢菌素时有无出现 下列任一症状？ 过敏症、血管性水肿、 呼吸窘迫、荨麻疹
4
GBS对孕妇的影响
➢ GBS感染是胎膜早破的重要发病因素 GBS对绒毛膜有较强吸附能力和穿透能力，接种2小时内即可 吸附于母体组织，继而侵入绒毛膜，通过炎症细胞的吞噬作用 及细菌产生的蛋白水解酶的直接侵袭，使胎膜局部张力减低， 从而导致胎膜早破 。
➢ GBS生殖道感染是导致早产的重要因素 GBS引起泌尿生殖道感染时，会引起磷脂酶A2和前列腺素及 细胞因子的释放，刺激子宫收缩导致早产。
疗不及时，可引发远期后遗症，如智力发育迟缓、视觉听觉丧失等。
➢ 晚发型感染 多发生于出生1周后。 主要为水平传播：可能与院内感染或家庭接触有关。 常呈隐匿性发病，其特征表现为脑膜炎；1/3的晚 发型疾病出现脑膜炎，故这些生存下来的新生儿中更 易发生神经系统后遗症。
6
GBS的传播与感染
感染GBS产妇
9
GBS的筛查与预防
孕35-37周取阴道和直肠拭子作GBS检测
阳性(+)
抗生素预防
阴性(－)
未检测
临产后GBS检测
阴性( － ) 且无产时高危因素
阳性(+)
或产时高危因素：早产，产时发热 ≥38 ℃，胎膜早破≥18小时
抗生素预防
不需要抗生素预防
10
预防GBS疾病的抗生素使用方案举例:
➢ 《围产期GBS预防指南》指出：
➢ 在我国，2011年，中华医学会妇产科学分会产科学组在《孕前和 孕期保健指南(第1版)》中已将B族链球菌筛查作为一个备查项目。
8
《围产期GBS预防指南》指出
➢ 对所有孕妇于妊娠35～37 周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗
➢ 以下情况应进行预防性治疗 ： 本次妊娠有GBS 菌尿 上次新生儿GBS 感染史 在妊娠37 周之前分娩 破膜时间超过18小时 分娩体温超过38.0度
✓ 是指怀孕28 周到产后一周这一分娩前后的重要时期 ✓ 围产期保健是指产前、产时和产后的一段时间内，对母亲、胎儿和
新生儿进行一系列的保健工作，使母亲健康和胎儿、新生儿的成长发育 得到很好的保护。
人群GBS带菌率
国外研究表明 ，不同地区、不同种族的妊娠晚期妇女GBS带菌率约 为6.5％～36.0％，国内报道的妊娠妇女GBS带菌率为3.5%～32.4％， 新生儿体表带菌率与母体带菌率相似。在一些特殊人群，如肥胖、糖 耐量异常、多次妊娠以及性生活活跃的妇女中带菌率较高。
否
头孢唑啉，首次剂量 2G，然后每8个小时 1g，直到分娩
是
红霉素和克 林霉素治疗 是否有效
否
万古霉素每12小时1g（静 脉注射）直至分娩
是
克林霉素每8小时900mg 12 （静脉注射）直至分娩
GBS检测方法比较
方法学
具体方法
优势
劣势
细菌培养
选 血 后 签 药平 敏续定择皿 学药板肉培 分敏条汤养 析学培培1。实养8养-验43液-62：h41；hS8后T-2A4E，hP，结成分析果本。判低读，直可观进，行易药开敏展学，周 特 妇 G度 员B需别 不 较期S感要不 知 低长染较道适 ；（的深自合 实1情8的-身临 验况6经0是产 操h；验) ，否作时灵。敏有， 人孕
简单。
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PCR介绍
14
什么是PCR……
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种 分子生物学技术，用于放大扩增特定的DNA片段；可看作生物 体外的特殊DNA复制。
PCR原理
PCR一般由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成： ①DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂， 形成单链DNA 。 ②退火 ：（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成 局部双链。 ③延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，以dNTP为原料，从引物 的3′端→5′端延伸，合成与模板互补的DNA链。 每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍;2～3小时就能 将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
பைடு நூலகம்30~60% 未传染给新生儿
40%~70% 传染给新生儿
97% 无症状
1%~3%
早发性疾病：败血症，肺炎 或脑膜炎
5%会导致死亡
7
国内外GBS筛查现状
➢ 美国疾病控制中心(CDC) 制定了《围产期GBS预防指南》 该指南已经获得以下认可： 美国妇产科学院 美国儿科学会 美国护士助产士协会 美国家庭医生协会 美国微生物学会 美国流行病学会 美国药理学会