柱层析法的原理和方法

减压
优点 缺点
增加淋洗剂的流动 速度，减少产品收
集的时间
分离效果最好
减少硅胶的使用量， 但是由于大量的空 气通过硅胶会使溶 剂挥发
降低分离效果，减 少产品的塔板数
分离时间过长，效 率过差
有些比较易分解的 东西可能得不到而 且还必须同时使用 水泵抽气
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5.收集
• 根据样品中各组分的吸附能力判断流出 的各组分
干法
1. 管上端放一漏 斗
2.将硅胶装入 3.轻敲管壁使之
填装均匀
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吸附剂
种类：氧化铝、硅胶，氧化镁、碳酸钙和活性炭等。 ➢ 氧化铝有酸、碱、中性。适用于不同类型化合物
的分离。 ➢ 硅胶没有酸碱性之分，可适用于各类有机物的分
离。
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吸附剂的选择
a.与被吸附物及展开剂均无化学作用（首要） b.吸附能力的大小（颗粒大小） c.吸附剂的活性（含水量） d.分子极性
柱层析法的原理和方法
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一、原理
• 柱层析是化合物在液相 和固相之间的分配，属 于固-液吸附层析。
• 利用固定相对液体相中 的各组分吸附能力不同， 从而以不同速度向下迁 移，形成若干色带，分 别收集。
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二、操作
1.装柱
湿法
1.将溶剂装入管 内， 2.将吸附剂和溶 剂 调成浆状，倒入 管 中， 3.使溶剂流出， 吸附剂下沉
3.淋洗
• 洗脱剂的选择：根据点板的比移值（简称Rf值）。
Rf
值
原点到所需要点的中距心离 原点到溶剂前沿的距离
洗脱剂极性比较：
己烷、石油醚<环己烷<四氯化碳<三氟乙烯 <二硫化碳<甲苯<苯<二氯甲烷<三氯甲烷< 乙醚<乙酸乙酯<丙酮<丙醇<乙醇<甲醇<水 <吡啶<乙酸
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4.分类
分类
加压
常压
• 若为有色物质，观看色带，若无色，点 板观察。
• 收集含目标物的淋洗剂。 • 确定纯度。 • 选择无杂质的进行回收。
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干法 适用范围 任何化合物
湿法
溶于小极性 溶剂的化合 物
操作
优点 缺点
1.将溶剂旋干 2.加少量溶剂溶解（样品 溶解性好） 3.加入硅胶吸附至硅胶 不附着在瓶壁上 4.旋干
保证样品层很平整
硅胶和样品整理间pp易t 产生气泡
2.
样品溶液用 滴管均匀加
上
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样
样品紧实， 不易产生裂 缝
适用范围窄