芦荟的组织培养
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学年论文(设计)
(本科)
学院生命科学学院
专业生物科学
年级2007级生科2班
姓名刘琼
论文(设计)题目芦荟的组织培养
指导教师远凌威职称讲师成绩
2009年6月6日
目录
摘要 (1)
关键词 (1)
Abstract (1)
Key Words (1)
引言 (1)
1材料和方法 (2)
1.1材料 (2)
1.2培养基 (2)
1.3方法 (2)
2结果与讨论 (2)
2.1愈伤组织的诱导 (2)
2.2诱导不定芽 (3)
2.3生根 (4)
2.4试管苗移栽 (4)
3结论 (4)
4意义与进展 (4)
参考文献 (4)
芦荟的组织培养
姓名:刘琼学号:20075070083
生命科学学院生物科学
指导教师:远凌威职称:讲师
摘要:针对芦荟自然繁殖率低下的情况,探讨了利用组织培养方法解决生产中繁殖的问题。在叶和茎两种外植体中,嫩茎的出愈率最高,是理想的快速繁殖材料,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合是BA 2.0 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1,诱导不定芽的适宜激素组合是BA 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1,而根的诱导则是在1/2 MS+NAA 1.0 mg·L-1+庶糖1.5%+活性碳3%培养基上进行。
关键词:芦荟;组织培养;愈伤组织;不定芽
Abstract:Because the fruiting rate and germinative percentage of Aloe vera L. are lower, tissue culture was explored to solve the propagating problem in the production. The results show that the bud is the best material in speeding propagation among the two explants (stem, leaf) as it has the biggest inductivity, the best growth and it is easy to be inducted adventitious buds. The suitable phytohormone compositions to induct callus, adventitious buds and roots are respectively BA 2.0 mg·L -1 +IBA 0.2 mg·L-1 Induction of adventitious buds of appropriate hormone combinations BA 3.0 mg • L-1 + NAA 1.0 mg • L-1, and the root is in the induction of 1 / 2 MS + NAA 1.0 mg • L-1 + Shu-sugar 1.5% + activated carbon 3% on the medium.
Key Words:Aloe vera L.; tissue culture; callus; adventitious bu;
引言
芦荟(Aloe veraL.)为百合科(Liliaceae)芦荟属多年生常绿多肉质草本植物,叶簇生,呈莲座状或生于茎顶,叶长披针形或叶短宽,边缘有尖齿状刺;花序有伞形、总状、穗状、圆锥形,花呈桔红色、黄色或具赤色斑点,花被的基部多连合成筒状;果实蒴果,种子多数]1[。无论是从古代丰富的民间医疗实践,还是现代科学技术对芦荟的深入研究和开发利用,都证明了芦荟确实是一种普遍的、多效的、无毒的、无副
作用的药用植物,能解决现代医学中的许多疑难问题]2[。随着芦荟本身神奇的效能一再被人们发现,到目前它已成为集食用、药用、观赏于一身的保健植物新星。由于芦荟不能自花授粉结实,因而用种子繁殖很困难,为此,可以利用组织培养技术对其进行快速繁殖。芦荟品种间的形状和性质差异很大。本文采用在药用、食用等方面具有代表性的日本木立芦荟(A.arborescensMill)为研究材料,结合前人所作的工作]3[,对芦荟的组培快繁进行了深入的探讨。
1材料和方法
1.1材料
取木立芦荟老茎段(不带芽)、叶片及幼嫩茎尖作外植体进行组织培养,取材时最好用手将材料从母株上掰下,不用刀剪等工具切割,因为掰下的材料在培养时分泌产生相对少的酚类化合物,对以后的培养过程中防止褐化有帮助,而切割的材料容易产生过多酚类化合物,在以后的培养过程中易发生褐化]4[。
1.2培养基
基本培养基为MS,按不同处理方案添加不同类型的植物激素,诱导愈伤组织的最适激素组合是BA 2.0 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1,诱导不定芽的适宜激素组合是BA 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1,而根的诱导则是在1/2 MS+NAA 1.0 mg·L-1+庶糖1.5%+活性碳3%培养基上进行。用0.1 N NaOH和0.1 N HCL调节pH值为5.8~6.0,在高压灭菌锅中高温(121℃)灭菌20 min。
1.3方法
晴天取老茎段、叶及幼嫩茎尖为外植体,按下列程序进行消毒:取材→自来水粗洗→5%洗衣粉水溶液漂洗5 min→自来水冲洗30min→75%乙醇擦洗表面→0.1%升汞溶液中消毒5 min→2%次氯酸钠溶液中消毒20 min→无菌水冲洗4~6次,然后在无菌工作台中将外植体切成0.5~1.0 cm长的小段接种于诱导培养基上;将培养出来的愈伤组织切成小块接种于增殖培养基上;最后将形成不定芽的块段转移至生根培养基上,以培育出完整的小植株。以6 d为一周期,观察记录不同处理的生长状况。
2结果与讨论
2.1愈伤组织的诱导
木立芦荟的老茎段、叶和幼嫩茎尖形成愈伤组织的能力不一样。经多种植物激素