香蕉果实品质比较
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3个香蕉品种的果实品质比较分析
小组人员:谢小涵蒋灵灵王卓琴邵方平龚胜斌
本实验通过测定3个香蕉品种的可溶性总糖、V C、可溶性蛋白和有机酸含量来比较这3个香蕉品种的果实品质。
1.可溶性总糖含量的测定
【实验目的】
掌握蒽酮法测定可溶性总糖含量的原理和方法
【实验原理】
糖(还原糖与非还原糖)在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用形成蓝绿色络合物,其颜色的深浅与糖含量高低呈正相关。利用蓝绿色物质在625nm波长处有最大吸收值的特性进行比色测定,方法简单。
【器材与试剂】
1.实验仪器与用具
分光光度计、恒温水浴锅、天平、离心机、电炉、烘箱、研钵、剪刀、刻度试管、玻璃棒、漏斗、移液管、容量瓶
2.实验试剂
葡萄糖标准液(200μg/ml):葡萄糖在80℃烘箱中烘至恒重,称取100mg,用蒸馏水定容至500ml,即得含糖量为200μg/ml的标准液。
蒽酮试剂:100mg蒽酮溶于100ml稀硫酸(向76ml浓硫酸中加30ml水),储于棕色瓶内,冰箱保存,最好使用当天配置。
乙醇(80%)
活性炭
3.实验材料
3个品种的香蕉
【实验步骤】
1.可溶性糖的提取
称取新鲜果肉1g,剪碎研磨至均浆,倒入三角瓶(50ml)中,加入10ml 80%乙醇,80℃水浴40min,不断搅拌,冷却,4000g离心10min,残渣中加入5ml 80%乙醇,重复在80℃水浴中提取2次,合并上清液,加入10mg活性炭,80℃水浴30min,过滤,定容至25ml,取滤液待测定。
2.制作标准曲线
取7支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液:
处的OD值,绘制标准曲线。
3.显色和比色
吸取0.2ml样品提取液,加入0.8ml蒸馏水,混合,再加入5ml蒽酮试剂,小心混合,沸水浴10min,冷却。用分光光度计测定625nm处的OD值。从标准曲线上得到提取液中糖的含量。
【结果计算】
可溶性糖含量(mg/g)=[C×n×V/a] ÷(W×103)
式中,C为从标准曲线查到的待测果实样品葡萄糖含量(μg/ml);a为样品提取液体积(ml);V为提取液定容体积(ml);n为稀释倍数;W为果肉重量(g)。
【注意事项】
1.应用蒽酮试剂与糖反应的呈色程度随时间发生变化,故样品要尽快比色。
2.该显色反应非常灵敏,所用器皿需洁净。
2.维生素C含量的测定
【实验目的】
学习并掌握2,6一二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C(抗坏血酸)的原理和方法
【实验原理】
2,6-二氯酚靛酚钠是氧化性染料,可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C,而染料本身从深蓝色被还原成无色的衍生物。
2,6-二氯酚靛酚钠在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前,滴下的2,6-二氯酚靛酚钠立即被还原成无色。当溶液从无色转变成微红色时,即为滴定终点。
【器材与试剂】
1.实验仪器与用具
锥形瓶(50ml)、移液管(1ml和10ml)、容量瓶、微量滴定管(3ml或5ml),研钵
2.实验试剂
抗坏血酸标准溶液:准确称取50mg抗坏血酸,溶于1%的草酸溶液中,稀释至500ml,用棕色瓶储藏,冷藏保存,最好现用现配。
2%草酸溶液:草酸2g,溶于100ml蒸馏水中。
1%草酸溶液:1g草酸溶于100ml蒸馏水中。
0.01% 2,6一二氯酚靛酚溶液:称取104mgNaHCO3溶于300ml热水中,加入50mg 2,6一二氯酚靛酚溶解,冷却后,加水定容至500ml,过滤,滤液储于棕色瓶内(4℃,可保存一周)。每次临用前,用标准抗坏血酸溶液标定浓度。
3.实验材料
3个品种的香蕉
【实验步骤】
1.提取
洗净新鲜果实,吸干,称取5g剪碎放入研钵内,加5ml 2%草酸研磨成匀浆,倒入100ml 的容量瓶内,用2%草酸洗数次,定容至刻度,混匀后过滤,根据滤液颜色深浅考虑是否需要脱色。
2.滴定
标定2,6一二氯酚靛酚溶液。取2个50ml锥形瓶,其中1个加入1ml标准抗坏血酸溶液和9ml 1%草酸溶液,混合;另外1个锥形瓶只加入10ml 1%草酸溶液(为空白),分别用已
标定的2,6一二氯酚靛酚溶液(染料)滴定至粉红色出现,15s不褪色。记录所用的2,6一二氯酚靛酚溶液毫升数,用K表示。取2个50ml锥形瓶。各加入提取液10ml,同样的方法用标定的2,6一二氯酚靛酚溶液滴定,记录两次滴定所得的2,6一二氯酚靛酚溶液毫升数,求平均值为滴定提取液所用的体积V1.
维生素C含量(mg/100g)=[(V1-V2)×K×V]÷(W×V3)×100
【注意事项】
1.滴定维生素C时不要超过2min,因为样品内一般都含有其他物质,其还原染料的能力比维生素C迟缓,快速滴定可以减少它们的影响。
2.染料2,6一二氯酚靛酚溶液的用量在1-4ml,超过此范围则应减少样品量或将提取液适当稀释。
3.样品提取液要避免日光直射,否则会加速抗坏血酸的氧化。
4.提取物中存在色素类物质,会影响滴定终点的观察,可加入适量白陶土进行脱色过滤后再滴定。每次滴定时以标准坏血酸溶液标定。
3.有机酸含量的测定
【实验目的】
学习并掌握用指示剂滴定法测定有机酸含量的原理和方法。
【实验原理】
植物组织中的有机酸易溶于水、醇和醚,可用这些溶剂先将有机酸提出,然后用氢氧化钠标准溶液滴定,以酚酞为指示剂,通过消耗的氢氧化钠标准溶液的体积计算植物组织内有机酸的含量。
【器材和试剂】
1.实验仪器与工具
电子天平、电热恒温水浴锅、研钵、量筒、移液管、烧杯、容量瓶、漏斗、锥形瓶、碱式滴定管等玻璃仪器和滤纸
2.实验试剂
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液、酚酞指示剂、10g/L 95%乙醇溶液等
3.实验试材
3个品种的香蕉
【实验步骤】
1.样品提取
称取5g果实,放入研钵中,加少许石英砂研磨成匀浆,用蒸馏水洗入50ml三角瓶中,加水